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朊病毒研究进展 被引量:2
1
作者 贾小明 许于飞 《畜牧与兽医》 北大核心 2002年第9期40-42,共3页
朊病毒 (Prion)是一类能引起人和动物的亚急性海绵样脑病的病原因子 ,它的化学本质是一种蛋白质侵染颗粒 ,具有不同于病毒的生物学性质与理化性质。细胞型朊病毒蛋白 (PrPC)经过折叠可转变为致病型朊病毒蛋白 (PrPSC)。目前人和大多数... 朊病毒 (Prion)是一类能引起人和动物的亚急性海绵样脑病的病原因子 ,它的化学本质是一种蛋白质侵染颗粒 ,具有不同于病毒的生物学性质与理化性质。细胞型朊病毒蛋白 (PrPC)经过折叠可转变为致病型朊病毒蛋白 (PrPSC)。目前人和大多数动物的PrP基因序列已经被测定 ,这也为朊病毒的研究提供了重要的信息。 展开更多
关键词 朊病毒 致病型朊病毒蛋白 PrP基因 酵母朊病毒
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定量研究菲啶对酵母朊病毒[PSI^+]的治愈作用 被引量:4
2
作者 钟正伟 王莉洁 +3 位作者 谢辉 李辉 何剑为 宋有涛 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期737-746,共10页
为系统研究菲啶对酵母朊病毒的治愈效果,借助表达融合蛋白GFP-Sup35p的酵母朊病毒模型(NGMC),引入半变性琼脂糖凝胶电泳技术和荧光漂白后恢复技术在蛋白和细胞水平定量分析了菲啶对酵母朊病毒的治愈效果。结果表明,蛋白和细胞水平采用... 为系统研究菲啶对酵母朊病毒的治愈效果,借助表达融合蛋白GFP-Sup35p的酵母朊病毒模型(NGMC),引入半变性琼脂糖凝胶电泳技术和荧光漂白后恢复技术在蛋白和细胞水平定量分析了菲啶对酵母朊病毒的治愈效果。结果表明,蛋白和细胞水平采用的定量分析方法能够精确定量菲啶对酵母朊病毒的治愈作用,菲啶作用酵母朊病毒[PSI+]1~5 d的治愈率分别为0%、0%、51.7%、87.5%和94.4%。另外,菲啶作用酵母朊病毒[PSI+]细胞1~2 d后出现的粉色菌落中朊病毒的聚集状态与[PSI+]相似,而3~5 d后出现的粉色菌落中朊病毒的状态与[psi-]相似。 展开更多
关键词 菲啶 酵母朊病毒 [PSI+] 定量 治愈
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基于酵母朊病毒[PSI^+]的两种模型改进研究
3
作者 钟正伟 《辽宁化工》 CAS 2013年第3期218-220,226,共4页
为改进基于酵母朊病毒[PSI+]的抗朊病毒药物筛选模型灵敏度和促朊病毒形成条件筛选模型准确度偏低的不足,采用表型分析法研究了盐酸胍、氯化镁对4种酵母朊病毒菌株的表型影响,结果表明:ERG6Δ酵母朊病毒[PSI+]菌株对盐酸胍最为敏感,SSB... 为改进基于酵母朊病毒[PSI+]的抗朊病毒药物筛选模型灵敏度和促朊病毒形成条件筛选模型准确度偏低的不足,采用表型分析法研究了盐酸胍、氯化镁对4种酵母朊病毒菌株的表型影响,结果表明:ERG6Δ酵母朊病毒[PSI+]菌株对盐酸胍最为敏感,SSBΔ酵母朊病毒[psi-]菌株对氯化镁最为敏感;ERG6Δ酵母朊病毒[PSI+]菌株适合构建高灵敏度抗朊病毒药物筛选模型,SSBΔ酵母朊病毒[psi-]菌株适合构建高准确度促朊病毒形成条件筛选模型。 展开更多
关键词 酵母朊病毒 [PSI+] 朊病毒药物 朊病毒形成 模型改进
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定量研究石斛醇提取物对酵母朊病毒的治愈作用 被引量:2
4
作者 刘宴村 李辉 +3 位作者 张艳 窦爽 张波 宋有涛 《生命科学研究》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期344-348,共5页
为研究石斛醇提取物的抗朊病毒作用,借助酵母朊病毒[PSI+]表型系统分析石斛醇提取物对酵母朊病毒[PSI+]表型的作用,引入半变性琼脂糖凝胶电泳技术在蛋白质水平分析石斛醇提取物对酵母朊病毒的治疗效果。结果显示,石斛醇提取物浓度在15 ... 为研究石斛醇提取物的抗朊病毒作用,借助酵母朊病毒[PSI+]表型系统分析石斛醇提取物对酵母朊病毒[PSI+]表型的作用,引入半变性琼脂糖凝胶电泳技术在蛋白质水平分析石斛醇提取物对酵母朊病毒的治疗效果。结果显示,石斛醇提取物浓度在15 g/L时,作用酵母朊病毒[PSI+]细胞5 d的治愈率为5%;并且石斛醇提取物浓度在5~20 g/L范围内时,药物剂量与酵母朊病毒[PSI+]表型治疗效果呈现较好正相关性。蛋白水平试验表明石斛醇提取物作用酵母朊病毒[PSI+]细胞5 d后红色菌落的朊病毒聚集体大小与[psi-]相似。 展开更多
关键词 石斛醇提取物 酵母朊病毒 [PSI+] 治愈
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一种半变性琼脂糖凝胶电泳技术的改良 被引量:2
5
作者 钟正伟 《广州化工》 CAS 2012年第12期77-78,92,共3页
建立一种经济快捷的利用半变性琼脂糖凝胶电泳技术分析酵母朊病毒迁移特性的方法,在蛋白样品制备过程中采用珠磨破碎法代替文献使用的昂贵的藤黄节杆菌酶酶解法破碎酵母细胞,使用TBE代替文献使用的TAE作为电泳缓冲液,并使用电湿转法代... 建立一种经济快捷的利用半变性琼脂糖凝胶电泳技术分析酵母朊病毒迁移特性的方法,在蛋白样品制备过程中采用珠磨破碎法代替文献使用的昂贵的藤黄节杆菌酶酶解法破碎酵母细胞,使用TBE代替文献使用的TAE作为电泳缓冲液,并使用电湿转法代替文献使用的毛细虹吸法转印蛋白。对酵母朊病毒[PSI+]的朊蛋白迁移特性分析结果显示,改良法不影响文献法的准确性,但降低了实验成本,缩短了实验时间。 展开更多
关键词 半变性琼脂糖凝胶电泳 酵母朊病毒 迁移 改良
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淫羊藿提取物对酵母朊病毒[PSI^+]治愈的影响 被引量:2
6
作者 李辉 卜祥龙 +3 位作者 窦爽 郭晏华 张波 宋有涛 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2013年第5期42-45,共4页
研究6种菊科中药对酵母朊病毒[PSI+]治愈效果。通过在培养基内加入适量浓度中药成分的方式,利用表型检测方法在细胞水平上检测中药对酵母朊病毒的治愈。淫羊藿醇提物对朊病毒[PSI+]最佳治愈浓度为0.097 5 g/mL,治愈率可达到3%,而水提物... 研究6种菊科中药对酵母朊病毒[PSI+]治愈效果。通过在培养基内加入适量浓度中药成分的方式,利用表型检测方法在细胞水平上检测中药对酵母朊病毒的治愈。淫羊藿醇提物对朊病毒[PSI+]最佳治愈浓度为0.097 5 g/mL,治愈率可达到3%,而水提物没有治愈作用。淫羊藿醇提物对酵母朊病毒有一定的治愈作用。 展开更多
关键词 淫羊藿 醇提物 酵母朊病毒 [PSI^+] 治愈
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酵母抗朊病毒药物筛选模型细胞培养条件优选
7
作者 李辉 王莹 +3 位作者 钟正伟 王莉洁 何剑为 宋有涛 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期376-378,共3页
目的探讨基于酵母的抗朊病毒药物筛选模型在初级筛选时的细胞培养最佳条件。方法通过表型分析的方法探讨了培养基pH值、初始菌液浓度、细胞生长时期3个因素对基于酵母的抗朊病毒药物筛选模型灵敏度的影响。结果培养基pH值能够影响酵母... 目的探讨基于酵母的抗朊病毒药物筛选模型在初级筛选时的细胞培养最佳条件。方法通过表型分析的方法探讨了培养基pH值、初始菌液浓度、细胞生长时期3个因素对基于酵母的抗朊病毒药物筛选模型灵敏度的影响。结果培养基pH值能够影响酵母朊病毒[psi-]细胞的颜色表型,pH>7.46时,[psi-]酵母菌落变为白色,但对[PSI+]的聚集状态不造成影响;菌液初始浓度为A600nm=0.02时,相对于A600nm=0.5、A600nm=0.2时的药物治愈率要高几倍到几十倍;处于对数生长期的[PSI+]酵母细胞对药物的敏感性较差,而处于延滞期和稳定期的[PSI+]酵母细胞对药物的敏感性较强。结论酵母抗朊病毒药物筛选模型在初级筛选时的细胞培养最佳条件为pH<6,菌液初始浓度为A600nm=0.02,处于稳定期的酵母细胞。 展开更多
关键词 酵母朊病毒 朊病毒药物 PH 菌液初始浓度 生长时期
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钩藤提取物对感染朊病毒酵母模型的治疗作用 被引量:1
8
作者 张艳 刘宴村 宋有涛 《动物医学进展》 北大核心 2015年第9期84-87,共4页
通过已建立的抗朊病毒药物筛选模型,研究钩藤提物对酵母朊病毒细胞模型的治疗作用。通过在液体培养基中加入钩藤提取物的方式,利用酵母朊病毒[PSI+]表型分析方法和蛋白水平的半变性琼脂糖凝胶电泳技术分析钩藤提取物抗朊病毒的效果。结... 通过已建立的抗朊病毒药物筛选模型,研究钩藤提物对酵母朊病毒细胞模型的治疗作用。通过在液体培养基中加入钩藤提取物的方式,利用酵母朊病毒[PSI+]表型分析方法和蛋白水平的半变性琼脂糖凝胶电泳技术分析钩藤提取物抗朊病毒的效果。结果显示,钩藤醇提取物对感染朊病毒酵母[PSI+]作用5d后的治愈率为5%,而水提取物没有治疗效果。蛋白水平检测进一步说明钩藤醇提取物具有抗酵母朊病毒的作用。 展开更多
关键词 酵母朊病毒 钩藤醇提取物 钩藤水提物 治疗
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羟基脲抑制盐酸胍对于酵母朊病毒[PSI^+]的治愈 被引量:1
9
作者 王莉洁 沈曼莉 +1 位作者 李辉 宋有涛 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期561-565,共5页
目的研究细胞分裂与盐酸胍作用下酵母朊病毒[PSI+]聚集体解聚的关系。方法本研究借助重组表达Sup35p-GFP的菌株,采用表型分析方法与半变性琼脂糖凝胶电泳(SDD-AGE)结合蛋白质免疫印迹技术,分析羟基脲抑制细胞分裂情况下对盐酸胍解聚酵... 目的研究细胞分裂与盐酸胍作用下酵母朊病毒[PSI+]聚集体解聚的关系。方法本研究借助重组表达Sup35p-GFP的菌株,采用表型分析方法与半变性琼脂糖凝胶电泳(SDD-AGE)结合蛋白质免疫印迹技术,分析羟基脲抑制细胞分裂情况下对盐酸胍解聚酵母朊病毒聚集体的影响。结果羟基脲抑制细胞分裂的情况下,表型分析的数据显示盐酸胍不能治愈酵母朊病毒[PSI+],蛋白水平的实验数据证实了这一结果,并发现羟基脲的存在使得盐酸胍解聚酵母朊病毒聚集体的能力明显下降。结论暗示着盐酸胍治愈朊病毒[PSI+]是需要细胞进行分裂的。 展开更多
关键词 酵母朊病毒 [PSI+] 盐酸胍 羟基脲 细胞分裂
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中药水提物对酵母朊病毒[PSI^+]的治愈作用
10
作者 钟正伟 王冠蕾 谢辉 《承德石油高等专科学校学报》 CAS 2012年第3期51-55,共5页
筛选能够治愈酵母朊病毒[PSI+]的中药,为开发抗朊病毒中药制剂提供依据。采用试管二倍稀释法测定18种中药水提物的最小抑菌浓度,液体治愈法研究中药水提物对酵母朊病毒[PSI+]的治愈作用。结果表明:白芨、五味子水提物质量浓度为125 mg/m... 筛选能够治愈酵母朊病毒[PSI+]的中药,为开发抗朊病毒中药制剂提供依据。采用试管二倍稀释法测定18种中药水提物的最小抑菌浓度,液体治愈法研究中药水提物对酵母朊病毒[PSI+]的治愈作用。结果表明:白芨、五味子水提物质量浓度为125 mg/mL时,对酵母朊病毒[PSI+]均有治愈作用,同时,白芨、五味子水提物作用酵母朊病毒[PSI+]5d的治愈率分别为67.5%和33.2%。 展开更多
关键词 酵母朊病毒 [PSI+] 治愈 中药水提物
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NaF、NaBr、NaI对酵母朊病毒[PSI^+]形成的影响
11
作者 李辉 张波 +1 位作者 窦爽 宋有涛 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2014年第1期12-16,共5页
为研究NaF、NaBr、NaI对酵母朊病毒[PSI+]形成的影响,利用表达融合蛋白GFP-Sup35p酵母朊病毒模型,借助半变性琼脂糖凝胶电泳技术,结合免疫印迹方法在蛋白水平上定量分析NaF、NaBr、NaI对酵母朊病毒[PSI+]形成的影响。结果显示,在细胞表... 为研究NaF、NaBr、NaI对酵母朊病毒[PSI+]形成的影响,利用表达融合蛋白GFP-Sup35p酵母朊病毒模型,借助半变性琼脂糖凝胶电泳技术,结合免疫印迹方法在蛋白水平上定量分析NaF、NaBr、NaI对酵母朊病毒[PSI+]形成的影响。结果显示,在细胞表型方面NaF、NaBr诱导出酵母朊病毒[PSI+],且所需浓度分别为0.02、1.0 mol/L;NaI在浓度为0.25 mol/L可以诱导出[PSI+]经盐酸胍治愈后的酵母朊病毒[psi-]。在蛋白水平,NaF、NaBr、NaI盐作用后的[psi-]细胞内Sup35p并没有形成聚集体。 展开更多
关键词 酵母朊病毒 [PSI+] 聚集体
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一种研究酵母朊病毒流动性的荧光漂白后恢复技术的改良
12
作者 钟正伟 《辽宁化工》 CAS 2012年第3期220-221,228,共3页
为建立一种经济简便的利用荧光漂白后恢复技术检测酵母朊病毒流动性的方法,在参照文献荧光漂白后恢复技术研究酵母朊病毒流动性的基础上,借助表达融合蛋白GFP-Sup35p的酵母朊病毒模型(NGMC),对文献法的样片制备过程进行改良。采用YPAD... 为建立一种经济简便的利用荧光漂白后恢复技术检测酵母朊病毒流动性的方法,在参照文献荧光漂白后恢复技术研究酵母朊病毒流动性的基础上,借助表达融合蛋白GFP-Sup35p的酵母朊病毒模型(NGMC),对文献法的样片制备过程进行改良。采用YPAD培养基和价格低廉的普通载玻分别替代文献使用的培养酵母的合成培养基和固定酵母的腔室载玻片。结果表明:改良法在保持文献法准确性的基础上,操作更为简单,极大地降低了实验成本。 展开更多
关键词 荧光漂白后恢复 酵母朊病毒 流动性 改良
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基于酵母的高灵敏度抗朊病毒药物筛选模型建立及应用
13
作者 谢辉 钟正伟 王冠蕾 《黑龙江大学自然科学学报》 CAS 北大核心 2013年第1期113-118,共6页
建立一种高灵敏度抗朊病毒药物筛选模型研究传统中药的抗朊病毒作用。通过比较五种酵母朊病毒[PSI+]菌株在表型、生长特性和对抗朊病毒化合物敏感性方面的差异,优选出高药物敏感性酵母朊病毒[PSI+]菌株,并引入半变性琼脂糖凝胶电泳技术... 建立一种高灵敏度抗朊病毒药物筛选模型研究传统中药的抗朊病毒作用。通过比较五种酵母朊病毒[PSI+]菌株在表型、生长特性和对抗朊病毒化合物敏感性方面的差异,优选出高药物敏感性酵母朊病毒[PSI+]菌株,并引入半变性琼脂糖凝胶电泳技术建立了一种高灵敏度抗朊病毒药物筛选模型;利用该模型研究了20种中药水提物治愈朊病毒的活性,发现淫羊藿和两面针水提物浓度为0.1 g.mL-1时,对酵母朊病毒[PSI+]的5 d治愈率分别为12.5%±3.5%和56.2%±9.1%,蛋白水平实验表明淫羊藿和两面针水提物具有治愈酵母朊病毒[PSI+]作用。 展开更多
关键词 酵母朊病毒 [PSI+] 高灵敏度 药物筛选模型 中药水提物
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两面针水提物对酵母朊病毒作用研究 被引量:2
14
作者 钟正伟 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2013年第4期133-136,共4页
为研究两面针水提物的抗朊病毒作用,借助酵母朊病毒[PSI+]表型系统分析两面针水提物对[PSI+]表型的治疗作用,引入半变性琼脂糖凝胶电泳技术在蛋白水平分析两面针水提物对酵母朊病毒的治疗效果。结果显示,两面针水提物浓度为125mg/mL时,... 为研究两面针水提物的抗朊病毒作用,借助酵母朊病毒[PSI+]表型系统分析两面针水提物对[PSI+]表型的治疗作用,引入半变性琼脂糖凝胶电泳技术在蛋白水平分析两面针水提物对酵母朊病毒的治疗效果。结果显示,两面针水提物浓度为125mg/mL时,作用酵母朊病毒[PSI+]细胞5d的治愈率为90.2%;并且两面针水提物浓度在25mg/mL~125mg/mL范围内,药物剂量与酵母朊病毒[PSI+]表型治疗效果呈现较好正相关性。蛋白水平试验表明两面针水提物作用酵母朊病毒[PSI+]细胞5d后红色菌落的朊病毒聚集体大小与[psi-]相似。 展开更多
关键词 酵母朊病毒[PSI+] 两面针水提物 治疗
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白术水提物对酵母朊病毒[PSI^+]治愈作用的定量研究
15
作者 李辉 窦爽 +3 位作者 张波 卜祥龙 钟正伟 宋有涛 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期1024-1027,共4页
目的定量研究白术水提物对酵母朊病毒[PSI+]的治愈作用。方法首先用含白术水提物的培养基培养酵母朊病毒[PSI+]阳性菌株,初步评价白术的治愈作用。然后在细胞水平借助影印培养法和蛋白水平上使用半变性琼脂糖凝胶电泳结合蛋白免疫技术... 目的定量研究白术水提物对酵母朊病毒[PSI+]的治愈作用。方法首先用含白术水提物的培养基培养酵母朊病毒[PSI+]阳性菌株,初步评价白术的治愈作用。然后在细胞水平借助影印培养法和蛋白水平上使用半变性琼脂糖凝胶电泳结合蛋白免疫技术进一步验证白术水提物对酵母朊病毒[PSI+]的治愈作用。结果白术水提物作用酵母朊病毒[PSI+]5d后的治愈率为6%。结论白术水提物对酵母朊病毒[PSI+]有一定的治愈作用。 展开更多
关键词 酵母朊病毒[PSI^+] 白术水提物 半变性琼脂糖凝胶电泳
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朊病毒假说及酵母菌朊病毒假说 被引量:2
16
作者 李华玲 《医学综述》 2001年第3期131-133,共3页
关键词 朊病毒假说 生物分子医学 酵母朊病毒假说
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