龙眼FLO/LFY同源基因cDNA片段的克隆 被引量：8

1

作者 郑丽霞 林晓东 +4 位作者 朱芳德 肖洁凝 符同浩 钟伟 黄上志 《中山大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第S1期60-64,共5页

根据不同植物FLO LFY同源基因3′端保守序列,设计简并引物,运用RT＿PCR技术在龙眼花芽总RNA中扩增得到长度为408bp的cDNA片段,命名为lonFLO。序列分析表明,该片段与金鱼草FLO、苹果AFL2、AFL1、拟南芥LFY有较高的核苷酸同源性,分别达98 ... 根据不同植物FLO LFY同源基因3′端保守序列,设计简并引物,运用RT＿PCR技术在龙眼花芽总RNA中扩增得到长度为408bp的cDNA片段,命名为lonFLO。序列分析表明,该片段与金鱼草FLO、苹果AFL2、AFL1、拟南芥LFY有较高的核苷酸同源性,分别达98 8%,81 6%,81 1%和76 2%。 展开更多

关键词 龙眼 FLOLFY 克隆

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小鼠造血干细胞因子基因克隆及在 C H O 细胞中的表达 被引量：3

2

作者 张红梅 朱迅 《白求恩医科大学学报》 CSCD 1999年第4期341-343,共3页

目的： 克隆造血干细胞因子（ Ｓ Ｃ Ｆ）并在 Ｃ Ｈ Ｏ 细胞中表达。方法： 采用 Ｐ Ｃ Ｒ 方法从ｐ Ｒ Ｃ／ Ｃ Ｍ Ｖ（含 Ｓ Ｃ Ｆｃ Ｄ Ｎ Ａ）中钓取 Ｓ Ｃ Ｆ ｃ Ｄ Ｎ Ａ 膜外段活性区，克隆入真核表达载体ｐｃ Ｄ Ｎ Ａ... 目的： 克隆造血干细胞因子（ Ｓ Ｃ Ｆ）并在 Ｃ Ｈ Ｏ 细胞中表达。方法： 采用 Ｐ Ｃ Ｒ 方法从ｐ Ｒ Ｃ／ Ｃ Ｍ Ｖ（含 Ｓ Ｃ Ｆｃ Ｄ Ｎ Ａ）中钓取 Ｓ Ｃ Ｆ ｃ Ｄ Ｎ Ａ 膜外段活性区，克隆入真核表达载体ｐｃ Ｄ Ｎ Ａ３，转染入 Ｃ Ｈ Ｏ 细胞；用 Ｒ Ｔ－ Ｐ Ｃ Ｒ 方法检测 ｍ Ｒ Ｎ Ａ 水平表达及通过协同刺激骨髓细胞集落形成来检测转染细胞上清的生物活性。结果：转染 Ｓ Ｃ Ｆｃ Ｄ Ｎ Ａ 的 Ｃ Ｈ Ｏ 细胞可表达 Ｓ Ｃ Ｆｍ Ｒ Ｎ Ａ，其细胞培养上清可协同 Ｇ Ｍ － Ｃ Ｓ Ｆ刺激骨髓细胞形成集落数比 Ｇ Ｍ － Ｃ Ｓ Ｆ 单独作用高 ２ 倍，转染外源基因对细胞周期没有明显影响。结论：转染 Ｓ Ｃ Ｆｃ Ｄ Ｎ Ａ 在 Ｃ Ｈ Ｏ 细胞中表达，转染细胞上清协同 Ｇ Ｍ － Ｃ Ｓ Ｆ 刺激骨髓细胞集落的形成，而本身对集落的形成没有影响。 展开更多

关键词 造血干细胞因子 SCF 基因克隆 CHO细胞 表达

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恶性疟原虫海南FCC1/HN株环子孢子蛋白(CSP)基因的克隆与表达 被引量：3

3

作者 刘彦文 余新炳 +2 位作者 徐劲 罗树红 方建民 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2000年第1期8-11,共4页

目的　为疟疾疫苗的研制提供靶抗原。方法　根据恶性疟原虫ＩＭＴＭ２２ 株７Ｇ８ 克隆环子孢子蛋白基因编码区序列， 设计一对引物， 采用ＰＣＲ技术从恶性疟原虫ＦＣＣ１／ＨＮ株基因组ＤＮＡ中特异扩增ＣＳＰ基因的Ⅰ区、中央重复区... 目的　为疟疾疫苗的研制提供靶抗原。方法　根据恶性疟原虫ＩＭＴＭ２２ 株７Ｇ８ 克隆环子孢子蛋白基因编码区序列， 设计一对引物， 采用ＰＣＲ技术从恶性疟原虫ＦＣＣ１／ＨＮ株基因组ＤＮＡ中特异扩增ＣＳＰ基因的Ⅰ区、中央重复区和Ⅱ区片段， 全长１－０８ｋｂ； 纯化扩增产物用ＨｉｎｄⅢ和ＢａｍＨ Ⅰ双酶切后， 定向克隆入ｐｃＤＮＡ３ 载体， 转化大肠杆菌ＴＧ１ 株， 重组克隆经筛选后， 用ＰＣＲ 扩增和ＨｉｎｄⅢ＋ ＢａｍＨ Ⅰ双酶切进行鉴定： 用磷酸钙贴壁细胞转化法将重组质粒ｐｃＤＮＡ—ＣＳＰ导入ＨｅＬａ细胞， 用Ｇ４１８ 筛选出稳定分泌ＣＳＰ抗原的阳性细胞克隆； 将阳性细胞克隆系扩大培养并用Ｇ４１８ 加压， 以表达重组ＣＳＰ， 分离细胞培养上清和培养细胞， 进行ＳＤＳＰＡＧＥ分析。结果　（１） 从ＦＣＣ１／ＨＮ株基因组ＤＮＡ中特异扩增出ＣＳＰ基因Ⅰ区， 中央重复区和Ⅱ区编码序列；（２） 将扩增的目的片段正向插入ｐｃＤＮＡ３ＨｉｎｄⅢ和ＢａｍＨⅠ位点； （３） 在人宫颈癌细胞系ＨｅＬａ 细胞中表达重组ＣＳＰ抗原， 其分子量为３８－３ｋＤａ， 蛋白扫描分析表达量占细胞培养上清液中蛋白总含量的１５－７７％ 。 展开更多

关键词 恶性疟原虫 环子孢子蛋白 克隆 靶抗原

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藏酋猴类似人clock基因片段的克隆 被引量：3

4

作者 李韦 江舟 +5 位作者 王红星 周亮 关俊文 刘延友 汪宇辉 王正荣 《四川生理科学杂志》 2009年第2期49-51,共3页

目的:在藏酋猴中,寻找和克隆与人clock基因类似的基因。方法:提取藏酋猴外周血白细胞RNA,逆转录为全基因组cDNA,利用人clock基因保守序列设计相关引物,克隆,测序,进行生物信息学分析。结果:扩增得到1994bp的核酸序列。该序列与人,苏门... 目的:在藏酋猴中,寻找和克隆与人clock基因类似的基因。方法:提取藏酋猴外周血白细胞RNA,逆转录为全基因组cDNA,利用人clock基因保守序列设计相关引物,克隆,测序,进行生物信息学分析。结果:扩增得到1994bp的核酸序列。该序列与人,苏门答腊猩猩,绵羊,小鼠,褐家鼠,原鸡和蟾蜍clock基因核酸序列同源性分别为99%,98%,94%,90%,90%,82%和75%。结论:藏酋猴基因组中存在与人clock基因相似的基因,该基因可能为藏酋猴clock基因。 展开更多

关键词 基因片段 克隆 CLOCK基因 核酸序列同源性 猴 全基因组 序列设计 细胞RNA

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植物抗病基因研究进展 被引量：1

5

作者 王晓萍 温玉琴 +4 位作者 郭东林 徐淑红 李新玲 徐香玲 李集临 《黑龙江农业科学》 2003年第4期42-45,51,共5页

迄今为止已从植物中克隆出近30个抗病基因,基因编码产物具有富亮氨酸重复(LRR)、丝—苏氨酸蛋白激酶(STK)结构域及核苷酸结合位点(NBS)等结构特征。植物抗病基因的克隆方法主要有转座子标签技术和图位克隆技术等。

关键词 植物 抗病基因 结构特征 克隆方法 转座子标签技术 图位克隆技术

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人胰岛素样生长因子-Ⅱ基因cDNA克隆与序列分析

6

作者 郭淑华 《潍坊学院学报》 2004年第6期43-45,共3页

本研究通过RT-PCR技术从人胎盘组织中扩增出长为841bp的胰岛素样生长因 子-ⅡcDNA,PCR产物经凝胶回收纯化后,克隆在PGEM-T载体的T位点。测序结果和序列分 析表明,本人已成功地扩增、克隆了人胰岛素样生长因子-Ⅱ基因cDNA序列。

关键词 人胰岛素样生长因子-Ⅱ RT-PCR 克隆

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IBDV南京野毒株VP2结构蛋白基因克隆与表达 被引量：8

7

作者 姜平 陈溥言 蔡宝祥 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第4期61-65,共5页

用微机辅助设计合成了一对引物，用于扩增传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）中国地方株ＶＰ２基因片段。ＲＴＰＣＲ扩增出一１３２１ｂｐ的目的片段，分子杂交鉴定为ＶＰ２基因。扩增产物经双酶切后插入含噬菌体ＰＲＰＬ双强启动子... 用微机辅助设计合成了一对引物，用于扩增传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）中国地方株ＶＰ２基因片段。ＲＴＰＣＲ扩增出一１３２１ｂｐ的目的片段，分子杂交鉴定为ＶＰ２基因。扩增产物经双酶切后插入含噬菌体ＰＲＰＬ双强启动子的ｐＣＹＴＥＸＰ１表达质粒，构建了ＶＰ２基因克隆ｐＣＶＰ２１，经ＤｏｔＥＬＩＳＡ筛选出４个ＶＰ２表达阳性克隆。ＳＤＳＰＡＧＥ和Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ显示有一约３２０００的目的蛋白带，且能与ＩＢＤＶ阳性血清结合。 展开更多

关键词 病毒 结构蛋白 基因克隆 基因表达 IBD

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鄂东杰构——阳新县祠堂建筑及文化特征初探 被引量：9

8

作者 王炎松 徐靓 朱锋 《华中建筑》 2006年第11期91-93,共3页

该文通过时湖北省阳新县祠堂的分析研究,探寻和阐述了阳新当地祠堂的形成过程、历史文脉、空间形态和独有特征。

关键词 阳新祠堂 宗族 移民 建筑文化保护

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NT4-p53(N15)-Ant融合基因的克隆和鉴定 被引量：4

9

作者 宋丽萍 李跃萍 +2 位作者 邱曙东 杨广笑 王全颖 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期333-336,共4页

目的构建NT4-p53(N15)-Ant融合基因表达盒并进行序列分析。方法应用互为模板的引物PCR技术及T载体克隆法克隆p53(N15)-Ant基因,筛选阳性克隆、酶切鉴定并测序。扩增阳性重组质粒后限制性内切酶切取p53(N15)-Ant片段连入pBV220/NT4质粒... 目的构建NT4-p53(N15)-Ant融合基因表达盒并进行序列分析。方法应用互为模板的引物PCR技术及T载体克隆法克隆p53(N15)-Ant基因,筛选阳性克隆、酶切鉴定并测序。扩增阳性重组质粒后限制性内切酶切取p53(N15)-Ant片段连入pBV220/NT4质粒。结果克隆了p53(N15)-Ant基因,经酶切及测序证实结果正确;重组质粒pBV220/NT4p53(N15)Ant经限制性内切酶及琼脂糖凝胶电泳,结果显示酶切片段大小和理论值一致。结论通过分子克隆体外重组技术成功制备了含有NT4-p53(N15)-Ant表达盒的pBV220质粒,为进一步开展肿瘤的基因治疗奠定了基础。 展开更多

关键词 p53(N15)-Ant NT4信号肽 基因克隆 肿瘤

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凤丹牡丹PoFAD7基因的克隆及表达分析 被引量：3

10

作者 李超琼 王雪芹 +3 位作者 刘红占 王会芳 朱英男 田辉辉 《中国油脂》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期114-118,127,共6页

3脂肪酸脱氢酶能将亚油酸催化合成ɑ-亚麻酸,是植物脂肪酸生物合成的关键酶。以凤丹牡丹(Paeonia ostii)种子为试验材料,采用RACE和RT-PCR方法克隆获得凤丹牡丹脂肪酸脱氢酶7基因cDNA片段,命名为PoFAD7(GenBank登录号:MK205360);生物信... 3脂肪酸脱氢酶能将亚油酸催化合成ɑ-亚麻酸,是植物脂肪酸生物合成的关键酶。以凤丹牡丹(Paeonia ostii)种子为试验材料,采用RACE和RT-PCR方法克隆获得凤丹牡丹脂肪酸脱氢酶7基因cDNA片段,命名为PoFAD7(GenBank登录号:MK205360);生物信息学分析表明其包含完整的开放阅读框,推测编码的蛋白质含有450个氨基酸,具有2个跨膜结构域。蛋白质氨基酸序列比对分析表明,PoFAD7含有3个保守的组氨酸基序,而系统进化树分析结果显示凤丹牡丹与同属芍药属的芍药亲缘关系较近。对不同发育时期种子中PoFAD7基因的表达分析结果表明,该基因在凤丹牡丹授粉100 d的种子中相对表达量最高,结合凤丹牡丹种子中亚油酸和α-亚麻酸的累积规律,推测PoFAD7在催化亚油酸合成α-亚麻酸的反应中发挥一定的功能,但可能并不是α-亚麻酸合成的主效基因。 展开更多

关键词 凤丹牡丹 脂肪酸脱氢酶7 基因克隆 表达分析

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自适应免疫克隆粒子群算法的地震波阻抗反演 被引量：3

11

作者 聂茹 岳建华 《计算机应用与软件》 CSCD 2009年第11期21-25,共5页

针对粒子群优化算法应用于地震波阻抗反演问题时易陷入局部极小值和计算量大的问题,提出一种自适应免疫克隆粒子群(AICPSO)算法。该算法引入免疫机制,根据个体浓度和适应值概率定义了个体置换算子,能够避免粒子群算法陷于局部极值。为... 针对粒子群优化算法应用于地震波阻抗反演问题时易陷入局部极小值和计算量大的问题,提出一种自适应免疫克隆粒子群(AICPSO)算法。该算法引入免疫机制,根据个体浓度和适应值概率定义了个体置换算子,能够避免粒子群算法陷于局部极值。为避免由进化过程中大量相同抗体引起的算法退化现象,根据记忆库和抗体群不同的特性,采用自适应变异算子更新记忆库,而依据抗体浓度和亲和度更新下一代抗体群体。经数值模拟和实际波阻抗资料反演表明,该算法不依赖于初始模型,收敛速度快且结果可靠。免疫粒子群优化算法为解决地震波阻抗反演问题提供了一条可行途径。 展开更多

关键词 免疫算法 粒子群算法 免疫克隆 波阻抗反演

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巨噬细胞移动抑制因子基因的克隆和原核表达

12

作者 单志新 余细勇 +5 位作者 林秋雄 杨敏 符永恒 谭虹虹 郑猛 林曙光 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期815-816,819,共3页

目的:扩增、克隆人巨噬细胞移动抑制因子(MIF)基因,并在大肠杆菌中表达出具有生物活性的重组MIF蛋白。方法:根据人MIF基因序列,设计、合成PCR引物,利用RT -PCR技术从人T淋巴细胞mRNA中扩增MIF基因。将MIF定向插入原核表达载体pGEX - 4T ... 目的:扩增、克隆人巨噬细胞移动抑制因子(MIF)基因,并在大肠杆菌中表达出具有生物活性的重组MIF蛋白。方法:根据人MIF基因序列,设计、合成PCR引物,利用RT -PCR技术从人T淋巴细胞mRNA中扩增MIF基因。将MIF定向插入原核表达载体pGEX - 4T - 1,并将构建正确的重组表达载体pGEX - 4T -MIF转化工程菌BL2 1(DE3) ,用异丙基硫代- β-D -半乳糖(IPTG)诱导表达重组MIF蛋白。用GSTrap亲合柱纯化表达产物GST-MIF ,行柱上凝血酶消化,洗脱获得MIF蛋白。用巨噬细胞移动抑制试验(MMI)鉴定MIF蛋白的生物活性。结果:限制性内切酶分析和DNA测序结果表明,成功构建了重组质粒pGEX - 4T -MIF ,人MIFcDNA长348bp ,编码115个氨基酸。经IPTG诱导,高效表达出可溶的GST -MIF蛋白。SDS -PAGE和Westernblotting分析显示,GST -MIF经凝血酶消化,获得13kU的MIF蛋白。MIF蛋白对巨噬细胞移动的抑制率达30 % ,具有生物活性。结论:克隆、测定了人MIF基因,在大肠杆菌表达出具有生物活性的MIF蛋白。 展开更多

关键词 巨噬细胞游走抑制因子 克隆 分子 基因表达

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Galectin-1表达对LoVo细胞表型的影响 被引量：2

13

作者 童华生 张亚历 +1 位作者 姜泊 苏磊 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2010年第12期1074-1077,共4页

目的观察galectin-1表达对LoVo细胞表型的影响。方法构建galectin-1真核表达载体,转染LoVo细胞,细胞免疫化学检测蛋白质水平的改变,dot-blotting检测细胞培养上清分泌性galectin-1,观察LoVo细胞表型变化。结果成功构建了galectin-1真核... 目的观察galectin-1表达对LoVo细胞表型的影响。方法构建galectin-1真核表达载体,转染LoVo细胞,细胞免疫化学检测蛋白质水平的改变,dot-blotting检测细胞培养上清分泌性galectin-1,观察LoVo细胞表型变化。结果成功构建了galectin-1真核表达载体,并建立了稳定的真核表达载体转染LoVo细胞系。galectin-1表达可降低LoVo细胞与Ⅰ型胶原的粘附,促进细胞同质粘附,且降低细胞体内成瘤(P<0.001)。结论Galectin-1表达可降低LoVo细胞恶性相关表型。 展开更多

关键词 大肠癌 GALECTIN-1 基因重组 细胞表型

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包心菜无菌苗子叶及叶片原生质体高频分裂和高频植株再生 被引量：1

14

作者 李世君 孟征 李德葆 《浙江农业大学学报》 CSCD 1993年第4期389-394,共6页

以包心菜子叶和叶片原生质体为材料。经不同液体培养基(Bp1,Bp2,B1)浅层培养,再生细胞高频分裂并形成愈伤组织。愈伤组织经扩增后转移到分化培养基上诱导植株分化,从这两种原生质体中获得了再生植株。在原生质体培养过程中,原生质体及... 以包心菜子叶和叶片原生质体为材料。经不同液体培养基(Bp1,Bp2,B1)浅层培养,再生细胞高频分裂并形成愈伤组织。愈伤组织经扩增后转移到分化培养基上诱导植株分化,从这两种原生质体中获得了再生植株。在原生质体培养过程中,原生质体及细胞团的褐化程度与培养基中的有机成分的多少有关。原生质体的分化频率与培养基中植物激素种类关系甚大。在植株分化时,谷氨酰胺和腺嘌呤对植株分化有很大促进作用。另外,原生质体的来源及原生质体培养基对原生质体植株分化能力均有不同的影响。 展开更多

关键词 甘蓝 无菌苗 原生质体 再生植株

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松龄血脉康胶囊联合立普妥对老年高血压患者血清Fibulin-3、Lp(a)、MCP-1水平的影响 被引量：2

15

作者 任焱 范仲才 +2 位作者 任静 胡文义 刘红梅 《现代生物医学进展》 CAS 2018年第17期3348-3351,共4页

目的:研究松龄血脉康胶囊联合立普妥对老年高血压患者血清细胞外基质蛋白-3 (Fibulin-3)、脂蛋白a (Lipoprotein(a),Lp(a))、单核细胞趋化蛋白-1 (monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)水平的影响。方法:选择2015年04月至2017年1... 目的:研究松龄血脉康胶囊联合立普妥对老年高血压患者血清细胞外基质蛋白-3 (Fibulin-3)、脂蛋白a (Lipoprotein(a),Lp(a))、单核细胞趋化蛋白-1 (monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)水平的影响。方法:选择2015年04月至2017年12月在我院治疗的老年高血压患者72例,按照随机数字表法为观察组和对照组,对照组采用立普妥口服治疗,观察组在对照组的基础上联用松龄血脉康胶囊口服治疗,观察和比较两组临床治疗效果,治疗前后血脂、动态血压及Fibulin-3、Lp(a)、MCP-1水平的变化情况。结果:治疗后,观察组总有效率为88.89%,明显高于对照组(69.44%,P<0.05);观察组血清血清总胆固醇(Serum total cholesterol,TC)、低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein cholesterol,LDL-C)、甘油三酯(triglyceride,TG)、游离脂肪酸(nonesterified fatty acid,FFA)、Lp(a)、MCP-1等水平均显著低于对照组(P<0.05),而血清HDL-C、Fibulin-3水平明显高于对照组(P<0.05);治疗后,观察组动态血压水平降低范围较对照组更明显(P<0.05);观察组患者生活愉快、心理健康及认知功能等方面评分均显著高于对照组(P<0.05)。结论:松龄血脉康胶囊联合立普妥治疗老年高血压患者的临床疗效显著优于单用立普妥口服治疗,其能更有效维持动态血压的正常水平,且显著改善Fibulin-3、Lp(a)、MCP-1水平,降脂效果良好。 展开更多

关键词 松龄血脉康胶囊 立普妥 老年高血压 细胞外基质蛋白-、脂蛋白a、单核细胞趋化蛋白-1

原文传递

担子菌LMPQ39　Pst　Ⅰ片段基因库的构建

16

作者 王灿华 吴其威 +2 位作者 黄瑞珊 朱章玉 李堃宝 《上海交通大学学报》 EI CAS CSCD 北大核心 1995年第2期161-164,共4页

担子菌ＬＭＰＱ３９　Ｐｓｔ　Ⅰ片段基因库的构建王灿华，吴其威，黄瑞珊，朱章玉，李堃宝（生物技术研究所）关键词担子菌ＬＭＰＱ３９，ＰｓｔⅠ酶切，质粒ｐＢＲ３２２，克隆库中图法分类号Ｑ７５当今的育种工作，除使用常规手段外... 担子菌ＬＭＰＱ３９　Ｐｓｔ　Ⅰ片段基因库的构建王灿华，吴其威，黄瑞珊，朱章玉，李堃宝（生物技术研究所）关键词担子菌ＬＭＰＱ３９，ＰｓｔⅠ酶切，质粒ｐＢＲ３２２，克隆库中图法分类号Ｑ７５当今的育种工作，除使用常规手段外，主要是从分子水平和细胞水平两个层... 展开更多

关键词 担子菌 LMPQ 酶切 克隆库 食用菌 遗传

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par-4 SAC基因的克隆及序列测定

17

作者 秦天洁 马巍 +2 位作者 刘陕西 杨广笑 王全颖 《现代肿瘤医学》 CAS 2009年第9期1626-1629,共4页

目的:利用基因工程技术对par-4 SAC进行基因克隆并测定其序列,为进一步诱导肿瘤细胞靶向性凋亡的基因治疗奠定基础。方法:采用非对称互补引物/模板法,制备两端含有酶切位点的par-4 SAC的cDNA,PCR产物克隆入pGEM-T Easy载体并转化感受态... 目的:利用基因工程技术对par-4 SAC进行基因克隆并测定其序列,为进一步诱导肿瘤细胞靶向性凋亡的基因治疗奠定基础。方法:采用非对称互补引物/模板法,制备两端含有酶切位点的par-4 SAC的cDNA,PCR产物克隆入pGEM-T Easy载体并转化感受态大肠杆菌E.coli DH5α菌株,随机挑取数个菌落,筛选鉴定并测序。结果:经酶切鉴定、测序分析,表明所插入的基因片断为par-4 SAC基因,与设计完全相同。结论:应用非对称互补引物/模板法克隆par-4SAC基因是成功及可行的。 展开更多

关键词 PAR-4 SAC 基因克隆 凋亡

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基于GSM信令监测的SIM卡克隆预警系统设计

18

作者 江川贵 庞琳 曾键 《电信工程技术与标准化》 2010年第4期27-29,共3页

随着移动通信业务的高速发展,收入流失风险也在逐步加大,各种不法分子利用SIM卡克隆进行高额欺诈的手段越来越复杂,给移动运营商造成较大损失和不良影响。本文介绍了一种以"GSM信令监测进行SIM卡克隆预警"的技术方案,在快速预... 随着移动通信业务的高速发展,收入流失风险也在逐步加大,各种不法分子利用SIM卡克隆进行高额欺诈的手段越来越复杂,给移动运营商造成较大损失和不良影响。本文介绍了一种以"GSM信令监测进行SIM卡克隆预警"的技术方案,在快速预警SIM卡克隆欺诈上能起到较好的作用。 展开更多

关键词 GSM信令 SIM卡克隆 欺诈

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鸡胚胎干细胞单细胞克隆制备方法的比较

19

作者 何先红 倪黎纲 +1 位作者 余飞 李碧春 《扬州大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期35-38,共4页

提取鸡X期胚盘细胞,体外培养传至第3代,采用口吸管法、细胞稀释法及克隆环法将细胞集落分离成单个细胞,并将其接种至96孔板上,每孔1个细胞,采用细胞化学法和免疫荧光法检测细胞表面标志物,探讨鸡胚胎干细胞单细胞克隆制备的实际操作的... 提取鸡X期胚盘细胞,体外培养传至第3代,采用口吸管法、细胞稀释法及克隆环法将细胞集落分离成单个细胞,并将其接种至96孔板上,每孔1个细胞,采用细胞化学法和免疫荧光法检测细胞表面标志物,探讨鸡胚胎干细胞单细胞克隆制备的实际操作的可行性,并对其生物学特性进行鉴定。结果表明:口吸管法、克隆环法、细胞稀释法克隆率分别为0、1.0%、4.2%。3种方法相比较,细胞稀释法具有操作简单易行、实验时间短、对细胞伤害小等优点,经碱性磷酸酶活性和阶段特异性表面抗原1免疫荧光鉴定均呈阳性,扩增出的克隆能稳定增殖且不分化。 展开更多

关键词 鸡 胚胎干细胞 单细胞克隆

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人胰岛细胞自身抗原69ku蛋白基因的分离及重组质粒鉴定

20

作者 黄逎萍 吴锐 +1 位作者 蔡军 张镜宇 《天津医药》 CAS 2000年第2期96-98,共3页

目的:应用聚合酶链技术获取作为基因探针和体外表达研究所必需的人胰岛细胞自身抗原69ku蛋白(hICA 69)编码基因,为探讨该基因在不同种系间和(或)组织来源间的差异打下基础。方法:分别从正常白人胰腺细胞和国人胰岛细胞瘤Poly(A^+)-RNA... 目的:应用聚合酶链技术获取作为基因探针和体外表达研究所必需的人胰岛细胞自身抗原69ku蛋白(hICA 69)编码基因,为探讨该基因在不同种系间和(或)组织来源间的差异打下基础。方法:分别从正常白人胰腺细胞和国人胰岛细胞瘤Poly(A^+)-RNA中逆转录合成编码人胰岛细胞自身抗原69ku蛋白(hICA 69)的全长cDNA,以双链cDNA(ds cDNA)为模板,经聚合酶链反应(PCR)特异性扩增出hICA 69基因的编码序列。利用基因重组技术,将纯化的目的基因插入pSPORT1质粒的多克隆位点,经限制性内切酶加以初步鉴定。结果:成功地扩增了hICA 69基因,并正确地克隆进pSPORT1载体,酶切鉴定筛选出正向插入重组子,其结果与预期值一致。结论:hICA 69基因的克隆为应用基因工程技术生产胰岛细胞自身抗原、生产适用于1型糖尿病诊断的试剂盒打下一定的基础。 展开更多

关键词 ICA69 聚合酶链反应 分离 糖尿病 质粒 鉴定

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