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不同浓度的骨碎补总黄酮对大鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化的影响 被引量:35
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作者 舒晓春 刘君静 +1 位作者 朱丹华 庞天骄 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期1261-1264,共4页
目的:通过在体外条件下对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)实施干预诱导,探寻骨碎补总黄酮对BMSCs的成骨诱导分化能力及不同浓度下可能存在的剂量效应关系。方法:应用全骨髓贴壁培养法对BMSCs进行分离、纯化,并通过流式细胞术对BMSCs进行鉴... 目的:通过在体外条件下对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)实施干预诱导,探寻骨碎补总黄酮对BMSCs的成骨诱导分化能力及不同浓度下可能存在的剂量效应关系。方法:应用全骨髓贴壁培养法对BMSCs进行分离、纯化,并通过流式细胞术对BMSCs进行鉴定,再通过设立含不同浓度骨碎补总黄酮条件培养基,分组对BMSCs进行干预,观察各组7d和14d碱性磷酸酶(ALP)的表达,同时通过ALP染色和矿化结节染色进行定性分析。结果:用全骨髓贴壁法成功分离获得了均一稳定的BMSCs,各浓度骨碎补总黄酮作用BMSCs7d和14d后,诱导不同程度的ALP表达,经10-5g/L骨碎补总黄酮诱导,ALP染色及矿化结节染色均阳性。结论:低浓度骨碎补总黄酮能促进BMSCs向成骨细胞分化,其ALP生成量随着骨碎补总黄酮浓度的降低大致呈增加趋势。 展开更多
关键词 骨碎补总黄酮 骨髓间充质干细胞 成骨细胞 细胞分化
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骨髓间充质干细胞对股骨头坏死缺损模型修复的组织学观察 被引量:19
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作者 孙伟 李子荣 +5 位作者 史振才 张念非 李艳 崔福斋 张岚 蔡哲 《中国康复理论与实践》 CSCD 2005年第1期4-6,共3页
目的研究骨髓间充质干细胞在治疗股骨头坏死动物模型的修复作用及价值。方法建立兔双侧股骨头内骨缺损模型 ,并分为 3组 ,A组为制作缺损而不填充任何材料 ,B组为单纯填充纳米人工骨 ,C组填充纳米人工骨和骨髓间充质干细胞的复合材料。... 目的研究骨髓间充质干细胞在治疗股骨头坏死动物模型的修复作用及价值。方法建立兔双侧股骨头内骨缺损模型 ,并分为 3组 ,A组为制作缺损而不填充任何材料 ,B组为单纯填充纳米人工骨 ,C组填充纳米人工骨和骨髓间充质干细胞的复合材料。对植入后 4周、8周、12周的股骨头行组织学检查。结果B组和C组在股骨头缺损修复成骨方面与A组有显著差异 ,C组差异性更大。结论骨髓间充质干细胞有较强的成骨作用 ,可促进股骨头坏死骨缺损的修复 ,对股骨头坏死的治疗有较大价值。 展开更多
关键词 股骨头坏死 骨缺损 骨髓间充质干细胞
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枸杞多糖含药血清对大鼠骨髓间充质干细胞成骨诱导过程及Wnt信号通路的影响 被引量:20
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作者 王雨 苗永霸 +2 位作者 王银 张春 苗珍花 《宁夏医科大学学报》 2017年第5期525-529,F0002,共6页
目的探讨枸杞多糖含药血清对诱导大鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化过程及Wnt信号通路的影响。方法 4月龄SD雄性大鼠15只,随机分3组分别灌胃给予枸杞多糖(LBP)100、50mg·kg-1及蒸馏水,常规制备含药及空白血清;全骨髓培养法培养S... 目的探讨枸杞多糖含药血清对诱导大鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化过程及Wnt信号通路的影响。方法 4月龄SD雄性大鼠15只,随机分3组分别灌胃给予枸杞多糖(LBP)100、50mg·kg-1及蒸馏水,常规制备含药及空白血清;全骨髓培养法培养SD大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs),经纯化鉴定后,随机分为培养基组、诱导剂组、空白血清+诱导剂组(空白血清组)、LBP血清高、低剂量+诱导剂组(LBP血清高、低剂量组),进行成骨诱导;采用碱性磷酸酶(ALP)、茜素红染色检测BMSCs的成骨活性和矿化能力,Western blot检测β-catenin和wnt10b蛋白的表达情况。结果 (1)与培养基组比较,诱导剂组、空白血清组、LBP血清高及低剂量组ALP、茜素红染色均为阳性,β-catenin、wnt10b表达均增加(P<0.05或<0.01);(2)与诱导剂组比较,空白血清组、LBP血清低剂量组ALP沉淀、矿化结节无明显差别,LBP血清高剂量组增多;与诱导剂组比较,LBP血清高、低剂量组β-catenin、wnt10b表达增加(P均<0.05),空白血清组差异无统计学意义(P>0.05);(3)与空白血清组比较,LBP血清低剂量组的ALP沉淀、矿化结节无明显差异,LBP血清高剂量组增多,LBP血清高、低剂量组β-catenin、wnt10b表达增加(P均<0.05)。结论含LBP血清能增加经成骨诱导的BMSCs的成骨活性和矿化能力,这种作用可能与激活Wnt信号通路相关蛋白β-catenin和wnt10b蛋白的表达有关。 展开更多
关键词 枸杞多糖 骨髓间充质干细胞 成骨诱导 Β-CATENIN wnt10b
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雌激素受体信号通路介导的槲皮素调控骨髓间充质干细胞成骨及成脂分化研究 被引量:16
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作者 李小云 杨丽 张荣华 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第12期6011-6014,共4页
目的:研究槲皮素(QUE)对骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨及成脂分化的影响,及雌激素受体(ER)信号通路对其的调控作用。方法:全骨髓贴壁法提取大鼠BMSCs;细胞形态学及表面抗原鉴定BMSCs;CCK8法测定QUE对BMSCs活力的影响;碱性磷酸酶(ALP)法及... 目的:研究槲皮素(QUE)对骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨及成脂分化的影响,及雌激素受体(ER)信号通路对其的调控作用。方法:全骨髓贴壁法提取大鼠BMSCs;细胞形态学及表面抗原鉴定BMSCs;CCK8法测定QUE对BMSCs活力的影响;碱性磷酸酶(ALP)法及ELISA法分别检测QUE干预BMSCs后细胞培养上清液中ALP和BGP的表达;加入ER阻断剂ICI182780,Western blot及实时荧光定量PCR法检测正常及ER阻断后QUE对BMSCs成脂及成骨分化相关因子表达的影响。结果:细胞呈长梭形、多角状,表面抗原CD29阳性率99.93%,CD45阳性率3.20%;综合不同浓度QUE对BMSCs增殖和成骨分化影响,选取10^(-5)mol/L QUE进行后续实验。QUE能促进RUNX2及ALP的表达,抑制PPARγ及C/EBPα的表达(P<0.05);与QUE组比较,QUE与ICI182780联用后可显著抑制ALP的表达,促进PPARγ的表达(P<0.05),但RUNX2与C/EBPα的蛋白及mRNA变化不一致。结论:QUE促进BMSCs成骨分化、抑制成脂分化,可能是通过ER信号通路介导完成。 展开更多
关键词 槲皮素 雌激素受体信号通路 骨髓间充质干细胞 成骨分化 成脂分化
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香丹注射液定向诱导大鼠骨髓间质干细胞分化为神经元样细胞 被引量:12
5
作者 黄慧 唐云安 张成 《中药材》 CAS CSCD 北大核心 2004年第8期585-589,共5页
目的 :研究香丹注射液对成年SD大鼠骨髓间质干细胞 (rMSCs)的诱导分化作用。方法 :rMSCs取自大鼠的下肢骨 ,贴壁筛选法和营养缺陷培养基 (α MEM完全培养液 )分离纯化。加碱性成纤维生长因子 (bFGF)预诱导第 5代的rMSCs 2 4h ,换无血清... 目的 :研究香丹注射液对成年SD大鼠骨髓间质干细胞 (rMSCs)的诱导分化作用。方法 :rMSCs取自大鼠的下肢骨 ,贴壁筛选法和营养缺陷培养基 (α MEM完全培养液 )分离纯化。加碱性成纤维生长因子 (bFGF)预诱导第 5代的rMSCs 2 4h ,换无血清培养液 (D/F12 +N2 +bFGF)和香丹注射液 (1%~ 5 % )诱导 6~ 8h ,观察细胞形态变化 ;细胞免疫化学和反转录 PCR法鉴定神经元标记物 (神经元特异性烯醇化酶NSE、神经丝蛋白NF 2 0 0、微管相关蛋白MAP 2及胶质纤维酸性蛋白GFAP)的表达及相对表达量 ,并得到相应的诱导率。结果 :诱导 3h ,rM SCs出现神经元样的形态学变化 ,诱导 6~ 8h ,神经元的诱导率达 83 5 %± 3 8% ;诱导组中 ,神经元样细胞NSE、NF和GFAP的阳性率分别为 82 9%± 2 98%、84 1%± 4 4 5 %、3 4 9%± 1 6 7% ;对照组细胞和诱导组未变化细胞上述染色均呈阴性 ;RT PCR法示 :只有诱导组有NSE、MAP 2 (HWM )、GFAP的表达且前两者的表达量均分别高于后者 (P <0 0 1)。结论 :1%~ 5 展开更多
关键词 香丹注射液 诱导率 神经元样细胞 GFAP 骨髓间质干细胞 NSE 大鼠 表达量 分化 培养基
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半夏泻心汤含药血清对胃癌微环境中BMSCs生长增殖的影响 被引量:15
6
作者 杨柏林 刘喜平 +4 位作者 崔国宁 董俊刚 明海霞 辛宝 吴高峰 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第22期97-102,共6页
目的:观察半夏泻心汤及不同配伍药组含药血清对胃癌微环境中骨髓间充质干细胞(BMSCs)生长增殖的影响,并探讨其作用机制。方法:设BMSCs常规培养为空白组;模型组采用transwell小室将人胃癌BCG-823细胞与大鼠BMSCs非接触共培养建立胃癌微环... 目的:观察半夏泻心汤及不同配伍药组含药血清对胃癌微环境中骨髓间充质干细胞(BMSCs)生长增殖的影响,并探讨其作用机制。方法:设BMSCs常规培养为空白组;模型组采用transwell小室将人胃癌BCG-823细胞与大鼠BMSCs非接触共培养建立胃癌微环境;半夏泻心汤及不同配伍含药血清组(全方组、辛开组、苦降组、甘补组)在上室内加入体积浓度为10%的相应配伍药含药血清。倒置显微镜观察BMSCs细胞形态、噻唑蓝(MTT)比色法观察BMSCs的增殖率,流式细胞术(FCM)检测BMSCs的细胞周期,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测原癌基因(c-Myc)和端粒酶逆转录酶(TERT)蛋白的表达,实时荧光定量PCR检测c-Myc和TERT mRNA的表达。结果:全方组、辛开组、苦降组、甘补组含药血清在4,5,6,7 d对BMSCs的增殖有明显抑制作用,全方组明显优于甘补组(P<0.05);第7天的检测结果显示全方组、辛开组、苦降组、甘补组含药血清均可降低c-Myc和TERT表达水平,升高G1期细胞比例,降低S期细胞比例,全方组明显优于甘补组(P<0.05)。结论:半夏泻心汤及不同配伍药组含药血可抑制胃癌微环境中BMSCs的异常增殖,半夏泻心汤全方为最佳配伍。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 半夏泻心汤 胃癌微环境 细胞增殖 原癌基因 端粒酶逆转录酶
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骨髓间充质干细胞治疗脊髓损伤的研究进展 被引量:13
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作者 韩博 蒋玉东 董大明 《中华实用诊断与治疗杂志》 2017年第3期300-302,共3页
干细胞移植尤其是骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cell,BMSC)移植是治疗脊髓损伤的方法之一。BMSC具有增殖和多向分化能力良好、取材方便、易于分离培养、免疫原性低等特点,是脊髓损伤治疗研究的热点。本文就BMSC的生物学特征... 干细胞移植尤其是骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cell,BMSC)移植是治疗脊髓损伤的方法之一。BMSC具有增殖和多向分化能力良好、取材方便、易于分离培养、免疫原性低等特点,是脊髓损伤治疗研究的热点。本文就BMSC的生物学特征及其治疗脊髓损伤的研究进展作一综述。 展开更多
关键词 脊髓损伤 骨髓间充质干细胞 联合治疗
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鼠骨髓间充质干细胞在缺氧缺血性脑病新生鼠脑内的分布及分化 被引量:10
8
作者 李禄全 余加林 +1 位作者 官晓清 刘官信 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期327-330,共4页
目的 探讨鼠骨髓间充质干细胞 (MSCs)在缺氧缺血性脑病新生鼠脑内的分布及分化。方法 采用全骨髓贴壁筛选法分离培养鼠骨髓间充质干细胞 ,移植前加入 5 溴 2 脱氧尿嘧啶核苷 (BrdU)连续标记 72h。采用Rice法制备新生鼠缺氧缺血性... 目的 探讨鼠骨髓间充质干细胞 (MSCs)在缺氧缺血性脑病新生鼠脑内的分布及分化。方法 采用全骨髓贴壁筛选法分离培养鼠骨髓间充质干细胞 ,移植前加入 5 溴 2 脱氧尿嘧啶核苷 (BrdU)连续标记 72h。采用Rice法制备新生鼠缺氧缺血性脑病模型 ,2 4h后经前囟旁缓慢注射 4× 10 6 个MSCs入缺氧缺血性脑性脑病新生鼠右侧脑内 ,4周后进行免疫组化检测MSCs的分布并鉴定神经元巢蛋白 (Nestin)、神经元特异性烯醇化酶 (NSE)、胶质纤维酸性蛋白 (GFAP)的表达。结果 Rice法可制备新生鼠单侧脑损伤为主的缺氧缺血性脑病模型 ,MSCs移植入脑后主要分布在患侧大脑 ,呈弥散性分布于皮层、海马等部位 ,细胞计数左侧为 (2 781± 2 5 4) ,右侧为 (4 70 8± 2 81) ,双侧比较t=18 70 ,P <0 0 0 1,并神经性分化 ,左、右侧Nestin分化率为 (1 5 6± 0 47) % ,(71± 0 42 ) 1% (t =1 741,P >0 0 5 ) ;NSE为 (3 79± 0 95 ) % ,(5 69±1 48) % (t =3 40 4,P <0 0 5 ) ;GFAP为 (2 0 6± 0 89) % ,(2 47± 1 75 ) % (t=0 85 5 ,P >0 0 5 )。结论 MSCs颅内直接移植后主要分布在患侧大脑 ,MSCs移植后 2 8d可分化为神经干细胞、成熟神经元和星型胶质细胞。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 神经性分化 颅内移植
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低频电磁场促进骨髓间充质干细胞移植修复大鼠脊髓损伤的实验研究 被引量:11
9
作者 冯玉 白文芳 +5 位作者 许伟成 李新平 白利明 梁玲 王鑫 张鸣生 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2013年第32期5819-5826,共8页
背景:骨髓间充质干细胞移植治疗脊髓损伤被视为一种有前途的治疗方法,如何更有效地促进骨髓间充质干细胞在脊髓损伤区存活,加速脊髓损伤肢体运动功能的恢复是目前研究的重点。前期研究发现,低频电磁场能够促进骨髓间充质干细胞的增殖分... 背景:骨髓间充质干细胞移植治疗脊髓损伤被视为一种有前途的治疗方法,如何更有效地促进骨髓间充质干细胞在脊髓损伤区存活,加速脊髓损伤肢体运动功能的恢复是目前研究的重点。前期研究发现,低频电磁场能够促进骨髓间充质干细胞的增殖分化,低频电磁场是否可应用于骨髓间充质干细胞移植治疗脊髓损伤还需进一步研究。目的:探讨低频电磁场对移植骨髓间充质干细胞脊髓损伤大鼠后肢运动功能恢复的影响。方法:采用脊髓压迫法制备64只T10不完全性脊髓损伤大鼠模型,随机等分为对照组、骨髓间充质干细胞组、电磁场组和电磁场+骨髓间充质干细胞组。造模成功后,骨髓间充质干细胞组和电磁场+骨髓间充质干细胞组大鼠脊髓损伤原部位注射大鼠全贴壁法分离培养BrdU标记的骨髓间充质干细胞,对照组和电磁场组注射a-MEM培养液。造模术后24h,电磁场组和电磁场+骨髓间充质干细胞组予60min/d的低频电磁场刺激(频率50Hz、强度5mT)。结果与结论:骨髓间充质干细胞移植后第21天,电磁场+骨髓间充质干细胞组BBB评分与其他组相比,差异有显著性意义(P<0.05),与其他各组比较,电磁场+骨髓间充质干细胞组移植细胞后,大鼠BrdU阳性细胞在脊髓损伤区域生长并与脊髓组织融合,存活细胞数量较其他组多;空洞面积小;损伤区胶质纤维酸性蛋白表达更少,而基质金属蛋白2表达更多;脊髓损伤大鼠下肢运动功能恢复最快(P<0.05)。提示低频电磁场促进了移植骨髓间充质干细胞脊髓损伤大鼠后肢运动功能的恢复,可能与低频电磁场有利于损伤区移植骨髓间充质干细胞的存活,上调基质金属蛋白2的表达并减少胶质瘢痕的形成有关。 展开更多
关键词 干细胞 干细胞移植 低频电磁场 脊髓损伤 骨髓间充质干细胞 细胞移植 省级基金 干细胞图片文章
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骨髓间质干细胞移植对香猪急性心肌梗死后心肌结构和心功能的影响 被引量:11
10
作者 朱洪生 黄日太 +2 位作者 连锋 陶如琦 郑家豪 《中国胸心血管外科临床杂志》 CAS 2004年第2期112-115,共4页
目的 移植自体骨髓间质干细胞 ( BMSCs)到香猪急性心肌梗死区内 ,研究移植 BMSCs对心肌结构和心功能的影响。 方法 将 2 4只贵州香猪采用计算器随机法分为实验组 ( n=12 )和对照组 ( n=12 ) ,抽取香猪自体骨髓 ,经体外分离出 BMSCs... 目的 移植自体骨髓间质干细胞 ( BMSCs)到香猪急性心肌梗死区内 ,研究移植 BMSCs对心肌结构和心功能的影响。 方法 将 2 4只贵州香猪采用计算器随机法分为实验组 ( n=12 )和对照组 ( n=12 ) ,抽取香猪自体骨髓 ,经体外分离出 BMSCs并培养和经 5 -氮胞苷 ( 5 - azacytidine)转化 ,利用结扎左前降支 ( L AD)的方法建立急性心肌梗死动物模型 ,经 L AD和梗死区多点注射的方法将实验组香猪注射 BMSCs(细胞总数 2× 10 6 个 ) ,对照组注射等量的细胞培养液。 3周和 6周后 ,用超声心动图 ( UCG)观察两组移植后心肌结构和心功能改变的情况。 结果 实验组左心室射血分数、左心室短轴缩短率和室壁增厚率明显高于对照组 ;左心室室壁、室间隔厚度和心室腔的大小在两组之间也存在明显差别 ,实验组室壁和室间隔厚度明显大于对照组 ,而心室腔小于对照组。 结论  BMSCs梗死区心肌移植后可减轻心室重构的进程 ,减轻心肌的变薄程度 ,使心室腔未明显扩大。 BMSCs移植还可增加心肌的收缩力 。 展开更多
关键词 骨髓间质干细胞 细胞移植 香猪 急性心肌梗死 心肌结构 心功能 超声心动图 BMSCS
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骨髓间充质干细胞移植对急性脊髓损伤脱髓鞘病变的保护作用 被引量:12
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作者 苟杨 刘丹彦 +1 位作者 刘金凤 孙鸿然 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期761-776,共16页
骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)已被广泛应用于治疗脊髓损伤,但目前对其治疗机制了解甚少。BMSCs被移植至脊髓钳夹损伤模型大鼠,以研究其保护作用。通过LFB(Luxol fast blue)染色、锇酸染色、TUNEL(Td T-m... 骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)已被广泛应用于治疗脊髓损伤,但目前对其治疗机制了解甚少。BMSCs被移植至脊髓钳夹损伤模型大鼠,以研究其保护作用。通过LFB(Luxol fast blue)染色、锇酸染色、TUNEL(Td T-mediated d UTP nick-end labeling)染色和透射电镜对白质有髓神经纤维进行观察。免疫印迹检测BMSCs移植对脑源性神经营养因子(Brain derived neurotrophic factor,BDNF)和caspase 3蛋白表达的影响。通过脊髓损伤后1、7、14 d三个时间点移植BMSCs并进行后肢运动评分(Basso,beattie and bresnahan;BBB评分)和CNPase(2′,3′-cyclic-nucleotide 3′-phosphodiesterase)、髓鞘碱性蛋白(Myelin basic protein,MBP)、caspase 3蛋白水平的检测。免疫荧光观察BMSCs移植到受损脊髓后分化情况及CNPase-caspase 3^+共表达情况。骨髓间充质干细胞移植7 d后,部分移植的BMSCs可表达神经元和少突胶质细胞标记物,大鼠后肢运动能力和髓鞘超微结构特征均明显改善。骨髓间充质干细胞移植后BDNF蛋白表达水平增加,caspase 3蛋白表达水平则降低。相对于脊髓损伤后1 d和14 d,7 d移植BMSCs后MBP和CNPase蛋白表达水平最高;caspase 3蛋白表达水平则最低。骨髓间充质干细胞移植后CNPase-caspase 3^+细胞散在分布于脊髓白质。结果表明,急性脊髓损伤后,BMSCs移植到受损脊髓有分化为神经元和少突胶质细胞的倾向,并促进BDNF的分泌介导抗少突胶质细胞凋亡而对神经脱髓鞘病变有保护作用,且最佳移植时间为脊髓损伤后7 d。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 脊髓损伤 细胞凋亡 细胞移植
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HMGB1-RAG/LRs-NF-κB信号通路在骨髓间充质干细胞移植治疗内毒素致凝血功能障碍大鼠中的作用 被引量:12
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作者 修光辉 熊伟 +4 位作者 尹云玉 陈献忠 刘萍 孙洁 凌斌 《中华危重病急救医学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第9期830-835,共6页
目的探讨高迁移率族蛋白B1-晚期糖基化终末产/Toll样受体-核转录因子- κB(HMGB1-RAGE/TLRs-NF-κB)信号通路在骨髓间充质干细胞(BMSC)移植治疗内毒素脂多糖(LPS)致凝血功能障碍大鼠中的作用。方法体外分离培养4~5周龄雌性SD大鼠B... 目的探讨高迁移率族蛋白B1-晚期糖基化终末产/Toll样受体-核转录因子- κB(HMGB1-RAGE/TLRs-NF-κB)信号通路在骨髓间充质干细胞(BMSC)移植治疗内毒素脂多糖(LPS)致凝血功能障碍大鼠中的作用。方法体外分离培养4~5周龄雌性SD大鼠BMSC,取第4代细胞鉴定成功后用于后续实验。按随机数字表法将大鼠分为生理盐水(NS)对照组、LPS组和BMSC组,每组15只。经大鼠大隐静脉注射LPS 1 m/g构建LPS致凝血功能障碍模型;NS对照组给予等量NS。BMSC组于制模后2 h经尾静脉注射BMSC 0.5 mL(含BMSC 1×106个);NS对照组和LPS组给予等量NS。分别于术后1、3、7 d取大鼠腹主动脉血,检测凝血功能指标〔包括血小板计数(PLT)、血小板体积分布宽度(PDW)、平均血小板体积(MPV)、血小板压积(PCT)、大型血小板比例(P-LCR)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)、国际标准化比值(INR)及纤维蛋白原(FIB)〕;分别采用实时反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)与酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血中HMGB1、RAGE、TLR/及NF-κB的mRNA表达和含量。结果①体外培养细胞呈梭形或扁平型生长,第4代细胞表型经流式细胞仪鉴定为BMSC。②凝血功能指标:与NS对照组比较,LPS组1 d PLT、PCT、FIB即明显下降,PDW、MPV、P-LCP、INR即明显升高,APTT、PT、TT即明显延长;随LPS诱导时间延长,各项凝血指标均有所好转。给予BMSC干预后能明显逆转LPS诱导的凝血功能异常,1 d时各指标与LPS组比较差异即有统计学意义〔PLT(×10/):398.8±17.9比239.1±15.8,PCT(%):0.35±0.04比0.23±0.06,FIB(/):1.7±0.6比0.8±0.1,PDW(%):12.4±1.6比16.2±1.5,MPV(fl):11.0±1.6比13.7±1.1,P-LCR(%):13.0±2.1比15.3±2.7,INR:1.52±0.17比1.82±0.19,APTT(s):66.3±4.1比89.5±4.5,PT(s):18.3±0.7比25.1±1.9, 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 凝血功能障碍 内毒素 高迁移率族蛋白B1 信号通路
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黄芪皂甙Ⅳ联合骨髓间充质干细胞对脑缺血再灌注大鼠血管生成的影响 被引量:12
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作者 王莹 李文媛 +3 位作者 李明秋 管业秋 张秀彪 吕文召 《解剖学研究》 CAS 2011年第5期323-326,343,共5页
目的研究黄芪皂甙Ⅳ联合骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cell,BMSCs)移植对大鼠脑缺血再灌注模型血管生成和神经功能的影响。方法采用线栓法建立大鼠大脑中动脉缺血模型,随机分为模型组、黄芪皂甙Ⅳ组、BMSCs组、黄芪加BMSCs组... 目的研究黄芪皂甙Ⅳ联合骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cell,BMSCs)移植对大鼠脑缺血再灌注模型血管生成和神经功能的影响。方法采用线栓法建立大鼠大脑中动脉缺血模型,随机分为模型组、黄芪皂甙Ⅳ组、BMSCs组、黄芪加BMSCs组(联合组),应用PKH-26染色标记移植的BMSCs,NSS法检测神经功能恢复情况,免疫组化染色检测基质细胞衍生因子-1(stromal cell-derived factor-1,SDF-1)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)蛋白表达,CD34标记血管内皮细胞并计数微血管密度(MVD)。结果与模型组和黄芪皂甙Ⅳ组比较,黄芪加BMSCs组和BMSCs组均能使大鼠神经功能损害评分降低,以黄芪加BMSCs组恢复最为明显(P<0.05)。与模型组比较,黄芪皂甙Ⅳ组SDF-1蛋白表达显著增加(P<0.05)。黄芪加BMSCs组PKH-26标记的细胞个数显著高于BMSCs组(P<0.05)。治疗组VEGF和MVD表达均显著高于模型组,其中黄芪加BMSCs组表达最为显著(P<0.05)。结论联合组促进脑缺血损伤血管生成和神经功能恢复的作用优于单独治疗组,其机制可能与黄芪皂甙Ⅳ上调脑缺血区SDF-1表达,促进移植的BMSCs迁移和存活有关。 展开更多
关键词 黄芪皂甙Ⅳ 骨髓间充质干细胞 脑缺血再灌注 基质细胞衍生因子-1 血管内皮生长因子 血管生成
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大鼠脊髓匀浆上清液对骨髓间质干细胞的诱导分化作用 被引量:9
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作者 唐云安 王瑞淑 +4 位作者 张成 刘玉清 徐培渝 黄慧 姚晓黎 《中风与神经疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期196-198,共3页
目的 探讨大鼠脊髓匀浆上清液对骨髓间质干细胞的诱导分化作用。方法 从大鼠骨髓中分离培养间质干细胞并传至第 4代 ,诱导前 2 4h加 1 0ng/ml碱性成纤维生长因子 (bFGF)入培养液中以促分裂 ,再以正常脊髓、损伤后 5d及损伤后 40d脊髓... 目的 探讨大鼠脊髓匀浆上清液对骨髓间质干细胞的诱导分化作用。方法 从大鼠骨髓中分离培养间质干细胞并传至第 4代 ,诱导前 2 4h加 1 0ng/ml碱性成纤维生长因子 (bFGF)入培养液中以促分裂 ,再以正常脊髓、损伤后 5d及损伤后 40d脊髓匀浆上清液作诱导剂 ,然后观察细胞形态的变化 ,并采用免疫组织化学法 ,对诱导后第 4d的细胞进行神经元特异性烯醇化酶 (NSE)、神经丝蛋白 (NF)和胶质纤维酸性蛋白 (GFAP)表达的检测。结果 诱导后第 4d的部分细胞不仅在形态上表现为神经元样 ,而且呈NSE及NF阳性表达 ,GFAP阴性。 展开更多
关键词 大鼠 脊髓匀浆上清液 骨髓间质干细胞 细胞分化 碱性成纤维生长因子 脊髓损伤
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骨髓间充质干细胞对脑缺血大鼠星形胶质细胞影响的实验研究 被引量:10
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作者 陈玉玺 王晓莉 +3 位作者 牟青杰 张睿馨 范蒙蒙 巩平 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2013年第6期564-567,共4页
目的星形胶质细胞过度增生是影响损伤脑组织修复的重要因素,抑制星形胶质细胞形成有助于损伤脑组织修复。本研究观察骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)移植对局灶性脑缺血大鼠星形胶质细胞的影响并探讨其机制,以期为... 目的星形胶质细胞过度增生是影响损伤脑组织修复的重要因素,抑制星形胶质细胞形成有助于损伤脑组织修复。本研究观察骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)移植对局灶性脑缺血大鼠星形胶质细胞的影响并探讨其机制,以期为BMSCs治疗局灶性脑缺血疾病提供科学的理论依据。方法 30只雄性Sprangue Dawley大鼠随机分为假手术组、大脑中脑动阻塞模型+磷酸盐缓冲液(middle cerebral artery occlusion,MCAO)组与骨髓间充质干细胞移植(BMSCs)组,每组10只。线栓法建立MCAO模型,BMSCs组于造模后24 h侧脑室移植BMSCs,MCAO组注入等量磷酸盐缓冲液(phosphate buffered saline,PBS)液。移植后14 d尼氏染色法观察损伤侧神经元数目的变化,采用胶质纤维酸性蛋白(glialfibrillary acidic protein,GFAP)/4'6-二脒基-2苯基吲哚(4'6-diamidino-2-phenylindole,DAPI)及骨形态发生蛋白4(bone morpho-genetic protein 4,BMP4)/DAPI免疫荧光双标法观察BMSCs对损伤脑星形胶质细胞的影响并进行机制探讨。结果尼氏染色示MCAO组神经元排列不规则,数量较少,显著少于假手术组,差异有统计学意义(P<0.01);BMSCs组神经元排列较规则,数量较多,显著高于MCAO组(P<0.01);BMSCs组GFAP+DAPI+细胞数较少,显著少于MCAO组(P<0.01);MCAO组大脑皮层可见大量BMP4+DAPI+细胞,显著高于假手术组(P<0.01);BMSCs组大脑皮层仅可见少量BMP4+DAPI+细胞,显著少于MCAO组(P<0.01)。结论 BMSCs侧脑室移植可减少局灶性脑缺血大鼠脑星形胶质细胞的形成,减轻脑损伤,具有神经保护作用,其机制可能与减低BMP4蛋白的表达有关。 展开更多
关键词 大鼠 脑缺血 骨髓间充质干细胞 胶质纤维酸性蛋白 骨形态发生蛋白4
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应用全骨髓贴壁法获取高纯度大鼠骨髓间充质干细胞的实验研究 被引量:6
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作者 卢宁 赵龙凤 +2 位作者 李红 郝彦琴 黄丽丽 《山西医科大学学报》 CAS 2010年第3期277-280,F0003,共5页
目的探讨体外获取高纯度大鼠骨髓间充质干细胞的方法。方法应用全骨髓贴壁法体外分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,进行传代培养,倒置显微镜下观察细胞形态并测定其生长曲线,流式细胞术检测细胞周期,免疫细胞化学法鉴定细胞表面标志CD34、C... 目的探讨体外获取高纯度大鼠骨髓间充质干细胞的方法。方法应用全骨髓贴壁法体外分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,进行传代培养,倒置显微镜下观察细胞形态并测定其生长曲线,流式细胞术检测细胞周期,免疫细胞化学法鉴定细胞表面标志CD34、CD44及CD45。结果获取的大鼠骨髓间充质干细胞形态呈均一成纤维细胞样,并呈集落样生长。细胞生长曲线示,在传代后的第4-5天细胞开始明显增殖,进入指数增生期。细胞周期显示81.49%P3代细胞为G0/G1期,经免疫细胞化学染色结果显示CD44阳性,CD34、CD45阴性。结论体外应用全骨髓贴壁法可以分离培养出高纯度的大鼠骨髓间充质干细胞,而且此法简单易行、经济。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 细胞培养 全骨髓贴壁法
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姜黄素对猪骨髓间充质干细胞增殖和成脂分化的影响 被引量:10
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作者 张庆美 李方正 +3 位作者 姜忠玲 孙东兴 李东建 宋学雄 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期793-799,共7页
目的探讨姜黄素(curcumin)对猪骨髓间充质干细胞(BMSCs)增殖和成脂分化的影响及机制。方法用含不同浓度姜黄素的细胞培养液和诱导分化液,培养和诱导分化猪BMSCs,用MTT比色法检测对BMSCs增殖的影响,用形态学和油红O染色提取法检测对成脂... 目的探讨姜黄素(curcumin)对猪骨髓间充质干细胞(BMSCs)增殖和成脂分化的影响及机制。方法用含不同浓度姜黄素的细胞培养液和诱导分化液,培养和诱导分化猪BMSCs,用MTT比色法检测对BMSCs增殖的影响,用形态学和油红O染色提取法检测对成脂分化的影响,用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测对成脂分化相关基因过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ2)和脂蛋白脂肪酶(LPL)mRNA表达的影响。结果当姜黄素用于猪BMSCs的培养,1μmol/L浓度在培养第3天、第5天和10μmol/L浓度在培养第5天开始能够显著促进细胞增殖(P<0.05),但高于15μmol/L则具有显著的抑制作用(P<0.05);当姜黄素用于猪BMSCs的成脂诱导分化,所用不同浓度的姜黄素都能显著抑制成脂分化(P<0.05),用0.5μmol/L获得28.3%的抑制率,而用20μmol/L获得71.24%的高抑制率;当用20μmol/L姜黄素处理和分别诱导分化5、10和15d,PPARγ2 mRNA表达的抑制率分别达到19.11%、49.52%和76.76%,LPL mRNA表达的抑制率分别达到37.58%、49.32%和74.70%。结论适当浓度姜黄素具有促进猪BMSCs增殖和抑制猪BMSCs向脂肪细胞分化的作用,对脂肪细胞的分化发挥了重要调控作用。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 姜黄素 增殖 成脂分化 实时定量聚合酶链反应
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骨髓间充质干细胞移植对嘌呤霉素氨基核苷肾病大鼠足细胞修复作用的研究 被引量:9
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作者 杨焕丹 董晨 +3 位作者 关凤军 高莉莉 赵彤 丰炳峰 《中国当代儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期483-487,共5页
目的探讨骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)移植对嘌呤霉素氨基核苷(puromycin aminonucleoside,PAN)肾病大鼠足细胞修复作用及其对裂孔隔膜分子Nephrin表达的影响,为BMSCs移植治疗肾病综合征提供实验依据。方法 45... 目的探讨骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)移植对嘌呤霉素氨基核苷(puromycin aminonucleoside,PAN)肾病大鼠足细胞修复作用及其对裂孔隔膜分子Nephrin表达的影响,为BMSCs移植治疗肾病综合征提供实验依据。方法 45只雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为3组,每组15只。模型组:一次性腹腔注射PAN(0.15mg/g)造模;BMSCs组:PAN造模+BMSCs移植(细胞移植前经Brdu标记示踪);对照组:不予以造模。实验第10天杀鼠,留取标本行血、尿、肾组织超微结构检测,免疫组化检测肾脏Brdu标记阳性细胞的表达,半定量RT-PCR及Western blot方法检测Nephrin表达变化。结果模型组大鼠出现大量蛋白尿、血白蛋白降低、胆固醇升高,伴有广泛足突的融合。与模型组比较,BMSCs组尿蛋白、血胆固醇降低,血白蛋白回升及足突融合现象改善,差异有统计学意义(P<0.05);免疫组化显示,BMSCs组肾组织中可见阳性细胞,模型组及对照组未见阳性细胞;半定量RT-PCR及Western blot显示,模型组Nephrin相对表达量较对照组明显下降,BMSCS组与模型组比较有所增加,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 BMSCs移植对PAN肾病大鼠足突融合有一定的改善,Nephrin表达的变化可能在其中发挥了作用。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 移植 嘌呤霉素氨基核苷 肾病综合征 NEPHRIN 大鼠
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骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化过程中miR130a的表达 被引量:9
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作者 苏金梅 金晔 +2 位作者 曲强 张奉春 唐福林 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2010年第5期520-523,共4页
目的诱导骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化,初步探索miR130a在骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化过程中的调控作用。方法体外TGF-β1诱导骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化,免疫荧光法和免疫组化染色鉴定Ⅱ型胶原,阿辛兰染色鉴定氨基葡聚糖。... 目的诱导骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化,初步探索miR130a在骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化过程中的调控作用。方法体外TGF-β1诱导骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化,免疫荧光法和免疫组化染色鉴定Ⅱ型胶原,阿辛兰染色鉴定氨基葡聚糖。用Real-time PCR法检测细胞miR130a的表达。结果骨髓间充质干细胞在TGF-β1诱导下可分化为软骨细胞。培养7 d后,诱导培养组细胞miR130a表达的水平显著低于培养前的水平(P<0.05)。结论骨髓间充质干细胞体外诱导可以分化为软骨细胞,在向软骨细胞分化的早期,miR130a表达降低伴随着软骨细胞的分化,提示与软骨形成的过程有关。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 软骨细胞 分化 MICRORNA
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MicroRNA-195-5p调节Bmpr1α表达对骨髓间充质干细胞成脂分化的影响 被引量:9
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作者 潘欣 曾思良 +3 位作者 梁兴伦 嵇承栋 刘晓东 廖万清 《同济大学学报(医学版)》 CAS 2017年第3期1-7,13,共8页
目的探讨miR-195-5p在补肾方含药血清干预大鼠原代骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cell,BM SC)中的表达及其对成脂分化的影响。方法体外贴壁法原代培养的大鼠BM SC细胞经流式细胞术、CD44和CD34免疫荧光染色鉴定后,与椎间盘软... 目的探讨miR-195-5p在补肾方含药血清干预大鼠原代骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cell,BM SC)中的表达及其对成脂分化的影响。方法体外贴壁法原代培养的大鼠BM SC细胞经流式细胞术、CD44和CD34免疫荧光染色鉴定后,与椎间盘软骨细胞和成骨细胞一起采用荧光定量RT-PCR方法检测细胞中rno-miR-195-5p的表达情况;采用荧光素酶报告基因实验验证骨形态发生蛋白受体-1α(Bmpr1α)是否为rno-miR-195-5p的靶基因,采用Western印迹法和油红O染色检测rno-miR-195-5p对Bmpr1α表达和BMSC成脂分化的影响。结果流式细胞术与免疫荧光分析显示所培养细胞具备BMSC特征。rno-miR-195-5p在补肾方含药血清干预的原代BM SC中表达明显升高(P<0.01),且在分化完成的软骨细胞和成骨细胞中高表达。双荧光素酶报告实验与Western印迹法证实Bmpr1α是rno-miR-195-5p的靶基因。转染rno-miR-195-5p mimics上调BM SC中rno-miR-195-5p可抑制Bmpr1α的表达(P<0.05),降低成脂分化能力;而转染rno-miR-195-5p inhibitor可显著增加BM SC中Bmpr1α的表达(P<0.01),增强成脂分化能力。结论补肾方含药血清干预BMSC上调rno-miR-195-5p,通过降低其靶基因Bmpr1α的表达而降低BMSC的成脂分化,改善骨质疏松症状。 展开更多
关键词 骨形态发生蛋白受体-1α rno-miR-195-5p 骨髓间充质干细胞 骨质疏松
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