血红蛋白与运动训练的关系及怎样运用血红蛋白的参考值 被引量：12

1

作者 吕文英 《山东体育科技》 1995年第2期68-69,共2页

检验学中论述了血红蛋白(简称Hb)是红细胞的主要成分,红细胞的主要功能是通过血红蛋白运输氧气和二氧化碳以及维持体内酸碱平衡.因此Hb多少与运动员的身体机能有密切关系.目前国内外教练员和运动员已认识到Hb是评定运动员身体状况的一... 检验学中论述了血红蛋白(简称Hb)是红细胞的主要成分,红细胞的主要功能是通过血红蛋白运输氧气和二氧化碳以及维持体内酸碱平衡.因此Hb多少与运动员的身体机能有密切关系.目前国内外教练员和运动员已认识到Hb是评定运动员身体状况的一项重要指标.要想正确运用这一指标.首先得了解一般人的生理变化(与运动训练有关的). 展开更多

关键词 运动训练 原始红细胞 血红蛋白值 运动员 干细胞 微环境 集落形成细胞 运动训练强度 生理变化 促血小板生成素

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小鼠骨髓间充质干细胞对胚胎干细胞造血分化的影响 被引量：3

2

作者 王晓燕 刘兵 +2 位作者 苑春慧 要晖宇 毛宁 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2003年第4期329-334,共6页

骨髓间充质干细胞作为骨髓基质细胞的前体细胞 ,在体外具有一定的造血支持作用 ,与造血干细胞共移植可促进其植入。本研究旨在初步探讨应用小鼠骨髓间充质干细胞与胚胎干细胞共培养作为一种新的分化体系的可行性。首先分离、培养并鉴定... 骨髓间充质干细胞作为骨髓基质细胞的前体细胞 ,在体外具有一定的造血支持作用 ,与造血干细胞共移植可促进其植入。本研究旨在初步探讨应用小鼠骨髓间充质干细胞与胚胎干细胞共培养作为一种新的分化体系的可行性。首先分离、培养并鉴定小鼠骨髓间充质干细胞 ,然后利用扩增培养的骨髓间充质干细胞与胚胎干细胞共培养 ,通过造血集落培养和RT PCR观察造血分化的特点。结果表明 ,分离、扩增培养至第四代之后的骨髓间充质干细胞形态均一 ,高表达Sca 1,CD2 9,CD4 4和CD10 5 ,而CD34和CD4 5等造血与内皮细胞特异性表面标志呈阴性 ;特异性诱导体系内传代后 (>4代 )的骨髓间充质干细胞可向脂肪细胞和成骨细胞分化。与悬浮分化体系相比 ,骨髓间充质干细胞共培养体系中初始分化的胚胎干细胞含有显著增加的拟胚体形成细胞而没有造血集落形成细胞。此外 ,RT PCR检测发现 :共培养细胞表达胚胎干细胞特异性转录因子Oct 4 ,而造血标记Flk 1,GATA 1和 β H1为阴性。结论 :间充质干细胞在一定程度上抑制了胚胎干细胞的初始分化 。 展开更多

关键词 胚胎干细胞 间充质干细胞 集落形成细胞 造血分化

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CD34分化抗原与造血干、祖细胞 被引量：4

3

作者 刘明东 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 1994年第3期219-224,共6页

CD34抗原是局限于造血干、祖细胞表面的分化抗原。越是早期的造血细胞,CD34抗原的表达量越高。在外周血中成熟的粒细胞和淋巴细胞表面检测不到此抗原的存在。CD34抗原的发现有力地促进了造血干细胞发育、增殖和分化的研究,推动了临床上... CD34抗原是局限于造血干、祖细胞表面的分化抗原。越是早期的造血细胞,CD34抗原的表达量越高。在外周血中成熟的粒细胞和淋巴细胞表面检测不到此抗原的存在。CD34抗原的发现有力地促进了造血干细胞发育、增殖和分化的研究,推动了临床上应用造血干细胞移植治疗血液病及其它恶性肿瘤的进展。 展开更多

关键词 CD34抗原 造血干细胞 祖细胞 分化抗原 集落形成细胞 造血细胞 单克隆抗体 骨髓细胞 细胞移植 外周血

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分化抑制培养体系支持小鼠骨髓造血细胞体外扩增、归巢及造血重建 被引量：1

4

作者 袁国林 邹萍 +3 位作者 程范军 刘凌波 伍晓菲 王红祥 《中华器官移植杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期210-213,共4页

目的探讨分化抑制培养体系对小鼠骨髓造血细胞体外扩增、归巢及造血重建的支持作用。方法将小鼠骨髓造血细胞在分化抑制培养体系中共培养7 d,检测细胞总数、集落形成细胞(CFC)及干细胞抗原1阳性(Sca-1+)细胞,了解细胞的扩增情况。将扩... 目的探讨分化抑制培养体系对小鼠骨髓造血细胞体外扩增、归巢及造血重建的支持作用。方法将小鼠骨髓造血细胞在分化抑制培养体系中共培养7 d,检测细胞总数、集落形成细胞(CFC)及干细胞抗原1阳性(Sca-1+)细胞,了解细胞的扩增情况。将扩增后的雄性小鼠(供者)骨髓造血细胞移植给雌性小鼠(受者),移植后24 h,用FISH方法检测受者体内的供者Y染色体阳性细胞归巢率,并在移植后第3、6、9、12、15、18、25、32、42 d,分别检测受者的红细胞、白细胞及血小板,了解造血功能变化。结果分化抑制培养体系能够在体外扩增小鼠骨髓造血细胞,细胞总数、CFC及Sca-1+细胞明显增加,扩增后的细胞其归巢率增加,能使受者外周血的红细胞、白细胞及血小板恢复加快。结论分化抑制培养体系支持小鼠骨髓造血细胞体外扩增、归巢及造血重建,显示它是一种良好的扩增体系。 展开更多

关键词 造血细胞体外扩增 培养体系 小鼠骨髓 造血重建 抑制 分化 SCA-1^+细胞 骨髓造血细胞 集落形成细胞 造血细胞移植 FISH方法 细胞总数 干细胞抗原 血小板恢复 支持作用 雌性小鼠 雄性小鼠 细胞归巢 Y染色体 功能变化 移植后

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碱性成纤维细胞生长因子对胚胎干细胞来源集落形成细胞的作用 被引量：1

5

作者 李娜 石增立 王跃嗣 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2010年第14期2579-2582,共4页

背景：有研究表明,在卵黄囊造血、胎肝造血和在胚胎干细胞向造血干细胞分化过程中,碱性成纤维细胞生长因子可强烈表达。目的：在拟胚体培养阶段施加碱性成纤维细胞生长因子,验证碱性成纤维细胞生长因子对集落形成细胞产生的调控作用。... 背景：有研究表明,在卵黄囊造血、胎肝造血和在胚胎干细胞向造血干细胞分化过程中,碱性成纤维细胞生长因子可强烈表达。目的：在拟胚体培养阶段施加碱性成纤维细胞生长因子,验证碱性成纤维细胞生长因子对集落形成细胞产生的调控作用。方法：购买小鼠胚胎干细胞D3细胞系,取第3~5代小鼠原代胚胎成纤维细胞,加入新配制含丝裂霉素C的DMEM生长培养基孵育2.5h,使饲养层细胞失去增殖能力;加入胰酶消化适度,离心后制成单细胞悬液,以10×104个/cm2的密度种至用明胶包被的培养瓶中,放入孵箱内培养24h之后使用。复苏胚胎干细胞D3细胞并将其接种于饲养层细胞之上。在拟胚体培养阶段按培养基成分不同分为2组：对照组（标准培养基＋血管内皮生长因子＋干细胞因子组）、实验组（标准培养基＋血管内皮生长因子＋干细胞因子＋碱性成纤维细胞生长因子组）。各组于培养3,6d时分别计数克隆形成数,通过免疫荧光法检测Flk-1＋细胞表达情况,并用IMAGE-PROPLUS图像分析系统统计阳性细胞数及平均吸光度值。结果与结论：与对照组比较,在拟胚体培养阶段加入碱性成纤维细胞生长因子可显著增加集落形成细胞的数量（P〈0.01）,Flk-1阳性细胞数及平均吸光度值也显著增加（P〈0.01）。证明碱性成纤维细胞生长因子能够有效地促进胚胎体的扩增以及成血管血液干细胞的产生与增殖。 展开更多

关键词 拟胚体 集落形成细胞 碱性成纤维细胞生长因子 小鼠胚胎干细胞 造血干细胞

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阵发性睡眠性血红蛋白尿症异常克隆增殖机制研究进展 被引量：2

6

作者 张媛媛 付蓉 邵宗鸿 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期711-713,共3页

阵发性睡眠性血红蛋白尿症（PNH）是一种后天获得性造血干细胞基因突变引起的溶血性疾病.PNH患者造血干细胞磷脂酰肌醇糖苷-A（PIG-A）基因突变,引起糖肌醇磷脂（GPI）锚合成障碍,从而导致通过锚而连接在细胞表面的膜蛋白缺失,继而引起... 阵发性睡眠性血红蛋白尿症（PNH）是一种后天获得性造血干细胞基因突变引起的溶血性疾病.PNH患者造血干细胞磷脂酰肌醇糖苷-A（PIG-A）基因突变,引起糖肌醇磷脂（GPI）锚合成障碍,从而导致通过锚而连接在细胞表面的膜蛋白缺失,继而引起细胞一系列功能变化.临床上常表现为溶血性贫血、不同程度的骨髓衰竭、血栓形成以及平滑肌功能障碍等.1999年,Araten等[1]发现多数健康人外周血中也存在少量CD55-及CD59-的红细胞和中性粒细胞,并且可检测出PIG-A基因突变,但是这些人并未进展为典型PNH.2005年研究发现健康人与PNH患者PIG-A基因发生突变的细胞阶段不同,健康人的PIG-A突变发生在较晚期的造血祖细胞-集落形成细胞,而PNH患者的突变发生在多能造血干细胞（HSC）水平,随着PIG-A突变的HSC扩增和分化引起一系列病理改变[2].但据此仍无法完全阐明PNH病理机制的全过程,且体内外研究也已证实除PIG-A基因突变外尚存在其他因素可导致PNH克隆获得增殖[3]. 展开更多

关键词 阵发性睡眠性血红蛋白尿症 增殖机制 PIG-A基因 多能造血干细胞 克隆 基因突变 集落形成细胞 磷脂酰肌醇

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角膜移植排斥反应的实验研究Ⅱ　T淋巴细胞亚群及T—CEC的变化 被引量：2

7

作者 吴京 周国筠 +3 位作者 付瑞 王小宁 高基民 周筠 《眼科新进展》 CAS 1997年第3期137-139,共3页

关键词 角膜移植 排斥反应 T淋巴细胞亚群 集落形成细胞

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人类脐血中多向祖细胞的体外无血清培养及其增殖能力的研究

8

作者 胡国瑜 陈济民 +1 位作者 李秀珍 梅广义 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 1994年第4期401-404,共4页

本文应用造血细胞体外无血清培养技术,对脐血中的CFU-GM,CFU-GEMM,BFU-E进行培养,并与成人骨髓、外周血对照。结果显示:脐血中的CFU-GEMM为成人外周血中的5～8倍,相当于骨髓的70％左右。本文同时用白细胞介素-3(IL-3)将骨髓、外周血和... 本文应用造血细胞体外无血清培养技术,对脐血中的CFU-GM,CFU-GEMM,BFU-E进行培养,并与成人骨髓、外周血对照。结果显示:脐血中的CFU-GEMM为成人外周血中的5～8倍,相当于骨髓的70％左右。本文同时用白细胞介素-3(IL-3)将骨髓、外周血和脐血中的单个核细胞孵育3天后,再测定CFU-GEMM,以比较不同来源的祖细胞增殖能力,结果表明,脐血中的多向祖细胞增殖能力最强。 展开更多

关键词 脐带血 造血细胞 集落形成细胞

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骨髓高增殖潜能集落形成细胞(HPP-CFC)分化产生巨核细胞的研究

9

作者 张学军 蒋丽珍 +1 位作者 王新明 韩忠朝 《细胞生物学杂志》 CSCD 1995年第4期184-189,共6页

本研究用正常和5-FU处理的小鼠骨髓细胞,作血浆凝块培养,对一种称作HPP-mCFU-MK的HPP-CFC亚型细胞集落进行体外追踪。发现HPP-mCFU-MK不但能形成符合HPP-CFC标准的巨大集落,而且能产生大量的巨核细胞。该巨大集落的生长,依赖添加再生障... 本研究用正常和5-FU处理的小鼠骨髓细胞,作血浆凝块培养,对一种称作HPP-mCFU-MK的HPP-CFC亚型细胞集落进行体外追踪。发现HPP-mCFU-MK不但能形成符合HPP-CFC标准的巨大集落,而且能产生大量的巨核细胞。该巨大集落的生长,依赖添加再生障碍性贫血猪血清(AAS)或合用三种以上的基因重组造血生长因子而增强,在体外不被TGF-β1和PF4抑制。原代培养12天所得到的HPP-mCFU-MK集落,用AAS刺激可再次形成集落。该结果提示HPP-mCFU-MK是小鼠骨髓中多能相细胞的一个亚型。 展开更多

关键词 巨核细胞 骨髓 集落形成细胞 HPP-CFC

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高增殖潜能集落形成细胞的分类、富集与调控

10

作者 夏添 《国外医学（生理病理科学与临床分册）》 北大核心 1996年第2期79-82,共4页

高增殖潜能集落形成细胞（ＨＰＰ－ＣＦＣ）是存在于小鼠和人骨髓及入胎肝、脐血中的一类较为原始的造血祖细胞。它在体外培养中可产生直径大于０．５ｍｍ，５００００细胞／集落的巨大集落；对５－氟尿嘧啶有相对耐受性；对多种造血生... 高增殖潜能集落形成细胞（ＨＰＰ－ＣＦＣ）是存在于小鼠和人骨髓及入胎肝、脐血中的一类较为原始的造血祖细胞。它在体外培养中可产生直径大于０．５ｍｍ，５００００细胞／集落的巨大集落；对５－氟尿嘧啶有相对耐受性；对多种造血生长因子的刺激有反应性。 展开更多

关键词 造血干细胞 高增殖潜能 集落形成细胞

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锂对小鼠高增殖潜能集落形成细胞和粒巨噬系祖细胞体外增殖的影响

11

作者 夏添 蒋德昭 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 1997年第3期264-267,共4页

本文观察了锂对ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠骨髓高增殖潜能集落形成细胞（ＨＰＰ－ＣＦＣ）和粒巨噬系祖细胞ＣＦＵ－ＧＭ体外增殖的影响。ＨＰＰ－ＣＦＣ集落由ＩＬ－１、ＩＬ－６、ＷＥＨＩ３条件培养液（ＷＥＨＩ３－ＣＭ，含有ＩＬ－３）及Ｌ... 本文观察了锂对ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠骨髓高增殖潜能集落形成细胞（ＨＰＰ－ＣＦＣ）和粒巨噬系祖细胞ＣＦＵ－ＧＭ体外增殖的影响。ＨＰＰ－ＣＦＣ集落由ＩＬ－１、ＩＬ－６、ＷＥＨＩ３条件培养液（ＷＥＨＩ３－ＣＭ，含有ＩＬ－３）及Ｌ９２９条件培养液（Ｌ９２９－ＣＭ，含有Ｍ－ＣＳＦ）所支持，而ＣＦＵ－ＧＭ由ＷＥＨＩ３－ＣＭ所支持。结果显示，ＬｉＣｌ浓度在０．４－２ｍｍｏｌ／Ｌ时呈现剂量依赖性抑制ＨＰＰ－ＣＦＣ增殖；而在０．４－１ｍｍｏｌ／Ｌ的浓度范围内，则对ＣＦＵ－ＧＭ的增殖起剂量依赖性促进作用。这些结果提示ＬｉＣｌ对ＨＰＰ－ＣＦＣ和ＣＦＵ－ＧＭ的作用不同。 展开更多

关键词 锂 高增殖潜能 集落形成细胞 粒巨噬系祖细胞

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高增殖活性集落形成细胞的研究进展

12

作者 黄成龙 柳晓兰 《国外医学（输血及血液学分册）》 北大核心 1995年第1期13-15,共3页

高增殖活性集落形成细胞(HPP-CFC)是一类较接近原始造血干细胞的造血祖细胞,有HPP-CFC-1、HPP-CFC-2和HPP-CFC-3三种类型。本文就HPP-CFC培养方法的建立、特性及调控等作一简要综述。

关键词 高增殖活性 集落形成细胞 HPP-CFC

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高增殖潜能集落形成细胞培养方法的建立

13

作者 董文川 王逸兰 +1 位作者 黄宁伟 陆道培 《北京医科大学学报》 CSCD 1997年第4期372-372,376,共2页

关键词 高增殖潜能 集落形成细胞 体外培养

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白芨多糖对骨髓造血功能的影响 被引量：17

14

作者 张颖 周岐新 赖舒 《中药药理与临床》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期35-37,共3页

目的:研究白芨多糖(BSPS)对造血功能抑制小鼠的促进骨髓造血的作用。方法:腹腔注射环磷酰胺100 mg/kg连续3天建立造血功能低下小鼠模型,观察灌服白芨多糖对造血功能低下小鼠外周白细胞数、骨髓有核细胞数和骨髓脾集落形成细胞数的影响... 目的:研究白芨多糖(BSPS)对造血功能抑制小鼠的促进骨髓造血的作用。方法:腹腔注射环磷酰胺100 mg/kg连续3天建立造血功能低下小鼠模型,观察灌服白芨多糖对造血功能低下小鼠外周白细胞数、骨髓有核细胞数和骨髓脾集落形成细胞数的影响。结果:与模型组相比,白芨多糖0.15 g/kg和0.5 g/kg灌服给予连续6天,呈剂量依赖性升高骨髓造血功能低下小鼠外周血白细胞数和加快骨髓有核细胞数和脾集落形成细胞数的恢复,其作用与等剂量的阿胶大致相当。结论:白芨多糖能加快环磷酰胺所致的小鼠造血功能损伤恢复正常,提示白芨多糖对功能低下的骨髓有促进造血的作用。 展开更多

关键词 白芨多糖 外周白细胞 骨髓有核细胞 脾集落形成细胞

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银屑病患者骨髓造血细胞体外增殖活性研究 被引量：8

15

作者 牛旭平 李新华 +1 位作者 张开明 尹国华 《中国皮肤性病学杂志》 CAS 北大核心 2007年第4期196-198,共3页

目的进一步了解银屑病患者骨髓造血细胞是否有异常。方法采用密度梯度离心法分离银屑病患者及正常对照组骨髓单一核细胞,然后在含有甲基纤维素的半固体细胞因子培养体系中进行体外高增殖潜能集落形成细胞(HPP-CFC)、粒-巨噬细胞系集落... 目的进一步了解银屑病患者骨髓造血细胞是否有异常。方法采用密度梯度离心法分离银屑病患者及正常对照组骨髓单一核细胞,然后在含有甲基纤维素的半固体细胞因子培养体系中进行体外高增殖潜能集落形成细胞(HPP-CFC)、粒-巨噬细胞系集落形成单位(CFU-GM)及红系集落形成单位(CFU-E)集落形成实验,培养一定时期后计数集落。结果与正常对照比较,银屑病患者的HPP-CFC及CFU-GM的集落形成数显著减少,而CFU-E形成的集落数无统计学意义。结论银屑病患者骨髓造血细胞体外增殖能力明显降低,这种异常的造血细胞可能在银屑病的免疫发病机制中发挥一定作用。 展开更多

关键词 银屑病 骨髓 高增殖潜能集落形成细胞 粒-巨噬细胞系集落形成单位 红系集落形成单位

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METTL3调控miR-301a促进缺氧环境下内皮集落形成细胞血管生成

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作者 蒋丽花 陈翌 黄旋平 《广西医科大学学报》 CAS 2024年第6期841-848,共8页

目的:探讨缺氧环境对内皮集落形成细胞(ECFCs)血管生成能力的影响及甲基转移酶样3(METTL3)的调控作用。方法:分离、培养犬外周血ECFCs。实验分为正常对照组与缺氧实验组。缺氧实验组分别使用含50μmol/L、100μmol/L和200μmol/L氯化钴(... 目的:探讨缺氧环境对内皮集落形成细胞(ECFCs)血管生成能力的影响及甲基转移酶样3(METTL3)的调控作用。方法:分离、培养犬外周血ECFCs。实验分为正常对照组与缺氧实验组。缺氧实验组分别使用含50μmol/L、100μmol/L和200μmol/L氯化钴(CoCl_(2))的培养基处理细胞24 h,对照组CoCl_(2)浓度为0。CCK-8检测不同浓度CoCl_(2)对ECFCs增殖的影响,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的表达,筛选适宜浓度的CoCl_(2)用于缺氧环境构建。Transwell实验和管形成实验分别检测ECFCs迁移和血管生成能力。RT-qPCR和western blotting检测血管内皮生长因子(VEGF)、CD31、METTL3、miR-301a的表达情况。构建沉默METTL3慢病毒转染ECFCs,将ECFCs分为NC-shRNA组和METTL3-shRNA组。RT-qPCR和western blotting检测ECFCs细胞中VEGF、CD31、METTL3、miR-301a表达水平的变化。结果:与正常对照组比较,50μmol/L和100μmol/L的CoCl_(2)培养ECFCs 24 h后可促进细胞增殖(均P<0.0001),HIF-1α随着CoCl_(2)浓度升高而高表达(P<0.01)。100μmol/L CoCl_(2)组中ECFCs迁移能力和血管生成能力提高(均P<0.01),VEGF、CD31、METTL3、miR-301a mRNA水平表达升高(均P<0.01),VEGF、CD31、METTL3蛋白表达升高(均P<0.01)。与NC-shRNA组比较,METTL3-shRNA组中VEGF、CD31、METTL3、miR-301a mRNA表达降低(均P<0.05),VEGF、CD31、METTL3蛋白表达降低(均P<0.05)。结论:适宜的缺氧干预可提高ECFCs增殖、迁移和血管生成能力,METTL3/miR-301a轴可能参与调控血管生成。 展开更多

关键词 缺氧 内皮集落形成细胞 血管生成 甲基转移酶样3

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胚胎干细胞来源的BL-CFC可产生高增殖潜能造血祖细胞 被引量：4

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作者 要晖宇 刘兵 +1 位作者 原野 毛宁 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2003年第4期345-349,共5页

小鼠胚胎干细胞 (embryonicstemcell,EScell)体外分化 2 .5 - 3.5天形成的拟胚体 (embryoidbody ,EB)中可产生原始细胞集落形成细胞 (blastcolony formingcell,BL CFC) ,后者具有造血和内皮细胞双向分化潜能 ,是目前体外实验可检测到的... 小鼠胚胎干细胞 (embryonicstemcell,EScell)体外分化 2 .5 - 3.5天形成的拟胚体 (embryoidbody ,EB)中可产生原始细胞集落形成细胞 (blastcolony formingcell,BL CFC) ,后者具有造血和内皮细胞双向分化潜能 ,是目前体外实验可检测到的最早期的定向造血分化的细胞。本研究建立BL CFC培养体系 ,并通过造血祖细胞集落培养、免疫荧光标记以及巢式RT PCR鉴定单个原始细胞集落来源的贴壁细胞和非贴壁细胞的分化特点。结果表明 :部分贴壁细胞吞噬DiI Ac LDL ,并表达CD31,UEA I ,VE cadherin等内皮细胞特异性的表面分子 ;非贴壁细胞具有原始造血 (primitivehematopoiesis)和 (或 )永久造血 (definitivehematopoiesis)活性 ,其中 2 0 %的原始细胞集落含有高增殖潜能集落形成细胞 (highproliferativepotentialcolony formingcell,HPP CFC) ,后者能形成次级造血集落。结论 :胚胎干细胞来源的BL CFC可产生高增殖潜能造血祖细胞 ,但原始细胞集落来源的HPP 展开更多

关键词 胚胎干细胞 原始集落形成细胞 高增殖潜能集落形成细胞 造血分化

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缺氧环境中犬内皮集落形成细胞成血管能力及自噬水平观察

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作者 廖子琦 周诺 黄旋平 《山东医药》 CAS 2023年第12期34-38,共5页

目的观察缺氧环境中犬内皮集落形成细胞(ECFCs)成血管能力及自噬水平。方法取对数生长期的ECFCs,分为缺氧组和常氧组,缺氧组在缺氧环境中培养,常氧组在常氧环境中培养,比较两组成血管能力(细胞OD值、细胞迁移数、细胞迁移率、管分支数及... 目的观察缺氧环境中犬内皮集落形成细胞(ECFCs)成血管能力及自噬水平。方法取对数生长期的ECFCs,分为缺氧组和常氧组,缺氧组在缺氧环境中培养,常氧组在常氧环境中培养,比较两组成血管能力(细胞OD值、细胞迁移数、细胞迁移率、管分支数及VEGF mRNA、FGF mRNA、VEGF蛋白、FGF蛋白相对表达量)和自噬水平(细胞LC3 mRNA、P62 mRNA、LC3Ⅱ/Ⅰ、P62蛋白、LC3平均荧光强度、P62平均荧光强度)。结果与常氧组比较,缺氧组培养48、72、96 h的OD值及细胞迁移数、细胞迁移率、管分支数和VEGF mRNA、FGF mRNA、VEGF蛋白、FGF蛋白相对表达量增加(P均<0.05)。与常氧组比较,缺氧组LC3 mRNA、LC3Ⅱ/Ⅰ表达增加及LC3平均荧光强度增强,P62 mRNA、P62蛋白表达减少及P62平均荧光强度减弱(P均<0.05)。结论缺氧环境中犬ECFCs成血管能力增强,自噬水平升高。 展开更多

关键词 缺氧 内皮集落形成细胞 细胞成血管能力 细胞自噬水平

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利拉鲁肽调节Sirtuin表达对高糖诱导的人内皮集落形成细胞生物学行为的影响 被引量：4

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作者 张路 唐康 周波 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期361-368,共8页

目的探索利拉鲁肽是否通过调节Sirtuin影响高糖诱导的人内皮集落形成细胞(ECFC)的生物学行为。方法采用密度梯度离心法从外周血中分离获取单个核细胞,用EBM-2诱导培养出ECFC,随机分为正糖组(5.5 mmol/L D-葡萄糖)、渗透压组(5.5mmol/LD... 目的探索利拉鲁肽是否通过调节Sirtuin影响高糖诱导的人内皮集落形成细胞(ECFC)的生物学行为。方法采用密度梯度离心法从外周血中分离获取单个核细胞,用EBM-2诱导培养出ECFC,随机分为正糖组(5.5 mmol/L D-葡萄糖)、渗透压组(5.5mmol/LD-葡萄糖+24.5 mmol/L甘露醇)、高糖组(30 mmol/LD-葡萄糖),均处理6d。随后采用EdU实验、Transwell实验、成管实验、β-半乳糖苷酶实验分别测定ECFC的增殖、迁移、成管及衰老情况,采用免疫印迹法测定Sirtuins(Sirtuin1–7)、血管内皮生长因子(VEGF)、血管生成素的表达水平。研究利拉鲁肽对ECFC的影响时,将细胞分为4组,除上述正糖组与高糖组外,还设有正糖利拉鲁肽干预组(5.5 mmol/L D-葡萄糖+100 nmol/L利拉鲁肽)、高糖利拉鲁肽干预组(30 mmol/L D-葡萄糖+100 nmol/L利拉鲁肽),均处理6d,观察4组细胞的生物学行为变化并测定VEGF和血管生成素的表达水平。结果 EdU实验显示高糖组的细胞增殖率明显低于正糖组[(30.16±12.36)%vs.(88.00±13.77)%],Transwell实验显示高糖组的细胞迁移能力明显低于正糖组(25.11±6.05vs.64.89±10.73),成管实验显示高糖组细胞成管能力明显低于正糖组(27.50±3.90 vs. 69.61±5.48),β-半乳糖苷酶染色实验显示高糖组细胞衰老率明显高于正糖组[(87.63±9.63)%vs.(71.35±7.58)%],差异均有统计学意义(P<0.05)。高糖情况下,Sirtuins家族表达普遍降低,VEGF和血管生成素表达均显著下降(P<0.05),Sirtuin1的表达随利拉鲁肽浓度的升高而升高。予以适宜浓度的利拉鲁肽干预后,VEGF和血管生成素的表达均明显增加(P<0.05)。EdU实验显示高糖利拉鲁肽干预组的细胞增殖率明显高于正糖组[(54.09±27.29)%vs.(29.01±7.56)%],Transwell实验显示高糖利拉鲁肽干预组的细胞迁移能力明显高于高糖组(32.25±4.99 vs. 21.75±3.10),成管实验显示高糖利拉鲁肽干预组的细胞成管能力明显高于高糖组(69.61±8.11vs.39. 展开更多

关键词 内皮集落形成细胞 利拉鲁肽 沉默信息调节因子 血管内皮生长因子 血管生成素

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银屑病患者骨髓HPP-CFC集落形成及p21基因启动子甲基化的研究 被引量：4

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作者 张瑞丽 牛旭平 +2 位作者 李新华 张开明 尹国华 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期842-846,共5页

目的:研究银屑病患者骨髓高增殖潜能集落形成细胞(HPP-CFC)集落形成能力及集落细胞p21基因启动子甲基化状态,探讨银屑病患者骨髓造血前体细胞的活性。方法:密度梯度离心法分离银屑病患者及正常对照骨髓单个核细胞,培养于含SCF+GM-CSF+IL... 目的:研究银屑病患者骨髓高增殖潜能集落形成细胞(HPP-CFC)集落形成能力及集落细胞p21基因启动子甲基化状态,探讨银屑病患者骨髓造血前体细胞的活性。方法:密度梯度离心法分离银屑病患者及正常对照骨髓单个核细胞,培养于含SCF+GM-CSF+IL-3+IL-6细胞因子组合的甲基纤维素半固体培养基,培养14天时计数HPP-CFC集落,然后收集集落。提取纯化集落细胞DNA,经亚硫酸盐修饰后,采用甲基化特异性PCR(MSP)检测HPP-CFC集落细胞p21基因启动子甲基化状态。结果:(1)在甲基纤维素半固体培养基中,银屑病患者骨髓HPP-CFC集落数显著低于正常对照组,且集落形态较小;(2)正常对照骨髓HPP-CFCp21基因启动子甲基化阳性率较高,而银屑病患者骨髓HPP-CFCp21基因启动子甲基化阳性率低于正常对照组。结论:银屑病患者骨髓造血前体细胞活性有异常;银屑病患者骨髓HPP-CFCp21基因甲基化降低可能与其相对较低的HPP-CFC集落形成能力密切相关。 展开更多

关键词 银屑病 高增殖潜能集落形成细胞 P21基因

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