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犬细小病毒病研究进展 被引量：51
1
作者 李河林 焦铁军 +2 位作者 刘淑红 王晶钰 李健强 《动物医学进展》 CSCD 2008年第5期73-77,共5页
犬细小病毒病是由犬细小病毒感染幼犬所引起的一种急性传染病。临床上有两种表现型,出血性肠炎型以剧烈的呕吐、出血性肠炎和白细胞显著减少为主要特征;心肌炎型则以突然死亡为特征。无论那种类型的临床表现,均以发病率高、死亡率高和... 犬细小病毒病是由犬细小病毒感染幼犬所引起的一种急性传染病。临床上有两种表现型,出血性肠炎型以剧烈的呕吐、出血性肠炎和白细胞显著减少为主要特征;心肌炎型则以突然死亡为特征。无论那种类型的临床表现,均以发病率高、死亡率高和传染性强为特点,是危害养犬业最为严重的传染病之一,可造成严重的经济损失。论文从病毒生物学特性、基因组结构、病原的检测方法,流行病学、发病机理及病理变化、临床症状以及疫苗研制等角度对犬细小病毒病近年来的研究进展做以概述。 展开更多
关键词 犬细小病毒 生物学特性 基因组结构 疫苗
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犬细小病毒病的病原学研究进展 被引量：43
2
作者 颜文卿 吴德峰 +1 位作者 戴亚东 林永利 《动物医学进展》 CSCD 2006年第1期48-51,共4页
犬细小病毒病是由犬细小病毒感染引起的一种急性传染病,以剧烈的呕吐、出血性肠炎和白细胞显著减少为主要特征,并可引起犬急性心肌炎。症状与猫泛白细胞减少症相似,是危害我国养犬业最为严重的传染病之一,可造成严重的经济损失。文章从... 犬细小病毒病是由犬细小病毒感染引起的一种急性传染病,以剧烈的呕吐、出血性肠炎和白细胞显著减少为主要特征,并可引起犬急性心肌炎。症状与猫泛白细胞减少症相似,是危害我国养犬业最为严重的传染病之一,可造成严重的经济损失。文章从病毒生物学特性、基因组结构、疫苗开发研制以及病原的检测方法等角度对犬细小病毒病的病原学研究进行了综述。 展开更多
关键词 犬细小病毒 病原 疫苗 检测
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中国国内首次检测到犬细小病毒CPV-2c 被引量：44
3
作者 张仁舟 杨松涛 +2 位作者 冯昊 崔苌盛 夏咸柱 《中国病原生物学杂志》 CSCD 2010年第4期246-249,275,共5页
目的分析犬细小病毒(CPV)流行毒株的分子生物学特征,研究犬细小病毒遗传进化规律,了解CPV流行毒株现状。方法收集CPV阳性犬粪PCR扩增CPV-2c后进行RFLP分析,并进行病毒结构蛋白VP2基因的克隆、测序并进行序列分析。结果经RFLP分析及序列... 目的分析犬细小病毒(CPV)流行毒株的分子生物学特征,研究犬细小病毒遗传进化规律,了解CPV流行毒株现状。方法收集CPV阳性犬粪PCR扩增CPV-2c后进行RFLP分析,并进行病毒结构蛋白VP2基因的克隆、测序并进行序列分析。结果经RFLP分析及序列测定,2份样品均为CPV-2c阳性,序列分析显示CPV-06/09及CPV-07/09VP2序列与国外CPV-2c的基因序列同源性在99%以上。进化分析表明CPV-06/09及CPV-07/09在进化树中形成一个独立的分支,不同国家的CPV-2c存在一定的差异。结论通过RFLP分析及测序证实2份犬粪便样品为CPV-2c阳性,首次在我国检测到CPV-2c。系统进化树显示两分离株CPV-2c与国外CPV-2c有所差异,可能是传入我国的CPV-2c在向适应地区条件的方向进化,也可能是我国已有CPV变异。 展开更多
关键词 犬细小病毒 CPV-2c VP2基因
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犬细小病毒:从起源到进化 被引量：37
4
作者 赵建军 闫喜军 吴威 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期869-875,共7页
犬细小病毒(Canine parvovirus,CPV-2)首次分离于1978年,被认为是由遗传关系相近的猫泛白细胞减少症病毒(FPLV)或其他肉食兽细小病毒(FPLV-like virus)跨宿主感染犬产生的新病原。其感染能引起新生犬急性心肌炎或幼犬出血性肠炎,造成较... 犬细小病毒(Canine parvovirus,CPV-2)首次分离于1978年,被认为是由遗传关系相近的猫泛白细胞减少症病毒(FPLV)或其他肉食兽细小病毒(FPLV-like virus)跨宿主感染犬产生的新病原。其感染能引起新生犬急性心肌炎或幼犬出血性肠炎,造成较高的发病率和死亡率。该病原爆发后短短一年时间内即广泛流行到世界各地。随着CPV-2对宿主的适应和变异,新抗原变异型(CPV-2a、CPV-2b和CPV-2c)不断产生并在世界各地逐步替代了CPV-2的流行。伴随CPV-2抗原变异的同时,其对宿主(犬、猫)嗜性、毒力等生物学特性也随之改变。本文综述了CPV-2过去30多年在世界流行和变异情况,并探讨了基因变异在病毒跨宿主传播中的意义。 展开更多
关键词 犬细小病毒 进化 抗原变异
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犬细小病毒血凝抑制抗体和中和抗体的关系 被引量：25
5
作者 邱薇 夏咸柱 +7 位作者 范泉水 王春华 黄耕 何洪彬 范秀军 乔军 余春 武银莲 《中国兽医科技》 CSCD 2000年第10期3-5,共3页
对 8份犬细小病毒免疫的犬血清同时进行中和 (SN)抗体和血凝抑制 (HI)抗体检测。结果 ,SN抗体和HI抗体具有正比线性关系 ,SN抗体近似于 6倍HI抗体。其中HI抗体检测可在 3h内获得结果 ,操作简便 。
关键词 犬细小病毒 血凝抑制试验 中和试验 抗体检测
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犬细小病毒分离株VP2基因的克隆与序列分析 被引量：23
6
作者 杨玲 徐向明 +3 位作者 殷俊 宗卫峰 陈璐 李厚达 《扬州大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 2002年第3期12-14,共3页
以犬细小病毒 (Canine parvovirus,CPV)扬州分离株病毒的 DNA为模板 ,根据基因库 CPV-d序列设计合成了VP2基因的 1对特异引物 ,进行聚合酶链式反应 ,扩增出约 1 .7kb的片段 ,按常规方法克隆进 p UC1 8载体 ,经 Eco R 和Sal 双酶切筛选... 以犬细小病毒 (Canine parvovirus,CPV)扬州分离株病毒的 DNA为模板 ,根据基因库 CPV-d序列设计合成了VP2基因的 1对特异引物 ,进行聚合酶链式反应 ,扩增出约 1 .7kb的片段 ,按常规方法克隆进 p UC1 8载体 ,经 Eco R 和Sal 双酶切筛选到阳性质粒 ,进一步对该片段进行序列分析。结果表明 :所扩增基因片段长度为 1 740 bp,与美国参考株 CPV-d (type 2 )、CPV-1 5 (type 2 a)、CPV-3 9(type 2 b)相比较 ,核苷酸同源性分别高达 99.5 %、99.7%、99.7%。 展开更多
关键词 犬 细小病毒 分离株 VP2基因 克隆 序列分析
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犬细小病毒病的流行现状调查 被引量：26
7
作者 耿志贤 时彦胜 +3 位作者 郑亚平 邱旭方 周晓丽 孔德强 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2009年第11期135-137,共3页
对犬细小病毒病流行现状进行调查,为本病的预防、诊断和治疗提供依据。用犬细小病毒抗原检测试剂盒对2008年门诊的具有腹泻、呕吐、粪便带血等体征的189只患犬作病原检测,对犬细小病毒阳性病例兼有发热、咳嗽体征的16例病犬同时作犬瘟... 对犬细小病毒病流行现状进行调查,为本病的预防、诊断和治疗提供依据。用犬细小病毒抗原检测试剂盒对2008年门诊的具有腹泻、呕吐、粪便带血等体征的189只患犬作病原检测,对犬细小病毒阳性病例兼有发热、咳嗽体征的16例病犬同时作犬瘟热病毒抗原检测。结果犬细小病毒阳性病例共137只,发病年龄从1个月-15岁各年龄段均有分布,以6月龄以下幼龄动物发病较多,占65.7%。流行季节差异不大,以春季病例略多,占27.0%。犬细小病毒与犬瘟热病毒混合感染的有12例,占8.8%。对在疫苗接种免疫保护期内的4只患犬进行检测,3只犬细小病毒阳性。结论：①免疫力尚未建立是幼犬发病的主要原因;②不按规定的免疫程序对动物进行加强免疫是成年犬发病的主要原因;③在部分发病幼犬中存在犬细小病毒与犬瘟热病毒的混合感染;④老龄动物对免疫的应答能力下降可导致免疫失败。 展开更多
关键词 犬细小病毒 流行现状 发病原因
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犬细小病毒国内外流行病学研究进展 被引量：20
8
作者 孙明洁 董国英 +1 位作者 张雪竹 胡桂学 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期1035-1039,共5页
犬细小病毒(canine parvovirus,CPV)已流行近40年,由于VP2基因不断变异,产生了多种变异毒株并广泛流行于全世界,给CPV的防控带来巨大挑战。因此,本文以CPV的起源进化、变异毒株的突变特点及CPV变异株在国内外流行特点进行综述分析,以期... 犬细小病毒(canine parvovirus,CPV)已流行近40年,由于VP2基因不断变异,产生了多种变异毒株并广泛流行于全世界,给CPV的防控带来巨大挑战。因此,本文以CPV的起源进化、变异毒株的突变特点及CPV变异株在国内外流行特点进行综述分析,以期阐明CPV流行态势,为有效的精准防控提供支持。 展开更多
关键词 犬细小病毒 VP2基因 CPV变异株 全球流行特点
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猫细小病毒、犬细小病毒、貂细小病毒的特征比较 被引量：20
9
作者 饶家辉 王玉平 雷连成 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2009年第7期166-168,共3页
猫细小病毒、犬细小病毒和貂细小病毒是3种极为相似的细小病毒。最初人们主要根据患病水貂、猫、犬临床症状相似的特点,注意到它们之间可能有密切关系。时至今日,对这3种病毒的许多方面都已进行了深入的研究。作者从猫细小病毒、犬细小... 猫细小病毒、犬细小病毒和貂细小病毒是3种极为相似的细小病毒。最初人们主要根据患病水貂、猫、犬临床症状相似的特点,注意到它们之间可能有密切关系。时至今日,对这3种病毒的许多方面都已进行了深入的研究。作者从猫细小病毒、犬细小病毒、貂细小病毒病共同特性、生物学差异和进化机制等方面对这3种病毒的特征进行了比较和综述。 展开更多
关键词 猫细小病毒 犬细小病毒 貂细小病毒 特征比较
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犬细小病毒生物学特征及检测技术研究进展 被引量：18
10
作者 史利军 曾妮 李刚 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2010年第4期82-85,共4页
犬细小病毒(CPV)所引起的疾病在世界范围内流行,临床主要表现为犬的肠炎和心肌炎。CPV属于单股负链的自主复制的细小病毒属成员,其基因组可编码两种结构蛋白和两种非结构蛋白。CPV的主要检测方法有分子生物学检测方法和免疫学检测方法,... 犬细小病毒(CPV)所引起的疾病在世界范围内流行,临床主要表现为犬的肠炎和心肌炎。CPV属于单股负链的自主复制的细小病毒属成员,其基因组可编码两种结构蛋白和两种非结构蛋白。CPV的主要检测方法有分子生物学检测方法和免疫学检测方法,其中分子生物学检测方法包括常用的PCR检测技术、核酸杂交检测技术及近年发展起来的LAMP检测技术及NASBA检测技术。免疫学检测方法主要包括ELISA检测技术、胶体金检测技术、血凝试验、免疫荧光检测技术及未来可用于CPV检测的生物条形码检测技术。新技术的应用必将为临床控制CPV找到更为有效的检测方法。 展开更多
关键词 犬细小病毒 生物学特性 检测
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犬细小病毒病发病情况调查与流行分析 被引量：17
11
作者 付连军 裴晓东 +1 位作者 王晓元 尹柏双 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第5期225-227,共3页
对吉林市2009—2010年犬细小病毒病的发病情况进行了调查和分析。收集9个动物医院2年接诊的5684例疑似犬细小病毒病犬,通过临床检查及实验室诊断,确诊4124例患犬发生不同类型的犬细小病毒病。研究表明,本病发生多以肠炎型为主,占总发病... 对吉林市2009—2010年犬细小病毒病的发病情况进行了调查和分析。收集9个动物医院2年接诊的5684例疑似犬细小病毒病犬,通过临床检查及实验室诊断,确诊4124例患犬发生不同类型的犬细小病毒病。研究表明,本病发生多以肠炎型为主,占总发病数的49.64%;犬品种影响犬细小病毒病的发生,纯种犬的发病率最高,占62.85%,土种犬发病率最低,占11.99%;1～3月龄的幼犬多发,占发病数的65.11%;一年四季均有发病,多发于气温骤变的11～12月和2～3月;免疫次数也影响了犬细小病毒病的发生,每年2次免疫可以显著降低犬细小病毒病的发生。因此,选择高质量的疫苗,增加免疫次数,选择合理的饲养环境,加强多发季节和多发年龄段对犬的保护是减少本病发生的关键。 展开更多
关键词 犬细小病毒病 流行情况 调查 分析
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犬细小病毒SH15株的分离鉴定与全基因组分析 被引量：16
12
作者 张传鹏 张航 +3 位作者 高全新 刘云霞 孙建和 严亚贤 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期165-171,共7页
为了解上海地区犬细小病毒的流行及其变异情况,从疑似犬细小病毒感染的死亡犬采集各种组织,无菌处理病料后同步接种F81细胞,盲传至第5代出现细胞病变,从肠组织中分离出1株病毒。采用电镜进行病毒形态学观察,以及HA、HI和PCR等方法鉴定病... 为了解上海地区犬细小病毒的流行及其变异情况,从疑似犬细小病毒感染的死亡犬采集各种组织,无菌处理病料后同步接种F81细胞,盲传至第5代出现细胞病变,从肠组织中分离出1株病毒。采用电镜进行病毒形态学观察,以及HA、HI和PCR等方法鉴定病毒,结果证实为犬细小病毒,命名为CPV-SH15。该病毒的血凝效价为2~9,病毒TCID_(50)为10^(5.2)/m L,测得病毒编码区基因序列的全长为4 869 bp,与上海分离毒株CPV/CN/SH1/2013的同源性为99.8%,亲缘关系较近,说明上海地区的犬细小病毒的遗传变异并不明显。对其VP2基因的氨基酸序列进行分析,确定该细小病毒属于New CPV-2a亚型。该研究为犬细小病毒遗传进化的进一步研究奠定了基础,从而为犬细小病毒病疫苗的研制以及防控提供参考。 展开更多
关键词 犬细小病毒 分离鉴定 序列分析
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犬细小病毒上海分离株全基因的克隆及进化树分析 被引量：14
13
作者 郭伟 商晓桂 +4 位作者 单同领 华修国 杨志彪 朱建国 周雨霞 《中国动物传染病学报》 CAS 2009年第3期27-32,共6页
为研究上海地区犬感染细小病毒(Canine parvovirus,CPV)的基因特点和基因型,参考GenBank上细小病毒3个基因型的全基因设计6对扩增引物进行PCR,分段扩增出目标片段,克隆于T载体上,测定序列并拼接,用MEGA软件、NJ法构建进化树。结果显示,... 为研究上海地区犬感染细小病毒(Canine parvovirus,CPV)的基因特点和基因型,参考GenBank上细小病毒3个基因型的全基因设计6对扩增引物进行PCR,分段扩增出目标片段,克隆于T载体上,测定序列并拼接,用MEGA软件、NJ法构建进化树。结果显示,犬细小病毒全基因为4 758bp,命名为CPV-SH,提交到GenBank上的序列号为FJ792845,与GenBank中4种基因型犬细小病毒的VP2基因核苷酸序列同源性比较发现,CPV-SH克隆与2a亚型犬细小病毒核苷酸同源性为最高99.7%,与2型、2b亚型、2c亚型的同源性分别为98.8%、99.5%、99.5%。CPV-SH属于2a亚型犬细小病毒,与国内北京分离株CPV/BJ082亲缘关系最近,同源性为99.9%。 展开更多
关键词 犬细小病毒 上海 2a基因亚型 进化树分析
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犬细小病毒广西流行株的分离鉴定及生物学特性分析 被引量：14
14
作者 刘金凤 廖文军 +4 位作者 陈凤莲 白安斌 钟华 凌丹 吴健敏 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期877-883,共7页
为了解当前犬细小病毒广西地方毒株的生物学特性,本研究收集广西各地疑似犬细小病毒(CPV)感染病犬的粪便通过接种F81细胞进行病毒的分离培养,并通过血凝试验、抗性分析、同源性分析和攻毒试验等对分离毒株的生物学特性及致病力进行研究... 为了解当前犬细小病毒广西地方毒株的生物学特性,本研究收集广西各地疑似犬细小病毒(CPV)感染病犬的粪便通过接种F81细胞进行病毒的分离培养,并通过血凝试验、抗性分析、同源性分析和攻毒试验等对分离毒株的生物学特性及致病力进行研究。结果显示,接种3代后,细胞出现明显的病变(CPE),血凝效价为1∶512,第5代病毒的TCID_(50)为1×10^(-3.6)/0.1 m L,能抗热、酸、氯仿和乙醚;电镜观察到CPV为直径约25 nm圆形、无囊膜的结构,应用CPV特异性引物检测到长约1 419 bp和1 254 bp的特异性条带,提示成功分离到一株犬细小病毒毒株;测序分析结果表明,VP2基因与周边国家地区及我国各地方的参考毒株、流行株核苷酸同源性为98.9%~99.8%;系统进化发生分析表明,广西分离株的基因型为CPV-2a亚型,与泰国参考毒株VT148亲缘关系最近;与其它CPV-2a亚型相比,分离株的第267位、305位、324位和440位氨基酸位点发生了变异;动物回归试验结果表明,犬细小病毒广西分离株属于强毒株。本研究成功分离到犬细小病毒广西地方流行株,并对其主要衣壳蛋白VP2基因进行遗传变异分析,为更好的预防和控制犬细小病毒提供依据。 展开更多
关键词 犬细小病毒 分离 生物学特性
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犬细小病毒VP2基因的遗传变异分析 被引量：14
15
作者 易立 程世鹏 +2 位作者 闫喜军 王建科 罗彬 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期452-459,共8页
为了分析中国部分省市犬细小病毒（Canine parvovirus,CPV）流行毒株的分子生物学特征,了解其遗传演化规律,查明中国目前CPV流行毒株现状,本项研究通过对2006-2008年武汉、南京和北京的宠物犬疑似犬细小病毒粪便样品进行检测,并对犬细... 为了分析中国部分省市犬细小病毒（Canine parvovirus,CPV）流行毒株的分子生物学特征,了解其遗传演化规律,查明中国目前CPV流行毒株现状,本项研究通过对2006-2008年武汉、南京和北京的宠物犬疑似犬细小病毒粪便样品进行检测,并对犬细小病毒PCR阳性产物进行RFLP分析,未发现宠物犬感染猫细小病毒的现象。从PCR检测犬细小病毒阳性标本15份以及广泛使用的犬细小病毒疫苗2株中克隆犬细小病毒VP2基因并进行序列分析,结果显示：检测到的15株犬细小病毒均属于CPV-2a亚型;与GenBank中的其他CPV-2a亚型相比,其中14株犬细小病毒存在独特的Ile324变异,并且国内主要使用的两个犬细小病毒疫苗株均属于CPV-2型,但是与CPV-2型原型毒株CPV-b相比,VP2蛋白氨基酸序列已经发生改变。通过构建基于犬细小病毒VP2蛋白氨基酸序列的系统发生树,发现在我国主要城市的宠物犬中流行的犬细小病毒CPV-2a亚型毒株单独构成一簇,并且与2008年的韩国分离株K001关系紧密,而与早期其他地区的犬细小病毒CPV-2a亚型流行株距离较远。这提示犬细小病毒流行株的变异具有某种时间和空间相关性。本研究对犬细小病毒流行株的主要衣壳蛋白VP2的编码蛋白进行遗传变异分析，为更好地预防和控制犬细小病毒提供基础。 展开更多
关键词 犬细小病毒 VP2基因 遗传变异
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复方参芩对犬细小病毒致心肌组织Bcl-2和Bax mRNA的影响 被引量：13
16
作者 刘俊玮 刘娟 +2 位作者 杜林林 郭志兴 凌榕镔 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期122-128,共7页
为了探讨复方参芩对犬细小病毒致犬心肌组织Bcl-2和Bax基因表达的影响,将丹参、黄芩、甘草等中药配伍并制备成为复方参芩针剂,人工感染犬细小病毒建立模型;将犬分为空白对照组、模型组、黄芪多糖组、复方参芩组;给药7d后,接种病毒,观察... 为了探讨复方参芩对犬细小病毒致犬心肌组织Bcl-2和Bax基因表达的影响,将丹参、黄芩、甘草等中药配伍并制备成为复方参芩针剂,人工感染犬细小病毒建立模型;将犬分为空白对照组、模型组、黄芪多糖组、复方参芩组;给药7d后,接种病毒,观察各组犬临床症状,取心肌组织,电镜观察心脏组织超微结构变化,采用荧光实时定量PCR法检测Bcl-2和Bax mRNA表达。结果表明,模型组犬死亡率高,心肌组织结构损伤严重,与空白对照组比较,心肌组织细胞Bcl-2mRNA表达下调(P<0.05),Bax mRNA表达增加(P<0.01)。复方参芩组犬存活率较高,心肌组织损伤轻,与模型组相比,心肌组织细胞Bax mRNA表达下调(P<0.01),Bcl-2mRNA表达上调(P<0.01)。通过本试验证明复方参芩可通过上调犬心肌组织细胞Bcl-2mRNA表达,下调Bax mRNA的表达,抑制细小病毒引起的心肌细胞凋亡,保护犬心肌组织免受细小病毒损害。 展开更多
关键词 犬细小病毒 复方参芩 BCL-2 BAX 荧光定量PCR
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犬细小病毒病基因工程疫苗的研究进展 被引量：13
17
作者 徐进 孙世琪 +2 位作者 曹随忠 孙德惠 郭慧琛 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期541-544,共4页
从犬细小病毒病亚单位疫苗、表位疫苗、核酸疫苗、活载体疫苗等方面,论述了近年来国内外在犬细小病毒病新型疫苗研究方面的新进展,并对各种新型疫苗的优缺点及应用前景进行了讨论,为犬细小病毒病新型疫苗的研制提供理论基础。提出各种... 从犬细小病毒病亚单位疫苗、表位疫苗、核酸疫苗、活载体疫苗等方面,论述了近年来国内外在犬细小病毒病新型疫苗研究方面的新进展,并对各种新型疫苗的优缺点及应用前景进行了讨论,为犬细小病毒病新型疫苗的研制提供理论基础。提出各种犬细小病毒病基因工程疫苗互有优劣,可以通过技术手段采用不同种类的新型疫苗的交叉组合、免疫原的集成使用等研制出更理想、更有效的疫苗。 展开更多
关键词 犬细小病毒 疫苗 基因工程 进展
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犬细小病毒VP2蛋白在真核细胞中的分泌表达及特性 被引量：13
18
作者 王微 李秀锦 +5 位作者 仲飞 王幸兴 韩冬梅 靳慧君 潘素敏 李巍 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期648-652,共5页
【目的】利用真核细胞分泌表达犬细小病毒VP2蛋白和研究其特性。【方法】为构建犬细小病毒(Canineparvovirus,CPV)VP2基因的真核分泌型表达载体,首先通过酶切从含有人CD5信号肽序列的质粒中将CD5信号肽基因片段切出,将其连接到真核表达... 【目的】利用真核细胞分泌表达犬细小病毒VP2蛋白和研究其特性。【方法】为构建犬细小病毒(Canineparvovirus,CPV)VP2基因的真核分泌型表达载体,首先通过酶切从含有人CD5信号肽序列的质粒中将CD5信号肽基因片段切出,将其连接到真核表达载体pcDNA3.1A的多克隆位点上,构建成pcDNA3.1-CD5sp质粒。然后再通过PCR方法从含有犬细小病毒VP2基因的质粒中扩增VP2基因,并将其插入到pcDNA3.1-CD5sp载体中CD5信号肽的下游,构建成VP2基因的真核分泌型表达载体pcDNA-CD5sp-VP2。经磷酸钙介导转染293T细胞,使其在真核细胞中进行分泌表达,并通过ELISA检测表达的VP2蛋白与犬转铁蛋白受体(TfR)结合的活性。【结果】序列分析结果表明,本实验构建的犬细小病毒VP2基因真核分泌型表达载体结构正确,将该表达载体转染的293T细胞,在培养基中通过Western-blot检测到有VP2重组蛋白的存在。经ELISA检测表明表达的重组VP2蛋白具有与犬转铁蛋白受体结合的活性。【结论】利用人的CD5信号肽实现了犬细小病毒VP2蛋白在真核细胞中的分泌表达,表达的VP2蛋白具有与犬转铁蛋白受体结合的活性。 展开更多
关键词 犬细小病毒 VP2蛋白 293T细胞 分泌性表达 TFR
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犬细小病毒新2b型分离株的分离鉴定 被引量：13
19
作者 王建科 刘辉哲 +7 位作者 林鹏 赵航 程悦宁 张淼 郭利 朱洪伟 武华 程世鹏 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期734-738,共5页
为了更好的了解我国东北地区犬细小病毒的流行情况,采用F81细胞从来自长春某宠物医院疑似患有肠炎的犬粪便样品中分离出1株病毒,经形态学、血清学、动物回归试验和分子生物学鉴定,分离的病毒为犬细小病毒new CPV-2b型,命名为CPV JL13-1... 为了更好的了解我国东北地区犬细小病毒的流行情况,采用F81细胞从来自长春某宠物医院疑似患有肠炎的犬粪便样品中分离出1株病毒,经形态学、血清学、动物回归试验和分子生物学鉴定,分离的病毒为犬细小病毒new CPV-2b型,命名为CPV JL13-1。对该病毒主要结构蛋白VP2基因进行克隆测序和基因进化分析表明,CPV JL13-1分离株VP2基因与GenBank上提交的其他41株犬细小病毒株核苷酸和氨基酸均有较高的同源性,分别为98.6%-99.5%和97.6%-99.5%,其中核苷酸和氨基酸同源性最高的均为B-2004株。本研究为犬细小病毒分子流行病学调查和疫苗的研究奠定基础。 展开更多
关键词 犬细小病毒 新2b型 分离 鉴定
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应用电镜技术和血凝试验检测犬细小病毒和犬腺病毒 被引量：4
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作者 李六金 押宗保 +6 位作者 李成 姜焕宏 陈慧茹 刘建荣 马伟辉 王新建 李宏 《中国兽药杂志》 2002年第7期33-35,共3页
电镜技术和血凝试验是检测犬细小病毒和犬腺病毒快速而简便的方法。本试验结果表明,两种方法检验结果大部分相符,但各具特色。电镜技术的优势在于能够直观地显示目标病毒的生长发育、粒子的完整性以及有无非目标病毒、细菌、支原体等污... 电镜技术和血凝试验是检测犬细小病毒和犬腺病毒快速而简便的方法。本试验结果表明,两种方法检验结果大部分相符,但各具特色。电镜技术的优势在于能够直观地显示目标病毒的生长发育、粒子的完整性以及有无非目标病毒、细菌、支原体等污染情况,这对于动物病毒疫苗种毒质量的检测是十分重要的。 展开更多
关键词 电镜技术 血凝试验 检测 犬细小病毒 犬腺病毒
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