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连接斑珠蛋白对放疗抵抗子宫颈癌细胞影响
1
作者 陈笑 黄巧丽 +1 位作者 夏念 陈亦乐 《肿瘤研究与临床》 CAS 2020年第5期309-312,共4页
目的探讨连接斑珠蛋白(JUP)体外对放疗抵抗子宫颈癌细胞的影响。方法对子宫颈癌细胞株SiHa、HeLa、Me-180采用单次剂量1 Gy、每周3次的60Co放射线照射,诱导细胞耐放疗性,得到获得性放疗抵抗细胞株SiHaIR、HeLaIR、Me-180IR,以相应野生... 目的探讨连接斑珠蛋白(JUP)体外对放疗抵抗子宫颈癌细胞的影响。方法对子宫颈癌细胞株SiHa、HeLa、Me-180采用单次剂量1 Gy、每周3次的60Co放射线照射,诱导细胞耐放疗性,得到获得性放疗抵抗细胞株SiHaIR、HeLaIR、Me-180IR,以相应野生型细胞株作为对照组。分别采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)、蛋白质印迹法检测6组细胞中JUP mRNA及蛋白的表达情况,采用细胞划痕实验检测细胞迁移能力。结果SiHa组和SiHaIR组、HeLa组和HeLaIR组、Me-180组和Me-180IR组JUP mRNA相对表达量分别为1.74±0.06和0.48±0.02(t=12.327,P<0.01)、1.77±0.06和0.28±0.03(t=14.698,P<0.01)、2.28±0.06和0.78±0.01(t=7.367,P<0.01),JUP蛋白的相对表达量分别为2.36±0.03和0.55±0.02(t=9.245,P<0.01)、2.13±0.02和0.23±0.01(t=15.643,P<0.01)、1.96±0.05和0.73±0.02(t=5.826,P<0.01)。划痕后培养12、24、48 h时,3组放疗抵抗细胞迁移率均较相应野生型细胞增加,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论JUP在放疗抵抗子宫颈癌细胞株的表达量低于野生型细胞株,且放疗抵抗细胞的迁移能力增强。 展开更多
关键词 宫颈肿瘤 连接斑珠蛋白 辐射耐受性
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连接桥粒斑珠蛋白通过调节HIF2α并降低其稳定性抑制肾细胞癌的肿瘤发生
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作者 陈科 曾瑾 +13 位作者 孙旖 欧阳为 余淦 周辉 张杨军 姚炜敏 肖巍 胡峻珲 邢金春 肖克峰 Lily Wu 陈志强 叶章群 徐华 《癌症》 CAS 2022年第1期18-35,共18页
背景与目的低氧诱导因子(hypoxia-inducible factor 2α,HIF2α)活性增高常见于肾透明细胞癌(clear cell renal cell carcinoma,ccRCC)的进展过程。HIF2α在ccRCC中的功能和作用机制仍不清楚。本研究阐释了连结桥粒斑珠蛋白(junction pl... 背景与目的低氧诱导因子(hypoxia-inducible factor 2α,HIF2α)活性增高常见于肾透明细胞癌(clear cell renal cell carcinoma,ccRCC)的进展过程。HIF2α在ccRCC中的功能和作用机制仍不清楚。本研究阐释了连结桥粒斑珠蛋白(junction plakoglobin,JUP)和HIF2α在ccRCC中的作用。方法采用亲和纯化联合质谱(affinity purification and mass spectrometry,AP-MS)、谷胱甘肽-S-转移酶(glutathione-s-transferase,GST)沉降和免疫共沉淀(co-immunoprecipitation,Co-IP)法筛选和鉴定出可与HIF2α相互作用的蛋白质。采用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)和Western blotting法检测人ccRCC样本中JUP的表达情况。采用荧光素酶报告基因、染色质免疫沉淀(chromatin immunoprecipitation,ChIP)、环己酰亚胺追踪实验、泛素化检测研究JUP对HIF2α活性的调节。采用细胞计数试剂盒-8(Cell Counting Kit-8,CCK-8)检测、集落形成实验、transwell迁移实验、异种移植瘤模型研究JUP敲减或过表达对肾癌细胞致瘤活性的影响。结果我们的研究发现,JUP是一种新的HIF2α结合蛋白,通过将VHL(von Hippel-Lindau,VHL)和组蛋白去乙酰化酶1/2(histone deacetylases 1/2,HDAC1/2)招募到HIF2α并调节其稳定性和转录活性来发挥重要作用。在体内和体外实验中,敲减JUP可促进肾细胞癌的致瘤活性;相反,JUP过表达则可抑制肾细胞癌的致瘤活性。另外,在ccRCC临床样本中JUP低表达,而且其低表达与低氧评分升高及预后更差相关。结论本研究表明JUP在ccRCC进展过程中通过调节HIF2α信号通路发挥重要作用,JUP可作为一个潜在的治疗靶点。 展开更多
关键词 肾细胞癌 连接桥粒斑珠蛋白 低氧诱导因子2α 转录活性 泛素化
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连接桥粒斑珠蛋白抑制神经母细胞瘤Wnt/β-catenin信号通路活化和增殖、侵袭作用及机制
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作者 李聃 普佳睿 +2 位作者 梅红 童强松 郑丽端 《中华转移性肿瘤杂志》 2021年第4期311-317,共7页
目的探讨连接桥粒斑珠蛋白(JUP)在神经母细胞瘤增殖、侵袭中发挥的作用及其机制。方法检测神经母细胞瘤临床组织标本及细胞系中的JUP蛋白水平。过表达及敲低JUP前后采用蛋白印迹法、实时定量PCR检测基因表达变化,运用MTT比色分析、基质... 目的探讨连接桥粒斑珠蛋白(JUP)在神经母细胞瘤增殖、侵袭中发挥的作用及其机制。方法检测神经母细胞瘤临床组织标本及细胞系中的JUP蛋白水平。过表达及敲低JUP前后采用蛋白印迹法、实时定量PCR检测基因表达变化,运用MTT比色分析、基质胶侵袭实验观测瘤细胞的增殖、侵袭能力变化;运用免疫共沉淀、荧光素酶报告基因方法观测蛋白相互作用及Wnt/β-catenin信号通路活化改变。结果神经母细胞瘤临床组织标本中JUP低表达,与神经母细胞瘤的不良预后相关。MYCN扩增型神经母细胞瘤细胞中JUP水平更低(P<0.05);过表达JUP对神经母细胞瘤细胞的增殖、侵袭起到抑制作用(均P<0.05);JUP能与β-catenin相结合,减少β-catenin进入细胞核,抑制Wnt/β-catenin信号通路活性。结论JUP在神经母细胞瘤中通过与β-catenin相互作用并抑制其核转位,降低Wnt/β-catenin信号通路活性,抑制神经母细胞瘤的增殖、侵袭。 展开更多
关键词 连接桥粒斑珠蛋白 Wnt/β-catenin信号 肿瘤侵袭 神经母细胞瘤
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