目的:利用小干扰RNA(si RNA)技术干扰酰基辅酶A-胆固醇酰基转移酶1(ACAT1)基因在人结肠癌HT29细胞中的表达,观察ACAT1基因表达下降对于人结肠癌HT29细胞增殖和侵袭迁移能力的影响,了解ACAT1在结肠癌发生发展中的作用。方法:通过脂质体Hi...目的:利用小干扰RNA(si RNA)技术干扰酰基辅酶A-胆固醇酰基转移酶1(ACAT1)基因在人结肠癌HT29细胞中的表达,观察ACAT1基因表达下降对于人结肠癌HT29细胞增殖和侵袭迁移能力的影响,了解ACAT1在结肠癌发生发展中的作用。方法:通过脂质体Hiper Fect将ACAT1 si RNA转染至人结肠癌HT29细胞中干扰ACAT1基因的表达,利用Real time PCR检测转染前后ACAT1基因表达的变化,利用ACAT1基因干扰前后的HT29细胞,采用CFSE染色法检测HT29细胞增殖能力的变化;Transwell小室法检测HT29细胞侵袭和迁移能力的变化。结果:ACAT1 si RNA转染HT29细胞后ACAT1 m RNA的表达明显下降,ACAT1 si RNA转染后的HT29细胞与转染前比较,增殖及侵袭转移的能力均受到明显抑制,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:ACAT1基因干扰使HT29细胞的增殖减慢,侵袭迁移能力降低,为结肠癌治疗提供新的靶点。展开更多
文摘目的探讨香青兰Dracocephalum moldovica总黄酮对小鼠腹腔巨噬细胞源性泡沫细胞形成的影响及其可能机制。方法以氧化低密度脂蛋白(Ox-LDL)诱导小鼠腹腔巨噬细胞建立泡沫细胞的模型,并以不同质量浓度的香青兰总黄酮进行干预。分别采用油红O染色观察泡沫细胞,荧光分光光度法检测细胞内胆固醇酯的量,荧光定量PCR法检测细胞内酰基辅酶A-胆固醇酰基转移酶1(ACAT-1)m RNA的表达水平,流式细胞术检测细胞表面清道夫受体A(SR-A)的表达水平。结果香青兰总黄酮能显著抑制Ox-LDL诱导的泡沫细胞的形成、细胞内胆固醇酯的积聚、细胞中ACAT-1 m RNA及细胞表面SR-A分子的表达水平,且呈一定的剂量依赖性。结论香青兰总黄酮通过抑制巨噬细胞源性泡沫细胞的形成,可能是其治疗动脉粥样硬化的药效机制之一。
文摘目的:利用小干扰RNA(si RNA)技术干扰酰基辅酶A-胆固醇酰基转移酶1(ACAT1)基因在人结肠癌HT29细胞中的表达,观察ACAT1基因表达下降对于人结肠癌HT29细胞增殖和侵袭迁移能力的影响,了解ACAT1在结肠癌发生发展中的作用。方法:通过脂质体Hiper Fect将ACAT1 si RNA转染至人结肠癌HT29细胞中干扰ACAT1基因的表达,利用Real time PCR检测转染前后ACAT1基因表达的变化,利用ACAT1基因干扰前后的HT29细胞,采用CFSE染色法检测HT29细胞增殖能力的变化;Transwell小室法检测HT29细胞侵袭和迁移能力的变化。结果:ACAT1 si RNA转染HT29细胞后ACAT1 m RNA的表达明显下降,ACAT1 si RNA转染后的HT29细胞与转染前比较,增殖及侵袭转移的能力均受到明显抑制,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:ACAT1基因干扰使HT29细胞的增殖减慢,侵袭迁移能力降低,为结肠癌治疗提供新的靶点。
