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中国流感监测网络的发展与展望 被引量：76
1
作者 王大燕 《中华流行病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第8期1036-1040,共5页
流感引起的每年季节性流行在全球造成严重的疾病负担，而且流感还会不定期引起世界性流感大流行，造成严重社会恐慌、经济损失。由于流感病毒的高度可变性和不可确定性，流感防控面临诸多挑战。监测是预防和控制流感的关键策略，流感也... 流感引起的每年季节性流行在全球造成严重的疾病负担，而且流感还会不定期引起世界性流感大流行，造成严重社会恐慌、经济损失。由于流感病毒的高度可变性和不可确定性，流感防控面临诸多挑战。监测是预防和控制流感的关键策略，流感也是第一个实行全球监测的传染病。中国流感监测60余年，为我国和全球流感防控做出了巨大贡献。特别是近10余年来，流感监测网络得以飞跃发展，规模显著扩大，监测内容和范围不断完善，监测质量迅速提升。中国流感监测网络是我国和全球新发传染病病原的早期发现体系之一，为新发突发传染病应对准备了技术和人才队伍，有助于全面提升公共卫生系统对新发传染病的防控和预测预警能力。 展开更多
关键词 流感病毒 监测 禽流感病毒 大流行 监测网络
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PCR制备地高辛标记的探针检测禽流感病毒核酸 被引量：37
2
作者 黄庚明 辛朝安 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2001年第12期3-7,共5页
用聚合酶链反应 (PCR)技术 ,制备了广东禽流感无致病力分离株 A/goose/China/2 4/96 (H7N3 )核蛋白基因片段(NPc)的地高辛标记的 c DNA探针。建立并优化了检测禽流感病毒核酸的探针杂交法 ,探针杂交法能鉴别出非免疫鸡胚和SPF鸡胚尿囊... 用聚合酶链反应 (PCR)技术 ,制备了广东禽流感无致病力分离株 A/goose/China/2 4/96 (H7N3 )核蛋白基因片段(NPc)的地高辛标记的 c DNA探针。建立并优化了检测禽流感病毒核酸的探针杂交法 ,探针杂交法能鉴别出非免疫鸡胚和SPF鸡胚尿囊液中的病毒 ,攻毒后第 3天的 SPF和非免疫鸡泄殖腔拭子中 AIV的最大检出率为 1/10 ,对临床样品中的 AIV的最大检出率为 1/7,而直接 HA和 HI法及 AGP试验检不出临床样品的 AIV。该探针具有较好的特异性和敏感性 ,为从分子水平探讨 AIV的发病机理、临床早期快速诊断提供了新的研究手段。 展开更多
关键词 地高辛标记 PCR探针 禽流感病毒 核酸检测 禽流感
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禽流感病毒分子生物学研究进展 被引量：39
3
作者 金元昌 李景鹏 +3 位作者 张龙 孙岳 于敏 杨甲芳 《动物医学进展》 CSCD 2003年第1期12-15,共4页
禽流感 ( Avian Influenza,AI)是严重危害畜牧业和人类健康的一种传染性疾病 ,该病以引起禽类的呼吸系统以及全身性败血症为特征。多年来在世界上许多国家和地区都发生过此病 ,危害严重 ,经济损失巨大。世界各国都非常重视 ,对其进行了... 禽流感 ( Avian Influenza,AI)是严重危害畜牧业和人类健康的一种传染性疾病 ,该病以引起禽类的呼吸系统以及全身性败血症为特征。多年来在世界上许多国家和地区都发生过此病 ,危害严重 ,经济损失巨大。世界各国都非常重视 ,对其进行了大量研究工作。现在从基因组、毒力及其变异、病毒蛋白、基因疫苗等角度对禽流感病毒的分子生物学研究进行综述。 展开更多
关键词 禽流感 禽流感病毒 分子生物学 基因组 毒力 病毒蛋白 基因疫苗
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2009～2013年我国活禽市场环境样本中禽流感病毒的检测 被引量：60
4
作者 张烨 李晓丹 +5 位作者 邹淑梅 薄洪 董丽波 高荣保 王大燕 舒跃龙 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期615-619,共5页
为了解中国活禽市场环境样本中禽流感病毒分布情况,对全国2009~2013年采自活禽市场的环境样本进行流感病毒核酸检测,并利用无特殊致病原鸡胚（SPF鸡胚）对A型流感病毒核酸阳性标本进行病毒分离。结果显示,环境标本中禽流感病毒核酸阳性... 为了解中国活禽市场环境样本中禽流感病毒分布情况,对全国2009~2013年采自活禽市场的环境样本进行流感病毒核酸检测,并利用无特殊致病原鸡胚（SPF鸡胚）对A型流感病毒核酸阳性标本进行病毒分离。结果显示,环境标本中禽流感病毒核酸阳性率的波动呈明显的季节性趋势,冬春季节核酸检测阳性率较高;我国南方地区活禽市场环境样本的禽流感病毒核酸阳性率高于北方。市场中清洗禽类的污水和宰杀或摆放禽肉案板表面的擦拭样本核酸阳性率高于其它类型的样本。2009~2013年环境样本中分离到的禽流感病毒以H5和H9亚型为主,2013年之前H5亚型多于H9亚型,而2013年H9亚型超过了H5亚型。本研究表明,对城乡活禽市场中禽流感病毒的实时监测具有重要的公共卫生意义,可为我国人感染禽流感病毒的防控和预测预警提供依据。 展开更多
关键词 禽流感病毒 流行 活禽市场
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禽流感病毒研究概述 被引量：57
5
作者 谭伟 徐倩 谢芝勋 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期194-199,共6页
禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)可引起禽类的呼吸器官或全身性感染。高致病性禽流感病毒可以直接感染禽类,偶尔也能直接或间接感染人类。禽流感的流行会严重影响畜牧业发展和国际进出口贸易。低致病性禽流感病毒可以经基因突变... 禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)可引起禽类的呼吸器官或全身性感染。高致病性禽流感病毒可以直接感染禽类,偶尔也能直接或间接感染人类。禽流感的流行会严重影响畜牧业发展和国际进出口贸易。低致病性禽流感病毒可以经基因突变或基因重配转变成高致病性禽流感病毒。高致病性禽流感病毒是在人群中引发流感的一个潜在危险因素,并会严重地威胁人类健康。因此对禽流感病毒的检测和监测以及对其药物的研发和疫苗的研制,已成为世界各国政府及卫生防疫部门日益关注和积极着手解决的重大问题之一。本文将扼要介绍禽流感病毒的研究现状。 展开更多
关键词 禽流感病毒 抗原变异 病毒检测 疫苗
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细胞因子风暴:急性呼吸窘迫综合征中的主宰生命之手 被引量：57
6
作者 张艳丽 蒋澄宇 《生命科学》 CSCD 2015年第5期554-557,共4页
细胞因子风暴是机体对于病毒、细菌、纳米材料等外界刺激所产生的一种过度免疫。急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome,ARDS)的发病原因是由于细胞因子风暴造成的肺毛细血管内皮细胞以及肺泡上皮细胞的弥漫性损伤。... 细胞因子风暴是机体对于病毒、细菌、纳米材料等外界刺激所产生的一种过度免疫。急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome,ARDS)的发病原因是由于细胞因子风暴造成的肺毛细血管内皮细胞以及肺泡上皮细胞的弥漫性损伤。多种病毒感染,如SARS冠状病毒、2009甲型H1N1流感病毒、禽流感病毒,以及某些纳米材料,均可导致细胞因子风暴,进而引起ARDS。目前临床上对于细胞因子风暴与ARDS尚无特异性治疗手段,多采用给予抗感染药物、糖皮质激素等非特异性联合治疗措施。靶向治疗,如应用单克隆抗体、核酸适配体或特异的重组蛋白等措施,是未来的治疗方向。 展开更多
关键词 细胞因子风暴 急性呼吸窘迫综合征 禽流感病毒
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科学认识H7N9,有效防控人感染禽流感病毒 被引量：50
7
作者 毛青 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期693-695,共3页
自2013年2月以来,华东地区上海市、安徽省、江苏省、浙江省先后发生不明原因重症肺炎病例,大多数患者病前曾有活禽鸟接触史,经病原体分离鉴定后,于3月31日将其确诊为人感染H7N9禽流感病毒（avian influenza virus,AIV）。截止到2013年4... 自2013年2月以来,华东地区上海市、安徽省、江苏省、浙江省先后发生不明原因重症肺炎病例,大多数患者病前曾有活禽鸟接触史,经病原体分离鉴定后,于3月31日将其确诊为人感染H7N9禽流感病毒（avian influenza virus,AIV）。截止到2013年4月15日共确诊病例63例,死亡14例。目前病例均为散发,并未见人际间传播。疫情出现后,国家卫生与计划生育委员会、疾病防治控制中心立刻启动应急预案, 展开更多
关键词 H7N9 人 感染 禽流感 病毒
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禽流感病毒分离株A/Goose/Guangdong/1/96(H5N1)全基因克隆及序列分析 被引量：32
8
作者 张建林 于康震 +2 位作者 陈化兰 唐秀英 田国斌 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 2000年第3期232-235,共4页
本研究用无特定病原体 (SPF)鸡胚增殖禽流感病毒鹅体分离株A/Goose/Guangdong/1/96 (H5N1) (GD1/96 ) ,提取病毒基因组总RNA ,运用反转录_聚合酶链反应 (RT_PCR)技术分别扩增该病毒分离株的 8个基因片段的cDNA ,分别克隆后进行序列测定... 本研究用无特定病原体 (SPF)鸡胚增殖禽流感病毒鹅体分离株A/Goose/Guangdong/1/96 (H5N1) (GD1/96 ) ,提取病毒基因组总RNA ,运用反转录_聚合酶链反应 (RT_PCR)技术分别扩增该病毒分离株的 8个基因片段的cDNA ,分别克隆后进行序列测定。序列分析结果表明 ,所扩增到的 8个片段均包含相应的病毒基因的完整开放阅读框架。GD1/96株与 1997年香港禽流感事件中的 4株香港流感病毒分离株 (分别来自人、鸡、鸭和鹅 )的HA基因的高度同源性说明它们可能起源于同一种系 ,但NS基因的差异说明它们分属于不同的基因群系。GD1/96株与香港流感病毒分离株的核苷酸和推导的氨基酸序列的同源性较低 ( 6 3.9%～ 98.1%) ,而香港流感病毒分离株之间的核苷酸和氨基酸序列的同源性很高 ( 96 .5 %～ 10 0 %) ,且香港各流感病毒分离株的NA均缺失 5 7个核苷酸 ( 19个氨基酸 )残基。因此 ,内地H5N1分离株GD1/96与 展开更多
关键词 禽流感病毒 分离株 全基因克隆 序列分析
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抗禽流感病毒H5和H9亚型血凝素特异性单克隆抗体的研制及应用 被引量：31
9
作者 秦爱建 邵红霞 +2 位作者 钱琨 刘岳龙 金文杰 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期161-163,共3页
以禽流感H5和H9亚型病毒分别免疫Balb/c小鼠 ,取其脾细胞与SP2 / 0的骨髓瘤细胞融合 ,用血凝抑制试验(HI)检测细胞培养上清 ,结果获得了 6株特异性单克隆抗体 ,其中抗禽流感H5亚型病毒血凝素特异性单克隆抗体细胞株 3株 ,分别命名为 4B6... 以禽流感H5和H9亚型病毒分别免疫Balb/c小鼠 ,取其脾细胞与SP2 / 0的骨髓瘤细胞融合 ,用血凝抑制试验(HI)检测细胞培养上清 ,结果获得了 6株特异性单克隆抗体 ,其中抗禽流感H5亚型病毒血凝素特异性单克隆抗体细胞株 3株 ,分别命名为 4B6、4A3、3H1;抗H9亚型病毒血凝素单克隆抗体细胞株 3株 ,命名为 6E6、6B6和 5B4。这些单克隆抗体小鼠腹水HI效价为 2 13～ 15,细胞培养上清抗体HI效价为 2 7～ 8。研究结果表明 ,所有这些单克隆抗体仅与试验的相应H5或H9亚型病毒株发生特异性反应 ,而不能与鸡新城疫病毒、鹅新城疫病毒、鹅腺病毒和鸡产蛋下降综合征病毒(EDS76 )等反应。实验室检测结果证明 ,应用这些单克隆抗体能在 2 4h内迅速检测出相应的禽流感病毒。 展开更多
关键词 禽流感病毒 单克隆抗体 血凝抑制试验 间接免疫荧光
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广西健康青年H9、H6亚型禽流感病毒血清抗体调查 被引量：46
10
作者 陈妍梅 葛万运 +2 位作者 黄川 赖振屏 樊晓晖 《中国热带医学》 CAS 2008年第6期985-986,共2页
目的调查广西医科大学2007年新生中H9、H6亚型流感病毒的抗体水平,以了解广西健康青年是否已受到H9、H6亚型禽流感病毒感染。方法广西医科大学2007级新生血清168份,通过HI实验进行抗体检测。结果以HI抗体滴度≥1∶10为流感病毒抗体阳性... 目的调查广西医科大学2007年新生中H9、H6亚型流感病毒的抗体水平,以了解广西健康青年是否已受到H9、H6亚型禽流感病毒感染。方法广西医科大学2007级新生血清168份,通过HI实验进行抗体检测。结果以HI抗体滴度≥1∶10为流感病毒抗体阳性,H9亚型抗体阳性率13.69%;有两份H6亚型抗体阳性。结论广西健康青年人群已受到禽流感H9亚型病毒株的感染,H6亚型也可能感染了人群。 展开更多
关键词 禽流感病毒 H9 H6 抗体 血凝抑制试验
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在DNA芯片平台上探测AIV不同亚型cDNA 被引量：33
11
作者 王秀荣 邓国华 +5 位作者 于康震 石锐 刘丽玲 乔传玲 陈化兰 孔宪刚 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期394-398,共5页
对以基因芯片技术为基础的检测H5、H7、H9亚型禽流感病毒的快速诊断技术进行了研究。试验中所使用的病毒为A/Goose/Guangdong/1/96(H5N1)、A/African　starling/983/79(H7N1)和　A/Turkey/Wisconsin/1/66(H9N2)。通过RT-PCR获得大约500... 对以基因芯片技术为基础的检测H5、H7、H9亚型禽流感病毒的快速诊断技术进行了研究。试验中所使用的病毒为A/Goose/Guangdong/1/96(H5N1)、A/African　starling/983/79(H7N1)和　A/Turkey/Wisconsin/1/66(H9N2)。通过RT-PCR获得大约500　bp的禽流感病毒基因cDNAs片段,克隆,从重组质粒扩增DNA片段,并点到玻璃载体上,制成芯片。在病毒RNA反转录过程中,用Cy5标记样品　cDNAs。样品　cDNAs是一个包括禽流感病毒HA和M基因的混合物。依据M基因鉴别型,依据HA基因鉴别亚型。扫描芯片上探针结合位点,杂交信号与预期设想基本一致。结果显示,DNA芯片技术可以提供一种有效的AIV诊断方法。 展开更多
关键词 H9亚型禽流感病毒 鉴别 M基因 DNA芯片 快速诊断技术 基因芯片技术 HA基因 AIV 禽流感病毒 H5N1
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禽流感重组禽痘病毒rFPV-HA-NA活载体疫苗的研究 被引量：25
12
作者 乔传玲 姜永萍 +6 位作者 李呈军 田国斌 孟庆文 邓国华 王秀荣 于康震 唐秀英 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期46-49,共4页
目的　确定重组禽痘病毒rFPV HA NA疫苗株的最佳免疫剂量、免疫日龄、免疫产生时间及免疫持续期。方法　用重组禽痘病毒rFPV HA NA疫苗免疫SPF鸡 ,免疫后用HPAIVH5N1和H7N1AIV进行致死性攻击 ,观察疫苗免疫后的保护效果。结果　大约含 1... 目的　确定重组禽痘病毒rFPV HA NA疫苗株的最佳免疫剂量、免疫日龄、免疫产生时间及免疫持续期。方法　用重组禽痘病毒rFPV HA NA疫苗免疫SPF鸡 ,免疫后用HPAIVH5N1和H7N1AIV进行致死性攻击 ,观察疫苗免疫后的保护效果。结果　大约含 10 0个PFU的重组病毒即能使机体获得对强毒攻击的 10 0 %保护 ;对 1日龄SPF鸡进行免疫接种 ,4周后能 10 0 %抵抗HPAIV的致死性攻击 ;2周和 3周龄的免疫鸡对免疫周 1后的强毒攻击具有 10 0 %的保护力 ;重组病毒在免疫后10个月时 ,其诱导产生的血凝抑制 (Haemagglutinininhibition ,HI)抗体仍保持在 2～ 3log2水平 ,并可以提供 10 0 %抵抗病毒的致死性感染。结论　重组禽痘病毒rFPV HA NA疫苗是一种安全、高效的基因工程疫苗 。 展开更多
关键词 禽流感 重组禽痘病毒 疫苗 免疫学
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H9N2亚型禽流感病毒流行病学及其疫苗的研究进展 被引量：39
13
作者 丛彦龙 钟颖 +1 位作者 孙艺学 丁壮 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期386-392,共7页
禽流感(avian influenza AI)是由A型流感病毒引起的一种高度接触性传染病。H9N2是A型流感病毒的1个亚型,其谱系复杂,流行范围广,已经成为我国AI的主要亚型。尽管我国自1998年就开始进行H9N2亚型禽流感病毒(AIV)的防疫,但目前其疫苗株与... 禽流感(avian influenza AI)是由A型流感病毒引起的一种高度接触性传染病。H9N2是A型流感病毒的1个亚型,其谱系复杂,流行范围广,已经成为我国AI的主要亚型。尽管我国自1998年就开始进行H9N2亚型禽流感病毒(AIV)的防疫,但目前其疫苗株与流行株的抗原性已经出现了较大的差异。带毒野禽的迁徙不仅使H9N2AIV防控难度加大,而且使AI的流行不断复杂化;活禽交易市场为AIV重排以及跨种传播提供了有利的条件。此外,H9N2AIV感染谱在不断扩大,不仅感染哺乳动物,甚至已经感染了人群;因此,有必要重新认识H9N2AIV的兽医学和公共卫生学意义。现就H9N2AIV近年在我国的流行情况及其疫苗的研究进展作一综述。 展开更多
关键词 禽流感病毒 H9N2亚型 流行病学 疫苗
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禽流感和新城疫病毒二重荧光定量RT-PCR检测方法的建立 被引量：38
14
作者 谢芝勋 谢丽基 +2 位作者 刘加波 庞耀珊 邓显文 《生物技术通讯》 CAS 2008年第3期410-413,共4页
目的:建立二重荧光定量RT-PCR方法,用于禽流感病毒(AIV)和新城疫病毒(NDV)的检测。方法:根据AIV和NDV的基因保守序列,设计了AIV和NDV的2对特异性引物和2条用不同荧光基团标记的TaqMan探针;对反应条件和试剂浓度进行优化,建立了能够同时... 目的:建立二重荧光定量RT-PCR方法,用于禽流感病毒(AIV)和新城疫病毒(NDV)的检测。方法:根据AIV和NDV的基因保守序列,设计了AIV和NDV的2对特异性引物和2条用不同荧光基团标记的TaqMan探针;对反应条件和试剂浓度进行优化,建立了能够同时检测AIV和NDV的二重荧光定量RT-PCR方法。结果:所建方法特异性好,对AIV和NDV的检测敏感性均达到2000个模板拷贝数,比常规RT-PCR敏感性高100倍;抗干扰能力强,对AIV和NDV不同模板浓度进行组合,仍可有效地同时检测2种病毒。对保存的AIV或NDV鸡胚尿囊液及临床病料进行二重荧光定量RT-PCR检测,结果尿囊液检测的拷贝数均达到1010/μL以上,临床病料的拷贝数为2.13×108～6.52×104/μL。结论:建立了用于检测AIV和NDV的二重荧光定量RT-PCR法,该方法特异、敏感、快速、可定量,对AIV和NDV的防制有重要意义。 展开更多
关键词 禽流感病毒 新城疫病毒 二重荧光定量RT-PCR
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禽流感病毒血凝素分子生物学研究进展 被引量：24
15
作者 曹梅 田夫林 庄文忠 《动物医学进展》 CSCD 2004年第2期35-37,61,共4页
禽流感病毒基因组由 8条单性负链RNA组成 ,血凝素基因是禽流感病毒基因组中变异最大的基因 ,禽流感病毒的抗原性和致病性很大程度上取决于该基因的变异情况。血凝素在病毒吸附及穿膜过程中起关键作用 ,但可刺激机体产生中和抗体来中和... 禽流感病毒基因组由 8条单性负链RNA组成 ,血凝素基因是禽流感病毒基因组中变异最大的基因 ,禽流感病毒的抗原性和致病性很大程度上取决于该基因的变异情况。血凝素在病毒吸附及穿膜过程中起关键作用 ,但可刺激机体产生中和抗体来中和病毒的感染力 ,而且血凝素诱导机体产生的体液免疫反应 ,对宿主抵抗禽流感起到了决定性保护作用 ,使目前研制血凝素基因工程疫苗成为禽流感病毒疫苗的研究热点。血凝素发挥功能之前必须裂解为两条肽链 HA1和 HA2 ,其裂解位点的氨基酸残基的组成是决定禽流感病毒致病力高低的主要因素。文章主要从血凝素的基因及其编码的蛋白、裂解位点序列和基因疫苗等角度对禽流感病毒血凝素分子生物学的研究状况进行了综述 。 展开更多
关键词 禽流感病毒 血凝素 分子生物学 基因组 基因工程疫苗 编码蛋白 序列分析
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RT-PCR快速诊断禽流感 被引量：21
16
作者 刘明 于康震 +3 位作者 崔尚金 孔宪刚 唐秀英 徐宜为 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 2000年第S1期176-177,共2页
根据禽流感病毒ＮＰ基因的序列分析结果，设计了一对ＮＰ基因特异的引物。采用该对引物，不经病毒分离，直接从禽流感病毒感染鸡的气管、泄殖腔棉拭子和组织样品中提取核酸， ＲＴ～ＰＣＲ可以扩增出 ３２６ｂｐ的 ＮＰ基因片段。采用... 根据禽流感病毒ＮＰ基因的序列分析结果，设计了一对ＮＰ基因特异的引物。采用该对引物，不经病毒分离，直接从禽流感病毒感染鸡的气管、泄殖腔棉拭子和组织样品中提取核酸， ＲＴ～ＰＣＲ可以扩增出 ３２６ｂｐ的 ＮＰ基因片段。采用该技术对１４个亚型禽流感病毒标准参考株，４个亚型１２株国内分离野毒株，ＲＴ－ＰＣＲ检测的结果都呈阳性；对新城疫病毒、传染性法氏囊病毒、传染性支气管炎病毒、传染性喉气管炎病毒以及减蛋综合症病毒，ＲＴ－ＰＣＲ扩增结果都呈阴性。禽流感病毒 Ａ／Ｇｏｏｓｅ／Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ（Ｈ５Ｎ１）和 Ａ／Ａｆｒｉｃａｎ　Ｓｔａｒｌｉｎｇ／Ｅｎｇｌａｎｄ（Ｈ７Ｎ１）实验感染鸡样品 ＲＴ－ＰＣＲ检测与鸡胚病毒分离阳性率分别为３４／４２、３２／４２； ２４／５５、２４／５５， 二者符合率大于９５％。 ＲＴ－ＰＣＲ最少可检测到１０ｐｇ的病毒核酸。对山东某地发病鸡场样品进行ＲＴ－ＰＣＲ检测，只用６个小时就可得出准确的诊断结果，证明ＲＴ－ＰＣＲ检测方法敏感特异，可用于禽流感的快速诊断。 展开更多
关键词 禽流感病毒 诊断 反转录-聚合酶链式反应
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抗禽流感病毒多表位DNA疫苗的构建及其免疫效力研究 被引量：23
17
作者 彭金美 童光志 +1 位作者 王云峰 仇华吉 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期623-627,共5页
多表位DNA疫苗是建立在常规DNA疫苗基础上的一种新型疫苗。它是用表位作免疫原 ,这样就比较容易在一个表达载体上克隆病原体的多个抗原基因中具有免疫活性的部分。本试验以H5N1亚型禽流感病毒的HA和NP基因及其表位为基础构建了 4个重组... 多表位DNA疫苗是建立在常规DNA疫苗基础上的一种新型疫苗。它是用表位作免疫原 ,这样就比较容易在一个表达载体上克隆病原体的多个抗原基因中具有免疫活性的部分。本试验以H5N1亚型禽流感病毒的HA和NP基因及其表位为基础构建了 4个重组质粒 :1 pIRES HA(表达全长的HA基因 ) ;2 pIRES tHA(只表达HA基因的主要抗原表位区 ) ;3 pIRES tHA NPep(融合表达HA基因的抗原表位区和NP基因的 3个CTL表位 ) ;4 pIRES tHA NPep IFN γ(用鸡的IFN γ基因取代质粒pIRES tHA NPep中的neo基因 )。分别用这 4个重组质粒和空载体质粒pIRES1neo肌注免疫 30日龄SPF鸡。免疫 3次 ,间隔为 2周 ,每次每只鸡的剂量为 2 0 0 μg。第 3次免疫后两周以高致病性禽流感病毒H5N1强毒攻击 ,免疫及攻毒前后均采血检测HI抗体效价和外周血CD4 + 、CD8+ T细胞的变化。结果发现 ,攻毒前各质粒免疫组均检测不到HI抗体 ,攻毒后 1周存活鸡HI抗体效价迅速升高到 6 4～ 2 5 6。流式细胞仪检测显示外周血CD4 + 、CD8+ T细胞在疫苗免疫后都有不同程度的升高。空载体质粒对照组鸡 (10只 )在攻毒后 3～ 8d内全部死亡 ,其他各重组质粒免疫组鸡都获得了部分保护 ,保护率分别是 :pIRES HA组为 5 4 5 % (6 11) ,pIRES tHA组为 30 % (3 10 ) ,pIRES 展开更多
关键词 禽流感病毒 多表位 DNA疫苗 免疫效力
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禽流感HA基因疫苗脂质体的制备及其理化性质 被引量：17
18
作者 陈吉祥 李广林 +4 位作者 薛飞群 陈化兰 于康震 赵荣材 李树本 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第3期230-232,共3页
用改良的逆相蒸发法制备了Ｈ７亚型禽流感保护性抗原血凝素（ＨＡ）基因重组质粒ｐＳＶＨ７脂质体。电镜观察表明，该脂质体多呈球形的单层或多层结构，脂质体粒径分布均匀，粒径范围２０～７００ｎｍ，平均粒径１６３ｎｍ，主要粒径分... 用改良的逆相蒸发法制备了Ｈ７亚型禽流感保护性抗原血凝素（ＨＡ）基因重组质粒ｐＳＶＨ７脂质体。电镜观察表明，该脂质体多呈球形的单层或多层结构，脂质体粒径分布均匀，粒径范围２０～７００ｎｍ，平均粒径１６３ｎｍ，主要粒径分布位于５０～２００ｎｍ（８４．８０％）。重组质粒ＤＮＡ在脂质体的制备过程中保持了稳定性，并能抵抗ＤＮＡ酶的水解破坏作用。吸收光谱表明，在２４８ｎｍ及２６８ｎｍ处脂质体有２个特征吸收峰，ＤＮＡ的存在不改变吸收峰的位置，但能增加吸收峰的强度。 展开更多
关键词 禽流感病毒 血凝素基因 疫苗 脂质体 理化性质
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禽流感病毒血凝素疫苗在转基因马铃薯中的表达 被引量：25
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作者 宋长征 Hugh S Mason 《生物技术》 CAS CSCD 2001年第5期3-4,共2页
利用转基因马铃薯表达禽流感病毒血凝素疫苗。将含有禽流感病毒血凝素序列的表达载体导入农杆菌 ,再感染马铃薯的幼茎外植体。转化植株的再生及温室栽培。Westernblot分析表明 ,83%的转化植株在其块茎组织中表达了重组血凝素 ,表达量占... 利用转基因马铃薯表达禽流感病毒血凝素疫苗。将含有禽流感病毒血凝素序列的表达载体导入农杆菌 ,再感染马铃薯的幼茎外植体。转化植株的再生及温室栽培。Westernblot分析表明 ,83%的转化植株在其块茎组织中表达了重组血凝素 ,表达量占总蛋白量的 0 0 3%～ 0 0 4 % 。 展开更多
关键词 禽流感病毒 血凝素疫苗 转基因马铃薯
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禽流感病毒RT-PCR及多重RT-PCR检测技术的建立 被引量：34
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作者 张应国 宋建领 +2 位作者 胡媛媛 王金萍 张富强 《中国兽医科技》 CSCD 北大核心 2005年第8期600-604,共5页
研究建立了禽流感病毒(AIV)A型、H5、N1、H9、N2亚型特异性RT-PCR及H5/N1、H9/N2、A/H5/N1多重RT-PCR检测技术,用于检测或同时检测和鉴别A型及H5N1、H9N2亚型AIV.所建立的RT-PCR和多重RT-PCR从核酸提取、基因扩增到产物分析在3～4h内即... 研究建立了禽流感病毒(AIV)A型、H5、N1、H9、N2亚型特异性RT-PCR及H5/N1、H9/N2、A/H5/N1多重RT-PCR检测技术,用于检测或同时检测和鉴别A型及H5N1、H9N2亚型AIV.所建立的RT-PCR和多重RT-PCR从核酸提取、基因扩增到产物分析在3～4h内即可完成,经对36株AIV及相关病毒分离物检测,与病毒分离鉴定的结果完全一致,且与相关病毒或其他亚型无交叉反应.采用多重RT-PCR检测80份棉拭子样品,并与病毒分离鉴定方法比较,二者H5N1、H9N2亚型的鉴定结果完全吻合.结果表明,该方法具有快速、敏感、特异等优点,为临诊样品中AIV型及H5N1、H9N2亚型鉴定和诊断的有效方法. 展开更多
关键词 禽流感病毒 多重RT-PCR H5N1亚型 HgN2亚型
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