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黄芪当归主要活性成分配伍对人脐静脉内皮细胞氧化损伤的保护作用研究 被引量:13
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作者 谭媖子 刘彩霞 +1 位作者 朱秋燕 邓常清 《中西医结合心脑血管病杂志》 2020年第24期4141-4148,共8页
目的观察黄芪当归主要活性成分黄芪甲苷、黄芪皂苷-Ⅰ、毛蕊异黄酮、毛蕊异黄酮苷、阿魏酸和芒柄花素配伍对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)氧化损伤的保护作用。方法以ox-LDL构建HUVECs氧化损伤模型,采用均匀... 目的观察黄芪当归主要活性成分黄芪甲苷、黄芪皂苷-Ⅰ、毛蕊异黄酮、毛蕊异黄酮苷、阿魏酸和芒柄花素配伍对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)氧化损伤的保护作用。方法以ox-LDL构建HUVECs氧化损伤模型,采用均匀设计实验探讨6种活性成分配伍对氧化损伤HUVECs活性的影响,寻找6种活性成分抗HUVECs氧化损伤的最佳配伍浓度。在此基础上采用药物“敲出/敲入”中药辨识模式,分为正常组、模型组、各药物单用组、各药物敲出组及6种成分配伍组,分别检测乳酸脱氢酶(LDH)漏出率、一氧化氮(NO)总含量及一氧化氮合酶(NOS)活性,流式细胞术检测细胞周期及细胞凋亡,分析各主要成分及其配伍对HUVECs氧化损伤的影响。结果黄芪、当归6种主要活性成分及配伍均可降低LDH漏出率,减少细胞损伤,且黄芪甲苷和毛蕊异黄酮敲出的LDH漏出率升高,提示6种成分均可抑制内皮细胞损伤,其中以黄芪甲苷、毛蕊异黄酮作用较强。黄芪、当归6种主要活性成分及其配伍均能增强NOS活性,且黄芪皂苷-Ⅰ单用可增加NO含量,提示6种成分可增加NOS活性,且黄芪皂苷-Ⅰ可增加NO合成,6种成分配伍作用增强。黄芪甲苷和芒柄花素均可促进细胞增殖,而黄芪皂苷-Ⅰ、阿魏酸可抑制细胞增殖,提示黄芪甲苷和芒柄花素可能是促进细胞增殖的有效物质,而黄芪皂苷-Ⅰ、阿魏酸可能对细胞增殖具有负向调控作用。黄芪皂苷-Ⅰ、毛蕊异黄酮、毛蕊异黄酮苷、阿魏酸、芒柄花素可降低细胞凋亡率,6种活性成分配伍可增强抗细胞凋亡作用。结论6种活性成分对血管内皮细胞氧化损伤具有保护作用,这些活性成分配伍可增强抗血管内皮细胞氧化损伤,促进血管内皮细胞功能的修复。 展开更多
关键词 黄芪 当归 黄芪甲苷 黄芪皂苷- 毛蕊异黄酮 毛蕊异黄酮苷 阿魏酸 芒柄花素 血管内皮细胞 氧化损伤 实验研究
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遗传神经网络与遗传算法优选黄芪皂苷微波提取工艺条件 被引量:19
2
作者 黄鹏程 金伟锋 +4 位作者 万海同 李畅 陈建真 楼小红 何昱 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2019年第16期3815-3823,共9页
目的基于中心组合试验设计(central-composite design,CCD),采用遗传神经网络(genetic neural network,GNN)和遗传算法(genetic algorithm,GA)优选黄芪皂苷类成分的微波提取工艺条件。方法构建黄芪皂苷的HPLC指纹图谱,选择含量较高的7... 目的基于中心组合试验设计(central-composite design,CCD),采用遗传神经网络(genetic neural network,GNN)和遗传算法(genetic algorithm,GA)优选黄芪皂苷类成分的微波提取工艺条件。方法构建黄芪皂苷的HPLC指纹图谱,选择含量较高的7种成分(黄芪皂苷I^V和异黄芪皂苷Ⅰ、Ⅱ),以峰面积代替质量浓度,将通过熵权法计算得到的综合得分作为评价指标。在单因素实验基础上,运用CCD开展实验,构建遗传神经网络以建立提取工艺条件与评价指标之间的定量关系,并通过遗传算法优选微波提取黄芪皂苷成分的最佳工艺参数,并与响应面法优化结果进行比较。结果通过GNN与GA获得的最佳提取工艺条件为提取时间260 s、提取功率695 W、乙醇体积分数50%、液料比21.5,7个皂苷成分的综合得分为1 432.584;响应面分析法获得最佳提取工艺条件为提取时间190 s、提取功率880 W、乙醇体积分数70%、料液比18.5,7个皂苷成分的综合得分为1 066.236;GNN与GA所获提取工艺条件可有效增加综合得分。结论通过熵权法以及遗传神经网络构建黄芪皂苷成分与微波提取工艺条件之间的数学模型是可行的,可为实现中药有效部位多成分提取、分离纯化的工艺优选提供一种新的模式。 展开更多
关键词 黄芪皂苷 微波提取工艺 多目标优选 遗传神经网络 遗传算法 黄芪皂苷 黄芪皂苷 黄芪皂苷 黄芪皂苷 黄芪皂苷 黄芪皂苷 黄芪皂苷
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山西恒山地区蒙古传统黄芪和移栽黄芪的质量差异研究 被引量:19
3
作者 熊一峰 万燕晴 +2 位作者 李科 李震宇 秦雪梅 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期1635-1643,共9页
目的比较生长于山西北部恒山及其周边地区的蒙古传统黄芪和移栽黄芪化学成分差异。方法采用~1H-NMR代谢组学技术结合HPLC-UV-ELSD联用技术分别对两种种植模式黄芪的初级代谢物和次级代谢物进行差异性比较。结果从核磁图谱中共指认出25... 目的比较生长于山西北部恒山及其周边地区的蒙古传统黄芪和移栽黄芪化学成分差异。方法采用~1H-NMR代谢组学技术结合HPLC-UV-ELSD联用技术分别对两种种植模式黄芪的初级代谢物和次级代谢物进行差异性比较。结果从核磁图谱中共指认出25个代谢物,其中甲醇水相中主要为氨基酸和有机酸等初级代谢物,氯仿相中主要为脂肪酸类物质;多元统计结果显示二者的初级代谢物差异不大,但8,2′-羟基-7,4′-甲氧基异黄烷只在传统黄芪中检测到。采用HPLC-UV-ELSD联用技术测定不同黄芪样本中6种黄酮和4种皂苷的量,结果显示传统黄芪中毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花苷和黄芪皂苷III量显著高于移栽黄芪,而移栽黄芪中黄芪皂苷I的量显著高于传统黄芪,传统黄芪总黄酮量显著高于移栽黄芪,总皂苷量无显著性差异。结论恒山地区蒙古传统黄芪和移栽黄芪差异性主要体现在次级代谢物上,说明不同种植方式对黄芪次级代谢物的积累影响较大,为恒山地区发展优质的传统黄芪资源奠定了基础。 展开更多
关键词 黄芪 1H-NMR HPLC-UV-ELSD 毛蕊异黄酮葡萄糖苷 芒柄花苷 紫檀烷苷 异黄烷苷 毛蕊异黄酮 芒柄花素 黄芪皂苷 黄芪皂苷 黄芪皂苷 黄芪皂苷
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基于指纹图谱和多指标定量的蜜炙黄芪饮片质量控制研究 被引量:12
4
作者 张淑娟 张育贵 +4 位作者 李东辉 吴红伟 牛江涛 司昕蕾 李越峰 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2021年第10期3081-3088,共8页
目的采用HPLC法建立蜜炙黄芪饮片指纹图谱,并测定异黄酮类成分和皂苷类成分含量,进行聚类分析与主成分分析(PCA-主成分分析),比较炙黄芪饮片中4种异黄酮成分(毛蕊异黄酮苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮和芒柄花素)和4种皂苷类成分(黄芪甲苷、... 目的采用HPLC法建立蜜炙黄芪饮片指纹图谱,并测定异黄酮类成分和皂苷类成分含量,进行聚类分析与主成分分析(PCA-主成分分析),比较炙黄芪饮片中4种异黄酮成分(毛蕊异黄酮苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮和芒柄花素)和4种皂苷类成分(黄芪甲苷、黄芪皂苷I、黄芪皂苷II和黄芪皂苷III)的差异。方法采用HPLC法对15批甘肃不同产地炙黄芪饮片8种成分进行测定,运用国家药典委员会"中药色谱指纹图谱相似度评价软件(2012版)"进行评价,并结合PCA和正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA-正交偏最小二乘判别分析)等化学计量学方法对15批不同产地炙黄芪饮片进行区分与比较。结果建立了炙黄芪饮片异黄酮类成分和皂苷类成分HPLC指纹图谱,相似度均达0.90以上,确定了8个共有峰(毛蕊异黄酮苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素、黄芪甲苷、黄芪皂苷I、黄芪皂苷II和黄芪皂苷III)构成炙黄芪饮片的特征峰,毛蕊异黄酮苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、黄芪皂苷I和黄芪皂苷III是差异性化合物,可作为鉴别和区分炙黄芪饮片的质量控制指标。结论该法所建立的炙黄芪异黄酮成分和皂苷类成分指纹图谱特征性强、方法简便,结合8种成分含量测定可更好控制其质量,对炙黄芪饮片的鉴定及质量控制具有指导意义和参考价值。 展开更多
关键词 蜜炙黄芪 指纹图谱 毛蕊异黄酮苷 芒柄花苷 毛蕊异黄酮 芒柄花素 黄芪甲苷 黄芪皂苷 黄芪皂苷 黄芪皂苷 化学模式识别分析 质量控制
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UPLC-Q-Orbitrap HRMS结合主成分分析的复方血栓通胶囊质量评价研究 被引量:12
5
作者 李宁 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2018年第19期4552-4560,共9页
目的建立基于UPLC-Q-Orbitrap HRMS的复方血栓通胶囊中多种活性成分定量分析方法,并采用主成分分析法对其质量进行综合评价。方法采用Acquity UPLC~?BEH C_(18)色谱柱(50 mm×2.1 mm,1.7μm),以乙腈(A)-0.1%甲酸水(B)为流动相进行... 目的建立基于UPLC-Q-Orbitrap HRMS的复方血栓通胶囊中多种活性成分定量分析方法,并采用主成分分析法对其质量进行综合评价。方法采用Acquity UPLC~?BEH C_(18)色谱柱(50 mm×2.1 mm,1.7μm),以乙腈(A)-0.1%甲酸水(B)为流动相进行梯度洗脱,以实现化合物的前期分离;通过Q-Orbitrap MS先进的正、负离子同时监测、一级全扫描及自动触发二级质谱扫描的模式捕捉目标成分的精确相对分子质量及碎片离子信息,以实现对待测物的准确定性和定量;最后将定量结果与主成分分析法相结合对不同批次药物进行科学的质量评价分析。结果在优化的色谱、质谱条件下,甜菜碱、琥珀酸、丹参素钠、丹参素、原儿茶酸、原儿茶醛、咖啡酸、芦丁、人参皂苷Rg_1、迷迭香酸、丹酚酸A、丹酚酸B、汉黄芩素、毛蕊异黄酮、芒柄花黄素、黄芪皂苷Ⅱ、黄芪皂苷Ⅰ、人参皂苷Rg_3、二氢丹参酮Ⅰ、丹参酮Ⅰ、隐丹参酮、丹参酮Ⅱ_A和齐墩果酸分别在0.009 8~0.314 5、0.067 8~2.170 7、0.044 2~1.413 3、0.059 6~1.907 2、0.003 3~0.104 4、0.002 8~0.089 9、0.001 2~0.038 3、0.006 3~0.203 2、0.960 5~30.735 5、0.022 2~0.709 0、0.083 7~2.679 5、0.593 8~19.002 6、0.000 2~0.005 3、0.012 3~0.394 4、0.004 5~0.143 5、0.009 2~0.293 4、0.066 0~2.113 3、0.033 0~1.055 0、0.004 5~0.145 5、0.015 9~0.508 1、0.024 1~0.772 0、0.009 3~0.297 8、0.002 5~0.078 8μg/mL线性关系良好(r≥0.999 0);精密度、重复性及稳定性良好(RSD≤5%);加样回收率在98%~101%,RSD均小于3%;定量分析结果表明大多数批次药物质量较为稳定,其中人参皂苷Rg_1、丹酚酸B、琥珀酸、丹酚酸A、丹参素和丹参素钠对药物质量具有较大影响,可对其进行重点监控以保证药物批次质量。结论建立的定量方法灵敏度高且准确性好,方法学考察结果符合测定要求,可用于复方血栓通胶囊中多种活性成分的快速 展开更多
关键词 UPLC-Q-Orbitrap HRMS 复方血栓通胶囊 主成分分析 质量评价 甜菜碱 琥珀酸 丹参素钠 丹参素 原儿茶酸 原儿茶醛 咖啡酸 芦丁 人参皂苷Rg1 迷迭香酸 丹酚酸A 丹酚酸B 汉黄芩素 毛蕊异黄酮 芒柄花黄素 黄芪皂苷 黄芪皂苷 人参皂苷Rg3 二氢丹参酮 丹参酮 隐丹参酮 丹参酮ⅡA 齐墩果酸
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基于化学计量学分析方法黄芪药材质量评价体系的建立 被引量:11
6
作者 汪祺 郑笑为 +3 位作者 刘燕 姚令文 戴忠 马双成 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2015年第12期1825-1829,共5页
目的采用化学计量学分析方法,建立黄芪Astragalus membranaceus药材质量评价体系。方法收集20批不同产地不同品种黄芪药材,建立皂苷、黄酮类成分特征图谱。运用主成分分析、聚类分析方法深入研究不同黄芪药材中化学成分量的变化趋势及... 目的采用化学计量学分析方法,建立黄芪Astragalus membranaceus药材质量评价体系。方法收集20批不同产地不同品种黄芪药材,建立皂苷、黄酮类成分特征图谱。运用主成分分析、聚类分析方法深入研究不同黄芪药材中化学成分量的变化趋势及规律。结果 17个特征成分中,黄芪皂苷Ⅰ、黄芪皂苷ⅣV、芒柄花素和2个未知皂苷成分的差异显著,可作为区分不同产地或不同品种黄芪的关键性指标成分。结论通过化学计量学分析方法,建立的黄芪药材中皂苷、黄酮类成分评价体系专属性强、准确性高,可有效控制和评价黄芪药材质量。 展开更多
关键词 黄芪 特征图谱 化学计量学 质量评价体系 黄芪皂苷 黄芪皂苷 芒柄花素
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UPLC法同时测定甘肃产蒙古黄芪皂苷类成分的含量 被引量:9
7
作者 高攀峰 胡明勋 曹爱华 《中国药房》 CAS 北大核心 2015年第12期1708-1710,共3页
目的:建立同时测定甘肃产蒙古黄芪药材中黄芪皂苷Ⅰ、黄芪皂苷Ⅱ、黄芪皂苷Ⅲ、黄芪甲苷含量的方法。方法:采用超高效液相色谱法。色谱柱为Waters Acquity,流动相为乙腈-0.3%甲酸溶液(梯度洗脱);蒸发光散射检测器(ELSD)参数为漂移管温... 目的:建立同时测定甘肃产蒙古黄芪药材中黄芪皂苷Ⅰ、黄芪皂苷Ⅱ、黄芪皂苷Ⅲ、黄芪甲苷含量的方法。方法:采用超高效液相色谱法。色谱柱为Waters Acquity,流动相为乙腈-0.3%甲酸溶液(梯度洗脱);蒸发光散射检测器(ELSD)参数为漂移管温度70℃,喷雾器温度42℃,氮气体积流量2.07 L/min。结果:精密度、稳定性、重复性试验的RSD≤1.22%;黄芪皂苷Ⅰ、黄芪皂苷Ⅱ、黄芪皂苷Ⅲ、黄芪甲苷的加样回收率分别为100.32%、99.51%、100.57%、100.21%,RSD分别为0.44%、0.39%、1.19%、0.65%。结论:该方法简便、快速,结果准确、可靠,重复性良好,可为甘肃黄芪的质量控制提供依据。 展开更多
关键词 蒸发光散射检测器 黄芪 黄芪皂苷 黄芪皂苷 黄芪皂苷 黄芪甲苷
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补阳还五汤抗脑卒中网络动力学研究 被引量:5
8
作者 谯茹 樊启猛 +5 位作者 贺鹏 李海英 张伟龙 李文娇 潘雪 贺福元 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期127-137,共11页
目的基于补阳还五汤抗缺血性脑卒中的超分子“印迹模板”理论中的物质流量平衡原理,建立网络动力学平衡常数模型,阐明补阳还五汤复方抗脑缺血成分-成分作用关系,为中药复方治疗疾病的复杂作用体系提供新思路。方法通过UPLC-MS/MS测定补... 目的基于补阳还五汤抗缺血性脑卒中的超分子“印迹模板”理论中的物质流量平衡原理,建立网络动力学平衡常数模型,阐明补阳还五汤复方抗脑缺血成分-成分作用关系,为中药复方治疗疾病的复杂作用体系提供新思路。方法通过UPLC-MS/MS测定补阳还五汤血药成分及其浓度,研究稳态血药浓度内再次给药对体系的扰动,以网络动力学数学模型为媒介,选取20个有效成分作为模型中的节点,计算补阳还五汤网络动力学平衡常数参数,从而以平衡常数矩阵的方式揭示补阳还五汤成分群在体内的作用关系。结果在构建的平衡常数拓扑网络中,补阳还五汤中10种入血成分对网络有正向调控作用,按作用大小排序为异黄芪皂苷Ⅰ>琥珀酸>刺芒柄花苷>洋川芎内酯H>洋川芎内酯Ⅰ>香草醛>丁烯苯酞>苦杏仁苷>氧化芍药苷>3-羟基-9,10-二甲氧基紫檀烷;另10种成分网络有负向调控作用,按作用大小排序为黄芪皂苷Ⅰ>洋川芎内酯C>阿魏酸>羟基红花黄色素A>藁本内酯>胡萝卜苷>洋川芎内酯A>毛蕊异黄酮>芒柄花素>毛蕊异黄酮葡萄糖苷,异黄芪皂苷Ⅰ、黄芪皂苷Ⅰ等成分的作用平衡常数较大。结论在构建的成分-成分间的平衡常数拓扑网络中,异黄芪皂苷Ⅰ、黄芪皂苷Ⅰ等对成分群间的网络影响较大,可能为补阳还五汤治疗缺血性脑卒中的“印迹模板”。 展开更多
关键词 补阳还五汤 缺血性脑卒中 印迹模板 网络动力学 复杂体系 黄芪皂苷 黄芪皂苷
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市售不同产地黄芪HPLC-DAD-ELSD指纹图谱及同时测定3种成分含量的方法研究 被引量:10
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作者 廖小芳 毕晓黎 +1 位作者 胥爱丽 李养学 《广东药科大学学报》 CAS 2018年第5期558-563,共6页
目的采用高效液相色谱法、二极管阵列检测器和蒸发光散射检测器联用技术(HPLC-DADELSD)建立45批不同产地黄芪药材的指纹图谱,并在指纹图谱条件下,同时测定3种黄酮类及皂苷类成分的质量分数。方法采用Phenomenex kinetex@XBC18色谱柱(4.6... 目的采用高效液相色谱法、二极管阵列检测器和蒸发光散射检测器联用技术(HPLC-DADELSD)建立45批不同产地黄芪药材的指纹图谱,并在指纹图谱条件下,同时测定3种黄酮类及皂苷类成分的质量分数。方法采用Phenomenex kinetex@XBC18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-0.02%甲酸水(梯度洗脱),流速为1.0 m L/min,柱温为30℃,进样量为10μL,检测波长为230 nm。蒸发光散射检测器条件:漂移管温度为60℃,载气流速为2.5 L/min。结果建立了45批不同产地黄芪药材的HPLC-DAD-ELSD串联指纹图谱,并确立了HPLC-DAD指纹图谱的22个共有峰,指认了其中的毛蕊异黄酮葡萄糖苷和毛蕊异黄酮; HPLC-ELSD指纹图谱确立了22个共有峰,指认了其中的毛蕊异黄酮葡萄糖苷、毛蕊异黄酮和黄芪皂苷Ⅰ。毛蕊异黄酮葡萄糖苷在126.350~750.812μg/m L、毛蕊异黄酮在162.500~975.000μg/m L、黄芪皂苷Ⅰ在84.230~505.350μg/m L线性关系良好,r>0.999 0,平均加样回收率分别为100.5%、103.2%、98.2%。结论建立的方法简单、准确、可靠,为评价和控制不同产地的黄芪药材质量提供了一定的科学依据。 展开更多
关键词 黄芪 指纹图谱 高效液相色谱法 毛蕊异黄酮葡萄糖苷 毛蕊异黄酮 黄芪皂苷
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HPLC-ELSD法同时测定参芪颗粒中6个成分的含量 被引量:6
10
作者 吴佳 张正锋 胡娟娟 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期68-73,共6页
目的:建立HPLC-ELSD法同时测定参芪颗粒中党参炔苷、芒柄花素、黄芪皂苷Ⅰ、黄芪皂苷Ⅱ、黄芪皂苷Ⅲ和黄芪甲苷(黄芪皂苷Ⅳ)的含量测定方法。方法:采用Agilent C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-0.5%(v/v)醋酸水溶液为流动相... 目的:建立HPLC-ELSD法同时测定参芪颗粒中党参炔苷、芒柄花素、黄芪皂苷Ⅰ、黄芪皂苷Ⅱ、黄芪皂苷Ⅲ和黄芪甲苷(黄芪皂苷Ⅳ)的含量测定方法。方法:采用Agilent C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-0.5%(v/v)醋酸水溶液为流动相,进行梯度洗脱,流速1.0 m L·min^(-1),柱温35℃;使用蒸发光散射检测器,载气气压为2.76×(10)~5 Pa,漂移管温度为70℃。结果:在34 min内,参芪颗粒中6个成分(党参炔苷、芒柄花素、黄芪皂苷Ⅰ、黄芪皂苷Ⅱ、黄芪皂苷Ⅲ和黄芪甲苷)完全分离,峰面积的对数与进样量的对数呈良好的线性关系(r=0.999 5~0.999 9);平均回收率分别为96.7%、99.5%、99.5%、98.7%、99.6%、97.4%。3批样品中党参炔苷、芒柄花素、黄芪皂苷Ⅰ、黄芪皂苷Ⅱ、黄芪皂苷Ⅲ和黄芪甲苷含量分别在0.10~0.13、0.008 6~0.012 1、0.014~0.018、0.056~0.060、0.002 3~0.004 1、0.055~0.066 mg·g-1。结论:该方法经方法学验证可用于参芪颗粒的质量控制。 展开更多
关键词 参芪颗粒 HPLC-ELSD 党参炔苷 芒柄花素 黄芪皂苷 黄芪皂苷 黄芪皂苷 黄芪甲苷(黄芪皂苷IV) 方法验证
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黄芪皂苷Ⅰ调控PI3K/Akt/NF-κB通路抑制LPS诱导BV-2细胞激活 被引量:9
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作者 刘宏帅 李文慧 +6 位作者 沈慧 唐韵迪 石海莲 吴辉 黄菲 吴晓俊 胡之璧 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期1946-1950,共5页
目的:探讨黄芪皂苷Ⅰ(ASTⅠ)对脂多糖(LPS)诱导BV-2小胶质细胞激活的作用及其分子机制。方法:不同浓度的ASTⅠ(25、50、100μmol/L)预处理BV-2细胞2h后,加入LPS(200ng/m L)诱导20h,收集培养基上清及细胞。CCK-8法检测不同浓度的ASTⅠ对B... 目的:探讨黄芪皂苷Ⅰ(ASTⅠ)对脂多糖(LPS)诱导BV-2小胶质细胞激活的作用及其分子机制。方法:不同浓度的ASTⅠ(25、50、100μmol/L)预处理BV-2细胞2h后,加入LPS(200ng/m L)诱导20h,收集培养基上清及细胞。CCK-8法检测不同浓度的ASTⅠ对BV-2细胞活性的影响;分别采用ELISA和Greiss法检测培养上清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)和一氧化氮(NO)的含量;q PCR法检测细胞中CD11b,TNF-α,诱导型一氧化氮合酶(i NOS)和白介素1β(IL-1β)m RNA水平;Western blot法检测细胞PI3K/AKT/NF-κB信号通路蛋白表达;细胞免疫荧光(ICC)法观察p-NFκB的入核情况。结果:ASTⅠ在不影响BV-2细胞存活率的条件下,能显著抑制LPS诱导BV-2细胞TNF-α和NO分泌的增加(P<0.01)。q PCR结果显示,ASTⅠ能够显著抑制TNF-α,i NOS及IL-1β的m RNA生成(P<0.001,P<0.001,P<0.05),但对BV-2细胞CD11b的m RNA水平无显著影响。同时,ASTⅠ能显著抑制BV-2细胞中LPS诱导上调的i NOS,COX-2蛋白表达。ASTⅠ能够降低LPS诱导的p-NF-κB的核转位作用,并且能够减少LPS引起的PI3K/Akt/NF-κB/IκB蛋白的磷酸化作用。结论:ASTⅠ能够抑制LPS诱导BV-2细胞的大量激活,作用机制可能与其抑制PI3K/Akt/NF-κB信号通路有关。 展开更多
关键词 黄芪皂苷 小胶质细胞 神经炎性反应 BV-2细胞
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HPLC-CAD分析黄芪甲苷提取过程中黄芪皂苷类成分动态变化 被引量:5
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作者 刘蓬蓬 鞠成国 +2 位作者 林桂梅 聂紫璇 任天航 《中国中医药信息杂志》 CAS CSCD 2022年第11期92-96,共5页
目的采用高效液相色谱-电喷雾检测器(HPLC-CAD)分析《中华人民共和国药典》黄芪甲苷提取过程中黄芪皂苷类成分的变化情况。方法采用Ecosil C18色谱柱(5μm,4.6 mm×250 mm),以纯水-乙腈溶液为流动相,梯度洗脱,电喷雾检测器的氮气压... 目的采用高效液相色谱-电喷雾检测器(HPLC-CAD)分析《中华人民共和国药典》黄芪甲苷提取过程中黄芪皂苷类成分的变化情况。方法采用Ecosil C18色谱柱(5μm,4.6 mm×250 mm),以纯水-乙腈溶液为流动相,梯度洗脱,电喷雾检测器的氮气压力35 psi,高频滤波,量程200 pA,流速1.0 mL/min,进样量10μL,根据黄芪甲苷的主要提取步骤分别制备供试品溶液,测定黄芪皂苷Ⅰ、黄芪皂苷Ⅱ和黄芪甲苷的含量。结果黄芪中黄芪皂苷Ⅰ和黄芪皂苷Ⅱ的含量较高,黄芪甲苷含量较低。在黄芪甲苷提取过程中,加入氨试液后的供试品溶液中黄芪皂苷Ⅰ和黄芪皂苷Ⅱ含量显著降低,而黄芪甲苷含量显著增加,表明黄芪皂苷Ⅰ和黄芪皂苷Ⅱ转化成黄芪甲苷。结论黄芪甲苷提取过程中黄芪皂苷Ⅰ、黄芪皂苷Ⅱ发生了量变与质变,而黄芪甲苷发生了量变。 展开更多
关键词 黄芪 高效液相色谱-电喷雾检测器 含量测定 黄芪皂苷 黄芪皂苷 黄芪甲苷
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高效液相色谱串联电喷雾检测器一测多评法同时测定当归丸中5种皂苷类成分
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作者 郭润芳 李瑞燕 李建伟 《山西中医药大学学报》 2023年第6期631-635,共5页
目的:建立高效液相色谱串联电喷雾检测器一测多评法(HPLC-CAD-QAMS),同时测定当归丸中5种成分黄芪皂苷Ⅱ、黄芪皂苷IV、异黄芪皂苷Ⅱ、黄芪皂苷Ⅰ、异黄芪皂苷Ⅰ的含量。方法:采用电雾式检测器(CAD),将漂移管的温度调节至50℃,并将气体... 目的:建立高效液相色谱串联电喷雾检测器一测多评法(HPLC-CAD-QAMS),同时测定当归丸中5种成分黄芪皂苷Ⅱ、黄芪皂苷IV、异黄芪皂苷Ⅱ、黄芪皂苷Ⅰ、异黄芪皂苷Ⅰ的含量。方法:采用电雾式检测器(CAD),将漂移管的温度调节至50℃,并将气体的流速调节至50 psi;Agilent SB-C18(150 mm×4.6 mm,3.5μm)色谱柱,将A相和B相分别设置为0.1%的甲酸和乙腈,并将流速调节至1.5 ml/min,同时将进样量调节至20μl,最后将柱温调节至40℃。建立黄芪皂苷Ⅱ与黄芪皂苷IV、异黄芪皂苷Ⅱ等4个皂苷成分的相对校正因子(RCF),用RCF计算各指标成分含量,并验证一测多评法(QAMS)的准确度和重复性。结果:色谱峰分离度良好,黄芪皂苷Ⅱ、黄芪皂苷IV、异黄芪皂苷Ⅱ、黄芪皂苷Ⅰ、异黄芪皂苷Ⅰ的线性范围分别为7.5~150μg/ml、8.2~164μg/ml、8.3~16.6μg/ml、7.8~156μg/ml、9.8~245μg/ml,平均加样回收率分别为98.1%、98.7%、99.3%、98.6%、99.2%,RSD分别为1.13%、1.66%、0.97%、1.03%、1.01%。黄芪皂苷Ⅱ设定为内参物,对黄芪皂苷IV、异黄芪皂苷Ⅱ、黄芪皂苷Ⅰ、异黄芪皂苷Ⅰ的相对校正因子分别为0.822、0.549、0.287、0.786,建立的一测多评法检测方法、结果可靠。结论:建立的HPLC-CAD-QAMS法简便、准确,同时测定当归丸中5个指标成分,可用于当归丸的多指标成分质量控制,为当归丸的质量标准研究提供参考。 展开更多
关键词 当归丸 黄芪皂苷 黄芪皂苷IV 黄芪皂苷 黄芪皂苷 黄芪皂苷 一测多评 HPLC-CAD
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基于HPLC-PDA-ELSD的炙黄芪特征成分一测多评适用性研究
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作者 黄沈辉 李洋 +4 位作者 孙捷 宋丽 万毅 彭国平 郑云枫 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2024年第15期5230-5237,共8页
目的针对炙黄芪中主要指标成分及经蜜炙转化的特征乙酰基成分,建立HPLC-PDA-ELSD测定炙黄芪中6种异黄酮及2种三萜皂苷的分析方法以及6种异黄酮的一测多评(quantitative determination analysis multi-component by a singlemarker,QAMS... 目的针对炙黄芪中主要指标成分及经蜜炙转化的特征乙酰基成分,建立HPLC-PDA-ELSD测定炙黄芪中6种异黄酮及2种三萜皂苷的分析方法以及6种异黄酮的一测多评(quantitative determination analysis multi-component by a singlemarker,QAMS)法。方法选取毛蕊异黄酮7-O-β-D-葡萄糖苷(CYG)、黄芪皂苷I(AGI)分别为异黄酮和三萜皂苷类成分的内参物,并计算CYG与乙酰毛蕊异黄酮苷(CYA)、芒柄花苷(FMG)、毛蕊异黄酮(CY)、乙酰芒柄花苷(FMA)、芒柄花素(FM)及AGI与乙酰黄芪皂苷I(ATI)的相对校正因子(f_(k/s)),在不同仪器、色谱柱、柱温、体积流量上考察各成分相对校正因子的稳定性与耐用性,比较QAMS法与外标法(ESM)结果差异。结果对来自8个厂家共18批炙黄芪进行检测,PDA检测的6种异黄酮的QAMS法与ESM的结果相近,相对误差绝对值均在5%以内,表明针对异黄酮类成分建立的QAMS法准确性良好,可选用QAMS法与ESM进行质量控制;ELSD检测的2种三萜皂苷的QAMS法与ESM的结果差异明显,相对误差绝对值为0.40%~22.69%,显示针对三萜皂苷类成分建立的QAMS法不适用,应选用ESM进行质量控制。结论建立的炙黄芪中6种异黄酮及2种三萜皂苷的分析方法及6种异黄酮的QAMS法准确可靠,操作简便,可反映黄芪的蜜炙程度,为更加全面地评价炙黄芪质量提供参考,以期提升炙黄芪饮片质量。 展开更多
关键词 黄芪 特征成分 HPLC-PDA-ELSD 一测多评法 毛蕊异黄酮7-O-β-D葡萄糖苷 乙酰毛蕊异黄酮苷 芒柄花苷 毛蕊异黄酮 乙酰芒柄花苷 芒柄花素 黄芪皂苷 乙酰黄芪皂苷
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HPLC-DAD-ELSD法同时测定芪蛭降糖胶囊中6种成分的含量 被引量:7
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作者 史静超 柴智 杨丽 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第10期4627-4630,共4页
目的:建立定量测定芪蛭降糖胶囊中4种黄酮类成分:毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮和芒柄花素,2种皂苷类成分:黄芪甲苷、黄芪皂苷Ⅰ的方法。方法:采用HPLC-DAD-ELSD法,Agilent SB-C18(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱,流动相乙腈... 目的:建立定量测定芪蛭降糖胶囊中4种黄酮类成分:毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮和芒柄花素,2种皂苷类成分:黄芪甲苷、黄芪皂苷Ⅰ的方法。方法:采用HPLC-DAD-ELSD法,Agilent SB-C18(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱,流动相乙腈-0.1%甲酸水溶液梯度洗脱,柱温30℃,体积流量1.0mL/min,检测波长254nm;ELSD漂移管温度100℃,气体流量2.4L/min。结果:毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素、黄芪甲苷、黄芪皂苷Ⅰ在0.4296~1.0024μg(r=0.9993)、0.2214~0.5166μg(r=0.9991)、0.6762~1.5788μg(r=1.0000)、0.2286~0.5334μg(r=1.0000)、3.1374~7.3206μg(r=0.9990)、0.6375~1.4875μg(r=0.9993)范围内分别与峰面积积分值呈良好的线性关系;芪蛭降糖胶囊中6个成分的平均回收率分别为95.28%、96.18%、98.38%、97.61%、96.20%、100.39%。结论:建立了HPLC-DAD-ELSD法同时测定芪蛭降糖胶囊中毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素、黄芪甲苷、黄芪皂苷Ⅰ含量的方法。方法准确、灵敏度高、重复性好,可为芪蛭降糖胶囊质量控制提供可靠方法。 展开更多
关键词 芪蛭降糖胶囊 毛蕊异黄酮葡萄糖苷 芒柄花苷 毛蕊异黄酮 芒柄花素 黄芪甲苷 黄芪皂苷 高效液相色谱-二极管阵列检测一蒸发光散射检测
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HPLC法同时测定参芪扶正注射液中6种成分的含量 被引量:4
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作者 舒娟 杨胜斌 《中国药房》 CAS 北大核心 2016年第30期4275-4277,共3页
目的:建立同时测定参芪扶正注射液中黄芪皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和党参炔苷、芒柄花素含量的方法。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Ultimate XB-C_(18),检测器为蒸发光散射检测器,流动相为乙腈-0.5%甲酸(梯度洗脱),流速为1.2 ml/m... 目的:建立同时测定参芪扶正注射液中黄芪皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和党参炔苷、芒柄花素含量的方法。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Ultimate XB-C_(18),检测器为蒸发光散射检测器,流动相为乙腈-0.5%甲酸(梯度洗脱),流速为1.2 ml/min,柱温为30℃,进样量为10μl。结果:黄芪皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、党参炔苷和芒柄花素检测进样量线性范围分别为0.62-5.67μg(r=0.999 6)、0.78-6.31μg(r=0.999 6)、0.36-3.48μg(r=0.999 7)、0.81-6.72μg(r=0.999 5)、0.82-7.03μg(r=0.999 8)、0.58-6.62μg(r=0.999 7);定量限分别为1.21、0.15、0.12、0.03、0.12、0.17μg/ml;检测限分别为0.35、0.35、0.04、0.01、0.03、0.04μg/ml;精密度、稳定性、重复性试验的RSD〈2%;加样回收率分别为95.1%-101.1%(RSD=2.0%,n=9)、95.2%-100.7%(RSD=1.9%,n=9)、95.8%-100.2%(RSD=1.4%,n=9)、96.2%-100.6%(RSD=1.7%,n=9)、96.6%-101.2%(RSD=1.4%,n=9)、95.9%-99.5%(RSD=1.2%,n=9)。结论:该方法操作简便、结果准确,可用于同时测定参芪扶正注射液中黄芪皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、党参炔苷和芒柄花素的含量。 展开更多
关键词 参芪扶正注射液 高效液相色谱法 黄芪皂苷 黄芪皂苷 黄芪皂苷 黄芪皂苷 党参炔苷 芒柄花素
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黄芪皂苷I对Th1免疫反应的调节效应及机制研究 被引量:7
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作者 顾瑛媛 宋娜丽 万春平 《云南中医中药杂志》 2017年第12期72-74,共3页
目的研究黄芪皂苷Ⅰ的免疫调节作用以及作用的分子机理。方法构建丝裂原诱导脾淋巴细胞增殖细胞模型,测定黄芪皂苷Ⅰ对Con A诱导T淋巴细胞增殖和LPS诱导B淋巴细胞增殖反应,构建anti-CD3 m Ab抗体诱导T淋巴细胞增殖,RT-PCR检测黄芪皂苷Ⅰ... 目的研究黄芪皂苷Ⅰ的免疫调节作用以及作用的分子机理。方法构建丝裂原诱导脾淋巴细胞增殖细胞模型,测定黄芪皂苷Ⅰ对Con A诱导T淋巴细胞增殖和LPS诱导B淋巴细胞增殖反应,构建anti-CD3 m Ab抗体诱导T淋巴细胞增殖,RT-PCR检测黄芪皂苷Ⅰ对IL-2、IFN-γ和T-bet mRNA基因表达。结果黄芪皂苷Ⅰ在30n M显著促进Con A刺激T淋巴细胞增殖,差异有显著性意义(P<0.05);黄芪皂苷Ⅰ体外用药能够显著上调IFN-γ,T-bet的mRNA表达,而对IL-2表达水平无明显影响。结论黄芪皂苷Ⅰ可能特异性激活转录因子T-bet的转录,促进T淋巴细胞增殖和细胞因子的产生。 展开更多
关键词 黄芪皂苷 T淋巴细胞 Th1免疫反应 IFN-Γ T-BET
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HPCE同时测定黄芪饮片中3种指标成分的含量 被引量:5
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作者 陈巧霞 韩乐 +4 位作者 刘训红 许虎 傅兴圣 李俊松 蔡宝昌 《南京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期275-278,共4页
目的建立高效毛细管电泳法(HPCE)同时测定黄芪饮片中黄芪甲苷、黄芪皂苷Ⅰ、毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量的方法。方法 40mmol/L硼砂-20mmol/L硼酸-10%甲醇(pH=8.7)为电泳介质,未涂渍标准熔融石英毛细管(75μm i.d.×64.5cm,有效长度56cm... 目的建立高效毛细管电泳法(HPCE)同时测定黄芪饮片中黄芪甲苷、黄芪皂苷Ⅰ、毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量的方法。方法 40mmol/L硼砂-20mmol/L硼酸-10%甲醇(pH=8.7)为电泳介质,未涂渍标准熔融石英毛细管(75μm i.d.×64.5cm,有效长度56cm)为分离通道,分离电压为20kV,检测波长为206nm,毛细管温度为25℃,压力进样为5kPa×6s。结果 3种指标成分的浓度与峰面积的线性关系良好(r>0.9900);加样回收率为91.20%~104.40%。结论该方法简单、准确,重复性较好,可用于黄芪饮片的质量评价和控制。 展开更多
关键词 高效毛细管电泳法 黄芪 黄芪甲苷 黄芪皂苷 毛蕊异黄酮葡萄糖苷
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木犀草素、欧当归内酯A和黄芪皂苷Ⅰ单用及联用对人肝星状细胞株LX-2增殖、活化的影响
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作者 陆倩 张金娟 +2 位作者 蒋先慧 国小利 廖尚高 《贵州医科大学学报》 CAS 2024年第2期198-204,共7页
目的 探讨木犀草素(Lut)、欧当归内酯A(Lev)和黄芪皂苷Ⅰ(Ast)单用及联用对人肝星状细胞株LX-2增殖、活化的影响。方法 取对数生长期的LX-2细胞,采用噻唑蓝(MTT)法考察Lut、Lev和Ast对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的LX-2细胞增殖的影... 目的 探讨木犀草素(Lut)、欧当归内酯A(Lev)和黄芪皂苷Ⅰ(Ast)单用及联用对人肝星状细胞株LX-2增殖、活化的影响。方法 取对数生长期的LX-2细胞,采用噻唑蓝(MTT)法考察Lut、Lev和Ast对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的LX-2细胞增殖的影响、联用比例确定及Lut、Lev和Ast联用对TGF-β1诱导LX-2细胞增殖的影响;应用CalcuSyn软件计算Lut、Lev及Ast联用抑制LX-2细胞增殖的联合指数(CI),分析3者联用类型;通过蛋白免疫印迹法(Western blot)检测3者对LX-2细胞中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和TGF-β1蛋白表达的影响。结果 MTT结果显示,Lut、Lev和Ast联用摩尔比为1∶1∶10,3者单用及联用对TGF-β1诱导的LX-2细胞增殖均具有抑制作用(P<0.05),并呈浓度依赖性;CalcuSyn软件分析结果显示,3者联用对LX-2细胞的增殖抑制率>15%时CI<1,说明3者联用具有协同增效的作用;Western blot结果显示,Lut、Lev及Ast联用能够显著降低TGF-β1诱导的LX-2细胞中α-SMA蛋白的表达(P<0.01),降低LX-2细胞中TGF-β1蛋白的表达(P<0.05)。结论 Lut、Lev和Ast单用及联用均能抑制LX-2细胞的增殖、活化,3者联用作用更强、具有协同增效的作用,该作用可能与下调肝星状细胞TGF-β1蛋白表达有关。 展开更多
关键词 木犀草素 欧当归内酯A 黄芪皂苷 LX-2细胞 联合指数 协同作用
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黄芪当归主要活性成分抗血管平滑肌细胞增殖和迁移的作用 被引量:3
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作者 陈凌波 阎卉芳 邓常清 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第7期3811-3818,共8页
目的:研究黄芪和当归6种主要活性成分芒柄花素、黄芪皂苷Ⅰ、黄芪甲苷、毛蕊异黄酮、阿魏酸、毛蕊异黄酮苷单用及其配伍对大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖与迁移的影响。方法:以血小板衍生生长因子BB(PDGF-BB)诱导VSMCs增殖,随机分为对... 目的:研究黄芪和当归6种主要活性成分芒柄花素、黄芪皂苷Ⅰ、黄芪甲苷、毛蕊异黄酮、阿魏酸、毛蕊异黄酮苷单用及其配伍对大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖与迁移的影响。方法:以血小板衍生生长因子BB(PDGF-BB)诱导VSMCs增殖,随机分为对照组、模型组、各成分单用组、各成分剔除组、六药配伍组。CCK-8检测VSMCs增殖,流式细胞术检测细胞周期,划痕实验检测细胞迁移能力,免疫荧光法检测增殖细胞核抗原(PCNA)、平滑肌α肌动蛋白(α-SMA)、骨桥蛋白(OPN)的表达。结果:各成分单用组(除芒柄花素单用组外)、各成分剔除组、六药配伍组均可显著抑制VSMCs增殖、细胞周期转化、PCNA的表达(P<0.05,P<0.01)。与六药配伍组比较,黄芪皂苷Ⅰ剔除组、黄芪甲苷剔除组、毛蕊异黄酮剔除组细胞增殖抑制率显著降低,增殖指数(PI)、PCNA蛋白表达显著升高(P<0.05,P<0.01);单用黄芪皂苷Ⅰ组、单用毛蕊异黄酮组、单用阿魏酸组、各成分剔除组、六药配伍组均可使细胞迁移降低,α-SMA表达上调,OPN蛋白表达下调(P<0.01),单用毛蕊异黄酮苷组可上调α-SMA表达(P<0.05)。与六药配伍组比较,黄芪皂苷Ⅰ剔除组、黄芪甲苷剔除组、毛蕊异黄酮剔除组均可使细胞迁移率增加,α-SMA表达降低,OPN表达增强(P<0.01);阿魏酸剔除组可使细胞迁移率和OPN表达增加(P<0.01)。结论:黄芪当归主要活性成分配伍对VSMCs表型转化、增殖和迁移的抑制作用强于药物单用,其中黄芪皂苷Ⅰ、黄芪甲苷、毛蕊异黄酮主要起抑制VSMCs增殖和迁移的作用,阿魏酸起抑制VSMCs迁移的作用,毛蕊异黄酮苷可抑制VSMCs增殖。黄芪和当归主要活性成分配伍的作用可能是通过抑制VSMCs表型转化和细胞周期进程而发挥的。 展开更多
关键词 黄芪 当归 芒柄花素 黄芪皂苷 黄芪甲苷 毛蕊异黄酮 阿魏酸 毛蕊异黄酮苷 血管平滑肌细胞
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