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高质量水稻基因组文库构建的策略和方法
被引量：
5
1
作者
梁卫红
刘一鸣
吴乃虎
《河南师范大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第2期177-179,共3页
采用改良的CTAB法提取水稻基因组DNA,经Sau3AI部分酶切的产物经透析袋电洗脱法回收、正丁醇浓缩后,以1∶1的摩尔数比和载体臂连接.包装后测定,文库滴度达到106 pfu/ml;随机酶切重组克隆显示,插入片段达到预期的15～23 kb之间,提示该方...
采用改良的CTAB法提取水稻基因组DNA,经Sau3AI部分酶切的产物经透析袋电洗脱法回收、正丁醇浓缩后,以1∶1的摩尔数比和载体臂连接.包装后测定,文库滴度达到106 pfu/ml;随机酶切重组克隆显示,插入片段达到预期的15～23 kb之间,提示该方法适于植物材料高质量基因组文库的构建,有利于分离完整的基因序列及其调控区.
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关键词
基因组DNA
部分
酶切
电洗脱
滴度
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职称材料
一种用于形成1kb阶梯DNA分子量标准载体的构建
被引量：
3
2
作者
李文成
杨博
王永华
《湖北农业科学》
北大核心
2009年第1期1-3,共3页
构建了2个用于产生DNA分子量标准的载体pTLK3和pTLK5。pTLK3由1.0,2.0,4.0和5.0 kb 4个部分组成,经ApaI完全酶切后再用EcoRI部分酶切,可以得到1.0～8.0 kb以及12.0 kb的条带。pTLK5由3.0,0.5和1.5 kb 3个部分组成,用EcoRI完全酶切将得到...
构建了2个用于产生DNA分子量标准的载体pTLK3和pTLK5。pTLK3由1.0,2.0,4.0和5.0 kb 4个部分组成,经ApaI完全酶切后再用EcoRI部分酶切,可以得到1.0～8.0 kb以及12.0 kb的条带。pTLK5由3.0,0.5和1.5 kb 3个部分组成,用EcoRI完全酶切将得到3.0,0.5和1.5 kb 3种大小的片段。将pTLK3和pTLK5的酶切产物混合,得到1.0 kb阶梯的DNA分子量标准,其条带分别为0.5、1.0、1.5、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0、8.0、12.0 kb的条带。此分子量标准适合0.5～8.0 kb的DNA的分子量测定,适用范围较广。
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关键词
DNA分子量标准
载体
部分
酶切
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职称材料
汉坦病毒基因组G1区部分酶切位点的研究
被引量：
1
3
作者
熊莉娟
罗端德
+1 位作者
曾令兰
蔡淑清
《中国病毒学》
CAS
CSCD
2002年第3期195-197,共3页
用分型RT -PCR方法对 34份武汉地区肾综合征出血热患者外周血标本扩增 ,扩增的目的片段为汉坦病毒M片段G1基因部分序列 ,应用HincⅡ和SacI两种限制性内切酶消化扩增产物 ,可将汉坦病毒区分为HTN型和SEO型 ,结果与分型PCR有很高的一致性 。
关键词
汉坦病毒
基因组
G1区
部分
酶切
位点
病毒分型
限制性内切酶
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职称材料
苏云金芽孢杆菌gerA操纵子在芽孢萌发中的作用
被引量：
2
4
作者
梁亮
盖玉玲
+1 位作者
胡坤
刘钢
《微生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第3期281-286,共6页
芽孢萌发的营养诱导剂通过与特异的萌发受体结合激活下游的萌发过程,从而使芽孢经过一系列的遗传变化及生化反应恢复营养生长。从苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)中克隆到一个与枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)gerA操纵子和蜡...
芽孢萌发的营养诱导剂通过与特异的萌发受体结合激活下游的萌发过程,从而使芽孢经过一系列的遗传变化及生化反应恢复营养生长。从苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)中克隆到一个与枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)gerA操纵子和蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)gerR操纵子同源的gerA操纵子。苏云金芽孢杆菌gerA操纵子含有3个开放读码框:gerAA、gerAC和gerAB,该操纵子在产孢起始3个小时后开始转录。gerA的破坏阻断了L-丙氨酸诱导的芽孢萌发并且延迟了肌苷诱导的萌发。在L-丙氨酸诱导芽孢萌发的过程中D-环丝氨酸能够提高芽孢的萌发率。
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关键词
苏云金芽孢杆菌
部分
基因组
酶切
文库
gerA操纵子
RT-PCR
芽孢萌发
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职称材料
苏云金芽孢杆菌芽孢萌发相关基因gerM的克隆及功能研究
被引量：
1
5
作者
严晓华
刘钢
谭华荣
《微生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第1期17-21,共5页
依照蜡状芽孢杆菌gerM基因的保守序列设计引物,从苏云金芽孢杆菌中扩增出640bp的DNA片段。以此为探针,从苏云金芽孢杆菌部分基因组酶切文库中成功地克隆到了一个4·5kb的DNA片段。序列分析表明,该片段包含一个完整的开放阅读框,其...
依照蜡状芽孢杆菌gerM基因的保守序列设计引物,从苏云金芽孢杆菌中扩增出640bp的DNA片段。以此为探针,从苏云金芽孢杆菌部分基因组酶切文库中成功地克隆到了一个4·5kb的DNA片段。序列分析表明,该片段包含一个完整的开放阅读框,其预测的编码产物与枯草芽孢杆菌GerM蛋白具有很高的同源性,将该基因命名为gerM。RT-PCR分析表明,gerM基因仅在芽孢形成的过程中表达。通过同源重组的策略构建了gerM基因的阻断突变株。研究表明,gerM基因的破坏影响苏云金芽孢杆菌芽孢萌发的速率和比例。
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关键词
苏云金芽孢杆菌
部分
基因组
酶切
文库
gerM基因
RT-PCR
芽孢萌发
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职称材料
题名
高质量水稻基因组文库构建的策略和方法
被引量：
5
1
作者
梁卫红
刘一鸣
吴乃虎
机构
河南师范大学生命科学学院
中国科学院遗传与发育生物学研究所
出处
《河南师范大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第2期177-179,共3页
基金
国家重大基础研究发展计划(2001CB1088)
国家"863"计划(2002AA224061)
+1 种基金
河南省高校青年骨干教师资助计划(521697)
河南师范大学青年科学基金(521911)
文摘
采用改良的CTAB法提取水稻基因组DNA,经Sau3AI部分酶切的产物经透析袋电洗脱法回收、正丁醇浓缩后,以1∶1的摩尔数比和载体臂连接.包装后测定,文库滴度达到106 pfu/ml;随机酶切重组克隆显示,插入片段达到预期的15～23 kb之间,提示该方法适于植物材料高质量基因组文库的构建,有利于分离完整的基因序列及其调控区.
关键词
基因组DNA
部分
酶切
电洗脱
滴度
Keywords
genomic DNA
partial-digestiont electric elutiont titer
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
一种用于形成1kb阶梯DNA分子量标准载体的构建
被引量：
3
2
作者
李文成
杨博
王永华
机构
华南理工大学生物科学与工程学院
华南理工大学轻工与食品工程学院
出处
《湖北农业科学》
北大核心
2009年第1期1-3,共3页
基金
国家自然科学基金项目(30700021)
中国博士后科学基金项目(20070410239)
文摘
构建了2个用于产生DNA分子量标准的载体pTLK3和pTLK5。pTLK3由1.0,2.0,4.0和5.0 kb 4个部分组成,经ApaI完全酶切后再用EcoRI部分酶切,可以得到1.0～8.0 kb以及12.0 kb的条带。pTLK5由3.0,0.5和1.5 kb 3个部分组成,用EcoRI完全酶切将得到3.0,0.5和1.5 kb 3种大小的片段。将pTLK3和pTLK5的酶切产物混合,得到1.0 kb阶梯的DNA分子量标准,其条带分别为0.5、1.0、1.5、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0、8.0、12.0 kb的条带。此分子量标准适合0.5～8.0 kb的DNA的分子量测定,适用范围较广。
关键词
DNA分子量标准
载体
部分
酶切
Keywords
DNA molecular weight standards
vector
partial digestion
分类号
Q523 [生物学—生物化学]
O631.61 [理学—高分子化学]
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职称材料
题名
汉坦病毒基因组G1区部分酶切位点的研究
被引量：
1
3
作者
熊莉娟
罗端德
曾令兰
蔡淑清
机构
华中科技大学同济医学院附属协和医院传染科
出处
《中国病毒学》
CAS
CSCD
2002年第3期195-197,共3页
基金
国家卫生部立项课题 (96 2 116)
文摘
用分型RT -PCR方法对 34份武汉地区肾综合征出血热患者外周血标本扩增 ,扩增的目的片段为汉坦病毒M片段G1基因部分序列 ,应用HincⅡ和SacI两种限制性内切酶消化扩增产物 ,可将汉坦病毒区分为HTN型和SEO型 ,结果与分型PCR有很高的一致性 。
关键词
汉坦病毒
基因组
G1区
部分
酶切
位点
病毒分型
限制性内切酶
Keywords
Hantavirus
Virus typing
RFLP
分类号
R512.8 [医药卫生—内科学]
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职称材料
题名
苏云金芽孢杆菌gerA操纵子在芽孢萌发中的作用
被引量：
2
4
作者
梁亮
盖玉玲
胡坤
刘钢
机构
中国科学院微生物研究所
中国科学院研究生院
出处
《微生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第3期281-286,共6页
基金
国家自然科学基金(30430010)~~
文摘
芽孢萌发的营养诱导剂通过与特异的萌发受体结合激活下游的萌发过程,从而使芽孢经过一系列的遗传变化及生化反应恢复营养生长。从苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)中克隆到一个与枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)gerA操纵子和蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)gerR操纵子同源的gerA操纵子。苏云金芽孢杆菌gerA操纵子含有3个开放读码框:gerAA、gerAC和gerAB,该操纵子在产孢起始3个小时后开始转录。gerA的破坏阻断了L-丙氨酸诱导的芽孢萌发并且延迟了肌苷诱导的萌发。在L-丙氨酸诱导芽孢萌发的过程中D-环丝氨酸能够提高芽孢的萌发率。
关键词
苏云金芽孢杆菌
部分
基因组
酶切
文库
gerA操纵子
RT-PCR
芽孢萌发
Keywords
Bacillus thuringiensis
partial DNA library
gerA gene
RT-PCR
spore germination
分类号
Q93 [生物学—微生物学]
下载PDF
职称材料
题名
苏云金芽孢杆菌芽孢萌发相关基因gerM的克隆及功能研究
被引量：
1
5
作者
严晓华
刘钢
谭华荣
机构
中国科学院微生物研究所微生物遗传与代谢工程研究中心
出处
《微生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第1期17-21,共5页
基金
国家重大基础研究(973)资助项目(2002CB513207)~~
文摘
依照蜡状芽孢杆菌gerM基因的保守序列设计引物,从苏云金芽孢杆菌中扩增出640bp的DNA片段。以此为探针,从苏云金芽孢杆菌部分基因组酶切文库中成功地克隆到了一个4·5kb的DNA片段。序列分析表明,该片段包含一个完整的开放阅读框,其预测的编码产物与枯草芽孢杆菌GerM蛋白具有很高的同源性,将该基因命名为gerM。RT-PCR分析表明,gerM基因仅在芽孢形成的过程中表达。通过同源重组的策略构建了gerM基因的阻断突变株。研究表明,gerM基因的破坏影响苏云金芽孢杆菌芽孢萌发的速率和比例。
关键词
苏云金芽孢杆菌
部分
基因组
酶切
文库
gerM基因
RT-PCR
芽孢萌发
Keywords
Bacillus thuringiensis
Partial DNA library
gerM gene
RT-PCR
Spore germination
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
高质量水稻基因组文库构建的策略和方法
梁卫红
刘一鸣
吴乃虎
《河南师范大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2006
5
下载PDF
职称材料
2
一种用于形成1kb阶梯DNA分子量标准载体的构建
李文成
杨博
王永华
《湖北农业科学》
北大核心
2009
3
下载PDF
职称材料
3
汉坦病毒基因组G1区部分酶切位点的研究
熊莉娟
罗端德
曾令兰
蔡淑清
《中国病毒学》
CAS
CSCD
2002
1
下载PDF
职称材料
4
苏云金芽孢杆菌gerA操纵子在芽孢萌发中的作用
梁亮
盖玉玲
胡坤
刘钢
《微生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008
2
下载PDF
职称材料
5
苏云金芽孢杆菌芽孢萌发相关基因gerM的克隆及功能研究
严晓华
刘钢
谭华荣
《微生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007
1
下载PDF
职称材料
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