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下调miR-372靶向调控BTG1表达对胶质瘤细胞分泌免疫抑制因子的影响
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作者 苏保寿 薛治乾 +2 位作者 余鹏飞 吴益敏 喻闻庆 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2021年第12期2591-2595,共5页
目的研究miR-372靶向调控B细胞易位基因(BTG)1的表达对胶质瘤细胞分泌免疫抑制因子的影响。方法Realtime PCR方法测定胶质瘤细胞和正常星形胶质细胞中miR-372表达变化。在胶质瘤细胞中转染miR-372抑制剂(inhibitor),Realtime PCR方法检... 目的研究miR-372靶向调控B细胞易位基因(BTG)1的表达对胶质瘤细胞分泌免疫抑制因子的影响。方法Realtime PCR方法测定胶质瘤细胞和正常星形胶质细胞中miR-372表达变化。在胶质瘤细胞中转染miR-372抑制剂(inhibitor),Realtime PCR方法检测下调效果,酶联免疫吸附试验(ELISA)测定细胞培养液上清中转化生长因子(TGF)-β1、血管内皮生长因子(VEGF)、白细胞介素(IL)-8含量。利用生物信息学软件预测miR-372的靶基因可能为BTG1,荧光素酶报告系统鉴定靶向关系。Western印迹检测miR-372 inhibitor对胶质瘤细胞中BTG1蛋白表达影响。在胶质瘤细胞中共转染BTG1 siRNA和miR-372 inhibitor,检测细胞培养液上清中TGF-β1、VEGF、IL-8含量和细胞中BTG1蛋白水平。结果胶质瘤细胞中miR-372表达水平高于正常星形胶质细胞。转染miR-372 inhibitor后的胶质瘤细胞分泌的TGF-β1、VEGF、IL-8含量显著减少。miR-372靶向调控BTG1。转染miR-372 inhibitor后的胶质瘤细胞中BTG1蛋白水平显著升高。BTG1 siRNA可以逆转miR-372 inhibitor对胶质瘤细胞分泌TGF-β1、VEGF、IL-8的抑制作用和BTG1蛋白表达的促进作用。结论下调miR-372靶向调控BTG1的表达抑制胶质瘤细胞分泌免疫抑制因子TGF-β1、VEGF、IL-8。 展开更多
关键词 胶质瘤 miR-372 b细胞易位基因(btg)1 免疫抑制因子
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BTG1在非小细胞肺癌中的表达及其对肺癌细胞增殖、凋亡和侵袭转移的作用 被引量:4
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作者 孙国贵 张洁 +4 位作者 崔大为 李成林 杨从容 张钧 程云杰 《临床肿瘤学杂志》 CAS 2014年第11期972-976,共5页
目的探讨B细胞易位基因1(BTG1)在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及其对NSCLC细胞生物学行为的影响。方法采用免疫组织化学染色和Western blotting分别检测82例NSCLC及38例癌旁正常组织中BTG1蛋白的表达。采用慢病毒转染建立BTG1过表达... 目的探讨B细胞易位基因1(BTG1)在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及其对NSCLC细胞生物学行为的影响。方法采用免疫组织化学染色和Western blotting分别检测82例NSCLC及38例癌旁正常组织中BTG1蛋白的表达。采用慢病毒转染建立BTG1过表达的NSCLC H1299细胞株。采用实时荧光定量PCR和Western blotting检测BTG1转染后H1299细胞株中BTG1表达含量的变化。采用MTT法、流式细胞术及Transwell法检测BTG1过表达对NSCLC细胞增殖、凋亡及侵袭转移的影响。结果 BTG1蛋白在NSCLC及癌旁正常组织中的阳性表达率分别为37.8%(31/82)、84.2%(32/38),差异有统计学意义(P<0.05)。NSCLC组织中BTG1蛋白的相对表达量为0.331±0.035,明显低于癌旁正常组织的0.673±0.072,差异有统计学意义(P<0.05)。NSCLC组织中BTG1的表达与淋巴结转移、临床分期和组织学分级有关(P<0.05)。BTG1过表达的NSCLC细胞增殖能力明显减弱、细胞凋亡增加及侵袭转移能力降低,且Bcl-2、MMP-9表达量明显下调。结论 NSCLC组织中BTG1蛋白的表达明显降低;BTG1可能通过调控Bcl-2及MMP-9蛋白的表达影响NSCLC细胞的增殖、凋亡与转移。 展开更多
关键词 b细胞易位基因1(btg1) 非小细胞肺癌 基因转染 肿瘤转移
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绵羊BTG1基因的半定量RT-PCR及生物信息学分析 被引量:2
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作者 张菊 杜立新 +1 位作者 李宏滨 魏彩虹 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期911-917,共7页
B细胞易位基因1(BTG1基因)是BTG/TOB基因家族的成员之一,在动物细胞的增殖和分化中起重要的作用.利用牛BTG1基因的mRNA序列与绵羊的EST数据库进行Blast检索,并通过序列拼接和逆转录RT-PCR方法首次获得绵羊BTG1基因的部分cDNA序列(GenBan... B细胞易位基因1(BTG1基因)是BTG/TOB基因家族的成员之一,在动物细胞的增殖和分化中起重要的作用.利用牛BTG1基因的mRNA序列与绵羊的EST数据库进行Blast检索,并通过序列拼接和逆转录RT-PCR方法首次获得绵羊BTG1基因的部分cDNA序列(GenBank登录号FJ444829),其片段长度为1 358 bp,包括完整的开放阅读框516 bp,编码171个氨基酸.半定量PCR研究结果表明:BTG1基因在小尾寒羊和陶赛特羊的10种组织中均表达,并具有一致的表达趋势.同源分析结果表明,绵羊BTG1蛋白的氨基酸序列中存在BTG/TOB的保守结构域,并且该蛋白在不同物种间具有很高的保守性.通过生物信息学预测BTG1蛋白功能,发现绵羊BTG1蛋白存在1个跨膜结构域、8个磷酸化位点和1个特异性蛋白激酶磷酸化位点.蛋白质结构同源建模分析表明,绵羊BTG1蛋白具有BTG/TOB蛋白家族的典型空间结构. 展开更多
关键词 b细胞易位基因1(btg1基因) CDNA克隆 半定量RT-PCR 生物信息学预测
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