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产青蒿二烯的人工酵母细胞的构建及发酵优化
被引量：
5
1
作者
郭睿
丁明珠
元英进
《化工学报》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2015年第1期378-385,共8页
为了异源合成抗疟疾药物青蒿素重要前体青蒿二烯,以酿酒酵母作为底盘细胞,利用基因工程手段构建功能人工酵母细胞。为提高基因拷贝数,并增加重组菌株基因型的稳定性,选择酵母基因组中多拷贝位点Delta为整合点,实现酿酒酵母内源基因t HMG...
为了异源合成抗疟疾药物青蒿素重要前体青蒿二烯,以酿酒酵母作为底盘细胞,利用基因工程手段构建功能人工酵母细胞。为提高基因拷贝数,并增加重组菌株基因型的稳定性,选择酵母基因组中多拷贝位点Delta为整合点,实现酿酒酵母内源基因t HMGR和ERG20的过表达以及外源基因ADS的整合。过表达t HMGR和ERG20基因增加了酵母体内半萜类物质共同前体法尼基焦磷酸FPP的积累量;而导入外源基因ADS,实现了酵母生产青蒿二烯。经过摇瓶发酵优化实验,人工酵母菌株青蒿二烯产量为225.3 mg·L-1;为了进一步提高青蒿二烯产量,经过发酵过程优化和补料策略,人工酵母菌株在5 L发酵罐中青蒿二烯产量达到1.05 g·L-1。
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关键词
合成生物学
青蒿
二烯
酿酒酵母
基因工程
发酵
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职称材料
启动子和质粒对酵母细胞青蒿二烯产量的影响
被引量：
2
2
作者
王思佳
丁明珠
元英进
《中国生物工程杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第8期15-23,共9页
为了研究并优化不同启动子和质粒类型对酵母细胞青蒿二烯产量的影响,对携带游离型质粒的酿酒酵母人工细胞进行了四种启动子替换,对携带整合型质粒和着丝粒型质粒的人工细胞进行了强启动子和弱启动子替换。利用GC-TOF/MS检测并比较以上...
为了研究并优化不同启动子和质粒类型对酵母细胞青蒿二烯产量的影响,对携带游离型质粒的酿酒酵母人工细胞进行了四种启动子替换,对携带整合型质粒和着丝粒型质粒的人工细胞进行了强启动子和弱启动子替换。利用GC-TOF/MS检测并比较以上几株人工细胞的发酵产物浓度。结果表明,所构建的人工细胞均能生产青蒿二烯,其中携带着丝粒型质粒的人工细胞SyBE_001243(W-tH-20[pRS316/TDH3/ADS])产量最高,为44.7 mg/L。进一步对比以上结果发现,发酵液中青蒿二烯的浓度与启动子的强弱呈正相关;对每种底盘细胞,发酵液中青蒿二烯的浓度与导入的外源模块中质粒类型有关;且对于强启动子,携带不同类型质粒的人工细胞发酵液中青蒿二烯的浓度差异较大,而对于弱启动子,携带不同类型质粒的人工细胞发酵液中青蒿二烯的浓度均较低,浓度差异较小。
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关键词
青蒿
二烯
青蒿
素
酵母人工细胞
合成生物学
原文传递
青蒿二烯功能模块与酵母底盘的适配性
被引量：
2
3
作者
贾云婧
赵鹃
+1 位作者
丁明珠
元英进
《高等学校化学学报》
SCIE
EI
CAS
CSCD
北大核心
2013年第12期2765-2771,共7页
设计构建人工酿酒酵母细胞合成青蒿二烯的关键是使外源功能模块与底盘细胞适配,本文通过对外源功能模块中的载体、蛋白表达和启动子进行优化,以提高功能模块与底盘细胞的适配性.使用着丝粒载体和附加型载体构建了2种青蒿二烯功能模块,...
设计构建人工酿酒酵母细胞合成青蒿二烯的关键是使外源功能模块与底盘细胞适配,本文通过对外源功能模块中的载体、蛋白表达和启动子进行优化,以提高功能模块与底盘细胞的适配性.使用着丝粒载体和附加型载体构建了2种青蒿二烯功能模块,在过表达甲羟戊酸(MEV)途径中关键基因(截短的3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶基因tHMGR及法尼基焦磷酸合酶基因ERG20)的2种酵母底盘中进行适配,得到适配性较好的人工合成细胞,其产量为11.2 mg/L;将青蒿二烯合酶基因(ADS)与ERG20进行融合构建融合蛋白功能模块,在选定底盘中适配性进一步提高,青蒿二烯的产量提升至17.5 mg/L;采用不同强度的启动子(TDH3p,TEF1p和PGK1p)对融合蛋白功能模块进行调控,最终得到功能模块与底盘间适配关系更好的人工合成细胞,其产量提升到71.8 mg/L.
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关键词
青蒿
二烯
酵母底盘
融合蛋白
功能模块
适配
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职称材料
合成生物学在医药领域的应用
4
作者
尹怡
刘继科
《生物化工》
2017年第3期108-110,共3页
随着自然科学的发展,催生了21世纪工程学和生物科学交叉领域的合成生物学。当前,合成生物学广泛应用于环境、可再生能源、人体健康及药物领域,由方兴未艾快步走向飞速发展阶段。本文将在介绍合成生物学发展进程的基础上,着重就其在青蒿...
随着自然科学的发展,催生了21世纪工程学和生物科学交叉领域的合成生物学。当前,合成生物学广泛应用于环境、可再生能源、人体健康及药物领域,由方兴未艾快步走向飞速发展阶段。本文将在介绍合成生物学发展进程的基础上,着重就其在青蒿二烯、紫杉二烯2种合成药物上的应用进行讨论,并对合成生物学的发展前景进行展望。
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关键词
合成生物学
医药应用
青蒿
二烯
紫杉
二烯
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职称材料
题名
产青蒿二烯的人工酵母细胞的构建及发酵优化
被引量：
5
1
作者
郭睿
丁明珠
元英进
机构
系统生物工程教育部重点实验室
出处
《化工学报》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2015年第1期378-385,共8页
基金
国家高技术研究发展计划项目(2012AA02A701)~~
文摘
为了异源合成抗疟疾药物青蒿素重要前体青蒿二烯,以酿酒酵母作为底盘细胞,利用基因工程手段构建功能人工酵母细胞。为提高基因拷贝数,并增加重组菌株基因型的稳定性,选择酵母基因组中多拷贝位点Delta为整合点,实现酿酒酵母内源基因t HMGR和ERG20的过表达以及外源基因ADS的整合。过表达t HMGR和ERG20基因增加了酵母体内半萜类物质共同前体法尼基焦磷酸FPP的积累量;而导入外源基因ADS,实现了酵母生产青蒿二烯。经过摇瓶发酵优化实验,人工酵母菌株青蒿二烯产量为225.3 mg·L-1;为了进一步提高青蒿二烯产量,经过发酵过程优化和补料策略,人工酵母菌株在5 L发酵罐中青蒿二烯产量达到1.05 g·L-1。
关键词
合成生物学
青蒿
二烯
酿酒酵母
基因工程
发酵
Keywords
synthetic biology
amorphadiene
Saccharomyces cerevisiae
gene engineering
fermentation
分类号
Q819 [生物学—生物工程]
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职称材料
题名
启动子和质粒对酵母细胞青蒿二烯产量的影响
被引量：
2
2
作者
王思佳
丁明珠
元英进
机构
系统生物工程教育部重点实验室天津大学化工学院制药工程系
出处
《中国生物工程杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第8期15-23,共9页
基金
国家"863"计划资助项目(2012AA02A701)
文摘
为了研究并优化不同启动子和质粒类型对酵母细胞青蒿二烯产量的影响,对携带游离型质粒的酿酒酵母人工细胞进行了四种启动子替换,对携带整合型质粒和着丝粒型质粒的人工细胞进行了强启动子和弱启动子替换。利用GC-TOF/MS检测并比较以上几株人工细胞的发酵产物浓度。结果表明,所构建的人工细胞均能生产青蒿二烯,其中携带着丝粒型质粒的人工细胞SyBE_001243(W-tH-20[pRS316/TDH3/ADS])产量最高,为44.7 mg/L。进一步对比以上结果发现,发酵液中青蒿二烯的浓度与启动子的强弱呈正相关;对每种底盘细胞,发酵液中青蒿二烯的浓度与导入的外源模块中质粒类型有关;且对于强启动子,携带不同类型质粒的人工细胞发酵液中青蒿二烯的浓度差异较大,而对于弱启动子,携带不同类型质粒的人工细胞发酵液中青蒿二烯的浓度均较低,浓度差异较小。
关键词
青蒿
二烯
青蒿
素
酵母人工细胞
合成生物学
Keywords
Amorphadiene Artimesinin Engineered yeasts Synthetic biology
分类号
TQ [化学工程]
原文传递
题名
青蒿二烯功能模块与酵母底盘的适配性
被引量：
2
3
作者
贾云婧
赵鹃
丁明珠
元英进
机构
系统生物工程教育部重点实验室
出处
《高等学校化学学报》
SCIE
EI
CAS
CSCD
北大核心
2013年第12期2765-2771,共7页
基金
国家'八六三'计划项目(批准号:2012AA02A701)资助
文摘
设计构建人工酿酒酵母细胞合成青蒿二烯的关键是使外源功能模块与底盘细胞适配,本文通过对外源功能模块中的载体、蛋白表达和启动子进行优化,以提高功能模块与底盘细胞的适配性.使用着丝粒载体和附加型载体构建了2种青蒿二烯功能模块,在过表达甲羟戊酸(MEV)途径中关键基因(截短的3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶基因tHMGR及法尼基焦磷酸合酶基因ERG20)的2种酵母底盘中进行适配,得到适配性较好的人工合成细胞,其产量为11.2 mg/L;将青蒿二烯合酶基因(ADS)与ERG20进行融合构建融合蛋白功能模块,在选定底盘中适配性进一步提高,青蒿二烯的产量提升至17.5 mg/L;采用不同强度的启动子(TDH3p,TEF1p和PGK1p)对融合蛋白功能模块进行调控,最终得到功能模块与底盘间适配关系更好的人工合成细胞,其产量提升到71.8 mg/L.
关键词
青蒿
二烯
酵母底盘
融合蛋白
功能模块
适配
Keywords
Amorphadiene
Yeast chassis
Fusion enzyme
Functional module
Fitness
分类号
O629 [理学—有机化学]
Q599 [理学—化学]
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职称材料
题名
合成生物学在医药领域的应用
4
作者
尹怡
刘继科
机构
长沙长郡中学
长沙市规划信息服务中心
出处
《生物化工》
2017年第3期108-110,共3页
文摘
随着自然科学的发展,催生了21世纪工程学和生物科学交叉领域的合成生物学。当前,合成生物学广泛应用于环境、可再生能源、人体健康及药物领域,由方兴未艾快步走向飞速发展阶段。本文将在介绍合成生物学发展进程的基础上,着重就其在青蒿二烯、紫杉二烯2种合成药物上的应用进行讨论,并对合成生物学的发展前景进行展望。
关键词
合成生物学
医药应用
青蒿
二烯
紫杉
二烯
Keywords
Synthetic biology
Medical application
Artesunate
Taxane
分类号
TQ460.1 [化学工程—制药化工]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
产青蒿二烯的人工酵母细胞的构建及发酵优化
郭睿
丁明珠
元英进
《化工学报》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2015
5
下载PDF
职称材料
2
启动子和质粒对酵母细胞青蒿二烯产量的影响
王思佳
丁明珠
元英进
《中国生物工程杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013
2
原文传递
3
青蒿二烯功能模块与酵母底盘的适配性
贾云婧
赵鹃
丁明珠
元英进
《高等学校化学学报》
SCIE
EI
CAS
CSCD
北大核心
2013
2
下载PDF
职称材料
4
合成生物学在医药领域的应用
尹怡
刘继科
《生物化工》
2017
0
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职称材料
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