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p62基因对黑素瘤A375细胞生物学特性的影响 被引量:3
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作者 易娟娟 刘龙阳 +4 位作者 黄慧珍 唐妍 岑丽卿 蔡艳桃 毛越苹 《中国皮肤性病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期9-11,60,共4页
目的研究p62基因在黑素瘤A375细胞生长增殖及细胞周期调控等方面的作用。方法取对数生长期的A375细胞,用干扰p62基因表达的siRNA慢病毒载体转染细胞;MTT法检测转染及正常A375细胞的平均OD值;流式细胞术检测两组的细胞周期分布。结果转... 目的研究p62基因在黑素瘤A375细胞生长增殖及细胞周期调控等方面的作用。方法取对数生长期的A375细胞,用干扰p62基因表达的siRNA慢病毒载体转染细胞;MTT法检测转染及正常A375细胞的平均OD值;流式细胞术检测两组的细胞周期分布。结果转染组的平均OD值较正常组小(P<0.05);转染组的G0/G1期比例(0.73±0.01)较正常组(0.64±0.02)高(P=0.002);转染组的凋亡率(0.10±0.02)较正常组(0.03±0.01)高(P=0.004)。结论干扰p62表达后,细胞周期阻滞于G0/G1期,p62在维持细胞周期和肿瘤细胞凋亡中起着重要的作用。 展开更多
关键词 p62基因 SIRNA 黑素瘤A375细胞 生物学特性
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荷载白介素24的溶瘤腺病毒联合达卡巴嗪对裸鼠黑素瘤的抑制作用 被引量:1
2
作者 蒋冠 李鹤 +2 位作者 魏志平 郑骏年 刘彦群 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期282-283,共2页
目的研究荷载白介素24(IL-24)的溶瘤腺病毒ZD55-IL-24联合达卡巴嗪抑制裸鼠黑素瘤的作用。方法建立裸鼠恶性黑素瘤A375细胞移植瘤模型后,分别给予ZD55-IL-24联合达卡巴嗪、ZD55-IL-24、达卡巴嗪、磷酸盐缓冲液(PBS)干预。Western... 目的研究荷载白介素24(IL-24)的溶瘤腺病毒ZD55-IL-24联合达卡巴嗪抑制裸鼠黑素瘤的作用。方法建立裸鼠恶性黑素瘤A375细胞移植瘤模型后,分别给予ZD55-IL-24联合达卡巴嗪、ZD55-IL-24、达卡巴嗪、磷酸盐缓冲液(PBS)干预。Western印迹法检测A375细胞移植瘤组织IL-24、E1A蛋白表达。测量裸鼠肿瘤生长体积。结果Western印迹结果表明,ZD55-IL-24联合达卡巴嗪作用的裸鼠黑素瘤高效表达IL-24、E1A蛋白。接种30d后,ZD55-IL-24联合达卡巴嗪组肿瘤平均体积为(2346.5±576.0)mm3,ZD55-IL-24组为(4141.6±1348.2)mm3,达卡巴嗪组为(5230.1±922.8)mm3,PBS组为(7135.1±1002-3)mm3,ZD55-IL-24联合达卡巴嗪组与各组之间差异均有统计学意义(P〈0.05)。结论荷载IL-24基因的溶瘤腺病毒ZD55-IL-24联合达卡巴嗪有抑制黑素瘤增殖的作用。 展开更多
关键词 黑素瘤A375细胞 腺病毒 达卡巴嗪 白介素24 裸鼠 Western印迹法 抑制作用 荷载
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补骨脂注射液联合NB-UVB对人黑素瘤A375细胞增殖及黑素合成的影响 被引量:4
3
作者 武松江 刘志军 向亚萍 《中国皮肤性病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期5-8,共4页
目的通过观察补骨脂注射液联合窄谱中波紫外线(NB-UVB)对人黑素瘤A375细胞的增殖、黑素的合成以及酪氨酸酶活性的影响,探讨两者协同治疗白癜风的可能机制。方法选择一定浓度的补骨脂注射液(稀释后浓度为0.5%)联合一定剂量的NB-UVB(22m J... 目的通过观察补骨脂注射液联合窄谱中波紫外线(NB-UVB)对人黑素瘤A375细胞的增殖、黑素的合成以及酪氨酸酶活性的影响,探讨两者协同治疗白癜风的可能机制。方法选择一定浓度的补骨脂注射液(稀释后浓度为0.5%)联合一定剂量的NB-UVB(22m J/cm2)共同作用于人黑素瘤A375细胞后,通过MTT法观察其对人黑素瘤A375细胞细胞增殖的影响,Na OH裂解法测定黑素的含量,多巴氧化法测定酪氨酸酶活性的变化。结果补骨脂注射液+NB-UVB组中A375细胞培养至48h,72h后检测到的细胞增殖情况与单一补骨脂注射液组、NB-UVB组及空白组相比较,差异有统计学意义(P<0.05)。补骨脂注射液+NB-UVB组均显示可上调细胞内酪氨酸酶的活性及黑素的生成量,且与各实验干预组及空白组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论一定浓度的补骨脂注射液(稀释后浓度为0.5%)联合一定剂量的NB-UVB(22m J/cm2)可以协同促进人黑素瘤A375细胞的增殖,上调细胞酪氨酸酶活性,从而达到促进黑素合成的效果。 展开更多
关键词 黑素瘤A375细胞 补骨脂注射液 NB—UVB 酪氨酸酶活性 黑素含量
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高良姜素对人黑素瘤A375细胞黑素合成及TYR、TRP-1、TRP-2 mRNA表达的影响 被引量:2
4
作者 谭文英 《中国皮肤性病学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第10期1077-1080,1087,共5页
目的探讨不同质量分数高良姜素对人黑素瘤A375细胞黑素合成以及酪氨酸酶基因(TYR)、酪氨酸相关蛋白-1(TRP-1)和酪氨酸相关蛋白-2(TRP-2)mRNA的影响。方法选取人黑素瘤A375细胞,随机分为空白对照组、阳性对照组、90%高良姜素组和99%高良... 目的探讨不同质量分数高良姜素对人黑素瘤A375细胞黑素合成以及酪氨酸酶基因(TYR)、酪氨酸相关蛋白-1(TRP-1)和酪氨酸相关蛋白-2(TRP-2)mRNA的影响。方法选取人黑素瘤A375细胞,随机分为空白对照组、阳性对照组、90%高良姜素组和99%高良姜素组,其中阳性对照组、90%高良姜素组和99%高良姜素组各分为1.0,5.0和10.0 mmol/L组,每组给予相应浓度的含8-甲氧基补骨脂素、90%高良姜素和99%高良姜素的培养液,对照组给予等体积的培养液,采用MTT法测定细胞增殖情况,Na OH裂解法检测黑素合成情况,RT-PCR检测细胞TYR mRNA等表达情况。结果相同浓度下,90%高良姜素组和99%高良姜素组A值均高于阳性对照组(均P<0.05),且两组比较差异无统计学意义(P>0.05);10.0 mmol/L浓度下,90%高良姜素组和99%高良姜素组黑素水平分别为(170.12±0.07)%和(121.41±0.07)%,明显高于浓度为1.0 mmol/L和5.0 mmol/L浓度组(P<0.05);相同浓度下,90%高良姜素组黑素水平明显高于99%高良姜素组(P<0.05);在1.0 mmol/L浓度下,99%高良姜素组能显著上调TYP和TRP-2 mRNA表达,分别为(0.65±0.08)和(0.72±0.30),明显高于空白对照组以及相同浓度下90%高良姜素组(P<0.05);在5.0 mmol/L浓度下,99%高良姜素组能显著上调TYP,TRP-1,TRP-2 mRNA表达,分别为(0.61±0.07)、(0.61±0.11)和(0.67±0.27),明显高于空白对照组以及相同浓度下90%高良姜素组(P<0.05)。结论高良姜素对人黑素瘤A375细胞黑素合成及TYR,TRP-1,TRP-2 mRNA表达有所影响,其中99%高良姜素促进细胞黑素合成的能力弱于90%高良姜素,值得进一步研究。 展开更多
关键词 高良姜素 黑素合成 黑素瘤A375细胞 酪氨酸酶基因 酪氨酸相关蛋白
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鼠尾草酸通过减少β-catenin表达抑制人黑素瘤A375细胞增殖 被引量:1
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作者 王倩 万品文 李红文 《中国皮肤性病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第10期1113-1119,共7页
目的研究鼠尾草酸(CA)对人黑素瘤A375细胞增殖的影响并初步探讨其作用机制,为寻找新的黑素瘤临床治疗药物奠定一定的理论基础。方法 A375细胞传代培养后分为正常组、10μmol/L CA组(10μmol/L CA处理24h)、20μmol/L CA组、50μmol/L CA... 目的研究鼠尾草酸(CA)对人黑素瘤A375细胞增殖的影响并初步探讨其作用机制,为寻找新的黑素瘤临床治疗药物奠定一定的理论基础。方法 A375细胞传代培养后分为正常组、10μmol/L CA组(10μmol/L CA处理24h)、20μmol/L CA组、50μmol/L CA组,FH535 (β-catenin抑制剂)组(20μmol/L FH535处理24h)。MTT法检测细胞抑制情况;平板细胞克隆形成实验检测克隆形成情况;流式细胞仪检测细胞周期以及细胞凋亡变化; RT-PCR法检测A375细胞中β-catenin、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、淋巴增强因子1(LEF1)、原癌基因(C-myc) mRNA的表达; Western blot检测A375细胞中β-catenin、CyclinD1、LEF1、C-myc蛋白表达。结果与正常组相比,CA各组、FH535组细胞抑制率增加,CA各组呈时间、剂量依赖性增加(P <0. 05); CA各组、FH535组克隆形成数量均降低,CA各组克隆形成数量呈剂量依赖性降低(P <0. 05)。流式细胞仪检测显示与正常组相比,CA各组、FH535组G1期细胞比例升高,S期细胞比例降低,CA各组G1期细胞比例呈剂量依赖性升高,S期细胞比例呈剂量依赖性降低(P <0. 05); CA各组、FH535组细胞凋亡率升高,CA各组凋亡率呈剂量依赖性升高(P <0. 05)。与正常组相比,CA各组、FH535组β-catenin、CyclinD1、LEF1、C-myc mRNA、蛋白表达降低,CA各组呈剂量依赖性降低(P <0. 05)。结论 CA可能通过抑制β-catenin的表达,引起细胞周期G1期阻滞,进而抑制人黑素瘤A375细胞增殖。 展开更多
关键词 鼠尾草酸 黑素瘤A375细胞 Β-链蛋白 作用机制
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蒺藜皂苷对人黑素瘤A375细胞增值、粘附及黑素合成的作用 被引量:1
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作者 安丽凤 黄敬文 +4 位作者 王佳娜 鲁光宝 刘海洲 王英莲 王兴焱 《世界中医药》 CAS 2015年第A02期1673-1674,共2页
目的观察不同浓度的蒺藜皂苷对人黑素瘤A375细胞增值、粘附及黑素合成的作用.方法:选取人黑素瘤A375细胞为细胞模型,并以蒺藜皂苷进行干预,采用CCK-8法测定细胞活力,粘附实验测定细胞粘附力,氢氧化钠法测黑素含量,流式细胞术测ICAM-1含... 目的观察不同浓度的蒺藜皂苷对人黑素瘤A375细胞增值、粘附及黑素合成的作用.方法:选取人黑素瘤A375细胞为细胞模型,并以蒺藜皂苷进行干预,采用CCK-8法测定细胞活力,粘附实验测定细胞粘附力,氢氧化钠法测黑素含量,流式细胞术测ICAM-1含量.结果:不同浓度的蒺藜皂苷处理后,其细胞活力、细胞粘附力、黑素含量均有所增加,ICAM-1含量降低,其中以100、200 ug/mL效果好.结论:蒺藜皂苷能够促进人黑素瘤A375细胞增值、粘附及黑素合成,从而对白癜风患者发挥一定的治疗作用. 展开更多
关键词 蒺藜皂苷 黑素瘤A375细胞 白癜风
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下调microRNA-192基因表达对恶性黑素瘤A375细胞增殖及早期凋亡的影响
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作者 彭辉 康瑞花 +1 位作者 张国强 高顺强 《临床皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期4-7,共4页
目的:研究microRNA-192基因表达降低与恶性黑素瘤A375细胞增殖及凋亡的关系。方法:除空白对照组外,运用脂质体介导法将空载体和为microRNA-192设计的small interfering RNA(si RNA)转染到恶性黑素瘤A375细胞中,并利用实时定量PCR检测mic... 目的:研究microRNA-192基因表达降低与恶性黑素瘤A375细胞增殖及凋亡的关系。方法:除空白对照组外,运用脂质体介导法将空载体和为microRNA-192设计的small interfering RNA(si RNA)转染到恶性黑素瘤A375细胞中,并利用实时定量PCR检测microRNA-192的表达。通过形态学观察、细胞计数法、3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)比色法以及流式细胞免疫学等方法,分析空白对照组、空载体对照组(lipofectamine2000)和实验组恶性黑素瘤A375细胞的增殖和早期凋亡情况。结果:空白对照组和空载体对照组之间相比较,细胞增殖和凋亡情况几乎一致,差异无统计学意义。与空载体对照组相比,实验组存活的恶性黑素瘤A375细胞的活性和数量明显降低,此现象并随着si RNA浓度的提高而愈发明显。另外,实验组恶性黑素瘤A375细胞细胞凋亡指数较空载体对照组明显升高。结论:通过下调恶性黑素瘤细胞中microRNA-192基因表达可能会有效地抑制恶性黑素瘤的生长并促使其细胞凋亡。 展开更多
关键词 基因沉默 恶性黑素瘤A375细胞 细胞增殖 细胞凋亡 mieroRNA-192
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芹菜素对人恶性黑素瘤A375细胞周期的影响及机制研究
8
作者 曹经江 李东升 +5 位作者 李明静 吴斌 魏荣 朱军容 吕静 魏青宇 《中国中西医结合皮肤性病学杂志》 CAS 2017年第4期307-310,共4页
目的研究芹菜素对人恶性黑素瘤细胞系A375细胞周期的影响,并进一步探讨其作用机制。方法 A375细胞经芹菜素干预后,MTT比色法检测芹菜素对细胞增殖的影响,PI单标流式细胞术检测芹菜素对细胞周期的影响,蛋白印迹法检测芹菜素对细胞周期相... 目的研究芹菜素对人恶性黑素瘤细胞系A375细胞周期的影响,并进一步探讨其作用机制。方法 A375细胞经芹菜素干预后,MTT比色法检测芹菜素对细胞增殖的影响,PI单标流式细胞术检测芹菜素对细胞周期的影响,蛋白印迹法检测芹菜素对细胞周期相关蛋白Cyclin D1及p21表达的影响。结果芹菜素在体外能明显抑制A375细胞增殖,其抑制效应呈时间及浓度依赖性;芹菜素可影响A375细胞周期,经芹菜素干预的A375细胞,其细胞周期被阻滞于G1期;芹菜素可显著影响A375细胞周期相关蛋白的表达,芹菜素在下调A375细胞Cyclin D1表达的同时,明显上调p21蛋白的表达。结论芹菜素能拮抗人恶性黑素瘤A375细胞增殖,其机制可能与芹菜素影响A375细胞周期相关蛋白Cyclin D1/p21的表达进而调控A375细胞周期进程有关。 展开更多
关键词 芹菜素 人恶性黑素瘤A375细胞 细胞周期
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Celecoxib抑制人黑素瘤A375细胞增殖及对Cox-2/MMP-1蛋白表达的影响
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作者 任建文 彭振辉 +4 位作者 刘艳 潘敏 许庆强 李张军 王香兰 《中国皮肤性病学杂志》 CAS 北大核心 2008年第7期385-387,共3页
目的研究Celecoxib(塞来考昔)对人黑素瘤A375细胞增殖抑制、凋亡诱导和周期阻滞作用及对A375细胞表达Cox-2和分泌型MMP-1蛋白的影响。方法MTT法测定Celecoxib对A375细胞的增殖抑制作用,流式细胞术检测药物诱导细胞凋亡及周期阻滞作用;... 目的研究Celecoxib(塞来考昔)对人黑素瘤A375细胞增殖抑制、凋亡诱导和周期阻滞作用及对A375细胞表达Cox-2和分泌型MMP-1蛋白的影响。方法MTT法测定Celecoxib对A375细胞的增殖抑制作用,流式细胞术检测药物诱导细胞凋亡及周期阻滞作用;细胞爬片SABC免疫细胞化学检测Celecoxib对A375细胞Cox-2蛋白表达的影响,ELISA法分析Celecoxib对A375细胞分泌型MMP-1蛋白表达的影响。结果80μmol/L的Celecoxib明显抑制人黑素瘤A375细胞增殖,并诱导凋亡(凋亡率35.91%)和G2/M期阻滞,减少A375细胞表达Cox-2蛋白和分泌型MMP-1蛋白。结论人黑素瘤A375细胞表达Cox-2蛋白和MMP-1蛋白,Celecoxib是一种有潜力的抑制黑素瘤增殖的药物。 展开更多
关键词 CELECOXIB 黑素瘤A375细胞 COX-2蛋白 MMP-1蛋白
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维A酸CD437和阿维A抑制人黑素瘤A375细胞的比较
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作者 任建文 彭振辉 +3 位作者 潘敏 郭碧蓉 李晓莉 王香兰 《中国皮肤性病学杂志》 CAS 北大核心 2008年第8期449-451,共3页
目的探讨合成的维A酸CD437与阿维A对体外培养的人黑素瘤A375细胞的增殖抑制、凋亡诱导、周期阻滞作用及对Bax/bcl-2蛋白表达的影响。方法MTT法测定CD437及阿维A对人黑素瘤A375细胞的增殖抑制作用;流式细胞术检测两种药物诱导细胞凋亡及... 目的探讨合成的维A酸CD437与阿维A对体外培养的人黑素瘤A375细胞的增殖抑制、凋亡诱导、周期阻滞作用及对Bax/bcl-2蛋白表达的影响。方法MTT法测定CD437及阿维A对人黑素瘤A375细胞的增殖抑制作用;流式细胞术检测两种药物诱导细胞凋亡及周期阻滞;细胞爬片SABC免疫细胞化学分析两种药物对细胞Bax/bcl-2蛋白表达的影响。结果干预24h后,10-5mol/L维A酸CD437和阿维A对人黑素瘤A375细胞的增殖抑制率(PIR)和凋亡率分别为58.6%和43.25%,28.03%和17.13%(P<0.05),CD437促A375细胞G0/G1期阻滞,而阿维A无此作用;两药均上调A375细胞Bax蛋白表达和下调bcl-2蛋白表达,但CD437组与阿维A组差异无显著性。结论与阿维A相比较,CD437更有效抑制人黑素瘤A375细胞的增殖及更明显的凋亡诱导和G0/G1期阻滞作用;在辅助治疗黑素瘤方面,CD437比阿维A可能更具潜力。 展开更多
关键词 CD437 阿维A 黑素瘤A375细胞 凋亡 Bax/bcl-2蛋白
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