ACC合成酶基因及其反义基因对西瓜的遗传转化 被引量：39

1

作者 王春霞 简志英 +3 位作者 刘愚 邹琦 白永延 毛慧珠 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 1997年第5期445-450,共6页

以2日龄西瓜(Citrullus lanatus(Thunb.)Mansfeld)无菌苗子叶为外植体,通过与根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)进行叶盘共培养建立了西瓜的遗传转化系统。所用根癌农杆菌中含有改建后分别携带嵌合NPTⅡ基因和番茄的ACC合成酶基因... 以2日龄西瓜(Citrullus lanatus(Thunb.)Mansfeld)无菌苗子叶为外植体,通过与根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)进行叶盘共培养建立了西瓜的遗传转化系统。所用根癌农杆菌中含有改建后分别携带嵌合NPTⅡ基因和番茄的ACC合成酶基因及其反义基因的质粒。外植体在MSA培养基(MS盐类、B_5维生素、1.0mg/L BA、0.2mg/L IAA)上预培养3～4d后,与根癌农杆菌共培养4d,随后转移外植体至附加100mg/L卡那霉素、300mg/L头孢菌素的MSA培养基上筛选转化芽。将带芽外植体移入含有100mg/L卡那霉素、300mg/L头孢菌素的伸长培养基(MS+0.2mg/L KT)上进行芽伸长,切取2～3cm高的伸长芽移入生根培养基(1/2MS+0.1mg/L NAA)生根。Southern blot结果证明获得转基因植株,乙烯释放指标表明转入的正义和反义ACC合成酶基因得到不同程度的表达。 展开更多

关键词 西瓜 转基因西瓜 acc合成酶基因 反义基因

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用反义ACC合成酶基因转化河套蜜瓜的研究 被引量：9

2

作者 哈斯阿古拉 方天祺 +3 位作者 张竞秋 骆蒙 张彤 刘小强 《云南大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 1999年第S3期200-201,共2页

关键词 河套蜜瓜 acc合成酶基因 转基因 反义RNA

原文传递

香蕉ACC合成酶反义基因转化香蕉的研究 被引量：13

3

作者 吴静 李瑞珍 +1 位作者 徐碧玉 金志强 《分子植物育种》 CAS CSCD 2007年第4期497-501,共5页

香蕉是重要的热带、亚热带地区作物,典型的呼吸跃变型果实,不耐贮藏。传统的保鲜方法存在诸多弊端,利用现代生物技术培育耐贮藏新品种,已经成为我们解决香蕉保鲜问题的重要课题。本研究利用果实特异性ACC合成酶基因反义植物表达载体,采... 香蕉是重要的热带、亚热带地区作物,典型的呼吸跃变型果实,不耐贮藏。传统的保鲜方法存在诸多弊端,利用现代生物技术培育耐贮藏新品种,已经成为我们解决香蕉保鲜问题的重要课题。本研究利用果实特异性ACC合成酶基因反义植物表达载体,采用基因枪和农杆菌介导法转化海南主栽的巴西香蕉及红香蕉,并比较了不同转化方法及不同栽培品种的转化效果。结果表明农杆菌侵染法好于基因枪法,在农杆菌侵染方法中,对红香蕉的转化效果好于巴西香蕉。经PCR检测获得了9株转化植株,进一步采用Southern blot分析的方法,其中4株杂交信号较强,确认ACC合成酶反义基因已经整合进香蕉基因组中。本研究为香蕉的转基因研究和耐储藏新品种的培育奠定了一定的基础。 展开更多

关键词 香蕉 acc合成酶基因 反义植物表达载体 转化

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薄皮甜瓜果实ACC合成酶cDNA克隆及反义表达载体的构建 被引量：4

4

作者 郭庆勋 秦智伟 +1 位作者 丁国华 李景鹏 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 2006年第1期22-27,共6页

从成熟的薄皮甜瓜(Cucumis melo cv.Qitian I)果肉组织中分离总RNA,经RT-PCR扩增得到0.7 kb的cDNA片段,将其克隆到质粒载体pGEM-T Easy。测序表明,该基因为777 bp,编码258个氨基酸,与Gen-Bank中甜瓜1-氨基环丙烷-1-羧酸合成酶(1-aminocy... 从成熟的薄皮甜瓜(Cucumis melo cv.Qitian I)果肉组织中分离总RNA,经RT-PCR扩增得到0.7 kb的cDNA片段,将其克隆到质粒载体pGEM-T Easy。测序表明,该基因为777 bp,编码258个氨基酸,与Gen-Bank中甜瓜1-氨基环丙烷-1-羧酸合成酶(1-aminocyclopropane-1-carboxylate synthase,ACS)基因比对,核苷酸同源性为99%,氨基酸同源性为98%。克隆片段经双酶切消化,反向插入到植物表达载体pCAM2301的E8启动子和NOS终止子之间,构建成E8调控下ACS基因反义表达载体。通过冻融法将携带反义cDNA的植物表达载体质粒转入根癌农杆菌LBA4404,得到了完整的Ti质粒表达载体系统。 展开更多

关键词 薄皮甜瓜 acc合成酶基因 反义基因 反义表达载体

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农杆菌介导蝴蝶兰的遗传转化研究 被引量：7

5

作者 崔波 蒋素华 +3 位作者 牛苏燕 袁秀云 马杰 叶永忠 《河南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期642-645,650,共5页

采用根癌农杆菌介导法,将ACC合成酶反义基因导入蝴蝶兰原球茎中,比较不同PPT筛选压力、Mer浓度和侵染时间等对蝴蝶兰转化的影响,优化蝴蝶兰的遗传转化体系.结果表明,在OD600值为0.2～0.3的农杆菌菌液中侵染120 min后,放入含有20 mg.L-1... 采用根癌农杆菌介导法,将ACC合成酶反义基因导入蝴蝶兰原球茎中,比较不同PPT筛选压力、Mer浓度和侵染时间等对蝴蝶兰转化的影响,优化蝴蝶兰的遗传转化体系.结果表明,在OD600值为0.2～0.3的农杆菌菌液中侵染120 min后,放入含有20 mg.L-1Mer和2.0 mg.L-1PPT的筛选培养基中的原球茎,遗传转化效率最高. 展开更多

关键词 蝴蝶兰 acc合成酶基因 遗传转化

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番茄1-氨基环丙烷羧酸ACC合成酶基因的克隆及其反义基因表达载体的构建 被引量：1

6

作者 李小娟 邵寒霜 郑学勤 《热带作物学报》 CSCD 1999年第1期34-37,共4页

从成熟番茄果实中分离mRNA，以Oligo（dT）为引物在AMV逆转录酶作用下合成ACC2cDNA第一链，以cDNA为模板通过PCR扩增ACC2基因，获得1.45kb的扩增片段，将此片段克隆到BS质粒的EcoRV位点上，对插入片段两端进行部分序列分析，随后，将此... 从成熟番茄果实中分离mRNA，以Oligo（dT）为引物在AMV逆转录酶作用下合成ACC2cDNA第一链，以cDNA为模板通过PCR扩增ACC2基因，获得1.45kb的扩增片段，将此片段克隆到BS质粒的EcoRV位点上，对插入片段两端进行部分序列分析，随后，将此片段以反方向插入双元载体pBI151的35S启动子和NOS终止子之间，通过三条交配法将携带反义ACC2基因的中间表达载体pBA7转入根癌农杆菌LBA4404，得到了完整的Ti质粒表达载体系统。 展开更多

关键词 acc合成酶基因 PCR 反义基因

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番茄1位氨基环丙烷羧酸(ACC)合成酶基因的分离和克隆 被引量：1

7

作者 刘中大 仇润祥 +2 位作者 王永胜 张晓海 扈廷茂 《内蒙古大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 1998年第4期548-551,共4页

以番茄基因组ＤＮＡ为模板，利用多聚酶链反应技术（ＰＣＲ）将ＬＥ－ＡＣＣ２基因的编码区的第四外显子进行扩增．所得的ＤＮＡ扩增片段克隆至质粒ｐＥＧＭ－３ｚｆ（＋）的ＢａｍＨＩ和ＨｉｎｄⅢ位点之间，并用限制内切酶酶切、ＰＣ... 以番茄基因组ＤＮＡ为模板，利用多聚酶链反应技术（ＰＣＲ）将ＬＥ－ＡＣＣ２基因的编码区的第四外显子进行扩增．所得的ＤＮＡ扩增片段克隆至质粒ｐＥＧＭ－３ｚｆ（＋）的ＢａｍＨＩ和ＨｉｎｄⅢ位点之间，并用限制内切酶酶切、ＰＣＲ扩增及ＤＮＡ序列分析等手段证实已获得ＬＥ－ＡＣＣ２第四外显子序列的克隆．该克隆的碱基序列与国外报道的相关序列相一致，本文还对该基因的反义片段在番茄延熟品种培育上的意义进行了阐述和探讨． 展开更多

关键词 番茄 acc合成酶基因 基因 分离 克隆

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牡丹ACS基因克隆及序列分析 被引量：3

8

作者 高水平 魏春梅 +3 位作者 刘改秀 王丽娜 孔祥生 范丙友 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2013年第3期100-102,106,共4页

ACC合成酶(ACS)是乙烯生物合成的关键酶。为了明确牡丹ACC合成酶基因的结构,基于报道的牡丹ACScDNA(DQ337250)序列,设计一对特异性PCR扩增引物,以洛阳红牡丹(Paeonia suffuticosa Andr.)新鲜叶片总DNA为模板,用高保真DNA聚合酶KOD-Plus... ACC合成酶(ACS)是乙烯生物合成的关键酶。为了明确牡丹ACC合成酶基因的结构,基于报道的牡丹ACScDNA(DQ337250)序列,设计一对特异性PCR扩增引物,以洛阳红牡丹(Paeonia suffuticosa Andr.)新鲜叶片总DNA为模板,用高保真DNA聚合酶KOD-Plus成功地扩增出长度约为2 200bp的PCR产物;用pMD18-T载体对PCR产物进行了克隆,测序结果表明,牡丹ACS基因序列全长2 251bp,含4个外显子和3个内含子,剪接位点均为保守的5′供位GU与3′受位AG模式,4个外显子分别居于1-174、267-398、483-643、1 240-2 251bp;序列已提交至GenBank数据库,其登录号为FJ769773;牡丹ACS蛋白由492个氨基酸组成,与苹果、枇杷、西洋梨、天竺葵等ACS的相似性达74%～76%;生物信息学分析预测牡丹ACS蛋白的分子量为54.9kD,等电点为6.8,是一个定位于细胞质的不稳定的非分泌亲水蛋白。 展开更多

关键词 牡丹 acc合成酶基因 基因序列 克隆 生物信息学分析

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桃基因组ACC合成酶基因的分离及其生物信息学分析

9

作者 邹爱兰 陈崇顺 《江苏农业科学》 CSCD 北大核心 2005年第3期82-85,共4页

根据桃(PrunuspersicaL.Batch)品种Hakuho中与成熟相关的ACC合成酶基因cDNA序列,设计了两对特异引物,从新白花水蜜桃基因组DNA中,利用PCR方法扩增得到两个片段,经过拼接获得了ACC合成酶基因的完整序列(GenBankaccession:AY994054),并对... 根据桃(PrunuspersicaL.Batch)品种Hakuho中与成熟相关的ACC合成酶基因cDNA序列,设计了两对特异引物,从新白花水蜜桃基因组DNA中,利用PCR方法扩增得到两个片段,经过拼接获得了ACC合成酶基因的完整序列(GenBankaccession:AY994054),并对其进行了生物信息学分析。该序列全长2496bp,包括4个外显子和3个内含子,4个外显子共长1479bp。桃ACC合成酶基因编码区与蔷薇科梅(Prunusmume)和梨(Pyrus communis)的同源性分别为98%和84%,除终止密码子外,编码492个氨基酸,其中有SLSKDMGLPGLR共12个氨基酸残基的保守区,被认为是ACC合成酶的活性中心,位于274至285氨基酸残基处。推测其酶蛋白分子量为55kDa,pI为8.26。 展开更多

关键词 桃 基因组 acc合成酶基因 分离 生物信息学

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反义RNA技术在培育延熟保鲜蔬菜新品种上应用 被引量：1

10

作者 郭庆勋 陈柏杰 秦智伟 《北方园艺》 CAS 北大核心 2004年第3期88-89,共2页

关键词 蔬菜 品种 培育 反义RNA技术 乙烯 acc合成酶基因

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龙眼胚性愈伤组织ACC合成酶基因(DL-ACS1)的克隆及表达分析 被引量：2

11

作者 李惠华 赖钟雄 +1 位作者 苏明华 林玉玲 《热带作物学报》 CSCD 2011年第5期854-860,共7页

以龙眼(Dimocarpus longan Lour.)胚性愈伤组织为材料,采用同源克隆和RACE方法分离得到龙眼胚性愈伤组织乙烯合成限速酶DL-ACS1(1-aminocyclopropane-1-carboxylate synthase)基因的cDNA全长序列(GenBank,FJ617537),共1 817 bp,包含了5&... 以龙眼(Dimocarpus longan Lour.)胚性愈伤组织为材料,采用同源克隆和RACE方法分离得到龙眼胚性愈伤组织乙烯合成限速酶DL-ACS1(1-aminocyclopropane-1-carboxylate synthase)基因的cDNA全长序列(GenBank,FJ617537),共1 817 bp,包含了5'非编码区(73 bp),开放阅读框(1 437 bp),3'非编码区(307 bp)。该cDNA开放阅读框的氨基酸序列(含478个氨基酸)与其它植物ACS具有77%～63%同源性,属于ACC Synthase家族。实时荧光定量PCR分析表明,该基因在龙眼体细胞胚胎(以下简称龙眼体胚)各阶段的表达量存在较大的时期差异,其中,球形胚(Stage 5)的表达量最高,鱼雷形胚(Stage 7)的表达量最低。 展开更多

关键词 龙眼 胚性愈伤组织 acc合成酶基因 基因克隆 实时荧光定量PCR

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牡丹ACC合成酶ACS1基因的克隆与原核表达 被引量：1

12

作者 张超 张玉环 +1 位作者 贾培义 董丽 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期97-100,共4页

从牡丹‘洛阳红’(Paeonia suffruticosa‘Luo Yang Hong’)花瓣中提取总RNA,根据GenBank上牡丹ACC合成酶基因PsACS的序列设计引物,通过RT-PCR获得牡丹PsACS1基因序列,包含一个1 479 bp的开放阅读框,编码492个氨基酸。将PsACS1基因cDNA... 从牡丹‘洛阳红’(Paeonia suffruticosa‘Luo Yang Hong’)花瓣中提取总RNA,根据GenBank上牡丹ACC合成酶基因PsACS的序列设计引物,通过RT-PCR获得牡丹PsACS1基因序列,包含一个1 479 bp的开放阅读框,编码492个氨基酸。将PsACS1基因cDNA片段与pET28a(+)构建原核表达载体pET-ACS1,转化大肠杆菌E.coli BL21(DE3)。0.4 mmol/LIPTG诱导3 h后,在预期的蛋白分子量55 kD处出现1条表达加强的蛋白条带。为进一步目的蛋白的纯化和鉴定提供试验基础。 展开更多

关键词 牡丹 acc合成酶基因 克隆 原核表达

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美国农业部批准DNAP的遗传改良番茄 被引量：1

13

作者 朱遐 《生物技术通报》 CAS CSCD 1995年第6期20-21,共2页

DNA Plant Technology Corporation（DNAP）已接到美国农业部（USDA）的通知,从1995年1月17日起,DNAP的遗传工程晚熟番茄不再受到限制。因在此之前DNAP受到美国食品与药物管理局（FDA）的检查,所以USDA的这项决定完全取消了对DNAP的限制... DNA Plant Technology Corporation（DNAP）已接到美国农业部（USDA）的通知,从1995年1月17日起,DNAP的遗传工程晚熟番茄不再受到限制。因在此之前DNAP受到美国食品与药物管理局（FDA）的检查,所以USDA的这项决定完全取消了对DNAP的限制,使其从现在起可以在全美自由培育,运输和销售其遗传工程番茄。DNAP计划从3月份开始,以Fresh World Farms Endless Summer^TM为商标试销其番茄。 DNAP首席执行官Robert Sereabetz高兴地说:“我们非常高兴地获悉对我们首种遗传工程产品的限制已经解除。”“我们正在平稳地推进3月份的试销活动。 展开更多

关键词 遗传改良 美国农业部 番茄 DNAP 遗传工程 美国食品与药物管理局 货架寿命 acc合成酶基因 工程改良 首席执行官

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反义ACC合成酶基因导入番茄的研究 被引量：8

14

作者 曾黎琼 张绍松 +4 位作者 柴红梅 王敬乔 李成云 张云孙 罗云波 《云南大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 2002年第5期393-397,共5页

采用农杆菌介导法将携带有反义ACC合成酶基因和NPTII的表达载体 pKAC导入番茄栽培品种美国大红五星 10 2、美国大红 10 8、美国大红王、大红II号等中 .经过卡那霉素筛选后 ,获得了一批抗性苗 ,其中有 3株PCR检测为阳性 .实验证明 ,不同... 采用农杆菌介导法将携带有反义ACC合成酶基因和NPTII的表达载体 pKAC导入番茄栽培品种美国大红五星 10 2、美国大红 10 8、美国大红王、大红II号等中 .经过卡那霉素筛选后 ,获得了一批抗性苗 ,其中有 3株PCR检测为阳性 .实验证明 ,不同激素配比对番茄子叶不定芽的诱导有一定影响 ,适宜的农杆菌侵染时间和浓度是番茄基因转化成功与否的关键 。 展开更多

关键词 农杆菌介导法 番茄 反义acc合成酶基因 延迟选择 转基因植物 基因转化 遗传育种

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果实特异启动子调控薄皮甜瓜ACC合成酶反义基因植物表达载体的构建 被引量：6

15

作者 郭庆勋 秦智伟 +1 位作者 丁国华 周秀艳 《中国农学通报》 CSCD 2006年第1期34-37,共4页

从成熟的薄皮甜瓜(齐甜1号)果肉组织中提取总DNA,经PCR扩增得到约0.5kb的ACC合成酶基因的片段,将其克隆到质粒载体pMD18-T中,测序表明,该基因为583bp,编码194个氨基酸;从番茄(东农706)叶片组织中提取总DNA,经PCR扩增得到约2.2kb的E8基... 从成熟的薄皮甜瓜(齐甜1号)果肉组织中提取总DNA,经PCR扩增得到约0.5kb的ACC合成酶基因的片段,将其克隆到质粒载体pMD18-T中,测序表明,该基因为583bp,编码194个氨基酸;从番茄(东农706)叶片组织中提取总DNA,经PCR扩增得到约2.2kb的E8基因片段,将其克隆到质粒载体pGEM-TEasy中,测序表明,该基因为2192bp;以pCAM2301为起始植物表达载体,pCAM-GT为中间载体,成功构建了果实特异启动子(E8)调控薄皮甜瓜ACC合成酶反义基因植物表达载体,采用冻融法将其转入根癌农杆菌LBA4404,得到了完整的Ti质粒表达载体系统。 展开更多

关键词 薄皮甜瓜 番茄 反义acc合成酶基因 特异启动子 植物表达载体

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次郎柿ACC合成酶的转基因工艺研究 被引量：4

16

作者 申晓鸿 马俊莲 +2 位作者 张子德 唐霞 张丽 《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期29-32,共4页

为获得抗软化的转基因柿果,初步建立了次郎柿转基因工艺。预培养时间为4 d;菌液OD600值为0.5,侵染时间10 min;共培养时间3 d;壮观霉素适宜浓度为30 mg/L。在此条件下,获得了次郎柿ACC合成酶的RNA干扰基因转基因苗。经PCR检测,得到8个转... 为获得抗软化的转基因柿果,初步建立了次郎柿转基因工艺。预培养时间为4 d;菌液OD600值为0.5,侵染时间10 min;共培养时间3 d;壮观霉素适宜浓度为30 mg/L。在此条件下,获得了次郎柿ACC合成酶的RNA干扰基因转基因苗。经PCR检测,得到8个转基因植株。 展开更多

关键词 次郎柿 acc合成酶基因(ACS) 转基因

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根癌农杆菌介导的磨盘柿遗传转化体系的优化 被引量：2

17

作者 尹虹 宋春丽 +2 位作者 马俊莲 张子德 唐霞 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2007年第2期56-59,共4页

以磨盘柿叶片为外植体,通过农杆菌介导法,建立了ACC合成酶基因(ACS)遗传转化体系。研究了预培养时间、农杆菌菌液浓度、侵染时间、共培养时间和乙酰丁香酮(AS)浓度等因素对基因转化的影响。结果表明:适宜的预培养时间为2 d;用OD600值为... 以磨盘柿叶片为外植体,通过农杆菌介导法,建立了ACC合成酶基因(ACS)遗传转化体系。研究了预培养时间、农杆菌菌液浓度、侵染时间、共培养时间和乙酰丁香酮(AS)浓度等因素对基因转化的影响。结果表明:适宜的预培养时间为2 d;用OD600值为1.0的菌液侵染15 min、共培养3 d,AS浓度200μmol/L有利于提高转化频率。经PCR分子检测,初步确定ACC合成酶基因已转入磨盘柿组培苗中。 展开更多

关键词 磨盘柿 根癌农杆菌 acc合成酶基因(ACS) 遗传转化

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ACC合成酶基因技术在培育延熟保鲜果品上的应用 被引量：3

18

作者 何业华 官春云 +1 位作者 林良斌 熊兴华 《经济林研究》 2000年第4期26-28,共3页

关键词 acc合成酶基因技术 果品 延熟保鲜 贮藏

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果实特异启动子调控薄皮甜瓜ACC合成酶cDNA反义表达载体的构建 被引量：1

19

作者 郭庆勋 秦智伟 李景鹏 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期411-414,共4页

应用反义RNA技术抑制甜瓜成熟过程中内源乙烯的合成,从而培育耐贮运品种是解决甜瓜延熟保鲜难题的可行新方法。根据GenBank中甜瓜、黄瓜ACC合成酶基因氨基酸保守序列设计引物,从成熟的薄皮甜瓜(齐甜1号)果肉组织中提取总RNA,经RT-PCR扩... 应用反义RNA技术抑制甜瓜成熟过程中内源乙烯的合成,从而培育耐贮运品种是解决甜瓜延熟保鲜难题的可行新方法。根据GenBank中甜瓜、黄瓜ACC合成酶基因氨基酸保守序列设计引物,从成熟的薄皮甜瓜(齐甜1号)果肉组织中提取总RNA,经RT-PCR扩增得到约0.7kb的ACC合成酶cDNA片段,将其克隆到质粒载体pGEM-TEasy中,测序表明,该基因为777bp,编码258个氨基酸;从番茄(东农706)叶片组织中提取总DNA,经PCR扩增得到约2.2kb的E8基因片段,将其克隆到质粒载体pGEM-TEasy中,测序表明,该基因为2192bp;以pCAM2301为起始植物表达载体,pCAM-GT为中间载体,成功构建了果实特异启动子(E8)调控薄皮甜瓜ACC合成酶cDNA反义表达载体,采用冻融法将其转入根癌农杆菌LBA4404,得到了完整的Ti质粒表达载体系统。 展开更多

关键词 薄皮甜瓜 反义acc合成酶基因 特异启动子 植物表达载体

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根癌农杆菌介导反义ACC合成酶基因对枣树的转化 被引量：18

20

作者 何业华 熊兴华 +4 位作者 林顺权 吴会桃 林良斌 何钢 陈建华 《湖南农业大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期33-36,共4页

以枣树鲜食品种鸡蛋枣为材料,通过根癌农杆菌介导ACC合成酶反义基因转化,得到了转基因植株.预培养1d的枣树幼嫩茎段经根癌农杆菌感染后共培养3d,转移至分化选择培养基MS(1/2NO3)+0.15mg/LNAA+1.75mg/LZT+10mg/LKm+500mg/LCarb上诱导产... 以枣树鲜食品种鸡蛋枣为材料,通过根癌农杆菌介导ACC合成酶反义基因转化,得到了转基因植株.预培养1d的枣树幼嫩茎段经根癌农杆菌感染后共培养3d,转移至分化选择培养基MS(1/2NO3)+0.15mg/LNAA+1.75mg/LZT+10mg/LKm+500mg/LCarb上诱导产生不定芽,将抗Km不定芽先后在15mg/LKm的生长、增殖和生根培养基上继续选择,诱导成完整植株.经PCR检测从抗Km植株中选择到7株阳性植株,进一步经Southern杂交证实有6株外源基因已整合到了枣树基因组中.Real timePCR定量检测表明,ACC合成酶反义基因在5株转基因植株中得到表达. 展开更多

关键词 枣树 acc合成酶反义基因 转化

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