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早期胃癌血清特异标志物过氧化物酶4核酸适配体的筛选、鉴定与应用 被引量：6
1
作者 杜振亚 贾茹涵 +4 位作者 李文慧 杨静 习静 石大林 韩跃武 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第10期1065-1072,共8页
胃癌是世界上死亡率第三的重大疾病,而在早期阶段却有着良好的治愈率和生存率。因此,找到针对早期胃癌的特异性标志物从而提高早期胃癌的检出率,是目前亟待解决的问题。在本实验室的早期研究中,发现过氧化物酶4(peroxiredoxin-4,PRDX4)... 胃癌是世界上死亡率第三的重大疾病,而在早期阶段却有着良好的治愈率和生存率。因此,找到针对早期胃癌的特异性标志物从而提高早期胃癌的检出率,是目前亟待解决的问题。在本实验室的早期研究中,发现过氧化物酶4(peroxiredoxin-4,PRDX4)有极大的潜能作为早期胃癌的特异性标志物,并且由于蛋白质结构的特殊性,能够分泌至血清中,为早期胃癌的无创化诊断提供了可能。本文为寻找血清中PRDX4蛋白的特异性适配体,通过消减-SELEX方法找到9种适配体。经特异性和亲和力分析后,证实其中Ap-EGACS-11在9种适配体中具有最高的特异性和亲和力。随后在适配体的验证研究中证实,相对于进展期胃癌病人血清、结直肠癌病人血清和正常人血清,Ap-EGACS-11对早期胃癌病人血清的检出率最高。该结果表明,PRDX4具有早期胃癌特异性血清标志物的潜能,且Ap-EGACS-11可直接作为早期胃癌的检测试剂。 展开更多
关键词 过氧化物酶4 早期胃癌 适配体 生物标志物
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新早期胃癌标志物PRDX4通过清除ROS促进胃癌的发生发展（英文） 被引量：5
2
作者 贾茹涵 石大林 +3 位作者 李文慧 杨静 张艳敏 韩跃武 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期320-331,共12页
胃癌是全球第四大最常见的癌症,也是全球癌症中引起死亡的第二大原因。为了降低胃癌的死亡率,目前亟需解决的问题是发现新的早期胃癌特异性的标志物,提高早期胃癌的检出率,从而从根本上解决胃癌死亡率高的问题。实验室前期研究发现过氧... 胃癌是全球第四大最常见的癌症,也是全球癌症中引起死亡的第二大原因。为了降低胃癌的死亡率,目前亟需解决的问题是发现新的早期胃癌特异性的标志物,提高早期胃癌的检出率,从而从根本上解决胃癌死亡率高的问题。实验室前期研究发现过氧化物酶4 (Peroxiredoxin 4,PRDX4)具有早期胃癌标志物的潜能,文中通过建立恶性转化模型及转化细胞过表达等方法,研究PRDX4在转化细胞中的作用。结果显示PRDX4通过减少转化细胞中活性氧(Reactive oxygen species,ROS)含量,使细胞处在利于生长增殖的微环境中,从而促进细胞发生恶性转化,即PRDX4通过清除ROS促进胃癌的发生发展。 展开更多
关键词 过氧化物酶4 早期胃癌 活性氧 生物标志物
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PRDX4蛋白在肾透明细胞癌中表达下调与恶性程度增高相关 被引量：2
3
作者 陈壮飞 肖耀军 +3 位作者 黄泽海 陈彤 秦自科 郑少斌 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期1304-1312,共9页
目的:筛选在肾透明细胞癌(clear cell renal cell carcinoma,ccRCC)中差异表达的蛋白,并探讨其在肾癌中的临床意义。方法:采用荧光差异双向凝胶电泳联合质谱技术筛选15例ccRCC及癌旁组织中差异表达的蛋白;蛋白质印迹法在45例ccRCC及癌... 目的:筛选在肾透明细胞癌(clear cell renal cell carcinoma,ccRCC)中差异表达的蛋白,并探讨其在肾癌中的临床意义。方法:采用荧光差异双向凝胶电泳联合质谱技术筛选15例ccRCC及癌旁组织中差异表达的蛋白;蛋白质印迹法在45例ccRCC及癌旁组织中检测筛选获得的差异蛋白的表达水平;免疫组织化学法检测152例ccRCC和40例癌旁组织中差异蛋白的表达情况。分析差异表达蛋白与ccRCC患者临床病理特征及预后的关系。结果:荧光差异双向凝胶电泳联合质谱技术筛选结果显示,ccRCC与其癌旁组织中过氧化物酶4(peroxiredoxin 4,PRDX4)蛋白的表达水平差异明显,与癌旁组织相比,PRDX4在肾癌组织中的表达水平明显下调(P<0.05),癌旁组织中PRDX4蛋白的表达水平是其在癌组织中的3.979倍。蛋白质印迹法检测结果提示,PRDX4在ccRCC中的表达水平较其在癌旁组织中的表达水平明显降低(t=12.810,P<0.001)。免疫组织化学法检测结果显示,PRDX4在ccRCC组织中阳性表达率为36.8%(56/152),较癌旁组织的87.5%(35/40)明显降低(χ2=32.594,P<0.001);PRDX4与ccRCC病理分级(χ2=6.802,P=0.033)和远处转移(χ2=3.925,P=0.048)有关,且与病理分级(γ=-0.211,P=0.009)及远处转移(γ=-0.161,P=0.048)呈负相关。PRDX4的表达与性别、年龄、T分期、淋巴结转移及复发无关(P值均>0.05)。PRDX4表达阳性组和表达阴性组5年生存率分别为75.3%和62.7%,差异无统计学意义(P=0.862)。结论:PRDX4作为ccRCC差异表达蛋白可能参与了肾癌的发生和发展,其表达下调与ccRCC恶性程度增高相关。 展开更多
关键词 肾肿瘤 过氧化物酶4 蛋白质组学 预后
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牦牛PRDX4基因的分子特征分析及其在输卵管和卵巢中的表达
4
作者 卢国杰 潘阳阳 +7 位作者 韩小红 王萌 蔺蕙 崔燕 张虔 蔡得琪 康彩彩 余四九 《中国兽医科学》 CSCD 北大核心 2021年第8期1062-1072,共11页
为研究牦牛过氧化物还原酶4(PRDX4)基因在牦牛卵巢和输卵管中的作用,采取繁殖周期不同阶段牦牛卵巢和输卵管样品,采用IHC技术,进行PRDX4蛋白表达的定位检测;进行牦牛PRDX4基因的克隆,并分析其分子特征;采用RT-qPCR技术,检测m RNA在牦牛... 为研究牦牛过氧化物还原酶4(PRDX4)基因在牦牛卵巢和输卵管中的作用,采取繁殖周期不同阶段牦牛卵巢和输卵管样品,采用IHC技术,进行PRDX4蛋白表达的定位检测;进行牦牛PRDX4基因的克隆,并分析其分子特征;采用RT-qPCR技术,检测m RNA在牦牛卵巢和输卵管中的相对表达量;采用Western-blot技术,检测PRDX4蛋白在牦牛卵巢和输卵管中的相对表达量。IHC结果显示,在繁殖周期不同阶段牦牛卵巢中,PRDX4蛋白主要表达于颗粒细胞、卵巢体细胞和粒黄体细胞,且在妊娠期的染色强于黄体期和卵泡期;在繁殖周期不同阶段牦牛输卵管中,PRDX4蛋白主要表达于黏膜上皮细胞,且在卵泡期的染色强于黄体期和妊娠期。成功克隆出牦牛PRDX4基因的CDs区,其保守性较高,与家牛、印度牛、美洲狮及金钱豹等的同源性均在86%以上;分子特征分析结果显示,牦牛PRDX4蛋白的氨基酸数为227,分子式为C_(1146)H_(1854)N_(348)O_(317)S_(15),原子总数为3680,pI为10.58,分子质量为26.06 ku,且其主要分布于粒线体、细胞核、细胞质、细胞骨架,含量分别为69.6%、21.70%、4.30%、4.30%;该蛋白具有Sec/SPI信号肽,其二级结构由3种折叠方式构成,其中含有89个α-螺旋、31个延伸链、107个无规卷曲,占比分别为39.21%、13.66%、47.14%,且具有三级结构;该蛋白有18个丝氨酸磷酸化位点、13个苏氨酸磷酸化位点,且不存在蛋白结合位点、糖基化位点,具有可溶性,且有两个跨膜区。qRT-PCR结果显示,在繁殖周期不同阶段卵巢中,PRDX4基因在卵泡期和妊娠期的相对表达量均显著高于黄体期(P<0.05),且两者无显著差异(P>0.05);在繁殖周期不同阶段输卵管中,PRDX4基因的相对表达量不存在显著差异(P>0.05)。Western-blot结果显示,在繁殖周期不同阶段卵巢中,PRDX4蛋白在卵泡期显著高于黄体期和妊娠期(P<0.05),且在黄体期和妊娠期无显著差异(P>0.05);在繁殖周期不同阶段输卵� 展开更多
关键词 牦牛 过氧化物酶4 分子特征 相对表达
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敲低过氧化物酶4通过β-连环蛋白通路抑制胃癌细胞侵袭的实验研究
5
作者 张春艳 李海宁 +1 位作者 李小佩 朱丹 《解放军预防医学杂志》 CAS 2020年第5期91-94,共4页
目的探讨敲低过氧化物酶4(PRDX4)抑制胃癌细胞侵袭的作用及β-连环蛋白(β-catenin)通路机制。方法培养永分化胃上皮细胞系GES-1及胃癌细胞系BGC-823、SGC-7901、AGS并检测PRDX4的表达水平;SGC-7901细胞分为对照组、si-NC组、si-PRDX4组... 目的探讨敲低过氧化物酶4(PRDX4)抑制胃癌细胞侵袭的作用及β-连环蛋白(β-catenin)通路机制。方法培养永分化胃上皮细胞系GES-1及胃癌细胞系BGC-823、SGC-7901、AGS并检测PRDX4的表达水平;SGC-7901细胞分为对照组、si-NC组、si-PRDX4组、si-PRDX4+SKL2001组,western blot检测MMP2、N-cadherin、E-cadherin、β-catenin、TCF4的表达水平,Transwell检测细胞侵袭数目。结果与GES-1比较,胃癌细胞系BGC-823、SGC-7901、AGS中PRDX4的表达上调(P<0.05)且SGC-7901细胞中PRDX4表达上调最显著;与对照组及si-NC组比较,si-PRDX4组SGC-7901细胞的侵袭数目减少,细胞中MMP2、N-cadherin、β-catenin、TCF4的表达下调,E-cadherin的表达上调(P<0.05);与si-PRDX4组比较,si-PRDX4+SKL2001组SGC-7901细胞的侵袭数目增加,细胞中MMP2、N-cadherin、β-catenin、TCF4的表达上调,E-cadherin的表达下调(P<0.05)。结论敲低PRDX4能够抑制胃癌细胞侵袭,抑制β-catenin通路是可能的分子机制。 展开更多
关键词 胃癌 侵袭 过氧化物酶4 Β-连环蛋白 胃癌细胞系SGC-7901
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铁死亡参与油酸诱导的小鼠急性肺损伤（英文） 被引量：21
6
作者 周航 李凤 +8 位作者 牛建一 钟伟勇 汤敏誉 林栋 崔洪珲 黄学涵 陈莹莹 王红艳 涂永生 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期689-697,共9页
本研究旨在探讨铁死亡在油酸(oleic acid, OA)致急性肺损伤(acute lung injury, ALI)小鼠模型中的作用。小鼠尾静脉注射纯OA制备ALI模型,以肺组织病理学评分、肺湿干重比、支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid, BALF)蛋白含... 本研究旨在探讨铁死亡在油酸(oleic acid, OA)致急性肺损伤(acute lung injury, ALI)小鼠模型中的作用。小鼠尾静脉注射纯OA制备ALI模型,以肺组织病理学评分、肺湿干重比、支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid, BALF)蛋白含量作为ALI的评价指标,用试剂盒检测肺组织的铁浓度、谷胱甘肽(glutathione, GSH)和丙二醛(malondialdehyde, MDA)含量,用透射电子显微镜观察肺细胞的超微结构,用定量PCR (q-PCR)检测肺组织中前列腺素内过氧化物合酶2 (prostaglandin-endoperoxide synthase 2, PTGS2) mRNA表达,用Western blot测定肺组织谷胱甘肽过氧化物酶4 (glutathione peroxidase 4, GPX4)、铁蛋白和转铁蛋白受体1 (transferrin receptor 1, TfR1)的蛋白表达水平。结果表明,OA组小鼠肺组织病理评分、肺湿干重比和BALF中蛋白均高于对照组。OA组小鼠肺细胞线粒体缩小,线粒体膜破裂。与对照组相比,OA组PTGS2 mRNA表达增加7倍。OA组小鼠肺组织出现铁过载、GSH含量减少和MDA累积。与对照组相比,OA组小鼠肺组织GPX4和铁蛋白表达水平下调。以上结果提示,铁死亡可能在ALI发病机制中发挥作用,这为治疗ALI的新药开发提供了新的角度。 展开更多
关键词 铁死亡 油酸 急性肺损伤 谷胱甘肽 谷胱甘肽过氧化物酶4 铁
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五味子乙素调控Nrf2/HO-1/GPX4铁死亡途径减轻糖尿病小鼠心肌损伤的机制研究 被引量：19
7
作者 杨素清 何天乐 +1 位作者 苏军华 王伟 《中药材》 CAS 北大核心 2022年第7期1705-1713,共9页
目的:探讨五味子乙素对糖尿病(DM)小鼠心肌损伤的影响及机制。方法:小鼠采用腹腔注射链脲佐菌素(STZ,50 mg/kg)诱导建立DM模型,造模后分为模型组、五味子乙素低剂量(50 mg/kg)组、五味子乙素高剂量(100 mg/kg)组、五味子乙素(100 mg/kg)... 目的:探讨五味子乙素对糖尿病(DM)小鼠心肌损伤的影响及机制。方法:小鼠采用腹腔注射链脲佐菌素(STZ,50 mg/kg)诱导建立DM模型,造模后分为模型组、五味子乙素低剂量(50 mg/kg)组、五味子乙素高剂量(100 mg/kg)组、五味子乙素(100 mg/kg)+ML385(30 mg/kg)组,每组18只;另取18只小鼠为正常对照组。五味子乙素各剂量组小鼠分别给予相应剂量的五味子乙素灌胃,五味子乙素+ML385组小鼠在给予100 mg/kg五味子乙素灌胃的同时腹腔注射ML38530 mg/kg,正常对照组与模型组小鼠灌胃相应体积生理盐水,1次/d,连续给药4 w后,使用超声心动图分析小鼠心功能;检测小鼠FBG、体质量、心脏质量,计算心脏指数,检测小鼠血清LDH、CK-MB、cTnⅠ水平;检测小鼠心肌组织SOD、GSH-Px、MDA、Fe^(2+)水平;二氢乙锭(DHE)荧光法检测心肌组织ROS水平;HE和Masson染色检测心肌组织病理学变化,并计算CVF;TUNEL染色检测心肌细胞凋亡;RT-qPCR和Western Blot检测心肌Nrf2、HO-1、GPX4 mRNA和蛋白表达。结果:与正常对照组比较,模型组小鼠LVEF、LVFS、体质量显著降低,LVEDD、LVESD、FBG、心脏质量、心脏指数、CVF、心肌细胞凋亡率及血清LDH、CK-MB、cTnⅠ水平和心肌组织MDA、ROS、Fe^(2+)水平显著升高,心肌组织SOD、GSH-Px水平和Nrf2、HO-1、GPX4 mRNA及蛋白表达显著降低(P<0.05),心肌组织损伤及胶原纤维沉积明显。与模型组比较,五味子乙素低、高剂量组上述指标均显著改善(P<0.05),心肌组织损伤及胶原纤维沉积明显减轻。Nrf2抑制剂ML385能显著逆转五味子乙素对DM小鼠心肌损伤的保护作用。结论:五味子乙素可抑制铁死亡进而减轻DM小鼠心肌损伤,其作用机制可能与激活Nrf2/HO-1/GPX4信号通路有关。 展开更多
关键词 五味子乙素 糖尿病心肌病 铁死亡 氧化应激 核因子E2相关因子2 血红素加氧酶-1 谷胱甘肽过氧化物酶4
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右美托咪定通过抑制铁死亡发挥对小鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用 被引量：18
8
作者 胡淼 门运政 +4 位作者 陈蕾 黄杰 段方方 张雨鑫 董淑英 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期600-609,共10页
目的:脑卒中是危害人类生命健康的重大疾病之一,其中缺血性脑卒中的发病率占脑卒中的70%以上。缺血性脑卒中引起的脑缺血再灌注(ischemia reperfusion,IR)损伤的发生机制极为复杂。右美托咪定作为临床上常用的麻醉辅助用药,其在对抗脑I... 目的:脑卒中是危害人类生命健康的重大疾病之一,其中缺血性脑卒中的发病率占脑卒中的70%以上。缺血性脑卒中引起的脑缺血再灌注(ischemia reperfusion,IR)损伤的发生机制极为复杂。右美托咪定作为临床上常用的麻醉辅助用药,其在对抗脑IR损伤中的作用近年来被广泛研究,但具体作用机制尚未阐明。因此,本研究基于铁死亡探讨右美托咪定对抗小鼠脑IR损伤的作用及机制。方法:采用改良线栓法制备小鼠大脑中动脉栓塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型。将雄性ICR小鼠随机分成:假手术(sham)组、IR组、IR+D1组(给予IR和25μg/kg的右美托咪定)、IR+D2组(给予IR和50μg/kg的右美托咪定)、IR+D3组(给予IR和100μg/kg的右美托咪定)、IR+D2+ML385组(给予IR、50μg/kg的右美托咪定和30 mg/kg的ML385)。采用Longa五分法进行小鼠神经行为学评分;2,3,5-三苯基四唑氮(triphenyltetrazolium chloride,TTC)染色法检测小鼠脑梗死体积;蛋白质印迹法检测小鼠脑组织中核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)、转铁蛋白受体1(transferrin receptor 1,TFR1)、谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)及胱氨酸/谷氨酸逆向转运蛋白溶质载体家族7成员11(solute carrier family 7 member 11,SLC7A11)蛋白质的表达水平。使用透射电镜观察线粒体形态。检测小鼠脑组织中MDA、GSH和Fe^(2+)的含量。结果:与sham组相比,IR组小鼠神经行为学评分、脑梗死体积、MDA和Fe^(2+)含量明显增加,TFR1蛋白质表达水平明显升高,GSH含量、SLC7A11和GPX4蛋白质表达水平显著降低(均P<0.05),脑组织神经细胞中的线粒体皱缩,嵴减少,膜密度增加;使用右美托咪定预处理后,相较于IR组,小鼠神经学行为评分、MDA和Fe^(2+)含量、TFR1蛋白质表达水平显著降低,脑梗死体积明显缩小,GSH含量、SLC7A11和GPX4蛋白质表达水平显著升高(均P<0.05),线粒体受损情况显著改� 展开更多
关键词 右美托咪定 脑缺血再灌注 铁死亡 核因子E2相关因子2 谷胱甘肽过氧化物酶4 胱氨酸/谷氨酸逆向转运蛋白溶质载体家族7成员11
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细胞铁死亡发生机制的研究进展 被引量：18
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作者 梅胜兰 夏中元 +1 位作者 孟庆涛 周金剑 《医学综述》 2020年第21期4207-4211,4218,共6页
铁死亡是一种全新的细胞死亡方式,具有独特的形态结构、生物化学及遗传学表现,其本质是铁离子依赖的脂质过氧化产物超量蓄积引起的以线粒体改变为主的氧化损伤。铁离子代谢失衡,诱发机体大量活性氧类与脂质过氧化物的产生,导致细胞铁死... 铁死亡是一种全新的细胞死亡方式,具有独特的形态结构、生物化学及遗传学表现,其本质是铁离子依赖的脂质过氧化产物超量蓄积引起的以线粒体改变为主的氧化损伤。铁离子代谢失衡,诱发机体大量活性氧类与脂质过氧化物的产生,导致细胞铁死亡;而核转录因子红系2相关因子2/谷胱甘肽过氧化物酶4抑制氧化应激是铁死亡的关键信号通路;胱氨酸/谷氨酸反向转运体促进谷胱甘肽的合成;电压依赖性阴离子通道稳定线粒体代谢及离子平衡;p53上调溶质载体家族7成员11的表达,抑制胱氨酸进入细胞内,促进铁死亡。铁死亡与肿瘤、神经退行性疾病、缺血再灌注损伤等有关,但铁离子在细胞铁死亡中的具体作用以及铁死亡与其他细胞死亡方式之间是否存在潜在的相关性需进一步探讨。 展开更多
关键词 铁死亡 铁离子 核转录因子红系2相关因子2/谷胱甘肽过氧化物酶4信号通路 胱氨酸/谷氨酸反向转运体 电压依赖性阴离子通道 p53
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黄精多糖对糖尿病肾病大鼠铁死亡的影响 被引量：14
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作者 刘赫 李函舟 +3 位作者 张辉 吕树泉 苏秀海 潘红梅 《中国中医药信息杂志》 CAS CSCD 2023年第8期126-130,共5页
目的观察黄精多糖对糖尿病肾病(DN)大鼠铁死亡的影响,研究其可能的作用机制。方法50只雄性SD大鼠随机选取10只作为正常组,另40只喂食高糖高脂饲料联合腹腔注射链脲佐菌素建立DN模型,将成模大鼠随机分为模型组、阳性药组(厄贝沙坦30 mg/... 目的观察黄精多糖对糖尿病肾病(DN)大鼠铁死亡的影响,研究其可能的作用机制。方法50只雄性SD大鼠随机选取10只作为正常组,另40只喂食高糖高脂饲料联合腹腔注射链脲佐菌素建立DN模型,将成模大鼠随机分为模型组、阳性药组(厄贝沙坦30 mg/kg)和黄精多糖低、高剂量组(200、800 mg/kg),每组10只,各给药组分别予相应药物灌胃,连续4周。检测大鼠肾功能指标[血肌酐(SCr)、血尿素氮(BUN)、24 h尿蛋白],HE染色观察肾组织病理变化,ELISA检测肾组织丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)和总铁离子含量,qPCR和Western blot检测肾组织转铁蛋白(Transferrin)、铁蛋白重链1(FTH1)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)mRNA和蛋白表达。结果与正常组比较,模型组大鼠体质量、血糖明显升高,SCr、BUN及24 h尿蛋白含量明显升高,肾小管局灶变性,肾小球基底膜增厚、系膜增生,肾组织MDA和总铁离子含量明显增加,GSH含量明显减少,Transferrin、FTH1 mRNA和蛋白表达明显升高,GPX4 mRNA和蛋白表达明显降低(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,黄精多糖高剂量组小鼠SCr、BUN及24 h尿蛋白含量明显降低,肾组织病变明显减轻,MDA和总铁离子含量明显减少,GSH含量明显增加,Transferrin、FTH1 mRNA和蛋白表达明显降低,GPX4 mRNA和蛋白表达明显升高(P<0.05,P<0.01)。结论黄精多糖对DN大鼠具有治疗作用,其机制与调节铁死亡相关因子Transferrin、FTH1、GPX4表达,调控铁死亡有关。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 黄精多糖 铁死亡 转铁蛋白 铁蛋白重链1 谷胱甘肽过氧化物酶4 大鼠
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蛇床子素通过Nrf2-Gpx4铁死亡途径对肺炎支原体肺炎大鼠肺损伤的改善作用 被引量：11
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作者 赵丽娜 葛国岚 +1 位作者 李靖 韩雪 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期48-54,共7页
目的探讨蛇床子素对肺炎支原体肺炎大鼠肺损伤的影响及其机制。方法大鼠随机分为正常组、模型组、蛇床子素低剂量组(20 mg/kg)、蛇床子素高剂量组(40 mg/kg)、蛇床子素+ML385组(蛇床子素40 mg/kg+Nrf2抑制剂ML38530 mg/kg),每组12只。... 目的探讨蛇床子素对肺炎支原体肺炎大鼠肺损伤的影响及其机制。方法大鼠随机分为正常组、模型组、蛇床子素低剂量组(20 mg/kg)、蛇床子素高剂量组(40 mg/kg)、蛇床子素+ML385组(蛇床子素40 mg/kg+Nrf2抑制剂ML38530 mg/kg),每组12只。除正常组外,其余大鼠采用经鼻反复感染肺炎支原体构建肺炎模型,给予相应药物干预后,ELISA法检测血清MP-IgM、IL-6、TNF-α水平,HE染色观察肺组织病理学变化,检测肺组织MDA、GSH、Fe^(2+)水平和SOD活性,TUNEL法检测肺组织细胞凋亡率,RT-qPCR和Western blot法检测肺组织Nrf2、SLC7A11、Gpx4 mRNA和蛋白表达。结果与正常组比较,模型组大鼠血清MP-IgM、IL-6、TNF-α水平和肺组织炎症浸润评分、MDA、Fe^(2+)水平、细胞凋亡率均升高(P<0.05),肺组织GSH水平、SOD活性、Nrf2、SLC7A11、Gpx4 mRNA和蛋白表达均降低(P<0.05);与模型组比较,蛇床子素各剂量组大鼠血清MP-IgM、IL-6、TNF-α水平和肺组织炎症浸润评分、MDA、Fe^(2+)水平、细胞凋亡率均降低(P<0.05),肺组织GSH水平、SOD活性、Nrf2、SLC7A11、Gpx4 mRNA和蛋白表达均升高(P<0.05);ML385可减弱蛇床子素对肺炎支原体肺炎大鼠肺损伤的保护作用(P<0.05)。结论蛇床子素可改善肺炎支原体肺炎大鼠肺损伤,其作用机制可能与激活Nrf2-Gpx4信号通路,抑制铁死亡有关。 展开更多
关键词 蛇床子素 肺炎支原体肺炎 肺损伤 铁死亡 核因子E2相关因子2(Nrf2) 谷胱甘肽过氧化物酶4(Gpx4)
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转铁蛋白受体对铁过载所致大鼠心肌细胞铁死亡的作用及其机制 被引量：12
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作者 杨岚婷 徐涛 +3 位作者 杨福情 肖丹丹 宋林 王建勋 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期781-788,共8页
目的观察铁过载对小鼠心脏功能及大鼠心肌细胞铁死亡的影响,探讨铁转运蛋白受体(TFRC)在大鼠心肌细胞铁死亡中的作用机制。方法C57BL/6J小鼠14只,随机分为正常饮食组和高铁饮食组各7只,分别给予常规饲料和高铁饲料喂食8周后,采用小动物... 目的观察铁过载对小鼠心脏功能及大鼠心肌细胞铁死亡的影响,探讨铁转运蛋白受体(TFRC)在大鼠心肌细胞铁死亡中的作用机制。方法C57BL/6J小鼠14只,随机分为正常饮食组和高铁饮食组各7只,分别给予常规饲料和高铁饲料喂食8周后,采用小动物超声检测其心脏功能,酶标仪检测心脏组织丙二醛(MDA)含量,Masson染色检测心脏纤维化情况。通过碘化丙啶(PI)染色和亲脂荧光染料(C11)染色检测细胞死亡率和脂质过氧化物含量,观察柠檬酸铁铵(AIC)和铁死亡抑制剂Ferrostatin-1(Fer-1)对H9C2大鼠心肌细胞的作用。AIC和铁死亡诱导剂Erastin处理H9C2细胞后,Western blotting检测TFRC、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)蛋白表达水平,qRT-PCR检测mRNA表达水平;相同条件下,小干扰RNA敲低TFRC的表达,检测H9C2细胞死亡率和脂质过氧化物含量。结果与正常饮食组比较,高铁饮食组小鼠心室间隔厚度(IVSd)、左心室后壁厚度(LVPWd)、心脏组织MDA相对含量和胶原沉积相对面积均明显增大[(0.96±0.12)mm vs.(0.73±0.09)mm,(1.18±0.28)mm vs.(0.84±0.07)mm,2.08±0.80 vs.1.00±0.50,4.04±0.60 vs.1.00±0.21,P<0.05],但左室射血分数和左心室缩短分数差异无统计学意义(P>0.05)。经500μmol/L AIC处理后,H9C2细胞死亡率和脂质过氧化物含量明显升高(33.73%±1.20%vs.2.30%±1.73%,5.36±0.06 vs.1.00±0.19,P<0.05),加用Fer-1处理后H9C2细胞死亡率和脂质过氧化物含量明显降低(19.63%±0.81%vs.33.73%±1.2%,2.03±0.12 vs.5.36±0.06,P<0.05);500μmol/L AIC处理后,H9C2细胞TFRC表达量明显升高(P<0.05),TFRC敲低后,脂质过氧化物含量和细胞死亡率明显下降(P<0.05)。Erastin诱导下H9C2细胞TFRC和GPX4蛋白表达量分别明显上调和下调(P<0.05);TFRC敲低后,细胞死亡率明显下降(P<0.05)。结论高铁饮食可诱导大鼠心肌细胞发生铁死亡损伤,TFRC参与了高铁诱导的心肌细胞铁死亡并可能成为心脏疾病治疗研究的新靶点。 展开更多
关键词 铁过载 心肌细胞 铁死亡 转铁蛋白受体 谷胱甘肽过氧化物酶4
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铁死亡与炎症性疾病的研究现状 被引量：11
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作者 李贝 田首元 +2 位作者 郭志佳 姚豆 张晋毓 《医学综述》 CAS 2021年第7期1302-1306,共5页
铁死亡是一种以细胞内铁依赖的脂质过氧化为特征的非凋亡细胞死亡方式。铁死亡在形态学、遗传学和生物学等方面均不同于其他类型的细胞死亡,与肿瘤、缺血再灌注损伤、脑卒中等密切相关。而谷胱甘肽过氧化物酶4可抑制氧化应激,是调节铁... 铁死亡是一种以细胞内铁依赖的脂质过氧化为特征的非凋亡细胞死亡方式。铁死亡在形态学、遗传学和生物学等方面均不同于其他类型的细胞死亡,与肿瘤、缺血再灌注损伤、脑卒中等密切相关。而谷胱甘肽过氧化物酶4可抑制氧化应激,是调节铁死亡的关键因子。炎症性疾病的病理过程与细胞内铁代谢异常、谷胱甘肽代谢耗竭、脂质过氧化物蓄积等密切相关,故调节铁死亡通路中的调控因子可以加速或抑制炎症性疾病的病程进展,但铁死亡与炎症性疾病之间潜在的相关性未来需进一步探讨。 展开更多
关键词 炎症性疾病 铁死亡 脂质过氧化物 谷胱甘肽过氧化物酶4
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铁死亡抑制蛋白1在人类疾病中的作用机制研究进展 被引量：11
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作者 陆会平 党裔武 陈罡 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第7期731-736,共6页
铁死亡抑制蛋白1(FSP1)是新近被证实的铁死亡抑制因子,与乳腺癌、卵巢癌、肺癌、肝细胞癌、黑色素瘤、淋巴瘤、白血病、铜耐受、重症急性胰腺炎、糖尿病等疾病的发生发展密切相关。有研究发现,FSP1基于其氨基酸系列C末端片段、核易位、... 铁死亡抑制蛋白1(FSP1)是新近被证实的铁死亡抑制因子,与乳腺癌、卵巢癌、肺癌、肝细胞癌、黑色素瘤、淋巴瘤、白血病、铜耐受、重症急性胰腺炎、糖尿病等疾病的发生发展密切相关。有研究发现,FSP1基于其氨基酸系列C末端片段、核易位、过表达等因素诱导非caspase依赖性的细胞凋亡,并可通过FSP1-CoQ_(10)-NAD(P)H途径、平行于经典的谷胱甘肽(GSH)-GPX4途径使细胞免于铁死亡,在细胞生命活动中发挥"双刃剑"的作用。该文综述目前FSP1在人类疾病中作用机制的研究进展,以期为疾病防治提供新的靶标。 展开更多
关键词 铁死亡抑制蛋白1 凋亡诱导因子线粒体相关2 谷胱甘肽过氧化物酶4 铁死亡
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双氢青蒿素诱导肿瘤细胞铁死亡及其机制研究 被引量：10
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作者 费伟东 叶轶青 +4 位作者 陈玥 吴晓东 宋倩倩 姚瑶 郑彩虹 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2020年第13期3473-3481,共9页
目的阐明双氢青蒿素(DHA)诱导肿瘤细胞铁死亡的作用及其机制。方法利用3,3′,5,5′-四甲基联苯胺(TMB)检测DHA与FeSO4体外芬顿样(Fenton)反应生成氧自由基(·OH)的能力;MTT法检测DHA对人肝癌HepG2细胞的毒性(包括FeSO4与去铁胺预处... 目的阐明双氢青蒿素(DHA)诱导肿瘤细胞铁死亡的作用及其机制。方法利用3,3′,5,5′-四甲基联苯胺(TMB)检测DHA与FeSO4体外芬顿样(Fenton)反应生成氧自由基(·OH)的能力;MTT法检测DHA对人肝癌HepG2细胞的毒性(包括FeSO4与去铁胺预处理组)。MTT法考察谷胱甘肽(GSH)与铁死亡抑制剂(Fer-1)对DHA细胞毒性的影响;采用DCFH-DA染料考察DHA(包括FeSO4预处理组)诱导的细胞内活性氧的生成能力;采用C11-BODIPY581/591与DiO分别考察DHA(包括FeSO4预处理组)对细胞内脂质过氧化物生成能力以及细胞膜结构的影响;利用谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX-4)试剂盒测定DHA(包括FeSO4预处理组)对HepG2细胞内GPX-4活性的影响。结果 Fe2+能够催化DHA发生芬顿样反应并生成·OH;DHA的半数抑制浓度(IC50)为(39.96±8.78)μmol/L,FeSO4与去铁胺分别能够增加或者降低DHA的细胞毒性;DHA处理后细胞内活性氧含量与脂质过氧化物含量升高,细胞形态变大,细胞膜呈散点状分布并呈现解离状态。FeSO4预处理组与DHA组相比较进一步增加细胞内活性氧含量与脂质过氧化物含量,并且细胞膜形态完全破坏。FeSO4能够增强DHA对GPX-4活性的抑制作用。结论 DHA通过芬顿样反应升高细胞内活性氧而最终诱导肿瘤细胞铁死亡。另外,外源性铁可以加速DHA发生芬顿样反应进而加速肿瘤细胞铁死亡的发生与发展。 展开更多
关键词 双氢青蒿素 铁死亡 芬顿样反应 氧自由基 肿瘤细胞 外源性铁 谷胱甘肽过氧化物酶4
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木犀草素调控Nrf2-Gpx4介导铁死亡途径抑制Ang Ⅱ诱导心肌细胞肥大 被引量：10
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作者 马春剑 马晓静 +3 位作者 鲍海咏 韩梅 翟红林 卢彭晨 《中药材》 CAS 北大核心 2022年第11期2731-2736,共6页
目的:探究木犀草素对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导下心肌细胞肥大的影响及分子机制。方法:体外培养大鼠心肌细胞H9c2,MTT法检测木犀草素对AngⅡ诱导下心肌细胞活力的影响,以筛选木犀草素的实验浓度。将H9c2细胞分为6组:正常对照组、模型组... 目的:探究木犀草素对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导下心肌细胞肥大的影响及分子机制。方法:体外培养大鼠心肌细胞H9c2,MTT法检测木犀草素对AngⅡ诱导下心肌细胞活力的影响,以筛选木犀草素的实验浓度。将H9c2细胞分为6组:正常对照组、模型组、木犀草素25μmol/L组、木犀草素50μmol/L组、Nrf2抑制剂brusatol(100 nmol/L)组、木犀草素50μmol/L+brusatol组,根据分组给予相应的药物预处理,再用AngⅡ诱导建立心肌细胞肥大模型。AngⅡ处理48 h后,Texas Red^(TM)-X鬼笔环肽免疫荧光染色检测各组细胞表面积;RT-qPCR检测各组细胞中肥大相关基因(ANP、BNP、NFATc1)的mRNA表达;试剂盒检测各组细胞中MDA、GSH、SOD、Fe^(2+)水平,DCFH-DA荧光探针法检测各组细胞中ROS含量;Western Blot检测各组细胞核Nrf2、HO-1、Gpx4、xCT蛋白表达。结果:木犀草素50μmol/L对AngⅡ处理的细胞活力无明显影响,经100μmol/L木犀草素处理的细胞活力显著降低(P<0.05),故采用25、50μmol/L木犀草素研究其抗心肌细胞肥大作用。与正常对照组比较,模型组心肌细胞表面积、ROS荧光强度、MDA、Fe^(2+)水平及ANP、BNP、NFATc1 mRNA表达显著升高,细胞中SOD、GSH水平及核Nrf2、Gpx4、xCT、HO-1蛋白表达显著降低(P<0.05)。与模型组比较,木犀草素25、50μmol/L组心肌细胞表面积、ROS荧光强度、MDA、Fe^(2+)水平及ANP、BNP、NFATc1 mRNA表达显著降低,细胞中SOD、GSH水平及核Nrf2、Gpx4、xCT、HO-1蛋白表达显著升高(P<0.05)。Brusatol可逆转木犀草素的作用(P<0.05)。结论:木犀草素可抑制氧化应激,减轻AngⅡ诱导的H9c2心肌细胞肥大,其作用机制可能与增强Nrf2的核转录,激活Nrf2/Gpx4通路,抑制铁死亡有关。 展开更多
关键词 木犀草素 心肌细胞肥大 血管紧张素Ⅱ 铁死亡 核因子E2相关因子2 谷胱甘肽过氧化物酶4
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有氧运动对高脂膳食小鼠心肌损伤中Nrf2/GPX4/Ferroptosis通路的作用 被引量：9
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作者 王海涛 杨雯茜 刘玉倩 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期143-148,共6页
目的:探讨核因子E2相关因子2(Nrf 2)激活谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)抑制铁死亡(Ferroptosis)的通路在有氧运动预防高脂膳食小鼠心肌损伤中的保护作用。方法:40只5周龄SPF级C57BL/6雄性小鼠随机分为安静对照组(NC)、运动组(NE)、高脂组(... 目的:探讨核因子E2相关因子2(Nrf 2)激活谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)抑制铁死亡(Ferroptosis)的通路在有氧运动预防高脂膳食小鼠心肌损伤中的保护作用。方法:40只5周龄SPF级C57BL/6雄性小鼠随机分为安静对照组(NC)、运动组(NE)、高脂组(HC)和高脂+运动组(HE,高脂与跑台运动同时开始),每组10只。高脂膳食采用60%Kcal SPF级高脂模型饲料喂养,自由进食。有氧运动采用递增负荷跑台运动,每周5 d, 60 min/d,速度从13 m/min开始,每两周速度递增1 m/min。14周后取心肌和血液。HE染色观察心肌组织结构变化。Western blot检测心肌Nrf2/GPX4/Ferroptosis相关蛋白表达。分光光度法测定心肌过氧化物浓度和抗氧化酶活性。ELISA法检测心肌线粒体8-OHdG和血清胰岛素水平。结果:与对照组相比,高脂组的心肌纤维间隙脂质集聚增加,FBG和FINS显著增加,而ISI显著下降(P<0.01);与高脂组相比,高脂运动组的心肌纤维间隙脂质集聚减少,T-AOC、T-SOD、GSH活性显著增强,心肌线粒体8-OHdG和心肌铁含量降低(P<0.01),FPN1、FTH1、GPX4、GLUT1和细胞核内Nrf2显著升高(P<0.01)。结论:有氧运动可促进小鼠心肌Nrf2转位入核增强GPX4表达,抑制心肌Ferroptosis发生,同时促进心肌抗氧化酶活性,抑制心肌线粒体过氧化损伤。 展开更多
关键词 谷胱甘肽过氧化物酶4 有氧运动 铁死亡 心肌 小鼠
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普罗布考经Nrf2/Gpx4途径抑制铁死亡保护H9C2心肌细胞 被引量：8
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作者 钟桂玲 李文祥 +3 位作者 王贺 陈丰 李仕来 朱继金 《广西医科大学学报》 CAS 2021年第3期462-467,共6页
目的:研究普罗布考(probucol)对RSL3(一种铁死亡诱导剂)诱导的心肌细胞铁死亡的影响并探讨其可能机制。方法:使用大鼠胚胎心肌细胞H9C2进行体外实验,细胞经浓度梯度的RSL3处理12 h,采用CCK8法检测心肌细胞的存活率。随后细胞用RSL3(1.40... 目的:研究普罗布考(probucol)对RSL3(一种铁死亡诱导剂)诱导的心肌细胞铁死亡的影响并探讨其可能机制。方法:使用大鼠胚胎心肌细胞H9C2进行体外实验,细胞经浓度梯度的RSL3处理12 h,采用CCK8法检测心肌细胞的存活率。随后细胞用RSL3(1.406μmol/L)与浓度梯度的probucol共处理12 h,测得probucol的最佳干预浓度。然后将在对数生长期的细胞随机分成4组:对照组(DMSO组)、RSL3(1.406μmol/L)组、RSL3(1.406μmol/L)+probucol(50μmol/L)组、probucol(50μmol/L)组。光镜下观察细胞形态,Western blotting检测核因子E2相关因子2(Nrf2)、谷胱甘肽过氧化物酶4(Gpx4)蛋白的表达以及流式细胞术检测细胞内活性氧(ROS)的浓度。结果:H9C2心肌细胞经probucol治疗后细胞活性增强、形态改善。probucol剂量依赖性的抑制RSL3诱导的H9C2心肌细胞的铁死亡;RSL3的IC50为1.406μmol/L,probucol的最佳干预浓度为50μmol/L。DMSO组细胞形态呈梭型,长势良好,贴壁性好,折光度强;RSL3组的细胞皱缩、贴壁性差,折光度减弱;RSL3+probucol组细胞状态明显改善,与DMSO组细胞形态基本相似;与DMSO组相比,RSL3组细胞内ROS浓度升高,Nrf2及Gpx4蛋白的表达降低(P<0.05);与RSL3组相比,RSL3+probucol组Nrf2、Gpx4蛋白的表达水平显著升高,细胞内ROS浓度明显降低(P<0.05)。结论:probucol降低细胞内氧化应激抑制RSL3诱导的心肌细胞铁死亡,其机制可能为通过升高Nrf2蛋白和Gpx4蛋白的表达水平。 展开更多
关键词 普罗布考 H9C2心肌细胞 铁死亡 核因子E2相关因子2 谷胱甘肽过氧化物酶4
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铁死亡在肿瘤治疗中的研究进展 被引量：7
19
作者 程洁 陆军 王章桂 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 北大核心 2020年第19期1598-1604,共7页
目的铁死亡是不同于细胞自噬、凋亡和坏死的一种新的细胞死亡方式,与各种人类疾病密切相关。肿瘤的发病率逐年增加,但治疗效果并不乐观,因此应积极探索新的抗肿瘤治疗靶点。本研究总结了铁死亡在肿瘤中的作用机制以及化疗、放疗、分子... 目的铁死亡是不同于细胞自噬、凋亡和坏死的一种新的细胞死亡方式,与各种人类疾病密切相关。肿瘤的发病率逐年增加,但治疗效果并不乐观,因此应积极探索新的抗肿瘤治疗靶点。本研究总结了铁死亡在肿瘤中的作用机制以及化疗、放疗、分子靶向治疗、免疫治疗、中药抗肿瘤药物和纳米抗肿瘤药物中以铁死亡作为潜在治疗靶点的研究现状和进展。方法以"铁死亡、化疗、放疗、分子靶向治疗和免疫治疗"等作为关键词,应用PubMed及CNKI期刊全文数据库检索系统,检索2012-01-2020-01的相关文献。共检索到英文文献120篇,中文文献5篇。纳入标准:(1)铁死亡发现史;(2)铁死亡在肿瘤中的发生机制;(3)以铁死亡作为潜在靶点的抗肿瘤治疗方法。排除标准:(1)综述类文献;(2)研究资料缺失。根据纳入和排除标准,共纳入分析文献50篇。结果铁死亡作用机制与细胞内铁代谢水平、脂质过氧化物的含量和谷胱甘肽过氧化物酶4的活性有关。化疗、放疗、分子靶向治疗、免疫治疗、中药抗肿瘤药物和纳米抗肿瘤药物都以不同的方式诱导肿瘤细胞发生铁死亡。以铁死亡作为靶点的抗肿瘤治疗有助于克服肿瘤细胞对现有治疗方法的耐受,并可恢复对治疗药物的敏感性。结论铁死亡是有前景的抗肿瘤治疗靶点,深入研究其在肿瘤中的作用机制并将其应用于临床抗肿瘤治疗,有望为肿瘤患者提供新的治疗方案。 展开更多
关键词 铁死亡 铁代谢 脂质过氧化物 谷胱甘肽过氧化物酶4 肿瘤治疗 研究现状 综述文献
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冬虫夏草介导SLC7A11/GPX4/ACSL4轴抑制铁死亡抵抗放射性直肠炎研究 被引量：6
20
作者 窦婷 杨静雯 +3 位作者 杨昊 孙利平 耿宏伟 贺介甫 《药物评价研究》 CAS 2023年第9期1882-1888,共7页
目的探讨冬虫夏草治疗急性放射性直肠炎的疗效及可能的作用机制。方法将25只小鼠随机分为5组:对照组、模型组和冬虫夏草低、中、高剂量(0.25、0.50、1.00 g·kg^(-1))组,每组5只,除对照组外的4组小鼠予直线加速器6-MV的X射线行下腹... 目的探讨冬虫夏草治疗急性放射性直肠炎的疗效及可能的作用机制。方法将25只小鼠随机分为5组:对照组、模型组和冬虫夏草低、中、高剂量(0.25、0.50、1.00 g·kg^(-1))组,每组5只,除对照组外的4组小鼠予直线加速器6-MV的X射线行下腹部照射,总剂量12 Gy,建立急性放射性直肠炎模型。照射后次日开始ig给药,观察并记录各组小鼠状态、体质量变化情况;HE染色观察各组小鼠肠道组织病理学改变;ELISA法检测各组小鼠血清丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、Fe^(2+)以及炎症因子白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;Western blotting检测各组小鼠直肠组织中中铁死亡相关蛋白:长链酯酰辅酶A合成酶(ACSL4)、溶质载体家族7成员11(SLC7A11)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)表达水平;透射电镜观察各组小鼠直肠细胞中线粒体数量及形态结构的变化情况。结果与对照组相比,模型组小鼠精神萎靡,体质量下降,部分小鼠有肛门出血的症状;与模型组比较,冬虫夏草组小鼠症状普遍缓解。HE染色结果显示模型组肠道上皮细胞坏死脱落,黏膜层出现不同程度地出血水肿;用药后,肠道黏膜有所恢复,病变程度明显好转。ELISA结果显示,与对照组相比,模型组炎症因子TNF-α、IL-6、IL-1β、MDA、Fe^(2+)水平显著升高(P<0.001),SOD水平显著下降(P<0.001);治疗后,与模型组相比,冬虫夏草中、高剂量组TNF-α、IL-6、IL-1β、MDA、Fe2+含量显著下降,SOD含量显著增高(P<0.001)。Western blotting实验结果显示,与对照组比较,模型组ACSL4蛋白表达水平显著升高(P<0.05),SLC7A11及GPX4蛋白表达水平显著降低(P<0.05);与模型组比较,冬虫夏草中、高剂量组ACSL4蛋白的表达水平显著降低(P<0.05),同时SLC7A11、GPX4蛋白表达水平显著升高。透射电镜结果发现,模型组线粒体数量下降,体积变小,膜密度增加,嵴减少;冬虫夏草治疗� 展开更多
关键词 冬虫夏草 急性放射性直肠炎 铁死亡 谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4) 线粒体
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