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人红细胞门冬氨酸氨基转移酶的提纯及有关性质研究 被引量:5
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作者 孟泽 史利宁 李勇 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期69-72,共4页
目的为研制AST测定用的酶参考品。方法  从人红细胞中提取了胞质型AST(C-AST),并对其有关性质进行了研究。结果提纯的ASP比活达105kU/g蛋白,几乎不含杂酶(未检出LD、GGT、CK、ALP、ACP、AL... 目的为研制AST测定用的酶参考品。方法  从人红细胞中提取了胞质型AST(C-AST),并对其有关性质进行了研究。结果提纯的ASP比活达105kU/g蛋白,几乎不含杂酶(未检出LD、GGT、CK、ALP、ACP、ALT、MDH(苹果酸脱氢酶)、GLDH(谷氨酸脱氢酶)、ChE及Amy]。聚丙烯酸胺凝胶电泳后酶染色呈单-GAST区带,蛋白质染色显示相应的主区带及一条更向阳极的次区带。其酶动力学性质(如Michenius常数,Arrhenius关系,最适pH)与血清AST非常接近。结论 本提制品可用于研制AST参考品。 展开更多
关键词 门冬氨酸氨基转移 参考 人红细胞 提纯 AST
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不同方法测定人血清与猪心提纯物中ALT结果的互换性 被引量:4
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作者 史利宁 孟泽 +1 位作者 李勇 黄宇峰 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2002年第5期303-305,共3页
目的 研究不同方法测定人血清与猪心提纯物中ALT结果的互换性,以便用猪心提取的ALT作为参考品。方法 采用10种常用的ALT连续监测法(或试剂盒)及2种赖氏法试剂盒测定72份人血清及猪心提纯物中的ALT,以IFCC推荐的方法(不含磷酸吡哆醛... 目的 研究不同方法测定人血清与猪心提纯物中ALT结果的互换性,以便用猪心提取的ALT作为参考品。方法 采用10种常用的ALT连续监测法(或试剂盒)及2种赖氏法试剂盒测定72份人血清及猪心提纯物中的ALT,以IFCC推荐的方法(不含磷酸吡哆醛)为基准,对其他11种方法测定的结果进行回归分析,并对人血清及猪心提纯物中ALT的反应性进行比较。结果11种方法与IFCC法间血清ALT测定值的相关性较好,相关系数(r)接近1.0,截距接近0。提纯物在各连续监测法间均与人血清ALT反应性相近,具互换性。结论 所提纯的ALT可作为酶制剂的参考品用于临床检测。 展开更多
关键词 测定 人血清 猪心提纯物 ALT结果 互换性 丙氨酸氨基转移 参考
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血清AST测定方法的比较及其与IFCC法结果转换的计算方法 被引量:3
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作者 史利宁 孟泽 《医学研究生学报》 CAS 2002年第2期121-124,共4页
目的 :研究血清标本及校正品或标准品用不同方法测定天冬氨酸转氨酶 (AST)结果间的关系以及转换成IFCC法结果的计算方法。 方法 :采用八种常用的AST测定方法 (试剂盒 )测定 87份血清标本 ,以IFCC推荐的方法H(不含磷酸吡哆醛 )为基准 ,... 目的 :研究血清标本及校正品或标准品用不同方法测定天冬氨酸转氨酶 (AST)结果间的关系以及转换成IFCC法结果的计算方法。 方法 :采用八种常用的AST测定方法 (试剂盒 )测定 87份血清标本 ,以IFCC推荐的方法H(不含磷酸吡哆醛 )为基准 ,其他七种方法测定的血清AST值与之进行相关分析 ;并研究两种酶校正品(RANDOX、c .f.a .s)和一种酶参考品 (ERM)与人血清AST的转换性。 结果 :八种方法间血清AST测定值的相关性较好 ,相关系数 (r)接近 1.0 ,截距接近 0。ERM在以上各方法间均与人血清AST反应性相近 ,具转换性 ;校正品RANDOX、c .f.a .s则与人血清AST反应性有差异 ,转换性欠佳。 结论 :采用统一的合格的酶参考品可以大大减小各方法间测定值的离散度 。 展开更多
关键词 转换性 血清AST测定方法 比较 IFCC法 计算方法 天冬氨酸转氨 参考
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丙氨酸转氨酶参考品的研制 被引量:2
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作者 孟泽 史利宁 +1 位作者 李勇 黄宇峰 《中国生化药物杂志》 CAS CSCD 2002年第5期223-225,共3页
目的研制用于丙氨酸转氨酶 (ALT)测定的参考品。方法猪心作原料 ,经硫酸铵沉淀、DEAE SephadexA 5 0、CM SephadexC 5 0、SephadexG 15 0及抗天冬氨酸转氨酶 (AST)免疫亲和色谱提纯 ,用一定的基础液稀释后分装冻干。结果提纯品ALT比活为... 目的研制用于丙氨酸转氨酶 (ALT)测定的参考品。方法猪心作原料 ,经硫酸铵沉淀、DEAE SephadexA 5 0、CM SephadexC 5 0、SephadexG 15 0及抗天冬氨酸转氨酶 (AST)免疫亲和色谱提纯 ,用一定的基础液稀释后分装冻干。结果提纯品ALT比活为 173U/mg蛋白 ,得率 2 2 .8% ,温度加速变性试验测得预期年失活率 ,在 - 2 0℃、4℃分别为 0 .0 5 %、0 .12 %。结论此法提纯ALT得率高 ,仅含少量AST ,冻干品稳定 ,在不同方法间与人血清有互换性 。 展开更多
关键词 丙氨酸转氨 参考 临床
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猪肾γ-谷氨酸基转移酶(GGT)的提纯及其稳定性 被引量:1
5
作者 孟泽 史利宁 +1 位作者 李勇 黄宇峰 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2002年第1期35-37,52,共4页
目的 提纯活性稳定的GGT,制备用于GGT(测定的参考品。方法 用差速离心法从猪肾皮质中分离刷状缘微绒毛膜,用 Triton X-100溶解膜结合的酶,用抗GGT亲和层析柱提纯 GGT,检测提纯品的有关特性。结果 提纯品GGT比活600IU/mg蛋白,得率... 目的 提纯活性稳定的GGT,制备用于GGT(测定的参考品。方法 用差速离心法从猪肾皮质中分离刷状缘微绒毛膜,用 Triton X-100溶解膜结合的酶,用抗GGT亲和层析柱提纯 GGT,检测提纯品的有关特性。结果 提纯品GGT比活600IU/mg蛋白,得率45.5%,未测出临床常测的酶,在不同方法间的活性比与人血清GGT相似,在特定介质中制成冻干品,经加速变性试验,在-20℃和4℃预期年失活率分别为0.02%和0.25%。结论 本法提纯GGTT速度快,得率高,几乎不含杂酶,稳定性好,在不同方法间与人血清酶有互换性,是用于制备酶参考品提纯GGT的理想方法。 展开更多
关键词 参考 Γ-谷氨酰基转移 稳定性 猪肾 GGT 提纯
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猪肾碱性磷酸酶的提纯及性质研究 被引量:1
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作者 史利宁 孟泽 张春妮 《医学研究生学报》 CAS 2004年第8期673-675,共3页
目的 :从猪肾中提取碱性磷酸酶 (ALP) ,并对其能否作为参考品进行研究。 方法 :从猪肾皮质中分离刷状缘微绒毛膜 ,用正丁醇溶解膜结合的酶 ,经硫酸铵沉淀 ,DEAE Sephacel、ConA Sepharose、SephadexG 2 0 0及抗γ 谷酰基转移酶 (GGT)... 目的 :从猪肾中提取碱性磷酸酶 (ALP) ,并对其能否作为参考品进行研究。 方法 :从猪肾皮质中分离刷状缘微绒毛膜 ,用正丁醇溶解膜结合的酶 ,经硫酸铵沉淀 ,DEAE Sephacel、ConA Sepharose、SephadexG 2 0 0及抗γ 谷酰基转移酶 (GGT)免疫亲和层析提纯ALP。 结果 :提纯的ALP比活达 4 0 2kU/g蛋白 ,几乎不含杂酶 (未检出ALT、AST、ChE、AMY、CK、LDH ,GGT仅含 2U/780UALP)。其对底物 4 硝基磷酸酚 (4 NPP)的Km值为 1.35mmol/L ,最适pH值为 10 .4 0。  结论 :提纯的猪肾ALP与人血清中的ALP酶动力学特性非常相似 ,为进一步研制ALP参考品奠定了基础。 展开更多
关键词 碱性磷酸 提纯 参考
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α-淀粉酶及门冬氨酸氨基转移酶参考品赋值方法的初步研究 被引量:1
7
作者 李勇 孟泽 +1 位作者 史利宁 黄宇烽 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期197-200,共4页
目的 初步研究α 淀粉酶和门冬氨酸转移酶参考品活性浓度的赋值方法。方法 两种酶的活性浓度用IFCC推荐的方法测定 ,由南京市内的 8个实验室协助完成 ,在测定前进行生化分析仪实际K值的检测。结果 瓶间变异CV小于 1 1%。实验室间变... 目的 初步研究α 淀粉酶和门冬氨酸转移酶参考品活性浓度的赋值方法。方法 两种酶的活性浓度用IFCC推荐的方法测定 ,由南京市内的 8个实验室协助完成 ,在测定前进行生化分析仪实际K值的检测。结果 瓶间变异CV小于 1 1%。实验室间变异大于实验室日内或实验室日间变异。α 淀粉酶和门冬氨酸氨基转移酶的催化浓度以 95 %可信限赋值 ,复溶的冻干参考品分别为 (10 48± 42 )U/L和 (182± 5 )U/L ;同样的液体参考品分别为 (1198± 43)U/L和 (172± 3)U/L。将复溶型和液体型淀粉酶参考品用蒸馏水等量稀释 ,其值为 (5 37± 2 0 )U/L和 (5 98± 2 2 )U/L。结论 此初步赋值对本品的试用和认证是有价值的。 展开更多
关键词 门冬氨酸氨基转移 淀粉 参考 赋值 血清 测定
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γ-谷氨酰转移酶参考品赋值方法的初步研究 被引量:1
8
作者 李勇 孟泽 +2 位作者 史利宁 黄宇烽 张春妮 《医学研究生学报》 CAS 2004年第3期207-209,共3页
目的 :研究γ 谷氨酰转移酶 (GGT)参考品活性的赋值。 方法 :用临床化学国际联盟 (IFCC)推荐方法测定该酶的活性 ,选择 5种厂家生产的试剂盒 ,首先进行实际K值的测定 ,然后对该酶参考品赋值。 结果 :瓶间变异系数 (CV) <1.0 %。GG... 目的 :研究γ 谷氨酰转移酶 (GGT)参考品活性的赋值。 方法 :用临床化学国际联盟 (IFCC)推荐方法测定该酶的活性 ,选择 5种厂家生产的试剂盒 ,首先进行实际K值的测定 ,然后对该酶参考品赋值。 结果 :瓶间变异系数 (CV) <1.0 %。GGT催化浓度以 95 %可信限赋值 ,复溶的冻干参考品为 (138± 8)U/L。 结论 :该赋值对于本品的试用和认证是有价值的。 展开更多
关键词 Γ-谷氨酰转移 参考 赋值
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酶参考品互换性在酶测定方法标准化中的意义及应用
9
作者 史利宁 孟泽 《医学研究生学报》 CAS 2003年第1期7-9,共3页
目的 :研究本室所提酶制品的互换性、影响因素及应用方法。 方法 :采用数种常用的酶测定法 (或试剂盒 )测定多份血清及本室所提酶制品 ,以国际临床化学联合会 (IFCC)推荐的方法为基准 ,对其他方法测定的结果进行回归分析 ,并对血清及... 目的 :研究本室所提酶制品的互换性、影响因素及应用方法。 方法 :采用数种常用的酶测定法 (或试剂盒 )测定多份血清及本室所提酶制品 ,以国际临床化学联合会 (IFCC)推荐的方法为基准 ,对其他方法测定的结果进行回归分析 ,并对血清及本室酶制品的反应性进行比较 ,对不具互换性的原因进行分析。 结果 :本室所提酶制品除在个别方法间不具互换性外 ,大多具有互换性。 结论 :本室所提酶制品具备互换性 。 展开更多
关键词 测定方法 参考 互换性 常规方法 标准方法 血清
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凝血实验的质量控制
10
作者 彭明婷 《浙江检验医学》 2004年第4期3-5,共3页
关键词 凝血实验 质量控制 凝血活参考 质控物 校准物 ICSH 组织凝血活 抗凝剂 真空采血管 批间
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