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大环糊精及其在食品工业应用前瞻 被引量：10
1
作者 王水兴 郭勇 许杨 《食品与机械》 CSCD 北大核心 2006年第2期113-116,共4页
分析了大环糊精的结构与功能,综述了国外大环糊精研究的最新成果,展望了其在食品工业方面的应用前景。
关键词 大环糊精 环状淀粉 环状糊精 麦芽糖转糖基酶
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基因工程菌E.coli BL21/pET-DsbA-MalQ发酵产麦芽糖转糖基酶的研究 被引量：3
2
作者 王水兴 李燕萍 +3 位作者 许杨 夏慧玲 吴凌伟 郁振军 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第8期285-289,共5页
为了获得最佳的基因工程菌E.coli BL21/pET-DsbA-MalQ发酵产酶条件,通过进行诱导时间﹑诱导温度﹑IPTG的浓度﹑诱导前菌液浓度(OD600)等因素梯度实验,研究各因素对发酵产酶的影响。实验结果表明,基因工程菌的最佳诱导条件分别为:诱导时... 为了获得最佳的基因工程菌E.coli BL21/pET-DsbA-MalQ发酵产酶条件,通过进行诱导时间﹑诱导温度﹑IPTG的浓度﹑诱导前菌液浓度(OD600)等因素梯度实验,研究各因素对发酵产酶的影响。实验结果表明,基因工程菌的最佳诱导条件分别为:诱导时间为2.5h,诱导温度为30℃,IPTG浓度为0.5mmol/L,诱导前OD600值为0.5。在最佳工艺条件下,粗酶液的酶活为130U,相当于出发菌产酶效率的135倍。 展开更多
关键词 E.COLI BL21/pET-DsbA-MalQ 诱导时间 诱导温度 IPTG浓度 麦芽糖转糖基酶
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大肠杆菌MalQ基因的克隆与原核融合表达 被引量：2
3
作者 王水兴 郭勇 +1 位作者 许杨 李燕萍 《华南理工大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第4期122-126,共5页
为了构建用于表达麦芽糖转糖基酶的基因工程菌,用PCR方法获得大肠杆菌(Escherichia coli)K12MalQ基因.将该基因插入原核表达载体pET-DsbA中,对质粒所含外源片段进行双向测序,并经局部相似性基本查询工具(BLAST)比较分析,发现其与GenBan... 为了构建用于表达麦芽糖转糖基酶的基因工程菌,用PCR方法获得大肠杆菌(Escherichia coli)K12MalQ基因.将该基因插入原核表达载体pET-DsbA中,对质粒所含外源片段进行双向测序,并经局部相似性基本查询工具(BLAST)比较分析,发现其与GenBank中报道的大肠杆菌K12MalQ基因的同源性高达99%.重组质粒转化E.coliBL21(DE3)plysS,经异丙基硫代-β-D-半乳糖(IPTG)诱导后以融合蛋白形式表达,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳显示MalQ基因与DsbA表达的融合蛋白在目标位置相对分子质量约为103 000处有明显条带.经薄层层析分析粗酶液酶处理的麦芽三糖溶液,证实粗酶液具有麦芽糖转糖基活性. 展开更多
关键词 麦芽糖转糖基酶 基因重组 融合表达 大环糊精 基因克隆
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新奇环状淀粉——大环糊精的最新研究进展 被引量：1
4
作者 王水兴 郭勇 +1 位作者 李艳萍 夏慧玲 《粮食与饲料工业》 CAS 北大核心 2006年第9期23-24,26,共3页
大环糊精是一类由9个以上葡萄糖基组成的环状糊精混合物总称,由于其特异的分子结构和性质,具有广泛的工业应用前景,最近10年在国际上引起了广泛的关注和研究。分析了在大环糊精的合成、分离纯化及其结构和应用等方面的最新研究进展,指... 大环糊精是一类由9个以上葡萄糖基组成的环状糊精混合物总称,由于其特异的分子结构和性质,具有广泛的工业应用前景,最近10年在国际上引起了广泛的关注和研究。分析了在大环糊精的合成、分离纯化及其结构和应用等方面的最新研究进展,指出了存在的问题和下一步的研究方向,并分析了其潜在的工业应用前景。 展开更多
关键词 大环糊精 环状糊精 环状淀粉 麦芽糖转糖基酶 CGT酶 D-酶
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麦芽糖转糖基酶产环糊精性质的研究 被引量：2
5
作者 刘书磊 黄永忠 +2 位作者 黄虹 杨成 王水兴 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期55-58,共4页
通过β-淀粉酶对未环化的直链淀粉进行降解,采用DNS法对反应体系中还原糖进行测定,依据环化反应前后还原糖的变化来计算环糊精的产率,研究底物浓度、酶量、温度、pH、麦芽糖、乙醇、二甲基亚砜对转化率的影响。结果表明,直链淀粉终浓度... 通过β-淀粉酶对未环化的直链淀粉进行降解,采用DNS法对反应体系中还原糖进行测定,依据环化反应前后还原糖的变化来计算环糊精的产率,研究底物浓度、酶量、温度、pH、麦芽糖、乙醇、二甲基亚砜对转化率的影响。结果表明,直链淀粉终浓度为0.1～0.125%时转化率最高,而酶用量对最终转化率影响不大,最适转化pH值和温度分别是6.5和40℃,麦芽糖对转化率起抑制作用,乙醇和二甲基亚砜则能够提高转化率。 展开更多
关键词 麦芽糖转糖基酶 环糊精 合成 转化率 特性 有机小分子
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来自基因工程菌E.coli BL21/pET-DsbA-MalQ的麦芽糖转糖基酶的分离纯化及酶学性质研究 被引量：2
6
作者 王水兴 龚珩 +2 位作者 郭勇 夏慧玲 吴凌伟 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第12期258-262,共5页
通过6-His的分离标签,联合采取硫酸铵沉淀,生物半透膜透析和亲和层析等方法,纯化了目标酶。通过使用凝血酶切割DsbA-MalQ融合蛋白,证明酶切后酶蛋白仍具有麦芽糖转糖基酶活性。该酶的最适温度为37℃,最适pH值为6.5。当处理温度小于40℃... 通过6-His的分离标签,联合采取硫酸铵沉淀,生物半透膜透析和亲和层析等方法,纯化了目标酶。通过使用凝血酶切割DsbA-MalQ融合蛋白,证明酶切后酶蛋白仍具有麦芽糖转糖基酶活性。该酶的最适温度为37℃,最适pH值为6.5。当处理温度小于40℃时,酶的活力基本保持在最高活性的80%以上,相对稳定;在酶的pH耐受方面,在pH5.5～8.0范围内较稳定。金属离子和EDTA对酶活性的影响实验表明,EDTA对酶活的影响不大,但Zn2+、Cu2+、Hg2+、Ag+对酶蛋白有较强的抑制作用,而Ca2+、Mg2+、Mn2+等对表达的酶有一定的激活作用。在37℃,pH6.5时以麦芽三糖为底物测得酶促反应的Km值为0.378mmol/L,Vmax值为1.979mmol/(L·min)。 展开更多
关键词 麦芽糖转糖基酶 酶学性质 纯化 亲和层析
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麦芽糖转糖基酶在毕赤酵母中的表达及活性分析 被引量：1
7
作者 朱国强 王水兴 +1 位作者 黄兰 朱石龙 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第23期258-261,共4页
用PCR方法从E.coliBL21(DE3)中获得麦芽糖转糖基酶基因,将该基因插入到酵母表达载体pPIC9K的α分泌信号开放阅读框的下游,对重组质粒pPIC9K-MalQ所含的外源片段进行双向测序。将测序正确的重组质粒用内切酶SalⅠ线性化,电穿孔转化到GS11... 用PCR方法从E.coliBL21(DE3)中获得麦芽糖转糖基酶基因,将该基因插入到酵母表达载体pPIC9K的α分泌信号开放阅读框的下游,对重组质粒pPIC9K-MalQ所含的外源片段进行双向测序。将测序正确的重组质粒用内切酶SalⅠ线性化,电穿孔转化到GS115感受态细胞中,G418梯度筛选高拷贝转化菌及PCR鉴定目的基因的整合,1%甲醇诱导表达。经薄层色谱分析粗酶液处理的麦芽二糖溶液,证实粗酶液具有麦芽糖转糖基酶活性。 展开更多
关键词 麦芽糖转糖基酶 毕赤酵母 基因重组
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产4-α-葡萄糖基转移酶链霉菌的筛选(英文)
8
作者 王水兴 郭勇 +1 位作者 许杨 李燕萍 《陕西科技大学学报（自然科学版）》 2007年第3期77-81,共5页
为了从链霉菌中筛选产4-α-糖基转移酶活性的菌种,详细研究了来自链霉菌的粗酶液对直链淀粉的作用,证实了该粗酶液能够催化直链淀粉环化.当用来自链霉菌的粗酶液作用直链淀粉时,引起了直链淀粉-碘络合物吸光值的迅速下降,以及不被外切... 为了从链霉菌中筛选产4-α-糖基转移酶活性的菌种,详细研究了来自链霉菌的粗酶液对直链淀粉的作用,证实了该粗酶液能够催化直链淀粉环化.当用来自链霉菌的粗酶液作用直链淀粉时,引起了直链淀粉-碘络合物吸光值的迅速下降,以及不被外切酶消化的淀粉的积累,但积累的产物能够被内切酶(α-淀粉酶)降解成葡萄糖和麦芽糖,这些结果共同证明来自链霉菌的粗酶液能够催化直链淀粉环化而生产大环糊精,从而进一步证实了在粗酶液中含有4-α-葡萄糖基转移酶活性的菌种. 展开更多
关键词 4-α-葡萄糖基转移酶 大环糊精 链霉菌 麦芽糖转糖基酶
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