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IL-2RG基因c.675 C>A突变引起X-连锁重症联合免疫缺陷病患儿的基因检测及实验室与临床结果分析
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作者 朱童 郭泽淇 +3 位作者 王琪 武万良 谢云 孟改利 《现代检验医学杂志》 CAS 2024年第3期103-108,共6页
目的探讨白细胞介素-2受体共同r链(interleukin 2 receptor gamma,IL-2RG)基因新发变异导致患儿重症联合免疫缺陷病(severe combined immunodeficiency,SCID)的分子遗传学特点和临床特征。方法分析西北妇女儿童医院儿童血液内科收治的... 目的探讨白细胞介素-2受体共同r链(interleukin 2 receptor gamma,IL-2RG)基因新发变异导致患儿重症联合免疫缺陷病(severe combined immunodeficiency,SCID)的分子遗传学特点和临床特征。方法分析西北妇女儿童医院儿童血液内科收治的一例重症联合免疫缺陷病患儿的临床资料、实验室结果及基因检测数据。结果一例两个月男婴,出生后反复感染入院治疗,患儿血细胞检测结果提示白细胞总数正常,但淋巴细胞明显减少;淋巴细胞亚群结果显示总T(CD3+),辅助T(CD3+CD4+),杀伤T(CD3+CD8+)和NK(CD3-CD16+CD56+)淋巴细胞占比明显减低,而B(CD3-CD19+)淋巴细胞占比明显升高;IgG明显减低,IgM和IgA小于检测下限;该患儿在感染状态下细胞因子水平未明显升高。患儿母亲家系中近3代有9例男性在出生后1岁内因反复感染致死,核心家系全外显子组测序结果发现,患儿X染色体IL-2RG基因(chrX:70329160)存在半合新发错义突变[c.675 C>A,p.S225R(p.Ser225Arg)],其母亲为携带者。依据以上证据患儿被确诊为X连锁重症联合免疫缺陷病(X-SCID)。随后每月静脉注射免疫球蛋白并服用常规抗生素和抗病毒药物预防感染,为患者造血干细胞移植做准备。因患儿出生后已接种卡介苗,患儿6月龄出现了播散性卡介苗病。经治疗后行造血干细胞移植。结论X-SCID患儿机体免疫功能缺陷严重,危及生命,接种活疫苗可能导致严重感染;该研究发现IL-2RG基因c.675 C>A突变是先证者X-SCID遗传学病因的新发致病变异,扩充了X-SCID致病基因IL-2RG的基因变异谱。 展开更多
关键词 白细胞介素-2 受体共同r 基因 X- 连锁重症联合免疫缺陷病 免疫功能缺陷
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PDGF-B链基因TFO抑制C6胶质瘤细胞PDGF-B链基因表达及细胞生长 被引量:1
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作者 李维方 周定标 +1 位作者 余新光 金由辛 《军医进修学院学报》 CAS 2004年第3期161-163,共3页
目的 :观察PDGF B链基因三链形成寡核苷酸 (triplex formingoligonucleotide,TFO)对C6胶质瘤细胞PDGF B链基因表达和细胞生长的作用。探索PDGF B链基因TFO作为抗肿瘤治疗新药的可能性。方法 :应用MTT法观察PDGF B链基因TFO对C6胶质瘤细... 目的 :观察PDGF B链基因三链形成寡核苷酸 (triplex formingoligonucleotide,TFO)对C6胶质瘤细胞PDGF B链基因表达和细胞生长的作用。探索PDGF B链基因TFO作为抗肿瘤治疗新药的可能性。方法 :应用MTT法观察PDGF B链基因TFO对C6胶质瘤细胞生长的抑制作用 ;应用流式细胞技术观察PDGF B链基因TFO对C6胶质瘤细胞PDGF B链基因表达的影响。结果 :PDGF B链基因TFO对C6胶质瘤细胞PDGF B链基因的表达和细胞生长有明显抑制作用 ,而且抑制作用存在浓度依赖性。结论 :PDGF B链基因TFO能够抑制C6胶质瘤细胞PDGF B链基因的表达和细胞生长 ,有望成为抑制PDGF 展开更多
关键词 PDGF-B 基因 TFO C6胶质瘤细胞 基因表达 细胞生长 形成寡核苷酸 血小板源生长因子
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毒蛋白A链基因被共抑制的蓖麻种子中毒蛋白含量的测定
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作者 黄凤兰 雷雪 +5 位作者 赵永 李国瑞 罗蕊 陈晓凤 李跃 孙华军 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2016年第1期29-34,共6页
为了获得毒蛋白含量低的蓖麻转基因新材料,以毒蛋白A链基因被共抑制的转基因蓖麻植株的T0、T1、T2种子为研究对象,对种子中的毒蛋白含量进行测定。结果表明,采用磷酸盐提取法、BCA试剂盒、UVwin5紫外软件V5.1.0、Band Scan蛋白定量分析... 为了获得毒蛋白含量低的蓖麻转基因新材料,以毒蛋白A链基因被共抑制的转基因蓖麻植株的T0、T1、T2种子为研究对象,对种子中的毒蛋白含量进行测定。结果表明,采用磷酸盐提取法、BCA试剂盒、UVwin5紫外软件V5.1.0、Band Scan蛋白定量分析软件相结合的方法,测定种子中毒蛋白含量,获得了2个共抑制后稳定遗传的材料,即T2-9-1、T2-15,毒蛋白A链含量均为0,毒蛋白B链含量分别为对照通蓖5号的77.63%,83.38%。这2个材料可以作为低毒蛋白含量的蓖麻材料进行推广。 展开更多
关键词 蓖麻 毒蛋白 A基因
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食药用菌多糖生物活性与结构的关系 被引量:12
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作者 杜巍 李元瑞 袁静 《食用菌》 2001年第2期3-5,共3页
食药用菌多糖作为具有提高免疫能力的生物 活性物质,受到各国研究人员的重视,已成为许多学科 研究的热点。本文扼要地从结钩等几方面简述了食药用 菌活性多糖与结构的关系,旨在为食药用菌多糖的结构 分析、开发等提供参考。
关键词 抗肿瘤活性 免疫活性物质 分支度 连接方式 基因性质 食药用菌 多糖 结构
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肌球蛋白重链基因Arg663Cys和Arg663His突变基因型与家族性肥厚型心肌病表型关系研究 被引量:15
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作者 宋雷 徐荣 +6 位作者 吴格茹 邹玉宝 王继征 郑维越 张芊 黄晓红 惠汝太 《中华心血管病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期131-135,共5页
目的 研究中国人家族性肥厚型心肌病相关致病基因 ,揭示致病基因型与临床表型的关系。方法 在 6 0例门诊肥厚型心肌病患者及 6 0例正常对照中进行 β 肌球蛋白重链 (β MHC)基因突变扫描 ,聚合酶链反应扩增其功能区外显子基因片断 ,... 目的 研究中国人家族性肥厚型心肌病相关致病基因 ,揭示致病基因型与临床表型的关系。方法 在 6 0例门诊肥厚型心肌病患者及 6 0例正常对照中进行 β 肌球蛋白重链 (β MHC)基因突变扫描 ,聚合酶链反应扩增其功能区外显子基因片断 ,测序检测突变。对阳性结果者进行家系调查 ,限制性片断长度多态性分析其他家系成员。结果 在一患者及其家系中发现位于 β MHC基因第18号外显子的 6 6 3密码子位置发生C→T转换 ,使精氨酸变为半胱氨酸 ,该突变以前未见报道 ;在另两个患者及其家系中同样在 6 6 3密码子位置发生G→A转换 ,使精氨酸变为组氨酸。 3个家系基因型类似但临床表型不同。前者表现为进行性心力衰竭、心房颤动 ,外显率 10 0 % ;而后者临床表现则相对轻微 ,呈不完全外显。另外 5 7例患者和 6 0例正常对照未发现异常。结论 β MHC同一位置基因突变表现为不同的临床表型 ,提示即使是在同一种族 (中国人群 )中肥厚型心肌病亦存在异质性遗传特点。 展开更多
关键词 肌球蛋白重基因 突变 基因 家族性肥厚型心肌病 基因突变 Arg663Cys Arg663His
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家蚕丝素蛋白H链基因启动子区域的克隆及活性分析 被引量:11
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作者 周文林 曹锦如 +3 位作者 叶爱红 曹广力 薛仁宇 贡成良 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期72-77,共6页
家蚕(Bombyxmori)丝素蛋白H链基因(fib-H)具有在后部丝腺组织专一性、高效性表达的特点。为利用其时空调控机制,通过PCR扩增方法克隆fib-H启动子片段,并进行序列分析,进而构建由fib-H启动子控制报告基因DsRed的重组载体pSK-FH-DsRed-Pol... 家蚕(Bombyxmori)丝素蛋白H链基因(fib-H)具有在后部丝腺组织专一性、高效性表达的特点。为利用其时空调控机制,通过PCR扩增方法克隆fib-H启动子片段,并进行序列分析,进而构建由fib-H启动子控制报告基因DsRed的重组载体pSK-FH-DsRed-PolyA,通过家蚕BmN细胞和丝腺进行瞬时表达。结果表明:克隆的fib-H启动子序列具有典型的丝腺特异性表达启动子的特征,并可以驱动DsRed报告基因在BmN细胞和家蚕后部丝腺组织中瞬时表达。 展开更多
关键词 家蚕 丝素H基因 启动子 DsRed基因 瞬时表达
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鱼类免疫球蛋白重链基因与基因座的研究进展 被引量:13
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作者 肖凡书 聂品 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期1617-1628,共12页
归纳了脊椎动物中报道的所有的免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)的种类,重点阐述了鱼类免疫球蛋白重链(heavy chain,H)基因及其基因座的研究进展。硬骨鱼类中目前已发现有IgM、IgD、IgZ/IgT以及一个嵌合体IgM-IgZ,软骨鱼类中目前只报道了... 归纳了脊椎动物中报道的所有的免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)的种类,重点阐述了鱼类免疫球蛋白重链(heavy chain,H)基因及其基因座的研究进展。硬骨鱼类中目前已发现有IgM、IgD、IgZ/IgT以及一个嵌合体IgM-IgZ,软骨鱼类中目前只报道了3种免疫球蛋白基因,即IgM、IgNAR和IgW。已报道的硬骨鱼类IgH基因座并非都是以传统的"易位子"排列方式进行排列,一般以(VH)n-(D)n-(JH)n-(Cζ)-(D)n-(JH)n-(Cμ)-(Cδ)的形式排列,不同硬骨鱼类的IgH基因座的结构特点、基因座中重链基因的数目以及基因座的拷贝数都存在一定差异。软骨鱼类中IgH基因座则是以"多簇"形式排列,即VH-D-D-JH-CH区段或VH-D-D-D-JH-CH区段在基因组中作为统一体多次复制。在不同种类的硬骨鱼类中,Ig表达器官或组织方面的研究结果并不完全相同,但一般在免疫器官如胸腺、头肾和脾脏中均有表达。目前对鱼类免疫球蛋白的研究尚不全面,要全面阐明鱼类B细胞个体发生、鱼类免疫球蛋白的结构、抗体产生的规律以及这些不同抗体在免疫反应中的作用等,都需要更进一步的研究。 展开更多
关键词 鱼类 基因 免疫球蛋白 免疫球蛋白重基因
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家蚕丝素重链启动子克隆片段在家蚕体内和昆虫培养细胞内的渗漏表达 被引量:10
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作者 汪生鹏 陆长德 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期491-496,共6页
为了探讨家蚕丝素重链基因的调控机制,应用重组苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒(AcMNPV)为基因转移载体,以绿色荧光蛋白基因为报告基因,研究了丝素重链基因启动子克隆片段在家蚕丝腺的不同部位,以及脂肪体细胞和Sf9培养细胞中的表达渗漏。... 为了探讨家蚕丝素重链基因的调控机制,应用重组苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒(AcMNPV)为基因转移载体,以绿色荧光蛋白基因为报告基因,研究了丝素重链基因启动子克隆片段在家蚕丝腺的不同部位,以及脂肪体细胞和Sf9培养细胞中的表达渗漏。结果发现,丝素重链启动子克隆片段在家蚕中部丝腺存在表达渗漏,并且在中部丝腺前部的表达活性要强于中部丝腺的中部和后部;克隆片段在脂肪体组织存在表达渗漏,通过荧光解剖显微镜可以在体表观察到绿色荧光;克隆片段在Sf9培养细胞中也存在表达渗漏。上述结果说明目前已知的有关家蚕丝素重链基因的调控元件仍不充分,家蚕基因组中可能还有其他调控丝素重链基因表达组织和时相的特异性元件存在。 展开更多
关键词 家蚕 丝素重基因 渗漏表达 重组苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒
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鸡MHCⅡβ链基因的克隆和表达及其抗体制备 被引量:9
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作者 徐志本 余为一 +2 位作者 仲大莲 李槿年 周杰 《安徽农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期51-55,共5页
用自行设计的1对引物,通过RT-PCR从鸡脾细胞中分别克隆了鸡MHCⅡβ链基因片段,大小为798bp。核苷酸测序结果表明,与已登录的基因序列同源性为95%。将该基因片段插入含谷胱甘肽(GST)基因的质粒pGEX-4T-1,构建了pGEX-4T-1-chMHCⅡβ。经... 用自行设计的1对引物,通过RT-PCR从鸡脾细胞中分别克隆了鸡MHCⅡβ链基因片段,大小为798bp。核苷酸测序结果表明,与已登录的基因序列同源性为95%。将该基因片段插入含谷胱甘肽(GST)基因的质粒pGEX-4T-1,构建了pGEX-4T-1-chMHCⅡβ。经诱导表达,获得分子大小约为53 000的融合蛋白,其中chMHCⅡβ链大小约27 000。经亲和层析,获得纯化GST-β融合蛋白,进一步用此蛋白免疫小鼠,制备了鼠源抗鸡MHCⅡβ链抗体。经过琼扩和ELISA检测,表明该融合蛋白具有良好的抗原性。 展开更多
关键词 MHCⅡ β基因 克隆 原核表达
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猝死研究动态 被引量:9
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作者 常芸 《体育科学》 CSSCI 北大核心 1997年第4期79-80,共2页
美国、英国及南非的一些心脏学家在今年最近一期心脏学研究权威杂志——美国学院心脏杂志上刊登了一篇题为“心肌肌钙蛋白T基因突变所致的猝死”的论著,此项研究为猝死发生机制的探讨开辟了一个现代分子生物学研究领域,引起了学术界关注... 美国、英国及南非的一些心脏学家在今年最近一期心脏学研究权威杂志——美国学院心脏杂志上刊登了一篇题为“心肌肌钙蛋白T基因突变所致的猝死”的论著,此项研究为猝死发生机制的探讨开辟了一个现代分子生物学研究领域,引起了学术界关注。 众所周知,运动性猝死是多少年来困扰运动医学专家、教练员及运动员的一大问题。人们苦苦“探索。 展开更多
关键词 研究动态 肥厚性心肌病 心肌肌钙蛋白T 心脏学 基因突变 运动性 运动医学 美国学院 肌球蛋白重基因 发生机制
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中国汉族家族性肥厚型心肌病中首次发现MYH7基因Ile736Thr突变 被引量:7
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作者 谢文丽 刘文玲 +6 位作者 胡大一 崔炜 朱天刚 范瑞云 李翠兰 孙艺红 李蕾 《中华心血管病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第12期1087-1089,共3页
目的 研究中国汉族人家族性肥厚型心肌病的致病基因突变位点,分析基因型与临床表型的相互关系。方法 对3个患家族性肥厚型心肌病家系的先证者进行β肌球蛋白重链基因(MYH7)扫描,聚合酶链式反应扩增其功能区外显子片断,双脱氧末端终止法... 目的 研究中国汉族人家族性肥厚型心肌病的致病基因突变位点,分析基因型与临床表型的相互关系。方法 对3个患家族性肥厚型心肌病家系的先证者进行β肌球蛋白重链基因(MYH7)扫描,聚合酶链式反应扩增其功能区外显子片断,双脱氧末端终止法测序。对阳性结果者进行家系中其他成员的筛查,全部进行β肌球蛋白重链基因目的片段的筛查,并分析家系中患者的临床表型特点。结果 在1个家系中发现Ile736Thr杂合突变,而正常对照组同一位置未见异常,Ile736Thr为我国患者中首次发现。结论 β肌球蛋白重链基因可能为我国家族性肥厚型心肌病的主要致病基因之一。Ile736Thr所致肥厚型心肌病其临床症状出现较晚,但进展快,易发生心力衰竭,预后较差。 展开更多
关键词 家族性肥厚型心肌病 家系 首次发现 肌球蛋白重基因 临床表型 致病基因 突变 中国汉族 外显子 测序
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重组真核表达载体pEGFP-N1/PDGF-A的构建及真皮干细胞的转染 被引量:6
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作者 闫国和 粟永萍 +5 位作者 王军平 汪代杰 艾国平 王锋超 冉新泽 程天民 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第20期2005-2008,共4页
目的克隆血小板衍生生长因子A链(plateletderivedgrowthfactorAchain,PDGFA)基因,以增强型绿色荧光蛋白(enhancedgreenfluorescentprotein,EGFP)载体pEGFPN1为骨架,携带PDGFA基因进入真皮间充质干细胞(dermisdrivedmesenchymalstemcells... 目的克隆血小板衍生生长因子A链(plateletderivedgrowthfactorAchain,PDGFA)基因,以增强型绿色荧光蛋白(enhancedgreenfluorescentprotein,EGFP)载体pEGFPN1为骨架,携带PDGFA基因进入真皮间充质干细胞(dermisdrivedmesenchymalstemcells,DMSCs),为采用转入PDGFA基因的DMSCs修复创面奠定基础。方法采用RTPCR二步分离法,以人肝癌细胞系(SMC7721)的总RNA为模板,扩增PDGFA基因的全长cDNA编码序列,克隆入载体pMD18T,随后又将PDGFA基因亚克隆入pEGFPN1载体中,构建PDGFA基因的真核表达载体pEGFPN1/PDGFA,并采用Fugene6介导转染技术将PDGFA基因导入DMSCs。结果克隆到PDGFA基因的全长cDNA序列,经测序验证,其序列与GenBank所报告的该基因的序列完全一致。结论成功地将PDGFA基因克隆到pEGFPN1载体中,并实现了PDGFA基因在DMSCs的表达。 展开更多
关键词 克隆 真核表达载体 血小板衍生生长因子A基因 绿色荧光蛋白 真皮间充质干细胞
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猪T细胞受体β链基因的克隆及生物信息学分析 被引量:9
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作者 李玩生 刘磊 +2 位作者 冯海燕 房永祥 景志忠 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期1-6,13,共7页
以GenBank上登载的猪的T细胞受体β(pTCR-β)基因为参考序列,用RT-PCR法从猪的外周血淋巴细胞中克隆了TCR-β链基因,并进行生物信息学分析.结果表明:pTCR-β基因含有一个完整的开放阅读框架(ORF),大小为849bp,编码283个氨基酸,且含有一... 以GenBank上登载的猪的T细胞受体β(pTCR-β)基因为参考序列,用RT-PCR法从猪的外周血淋巴细胞中克隆了TCR-β链基因,并进行生物信息学分析.结果表明:pTCR-β基因含有一个完整的开放阅读框架(ORF),大小为849bp,编码283个氨基酸,且含有一段27个氨基酸的信号肽序列,与参考序列相比,在核苷酸序列上的同源性为80.4%,在氨基酸序列上的同源性为70.3%;生物信息学结构预测发现2个结构域,一个为IG结构域,由第32-138位共107个氨基酸残基组成;另一个为IG-LIKE结构域,由第164-211位共48个氨基酸残基组成. 展开更多
关键词 猪TCR-β基因 基因克隆 生物信息学 结构预测
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二代测序技术监测急性淋巴白血病的克隆演变 被引量:9
14
作者 张英驰 章婧嫽 竺晓凡 《中华实用诊断与治疗杂志》 2016年第6期566-567,共2页
目的采用二代测序技术监测复发儿童B细胞急性淋巴白血病(B cell acute lymphoblastic leukemia,B-ALL)的克隆演变。方法 20例B-ALL患儿的初诊和复发骨髓标本,分别提取全基因组DNA,通过多重PCR方法扩增免疫球蛋白重链基因(immunoglobulin... 目的采用二代测序技术监测复发儿童B细胞急性淋巴白血病(B cell acute lymphoblastic leukemia,B-ALL)的克隆演变。方法 20例B-ALL患儿的初诊和复发骨髓标本,分别提取全基因组DNA,通过多重PCR方法扩增免疫球蛋白重链基因(immunoglobulin heavy chain,IGH)互补决定区3(complementarity determining region 3,CDR3)序列并进行二代测序检测。结果 20例B-ALL患儿初诊骨髓标本IGH CDR3测序结果显示,17例有CDR3特异性序列,其中9例有1种CDR3特异性序列,7例有2种CDR3特异性序列,1例有3种CDR3特异性序列;复发骨髓标本IGH CDR3测序结果显示,16例有CDR3特异性序列,其中9例有1种CDR3特异性序列,7例有2种CDR3特异性序列;对初诊和复发标本CDR3序列进行比对分析,发现4例患儿出现克隆演变。结论采用二代测序技术可监测儿童B-ALL复发过程中的克隆演变。 展开更多
关键词 儿童白血病 二代测序技术 克隆演变 免疫球蛋白重基因
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三维斑点追踪技术对于携带MYH7基因突变的肥厚型心肌病患者预后评估的价值 被引量:9
15
作者 赵洁 王静 +6 位作者 刘丽文 郑瑜 王博 李文霞 杨帆 康楠 左蕾 《中华心血管病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期287-293,共7页
目的采用三维斑点追踪(3D-STI)技术联合二维和多普勒超声对携带β-肌球蛋白重链基因(MYH7)基因突变的肥厚型心肌病(HCM)患者心功能特征进行全面评估,以期找到可预测此类患者不良心血管事件的超声指标。方法该研究为回顾性研究。连续入选... 目的采用三维斑点追踪(3D-STI)技术联合二维和多普勒超声对携带β-肌球蛋白重链基因(MYH7)基因突变的肥厚型心肌病(HCM)患者心功能特征进行全面评估,以期找到可预测此类患者不良心血管事件的超声指标。方法该研究为回顾性研究。连续入选2014年10月至2016年10月在西京医院肥厚型心肌病诊治中心就诊的携带MYH7基因突变的成人HCM患者43例,根据有无终点事件发生分为2组,即终点事件组(n=13)和无终点事件组(n=30)。收集入选患者的一般临床资料、超声心动图检测结果及随访结果,记录终点事件的发生情况。终点事件:一级终点事件包括心脏性猝死(SCD),心脏骤停抢救存活或植入埋藏式心脏除颤器(ICD)适当放电;二级终点事件包括急性心梗,因心力衰竭住院,血栓栓塞,室上性心律失常致血流动力学不稳定,终末期HCM。结果43例患者均完成随访,随访时间1012(812,1330)d。13例(30.2%)患者发生终点事件,其中6例(14.0%)发生一级终点事件(SCD 2例、心脏骤停抢救存活3例、ICD适当放电1例),7例(16.3%)发生二级终点事件(因心力衰竭住院5例、室上性心动过速致晕厥复律1例、终末期HCM 1例)。与无终点事件组比较,终点事件组患者5年SCD风险评分较高(P<0.05),发生晕厥的患者比例较高(P<0.05),左心房容积指数(LAVI)较大(P<0.05),左心室三维整体纵向应变(GLS)绝对值较低(P<0.05)。校正年龄、性别后多因素Cox回归分析结果显示,GLS是携带MYH7基因突变的HCM患者发生不良心血管事件的独立预测因素(HR=0.814,95%CI 0.663~0.999,P=0.049)。受试者工作特征(ROC)绝对值曲线评估结果显示,GLS绝对值≤13.67%的患者更易发生不良心血管事件(AUC=0.753,95%CI 0.558~0.948,P<0.05),敏感度为86%,特异度为69%。Kaplan-Meier生存曲线结果进一步显示,GLS绝对值≤13.67%的HCM患者无终点事件生存率明显低于GLS绝对值>13.67%的患者(P<0.05)。结论3D-STI指标GLS� 展开更多
关键词 心肌病 肥厚性 超声心动图 压力 三维斑点追踪技术 β-肌球蛋白重基因
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大口黑鲈肌球蛋白重链基因SNPs的筛选及与生长性状的关联 被引量:8
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作者 李胜杰 姜鹏 +3 位作者 樊佳佳 白俊杰 李锐 朱新平 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期305-313,共9页
肌球蛋白是肌肉细胞的重要组成成分,影响肌纤维的组成和肌肉生长。为了研究肌球蛋白重链(MYH)基因多态性与大口黑鲈生长性状的相关性,本研究采用PCR技术扩增得到编码区序列全长为9759 bp的大口黑鲈MYH基因,该基因包含37个外显子和36个... 肌球蛋白是肌肉细胞的重要组成成分,影响肌纤维的组成和肌肉生长。为了研究肌球蛋白重链(MYH)基因多态性与大口黑鲈生长性状的相关性,本研究采用PCR技术扩增得到编码区序列全长为9759 bp的大口黑鲈MYH基因,该基因包含37个外显子和36个内含子,编码1940个氨基酸。采用直接测序法在MYH基因上筛选到8个单核苷酸多态性标记(SNP)位点(A-305G、G-558C、A-2784C、A-2816G、T-4765A、C-6206T、C-6811T和G-6935T),有4个位于外显子上,其中2个属于同义突变。用SNa Pshot方法对从同批繁殖、同塘养殖的大口黑鲈"优鲈1号"群体中随机选取的430尾个体中各位点的基因型进行检测。结果显示,内含子上的A-2784C和A-2816G位点完全连锁,所有位点在大口黑鲈"优鲈1号"群体中的平均有效等位基因数、平均观测杂合度和平均期望杂合度分别为1.635、0.406和0.373,仅C-6206T、C-6811T和T-4765A位点的基因型频率分布符合Hardy-Weinberg定律。采用一般线性模型分析各位点与大口黑鲈生长性状之间的相关性,研究发现,C-6811T位点CC基因型个体的体质量和全长显著大于TT基因型,CC基因型个体的体高和尾柄长显著大于CT和TT基因型,其余位点不同基因型个体间的生长性状均不存在显著差异。C-6811T位点与生长性状显著相关,可作为大口黑鲈分子标记辅助育种的候选标记。 展开更多
关键词 大口黑鲈 肌球蛋白重基因 单核苷酸多态性标记(SNP) 生长性状 关联分析
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常规超声心动图联合三维斑点追踪显像技术构建多参数模型对家族性肥厚型心肌病MYH7基因突变携带者的早期识别 被引量:8
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作者 赵丹 纳丽莎 +4 位作者 刘丽文 段云燕 孙超 王博 朱晓丽 《中华超声影像学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第9期737-741,共5页
目的应用常规超声心动图(2DE)及三维斑点追踪显像(3DSTI)技术构建多参数联合诊断模型,提高家族性肥厚型心肌病(HCM)MYH7基因突变携带者的识别效率。方法选取28例家族性HCM中携带MYH7突变基因且表型阴性者(MYH7G+P-)作为研究组... 目的应用常规超声心动图(2DE)及三维斑点追踪显像(3DSTI)技术构建多参数联合诊断模型,提高家族性肥厚型心肌病(HCM)MYH7基因突变携带者的识别效率。方法选取28例家族性HCM中携带MYH7突变基因且表型阴性者(MYH7G+P-)作为研究组,27例携带MYBPC3突变基因且表型阴性者(MYBPC3G+P-)作为对照组。分别进行2DE、组织多普勒成像(TDI)、3D-STI检查,测量舒张末期室间隔厚度(IVS)及左室后壁厚度(LVPwT)取最大值,测量二尖瓣下舒张早期和晚期血流速度峰值(E、A)、E峰减速时间(EDT)、房室充盈时间、二尖瓣环室间隔侧和侧壁侧舒张早期及晚期运动峰值速度(IVS-e’、IVS-a’、L-e、La’)取平均值e’、a’,计算E/e’、E/A、左房容积指数(LAVI)、左室质量指数(LVMI)、左室射血分数(LVEF)、等容舒张时间(IVRT)、等容收缩时间(IVCT)。3D—STI测量整体纵向、径向、环向和面积应变(GLS、GRS、GCS、GAS),比较研究组与对照组以上参数的差异。结果与对照组相比,研究组LAVI、LVMI及舒张末期IVS和LVPwT最大值较对照组增大,GAS绝对值显著升高,差异均有统计学意义(P〈0.01),TDI参数差异无统计学意义(P〉0.01)。单一和联合超声参数ROC曲线下面积依次为:联合指标预测概率值〉LVPWT最大值〉LAVI〉IVS最大值〉LVMI〉GAS(曲线下面积分别为0.912、0.772、0.738、0.733、0.719、0.714)。联合指标预测值的识别MYH7G+P-的敏感性和特异性分别为85.2%、96.3%。结论2DE联合3D-STI建立数学模型可以显著提高识别HCM中MYH7突变基因携带者的诊断效率,LVPWT最大值可以作为区分MYH7G+P-与MYBPC3G+P-的独立预测指标。 展开更多
关键词 超声心动描记术 心肌病 肥厚型 肌球蛋白结合蛋白-C β-肌球蛋白重基因 三维斑点追踪显像
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荷包猪SLA-2重链基因偶合底物肽及表达研究 被引量:7
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作者 张香春 冯磊 +3 位作者 张鑫 何潇涵 吴子环 高凤山 《生物技术》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期17-20,共4页
目的:构建荷包猪SLA-2重链基因偶合底物肽(BSP)并研究其在pET-21a(+)中的蛋白表达。方法:设计荷包猪SLA-2-BSP复合基因引物,PCR扩增荷包猪SLA-2-HB-BSP复合基因,并克隆至pMD19-T Simple Vector,经酶切鉴定后,将SLA-2-HB-BSP复合基因... 目的:构建荷包猪SLA-2重链基因偶合底物肽(BSP)并研究其在pET-21a(+)中的蛋白表达。方法:设计荷包猪SLA-2-BSP复合基因引物,PCR扩增荷包猪SLA-2-HB-BSP复合基因,并克隆至pMD19-T Simple Vector,经酶切鉴定后,将SLA-2-HB-BSP复合基因与表达系统pET-21a(+)连接,并转化BL21(Rosetta)菌进行诱导表达,SDS-PAGE检测目的蛋白。结果:PCR结果显示,SLA-2-BSP大小为900bp左右,并成功克隆至pMD19-T Simple Vector载体,酶切后大小为876bp,该基因连接pET-21 a(+)并转化宿主菌BL21(Rosetta)后,经诱导表达和SDS-PAGE检测,目标蛋白大小为34.4kDa,经优化后目的蛋白相对表达含量达到了45%。结论:该研究成功构建荷包猪SLA-2偶合BSP的pET-21a重组表达系,为下一步构建猪SLAⅠ类分子四聚体奠定了基础。 展开更多
关键词 荷包猪 SLA-2 基因 底物肽
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烟台黑猪SLA-I重链基因末端生物素修饰及表达 被引量:7
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作者 刘筏 杨金刚 +2 位作者 翟晓鑫 董宋鹏 高凤山 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期191-195,共5页
为构建烟台黑猪SLA-2重链基因偶合生物素化酶BirA底物肽(BirA substrate peptide,BSP)并研究其在pET-28a(+)中的表达,设计烟台黑猪SLA-2-BSP复合基因引物,PCR扩增烟台黑猪SLA-2-YTH-BSP复合基因,并克隆至pMD 19-T Simple Vectorp,经酶... 为构建烟台黑猪SLA-2重链基因偶合生物素化酶BirA底物肽(BirA substrate peptide,BSP)并研究其在pET-28a(+)中的表达,设计烟台黑猪SLA-2-BSP复合基因引物,PCR扩增烟台黑猪SLA-2-YTH-BSP复合基因,并克隆至pMD 19-T Simple Vectorp,经酶切鉴定后将SLA-2-YTH-BSP复合基因与表达系统pET-28a(+)链接,并转化到BL21(Rosseta)菌进行诱导表达,SDS-PAGE检测目的蛋白。表达蛋白经过Ni-NTA亲和纯化,并经SDS-PAGE检测蛋白纯化效果。PCR结果显示SLA-2-BSP大小为900 bp,并成功克隆到pMD 19-T Simple Vector,酶切鉴定大小为876 bp,该基因链接到pET-28a(+)并转化到BL21(Rosseta)菌,经诱导表达和SDS-PAGE检测目的蛋白的大小为32.4 kD。目的蛋白以包涵体形式存在,纯化后蛋白纯度达到90%以上。成功构建烟台黑猪SLA-I重链偶合生物素化酶BirA底物肽(BSP)的pET-28a(+)的重组表达系,为下一步的SLA-I类分子四聚体研究鉴定基础。 展开更多
关键词 烟台黑猪 SLA-2 基因 生物素化酶BirA底物肽 纯化
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家蚕丝心蛋白H链基因的荧光原位杂交(FISH) 被引量:3
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作者 宋方洲 易发平 +7 位作者 张平波 易发平 鲁成 张平波 洪锡钧 伴野丰 藤井博 古贺克已 《中国科学(C辑)》 CSCD 北大核心 2002年第4期361-365,T001,共6页
蚕丝业在国民经济中占有极为重要的地位.家蚕作为重要的模式生物和生物反应器,历来为人们所关注.有关蚕丝基因的结构、表达调控和分子进化都已有较详细的研究和报道,但关于蚕丝结构基因的分子细胞遗传学基因定位的研究,几乎尚无报道.经... 蚕丝业在国民经济中占有极为重要的地位.家蚕作为重要的模式生物和生物反应器,历来为人们所关注.有关蚕丝基因的结构、表达调控和分子进化都已有较详细的研究和报道,但关于蚕丝结构基因的分子细胞遗传学基因定位的研究,几乎尚无报道.经用荧光原位杂交技术(fluorescence in situ hybridization,FISH)对家蚕丝心蛋白H链基因(Fib-H)的分子细胞遗传学定位研究结果,初步将家蚕丝心蛋白H链基因定位在了分子细胞遗传学第25连锁群染色体的端部,即25~0.0的位置,从而解决了该基因迄今尚未定位的问题,并证实了丝心蛋白H链基因在染色体位置上为单一座位. 展开更多
关键词 H基因 家蚕 丝心蛋白基因 荧光原位杂交 基因定位 FISH 分子细胞遗传学 染色体 位点
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