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水稻白叶枯病广谱抗性基因Xa21导入两用不育系培矮64S 被引量：19
1
作者 赵彬 王文明 +5 位作者 郑先武 王春莲 马伯军 薛庆中 朱立煌 翟文学1 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第2期137-141,共5页
以克隆的Xa21基因为外源基因,成熟胚愈伤组织为转化受体,应用农杆菌介导法对水稻两用型核不育系培矮64S进行转化,获46株转基因植株。PCR和Southern分析结果表明,Xa21已整合到受体基因组。用稻白叶枯病病原菌(Xanthomonasoryzaepv.oryzae... 以克隆的Xa21基因为外源基因,成熟胚愈伤组织为转化受体,应用农杆菌介导法对水稻两用型核不育系培矮64S进行转化,获46株转基因植株。PCR和Southern分析结果表明,Xa21已整合到受体基因组。用稻白叶枯病病原菌(Xanthomonasoryzaepv.oryzae)菲律宾小种6号接种鉴定,结果表明大多数转基因植株获得了抗病性。已整合的Xa21基因能够稳定地遗传,在所检测转基因株系的T1代中,Xa21基因显示3:1的分离。 展开更多
关键词 水稻 白叶枯病 XA21基因 培矮64S 不育系
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农杆菌转化花粉愈伤组织获取纯合的转基因水稻植株 被引量：19
2
作者 傅亚萍 斯华敏 +2 位作者 朱正歌 胡国成 孙宗修 《浙江大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期407-410,共4页
应用农杆菌介导法成功地将玉米转座子 Ds导入粳稻 (Oryza sativa L.subsp.japonica)中花 11的花粉愈伤组织中 ,基因转化以对除草剂 PPT有抗性的 Bar基因和潮霉素抗性基因 H pt为选择标记 .共获得了 18个独立的转基因绿苗 ,其中单倍体 11... 应用农杆菌介导法成功地将玉米转座子 Ds导入粳稻 (Oryza sativa L.subsp.japonica)中花 11的花粉愈伤组织中 ,基因转化以对除草剂 PPT有抗性的 Bar基因和潮霉素抗性基因 H pt为选择标记 .共获得了 18个独立的转基因绿苗 ,其中单倍体 11株 ,二倍体 7株 .转基因植株均抗除草剂 BASTA.考查了二倍体植株种子后代 (T1)对 BASTA的抗性 ,7个株系的所有植株均抗 BASTA,而未发生感抗分离 ,表明外源基因在转基因植株中是纯合的 .PCR和 Southern blotting的研究支持上述结果 . 展开更多
关键词 水稻 花药培养 转基因稻 农杆菌转化
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农杆菌介导的植物原位转基因方法研究进展 被引量：13
3
作者 刘凡 王国英 曹鸣庆 《分子植物育种》 CAS CSCD 2003年第1期108-115,共8页
本文介绍了农杆菌介导的植物原位转基因方法目前的发展状况、技术环节、以及在转化机制上的研究结果 。
关键词 植物原位转化 农杆菌介导 转化机制 基因工程
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用农杆菌介导法将大豆球蛋白基因导入水稻 被引量：15
4
作者 张宪银 薛庆中 《浙江大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期495-499,共5页
在克隆水稻谷蛋白基因 Gt1启动子的基础上 ,以农杆菌双元载体 p CAMBIA130 1为起点 ,构建出以该启动子带动大豆球蛋白 A1a B1b亚基基因表达的双元载体 ,并用农杆菌介导法转化水稻获得转基因植株 .经 PCR检测和后代分析 ,大豆球蛋白基因... 在克隆水稻谷蛋白基因 Gt1启动子的基础上 ,以农杆菌双元载体 p CAMBIA130 1为起点 ,构建出以该启动子带动大豆球蛋白 A1a B1b亚基基因表达的双元载体 ,并用农杆菌介导法转化水稻获得转基因植株 .经 PCR检测和后代分析 ,大豆球蛋白基因已整合入水稻基因组 。 展开更多
关键词 水稻 农杆菌转化 启动子 贮藏蛋白 大豆球蛋白基因 品质
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农杆菌敏感小麦基因型的筛选及其转化(英文) 被引量：19
5
作者 叶兴国 王艳丽 +2 位作者 康乐 杜丽璞 徐惠君 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第12期1552-1556,T0001,共6页
利用C58c1农杆菌菌株(其携带的pPTN290质粒载体上含有nptⅡ基因和GUS基因)为供体材料和小麦幼胚为受体材料,对我国35个春小麦基因型进行了农杆菌敏感性研究和转化研究。组织化学染色结果表明,PM97034、P187、巴140105、扬麦158、新春9... 利用C58c1农杆菌菌株(其携带的pPTN290质粒载体上含有nptⅡ基因和GUS基因)为供体材料和小麦幼胚为受体材料,对我国35个春小麦基因型进行了农杆菌敏感性研究和转化研究。组织化学染色结果表明,PM97034、P187、巴140105、扬麦158、新春9号和克丰6号等基因型农杆菌感染后GUS,基因瞬时表达率达到了15.0%～30.0%,显著高于模式基因型Bobwhite。其余幼胚分别在含10～25mg/LG418培养基上诱导愈伤组织和分化植株,抗性再生植株经ELISA检测、PCR检测、叶片离体退绿检测、XGluc染色检测和Southernblot检测,最终从新春9号、PM97034和Bobwhite获得了转基因植株,转化效率分别为3.3%、2.0%和1.1%,新春9号和PM97034的农杆菌转化效率高于Bobwhite。Southernblot检测结果同时表明,外源基因在多数转基因植株中表现为单拷贝整合。T1代植株ELISA检测结果和PCR检测结果表明,外源基因在个别株系中的分离符合孟德尔遗传规律,而在多数株系中的分离偏离了孟德尔遗传规律。阳性植株与阴性植株分离比经χ2c适合性检测,表明外源基因在多数株系中的遗传符合3∶1分离规律。本文首次对不同小麦基因型进行了农杆菌敏感性和转化效率研究,筛选到新春9号和PM97034两个对农杆菌比较敏感且转化效率比较高的基因型,可望广泛用于小麦转基因研究。 展开更多
关键词 小麦 农杆菌转化 基因型筛选 瞬时表达 分子检测
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反义ACC合成酶基因导入番茄的研究 被引量：8
6
作者 曾黎琼 张绍松 +4 位作者 柴红梅 王敬乔 李成云 张云孙 罗云波 《云南大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 2002年第5期393-397,共5页
采用农杆菌介导法将携带有反义ACC合成酶基因和NPTII的表达载体 pKAC导入番茄栽培品种美国大红五星 10 2、美国大红 10 8、美国大红王、大红II号等中 .经过卡那霉素筛选后 ,获得了一批抗性苗 ,其中有 3株PCR检测为阳性 .实验证明 ,不同... 采用农杆菌介导法将携带有反义ACC合成酶基因和NPTII的表达载体 pKAC导入番茄栽培品种美国大红五星 10 2、美国大红 10 8、美国大红王、大红II号等中 .经过卡那霉素筛选后 ,获得了一批抗性苗 ,其中有 3株PCR检测为阳性 .实验证明 ,不同激素配比对番茄子叶不定芽的诱导有一定影响 ,适宜的农杆菌侵染时间和浓度是番茄基因转化成功与否的关键 。 展开更多
关键词 农杆菌介导法 番茄 反义ACC合成酶基因 延迟选择 转基因植物 基因转化 遗传育种
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一种基于农杆菌介导的拟南芥瞬时转化技术优化 被引量：14
7
作者 郭勇 王玉成 王智博 《东北林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期41-44,83,共5页
利用根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导的拟南芥瞬时转化体系影响因素来确定最佳转化条件。以生长15日龄的拟南芥幼苗为试验材料,以转化p CAMBIA1301空载体的根癌农杆菌EHA105为目的菌株进行瞬时转化。研究了吐温20、菌液OD值... 利用根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导的拟南芥瞬时转化体系影响因素来确定最佳转化条件。以生长15日龄的拟南芥幼苗为试验材料,以转化p CAMBIA1301空载体的根癌农杆菌EHA105为目的菌株进行瞬时转化。研究了吐温20、菌液OD值、乙酰丁香酮(AS)及转化时间等对拟南芥瞬时转化效率的影响。结果表明:以体积分数为0.05%的吐温、菌液OD_(600)值为1.0和120μmol/L的AS侵染拟南芥2.5 h后,再共培养72 h,能够得到高瞬时转化效果。 展开更多
关键词 拟南芥 GUS基因 瞬时表达 实时定量 农杆菌介导转化
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胡萝卜高效再生和遗传转化体系的建立 被引量：10
8
作者 石琰璟 沙广利 黄粤 《青岛科技大学学报（自然科学版）》 CAS 2005年第3期197-200,204,共5页
对培养基中的激素组成和添加物种类进行了研究,建立了胡萝卜下胚轴外植体的高效再生系统,为生产植物可食性疫苗提供了良好的再生和转化技术平台。首先在较高生长素(2,4D)浓度下诱导胡萝卜(黑田五寸)愈伤组织,然后降低生长素浓度诱导胚状... 对培养基中的激素组成和添加物种类进行了研究,建立了胡萝卜下胚轴外植体的高效再生系统,为生产植物可食性疫苗提供了良好的再生和转化技术平台。首先在较高生长素(2,4D)浓度下诱导胡萝卜(黑田五寸)愈伤组织,然后降低生长素浓度诱导胚状体,添加质量分数0.2%的酵母提取物,可使胚状体的诱导率达78.27%。沿此再生途径用农杆菌侵染法进行转化,预培养96h,共培养黑暗72h,卡那霉素20mg·L-1筛选20d,然后在卡那霉素75mg·L-1的条件下筛选到了抗性植株。抗性植株经PCR检测,80%的抗性植株都检测到报告基因nptII片段。 展开更多
关键词 遗传转化体系 胡萝卜 高效再生 抗性植株 卡那霉素 可食性疫苗 酵母提取物 PCR检测 再生系统 技术平台 愈伤组织 质量分数 再生途径 报告基因 生长素 胚状体 添加物 培养基 外植体 下胚轴 诱导率 农杆菌 预培养 共培养
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离体培养植物细胞的表面与农杆菌介导基因转化频率的研究 被引量：3
9
作者 郭骁才 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2001年第3期23-27,共5页
以玉米、黑麦、烟草为材料 ,对细胞表面进行了扫描电镜观察 ,研究了离体培养植物细胞的细胞壁外表面的结构及其变化与农杆菌介导转化频率之间的关系。正常继代培养的烟草细胞 ,其细胞壁外表面光滑 ,大部分细胞在扫描电镜下坍陷或皱折 ;... 以玉米、黑麦、烟草为材料 ,对细胞表面进行了扫描电镜观察 ,研究了离体培养植物细胞的细胞壁外表面的结构及其变化与农杆菌介导转化频率之间的关系。正常继代培养的烟草细胞 ,其细胞壁外表面光滑 ,大部分细胞在扫描电镜下坍陷或皱折 ;经处理用于农杆菌介导转化的烟草细胞 ,其表面有很多颗粒状突起和纤丝状物或纤丝状网 ;光滑的表面很少见到菌 ,而粗糙表面则有很多菌。玉米和黑麦愈伤组织中 ,浅黄色、疏松易散的胚性细胞团 ,其表面细胞有很多未坍陷 ,相当一部分未坍陷细胞的细胞壁外表面与烟草细胞一样 ,具有很多较小的颗粒状突起和纤丝状物或纤丝状网 ;白色松软的愈伤组织 ,其外层细胞大多坍陷或呈柱状 ,未坍陷细胞的表面光滑 ,有些似有一层膜状物。 展开更多
关键词 离体培养 细胞壁外表面 农杆菌介导 转化频率 植物细胞 基因转化
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棉花农杆菌介导法转化机理及研究进展 被引量：4
10
作者 吴霞 焦改丽 +5 位作者 吴家和 范小平 孟晋红 罗小丽 上官小霞 李燕娥 《山西农业科学》 2001年第1期27-30,共4页
在农杆菌中Ti质粒上的若干重要区域共同作用下 ,将经改造的含有目的基因的T -DNA片断导入植物基因组中 ,并得以表达。采用农杆菌介导法 ,山西省农业科学院棉花研究所已将多个外源基因导入棉花中 ,获得转化品种与品系。
关键词 棉花 农杆菌介导法 转化机理 TI质粒 转化载体
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农杆菌介导的抗除草剂基因转入两系杂交稻恢复系的研究 被引量：4
11
作者 胡国成 肖晗 +4 位作者 于永红 朱正歌 斯华敏 付亚萍 孙宗修 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 2000年第6期511-515,共5页
利用农杆菌水稻高效转化系统 ,成功地将外源BAR基因转入实用性两系杂交稻恢复系R187和秀水0 4,经过除草剂Basta田间涂布试验 ,其阳性率达到 90 %以上 .对转基因植株同步进行的PCR特异扩增和总DNASouthern检测结果也证实抗Basta的植株中... 利用农杆菌水稻高效转化系统 ,成功地将外源BAR基因转入实用性两系杂交稻恢复系R187和秀水0 4,经过除草剂Basta田间涂布试验 ,其阳性率达到 90 %以上 .对转基因植株同步进行的PCR特异扩增和总DNASouthern检测结果也证实抗Basta的植株中含有BAR基因 .讨论了应用转BAR基因的方法提高两系杂交水稻制种纯度的条件 .图 2表 1参 展开更多
关键词 两系杂交稻 恢复系 农杆菌转化 抗除草剂基因
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农杆菌介导多年生黑麦草转化体系的建立 被引量：6
12
作者 王奇丽 何近刚 +2 位作者 陈彦龙 张小芸 吴金霞 《中国农业科技导报》 CAS CSCD 2009年第2期119-123,共5页
以胚性愈伤组织系,作为转化受体,利用农杆菌介导的遗传转化方法,将报告基因gus和抗除草剂基因bar成功转入多年生黑麦草。共计获得52株T0代抗性植株。利用PCR方法对转基因植株的bar基因进行扩增,确定阳性株系27株。对阳性植株叶片进行GU... 以胚性愈伤组织系,作为转化受体,利用农杆菌介导的遗传转化方法,将报告基因gus和抗除草剂基因bar成功转入多年生黑麦草。共计获得52株T0代抗性植株。利用PCR方法对转基因植株的bar基因进行扩增,确定阳性株系27株。对阳性植株叶片进行GUS染色,有15株叶片呈现较强的蓝色。对再生植株和野生型植株叶片喷施5‰的除草剂Basta溶液,GUS阳性的植株全部表现为Basta抗性。以上结果表明,以黑麦草成熟胚胚性愈伤组织为受体,通过优化农杆菌介导的黑麦草遗传转化体系,初步建立了多年生黑麦草的转基因平台,这对黑麦草的遗传改良具有重要的意义。 展开更多
关键词 多年生黑麦草 农杆菌介导转化 GUS染色 PCR检测 Basta筛选
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农杆菌介导的甜瓜蔓枯病菌遗传转化体系的建立 被引量：6
13
作者 任海英 方丽 +2 位作者 李岗 茹水江 王汉荣 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期802-808,共7页
甜瓜蔓枯病是当前危害瓜类的主要病害,严重影响甜瓜的产量和品质,但是蔓枯病菌Didymella bryoniae病原学研究还非常落后,关于该菌功能基因的研究还未见报道。本研究以携带潮霉素B磷酸转移酶基因(hph)的pBIG2RHPH2作为转化载体,根癌农杆... 甜瓜蔓枯病是当前危害瓜类的主要病害,严重影响甜瓜的产量和品质,但是蔓枯病菌Didymella bryoniae病原学研究还非常落后,关于该菌功能基因的研究还未见报道。本研究以携带潮霉素B磷酸转移酶基因(hph)的pBIG2RHPH2作为转化载体,根癌农杆菌C58C1作为转化介体,转化甜瓜蔓枯病菌的强致病菌株DB11。研究发现,甜瓜蔓枯病菌的最优转化体系为:甜瓜蔓枯病菌的分生孢子悬浮液浓度为1×106个孢子/mL,农杆菌悬浮液OD600为0.15,共培养时间48h,诱导培养基中添加200μg/mL乙酰丁香酮,选择培养基添加100μg/mL潮霉素B、200μg/mL头孢噻肟钠、200μg/mL氨苄青霉素和200μg/mL四环素。1×105个蔓枯病菌分生孢子可以产生45个左右的转化子,随机挑取3个转化子进行PCR和RT-PCR检测发现,在不含潮霉素B的PDA培养基平板上转化子连续培养5代后,hph基因仍能稳定存在和转录,Southern blotting检测发现,T-DNA都是单拷贝插入3个转化子的染色体内。本研究建立的甜瓜蔓枯病菌的转化体系将为该病菌的功能基因研究和寄主与病原菌的互作研究提供重要技术支撑。 展开更多
关键词 甜瓜蔓枯病菌 根癌农杆菌介导的转化 T-DNA插入突变
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几种基因转移技术在小麦上的应用 被引量：5
14
作者 曾黎琼 程在全 +2 位作者 段玉云 寸守铣 徐增富 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2000年第4期25-29,共5页
采用基因枪法、电脉冲法、农杆菌介导法和浸泡法将外源基因质粒pZFX2导入小麦细胞中 ,经卡那霉素筛选 ,获得了抗性的愈伤组织和再生植株。通过此项试验 ,研究了不同方法的转化效果 。
关键词 小麦 基因转化 基因枪 电脉冲 农杆菌介导
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黑花生再生体系和遗传转化的初步研究 被引量：5
15
作者 余云芳 姚伟 +5 位作者 李红梅 段真珍 何正权 乐超银 张昌菊 梁宏伟 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2006年第3期38-42,62,共6页
以黑花生品种黑霸920成熟种胚、幼叶和胚轴为外植体,对黑花生植株再生和遗传转化进行了研究。通过设置一系列不同浓度激素配比的培养基来优化各阶段培养条件,初步建立了高效的黑花生再生体系,即花生种子经75%乙醇表面消毒15 min,MS+6-BA... 以黑花生品种黑霸920成熟种胚、幼叶和胚轴为外植体,对黑花生植株再生和遗传转化进行了研究。通过设置一系列不同浓度激素配比的培养基来优化各阶段培养条件,初步建立了高效的黑花生再生体系,即花生种子经75%乙醇表面消毒15 min,MS+6-BA 2.0 mg/L为最优化的种子萌发培养基,MS+2,4-D 2.0 mg/L为最佳诱导愈伤培养基,幼叶为最佳诱导愈伤组织的外植体,MS+6-BA 8 mg/L+NAA 0.5 mg/L+AgNO31 mg/L为最佳分化培养基,MS+NAA 2.0mg/L+6-BA 0.2 mg/L+活性炭200 mg/L为最佳生根培养基。同时确定了愈伤组织和幼苗的卡那霉素筛选压分别为30 mg/L和300 mg/L。利用农杆菌介导法将含有G US基因和NPTⅡ基因的植物表达载体pBI121导入花生组织,在对愈伤组织、幼叶和胚轴的GUS表达检测中均有蓝色斑块出现,证明G US基因已成功转入到花生细胞中。 展开更多
关键词 花生 组织培养 农杆菌介导法 GUS检测
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一种新的适合于农杆菌介导的非洲菊基因转化受体体系 被引量：6
16
作者 叶华 朋金娥 +2 位作者 程在全 陈善娜 黄兴奇 《西南农业学报》 CSCD 2004年第B05期62-65,共4页
农杆菌介导的基因转化成功与否及效率与所选择的外植体类型有密切关系。报告以非洲菊叶柄基部的愈伤组织为起始材料,将其匀浆分散成小细胞团,并用该小细胞团为外植体进行农杆菌介导的基因转化,经GUS组织化学染色和抗生素筛选培养证明,... 农杆菌介导的基因转化成功与否及效率与所选择的外植体类型有密切关系。报告以非洲菊叶柄基部的愈伤组织为起始材料,将其匀浆分散成小细胞团,并用该小细胞团为外植体进行农杆菌介导的基因转化,经GUS组织化学染色和抗生素筛选培养证明,用此体系可高效率地获得非洲菊转基因愈伤,该愈伤可能进一步再分化出转基因植株。 展开更多
关键词 农杆菌 非洲菊 外植体 转基因 愈伤
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水稻遗传转化方法研究与应用进展 被引量：6
17
作者 许惠滨 朱永生 +4 位作者 连玲 蒋家焕 江敏榕 谢华安 张建福 《福建稻麦科技》 2017年第4期79-83,共5页
转基因技术已成为植物分子生物学研究的有效手段。文章综述了6种水稻遗传转化方法的优缺点,其中,农杆菌介导法具有费用低、拷贝数低、重复性好、基因沉默现象少、转育周期短,且在理论上和技术上操作都比较成熟等优点,应用广泛。
关键词 转基因 水稻 遗传 农杆菌介导法
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农杆菌介导陆地棉转化和再生体系的研究进展 被引量：5
18
作者 解晓红 张换样 +2 位作者 李静 焦改丽 吴慎杰 《棉花学报》 CSCD 北大核心 2011年第4期379-384,共6页
陆地棉通过体细胞胚胎发生的农杆菌介导转化体系的主要瓶颈在于:基因型限制、转化周期长、胚胎发生率低、易出现畸形胚等问题。针对这些问题,研究者对传统转化体系的各个环节进行了优化,并在拓展受体基因型、筛选高频再生品(种)系或株... 陆地棉通过体细胞胚胎发生的农杆菌介导转化体系的主要瓶颈在于:基因型限制、转化周期长、胚胎发生率低、易出现畸形胚等问题。针对这些问题,研究者对传统转化体系的各个环节进行了优化,并在拓展受体基因型、筛选高频再生品(种)系或株系、选择不同的组织或器官做受体和建立新的不依赖于组织培养和基因型限制的农杆菌转化体系等方面进行了探索和研究。 展开更多
关键词 棉花 农杆菌介导转化 转化体系 再生体系
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根癌农杆菌介导的骏枣愈伤组织遗传转化体系的研究 被引量：5
19
作者 冯晓东 陈国梁 +1 位作者 乔璟 常海飞 《延安大学学报（自然科学版）》 2014年第1期54-57,共4页
采用农杆菌介导法,对骏枣愈伤组织遗传转化体系进行研究.结果表明：进行遗传转化的合适条件为：愈伤诱导培养基MS＋6-BA 0.4 mg/L＋2,4-D 1.2 mg/L;浸染之前对愈伤组织进行6d的避光培养可提高愈伤组织在共培养过程中的成活率;愈伤组织在... 采用农杆菌介导法,对骏枣愈伤组织遗传转化体系进行研究.结果表明：进行遗传转化的合适条件为：愈伤诱导培养基MS＋6-BA 0.4 mg/L＋2,4-D 1.2 mg/L;浸染之前对愈伤组织进行6d的避光培养可提高愈伤组织在共培养过程中的成活率;愈伤组织在OD600=0.4～0.6的农杆菌菌液中浸染10 min,农杆菌LBA4404的生长情况最好;在28℃黑暗条件下共培养放置16 d对转化最适宜;头孢霉素的抑菌浓度为250 mg/L;卡那霉素的筛选浓度为125 mg/L.经PCR检测,初步证明外源目的基因已整合到骏枣基因组中,初步实现了农杆菌介导的骏枣愈伤组织遗传转化,与以骏枣茎叶外植体建立的遗传转化体系相比,以骏枣愈伤组织为外植体共培养时间长,有利于转化. 展开更多
关键词 骏枣 农杆菌 遗传转化 愈伤组织
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转hrap基因马铃薯获得晚疫病抗性研究 被引量：5
20
作者 黄先群 蒋敏华 +3 位作者 陈坚 朱振宇 李丽 林忠平 《分子植物育种》 CAS CSCD 2011年第2期218-223,共6页
马铃薯晚疫病(Phytopthora infestans)是制约马铃薯生产的主要病害之一。为了扩大马铃薯抗病基因源,提高栽培马铃薯的抗病能力,本试验利用根癌农杆菌介导的方法,将由harpinPss引起过敏反应的甜椒中分离出来的一种过敏反应促进蛋白hrap... 马铃薯晚疫病(Phytopthora infestans)是制约马铃薯生产的主要病害之一。为了扩大马铃薯抗病基因源,提高栽培马铃薯的抗病能力,本试验利用根癌农杆菌介导的方法,将由harpinPss引起过敏反应的甜椒中分离出来的一种过敏反应促进蛋白hrap基因导入马铃薯品种"Burbank"中。结果表明,获得的转化植株经PCR检测其阳性率为61.15%;Southern杂交有53.85%的植株表现阳性;对转化材料进行RT-PCR检测结果,表明导入的hrap基因已整合到马铃薯DNA中;从转化植株中分离hrap基因与GenBank中的hrap cDNA(GenBank:AF168415)进行DNA测序结果比较,两者的相似度达99.3%。通过对转基因植株进行活体接种抗病性检测,转hrap基因的马铃薯获得了抗晚疫病(Phytopthora infestans)植株。 展开更多
关键词 马铃薯 hrap基因 根癌农杆菌 遗传转化 晚疫病
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