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基于2L1D项目化教学模式的探索与实践——以《数据库系统》课程为例 被引量:1
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作者 窦慧敏 刘华敏 《电脑知识与技术》 2023年第4期72-74,共3页
数据库系统课程内容丰富,既有系统的理论知识,又有较强的实操内容,一直作为高校计算机专业学生的基础课程,但是学生对数据库系统知识的了解和掌握十分片面,甚至只会用SQL语言进行简单的操作。文章将2L1D项目化教学模式应用于该课程中,... 数据库系统课程内容丰富,既有系统的理论知识,又有较强的实操内容,一直作为高校计算机专业学生的基础课程,但是学生对数据库系统知识的了解和掌握十分片面,甚至只会用SQL语言进行简单的操作。文章将2L1D项目化教学模式应用于该课程中,提出了该课程基于2L1D的项目化教学模式的设计。实践证明,这种教学模式可以使学生主动参与学习和实践,提高教学质量。 展开更多
关键词 数据库系统 2l1D 项目化 教学模式
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构建以RACK1为核心口腔鳞状细胞癌差异基因间相互作用的关系网路 被引量:6
2
作者 郑建伟 利小平 +5 位作者 董俊英 曾宪丽 梁友龙 韩帮峰 杨德群 罗刚 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2015年第18期2911-2916,共6页
背景:RACK1与口腔鳞状细胞癌的发生发展密切相关,但肿瘤的发生发展不是一个基因或蛋白决定的,是多基因、多分子呈网络结构,多步骤、多阶段共同作用的长期复杂过程,各肿瘤基因之间相互协同作用促使肿瘤细胞形成和发展。因此要揭示口腔鳞... 背景:RACK1与口腔鳞状细胞癌的发生发展密切相关,但肿瘤的发生发展不是一个基因或蛋白决定的,是多基因、多分子呈网络结构,多步骤、多阶段共同作用的长期复杂过程,各肿瘤基因之间相互协同作用促使肿瘤细胞形成和发展。因此要揭示口腔鳞状细胞癌的作用机制将不能局限于单个蛋白或基因,而要着眼于与口腔鳞状细胞癌差异蛋白或基因相关的信号网络通路,研究整个信号通路中相关蛋白或基因的表达变化,进而分析研究这些分子之间的相互作用机制。目的:筛选出的口腔鳞状细胞癌相关差异基因,使用STRING数据库通过生物信息学的方法构建它们之间的相互作用关系网络,为后续实验提供线索。方法:根据作者所在课题组前期口腔鳞状细胞癌的经典蛋白组学实验结果和基因表达谱芯片实验的数据结果,选择表达一致且差异相对较大的基因作为实验的差异基因。将筛选的差异基因输入STRING数据库进行分析,找出差异基因对应蛋白之间的可能作用关系,构建相互作用网络结构图。结果与结论:口腔鳞状细胞癌的19个差异基因对应蛋白相互间构成一个复杂的作用网络,各差异蛋白间通过多条相互作用通路进行调节,RACK1蛋白是整个网络的节点蛋白。GNB2L1的编码蛋白RACK1蛋白通过WD40重复蛋白亚基(编号COG2319)和β-G蛋白亚基(编号KOG0279)与其他差异蛋白的亚基间相互作用。其中WD40重复蛋白(编号COG2319)与其中5个差异蛋白直接作用并构建了10条相互作用通路,β亚基G蛋白(编号KOG0279)与其中8个差异蛋白直接作用并构建了11条相互作用通路。说明通过STRING数据库分析构建了这19个差异基因相互作用的结构网络图发现RACK1蛋白的2个亚基共与8个相关差异蛋白直接作用,产生18条相互作用通路。在这个网络结构中RACK1蛋白是中心,提示其是口腔鳞状细胞癌的一个关键节点蛋白。 展开更多
关键词 实验动物 组织构建实验模型 口腔鳞状细胞癌 差异基因 差异蛋白 RACK1 GNB2l1 STRING数据库 网络调节 作用通路 国家自然科学基金
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基于网络药理学和细胞实验探讨Hispolon抗结肠癌的作用机制 被引量:4
3
作者 李俊峰 吴力超 +4 位作者 王进 孙腾飞 赵俊慧 张婷婷 刘文洪 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第8期1151-1158,共8页
目的运用网络药理学预测和细胞实验探讨Hispolon抗结肠癌的作用机制。方法Swiss Target Prediction网站获取Hispolon的潜在靶点,与疾病数据库GeneCards、OMIM中结肠癌靶点取交集;利用STRING11.0数据库构建靶点相互作用网络,使用Cytoscap... 目的运用网络药理学预测和细胞实验探讨Hispolon抗结肠癌的作用机制。方法Swiss Target Prediction网站获取Hispolon的潜在靶点,与疾病数据库GeneCards、OMIM中结肠癌靶点取交集;利用STRING11.0数据库构建靶点相互作用网络,使用Cytoscape3.7.2软件挖掘Hispolon作用于结肠癌的核心靶点,通过Metascape数据库进行GO和KEGG富集分析,最后采用Western blot验证Hispolon对结肠癌细胞SW480中部分关键靶点的调控作用。结果筛选出Hispolon抗结肠癌作用靶点69个,核心靶点包括BCL-2L1、EP300、CDK1、AR、MTOR、EGFR;富集分析发现Hispolon通过调节癌症相关通路、PI3K-Akt信号通路、前列腺癌相关通路等发挥抗结肠癌作用,并且通路中关键靶点涉及BCL-2L1、EP300、CDK1、MTOR和EGFR核心靶点。通过细胞实验证实Hispolon可下调靶点蛋白BCL-2L1和mTOR的表达,促进SW480细胞凋亡。结论Hispolon治疗结肠癌,具有多靶点、多通路协同作用的特点,该研究为进一步阐明Hispolon抗结肠癌作用机制及临床应用提供科学依据。 展开更多
关键词 Hispolon 结肠癌 网络药理学 作用机制 细胞实验 BCl-2l1 MTOR
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基于CRISPR/Cas9技术敲除NFE2L1对肺癌A549细胞增殖的影响 被引量:4
4
作者 阎煜 周帆 +5 位作者 姜瑞敏 颜习香 唐枫玲 刘茹霞 任艳琳 任勇刚 《四川医学》 CAS 2018年第12期1318-1322,共5页
目的利用改进的CRISPR/Cas9-2hitKO技术构建核因子E2相关因子1(NFE2L1)缺失的肺癌A549细胞,并观察NFE2L1敲除对肺癌A549细胞增殖的影响。方法利用改进的CRISPR/Cas9-2hitKO基因编辑技术,将重组NFE2L1-gRNA表达载体转入肺癌A549细胞,嘌... 目的利用改进的CRISPR/Cas9-2hitKO技术构建核因子E2相关因子1(NFE2L1)缺失的肺癌A549细胞,并观察NFE2L1敲除对肺癌A549细胞增殖的影响。方法利用改进的CRISPR/Cas9-2hitKO基因编辑技术,将重组NFE2L1-gRNA表达载体转入肺癌A549细胞,嘌呤霉素筛选NFE2L1缺失的肺癌A549细胞,并通过DNA测序和Western Blot实验验证获得的A549细胞。采用CCK8和克隆形成实验观察敲除NFE2L1对肺癌A549细胞增殖的影响。结果DNA测序和Western Blot实验结果表明,成功获得稳定敲除NFE2L1的肺癌A549细胞。CCK8和克隆形成实验均表明敲除NFE2L1促进肺癌A549细胞的增殖。结论利用CRISPR/Cas9-2hitKO技术成功构建NFE2L1缺失的A549细胞,敲除NFE2L1能够促进肺癌细胞增殖。 展开更多
关键词 NFE2l1 CRISPR/Cas9 肺癌A549细胞
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TFCP2L1在子宫内膜癌细胞增殖及侵袭中的作用
5
作者 罗伊凡 余力 +5 位作者 楼利群 吕牧 余娟娟 张新宝 张箴波 覃祚树 《现代生物医学进展》 CAS 2024年第10期1801-1806,共6页
目的:研究人子宫内膜癌中TFCP2L1的表达情况以及分析TFCP2L1对子宫内膜癌细胞增殖及迁移能力的影响。方法:(1)通过TCGA及GTEx数据库分析子宫内膜癌中TFCP2L1的表达水平及患者生存期。采用Western blot验证正常子宫内膜上皮细胞与多种子... 目的:研究人子宫内膜癌中TFCP2L1的表达情况以及分析TFCP2L1对子宫内膜癌细胞增殖及迁移能力的影响。方法:(1)通过TCGA及GTEx数据库分析子宫内膜癌中TFCP2L1的表达水平及患者生存期。采用Western blot验证正常子宫内膜上皮细胞与多种子宫内膜癌细胞系中TFCP2L1的表达情况。(2)使用CRISPR-Cas9技术敲除Ishikawa细胞系的TFCP2L1,并用流式分选技术筛选单个细胞进行培养,形成单克隆细胞系,以此来研究TFCP2L1对子宫内膜癌的细胞周期和细胞增殖的影响。通过Western blot及细胞免疫荧光检测细胞周期相关蛋白的表达,检测细胞增殖情况,采用平板克隆实验及CCK8实验。(3)通过Transwell小室及划痕实验对侵袭和转移能力进行检测。结果:TCGA及GTEx数据库分析发现TFCP2L1在子宫内膜癌中高表达且与肿瘤患者预后不良相关。敲除TFCP2L1后,Ki67、Cyclin D1和Cyclin D2的蛋白水平显著下调,CCK8及平板克隆实验结果表明,敲除TFCP2L1能够显著降低子宫内膜癌细胞的增殖能力。划痕实验及Transwell侵袭实验结果表明敲除TFCP2L1的子宫内膜癌细胞侵袭迁移能力均减弱。结论:本研究证明了TFCP21L1是子宫内膜癌的促癌因子。TFCP2L1的高表达可能与子宫内膜癌预后不良相关。敲除TFCP2L1可以抑制子宫内膜癌的侵袭和转移。 展开更多
关键词 TFCP2l1 子宫内膜癌 细胞周期 细胞增殖 细胞迁移
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MAD2L1在结直肠癌中的表达及与免疫浸润关系的研究
6
作者 刘萌萌 李付广 《临床研究》 2024年第5期5-9,共5页
目的 探讨干扰有丝分裂阻滞缺陷2样蛋白1(MAD2L1)在结直肠癌组织中的表达及与免疫浸润的关系。方法 基于TCGA数据库分析结直肠癌组织及正常结直肠组织中MAD2L1的表达差异,生存分析评价MAD2L1表达水平与患者预后的关系,采用临床相关性分... 目的 探讨干扰有丝分裂阻滞缺陷2样蛋白1(MAD2L1)在结直肠癌组织中的表达及与免疫浸润的关系。方法 基于TCGA数据库分析结直肠癌组织及正常结直肠组织中MAD2L1的表达差异,生存分析评价MAD2L1表达水平与患者预后的关系,采用临床相关性分析研究结直肠癌与临床资料的相关性。使用Timer数据库gene模块分析探究MAD2L1与免疫细胞群之间的关系。使用correlation模块评估与免疫检查点水平的相关性。使用correlation模块进行免疫细胞浸润的关联分析,分析结直肠癌组织中MAD2L1的表达与免疫细胞浸润的关系。结果 与正常组织相比,结直肠癌组织中MAD2L1表达上调;MAD2L1高表达组与低表达组结直肠癌患者相比,N分期患者比例不同,差异具有统计学意义(P<0.05)。预后分析显示,MAD2L1高表达组的患者生存期、无进展生存期均高于低表达组的患者,差异具有统计学意义(P<0.05)。多因素COX回归分析显示,年龄和T分期可作为影响结直肠癌患者预后的独立预后因子(P<0.05)。MAD2L1与结直肠癌中CD8^(+)T细胞(结肠癌:r=0.315,P<0.001;直肠癌r=0.352,P<0.001)、嗜中性粒细胞(结肠癌:r=0.195,P<0.001;直肠癌:r=0.278,P<0.001)浸润水平均呈正相关,与CD4^(+)T细胞(结肠癌:r=-0.174,P<0.001;直肠癌:r=-0.381,P<0.001)浸润水平呈负相关。其中还与结肠癌中B细胞水平(r=0.125,P<0.05)呈正相关。在结肠癌中,MAD2L1与PD-L1(r=0.159,P<0.05)呈正相关。在直肠癌中,MAD2L1与PD-1(r=-0.241,P<0.05)呈负相关。结论 MAD2L1在结直肠癌中高表达,与结直肠癌良好的预后及肿瘤免疫浸润相关,可能是结直肠癌患者潜在的治疗靶点。 展开更多
关键词 MAD2l1 结直肠癌 免疫浸润 预后
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转MdSOS2L1基因苹果植株根际微生物多样性的研究 被引量:4
7
作者 王晓娜 王小非 +4 位作者 安建平 马齐军 胡大刚 周波 郝玉金 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期333-340,共8页
以野生型‘嘎拉’苹果和转MdSOS2L1基因植株为试材,利用高通量测序技术研究转MdSOS2L1苹果植株对根际微生物的影响。结果表明,转基因与野生型植株根际微生物群落丰富度和多样性存在较大差异,其中原核微生物群落变化最为明显。转MdSOS2L... 以野生型‘嘎拉’苹果和转MdSOS2L1基因植株为试材,利用高通量测序技术研究转MdSOS2L1苹果植株对根际微生物的影响。结果表明,转基因与野生型植株根际微生物群落丰富度和多样性存在较大差异,其中原核微生物群落变化最为明显。转MdSOS2L1植株根际酸杆菌门丰度增加较多,蓝藻、放线菌门丰度略有下降。同时,转基因植株根际土壤pH值低于野生型,并且转基因植株根际土壤的苹果酸、柠檬酸、草酸含量明显升高,两者非根际土无明显差异,转基因植株根际微生物的差异极有可能与MdSOS2L1基因介导的有机酸分泌有关。 展开更多
关键词 苹果 MdSOS2l1 根际微生物多样性 高通量测序 有机酸
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基于CRISPR/Cas9系统定点编辑小鼠MAD2L1基因及其脱靶效应分析 被引量:4
8
作者 陈丽香 彭秀华 +5 位作者 谭丹 韩铖潇 赵锐 王超 李顺 周晓辉 《中国实验动物学报》 CSCD 北大核心 2017年第6期587-593,共7页
目的建立利用CRISPR/Cas9系统对小鼠MAD2L1基因第二外显子基因编辑的方法体系,并分析CRISPR/Cas9对MAD2L1基因编辑的脱靶效应。方法通过CHOPCHOP网站设计位于小鼠MAD2L1基因第二外显子的靶点序列,并构建Cas9-MAD2L1载体,将该载体转染到N... 目的建立利用CRISPR/Cas9系统对小鼠MAD2L1基因第二外显子基因编辑的方法体系,并分析CRISPR/Cas9对MAD2L1基因编辑的脱靶效应。方法通过CHOPCHOP网站设计位于小鼠MAD2L1基因第二外显子的靶点序列,并构建Cas9-MAD2L1载体,将该载体转染到NIH/3T3细胞中,通过嘌呤霉素筛选并结合荧光显微镜观察GFP后,提取细胞转染后的基因组DNA,利用PCR方法,结合T7E1分析和桑格尔测序,鉴定对小鼠MAD2L1基因编辑情况,并对转染后的NIH/3T3细胞进行CRISPR/Cas9脱靶效应分析。结果将Cas9-MAD2L1载体转染到NIH/3T3细胞并进行嘌呤霉素筛选后,荧光显微镜下观察到大量表达GFP的细胞,PCR结合T7E1结果显示,以转染后的细胞DNA为模板扩增出的228 bp MAD2L1 PCR产物,可被酶切成166 bp和62 bp片段,测序结果显示,成功对MAD2L1基因第二外显子靶点处进行基因编辑,脱靶效应分析未检测到CRISPR/Cas9有对脱靶位点进行基因编辑。结论成功建立对小鼠MAD2L1基因第二外显子进行基因编辑的方法体系,设计的对MAD2L1基因编辑靶点未检测到脱靶效应的发生。 展开更多
关键词 CRISPR/Cas9 小鼠 MAD2l1 脱靶效应
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MAD2L1在肺腺癌中的表达及对免疫微环境的影响 被引量:4
9
作者 刘迎博 刘晓红 +1 位作者 茹美华 李建强 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 2022年第6期586-592,共7页
目的探讨MAD2L1在肺腺癌组织中的表达对患者预后及免疫微环境的影响。方法通过TCGA和GEO数据库分析在肺腺癌组织及正常肺组织样本中MAD2L1的表达差异,生存分析评价其表达水平与患者预后的关系,StarBase数据库构建肺腺癌miRNA-MAD2L1调... 目的探讨MAD2L1在肺腺癌组织中的表达对患者预后及免疫微环境的影响。方法通过TCGA和GEO数据库分析在肺腺癌组织及正常肺组织样本中MAD2L1的表达差异,生存分析评价其表达水平与患者预后的关系,StarBase数据库构建肺腺癌miRNA-MAD2L1调控网络,分析肺腺癌组织中MAD2L1的表达与免疫细胞浸润的关系。结果肺腺癌组织中MAD2L1表达上调且MAD2L1高表达与肺腺癌的病理分期、淋巴结转移显著相关,MAD2L1表达水平高的肺腺癌患者预后较差,miR-101-3p/MAD2L1轴被确定为MAD2L1在肺腺癌中最有潜力的上游调控相关途径,MAD2L1表达水平与肿瘤免疫细胞浸润和免疫检查点表达呈显著相关。结论MAD2L1在肺腺癌组织中高表达,与肺腺癌不良预后及肿瘤免疫浸润相关,可作为肺腺癌患者治疗的潜在靶点。 展开更多
关键词 MAD2l1 肺腺癌 预后 免疫浸润 免疫微环境
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结直肠癌组织中MAD2L1的表达及与预后的关系
10
作者 章芳芳 李宁君 +1 位作者 陈福娟 朱伟君 《临床与实验病理学杂志》 CAS 北大核心 2024年第6期649-651,655,共4页
目的探讨有丝分裂阻滞缺陷蛋白2(mitotic arrest deficient 2-like 1,MAD2L1)在结直肠癌组织中的表达及与预后的关系。方法收集259例结直肠癌患者的临床病理资料,采用免疫组化SP法检测结直肠癌组织中MAD2L1的表达,分析MAD2L1表达与结直... 目的探讨有丝分裂阻滞缺陷蛋白2(mitotic arrest deficient 2-like 1,MAD2L1)在结直肠癌组织中的表达及与预后的关系。方法收集259例结直肠癌患者的临床病理资料,采用免疫组化SP法检测结直肠癌组织中MAD2L1的表达,分析MAD2L1表达与结直肠癌临床病理特征的关系及其对患者5年生存期的影响。结果TCGA和GTEx数据库分析结果显示,结直肠癌组织中MAD2L1 mRNA表达量显著高于癌旁组织;免疫组化结果显示,结直肠癌组织中MAD2L1表达水平均高于癌旁正常组织。259例结直肠癌组织中148例呈MAD2L1高表达,111例呈低表达。生存分析结果显示,MAD2L1低表达组患者5年生存率高于高表达组(67.57%vs 49.32%);按病变部位分析,MAD2L1高表达的结肠癌和直肠癌患者5年生存率均低于低表达患者(47.25%vs 73.21%;52.53%vs 65.38%)。结论MAD2L1在结直肠癌组织中高表达,可能与患者预后不良有关,是预测结直肠癌的潜在标志物。 展开更多
关键词 结直肠肿瘤 MAD2l1 预后 总生存率
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双荧光素酶报告基因系统验证hsa-miR-326对BCL2L1、BAK1的靶向调控 被引量:3
11
作者 俞石芳 李强 +2 位作者 洪俊英 金陈华 陈碧乐 《中国卫生检验杂志》 北大核心 2014年第8期1156-1158,共3页
目的构建psiCHECK2荧光素酶报告基因载体,验证hsa-miR-326对BCL2L1和BAK1表达的影响。方法设计合成包含与hsa-miR-326结合序列及其突变型序列的BCL2L1和BAK1基因片段,构建荧光素酶报告基因载体,转染293T细胞,通过荧光素酶活性变化观察hs... 目的构建psiCHECK2荧光素酶报告基因载体,验证hsa-miR-326对BCL2L1和BAK1表达的影响。方法设计合成包含与hsa-miR-326结合序列及其突变型序列的BCL2L1和BAK1基因片段,构建荧光素酶报告基因载体,转染293T细胞,通过荧光素酶活性变化观察hsa-miR-326对BCL2L1和BAK1表达的影响。结果 hsa-miR-326对BCL2L1组的荧光表达有非常显著的抑制作用(P<0.01);而对BCL2L1-mut、BAK1和BAK1-mut组的荧光表达没有显著的抑制作用(P>0.05)。结论 hsa-miR-326可以调控BCL2L1的表达,但对BAK1的表达未见影响,推测hsa-miR-326可能通过下调BCL2L1参与血小板的凋亡。 展开更多
关键词 hsa-miR-326 双荧光素酶报告基因 BCl2l1 BAK1
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多模态影像分子体外验证触液神经元的神经干细胞特性 被引量:1
12
作者 罗张荣 曹亮 +2 位作者 张毅 皮文俊 李青 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2023年第34期5505-5509,共5页
背景:最近研究发现位于脊髓中央管附近的接触脑脊液神经元(简称触液神经元)具有神经干细胞潜能,但触液神经元在体外研究中纯度不高,且目前尚无体外示踪技术证明其神经干细胞特性。目的:通过多模态影像分子筛选并在体外验证触液神经元的... 背景:最近研究发现位于脊髓中央管附近的接触脑脊液神经元(简称触液神经元)具有神经干细胞潜能,但触液神经元在体外研究中纯度不高,且目前尚无体外示踪技术证明其神经干细胞特性。目的:通过多模态影像分子筛选并在体外验证触液神经元的神经干细胞特性。方法:根据触液神经元特异性表达Pkd2l1基因,针对Pkd2l1基因上游启动子设计一种使触液神经元特异性表达绿色荧光蛋白(GFP)的多模态影像分子慢病毒(Lentivirus-Pkd2l1-GFP-puromycin-luciferase)。从出生24 h内C57BL/6小鼠延髓组织中提取出原代神经干细胞贴壁培养,用多模态影像分子病毒转染含有触液神经元的原代神经干细胞,通过嘌呤霉素筛选并纯化触液神经元。对筛选纯化的触液神经元进行体外悬浮培养并连续传代4代以上,免疫荧光检测第3代触液神经元与神经干细胞标记物Nestin、Sox2共表达情况。通过对第3代触液神经元诱导分化培养,免疫荧光检测触液神经元与神经元标记物NeuN、星形胶质细胞标记物S100β、少突胶质细胞标记物O4的共表达情况。结果与结论:成功构建出多模态影像分子慢病毒,并且筛选纯化后的触液神经元能够存活、增殖并表达绿色荧光蛋白。绿色荧光蛋白阳性触液神经元能在体外连续传代4代以上,并表达神经干细胞标记物Nestin、Sox2。诱导分化后,绿色荧光蛋白阳性触液神经元表达神经元标记物NeuN、星形胶质细胞标记物S100β、少突胶质细胞标记物O4。结果表明:多模态影像分子病毒能特异性标记触液神经元,触液神经元在体外具有自我更新、多向分化能力,通过多模态影像分子在体外成功验证触液神经元具有神经干细胞特性。 展开更多
关键词 触液神经元 神经干细胞 多模态影像分子 慢病毒 Pkd2l1
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LINC00963通过miR-146a-5p/NFE2L1轴调控胃癌细胞增殖、迁移和侵袭的机制研究 被引量:2
13
作者 徐万苏 柯飞 +1 位作者 许怡 郑艺 《世界华人消化杂志》 CAS 2021年第13期690-700,共11页
背景长基因间非编码RNA 00963(long intergene non-coding RNA 00963,LINC00963)在肿瘤表达上调,但LINC00963在胃癌中的功能和作用机制并未阐明.Starbase预测显示微小RNA(microRNA,miR)-146a-5p可能是LINC00963的靶基因,核因子类红细胞... 背景长基因间非编码RNA 00963(long intergene non-coding RNA 00963,LINC00963)在肿瘤表达上调,但LINC00963在胃癌中的功能和作用机制并未阐明.Starbase预测显示微小RNA(microRNA,miR)-146a-5p可能是LINC00963的靶基因,核因子类红细胞2相关因子1(nuclear factor erythroid-2 like 1,NFE2L1)可能是miR-146a-5p的靶基因.本研究假设LINC00963可能通过调控miR-146a-5p/NFE2L1轴表达影响胃癌细胞增殖、迁移和侵袭.目的探讨LINC00963对胃癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及分子机制.方法选取42例胃癌患者的癌组织及癌旁组织,实时定量PCR(RT-qPCR)检测胃癌组织中LINC00963表达水平;RT-qPCR检测胃癌细胞系SNU-1、AGS、HS-746T中LINC00963、miR-146a-5p和NFE2L1 mRNA的表达水平;将胃癌细胞SNU-1分为正常对照(NC)组、si-LINC00963组、si-NFE2L1组、si-NC组、miR-146a-5p组、miR-NC组、si-LINC00963+pcDNA-NC组、si-LINC00963+pcDNA-NFE2L1组;CCK-8检测细胞活性;Transwell检测细胞迁移和侵袭;双荧光素酶报告实验检测LINC00963、miR-146a-5p、NFE2L1之间的靶向关系.结果胃癌组织及胃癌细胞系SNU-1、AGS、HS-746T中LINC00963表达水平升高,胃癌细胞系中miR-146a-5p表达水平降低,NFE2L1 mRNA表达水平升高(P<0.05).LINC00963、NFE2L1低表达或miR-146a-5p高表达,胃癌细胞SNU-1的活性降低,细胞迁移和侵袭数量减少(P<0.05).高表达NFE2L1可以逆转LINC00963低表达对SNU-1细胞的作用.LINC00963靶向调控miR-146a-5p;miR-146a-5p靶向调控NFE2L1.结论LINC00963低表达通过调控miR-146a-5p/NFE2L1轴抑制胃癌细胞增殖、迁移和侵袭. 展开更多
关键词 lINC00963 miR-146a-5p NFE2l1 胃癌 增殖 迁移 侵袭
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NFE2L1在食管鳞癌中的表达及临床意义 被引量:2
14
作者 周琳 卫秦川 +4 位作者 王豫椒 徐美翔 熊文东 刘霞 任勇刚 《现代生物医学进展》 CAS 2018年第19期3706-3711,共6页
目的:通过检测食管鳞癌标本中核因子E2相关因子1(NFE2L1)的表达情况,探究NFE2L1在食管鳞癌发生发展中的作用,为食管鳞癌的诊治以及预后评估提供新的思路。方法:收集我校附院2016-2017年经病理组织学检查诊断为食管鳞癌的手术标本40例及... 目的:通过检测食管鳞癌标本中核因子E2相关因子1(NFE2L1)的表达情况,探究NFE2L1在食管鳞癌发生发展中的作用,为食管鳞癌的诊治以及预后评估提供新的思路。方法:收集我校附院2016-2017年经病理组织学检查诊断为食管鳞癌的手术标本40例及其对应的癌旁组织并从NCBI数据库下载GEO测序数据,应用定量PCR、免疫组化和生物信息分析等方法检测分析NFE2L1基因的表达情况。结果:在食管鳞癌组织中,NFE2L1表达阳性31例(77.5%),癌旁组织阳性表达17例(42.5%),两组比较差异显著有统计学意义(P<0.001);进一步发现NFE2L1的阳性表达与肿瘤分化程度和淋巴转移相关(P<0.05)。但在不同年龄、性别、浸润深度及不同部位之间差异无统计学意义。GEO数据分析结果显示NFE2L1在食管鳞癌组织显著高表达(P<0.01),只是未达到显著差异表达的阈值标准(即变化倍数小于2倍)。结论:NFE2L1在食管鳞癌中高表达,表达的高低与食管鳞癌的发生进展密切相关。 展开更多
关键词 转录因子NFE2l1 食管鳞癌 免疫组化 生物信息
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触脑脊液神经元的研究进展 被引量:2
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作者 李瑞 刘海鹰 +4 位作者 王家瑶 郭保霖 高方 武胜昔 王文挺 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期633-637,共5页
触脑脊液神经元(cerebrospinal fluid-contacting neurons,CSF-cNs)是一种分布于脑室、中央管、脑室周器及脑实质等处与脑脊液接触的特殊神经元。根据分布位置不同可将CSF-cNs分为室管膜上、室管膜下和远位CSF-cNs三类,不同部位的CSF-... 触脑脊液神经元(cerebrospinal fluid-contacting neurons,CSF-cNs)是一种分布于脑室、中央管、脑室周器及脑实质等处与脑脊液接触的特殊神经元。根据分布位置不同可将CSF-cNs分为室管膜上、室管膜下和远位CSF-cNs三类,不同部位的CSF-cNs分泌不同的神经递质。以往研究CSF-cNs多采用脑室注射辣根过氧化物酶标记的霍乱毒素B亚单位(cholera toxin subunit B labeled with horseradish peroxidase,CB-HRP)进行逆行追踪. 展开更多
关键词 触脑脊液神经元 POlYCYSTIN KIDNEY disease 2-like 1(PKD2l1) Acid-sensing ion channels(ASIC)
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GNB2L1在宫颈癌中的表达及与患者预后的相关性分析 被引量:2
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作者 马泽坤 李金秋 +5 位作者 买迪努尔·买买提 素比努尔·吾布力卡斯木 祁光伟 郑博源 阿仙姑·哈斯木 林晨 《新疆医科大学学报》 CAS 2022年第5期479-485,共7页
目的研究鸟嘌呤核苷酸结合蛋白β多肽2样蛋白1(GNB2L1)在宫颈癌组织中的表达情况与临床病理学特征及预后的相关性。方法收集2010年6月—2013年3月新疆医科大学第一附属医院妇科收治的132例宫颈鳞癌(CSCC)患者、56例宫颈上皮内瘤变(CIN)... 目的研究鸟嘌呤核苷酸结合蛋白β多肽2样蛋白1(GNB2L1)在宫颈癌组织中的表达情况与临床病理学特征及预后的相关性。方法收集2010年6月—2013年3月新疆医科大学第一附属医院妇科收治的132例宫颈鳞癌(CSCC)患者、56例宫颈上皮内瘤变(CIN)患者宫颈组织及32例无宫颈疾病患者正常宫颈(NC)组织,采用免疫组化、qRT-PCR、Western blot方法检测CSCC、CIN、NC组织中GNB2L1和mRNA表达水平,分析与临床病理学特征及预后的相关性。基因测序检测CSCC组织中GNB2L1基因拷贝数的变化。Western blot、qRT-PCR检测GNB2L1在宫颈癌细胞C33a、SiHa及正常宫颈上皮细胞H8中的表达情况。STRING数据库构建基因调控网络;RNA干扰调控技术下调子宫颈癌SiHa和C33a细胞中GNB2L1基因表达后,BODIPY染色检测SiHa、C33a细胞内脂质含量的变化。Kaplan-Meier和logrank试验分析GNB2L1蛋白的表达水平与患者总生存期的相关性。结果与CIN和NC组织相比,CSCC组织中GNB2L1的mRNA与蛋白质表达水平较高,差异具有统计学意义(P<0.01),且GNB2L1过表达与细胞分化程度(P=0.001)、临床分期(P=0.017)、淋巴结转移(P=0.049)密切相关。与GNB2L1低表达患者相比,GNB2L1高表达患者的总生存时间更短(P=0.002)。与NC组织(215100±7276)copies/ng相比,CSCC组织(297200±10815)copies/ng中的GNB2L1 DNA拷贝数显著升高(P=0.009)。qRT-PCR与Western blot结果显示,与H8细胞比较,C33a、SiHa细胞中GNB2L1的mRNA及蛋白表达水平均明显升高(P<0.01)。下调GNB2L1表达后,BODIPY检测结果显示,与正常对照组和阴性对照组比较,实验组细胞内脂质含量明显减少。结论GNB2L1在宫颈癌组织中高表达可能是CSCC患者独立的预后因素,过表达GNB2L1可能促进肿瘤的进展,有望成为CSCC患者潜在的预后生物标志物。 展开更多
关键词 宫颈癌 鸟嘌呤核苷酸结合蛋白β多肽2样蛋白1(GNB2l1)
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SP600125对人宫颈癌HeLa细胞增殖和侵袭的影响 被引量:1
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作者 莫艳秀 姚飞虹 +2 位作者 刘峻彤 胡紫昂 李木兰 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 2022年第4期304-313,共10页
目的探讨SP600125对人宫颈癌HeLa细胞的增殖周期、凋亡以及侵袭的影响。方法采用CCK-8法检测不同时间点不同浓度的SP600125作用后HeLa细胞的增殖状态。确定20μmol/L的SP600125用于后续实验。利用平板克隆形成实验检测细胞增殖能力,DAP... 目的探讨SP600125对人宫颈癌HeLa细胞的增殖周期、凋亡以及侵袭的影响。方法采用CCK-8法检测不同时间点不同浓度的SP600125作用后HeLa细胞的增殖状态。确定20μmol/L的SP600125用于后续实验。利用平板克隆形成实验检测细胞增殖能力,DAPI染色观察细胞核形态,流式细胞仪检测细胞周期和凋亡,细胞划痕和Transwell法检测细胞迁移和侵袭能力,qRT-PCR和Western blot分别检测SP600125作用不同时间点后各组细胞的p53、Mad2L1和CDC20 mRNA和蛋白水平的变化。结果与对照组(0.1%DMSO)相比,10、20、30、40、50μmol/L SP600125作用24 h均能使细胞的增殖活性降低。与对照组相比,各SP600125处理组的细胞凋亡率明显增加,且G_(2)/M期细胞比例增加(P<0.001),而SP600125处理HeLa细胞24和48 h的G_(0)/G_(1)期比例减少(P<0.001),其细胞的克隆数、迁移和侵袭能力明显下降(P<0.001);qRT-PCR和Western blot结果显示Mad2L1 mRNA和蛋白表达明显下降(P<0.05),p53和CDC20 mRNA和蛋白则呈上升趋势(P<0.01)。结论SP600125可通过上调p53和CDC20以及下调Mad2L1的表达诱导宫颈癌HeLa细胞周期阻滞于G_(2)/M期并促进细胞凋亡来抑制细胞的增殖、迁移和侵袭。 展开更多
关键词 SP600125 人宫颈癌HElA细胞 Mad2l1 CDC20
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干扰AGXT2L1表达对肝细胞癌细胞运动、迁移和侵袭能力的影响 被引量:1
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作者 亢舰 丁千山 +5 位作者 戴金芬 张韵婷 李艳霞 吴露 于红刚 董卫国 《武汉大学学报(医学版)》 CAS 2016年第3期414-417,429,共5页
目的:研究AGXT2L1是否能够影响肝细胞癌细胞系的运动、迁移和侵袭。方法:设计并构建AGXT2L1的靶向siRNA,验证敲低效果后,采用划痕愈合实验观察细胞的二维运动能力,采用Transwell实验观察细胞的三维迁移能力,采用带基质胶的Transwell实... 目的:研究AGXT2L1是否能够影响肝细胞癌细胞系的运动、迁移和侵袭。方法:设计并构建AGXT2L1的靶向siRNA,验证敲低效果后,采用划痕愈合实验观察细胞的二维运动能力,采用Transwell实验观察细胞的三维迁移能力,采用带基质胶的Transwell实验观察细胞的侵袭能力。结果:与对照组相比,干扰AGXT2L1的表达可以显著抑制两种肝细胞癌细胞系(97H和HCCLM3)的运动、迁移和侵袭能力。结论:AGXT2L1具有调控肝细胞癌细胞运动、迁移和侵袭的功能,说明AGXT2L1可能在肝细胞癌的转移过程中发挥了重要作用;AGXT2L1是治疗肝细胞癌的潜在靶标。 展开更多
关键词 AGXT2l1 肝细胞癌 运动 迁移 侵袭
原文传递
Network pharmacology and molecular docking identify mechanisms of medicinal plant-derived 1,2,3,4,6-penta-O-galloyl-beta-D-glucose treating gastric cancer
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作者 MAN REN YUAN YANG +3 位作者 DAN LI NANNAN ZHAO YUPING WANG YONGNING ZHOU 《BIOCELL》 SCIE 2023年第5期977-989,共13页
Background:1,2,3,4,6-penta-O-galloyl-beta-D-glucose(PGG)is a natural polyphenolic compound derived from multiple medicinal plants with favorable anticancer activity.Methods:In this study,the mechanisms of PGG against ... Background:1,2,3,4,6-penta-O-galloyl-beta-D-glucose(PGG)is a natural polyphenolic compound derived from multiple medicinal plants with favorable anticancer activity.Methods:In this study,the mechanisms of PGG against gastric cancer were explored through network pharmacology and molecular docking.First,the targets of PGG were searched in the Herbal Ingredients’Targets(HIT),Similarity Ensemble Approach(SEA),and Super-PRED databases.The potential targets related to gastric cancer were predicted from the Human Gene Database(GeneCards)and DisGeNET databases.The intersecting targets of PGG and gastric cancer were obtained by Venn diagram and then subjected to protein-protein interaction analysis to screen hub targets.Functional and pathway enrichment of hub targets were analyzed through Gene Ontology and Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes pathway databases.The differential expression and survival analysis of hub targets in gastric cancer were performed based on The Cancer Genome Atlas database.Finally,the affinity of PGG with hub targets was visualized by molecular docking.Results:Three hub targets were screened,including mitogen-activated protein kinase 14(MAPK14),BCL2 like 1(BCL2L1),and vascular endothelial growth factor A(VEGFA).MAPK14 had a higher expression,while BCL2L1 and VEGFA had lower expression in gastric cancer than in normal conditions.Enrichment analysis indicated enrichment of these hub targets in MAPK,neurotrophin,programmed death-ligand 1(PD-L1)checkpoint,phosphatidylinositol 3-kinases/protein kinase B(PI3K-Akt),Ras,and hypoxia-inducible factor-1(HIF-1)signaling pathways.Conclusion:Therefore,network pharmacology and molecular docking analyses revealed that PGG exerts a therapeutic efficacy on gastric cancer by multiple targets(MAPK14,BCL2L1,and VEGFA)and pathways(MAPK,PD-L1 checkpoint,PI3K-Akt,Ras,and HIF-1 pathways). 展开更多
关键词 1 2 3 4 6-penta-O-galloyl-beta-D-glucose Gastric cancer Network pharmacology Molecular docking MAPK14 BCl2l1 VEGFA
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过表达Gnb2l1基因对体外节律基因mPer1表达的影响 被引量:1
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作者 朱雨 邹晏 +3 位作者 江舟 汪宇辉 刘延友 王正荣 《四川生理科学杂志》 2010年第1期20-23,共4页
目的:评价过表达Gnb2l1基因对节律基因mPer1表达的影响。方法:用PMA刺激NIH3T3细胞,使节律基因稳定表达后,用脂质体介导方法将质粒pcDNA3.1/Gnb2l1转染至NIH3T3细胞,并以空载体质粒pcDNA3.1/vector为对照。利用RT-PCR技术检测不同时间点... 目的:评价过表达Gnb2l1基因对节律基因mPer1表达的影响。方法:用PMA刺激NIH3T3细胞,使节律基因稳定表达后,用脂质体介导方法将质粒pcDNA3.1/Gnb2l1转染至NIH3T3细胞,并以空载体质粒pcDNA3.1/vector为对照。利用RT-PCR技术检测不同时间点Gnb2l1 mPer1在NIH3T3细胞中的表达水平,研究过表达Gnb2l1基因对mPer1基因表达的影响。结果:采用RT-PCR技术显示成功转染,实验组比对照组Gnb2l1表达量明显增高(p<0.05)。并且发现实验组的mPer1表达量比对照组明显增高,但是经过余弦分析发现两组相比mPer1的表达周期无明显改变。结论:成功过表达Gnb2l1基因使节律基因mPer1表达量增加,中值增高(p=0.038)。 展开更多
关键词 时间生物学 节律基因 Gnb2l1基因 per1基因 转染
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