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KCa3．1表达改变对子宫内膜癌细胞增殖、细胞周期及凋亡的影响 被引量：6
1
作者 张英丽 赵明智 +4 位作者 鹿欣 黄妍 易晓芳 郁茵华 丰有吉 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期323-328,共6页
目的:探讨钙激活性中电导钾离子通道(intermediate-conductance Ca2+-activated K+channels,KCa3.1)表达水平和活性改变对子宫内膜癌细胞增殖、细胞周期及凋亡的影响。方法:将携有KCa3.1RNA干扰(RNA interference,RNAi)片段的质粒转染... 目的:探讨钙激活性中电导钾离子通道(intermediate-conductance Ca2+-activated K+channels,KCa3.1)表达水平和活性改变对子宫内膜癌细胞增殖、细胞周期及凋亡的影响。方法:将携有KCa3.1RNA干扰(RNA interference,RNAi)片段的质粒转染子宫内膜癌HEC-1-A和Ishikawa细胞,应用实时荧光定量PCR(real time fluorogentic quantitative PCR,RFQ-PCR)及Western印迹法检测KCa3.1的表达变化;应用MTT法、BrdU掺入法、FCM及Western印迹法检测KCa3.1特异性阻断剂TRAM-34和KCa3.1RNAi表达质粒干扰后,子宫内膜癌细胞株增殖、细胞周期、凋亡及cyclin D1、cyclin E及survivin蛋白表达的改变。结果:KCa3.1RNAi表达质粒可以明显抑制KCa3.1mRNA及蛋白的表达,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01);TRAM-34及KCa3.1RNAi可以明显抑制HEC-1-A和Ishikawa细胞的增殖,2株细胞的G0/G1期细胞百分比上升,S期细胞百分比下降,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05),但细胞凋亡率与对照组相比无明显差异(P>0.05);cyclin D1、cyclin E及survivin的蛋白表达水平降低,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论:抑制KCa3.1的表达及活性可以抑制子宫内膜癌细胞增殖,阻碍细胞周期进展,但对细胞凋亡无明显影响。 展开更多
关键词 子宫内膜肿瘤 RNA干扰 钙激活性中电导钾离子通道 细胞增殖 细胞周期 细胞凋亡
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阻断钙激活钾通道对宫颈癌细胞增殖及钾通道电流的影响 被引量：1
2
作者 刘玲 聂丹 +3 位作者 范凌晔 詹平 钱燕萍 毛熙光 《山东医药》 CAS 北大核心 2015年第43期1-4,共4页
目的观察钙激活性中电导钾离子通道(IKCa1)被阻断后对宫颈癌He La细胞增殖及IKCa1膜电位的影响。方法分别用IKCa1阻断剂克霉唑和RNA干扰法阻断He La细胞的IKCa1后,用RT-PCR技术检测He La细胞的IKCal mRNA,MTT法检测细胞OD值,膜片钳技术... 目的观察钙激活性中电导钾离子通道(IKCa1)被阻断后对宫颈癌He La细胞增殖及IKCa1膜电位的影响。方法分别用IKCa1阻断剂克霉唑和RNA干扰法阻断He La细胞的IKCa1后,用RT-PCR技术检测He La细胞的IKCal mRNA,MTT法检测细胞OD值,膜片钳技术检测细胞IKCa1电流。结果克霉唑阻断IKCa1后,He La细胞的IKCa1 mRNA表达降低、IKCa1电流减弱、细胞OD值下降,与对照组相比,P均<0.05。RNA干扰法阻断IKCa1后,Hela细胞的IKCa1 mRNA表达下降、IKCa1电流减弱、细胞OD值降低,与空白对照组和阴性转染组相比,P均<0.05。结论阻断IKCa1能有效抑制He La细胞增殖,下调细胞IKCa1 mRNA的表达,降低其IKCa1电流;IKCa1通过调控He La细胞膜电位而影响其信号传递,调控He La细胞的增殖。 展开更多
关键词 离子通道 钾离子通道 钙激活性中电导钾离子通道 钾离子通道阻断剂 克霉唑 小分子干扰RNA技术 宫颈癌细胞 He La细胞株
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人宫颈鳞状上皮细胞癌组织中IKCa1 mRNA的表达及意义 被引量：2
3
作者 林海蕤 毛熙光 王定玉 《山东医药》 CAS 2012年第46期47-49,共3页
目的观察人宫颈鳞状上皮细胞癌组织(简称宫颈癌)及正常宫颈上皮组织中钙激活性中电导钾离子通道(IKCal)mRNA表达变化,探讨其机制。方法采用RT-PCR方法分别检测15例宫颈癌组织和18例正常宫颈上皮组织中IKCalm RNA的表达变化。结果宫颈癌... 目的观察人宫颈鳞状上皮细胞癌组织(简称宫颈癌)及正常宫颈上皮组织中钙激活性中电导钾离子通道(IKCal)mRNA表达变化,探讨其机制。方法采用RT-PCR方法分别检测15例宫颈癌组织和18例正常宫颈上皮组织中IKCalm RNA的表达变化。结果宫颈癌组织中IKCal mRNA阳性表达率为73.33%,表达水平为1.14±0.45;正常宫颈上皮组织中分别为11.11%和0.86±0.23(P均<0.05)。宫颈癌组织中存在更高表达的IKCalmRNA。结论宫颈癌组织中细胞核内IKCal mRNA表达明显高于正常宫颈组织,过度表达的IKCal可能是宫颈癌发生的机制之一。 展开更多
关键词 宫颈肿瘤 宫颈鳞状上皮细胞癌 钙激活性中电导钾离子通道
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宫颈鳞状上皮细胞癌组织中钙激活性中电导钾离子通道蛋白产物表达分析 被引量：2
4
作者 林海蕤 毛熙光 +2 位作者 傅晓冬 黄桂英 鲁照明 《中国实用妇科与产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期44-46,共3页
目的探讨正常宫颈和宫颈癌组织中钙激活性中电导钾离子通道(IKCa1)与人类宫颈鳞状上皮细胞癌的相关性。方法取2007年10月至2008年4月泸州医学院附属医院手术治疗的30例不同分化程度的宫颈鳞状上皮细胞癌患者病变部位组织作为实验组,同时... 目的探讨正常宫颈和宫颈癌组织中钙激活性中电导钾离子通道(IKCa1)与人类宫颈鳞状上皮细胞癌的相关性。方法取2007年10月至2008年4月泸州医学院附属医院手术治疗的30例不同分化程度的宫颈鳞状上皮细胞癌患者病变部位组织作为实验组,同时期18例正常宫颈上皮组织作为对照组,分别采用免疫组织化学方法检测上述组织中IKCa1蛋白产物表达部位及表达水平。结果 IKCa1在30例宫颈鳞状上皮细胞癌组织细胞核及细胞膜上均呈阳性表达,阳性表达率为100.0%;18例正常宫颈上皮组织中仅1例在鳞状上皮部位细胞膜部位有较弱表达,阳性表达率为5.6%,IKCa1蛋白产物在宫颈鳞状上皮细胞癌组织中的表达程度及表达部位均与正常宫颈组织中存在明显差异(Z=-6.109,P=0.00,P<0.05)。在不同分化程度的宫颈鳞状上皮细胞癌组织中,高分化鳞癌组阳性表达率为40.0%,中分化鳞癌组阳性率为90.0%,低分化鳞癌组阳性率为100.0%;IK-Ca1蛋白产物表达程度与癌细胞分化程度呈负相关(χ2=8.4,P<0.05)。结论宫颈鳞状上皮细胞癌组织中IK-Ca1蛋白产物的表达明显高于正常宫颈组织;且IKCa1蛋白产物表达水平与癌细胞的分化程度呈负相关;过高表达的IKCa1与宫颈鳞状上皮细胞癌的发生和发展可能存在重要联系。 展开更多
关键词 钙激活性中电导钾离子通道 宫颈肿瘤 免疫组织化学
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人宫颈鳞状上皮细胞癌组织中钙激活性中电导钾离子通道的表达 被引量：1
5
作者 林海蕤 毛熙光 +1 位作者 付晓东 刘玲 《中国生育健康杂志》 2013年第2期114-116,124,共4页
目的探讨人宫颈鳞状上皮细胞癌（简称鳞癌）组织中电导钾离子通道（IKCal）mRNA及其蛋白产物与正常宫颈上皮组织中钙激活性的差异。方法采用免疫组织化学法及RT-PCR法分别检测30例不同分化程度的宫颈鳞癌组织和18例正常宫颈上皮组织中IK... 目的探讨人宫颈鳞状上皮细胞癌（简称鳞癌）组织中电导钾离子通道（IKCal）mRNA及其蛋白产物与正常宫颈上皮组织中钙激活性的差异。方法采用免疫组织化学法及RT-PCR法分别检测30例不同分化程度的宫颈鳞癌组织和18例正常宫颈上皮组织中IKCalmRNA及其蛋白产物的表达情况。结果（1）IKCalmRNA阳性表达率15例子宫颈鳞癌组织中分别为73．3％，表达水平为（1．2±n5），18例正常宫颈上皮组织中分别为11．1％，表达水平为（0．9±0．2），差异均有统计学意义；（2）30例宫颈鳞癌组织细胞核及细胞膜上IKCal蛋白产物均呈阳性表达；正常宫颈上皮组织中仅1例在鳞状上皮部位细胞膜部位有较弱表达，差异有统计学意义；（3）宫颈鳞癌组织中IKCal蛋白产物的表达与癌细胞分化程度呈正相关。结论IKCal的高表扶与宫颈鳞痛的发牛和发展密切相关． 展开更多
关键词 钙激活性中电导钾离子通道 子宫颈鳞状上皮细胞癌 mRNA 逆转录-聚合酶链反应 免疫组织化学
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IKCal蛋白产物在人宫颈鳞状上皮细胞癌组织及正常宫颈组织中表达差异分析 被引量：1
6
作者 林海蕤 毛熙光 +1 位作者 黄桂英 鲁照明 《四川医学》 CAS 2011年第1期7-9,共3页
目的研究人宫颈鳞状上皮细胞癌组织及正常宫颈上皮组织中钙激活性中电导钾离子通道(IKCal)蛋白产物的分布差异,探讨IKCal与人类宫颈鳞状上皮细胞癌的关联。方法采用免疫组织化学方法检测18例正常宫颈上皮组织和30例不同分化程度的宫颈... 目的研究人宫颈鳞状上皮细胞癌组织及正常宫颈上皮组织中钙激活性中电导钾离子通道(IKCal)蛋白产物的分布差异,探讨IKCal与人类宫颈鳞状上皮细胞癌的关联。方法采用免疫组织化学方法检测18例正常宫颈上皮组织和30例不同分化程度的宫颈鳞状上皮细胞癌组织中IKCal蛋白产物表达部位及表达水平。结果①IKCal在30例宫颈鳞状上皮细胞癌组织细胞核及细胞膜上均呈阳性表达;18例正常宫颈上皮组织中仅1例在鳞状上皮部位细胞膜部位有较弱表达,IKCal蛋白产物在宫颈鳞癌组织中的表达与正常宫颈组织中存在明显差异(Z=-6.109,P=0.00,P<0.05);②在不同分化程度的宫颈鳞癌组织中,IKCal蛋白产物表达程度与癌细胞分化程度呈负相关(2χ=16.468,P=0.00,P<0.017)。结论宫颈鳞癌组织中IKCal蛋白产物的表达明显高于正常宫颈组织;且IKCal蛋白产物表达水平与癌细胞的分化程度呈负相关;过高表达的IKCal与宫颈鳞状上皮细胞癌的发生和发展可能存在重要联系。 展开更多
关键词 钙激活性中电导钾离子通道 子宫颈鳞状上皮细胞癌 免疫组织化学
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IKCa1基因shRNA真核表达载体的构建及其在HeLa细胞中的表达
7
作者 聂丹 刘玲 +3 位作者 詹平 汪春燕 毛熙光 任黔川 《泸州医学院学报》 2012年第4期359-363,共5页
目的:构建针对钙激活性中电导钾离子通道(intermediate-conductance Ca2+-activated K+channels,IKCa1)的小发夹RNA(small hair RNA,shRNA)真核表达载体,观察其在宫颈癌细胞HeLa中的表达。方法:设计、合成IKCa1基因特异性shRNA序列,插... 目的:构建针对钙激活性中电导钾离子通道(intermediate-conductance Ca2+-activated K+channels,IKCa1)的小发夹RNA(small hair RNA,shRNA)真核表达载体,观察其在宫颈癌细胞HeLa中的表达。方法:设计、合成IKCa1基因特异性shRNA序列,插入空载体pGenesil-1.1中,构建重组体,脂质体法转染宫颈癌HeLa细胞,半定量RT-PCR和Western blotting技术检测转染前后HeLa细胞中IKCa1的表达。结果:成功构建IKCa1 shRNA真核表达载体,转染后HeLa细胞中IKCa1的表达受到显著抑制。结论:成功构建IKCa1特异性shRNA表达载体,为进一步研究IKCa1参与宫颈癌发生发展的机制奠定实验基础。 展开更多
关键词 钙激活性中电导钾离子通道 小发夹RNA HELA细胞
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siRNA抑制IKCa1基因表达对宫颈癌HeLa细胞增殖的影响
8
作者 聂丹 詹平 +2 位作者 毛熙光 汪春燕 刘玲 《中国妇幼保健》 CAS 北大核心 2012年第8期1221-1224,共4页
目的:研究siRNA(small interfering RNA)抑制钙激活性中电导钾离子通道(intermediate-conductance Ca2+-activated K+channels,IKCa1)表达对宫颈癌HeLa细胞增殖的影响。方法:构建含有IKCa1基因的siRNA表达载体,脂质体法转染HeLa细胞,通... 目的:研究siRNA(small interfering RNA)抑制钙激活性中电导钾离子通道(intermediate-conductance Ca2+-activated K+channels,IKCa1)表达对宫颈癌HeLa细胞增殖的影响。方法:构建含有IKCa1基因的siRNA表达载体,脂质体法转染HeLa细胞,通过RT-PCR和Western Blot检测HeLa细胞IKCa1 mRNA和蛋白表达变化;WST-1检测细胞增殖能力;流式细胞仪分析HeLa细胞周期变化。结果:成功构建针对IKCa1基因的真核表达载体,所获表达载体转染HeLa细胞可使IKCa1mRNA和蛋白表达水平显著降低(P<0.05),并能有效抑制HeLa细胞增殖(P<0.05),使细胞周期停留在G0～G1期,S期细胞明显减少。结论:应用siRNA干扰技术能有效抑制IKCa1基因的表达,同时也可有效抑制宫颈癌HeLa细胞体外增殖活性。 展开更多
关键词 钙激活性中电导钾离子通道 小干扰RNA HELA细胞
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