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NaCl胁迫对高粱根、叶鞘和叶片液泡膜ATP酶和焦磷酸酶活性的影响 被引量:58
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作者 王宝山 邹琦 《植物生理学报(0257-4829)》 CSCD 2000年第3期181-188,共8页
NaCl胁迫初期 ,Na+主要在根和叶鞘中积累。相应地 ,根和叶鞘液泡膜ATP酶和焦磷酸酶水解活性、依赖ATP和PPi的质子泵活性及Na+/H+逆向转运活性均明显增加 ,根和叶鞘的生长没有受到抑制。NaCl胁迫后期 ,Na+开始向地上部分运输并在叶片中... NaCl胁迫初期 ,Na+主要在根和叶鞘中积累。相应地 ,根和叶鞘液泡膜ATP酶和焦磷酸酶水解活性、依赖ATP和PPi的质子泵活性及Na+/H+逆向转运活性均明显增加 ,根和叶鞘的生长没有受到抑制。NaCl胁迫后期 ,Na+开始向地上部分运输并在叶片中积累。此时 ,叶片液泡膜质子泵和Na+/H+逆向转运活性开始增加 ,根和叶鞘的Na/K比增加 ,其液泡膜ATP酶和焦磷酸酶水解活性、质子泵活性和Na+/H+逆向转运活性下降。相应地 ,根和叶鞘的生长也下降。当保温介质中Na/K比超过 1时 ,液泡膜微囊ATP酶和焦磷酸酶活性均随Na/K比的增加而下降。 展开更多
关键词 高粱 ATP 质子泵活性 磷酸酶 NACL胁迫
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外源多胺对低氧胁迫下黄瓜幼苗根系生长及H^+-ATP酶和H^+-焦磷酸酶活性的影响 被引量:24
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作者 汪天 李娟 +2 位作者 郭世荣 高洪波 王素平 《植物生理与分子生物学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期637-642,共6页
采用营养液水培方式,研究了根际低氧胁迫下外源多胺对黄瓜幼苗植株根系生长,内源多胺含量与质膜H+-ATP酶、液泡膜H+-ATP酶和焦磷酸酶活性的影响。结果表明,根际低氧胁迫显著抑制黄瓜幼苗根系的生长,外源Put(腐胺)和Spd(亚精胺)可缓解低... 采用营养液水培方式,研究了根际低氧胁迫下外源多胺对黄瓜幼苗植株根系生长,内源多胺含量与质膜H+-ATP酶、液泡膜H+-ATP酶和焦磷酸酶活性的影响。结果表明,根际低氧胁迫显著抑制黄瓜幼苗根系的生长,外源Put(腐胺)和Spd(亚精胺)可缓解低氧胁迫对根系的生长抑制,多胺主要以Spd的形式发挥促进性的生理作用,Put通过转化为Spd发挥作用;低氧胁迫下黄瓜根系内源多胺含量略有提高,外源多胺处理可增加内源多胺的含量;低氧胁迫下外源Put和Spd处理后质膜H+-ATP酶活性显著提高,外源多胺对黄瓜根系液胞膜H+-ATP酶和H+-焦磷酸酶活性没有明显影响,说明低氧胁迫下外源多胺主要通过提高质膜H+-ATP酶活性而发挥生理作用。 展开更多
关键词 多胺 低氧 H^+ -ATP H^+ -磷酸酶 瓜幼苗
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植物液泡膜上的焦磷酸酶 被引量:20
3
作者 王延枝 《植物生理学通讯》 CSCD 1990年第4期73-76,40,共5页
本文概述了焦磷酸酶在植物物质和能量代谢过程中的调节作用,并对液泡膜焦磷酸酶的质子泵功能研究现状进行了讨论。
关键词 磷酸酶 植物液泡漠
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一氧化氮调节盐胁迫下小麦幼苗根部质膜H^+-ATPase和焦磷酸酶活性提高耐盐性 被引量:14
4
作者 阮海华 沈文飚 徐朗莱 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 2004年第4期415-422,共8页
采用外源一氧化氮(NO)供体硝普钠(SNP)研究了NO对盐胁迫下小麦(Triticum aestivum L.)幼苗耐盐性的影响。结果表明,0.1mmo1/L SNP处理显著缓解了150mmo1/L NAC1胁迫对小麦幼苗生长的抑制效应,包括水分丧失以及叶绿素降解,从而提... 采用外源一氧化氮(NO)供体硝普钠(SNP)研究了NO对盐胁迫下小麦(Triticum aestivum L.)幼苗耐盐性的影响。结果表明,0.1mmo1/L SNP处理显著缓解了150mmo1/L NAC1胁迫对小麦幼苗生长的抑制效应,包括水分丧失以及叶绿素降解,从而提高了小麦幼苗的耐盐性。进一步结合1mg/mL血红蛋白处理则显著逆转了SNP诱导的上述效应;利用亚硝酸钠和铁氰化钾作为对照也证实了NO对小麦幼苗耐盐性的专一性调节作用,并可能与NO对小麦幼苗根部质膜H^+-ATPase和焦磷酸酶活性诱导有关。此外,尽管NO显著提高了盐胁迫下小麦幼苗根部细胞质膜H^+-ATPase和焦磷酸酶的ATP水解活性,但是对跨膜H^+转运则没有明显影响。应用外源CaSO4和EGTA处理也证实,Ca^2+可能在NO诱导的质膜H^+-ATPase和焦磷酸酶活性的提高过程中起信号作用。另外,分析盐胁迫下小麦幼苗根部Na^+和K^+含量的变化也发现,NO对Na^+含量没有明显影响,但是却显著提高了K^+水平和K^+/Na^+比,这可能也是NO提高小麦幼苗耐盐性的原因之一。 展开更多
关键词 一氧化氮 盐胁迫 小麦 幼苗 质膜 磷酸酶 H^+-ATPASE
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小拟南芥液泡膜H^+-PPase基因OpVP1的克隆、序列分析及表达 被引量:8
5
作者 徐芳 赵云霞 +3 位作者 魏艳玲 李超 孙黎 黄先忠 《石河子大学学报(自然科学版)》 CAS 2013年第1期77-82,共6页
植物液泡膜质子转运无机焦磷酸酶(V-PPase)酸化植物液泡并为液泡的次级转运系统提供能量,在植物耐盐性起着重要的作用。为了克隆小拟南芥液泡膜H+-PPase基因,采用RT-PCR结合RACE的方法从小拟南芥叶片的cDNA中克隆了1个液泡膜H+-PPase基... 植物液泡膜质子转运无机焦磷酸酶(V-PPase)酸化植物液泡并为液泡的次级转运系统提供能量,在植物耐盐性起着重要的作用。为了克隆小拟南芥液泡膜H+-PPase基因,采用RT-PCR结合RACE的方法从小拟南芥叶片的cDNA中克隆了1个液泡膜H+-PPase基因,命名为OpVP1。OpVP1基因的cDNA全长为2698bp,开放阅读框(ORF)为2313bp,编码770个氨基酸。OpVP1蛋白与琴叶拟南芥、拟南芥相似性最高,分别为98.6%、98.4%。系统进化分析表明OpVP1基因属于Ⅰ型液泡膜质子焦磷酸酶基因。OpVP1蛋白的分子量是80745.9Da,等电点pI为5.13,含有14个跨膜螺旋结构。三维结构分析表明OpVP1蛋白是由2个单体组成的二聚体蛋白。qRT-PCR表明OpVP1基因在角果中表达高于根、茎、叶和花中的表达。 展开更多
关键词 磷酸酶 H+-PPase 小拟南芥 OpVP1 克隆
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Effect of Nitrogen Form on the Activity of Tonoplast Pyrophosphatase in Tomato Roots 被引量:4
6
作者 朱祝军 钱亚榕 Wolfgang PFEIFFER 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 2001年第11期1146-1149,共4页
Effect of nitrate and ammonium on the activity of tonoplast pyrophosphatase (V-PPase) was investigated in the roots of tomato ( Lycopersicon esculentum L.). The results showed that the activity of V-PPase was increase... Effect of nitrate and ammonium on the activity of tonoplast pyrophosphatase (V-PPase) was investigated in the roots of tomato ( Lycopersicon esculentum L.). The results showed that the activity of V-PPase was increased by ammonium nutrition, compared with nitrate nutrition. The H+ transport of tonoplast vesicles by V-PPase was also stimulated by ammonium nutrition. The result of Western blot indicated that the protein amount of V-PPase was increased by ammonium nutrition. 展开更多
关键词 TOMATO nitrogen form TONOPLAST PYROPHOSPHATASE
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大肠杆菌焦磷酸酶的表达及其酶学性质研究
7
作者 王赞丞 王璐 +4 位作者 樊俊萍 陈雨点 陈婷婷 刘露露 李勇昊 《中国酿造》 CAS 北大核心 2024年第9期65-71,共7页
该研究通过聚合酶链式反应(PCR)扩增克隆大肠杆菌(Escherichia coli)Rosetta(DE3)的焦磷酸酶(PPase)基因,采用无缝克隆技术构建焦磷酸酶表达载体pET-28a-ppa,并转化至感受态E.coliRosetta(DE3),构建重组菌株E.coli PPa.采用单因素试验... 该研究通过聚合酶链式反应(PCR)扩增克隆大肠杆菌(Escherichia coli)Rosetta(DE3)的焦磷酸酶(PPase)基因,采用无缝克隆技术构建焦磷酸酶表达载体pET-28a-ppa,并转化至感受态E.coliRosetta(DE3),构建重组菌株E.coli PPa.采用单因素试验对其诱导表达条件进行优化,并进一步采用镍离子磁珠纯化重组PPas,研究其酶学性质。结果表明,成功构建重组菌株E.coliPPa,当异丙基-β-D硫代半乳糖苷(IPTG)诱导浓度、诱导温度和诱导时间分别为0.4 mmolL、20℃和8h时,重组PPase活性达到最高,为129.05 IU/mL,是优化前的3.14倍。重组PPase的理论分子质量为19.7kDa;最适反应温度和pH分别为55℃和9,在温度10~30℃及pH 7.0~9.0范围内稳定;金属离子K^(+)、Mg^(2+)和Na^(+)可极显著性提高该酶活性(P<0.01),而Mn^(2+)和Zn^(2+)对该酶有极显著抑制作用(P<0.01);重组PPase的动力学参数米氏常数(K_(m)值)为3.58 μmol/mL、最大反应速率(V_(max)值)为314.66μmol/(mL·min),催化常数(K_(cat)值)为87300.56S^(-1),半失活时间为10 min。该研究为后续工业化生产PPase及对该酶的理性设计提供依据。 展开更多
关键词 磷酸酶 大肠杆菌 诱导表达 学性质
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可溶性焦磷酸酶的研究进展 被引量:4
8
作者 贤加欢 张美萍 +5 位作者 孙春玉 王艳芳 王康宇 陈静 赵明珠 王义 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期4030-4035,共6页
焦磷酸酶(pyrophosphatase, PPase)是一种将底物焦磷酸(pyrophosphoric acid, PPi)水解成两分子磷酸盐的酶。目前,自然界中存在两大类PPase:膜结合型焦磷酸酶(membrane-integral pyrophosphatase,M-PPase)和可溶性焦磷酸酶(soluble inor... 焦磷酸酶(pyrophosphatase, PPase)是一种将底物焦磷酸(pyrophosphoric acid, PPi)水解成两分子磷酸盐的酶。目前,自然界中存在两大类PPase:膜结合型焦磷酸酶(membrane-integral pyrophosphatase,M-PPase)和可溶性焦磷酸酶(soluble inorganic pyrophatase, s-PPase)。s-PPase又分为Ⅰ型可溶性焦磷酸酶(soluble inorganicpyrophatase FamilyⅠ, s-PPaseⅠ)、Ⅱ型可溶性焦磷酸酶(soluble inorganic pyrophatase FamilyⅡ, s-PPaseⅡ)和Ⅲ型可溶性焦磷酸酶(soluble inorganic pyrophatase FamilyⅢ, s-PPaseⅢ)。s-PPaseⅠ在不同生物中寡聚物的状态不同,s-PPaseⅡ在所有生物中都以二聚体形式存在,s-PPaseⅢ是卤代烷脱卤酶的变体。s-PPase 催化PPi水解过程包括基团去活化和亲核体产生。s-PPaseⅡ中的CBS-PPase 调控机制研究的比较清楚。本综述将重点对s-PPase 的结构、催化特性、调控机制和应用等方面进行分析阐述,为后续深入的研究提供参考。 展开更多
关键词 磷酸酶 结构 催化特性 调控机制
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鸡胸大肌中焦磷酸酶的分离纯化及特性研究 被引量:4
9
作者 姚蕊 彭增起 +2 位作者 周光宏 何燕 靳红果 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第7期299-304,共6页
经匀浆、0.6mol/L NaCl提取、硫酸铵分级分离、DEAE-纤维素离子交换柱层析,从鸡胸肉中纯化了焦磷酸酶。该酶有较强的底物专一性,只对添加到肉中的焦磷酸四钠发生作用。Mg2+不仅是其激活剂,还对酶的稳定性发挥作用,Ca2+、EDTA-Na2抑制酶... 经匀浆、0.6mol/L NaCl提取、硫酸铵分级分离、DEAE-纤维素离子交换柱层析,从鸡胸肉中纯化了焦磷酸酶。该酶有较强的底物专一性,只对添加到肉中的焦磷酸四钠发生作用。Mg2+不仅是其激活剂,还对酶的稳定性发挥作用,Ca2+、EDTA-Na2抑制酶活性。以焦磷酸四钠为底物,测得该酶的最适pH为7.4,最适温度为40℃。 展开更多
关键词 鸡胸肉 磷酸酶 分离纯化 性质
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肌肉焦磷酸酶和三聚磷酸酶的特性与应用 被引量:3
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作者 石金明 靳红果 +2 位作者 彭增起 田锐花 郭秀云 《肉类研究》 2011年第11期47-49,共3页
磷酸盐是肉制品加工中常用的添加剂,它们可以改善肉和肉制品的特性,如适口性、凝胶特性、乳化特性等。磷酸盐在肉中起作用是在其添加后和水解过程中。磷酸盐水解是肉中多聚磷酸酶的作用,其中焦磷酸酶(pyrophosphatase,PPase)和三聚磷酸... 磷酸盐是肉制品加工中常用的添加剂,它们可以改善肉和肉制品的特性,如适口性、凝胶特性、乳化特性等。磷酸盐在肉中起作用是在其添加后和水解过程中。磷酸盐水解是肉中多聚磷酸酶的作用,其中焦磷酸酶(pyrophosphatase,PPase)和三聚磷酸酶(tripolyphosphatase,TPPase)是主要的作用酶类。本文主要阐述近年来关于焦磷酸酶和三聚磷酸酶的研究,以期为今后的研究提供一定的参考。 展开更多
关键词 磷酸酶 三聚磷酸酶 特性 应用
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牛肉半腱肌中焦磷酸酶的分离纯化及特性研究 被引量:3
11
作者 孙珍珍 彭增起 +1 位作者 靳红果 史杰 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第5期160-164,共5页
对牛肉半腱肌中焦磷酸酶进行分离纯化并对其特性进行研究。将牛肉半腱肌用0.25mol/L蔗糖溶液冰浴匀浆后再用0.6mol/LNaCl提取、50%~70%饱和度硫酸铵分级沉淀、DEAE-52纤维素离子交换柱层析,得到纯的焦磷酸酶。通过SDS-PAGE分析,该酶的... 对牛肉半腱肌中焦磷酸酶进行分离纯化并对其特性进行研究。将牛肉半腱肌用0.25mol/L蔗糖溶液冰浴匀浆后再用0.6mol/LNaCl提取、50%~70%饱和度硫酸铵分级沉淀、DEAE-52纤维素离子交换柱层析,得到纯的焦磷酸酶。通过SDS-PAGE分析,该酶的分子质量为72kD。实验进一步得出牛肉半腱肌中焦磷酸酶有较强的底物专一性,对底物焦磷酸四钠(PP)水解作用强。Mg2+是其激活剂,Ca2+、EDTA-Na2、EDTA-Na4抑制其酶活性。以PP为底物,测得该酶的初速度时间范围为25min,最适pH值为6.8,最适温度为47℃。 展开更多
关键词 牛肉半腱肌 磷酸酶 分离纯化 特性
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橡胶树3个可溶性无机焦磷酸酶基因的原核表达 被引量:2
12
作者 朱家红 徐靖 +2 位作者 于晓惠 畅文军 张治礼 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2013年第1期41-45,共5页
焦磷酸酶对橡胶的生物合成具有重要的调控作用。将已克隆的3个可溶性无机焦磷酸酶基因的编码区插入到原核表达载体pGEX-6P-1上,构建3个焦磷酸酶基因表达载体(pGEX-HbSIP1、pGEX-HbSIP2和pGEX-HbSIP3),再将表达载体转入大肠杆菌表达菌株... 焦磷酸酶对橡胶的生物合成具有重要的调控作用。将已克隆的3个可溶性无机焦磷酸酶基因的编码区插入到原核表达载体pGEX-6P-1上,构建3个焦磷酸酶基因表达载体(pGEX-HbSIP1、pGEX-HbSIP2和pGEX-HbSIP3),再将表达载体转入大肠杆菌表达菌株进行诱导表达。结果表明:pGEX-HbSIP1、pGEX-HbSIP2表达载体在大肠杆菌BL21(DE3)中获得高效表达,pGEX-HbSIP3只在补充稀有密码子的大肠杆菌Rosetta(DE3)中表达,表达率分别为35.4%、43.7%和18.5%。对原核表达的蛋白质进行纯化,获得3种可溶性重组蛋白GST-HbSIP1、GST-HbSIP2和GST-HbSIP3,总回收率分别约为7%、8%、3%。该结果为进一步研究这3种焦磷酸酶蛋白的分子特性、抗体制备及功能研究奠定基础。 展开更多
关键词 橡胶树 磷酸酶 基因 原核表达 蛋白纯化
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兔抗弓形虫Ⅰ型液泡型质子焦磷酸酶多克隆抗体的制备及鉴定 被引量:2
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作者 佟澄碧 郝文波 +4 位作者 罗树红 肖斌 程莎莎 廖小青 潘迪 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期1137-1142,共6页
目的制备兔抗弓形虫I型液泡型质子焦磷酸酶(Tg VP1)多克隆抗体并鉴定其应用。方法选择弓形虫ME49株Tg VP1氨基酸序列中的两条多肽,Tg VP1-1与Tg VP1-2,进行人工合成,并将其与KLH偶联作为抗原免疫新西兰大耳白兔,收集血清制备多克隆抗体... 目的制备兔抗弓形虫I型液泡型质子焦磷酸酶(Tg VP1)多克隆抗体并鉴定其应用。方法选择弓形虫ME49株Tg VP1氨基酸序列中的两条多肽,Tg VP1-1与Tg VP1-2,进行人工合成,并将其与KLH偶联作为抗原免疫新西兰大耳白兔,收集血清制备多克隆抗体,并通过ELISA、Western blot、免疫荧光等方法进行鉴定。结果经间接ELISA测定,兔抗Tg VP1-1及Tg VP1-2的多克隆抗体效价均达1∶128 000;Western blot结果显示两种多抗均能识别弓形虫天然蛋白中85 000左右条带,与Tg VP1预测相对分子质量大小相符,且特异性较好;通过免疫荧光技术检测到两株多抗识别的蛋白均定位于细胞质中,与酸性钙体的分布相同。结论采用人工合成多肽为免疫原所获得的兔抗Tg VP1多克隆抗体效价高,特异性好,弓形虫Tg VP1和酸性钙体的深入研究奠定了基础,同时也为弓形虫病的诊断提供了新的有效工具。 展开更多
关键词 弓形虫 磷酸酶 酸性钙体 多克隆抗体
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dUTP焦磷酸酶在大肠癌细胞和组织中的差异表达 被引量:1
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作者 赖晓嵘 童华生 +4 位作者 杨晓强 耿焱 刘炀 陈楚弟 姜泊 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期802-804,共3页
目的验证dUTP焦磷酸酶(dUTPase)在人4种大肠癌细胞SW480,SW620,LoVo,SW1116和组织的差异表达。方法RT-PCR检测人4种大肠癌细胞SW480,SW620,LoVo,SW1116中焦磷酸酶的mRNA表达水平,并通过检测该酶水解dUTP释放的焦磷酸(PPi)来测定这4种大... 目的验证dUTP焦磷酸酶(dUTPase)在人4种大肠癌细胞SW480,SW620,LoVo,SW1116和组织的差异表达。方法RT-PCR检测人4种大肠癌细胞SW480,SW620,LoVo,SW1116中焦磷酸酶的mRNA表达水平,并通过检测该酶水解dUTP释放的焦磷酸(PPi)来测定这4种大肠癌细胞dUTPase的酶活性。免疫细胞和组织化学检测焦磷酸酶的蛋白表达差异。结果dUTPase在SW620和LoVo细胞的mRNA水平和酶活性高于SW480和SW1116细胞。大肠癌SW620,LoVo细胞免疫化学dUTPase表达高于SW1116、SW480细胞。大肠增生性息肉和腺瘤性息肉dUTPase的表达低于大肠癌。结论焦磷酸酶dUTPase在人4种大肠癌细胞和组织存在差异表达。 展开更多
关键词 磷酸酶 差异表达 学活性
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猪背最长肌焦磷酸酶的分离纯化与酶学特性 被引量:1
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作者 靳红果 万可慧 +2 位作者 田锐花 彭增起 王蓉蓉 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第3期168-173,共6页
通过离心、50%~70%饱和硫酸铵沉淀、DEAE-52离子交换柱层析,从猪背最长肌中分离纯化出焦磷酸酶(PPase)。变性聚丙烯酰胺凝胶电泳图谱显示,PPase分子质量约72kD。焦磷酸酶酶学特性研究表明,最适反应温度和pH值分别为50℃和7.5。Mg2+是PP... 通过离心、50%~70%饱和硫酸铵沉淀、DEAE-52离子交换柱层析,从猪背最长肌中分离纯化出焦磷酸酶(PPase)。变性聚丙烯酰胺凝胶电泳图谱显示,PPase分子质量约72kD。焦磷酸酶酶学特性研究表明,最适反应温度和pH值分别为50℃和7.5。Mg2+是PPase的激活剂,在浓度4.75mmol/L时,酶活力最强。但Na+和K+都能抑制酶的活力,且Na+的抑制效果强于K+。PPase水解焦磷酸钠(TSPP)的动力学参数Vmax为0.086μmol/(L.min)),Km为0.36mmol/L。 展开更多
关键词 磷酸酶 纯化 学特性 猪肉
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巴西橡胶树HbSIP1基因启动子的克隆和序列分析
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作者 朱家红 徐靖 +2 位作者 于晓惠 畅文军 张治礼 《中国农学通报》 CSCD 2013年第4期5-9,共5页
为研究橡胶焦磷酸酶基因的表达特征及其在天然橡胶生物合成中调控机理,根据巴西橡胶树焦磷酸酶基因HbSIP1序列,利用GenomeWalker方法对HbSIP1基因启动子序列进行了分离,对其序列进行了生物信息学分析,并构建了含有该序列的植物表达载体p... 为研究橡胶焦磷酸酶基因的表达特征及其在天然橡胶生物合成中调控机理,根据巴西橡胶树焦磷酸酶基因HbSIP1序列,利用GenomeWalker方法对HbSIP1基因启动子序列进行了分离,对其序列进行了生物信息学分析,并构建了含有该序列的植物表达载体pSIP1-1381Z。结果表明:分离获得了1198bp的HbSIP1基因启动子序列,该序列具有真核生物典型启动子结构特征,并含有众多应答激素和胁迫信号的调控元件。对HbSIP1的启动子区的克隆和分析,为进一步研究HbSIP1的功能和表达调控机制奠定基础。 展开更多
关键词 巴西橡胶树 磷酸酶 启动子 调控元件
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AVP1参与植物生长及调控研究进展
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作者 杨文静 聂峰杰 +2 位作者 张丽 刘璇 巩檑 《农业与技术》 2022年第21期4-7,共4页
无机焦磷酸酶基因(AVP1)编码一个定位在液泡膜上,调控细胞质pH和生长素转运的无机焦磷酸酶(H+-PPase),并参与响应旱胁迫、盐胁迫,跨膜电化学梯度的维持,叶片发育等多种生理过程。本文通过对AVP1发挥生理功能及其机制进行综述,旨在为通... 无机焦磷酸酶基因(AVP1)编码一个定位在液泡膜上,调控细胞质pH和生长素转运的无机焦磷酸酶(H+-PPase),并参与响应旱胁迫、盐胁迫,跨膜电化学梯度的维持,叶片发育等多种生理过程。本文通过对AVP1发挥生理功能及其机制进行综述,旨在为通过基因工程技术手段利用该基因提供思路。 展开更多
关键词 AVP1 磷酸酶 生理功能 调控机制
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巴西橡胶树乳管高效表达焦磷酸酶基因双元表达载体的构建
18
作者 于波 吴华玲 曾日中 《中国农学通报》 CSCD 北大核心 2009年第24期495-500,共6页
巴西橡胶树橡胶生物合成过程中,焦磷酸酶(PPase)具有重要的调控作用。通过基因工程技术提高其在乳管中的表达,有可能促进橡胶的生物合成,从而提高橡胶树产量。笔者以巴西橡胶树叶片为材料提取DNA,用特异引物经PCR扩增获得了378bp的REF... 巴西橡胶树橡胶生物合成过程中,焦磷酸酶(PPase)具有重要的调控作用。通过基因工程技术提高其在乳管中的表达,有可能促进橡胶的生物合成,从而提高橡胶树产量。笔者以巴西橡胶树叶片为材料提取DNA,用特异引物经PCR扩增获得了378bp的REF启动子片段,该片段序列与NCBI报道的REF序列间的同源性分别是98.68%和99.47%。以胶乳为材料提取总RNA,用特异引物经RT-PCR方法获得了2310bp的V-PPase基因片段,该片段序列与NCBI报道的V-PPase基因序列一致。然后通过酶切和连接,将REF启动子和V-PPase基因重组到植物表达载体pCAMBIA1301中,构建了含有潮霉素磷酸转移酶基因(hptⅡ)的乳管高效表达V-PPase基因的载体pC1301RV,然后用冻融法将其导入根癌农杆菌EHA105,为进一步通过转基因技术转化橡胶树奠定了基础。 展开更多
关键词 橡胶树 磷酸酶 REF启动子 表达载体 根癌农杆菌
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白鲢鱼背侧肌焦磷酸酶的纯化及酶学特性
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作者 刘玮 徐萌 +4 位作者 张雅玮 周黎 马志方 王复龙 彭增起 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第13期130-135,共6页
通过粗分离、50%~80%饱和度硫酸铵分级沉降、DE-52阴离子交换柱层析等步骤,从白鲢鱼背侧肌中分离纯化出焦磷酸酶。通过变性凝胶电泳分析,该酶在十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳图谱中仅有一个分子质量为40 kD的条带。酶学特性研究表... 通过粗分离、50%~80%饱和度硫酸铵分级沉降、DE-52阴离子交换柱层析等步骤,从白鲢鱼背侧肌中分离纯化出焦磷酸酶。通过变性凝胶电泳分析,该酶在十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳图谱中仅有一个分子质量为40 kD的条带。酶学特性研究表明,白鲢鱼背侧肌焦磷酸酶可专一性地水解焦磷酸盐,反应初速率时间范围为0~15 min,最适反应温度为45℃,最适反应pH值为7.5。Mg^(2+)对该酶有明显的激活作用,在Mg^(2+)浓度为5 mmol/L时酶活力最高。5 mmol/L的Ca^(2+)、Zn^(2+)、乙二胺四乙酸(ethylenediaminetetraacetic acid,EDTA)-Na_2、EDTA-Na_4、KIO_3和1 mmol/L的NaF均对该酶有强烈的抑制作用。该酶水解焦磷酸四钠的最大反应速率为0.051 U/mg,米氏常数为0.54 mmol/L。 展开更多
关键词 磷酸酶 纯化 学特性 背侧肌 白鲢鱼
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水稻灌浆期籽粒中3个与淀粉合成有关的酶活性变化 被引量:124
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作者 杨建昌 彭少兵 +1 位作者 顾世梁 R.M.Visperas 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期157-164,共8页
在水培和盆栽条件下 ,研究了 6个水稻品种 (含籼 /粳杂交组合、新株型品系 )灌浆期强、弱势粒中 ADPG焦磷酸酶 (EC 2 .7.7.2 1)、淀粉合成酶 (EC 2 .4 .1.2 1)和淀粉分枝酶或 Q-酶 (EC 2 .4 .1.18)的活性变化及其与灌浆充实的关系。 3... 在水培和盆栽条件下 ,研究了 6个水稻品种 (含籼 /粳杂交组合、新株型品系 )灌浆期强、弱势粒中 ADPG焦磷酸酶 (EC 2 .7.7.2 1)、淀粉合成酶 (EC 2 .4 .1.2 1)和淀粉分枝酶或 Q-酶 (EC 2 .4 .1.18)的活性变化及其与灌浆充实的关系。 3个酶的活性变化与籽粒灌浆动态相关联 :淀粉酶最高活性出现的时间稍前或同步于最大灌浆速率的时间 ;ADPG焦磷酸酶活性峰值的时间在籽粒达最大重量前的 3~ 6 d;Q-酶最高活性在籽粒重量接近最大时出现。灌浆期各个酶活性的平均值、最高值以及灌浆前期(花后 3~ 12 d)酶的活性与平均灌浆速率、最大灌浆速率、粒重及谷粒充实率均呈显著或极显著的正相关 ,尤以 Q-酶的相关值最大。籼 /粳杂交稻组合籽粒中酶的活性的高低与其亲本有关。在抽穗期通过剪叶、疏花或施用氮素等调节灌浆初期的源库关系或植株体内的营养水平 ,能增加或降低籽粒中特别是弱势粒中酶的活性。这些结果表明 :上述 3个酶尤其是 Q-酶对籽粒灌浆起着重要的调控作用 ;在育种上注意选择籽粒中酶活性高的亲本 ,可望培育出籽粒充实好的品种或杂种后代 ;通过栽培等措施提高灌浆前期籽粒中酶的活性 ,可提高结实率和粒重。 展开更多
关键词 ADPG磷酸酶 淀粉合成 Q- 籽粒灌浆 水稻 活性
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