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全人源抗前列腺癌ScFv抗体的筛选及生物学特性研究 被引量：1
1
作者 郑桂喜 王传新 +4 位作者 张欣 李伟 杜鲁涛 李娟 刘慧 《山东大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2012年第11期34-38,共5页
目的从已成功建立的前列腺癌噬菌体抗体库中筛选抗人前列腺癌单链抗体(ScFv),并分析其生物学特性。方法以良性前列腺增生(BPH)细胞与噬菌体抗体库共孵育,去除抗体库中能够与BPH细胞结合的噬菌体抗体,再以前列腺癌细胞系DU145与去除非特... 目的从已成功建立的前列腺癌噬菌体抗体库中筛选抗人前列腺癌单链抗体(ScFv),并分析其生物学特性。方法以良性前列腺增生(BPH)细胞与噬菌体抗体库共孵育,去除抗体库中能够与BPH细胞结合的噬菌体抗体,再以前列腺癌细胞系DU145与去除非特异性结合后的噬菌体抗体库共孵育,通过"吸附-洗脱-扩增"对前列腺癌的噬菌体抗体库进行3轮的富集。采用流式细胞术筛选出对人前列腺癌细胞系DU145高亲合力的阳性克隆。阳性噬菌体克隆经亚克隆并转染大肠杆菌TG1,表达出可溶性ScFv抗体。采用流式细胞术、免疫荧光法分析其生物学特性。结果以前列腺癌细胞系DU145为抗原,筛选出19个噬菌体抗体,经测定C11与DU145细胞亲合力最高,亚克隆至原核表达载体表达纯化为C11 ScFv抗体。流式细胞术和免疫荧光法检测结果均显示,C11ScFv抗体与前列腺癌细胞DU145和PC3结合,与BPH细胞不结合。结论通过噬菌体展示技术筛选到前列腺癌细胞系高亲合力的可溶性ScFv抗体,为进一步研究抗体的靶向性治疗奠定了基础。 展开更多
关键词 噬菌体展示技术 前列腺肿瘤 ScFv抗体 bph细胞 DU145细胞 PC3细胞
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油茶蒲提取物对人前列腺增生BPH-1细胞的抑制作用研究 被引量：8
2
作者 沈骏 郑茜茜 +1 位作者 吴晓琴 沈建福 《现代食品科技》 EI CAS 北大核心 2015年第7期6-11,共6页
良性前列腺增生(benign prostatic hyperplasia,BPH)在中老年男性中高发,5α-还原酶对其形成起重要作用。为考察油茶蒲提取物中5α-还原酶抑制活性组分对BPH的作用,本研究采用MTT法测定细胞增殖、Annexin V/PI双染色法检测细胞凋亡,通... 良性前列腺增生(benign prostatic hyperplasia,BPH)在中老年男性中高发,5α-还原酶对其形成起重要作用。为考察油茶蒲提取物中5α-还原酶抑制活性组分对BPH的作用,本研究采用MTT法测定细胞增殖、Annexin V/PI双染色法检测细胞凋亡,通过给予不同的给药浓度和作用时间,比较各活性组分对人前列腺增生BPH-1细胞的作用。试验结果表明,100μg/m L浓度下阳性对照非那雄胺、组分Fr5及Fr6的细胞增殖抑制率分别为47.20%±1.02%、48.60%±1.56%、55.23%±0.58%;组分Fr6在各作用浓度下抑制率均显著高于非那雄胺,Fr5与非那雄胺活性相当。活性组分对BPH-1细胞增殖的抑制率与对5α-还原酶的抑制率测定结果趋势相近,两种方法相互印证。时效性试验表明活性组分Fr6药效较非那雄胺持久,细胞凋亡试验表明Fr6在低剂量(25μg/m L)时诱导细胞凋亡率即可达12.40%±3.78%,与非那雄胺相近(13.68%±1.02%),极具开发潜力。 展开更多
关键词 油茶蒲提取物 良性前列腺增生 5α-还原酶 bph-1细胞
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前列腺癌与良性前列腺增生细胞株差异核基质蛋白的鉴定 被引量：3
3
作者 孙铁成 辛玲 +6 位作者 宋黎明 周越 宁丽峰 韩丽媛 郭颖 于和鸣 王慧萍 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 2012年第7期583-589,共7页
目的:鉴定人前列腺癌雄激素依赖性细胞株LNCaP、前列腺癌雄激素非依赖性细胞株PC-3与良性前列腺增生细胞株BPH-1之间差异表达的核基质蛋白(nuclear matrix proteins,NMPs)。方法:常规制备各细胞株NMPs,应用双向凝胶电泳对其进行分离;对... 目的:鉴定人前列腺癌雄激素依赖性细胞株LNCaP、前列腺癌雄激素非依赖性细胞株PC-3与良性前列腺增生细胞株BPH-1之间差异表达的核基质蛋白(nuclear matrix proteins,NMPs)。方法:常规制备各细胞株NMPs,应用双向凝胶电泳对其进行分离;对差异表达的蛋白质点行MALDI-TOF-MS/MS质谱分析,数据库搜索并鉴定。结果:成功获得了分辨率高、重复性好的不同细胞株NMPs双向凝胶电泳图谱;初步鉴定出包含酶、调节蛋白、RNA结合蛋白及各种因子在内的12个差异表达的蛋白质,在癌细胞株中3个NMPs表达上调,9个下调。结论:人前列腺癌细胞与良性前列腺增生细胞之间NMPs表达存在明显差异;初步筛选出12个差异NMPs,其表达水平及功能与疾病的联系需进一步研究。 展开更多
关键词 前列腺癌雄激素依赖性LNCaP细胞株 前列腺癌雄激素非依赖性PC-3细胞株 良性前列腺增生 bph-1细胞株 核基质蛋白
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