RNA诱导沉默复合体中的生物大分子及其装配 被引量：13

1

作者 宋雪梅 燕飞 杜立新 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期761-766,共6页

在RNA干扰机制中,双链RNA诱导同源RNA降解的过程依赖于RNA诱导沉默复合体(RISC)的活性。RISC由Dicer酶,Argonaute蛋白,siRNA等多种生物大分子装配而成,对这些大分子的结构和功能进行深入细致的研究,有助于进一步了解RISC的形成过程、作... 在RNA干扰机制中,双链RNA诱导同源RNA降解的过程依赖于RNA诱导沉默复合体(RISC)的活性。RISC由Dicer酶,Argonaute蛋白,siRNA等多种生物大分子装配而成,对这些大分子的结构和功能进行深入细致的研究,有助于进一步了解RISC的形成过程、作用方式,以及阐明整个RNAi过程的作用机制。研究表明,RISC中的Dicer具有RNaseIII结构域,在RNAi的起始阶段负责催化siRNA的产生,在RISC装配过程中起稳定RISC中间体结构和功能的作用;Argonaute蛋白是RISC中的核心蛋白,有PAZ和PIWI两个主要的结构域,前者为siRNA的传递提供结合位点,后者是RISC中的酶切割活性中心;siRNA是RISC完成特异性切割作用的向导,在成熟的RISC中虽然只包含siRNA的一条链,但siRNA在RISC形成过程中的双链结构是保证RNAi效应的决定因素。尽管RISC中还存在其他一些功能未知的蛋白质,但在RISC组分结构及功能研究方面取得的进展为建立一个可能的RISC装配模型提供了理论基础。 展开更多

关键词 RNA诱导沉默复合体 装配 DICER argonaute蛋白 R2D2

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RNA干扰与siRNA(小干扰RNA)研究进展 被引量：14

2

作者 史毅 金由辛 《生命科学》 CSCD 2008年第2期196-201,共6页

RNA干扰作为后基因组时代的一种下调基因表达的工具已被广泛用于基因功能的研究以及疾病的治疗。在RNA干扰技术下调基因表达的背后存在着一个复杂的蛋白质网络参与了这一功能的实现。本文对近年来RNA干扰在疾病治疗方面的进展及其机制... RNA干扰作为后基因组时代的一种下调基因表达的工具已被广泛用于基因功能的研究以及疾病的治疗。在RNA干扰技术下调基因表达的背后存在着一个复杂的蛋白质网络参与了这一功能的实现。本文对近年来RNA干扰在疾病治疗方面的进展及其机制研究方面的进展作了一些概述。 展开更多

关键词 RNA干扰 小干扰RNA 双链RNA argonaute蛋白 P小体 疾病治疗

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杨树ARGONAUTE基因的克隆及序列分析 被引量：13

3

作者 胥猛 谢雯凡 +3 位作者 潘惠新 苏晓华 张守攻 黄敏仁 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第3期46-51,共6页

作为RNA诱导沉默复合体的核心元件,Argonaute(AGO)蛋白在植物生长发育过程中发挥着重要作用。以欧美杨和美洲黑杨不定根cDNA为模板,采用RT-PCR技术分离得到PeAGO5和PdAGO5基因的cDNA克隆,测序和序列分析结果表明2个目的cDNA片段均为2809... 作为RNA诱导沉默复合体的核心元件,Argonaute(AGO)蛋白在植物生长发育过程中发挥着重要作用。以欧美杨和美洲黑杨不定根cDNA为模板,采用RT-PCR技术分离得到PeAGO5和PdAGO5基因的cDNA克隆,测序和序列分析结果表明2个目的cDNA片段均为2809bp,基因内部含有完整的开放阅读框,可编码907个氨基酸,预测蛋白质分子量分别为102.31ku和102.34ku,理论等电点(pI)分别为9.34和9.7。所推导的2个氨基酸序列之间仅有7个差异位点,含有3个保守的结构域,DUF1785、PAZ和Piwi结构域。它们与拟南芥AtAGO5蛋白的相似性分别为64.8%和64.3%,故将其命名为PeAGO5和PdAGO5。系统进化分析发现,PeAGO5和PdAGO5,与拟南芥AtAGO1,AtAGO5和AtAGO10蛋白同属一个进化分支。此外,采用实时定量PCR技术检测PeAGO5基因在杨树硬枝插穗不定根发育过程中的表达模式,推测该基因参与不定根发育调控。 展开更多

关键词 杨树 硬枝插穗 argonaute蛋白 表达模式 QRT-PCR

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RNA干扰机制研究进展 被引量：7

4

作者 燕飞 成卓敏 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期167-172,共6页

RNAi是多种生物体内由dsRNA介导的同源mRNA降解现象。这是一个高度特异化的过程,涉及多种蛋白质的共同参与。在这一过程中,siRNA的结构影响其两条链装配到RISC中去的能力。除了与RISC结合外,siRNA还引导了RITS复合物结合到同源染色质,... RNAi是多种生物体内由dsRNA介导的同源mRNA降解现象。这是一个高度特异化的过程,涉及多种蛋白质的共同参与。在这一过程中,siRNA的结构影响其两条链装配到RISC中去的能力。除了与RISC结合外,siRNA还引导了RITS复合物结合到同源染色质,介导异染色质化过程。干扰效应的扩散,即系统性沉默可能依赖于跨膜蛋白的转运,并且很可能是在多因素调控下完成的。 展开更多

关键词 RNA干扰 小干扰RNA RNA诱导沉默复合物 argonaute蛋白

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Argonaute亚族蛋白对人类肿瘤细胞周期的影响 被引量：6

5

作者 姜琳 潘淑娟 +1 位作者 葛郁芝 殷勤伟 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2008年第12期1394-1402,共9页

Argonaute(Ago)家族蛋白与小的非编码RNAs(siRNAs,miRNAs,piRNAs)生物发生和细胞功能密切相关.它可以结合小RNAs,调控蛋白质的合成或影响mRNA的稳定性,即RNA干扰(RNAi),并且参与Piwi相关RNAs(piRNAs)的生成.人类Argonaute蛋白家族包括8... Argonaute(Ago)家族蛋白与小的非编码RNAs(siRNAs,miRNAs,piRNAs)生物发生和细胞功能密切相关.它可以结合小RNAs,调控蛋白质的合成或影响mRNA的稳定性,即RNA干扰(RNAi),并且参与Piwi相关RNAs(piRNAs)的生成.人类Argonaute蛋白家族包括8个成员,对其中的4个(Ago1～Ago4)mRNAs进行了实时定量PCR(qRT-PCR)检测,其在许多细胞中共表达,与细胞生长紧密相关.针对人乳腺癌MCF7和子宫颈癌HeLa细胞系,通过下调Ago亚族蛋白表达量,研究其在细胞周期中的调控作用.MTT实验证明,Ago蛋白表达缺失导致细胞增殖活性显著下降(P<0.01),生长受阻.进一步研究揭示,细胞周期在G0/G1期发生停滞,其中Ago1(P<0.01)和Ago4(P<0.05)的作用尤为明显,但并不引发凋亡.虽然具体调控机制尚不清晰,但在人类肿瘤细胞中Argonaute蛋白可直接或间接地参与细胞周期进程的调控. 展开更多

关键词 RNA干扰 argonaute蛋白 实时定量PCR 细胞周期 G0/G1期

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拟南芥AGO基因家族分析及盐胁迫下的表达验证 被引量：9

6

作者 岳路明 宋剑波 +4 位作者 徐晓峰 杨海奇 莫小为 宋军 莫蓓莘 《深圳大学学报（理工版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第4期352-357,共6页

argonaute(AGO)蛋白家族成员在小核糖核酸(RNA)介导的转录后调控中有重要作用.通过拟南芥AGO蛋白家族的结构域及各类植物中的AGO蛋白的进化关系进行分析,发现AGO蛋白在植物中结构和进化相对保守.根据已有的芯片数据,对拟南芥中AGO蛋白... argonaute(AGO)蛋白家族成员在小核糖核酸(RNA)介导的转录后调控中有重要作用.通过拟南芥AGO蛋白家族的结构域及各类植物中的AGO蛋白的进化关系进行分析,发现AGO蛋白在植物中结构和进化相对保守.根据已有的芯片数据,对拟南芥中AGO蛋白家族的组织表达进行分析,发现某些AGO基因具有组织表达的特异性.进一步通过基因上游启动子响应元件分析,以及盐等胁迫下的芯片和反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)实验数据分析,发现AGO2、AGO3和AGO7等基因受到盐等非生物胁迫的诱导表达.初步探明了拟南芥中AGO基因家族在盐胁迫下的差异表达规律. 展开更多

关键词 植物生理学 拟南芥 小核糖核酸 argonaute蛋白 转录后调控 非生物胁迫

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兔抗人PIWIL4蛋白多克隆抗体的制备和鉴定 被引量：6

7

作者 王迎昕 郜恒骏 +1 位作者 陈锡美 孟逊 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期83-85,89,共4页

目的制备兔抗人PIWIL4的多克隆抗体,并鉴定其特异性,应用组织芯片初步探讨其在人类正常及肿瘤组织中的分布。方法合成特异性PIWIL4多肽,以马来酰胺活化匙孔血蓝蛋白(KLH)作为载体构建多肽免疫原,通过致敏大白兔,制备兔抗人PIWIL4多克隆... 目的制备兔抗人PIWIL4的多克隆抗体,并鉴定其特异性,应用组织芯片初步探讨其在人类正常及肿瘤组织中的分布。方法合成特异性PIWIL4多肽,以马来酰胺活化匙孔血蓝蛋白(KLH)作为载体构建多肽免疫原,通过致敏大白兔,制备兔抗人PIWIL4多克隆抗体,然后用亲和层析法纯化抗体。用ELISA和western方法进行抗体验证,并应用人组织芯片进行PIWIL4的免疫组化研究。结果通过构建PIWIL4多肽-KLH载体复合物致敏大白兔,我们制备了兔抗人PIWIL4蛋白多克隆抗体,经ELISA及Western blot证实兔抗人PIWIL4抗体可特异性识别PIWIL4多肽,在人组织芯片中通过免疫组化染色显示该抗体在BU部分正常组织和肿瘤组织中呈阳性染色。结论本项研究成功制备兔抗人PIWIL4多克隆抗体,为进一步研究PIWIL4在人类疾病中的意义提供了有利工具。 展开更多

关键词 argonaute蛋白 多克隆抗体 组织芯片

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Argonaute蛋白家族在RNAi中的作用 被引量：6

8

作者 邹扬 汤华 《医学分子生物学杂志》 CAS CSCD 2006年第1期55-57,共3页

RNA干扰是一种双链RNA诱导的基因沉默现象。Argonaute蛋白组成了一个高度保守的家族,该蛋白家族包括许多成员,它们组成了RNA诱导的沉默复合体的核心元件,是RNA干扰所必须的。Argo-naute蛋白选择性地与miRNA和siRNA结合,并与Dicer酶相互... RNA干扰是一种双链RNA诱导的基因沉默现象。Argonaute蛋白组成了一个高度保守的家族,该蛋白家族包括许多成员,它们组成了RNA诱导的沉默复合体的核心元件,是RNA干扰所必须的。Argo-naute蛋白选择性地与miRNA和siRNA结合,并与Dicer酶相互作用,其PIWI盒子与Dicer的RNaseⅢ结构域直接相互作用,PIWI与Dicer之间的相互作用可能会促进miRNA/siRNA的释放。Argonaute蛋白很可能是RNA干扰中核酸内切酶活性的执行者。 展开更多

关键词 RNA干扰 argonaute蛋白 PIWI结构域

原文传递

胃癌组织芯片中Argonaute蛋白表达分析 被引量：5

9

作者 毛鑫礼 朱洪源 +3 位作者 虞朝辉 叶丽萍 郜恒骏 厉有名 《中华消化杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期751-754,共4页

目的检测胃癌Argonaute1、Argonaute2、Argonaute3和Argonaute4蛋白表达，探讨其临床意义。方法利用组织芯片技术结合免疫组化法检测100例胃癌组织和癌旁组织中Argonaute1、Argonaute2、Argonaute3和Argonaute4蛋白的表达。结果胃癌组织... 目的检测胃癌Argonaute1、Argonaute2、Argonaute3和Argonaute4蛋白表达，探讨其临床意义。方法利用组织芯片技术结合免疫组化法检测100例胃癌组织和癌旁组织中Argonaute1、Argonaute2、Argonaute3和Argonaute4蛋白的表达。结果胃癌组织中Argonaute1、Argonaute2，Argonaute3和Argonaute4蛋白表达均显著高于癌旁组织（P〈0．05）；I～Ⅱ期胃癌中4种蛋白表达均显著高于癌旁组织（P〈0．05）；Argonaute4蛋白在Ⅲ期胃癌中的表达显著高于I～Ⅱ期胃癌（P〈0．05），Argonaute1、Argonaute2、Argonaute3蛋白在在I～Ⅱ期胃癌与Ⅲ期胃癌间差异无统计学意义（P〉0．05）。四种Argonaute蛋白的表达与胃癌患者的性别、年龄、淋巴结转移无相关性（P〉0．05）。在胃癌组织中Argonaute1、Argonaute2、Argonaute3和Argonaute4蛋白两两间表达存在相关性（P〈O．01）。结论胃癌的发生发展可能与Argonaute1、Argonaute2、Argonaute3和Argonaute4蛋白过表达有关。 展开更多

关键词 胃肿瘤 蛋白质阵列分析 argonaute蛋白

原文传递

微小RNA调控靶基因作用机制的研究进展 被引量：4

10

作者 高宁 李龙江 《国际口腔医学杂志》 CAS 2008年第1期35-37,共3页

微小RNA是一类通过转录后调控机制对基因进行调控的非编码的短链RNA。研究发现微小RNA的功能涉及多种生物学过程,与肿瘤的发生、发展和多种疾病密切相关。本文就微小RNA形成过程及对靶基因调控机制的研究进展作一综述。

关键词 微小RNA RNA诱导沉默复合体 argonaute蛋白 基因调控 P小体

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编码日本血吸虫Argonaute蛋白全长cDNA克隆、表达及初步鉴定 被引量：5

11

作者 杨燕萍 郭素霞 +3 位作者 陈晶 林矫矫 刘宗平 程国锋 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期830-834,共5页

目的获得编码日本血吸虫Argonaute基因的全长cDNA,并进行克隆和重组融合蛋白表达。方法利用RACE技术获得编码日本血吸虫Argonaute基因的全长cDNA并对其进行生物信息学分析。利用实时荧光定量PCR(Realtime PCR)分析该基因在日本血吸虫中... 目的获得编码日本血吸虫Argonaute基因的全长cDNA,并进行克隆和重组融合蛋白表达。方法利用RACE技术获得编码日本血吸虫Argonaute基因的全长cDNA并对其进行生物信息学分析。利用实时荧光定量PCR(Realtime PCR)分析该基因在日本血吸虫中的转录情况。原核表达保守功能域蛋白和全长蛋白,利用保守功能域重组融合蛋白免疫昆明系小鼠制备多克隆抗体。免疫印迹(Western blot)进行免疫学分析。结果本研究获得了一个编码日本血吸虫Argo-naute基因的全长cDNA,其完整开放阅读框为3 030 bp,编码1 009个氨基酸,预测分子量为111.7 kDa。生物信息学分析表明该基因编码的蛋白序列具有Argonaute家族蛋白的典型结构域特征,且与人、鼠Argonaute蛋白具有较高的同源性。Real-time PCR分析表明该基因在7,14日龄的日本血吸虫童虫中转录较高。Western blot分析制备的多抗具有较高的特异性并能识别全长融合蛋白。结论获得了编码日本血吸虫Argonaute基因的cDNA及重组蛋白,为进一步研究该蛋白的功能奠定了基础。 展开更多

关键词 日本血吸虫 argonaute蛋白 RACE 功能分析

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RNAi及沉默通路调控研究进展 被引量：4

12

作者 邓清华 刘国文 +8 位作者 付世新 刘磊 王晓旭 朱晓岩 王建国 白鸽 王振全 李小兵 王哲 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2011年第1期92-95,共4页

RNA干扰(RNA interference,RNAi)是由双链RNA(double-stranded RNA,dsRNA)介导的细胞内双链mRNA特异性降解的现象,属于转录后的基因沉默机制。迄今为止,RNAi已经是一种广泛应用于研究基因功能的最新和最有效的方法,并且在治疗人类和动... RNA干扰(RNA interference,RNAi)是由双链RNA(double-stranded RNA,dsRNA)介导的细胞内双链mRNA特异性降解的现象,属于转录后的基因沉默机制。迄今为止,RNAi已经是一种广泛应用于研究基因功能的最新和最有效的方法,并且在治疗人类和动物疾病中也有很大潜力。作者主要综述了RNAi的过程、小RNA的生物发生学及沉默通路的保护和调控。 展开更多

关键词 小RNA 小干扰RNA RISC argonaute蛋白

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新型Argonaute蛋白的挖掘及体外活性表征

13

作者 方蒙君 司振军 +2 位作者 沈培杰 黄迪 徐志南 《海南师范大学学报（自然科学版）》 CAS 2023年第4期440-446,共7页

本研究旨在挖掘新的具有可编码核酸切割活性的Argonaute(Ago)核酸酶。利用已报道的Ago核酸酶的氨基酸序列在NCBI中进行序列比对获得同源性较高的新型Ago蛋白作为候选蛋白;以大肠杆菌为异源表达系统,对候选蛋白的基因进行密码子优化;表... 本研究旨在挖掘新的具有可编码核酸切割活性的Argonaute(Ago)核酸酶。利用已报道的Ago核酸酶的氨基酸序列在NCBI中进行序列比对获得同源性较高的新型Ago蛋白作为候选蛋白;以大肠杆菌为异源表达系统,对候选蛋白的基因进行密码子优化;表达后的目的蛋白利用亲和层析进行分离和纯化;设计核酸定向切割体系以测试纯化蛋白的可编码核酸酶活性。结果显示,序列比对共获得4个候选Ago蛋白,均可在大肠杆菌中可溶表达,再通过亲和层析得到了高纯度的目的蛋白;纯化后的4个候选Ago蛋白经测试均具有可编码核酸内切酶活性。本研究建立的Ago核酸酶的挖掘和体外活性表征的方法,可高效获取新型Ago,对于后继Ago核酸酶的研究工作具有借鉴和参考价值。 展开更多

关键词 argonaute蛋白 可编码核酸内切酶 核酸酶活性表征

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Argonaute蛋白与心血管疾病关系的研究进展

14

作者 赵欣 陈修寰 杨波 《医学综述》 CAS 2023年第4期625-629,共5页

Argonaute(AGO)蛋白是一种高度保守的蛋白,可与小分子RNA构成RNA诱导沉默复合物(RISC),而RISC可靶向与小分子RNAs互补的靶信使RNA,并通过RNA降解、翻译抑制或染色质修饰等途径调控基因表达,从而参与生理病理过程。既往关于AGO蛋白的研... Argonaute(AGO)蛋白是一种高度保守的蛋白,可与小分子RNA构成RNA诱导沉默复合物(RISC),而RISC可靶向与小分子RNAs互补的靶信使RNA,并通过RNA降解、翻译抑制或染色质修饰等途径调控基因表达,从而参与生理病理过程。既往关于AGO蛋白的研究主要集中于其在肿瘤疾病发生发展中的作用,近年则着重于AGO蛋白的组织分布特点、复合体结合能力和靶向沉默基因的能力在糖尿病心肌病、心力衰竭、心房颤动等心血管疾病(CVD)发生发展中的作用。AGO蛋白在CVD中的作用机制已成为目前研究的热点,深入探究其具体的分子调节机制有望为CVD的诊疗提供新靶点。 展开更多

关键词 心血管疾病 argonaute蛋白 RNA诱导沉默复合物

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Argonaute系列蛋白多克隆抗体制备和鉴定及组织定位 被引量：2

15

作者 卢峪霞 黄志刚 +3 位作者 陈锡美 郜恒骏 胡莺 张小燕 《同济大学学报（医学版）》 CAS 2009年第1期23-26,31,共5页

目的制备一系列Argonaute(简称AGO)蛋白多克隆抗体,并鉴定其特异性,应用组织芯片初步探讨其在人类组织中的分布。方法合成特异性AGO多肽,以马来酰胺活化匙孔血蓝蛋白(keyhole limpet hemocyanin,KLH)作为载体构建多肽免疫原,通过致敏大... 目的制备一系列Argonaute(简称AGO)蛋白多克隆抗体,并鉴定其特异性,应用组织芯片初步探讨其在人类组织中的分布。方法合成特异性AGO多肽,以马来酰胺活化匙孔血蓝蛋白(keyhole limpet hemocyanin,KLH)作为载体构建多肽免疫原,通过致敏大白兔,制备系列兔抗人AGO多克隆抗体,然后用亲和层析法纯化抗体。用ELISA和western方法进行抗体验证,并应用人组织芯片进行AGO的免疫组化研究。结果通过构建系列AGO多肽-KLH载体复合物致敏大白兔,成功制备了3个兔抗人AGO蛋白多克隆抗体,经ELISA及Western blot证实兔抗人AGO抗体可特异性识别AGO多肽,在人组织芯片中通过免疫组化染色显示该抗体在部分肿瘤组织上皮来源细胞胞浆中呈阳性染色。结论本项研究成功制备系列兔抗人AGO多克隆抗体,为进一步研究AGO在miRNA/RNAi通路中的作用及在人类疾病中的意义提供了有利工具。 展开更多

关键词 argonaute蛋白 多克隆抗体 组织芯片

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植物Argonaute基因研究进展 被引量：3

16

作者 翟立红 孙伟 +1 位作者 李知洪 腾峰 《生命科学》 CSCD 北大核心 2018年第11期1210-1220,共11页

Argonaute (AGO)蛋白是一类在小RNA介导的基因沉默中起关键作用的RNA结合蛋白。AGO家族在不同物种中高度保守,由可变N端、PAZ、MID和PIWI等4个结构域组成。根据系统进化学以及AGO基因结合的小RNA类型可将该家族分为3个亚族,即AGO-like、... Argonaute (AGO)蛋白是一类在小RNA介导的基因沉默中起关键作用的RNA结合蛋白。AGO家族在不同物种中高度保守,由可变N端、PAZ、MID和PIWI等4个结构域组成。根据系统进化学以及AGO基因结合的小RNA类型可将该家族分为3个亚族,即AGO-like、PIWI-like和Group^3亚家族,目前发现的植物中的AGO基因均属于AGO-like亚家族。研究表明,不同类型的小RNA结合特定种类的AGO蛋白在植物不同生长发育和响应胁迫过程中扮演着重要角色。最近发掘的许多AGO蛋白新的生物学功能表明,AGO在调控配子生成和发育过程中也具有重要意义。现对植物AGO家族的分类、结构特点、结合的小RNA类别以及最新的功能研究进行详细综述。 展开更多

关键词 argonaute蛋白 小RNA 沉默复合体 生物学功能

原文传递

Argonaute蛋白与小RNA的作用机制 被引量：3

17

作者 赵文文 韩颖颖 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期1182-1189,共8页

RNA干扰(RNA interference,RNAi)是在植物、动物、线虫、真菌以及昆虫等生物体中普遍存在的通过双链RNA(double-strand RNA,dsRNA)诱导的抑制同源基因表达的一种保守的调控机制.小分子RNA通过特异性地识别结合RNA诱导的沉默复合体(RNA-i... RNA干扰(RNA interference,RNAi)是在植物、动物、线虫、真菌以及昆虫等生物体中普遍存在的通过双链RNA(double-strand RNA,dsRNA)诱导的抑制同源基因表达的一种保守的调控机制.小分子RNA通过特异性地识别结合RNA诱导的沉默复合体(RNA-induced silencing complex,RISC)对目标mRNA的表达在转录和翻译水平进行抑制.作为RISC的重要组成成分,Argonaute蛋白(Ago)发挥了至关重要的作用.为了进一步阐明Ago蛋白在RNA干扰中对小分子RNA的作用机制,本文介绍了Ago蛋白的结构、分类及其在RNA干扰机制中的作用,并着重阐述了目前已知的植物Ago蛋白对小分子RNA的几种作用机制,以及目前研究发现的Ago蛋白的功能作用,从而更进一步证实Ago蛋白对小分子RNA的作用是一个复杂的过程. 展开更多

关键词 argonaute蛋白 小RNA RNA干扰 作用机制

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编码日本血吸虫Argonaute 3蛋白全长cDNA的获得及初步研究 被引量：3

18

作者 陈晶 郭素霞 +4 位作者 杨燕萍 刘金明 林矫矫 李家奎 程国锋 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期310-314,共5页

目的获得日本血吸虫Argonaute3(Ago3)蛋白的全长编码cDNA并对其初步分析。方法利用cDNA末端快速扩增技术(RACE)获得日本血吸虫Ago3蛋白全长编码cDNA,利用原核表达系统对此蛋白片段进行重组表达,采用亲和层析法纯化重组蛋白,并免疫动物... 目的获得日本血吸虫Argonaute3(Ago3)蛋白的全长编码cDNA并对其初步分析。方法利用cDNA末端快速扩增技术(RACE)获得日本血吸虫Ago3蛋白全长编码cDNA,利用原核表达系统对此蛋白片段进行重组表达,采用亲和层析法纯化重组蛋白,并免疫动物制备多克隆抗体。利用Western blot技术分析该蛋白在日本血吸虫中的表达。结果采用RACE获得了日本血吸虫Ago3蛋白编码全长cDNA,长度为2772bp;利用原核表达系统获得了该蛋白片段的重组融合蛋白,并制备了多克隆抗体;Western blot分析表明,该抗体与日本血吸虫全虫蛋白在分子量约为100kDa处具有特异性反应。结论获得了编码日本血吸虫Ago3蛋白的全长编码cDNA,并制备了多克隆抗体,为进一步研究该蛋白的功能奠定了基础。 展开更多

关键词 日本血吸虫 argonaute蛋白 CDNA末端快速扩增技术 非编码小RNA

原文传递

植物RNA沉默的分子机制研究进展 被引量：2

19

作者 王鹏 赵旵军 朱国萍 《生命科学》 CSCD 2008年第5期784-789,共6页

RNA沉默(RNA silencing)是真核生物中的一种抵抗外源遗传因子(病毒、转座子或转基因)及调控基因表达的防御机制。参与植物RNA沉默的酶及蛋白质主要包括6种RNA依赖的RNA聚合酶、4种Dicer-like(DCL)核酸内切酶和10种Argonautes蛋白。植物... RNA沉默(RNA silencing)是真核生物中的一种抵抗外源遗传因子(病毒、转座子或转基因)及调控基因表达的防御机制。参与植物RNA沉默的酶及蛋白质主要包括6种RNA依赖的RNA聚合酶、4种Dicer-like(DCL)核酸内切酶和10种Argonautes蛋白。植物中4条RNA沉默途径分别由微小RNA (miRNAs)和3种小干扰RNA(siRNAs)介导,包括反式作用siRNAs(ta-siRNAs)、天然反义siRNAs(nat- siRNAs)和异染色质siRNAs(hc-siRNAs)。在植物RNA沉默的系统性传播中,由DCL4或DCL2将dsRNAs裁剪为次级siRNAs,以放大RNA沉默信号和增强沉默效应。 展开更多

关键词 RNA沉默 RNA依赖的RNA聚合酶 Dicer-like核酸内切酶 argonaute蛋白 微小RNA 小干扰RNA 沉默途径 系统性RNA沉默

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RNA农药的研究现状和发展前景

20

作者 关梅 晁子健 +1 位作者 闫硕 沈杰 《农化市场十日讯》 2023年第5期23-26,共4页

基因干扰(RNAi)是一种在动物、植物和微生物中高度保守的基因表达调控工具。1998年,Fire等首次在秀丽隐杆线虫中证明了触发基因沉默的关键因子是双链RNA(dsRNA),而非单链RNA。具体而言,dsRNA被Dicer-like蛋白随机剪切成长度为21~24nt的... 基因干扰(RNAi)是一种在动物、植物和微生物中高度保守的基因表达调控工具。1998年,Fire等首次在秀丽隐杆线虫中证明了触发基因沉默的关键因子是双链RNA(dsRNA),而非单链RNA。具体而言,dsRNA被Dicer-like蛋白随机剪切成长度为21~24nt的小RNA(siRNA或miRNA),siRNA与Argonaute蛋白(AGOs)结合形成RNA诱导的沉默复合体(RISCs),该复合体与目标RNA链互补,诱导mRNA降解或抑制翻译进程。 展开更多

关键词 argonaute蛋白 秀丽隐杆线虫 基因干扰 现状和发展前景 基因表达调控 MRNA降解 基因沉默 复合体

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