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提高西索米星生产菌产量的遗传育种 被引量:12
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作者 朱坚屏 倪雍富 荣洁 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第2期129-132,共4页
在西索米星产生菌橄榄星孢小单孢菌无锡亚种M-41的选育过程中,以常规诱变育种为主,结合一些综合处理方法,如原生质体再生、在8-甲氧基补骨酯存在下用近紫外光照射、氯化锂和紫外线的复合处理,筛选自身产物抗性解除反馈调节突... 在西索米星产生菌橄榄星孢小单孢菌无锡亚种M-41的选育过程中,以常规诱变育种为主,结合一些综合处理方法,如原生质体再生、在8-甲氧基补骨酯存在下用近紫外光照射、氯化锂和紫外线的复合处理,筛选自身产物抗性解除反馈调节突变株,同时结合单菌落自然分离纯化法经几十代选育,得到了稳定高产菌株96-37,比原始野生型菌株产量提高近30倍,主组分含量提高到85%以上。经20吨规模发酵罐试验,证实菌株96-37是一株高产、稳产的工业生产菌种。 展开更多
关键词 西索米 橄榄 小单孢菌 遗传育种 M-41
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HPLC-ELSD法分析硫酸奈替米星与硫酸西索米星的含量与有关物质 被引量:14
2
作者 吴燕 张胜强 +1 位作者 郭成明 袁雯玮 《中国药品标准》 CAS 2004年第4期35-39,共5页
目的:建立一种硫酸奈替米星与硫酸西索米星的含量及有关物质分析方法,为开辟氨基糖甙类抗生素含量测定及有关物质的分析方法提供新思路。方法:应用高效液相色谱-蒸发光散射检测法分析硫酸奈替米星与硫酸西索米星的含量及有关物质。色谱... 目的:建立一种硫酸奈替米星与硫酸西索米星的含量及有关物质分析方法,为开辟氨基糖甙类抗生素含量测定及有关物质的分析方法提供新思路。方法:应用高效液相色谱-蒸发光散射检测法分析硫酸奈替米星与硫酸西索米星的含量及有关物质。色谱条件:C18 Luna色谱柱,规格:250mm×4.6mm,5μm;流动相:0.1mol.L-1三氟醋酸水溶液-0.1%(V/V)甲酸水溶液-甲醇(360:540:100)(硫酸奈替米星适用)0.1mol.L-1三氟醋酸水溶液-0.1%(V/V)甲酸水溶液-甲醇(372:558:70)(硫酸西索米星适用);检测器条件:漂移管温度为50℃,雾化气体(空气)压力为3.0bar。结果:硫酸奈替米星与硫酸西索米星样品中主成分与有关物质分别在各自色谱条件下均分离良好。结论:本方法操作简单,方法的准确性、重现性均能很好地满足质量控制的要求,为开辟氨基糖甙类抗生素含量测定及有关物质的仪器分析方法提供了一定借鉴。 展开更多
关键词 有关物质 硫酸奈替 西索米 含量 HPLC-ELSD法 氨基糖甙类抗生素 色谱条件 析硫 甲醇 仪器分析方法
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西索米星的高效液相色谱测定 被引量:13
3
作者 陈珠灵 阮奇 张星 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期313-314,共2页
以邻苯二甲醛和巯基乙酸为衍生化试剂 ,对西索米星柱前衍生。色谱柱YWG C18( 10 μm ,15 0mm× 4mm) ,甲醇∶水∶乙酸 (内含庚烷磺酸钠 12mmol/L ,pH =6 .3,V/V/V =70∶2 5∶5 )为流动相 ,流速 1.0ml/min ,柱温 2 5℃ ,检测波长 2 5... 以邻苯二甲醛和巯基乙酸为衍生化试剂 ,对西索米星柱前衍生。色谱柱YWG C18( 10 μm ,15 0mm× 4mm) ,甲醇∶水∶乙酸 (内含庚烷磺酸钠 12mmol/L ,pH =6 .3,V/V/V =70∶2 5∶5 )为流动相 ,流速 1.0ml/min ,柱温 2 5℃ ,检测波长 2 5 0 μm ,反相高效液相色谱法分离测定西索米星的含量 ;在一定浓度范围内 ,西索米星的峰面积与浓度呈良好的线性关系 ,相关系数为 0 .9996 ,平均回收率为 99.85 % (n =3)。 展开更多
关键词 高效液相色谱法 西索米 邻苯二甲苯 柱前衍生
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NBS-二氯荧光素化学发光体系测定西索米星 被引量:3
4
作者 何树华 《分析试验室》 CAS CSCD 北大核心 2006年第9期41-43,共3页
在碱性奈件下,西索米星被NBS(N-溴代琥珀酰亚胺)氧化,其能量可激发共存的二氯荧光素(DCF)而产生化学发光,发光强度与西索米星的质量浓度在一定范围内呈良好的线性关系,基于此,结合流动注射技术,建立了一种直接测定西索米星的... 在碱性奈件下,西索米星被NBS(N-溴代琥珀酰亚胺)氧化,其能量可激发共存的二氯荧光素(DCF)而产生化学发光,发光强度与西索米星的质量浓度在一定范围内呈良好的线性关系,基于此,结合流动注射技术,建立了一种直接测定西索米星的化学发光新方法。该方法具有较高的灵敏度,检出限为73μg/L(IUPAC),线性范围为0.1~10mg/L,对5.0mg/L西索米星平行测定11次,其相对标准偏差为2.3%。已用于针剂中西索米星的测定。 展开更多
关键词 化学发光 流动注射分析 西索米 NBS 二氯荧光素
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产生西索米星的棘孢小单孢阻断型突变株JIM-121的筛选和研究 被引量:11
5
作者 赵敏 范瑾 +2 位作者 刘军 胡小玲 谢凤龙 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 1992年第1期16-20,共5页
利用紫外光、氯化锂和甲胺复合因子处理棘孢小单孢JIM-202变株,得到一株JIM-121;其发酵液用离子交换树脂提取、然后用CM-Sephadex C-25分离表明主要含有二个抗生素即121-A和121-B。经薄层层析、红外光谱和核磁共振谱、质谱测定证实抗生... 利用紫外光、氯化锂和甲胺复合因子处理棘孢小单孢JIM-202变株,得到一株JIM-121;其发酵液用离子交换树脂提取、然后用CM-Sephadex C-25分离表明主要含有二个抗生素即121-A和121-B。经薄层层析、红外光谱和核磁共振谱、质谱测定证实抗生素121-A与西索米星同质。根据庆大霉素-西索米星生物合成途径可推断该突变株系在西索米星到庆大霉素C_(1a)这一步转化绛红糖胺部份4′、5′还原反应较弱所致。 展开更多
关键词 西索米 阻断型突变株 小单孢南属
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大孔弱酸树脂提取西索米星的研究 被引量:8
6
作者 张星 阮奇 +2 位作者 黄诗煌 叶长 施汉英 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期338-340,343,共4页
比较几种大孔弱酸树脂和强酸 732树脂提取西索米星的交换和洗脱性能。实验表明 ,弱酸 号树脂对西索米星成品液的静态交换总量可达 18.1万 μg/ ml树脂 ,比 732树脂提高了 80 %; 号树脂 (羧基型 )吸附西索米星的最佳 p H值为 7.5左右 ,... 比较几种大孔弱酸树脂和强酸 732树脂提取西索米星的交换和洗脱性能。实验表明 ,弱酸 号树脂对西索米星成品液的静态交换总量可达 18.1万 μg/ ml树脂 ,比 732树脂提高了 80 %; 号树脂 (羧基型 )吸附西索米星的最佳 p H值为 7.5左右 ,其动态交换容量比静态交换容量高 13.8%; 号树脂 (羧基型 )动态吸附、动态解吸提取西索米星的收率达 82 .6 %,比 732树脂提取收率提高 8%;用 5 %氨水动态解吸 , 号树脂 (羧基型 )比 732树脂 (磺酸基型 )易洗脱 ,且洗脱峰集中 ,不拖尾。 展开更多
关键词 抗生素 西索米 吸附 离子交换容量 解吸 大孔网状弱酸树脂
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西索米星产生菌小单孢菌的诱变育种研究 被引量:5
7
作者 廖爱芳 程振泰 +4 位作者 陈久信 萨丹 林玲 方东升 高悟岩 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 1996年第1期5-8,共4页
用常规诱变育种方法对西索米星小单孢菌进行诱变育种,获得NS8-30菌株,结合发酵条件研究,发酵效价比原始菌株提高17倍以上,并在中试生产中应用。获得1株阻断型突变株7-25,其代谢产物经光谱学分析鉴定为JI-20A,... 用常规诱变育种方法对西索米星小单孢菌进行诱变育种,获得NS8-30菌株,结合发酵条件研究,发酵效价比原始菌株提高17倍以上,并在中试生产中应用。获得1株阻断型突变株7-25,其代谢产物经光谱学分析鉴定为JI-20A,并对其代谢途径进行了讨论。 展开更多
关键词 西索米 突变育种 小单孢菌 制药
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HPLC-ELSD法测定硫酸西索米星氯化钠注射液中西索米星含量 被引量:9
8
作者 于华生 郑一赛 陈婕 《海峡药学》 2004年第6期41-43,共3页
目的 建立高效液相色谱—蒸发光散射检测法测定西索米星的含量。 方法  采用 ZORBAX Extend— C1 8( 4 .6× 2 5 0 mm,5μm )柱 ,以 0 .2 mol· L - 1三氟醋酸 -甲醇 ( 92∶ 8)为流动相 ,流速为 0 .6ml· min- 1 ;蒸发光... 目的 建立高效液相色谱—蒸发光散射检测法测定西索米星的含量。 方法  采用 ZORBAX Extend— C1 8( 4 .6× 2 5 0 mm,5μm )柱 ,以 0 .2 mol· L - 1三氟醋酸 -甲醇 ( 92∶ 8)为流动相 ,流速为 0 .6ml· min- 1 ;蒸发光散射检测器 :漂移管温度 110℃ ,载气流速为 2 .8L· min- 1。 结果  西索米星在 1.0 2 1— 10 .2 1μg范围内呈良好线性关系 ,r=0 .9999;平均回收率为 10 1.6% ,RSD=1.1% ( N=9)。 结论  本法简便快速 ,结果可靠 。 展开更多
关键词 西索米 高效液相色谱法 蒸发光散射检测器 含量测定
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西索米星发酵液的薄层层析生物显影测定 被引量:7
9
作者 郭养浩 林春红 +3 位作者 张元兴 罗义发 谢涵宾 陈剑锋 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期224-226,236,共3页
通过对检定菌的敏感性,检定培养基、展开剂和发酵液样品等影响因素的考察,建立了一种检测发酵液中西索米星浓度的方法。采用短小芽孢杆菌为生物显影检定菌,双层琼脂扩散法于37℃培养16~18h,控制检定培养基的PH为7.5~8.0,发酵... 通过对检定菌的敏感性,检定培养基、展开剂和发酵液样品等影响因素的考察,建立了一种检测发酵液中西索米星浓度的方法。采用短小芽孢杆菌为生物显影检定菌,双层琼脂扩散法于37℃培养16~18h,控制检定培养基的PH为7.5~8.0,发酵液样品pH为4.5~7,0,展开剂为15%的KH2PO4,点样量为10μl,薄板和菌层接触时间为20min等检定条件,能用于发酵液中西索米星效价的直接测定,其线性回归方程为 Y=0.0115X+1.747,r=0.9877。在相同条件下,对536μg/ml的西索米星标准液连续测定6次,测定结果为(531.0 ±12.7)μg/ml,RSD=3.28%,该法具有较高的实验重复性和准确性,分析稳定性基本符合要求。 展开更多
关键词 西索米 薄层层析 生物显影法 发酵液 抗生素
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西索米星分批发酵的动力学特性 被引量:8
10
作者 陈剑锋 张元兴 +3 位作者 郭养浩 孟春 石贤爱 陈凡 《过程工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第4期430-433,共4页
伊尼奥小单孢菌F003的发酵特性研究表明,西索米星发酵过程具有典型的非生长耦联特征.当以淀粉为主要碳源时,对数生长期最大菌体比生长速率为0.058 h-1,产物合成期最大产物比合成速率0.0018 g/(g·h).HPLC和酶法测定结果显示发酵液... 伊尼奥小单孢菌F003的发酵特性研究表明,西索米星发酵过程具有典型的非生长耦联特征.当以淀粉为主要碳源时,对数生长期最大菌体比生长速率为0.058 h-1,产物合成期最大产物比合成速率0.0018 g/(g·h).HPLC和酶法测定结果显示发酵液中主要的可发酵糖为麦芽糖,适合菌体生长的麦芽糖浓度或葡萄糖浓度分别为10.0~25.0和7.5~15.0 g/L,可发酵糖浓度低于10.2 g/L将限制西索米星合成.西索米星发酵过程淀粉水解酶表观活性的动力学特性表明,在对数生长期淀粉水解酶表观活性较高,最大值为0.84 g/(L·h),在发酵中后期淀粉水解酶表观活性仅为最大值的1/4~1/20,导致可发酵糖浓度降低,限制西索米星的合成.西索米星浓度大于0.50 g/L将明显抑制产物合成. 展开更多
关键词 西索米 动力学特性 淀粉水解酶 产物合成 分批发酵
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促甲基化因子对西索米星发酵的影响 被引量:6
11
作者 陈剑锋 王航 +2 位作者 张元兴 郭养浩 陈浩 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期85-90,共6页
研究发现,发酵培养基中添加2.0—3.0g,/L蛋氨酸或7.5—10.0mg,/L氯化钴可明显促进西索米星的合成。蛋氨酸的添加时机和添加方式对西索米星产物合成的作用明显不同。在产物合成中前期(30-48h)添加蛋氨酸的效果最佳。当发酵液中... 研究发现,发酵培养基中添加2.0—3.0g,/L蛋氨酸或7.5—10.0mg,/L氯化钴可明显促进西索米星的合成。蛋氨酸的添加时机和添加方式对西索米星产物合成的作用明显不同。在产物合成中前期(30-48h)添加蛋氨酸的效果最佳。当发酵液中蛋氨酸初始浓度为0.656g/L时,与在产物合成初期一次性添加相比,1.5g/L蛋氨酸在产物合成初期、中期和后期均分成3次添加的效果更优,当发酵至91h结束时,发酵液中西索米星浓度可达0.70g/L。 展开更多
关键词 西索米 蛋氨酸 氯化钴 发酵 甲基化
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西索米星与七叶皂苷钠联用致急性肾衰竭 被引量:7
12
作者 邓金良 《临床误诊误治》 2008年第5期96-97,共2页
关键词 西索米 七叶皂苷钠 不良反应 肾衰竭
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衍生化-高效液相色谱法测定西索米星 被引量:6
13
作者 陈珠灵 张兰 +1 位作者 阮奇 兰锦昌 《分析试验室》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期46-48,共3页
采用反相高效液相色谱法 ,以 2 ,4 二硝基氟苯为衍生化试剂。其线性范围为 1 0mg/L~ 5 0 0mg/L ;检出限为 5 0mg/L ;相对标准偏差为 2 .3%。
关键词 高效液相色谱法 西索米 2 4-二硝基氟苯 衍生化试剂 抗生素 质量控制 药物分析
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抗生素西索米星发酵过程中次要组分的调控 被引量:6
14
作者 朱坚屏 倪雍富 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第1期16-18,共3页
在西索米星产生菌橄榄星孢小单孢菌M-41的发酵代谢与产物合成的研究中,发现通过控制种子期菌丝的生长形态、培养基中磷酸盐含量,并在发酵过程中添加合适的抑制剂,可有效地减少发酵液中次要组分verdamicin的生物合成,... 在西索米星产生菌橄榄星孢小单孢菌M-41的发酵代谢与产物合成的研究中,发现通过控制种子期菌丝的生长形态、培养基中磷酸盐含量,并在发酵过程中添加合适的抑制剂,可有效地减少发酵液中次要组分verdamicin的生物合成,增加主要组分西索米星的含量。 展开更多
关键词 橄榄孢小单孢菌 西索米 verdamicin 发酵 调控
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依尼奥小单孢菌抗性基因sisR的克隆研究 被引量:6
15
作者 洪文荣 陈代杰 +1 位作者 刘靖 朱宝泉 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期149-153,共5页
从产西索米星的依尼奥小单孢菌中克隆高抗性新基因sisR ,借助计算机设计PCR引物 ,从西索米星的产生菌依尼奥小单孢菌的染色体DNA中 ,经PCR扩增获得DNA序列长度不等的DNA片段。将这些DNA片段克隆至pUC19载体质粒并导入大肠杆菌 ,从中筛选... 从产西索米星的依尼奥小单孢菌中克隆高抗性新基因sisR ,借助计算机设计PCR引物 ,从西索米星的产生菌依尼奥小单孢菌的染色体DNA中 ,经PCR扩增获得DNA序列长度不等的DNA片段。将这些DNA片段克隆至pUC19载体质粒并导入大肠杆菌 ,从中筛选到 5个抗西索米星的转化子 (其中一个命名为sisR)显示对西索米星的高抗性 (超过 10 0 0 μg mL)。经DNA测序并通过互联网Blast比对 ,确认对该抗性负责的DNA片段是一个未见报道的新基因。 展开更多
关键词 sisR基因 依尼奥小单孢菌 西索米 基因克隆
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硫酸奈替米星的合成工艺改进 被引量:5
16
作者 洪虹 沈剑锋 章瑾 《中国医药工业杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期3-5,共3页
改进了硫酸奈替米星合成工艺中的关键步骤 ,将三乙酰基西索米星中活性官能团先行保护后 ,改用硼氢化钠代替昂贵进口品氰基硼氢化钠 ,并采用一锅合成法制得成品 ,简化了工艺 ,降低了原材料成本 ,成品的收率和质量也有明显的提高。
关键词 硫酸奈替 西索米 合成工艺 改进
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西索米星发酵工艺的优化控制 被引量:4
17
作者 倪雍富 朱坚屏 《生物技术》 CAS CSCD 2000年第6期25-28,共4页
在用橄榄星孢小单孢菌M - 4 1发酵生产西索米星的过程中 ,通过优化控制种子期菌丝的生长形态、培养基中有机氮源质量和磷酸盐含量、pH、温度、搅拌速度、通气质量等条件 ,可以使西索米星发酵达到适应工业化生产的水平。在此条件下 ,西... 在用橄榄星孢小单孢菌M - 4 1发酵生产西索米星的过程中 ,通过优化控制种子期菌丝的生长形态、培养基中有机氮源质量和磷酸盐含量、pH、温度、搅拌速度、通气质量等条件 ,可以使西索米星发酵达到适应工业化生产的水平。在此条件下 ,西索米星的发酵效价可达到 545u/ml左右。 展开更多
关键词 西索米 橄榄孢小单孢菌 发酵 控制
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DK-13和DK-3两种大孔弱酸阳离子树脂提取西索米星的吸附热力学和动力学研究 被引量:1
18
作者 杨丽敏 刘洋 +1 位作者 陈旭升 张建华 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期179-185,共7页
目的采用静态吸附实验考察了DK-13、DK-3两种大孔弱酸阳离子树脂对西索米星的吸附热力学和动力学行为。方法用刚果红分光光度法测定不同温度和不同初始浓度下的吸附等温线和吸附动力学、热力学曲线等。结果两种树脂对西索米星的吸附过... 目的采用静态吸附实验考察了DK-13、DK-3两种大孔弱酸阳离子树脂对西索米星的吸附热力学和动力学行为。方法用刚果红分光光度法测定不同温度和不同初始浓度下的吸附等温线和吸附动力学、热力学曲线等。结果两种树脂对西索米星的吸附过程符合Langmuir吸附等温方程(R2>0.998)和拟二级动力学模型(R2>0.995);热力学参数计算结果显示,吉布斯自由能变ΔG、焓变ΔH、熵变ΔS均大于零,说明其吸附过程为非自发吸热的熵增过程。同时,研究还发现DK-13树脂交换带长度为DK-3的5.2倍,表明DK-13树脂适用于固定床而DK-3树脂用于连续离子交换床更有利。结论本研究结果为大孔弱酸阳离子树脂吸附提取西索米星工艺的工业化应用提供了理论指导。 展开更多
关键词 大孔弱酸阳离子树脂 西索米 吸附动力学 吸附热力学 交换带
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西索米星原料药中极性小组分的研究 被引量:4
19
作者 范铭琦 沈依群 +1 位作者 胡小玲 范瑾 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第3期178-185,共8页
用大孔吸附型树脂对西索米星原料药进行分离,极性小组分首先被洗脱。用高效液相色谱法测定了分离前后的西索米星纯度,发现可从84%提高到92%。此外还建立了用硅胶薄层层析检测小组分的方法,并用阳离子交换树脂对小组分进行了分... 用大孔吸附型树脂对西索米星原料药进行分离,极性小组分首先被洗脱。用高效液相色谱法测定了分离前后的西索米星纯度,发现可从84%提高到92%。此外还建立了用硅胶薄层层析检测小组分的方法,并用阳离子交换树脂对小组分进行了分离。采用上述方法可分离得6种小组分。再用Am-berliteCG-50、CM-SephadexC-25等精制,得各小组分的精制品,经冷冻干燥后进行结构测定。其中含量最多的NAT-1、UK-1与庆大霉素A和加洛糖胺同质,NAT-4与庆大霉素A1的文献报道相符;而NAT-2、UK-2经MS、1H-NMR、13C-NMR测定。 展开更多
关键词 西索米 小组分 分离 色谱法 结构测定 抗生素
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西索米星生产菌株的诱变选育及工艺优化 被引量:1
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作者 沈淑琳 李会 +3 位作者 张晓梅 徐建国 史劲松 许正宏 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期11-20,共10页
利用原生质体常压室温等离子体(ARTP)诱变方法选育西索米星高产菌株,经诱变筛选获得一株高产菌株I4-10,其西索米星的生物效价达到1389 U/mL,较原始菌株提高了35.4%。通过对高产菌株I4-10进行碳源、氮源优化,确定可溶性淀粉和牛肉粉是突... 利用原生质体常压室温等离子体(ARTP)诱变方法选育西索米星高产菌株,经诱变筛选获得一株高产菌株I4-10,其西索米星的生物效价达到1389 U/mL,较原始菌株提高了35.4%。通过对高产菌株I4-10进行碳源、氮源优化,确定可溶性淀粉和牛肉粉是突变菌株I4-10的最适碳源和氮源。进一步采用响应面实验设计方法优化发酵培养基,结果表明黄豆饼粉和DL-蛋氨酸的添加量为显著影响因素,经优化其最适添加质量浓度分别为32.78 g/L和1.75 g/L。在此最适工艺下,西索米星的生物效价提高至1849 U/mL,较原始菌株提高了80%。最后对原始菌及高产突变株中西索米星代谢途径及菌株生长相关的关键酶进行转录水平比较分析,初步解析了突变菌株I4-10高产西索米星的机制。 展开更多
关键词 西索米 伊尼奥小单孢菌 常压室温等离子体诱变 培养基组分 响应面法
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