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HPLC及DESI-MSI法对不同生长年限黄连次生代谢产物的动态积累及分布规律的研究 被引量：6
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作者 王丹 戚苗 +5 位作者 赵禾笛 陈晗 王艳敏 江垭霓 蓝亚楠 王晶娟 《北京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期612-620,共9页
目的使用高效液相色谱法(HPLC)和解吸电喷雾电离-离子化质谱成像(DESI-MSI)法研究不同生长年限黄连次生代谢产物的动态积累及分布规律。方法以一、三、五年生黄连为研究对象,采用HPLC法对黄连次生代谢产物的7种指标性成分(盐酸药根碱、... 目的使用高效液相色谱法(HPLC)和解吸电喷雾电离-离子化质谱成像(DESI-MSI)法研究不同生长年限黄连次生代谢产物的动态积累及分布规律。方法以一、三、五年生黄连为研究对象,采用HPLC法对黄连次生代谢产物的7种指标性成分(盐酸药根碱、非洲防己碱、表小檗碱、盐酸黄连碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱、木兰花碱)进行含量测定。同时,利用DESI-MSI法对一、三、五年生黄连切片的7种成分的分布进行定性分析。结果HPLC法测定结果显示,盐酸小檗碱、盐酸巴马汀、盐酸药根碱、非洲防己碱、木兰花碱在五年生黄连中含量最高;盐酸黄连碱与表小檗碱在三年生黄连中含量最高,而木兰花碱与盐酸药根碱在三年生黄连中含量最低;盐酸小檗碱、盐酸巴马汀、非洲防己碱、表小檗碱及盐酸黄连碱均在一年生黄连中含量最低。DESI-MSI法测定结果显示,生物碱的盐酸盐在质谱分析过程中解离,最终以原型形式呈现。小檗碱和表小檗碱集中分布于整个黄连切片断面,且一年生分布区域最小、三年生和五年生分布区域相近;药根碱和非洲防己碱分布于皮部和髓部,且以五年生分布区域最大;巴马汀和黄连碱分布于皮部和髓部,一年生分布区域最小;木兰花碱仅分布于木部,且在一、三、五年生黄连中分布区域相近。结论一年生黄连中各成分累积较少,第一年为黄连生长发育的主要阶段;三年生黄连中各成分累积较多,1~3年是黄连次生代谢产物累积的主要时期;五年生黄连中总成分含量最高,尤其是小檗碱累积最多,与以栽培5年以上的黄连为药材的市场习惯相符合。 展开更多
关键词 黄连 生长年限 次生代谢产物 生物碱 解吸电喷雾电离-离子化质谱成像 高效液相色谱
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DESI-MSI技术在经典名方芍药甘草汤质量控制中应用研究 被引量：13
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作者 曲缘章 孙博 +7 位作者 朱广伟 马生军 万林春 李雅静 郭杰 李刚 杨林勇 李宝国 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2020年第13期3433-3443,共11页
目的使用超高效液相色谱-二极管阵列检测器检测法(UHPLC-DAD)和解吸电喷雾电离-离子化质谱成像技术(desorption electrospray ionization-mass spectrometry imaging,DESI-MSI)对15批芍药甘草汤(Shaoyao-Gancao-Decoction,SGD)物质基准... 目的使用超高效液相色谱-二极管阵列检测器检测法(UHPLC-DAD)和解吸电喷雾电离-离子化质谱成像技术(desorption electrospray ionization-mass spectrometry imaging,DESI-MSI)对15批芍药甘草汤(Shaoyao-Gancao-Decoction,SGD)物质基准和对应实物进行分析,考察DESI-MSI在经典名方SGD质量控制中的优势。方法以SGD为研究模型,采用传统UHPLC-DAD法建立物质基准指纹图谱,并对SGD指标成分(芍药苷、甘草苷、甘草酸)含量、出膏率进行考察。同时,以芍药甘草汤对应实物冻干粉为研究载体,将其复溶后点样于定性滤纸,并固定于载玻片制成样品,以甲醇-甲酸(1000∶1)为喷雾溶剂,体积流量3μL/min;扫描范围m/z 100~1200;空间分辨率300μm;喷雾气(N2)压力0.5 MPa;离子源温度120℃,采用正负离子全扫描样本。结果DESI-MSI法能检测到SGD指标成分芍药苷、甘草苷、甘草酸以及共有峰成分芍药内酯苷等。同时,DESI-MSI法还能检测到来自甘草、白芍的甘草皂苷G2、甘草皂苷J2、没食子酸、柠檬酸、对羟基苯甲酸等11种成分,并对其相对含量进行直观呈现,定性分析能力远强于UHPLC-DAD法。结论基于DESI-MSI技术无需进行复杂的样品前处理,可以在无对照品情况下进行复杂样品的定性、相对含量分析,灵敏度高,分析能力强,可以作为经典名方物质基准、对应实物及配方颗粒样品的质控研究方法。 展开更多
关键词 经典名方 芍药甘草汤 解吸电喷雾电离-离子化质谱成像技术 UHPLC-DAD 物质基准 质量标准 质量控制 芍药苷 甘草苷 甘草酸 芍药内酯苷 甘草皂苷G2 甘草皂苷J2 没食子酸 柠檬酸 对羟基苯甲酸
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基于UPLC-Q-TOF-MS和DESI-MSI分析天元芷通方入脑成分及其脑内分布 被引量：1
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作者 程怡 兰群 +3 位作者 吴冰雨 王锦玉 刘德文 仝燕 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第12期166-172,共7页
目的:基于超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱法(UPLC-Q-TOF-MS)、解吸电喷雾电离质谱成像(DESI-MSI)、高光谱成像技术对天元芷通方入脑成分及其脑内分布进行探究。方法:10只BALB/c小鼠随机分为空白组(n=3)和给药组(n=7),给药组灌胃生... 目的:基于超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱法(UPLC-Q-TOF-MS)、解吸电喷雾电离质谱成像(DESI-MSI)、高光谱成像技术对天元芷通方入脑成分及其脑内分布进行探究。方法:10只BALB/c小鼠随机分为空白组(n=3)和给药组(n=7),给药组灌胃生药质量浓度约5 g·mL-1的天元芷通方药液0.3 mL,空白组灌胃等体积生理盐水,取小鼠全脑分别制备组织匀浆及冰冻切片。组织匀浆采用UPLC-Q-TOF-MS技术分别在正、负离子模式下进行入脑成分的定性分析。冰冻切片采用DESI-MSI观察入脑成分的脑内分布。选用暗场增强显微镜对各组小鼠脑切片进行高光谱成像扫描,收集微观视场中至少1000个像素点可见-近红外(400~1000 nm)波段的散射光数据并创建平均光谱,对空白及给药小鼠脑组织中成分进行比对。结果:UPLC-Q-TOF-MS共鉴定出天元芷通方入脑成分27个,包括有机酸类10个、苷类5个、生物碱类4个、酚类1个、黄酮类4个、苯酞类2个、其他类1个,主要来源于天麻、川芎、醋延胡索、酸枣仁和制巴戟天;质谱成像分析得到14个成分,其中阿魏酸、延胡索乙素、N-甲基去氢小檗碱主要分布在大脑皮层区域,维生素B5、斑鸠菊酸、蓖麻油酸主要分布在下丘脑区域,榄香脂素、十八烯酸、十八碳酸主要分布在皮层及下丘脑区域,洋川芎内酯B、藁本内酯、亚油酸、9,12-十八碳二烯酰乙酯、斯皮诺素则在脑组织大部分区域均有分布;高光谱成像显示,在可见-近红外波段范围内,给药组小鼠脑组织平均光谱发生明显红移,表明空白组和给药组小鼠间脑内化学成分的物理性质或含量存在差异,进一步验证了质谱成像的结果。结论:通过UPLC-Q-TOF-MS技术与质谱成像、高光谱成像技术的结合,明确了天元芷通方入脑治疗头痛的药物成分及在脑组织中的分布特征,为复方质量标准研究指标成分的选择和药效作用机制研究提供参� 展开更多
关键词 天元芷通方 入脑成分 脑内分布 解吸电喷雾电离-敞开式离子化质谱成像(DESI-MSI) 高光谱成像 超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱法(UPLC-Q-TOF-MS)
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