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用草原兔尾鼠复制内脏利什曼病模型初探 被引量:15
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作者 杨元清 管立人 +2 位作者 吴嘉彤 王革 柴君杰 《上海实验动物科学》 1995年第2期82-84,共3页
给草原兔尾鼠经腹腔接种婴儿利什曼原虫前鞭毛体,5个月后剖杀动物作病理组织学检查,发现动物的脾、肝、骨髓、淋巴结、肾及输尿管内均有不同数量的利什曼原虫分布,有典型的内脏利什曼病病理损害。作者认为草原兔尾鼠是一种便于复制... 给草原兔尾鼠经腹腔接种婴儿利什曼原虫前鞭毛体,5个月后剖杀动物作病理组织学检查,发现动物的脾、肝、骨髓、淋巴结、肾及输尿管内均有不同数量的利什曼原虫分布,有典型的内脏利什曼病病理损害。作者认为草原兔尾鼠是一种便于复制内脏利什曼病模型的动物。 展开更多
关键词 草原 内脏利什曼病 动物模型
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草原兔尾鼠的生长发育 被引量:12
2
作者 蒋卫 郑强 +1 位作者 张兰英 杨东生 《动物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1995年第3期27-31,共5页
在人工饲养条件下,对初生至100日龄的草原兔尾鼠进行逐日观察,并测量其个体的体重、体长、尾长、后足长、记录其生长发育特征。幼鼠睁眼期为10─12日龄;自由采食期为15─18日龄;断奶期为19─20日龄;性成熟期为45... 在人工饲养条件下,对初生至100日龄的草原兔尾鼠进行逐日观察,并测量其个体的体重、体长、尾长、后足长、记录其生长发育特征。幼鼠睁眼期为10─12日龄;自由采食期为15─18日龄;断奶期为19─20日龄;性成熟期为45─60日龄。生长发育大致分为四个阶段:乳鼠阶段,初生至15日龄,体长70毫米以下;幼鼠阶段,16─30日龄,体长70─84毫米;亚成体阶段,30─60日龄,体长85─92毫米;成体阶段,60日龄以上,体长为92毫米以上。 展开更多
关键词 草原 繁殖 生长 发育
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草原兔尾鼠卵透明带3(ZP3)cDNA保守序列的克隆与序列分析 被引量:9
3
作者 张富春 张蕴斌 +5 位作者 李轶杰 张渝疆 李阔宇 钟哲 马正海 恩特马克 《地方病通报》 2001年第4期70-73,共4页
根据 Gene Bank数据库中 5种啮齿目动物卵透明带 3 (ZP3 ) c DNA的序列 ,利用 DNAMAN和 NIH NCBI BLAST同源性分析程序设计了特异性引物。从 6周龄的未孕雌性的草原兔尾鼠卵巢中用柱离心法得到总 RNA,利用反转录技术得到 c DNA,通过特... 根据 Gene Bank数据库中 5种啮齿目动物卵透明带 3 (ZP3 ) c DNA的序列 ,利用 DNAMAN和 NIH NCBI BLAST同源性分析程序设计了特异性引物。从 6周龄的未孕雌性的草原兔尾鼠卵巢中用柱离心法得到总 RNA,利用反转录技术得到 c DNA,通过特异性引物进行 PCR扩增草原兔尾鼠的 ZP3 c DNA保守序列。将扩增产物连接到 p MD1 8- T载体上 ,通过蓝白斑筛选得到阳性克隆 ,酶切鉴定后进行测序。将其与 Gene Bank中啮齿目动物 ZP3 c DNA进行同源性比较 ,获得了草原兔尾鼠 ZP3 c DNA的保守基因序列 ,与啮齿类同类基因比较 ,具有较高的同源性。 展开更多
关键词 草原 卵透明带3 cDNA保守序列 序列分析
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草原兔尾鼠的饲养驯化 被引量:8
4
作者 蒋卫 郑强 张兰英 《野生动物》 1993年第2期48-49,29,共3页
野生动物的驯化是当今动物学工作者的研究内容之一。草原兔尾鼠Lagurs lagurus隶属田鼠亚科,具有体型小,性情温和,性成熟早,繁殖力强,易被驯服和易饲养等特点。我们自1989年8月开始驯化野生草原兔尾鼠,生长繁殖较稳定。在室内人工条件... 野生动物的驯化是当今动物学工作者的研究内容之一。草原兔尾鼠Lagurs lagurus隶属田鼠亚科,具有体型小,性情温和,性成熟早,繁殖力强,易被驯服和易饲养等特点。我们自1989年8月开始驯化野生草原兔尾鼠,生长繁殖较稳定。在室内人工条件下饲养繁殖了5—6代200余只。现简要介绍如下: 1 驯化 1.1 原种来源:1989年7月1日从新疆和丰县和什吐洛盖国营牧场,蒿属草原景观捕获3只(2雄,1雌),带回实验室进行驯养。 1.2饲养条件:饲养室面积2.9×4.8米。 展开更多
关键词 草原 饲养
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野生动物实验动物化的研究概况 被引量:7
5
作者 郑强 林永红 《疾病预防控制通报》 1996年第S1期83-88,共6页
野生动物实验动物化的研究概况郑强,林永红综述(新疆地方病防治研究所,乌鲁木齐市83OO02;乌鲁木齐市第二十三中学)实验动物科学是生命科学的基础和条件。随着医学科学的飞速发展,对实验动物品种的需求也越来越多,而原有的... 野生动物实验动物化的研究概况郑强,林永红综述(新疆地方病防治研究所,乌鲁木齐市83OO02;乌鲁木齐市第二十三中学)实验动物科学是生命科学的基础和条件。随着医学科学的飞速发展,对实验动物品种的需求也越来越多,而原有的实验动物种类如小白鼠、大白鼠、豚鼠... 展开更多
关键词 草原 实验动物科学 高原 流行性出血热病毒 白化黑线仓 长爪沙 人工饲养 喜马拉雅旱獭 动物实验 动物学
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介绍一种新型实验动物──草原兔尾鼠 被引量:7
6
作者 张兰英 郑强 蒋卫 《地方病通报》 1996年第1期3-4,共2页
介绍一种新型实验动物──草原兔尾鼠张兰英,郑强,蒋卫(新疆地方病防治研究所,乌鲁木齐市830002)新疆地处亚洲腹地,自然景观类型多样,出现并形成许多自然动物种群,而啮齿动物是其中最为繁盛的一个类群,它不仅种属多,种... 介绍一种新型实验动物──草原兔尾鼠张兰英,郑强,蒋卫(新疆地方病防治研究所,乌鲁木齐市830002)新疆地处亚洲腹地,自然景观类型多样,出现并形成许多自然动物种群,而啮齿动物是其中最为繁盛的一个类群,它不仅种属多,种群密度也很高。随着生命科学的不断发... 展开更多
关键词 实验动物 草原
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黄兔尾鼠和草原兔尾鼠两种酯酶同工酶的比较分析 被引量:6
7
作者 王爱民 张晓岚 +2 位作者 李红叶 廖力夫 蒋卫 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 1992年第3期29-32,39,共5页
利用聚丙烯酰胺盘状电泳分析了新疆北部两种害鼠——黄兔尾鼠和草原兔尾鼠的α-酯酶和β-酯酶同工酶。共检查了肝脏、心脏、肌肉、肾脏、胃、肺、脑和横膈8种组织。结果表明,在同种动物中,两种酯酶同工酶具明显的组织特异性,并且部分酶... 利用聚丙烯酰胺盘状电泳分析了新疆北部两种害鼠——黄兔尾鼠和草原兔尾鼠的α-酯酶和β-酯酶同工酶。共检查了肝脏、心脏、肌肉、肾脏、胃、肺、脑和横膈8种组织。结果表明,在同种动物中,两种酯酶同工酶具明显的组织特异性,并且部分酶带有重叠现象;在不同动物中,两种酯酶同工酶具种间特异性。不同动物中酯酶同工酶的特异性可能与其生活的特殊生态环境相适应。 展开更多
关键词 草原 酯酶同功酶
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草原兔尾鼠(Lagurus lagurus)对利什曼原虫敏感性的初步观察 被引量:7
8
作者 侯岩岩 蒋卫 +2 位作者 左新平 张松 张兰英 《地方病通报》 1994年第4期68-69,共2页
本文报道了用杜氏利什曼和都兰利什曼两种原虫,进行人工感染草原兔尾鼠的初步结果。杜氏利什曼911株腹腔接种动物三个月后剖检,发现以5×107个原虫/0.2ml/只接种的5只鼠,有3只感染;901株以5×107个... 本文报道了用杜氏利什曼和都兰利什曼两种原虫,进行人工感染草原兔尾鼠的初步结果。杜氏利什曼911株腹腔接种动物三个月后剖检,发现以5×107个原虫/0.2ml/只接种的5只鼠,有3只感染;901株以5×107个原虫/0.2ml/只无鞭毛体接种4只中有3只感染,前鞭毛体接种7只中4只感染;都兰利什曼原虫前鞭毛体同样剂量接种7只中2只足垫出现皮肤损害,涂片上查到大量原虫,而内脏无感染。提示草原兔尾鼠可能是黑热病的一种敏感的实验动物。 展开更多
关键词 草原 利什曼原虫 人工感染
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婴儿利什曼原虫实验感染草原兔尾鼠的进一步观察 被引量:7
9
作者 侯岩岩 柴君杰 +4 位作者 左新平 严蕾 张松 蒋卫 张兰英 《地方病通报》 1999年第1期23-24,共2页
给草原兔尾鼠(Laguruslagurus)经腹腔接种不同量的婴儿利什曼原虫(Leishmaniainfantum)前鞭毛体,结果表明,不同量的原虫感染对动物体重及肝重没有明显的影响,但脾重则有一定的差异。肝脏原虫负荷随感染虫量的增加而加大,实验结... 给草原兔尾鼠(Laguruslagurus)经腹腔接种不同量的婴儿利什曼原虫(Leishmaniainfantum)前鞭毛体,结果表明,不同量的原虫感染对动物体重及肝重没有明显的影响,但脾重则有一定的差异。肝脏原虫负荷随感染虫量的增加而加大,实验结果进一步证明草原兔尾鼠是一种对利什曼原虫非常敏感的实验动物;同时在用级差较小的不同量的原虫接种后,可以显示感染程度的差别,这就为利什曼病的免疫学研究提供了良好的动物模型。 展开更多
关键词 草原 利什曼原虫 感染实验
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草原兔尾鼠心电图的分析 被引量:7
10
作者 蒋卫 郑强 +1 位作者 张兰英 陈晓琦 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 1996年第1期1-4,共4页
本文采用标准双极导联(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ)、加压单极肢导联(aVR、aVL、aVF)和单极胸导联(Va、Vb、Vc),对经10%乌拉坦麻醉状态下的119只成体草原兔尾鼠进行心电图测定,同时对20只昆明系小白鼠作为对照比较。结... 本文采用标准双极导联(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ)、加压单极肢导联(aVR、aVL、aVF)和单极胸导联(Va、Vb、Vc),对经10%乌拉坦麻醉状态下的119只成体草原兔尾鼠进行心电图测定,同时对20只昆明系小白鼠作为对照比较。结果表明,草原兔尾鼠的平均心率为558.54±54.59次/min,均为窦性心率,额面心电轴平均59.61±12.63度。PD-R、QRS波、Q-T、P波平均间期分别为38.29±6.48、12.70±0.46、27.62±7.37、12.34±4.09毫秒。P波和T波的方向与主波R波一致。在Ⅰ、Ⅱ、ⅢaVL、aVF和Va导联为正,在aVR导联均为负向。无典型的S-T段,QRS波群与T波部分重叠,Q-T间期较短。 展开更多
关键词 心电图 AVR导联 T波 心率 VF QRS P波 草原 乌拉坦 成体
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草原兔尾鼠几种同工酶等位基因位点研究 被引量:6
11
作者 严蕾 蒋卫 +1 位作者 石劲草 张兰英 《地方病通报》 1996年第2期32-35,共4页
本文报告采用聚丙烯酰胺凝胶电泳方法分析草原兔尾鼠的肝脏和心脏乳酸脱氢酶(LDH)、葡萄糖一6一磷酸脱氢酶(G6PD)、苹果酸酶(ME)和酯酶(EST)同工酶酶谱的结果。结果表明草原兔尾鼠同种脏器中同种酶的同工酶谱基本... 本文报告采用聚丙烯酰胺凝胶电泳方法分析草原兔尾鼠的肝脏和心脏乳酸脱氢酶(LDH)、葡萄糖一6一磷酸脱氢酶(G6PD)、苹果酸酶(ME)和酯酶(EST)同工酶酶谱的结果。结果表明草原兔尾鼠同种脏器中同种酶的同工酶谱基本相同,但有明显的个体差异,存在着遗传多态现象。不同脏器的同种酶谱差异明显。讨论了实验结果作为这种动物的生理学和遗传学基础资料的意义。 展开更多
关键词 草原 聚丙烯酰胺 凝胶电泳 同工酶
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野鼠自然和实验感染戊肝病毒的研究 被引量:4
12
作者 赵素元 蒋伟 +1 位作者 邹林越 廖立夫 《中国媒介生物学及控制杂志》 CAS CSCD 2001年第2期106-109,共4页
目的 :研究 3种鼠 (小白鼠A、草原兔尾鼠B、子午沙鼠C)对戊肝病毒 (HEV)的反应。方法 :检查疫区捕获的小林姬鼠 ;对人工饲养繁殖后的B、C鼠实验感染HEV :第 1次用已证实含HEV·RNA的人粪便悬液攻击A、B、C 3种鼠 ;第 2次用已感染HE... 目的 :研究 3种鼠 (小白鼠A、草原兔尾鼠B、子午沙鼠C)对戊肝病毒 (HEV)的反应。方法 :检查疫区捕获的小林姬鼠 ;对人工饲养繁殖后的B、C鼠实验感染HEV :第 1次用已证实含HEV·RNA的人粪便悬液攻击A、B、C 3种鼠 ;第 2次用已感染HEV的小林姬鼠和B鼠肝组织攻击 ,观察各种反应。结果 :第 1次攻击后临床表现少而轻 ,仅 2 0 %B鼠出现精神萎靡 ,A、B、C鼠全部有酶血症 ,C鼠排毒HCV·RNA+占 2 5 % ,肝组织普遍有病理反应 (占 30 %~ 10 0 % )。感染后死亡仅见B鼠 (占 5 0 % )。结论 :实验用 3种鼠均可感染HEV ,应重视其在传播中的作用 ,并可从中筛选动物模型目的 :研究 3种鼠 (小白鼠A、草原兔尾鼠B、子午沙鼠C)对戊肝病毒 (HEV)的反应。方法 :检查疫区捕获的小林姬鼠 ;对人工饲养繁殖后的B、C鼠实验感染HEV :第 1次用已证实含HEV·RNA的人粪便悬液攻击A、B、C 3种鼠 ;第 2次用已感染HEV的小林姬鼠和B鼠肝组织攻击 ,观察各种反应。结果 :第 1次攻击后临床表现少而轻 ,仅 2 0 %B鼠出现精神萎靡 ,A、B、C鼠全部有酶血症 ,C鼠排毒HCV·RNA+占 2 5 % ,肝组织普遍有病理反应 (占 30 %~ 10 0 % )。感染后死亡仅见B鼠 (占 5 0 % )。结论 :实验用 3种鼠均可感染HEV ,应重视其在传播中的作用 。 展开更多
关键词 草原 子午沙 戊肝病毒 感染
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年龄和性别因素对封闭群草原兔尾鼠正常血液生化指标的影响 被引量:5
13
作者 许永华 宋燕玲 +3 位作者 张东辉 是文辉 伏建峰 蒋卫 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2002年第4期239-242,共4页
目的 探讨性别和年龄因素对封闭群草原兔尾鼠正常血液生化指标的影响。方法 利用雅培(AEROSET)全自动血液生化测定仪对雄性组、雌性组、1月龄 2月龄组和 2 4月龄组封闭群草原兔尾鼠的 2 3项血液正常生化指标进行了测定。结果 两年... 目的 探讨性别和年龄因素对封闭群草原兔尾鼠正常血液生化指标的影响。方法 利用雅培(AEROSET)全自动血液生化测定仪对雄性组、雌性组、1月龄 2月龄组和 2 4月龄组封闭群草原兔尾鼠的 2 3项血液正常生化指标进行了测定。结果 两年龄组各指标间以及两性别组各指标间均无统计学差异。结论 本实验中封闭群草原兔尾鼠的性别因素和年龄 (1月龄 - 2月龄年龄段和 2 4月龄年龄段 )因素对测定的 2 3项正常血液生化指标没有显著影响。 展开更多
关键词 动物模型 年龄 性别因素 封闭群 草原 正常血液生化指标 影响
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正常草原兔尾鼠的血象 被引量:4
14
作者 蒋卫 张兰英 +1 位作者 马旭霞 孙利婷 《动物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1996年第4期22-25,共4页
草原兔尾鼠是一种新开发的实验动物。本文首次报道了在人工驯养和繁殖条件下,测定了119只该鼠正常血象值及血细胞大小。血象结果,性别间、不同采血时间亦无显著性差异;不同年龄组,仅血小板值有显著性差异,高年龄组稍有增加。
关键词 草原 血象 医用实验动物
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草原兔尾鼠主要脏器及毛发中无机元素测定分析 被引量:4
15
作者 沙拉麦提.吐尔逊太 李菁 +2 位作者 蒋卫 刘惠君 杨杨 《地方病通报》 2001年第4期74-76,共3页
用原子吸收光谱法测定了 2 5只健康草原兔尾鼠 (雌雄各半 )心、肝、肾、脾、肺及毛发中无机元素铜 ,铁、锌、铅、镉、砷的含量 ,发现锌、镉、铅、砷在毛发中浓度最高 ,铜、镁在脾脏中浓度最高 ,铁在肝脏中浓度最高 。
关键词 草原 脏器 毛发 无机元素 测定
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封闭群草原兔尾鼠肝脏和胰腺的组织学观察 被引量:4
16
作者 张东辉 卢开柏 +4 位作者 许永华 是文辉 蒋卫 张兰英 于万海 《四川动物》 CSCD 2003年第4期258-259,F003,共3页
首次对封闭群草原兔尾鼠的肝脏、胰腺进行了组织学观察 ,结果表明 :1.草原兔尾鼠的肝脏纤维组织极少 ,肝小叶间界限不明显 ;部分中央静脉周围可见少量毛细胆管 ;门管区较少 ,分布不均匀 ,其静脉形状不规则、腔大 ,胆管及动脉则较小。 2 ... 首次对封闭群草原兔尾鼠的肝脏、胰腺进行了组织学观察 ,结果表明 :1.草原兔尾鼠的肝脏纤维组织极少 ,肝小叶间界限不明显 ;部分中央静脉周围可见少量毛细胆管 ;门管区较少 ,分布不均匀 ,其静脉形状不规则、腔大 ,胆管及动脉则较小。 2 .胰腺分叶清晰 ,腺泡细胞较大 ,胞浆多呈嗜酸染色 ;小叶中部腺泡着色较深 ,外侧腺泡着色较浅 ;胰岛大小不等 ,细胞排列呈不规则索状 ,光镜下未见特殊改变。 展开更多
关键词 草原 肝脏 胰腺 组织学
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荒漠型杜氏利什曼原虫虫株在体内外的致病力及保存方法研究
17
作者 廖力夫 罗芸 +1 位作者 史深 徐艺玫 《实验动物与比较医学》 CAS 2023年第6期619-625,共7页
目的通过动物攻毒实验观察荒漠型杜氏利什曼原虫虫株在动物体内外的致病力,探索保持该虫株致病力的保存方法。方法将从rK39抗体阳性灰仓鼠脾脏中分离获得的荒漠型杜氏利什曼原虫虫株分别在体外培养基中传代培养至7 d、30 d、36 d、44 d... 目的通过动物攻毒实验观察荒漠型杜氏利什曼原虫虫株在动物体内外的致病力,探索保持该虫株致病力的保存方法。方法将从rK39抗体阳性灰仓鼠脾脏中分离获得的荒漠型杜氏利什曼原虫虫株分别在体外培养基中传代培养至7 d、30 d、36 d、44 d、60 d、90 d和150 d后,按2.6×10^(5)条/只剂量腹腔接种至草原兔尾鼠,接种后60 d计算动物的脾脏系数、虫株感染率和抗体阳性率。进一步将荒漠型杜氏利什曼原虫虫株分别接种灰仓鼠和草原兔尾鼠进行传代保种,比较两种动物感染该虫株后的存活时间和致病力变化。结果体外培养7~150 d的荒漠型杜氏利什曼原虫虫株接种后,草原兔尾鼠的脾脏系数由7 d的1.0%上升至30 d的2.2%,达到正常脾脏系数(0.15%)的10倍以上,而60 d的脾脏系数虽有下降,但仍然达正常值的3倍;虫株感染率和抗体阳性率由7 d的80%逐步下降至60 d的0%;90 d时的各项观测指标与对照组相比无明显差异,均在正常值范围内。传代感染虫株后,草原兔尾鼠的存活时间为1~13个月,感染的半数个体于接种后4个月内死亡;而灰仓鼠的存活时间为5~31个月,感染的半数个体于接种后13.7个月内死亡;两种动物的平均死亡时间差异显著(t=0.0001,P<0.001),脾脏系数差异无统计学意义(t=0.990,P>0.05)。该虫株在两种动物体内的致病力一致,且在动物体内连续传代4年仍然具有致病力。结论荒漠型杜氏利什曼原虫虫株随体外培养时间延长,其致病力逐步降低,90 d时对草原兔尾鼠已无致病力,说明培养基传代培养方法不能保持该虫株对动物的致病力。动物体内传代接种才可以保持该虫株对动物的致病力。 展开更多
关键词 黑热病 荒漠型杜氏利什曼原虫 致病力 毒力维持 草原 灰仓
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优化密码子提高草原兔尾鼠ZP3融合蛋白的原核表达 被引量:3
18
作者 李轶杰 张富春 +1 位作者 张钰 王焱冰 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期700-703,共4页
目的:探讨提高草原兔尾鼠(Lagurus lagurus)卵透明带3(LZP3)基因在原核细胞中表达的水平。方法:利用重叠PCR技术,定点突变LZP3基因上3个稀有的密码子簇,将LZP3基因中7个稀有的密码子更换成大肠杆菌(E.coli)最常用的相应密码子。将获得的... 目的:探讨提高草原兔尾鼠(Lagurus lagurus)卵透明带3(LZP3)基因在原核细胞中表达的水平。方法:利用重叠PCR技术,定点突变LZP3基因上3个稀有的密码子簇,将LZP3基因中7个稀有的密码子更换成大肠杆菌(E.coli)最常用的相应密码子。将获得的LZP3突变基因(LZP3m)插入pGEX4T-1中,构建重组表达载体。以重组体转化E.coliBL21(DE3)菌株进行表达。结果:LZP3m基因的表达量比野生型LZP3基因明显提高。结论:通过密码子优化,能显著提高LZP3基因在原核细胞中的表达水平。 展开更多
关键词 草原 卵透明带3 重叠PCR 密码子优化 原核表达
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草原兔尾鼠透明带3(lZP3)基因序列同源性比较 被引量:2
19
作者 李涛 张富春 《新疆大学学报(自然科学版)》 CAS 2003年第3期269-271,276,共4页
透明带3作为精子的初级受体是透明带的一种主要糖蛋白,而抗ZP3抗体能够阻止精卵结合.因此,ZP3被认为是避孕疫苗的候选免疫原.草原兔尾鼠是新疆的重要害鼠,将它的ZP3基因序列与GenBank上已发表的几种鼠的ZP3基因序列进行同源性比较,将有... 透明带3作为精子的初级受体是透明带的一种主要糖蛋白,而抗ZP3抗体能够阻止精卵结合.因此,ZP3被认为是避孕疫苗的候选免疫原.草原兔尾鼠是新疆的重要害鼠,将它的ZP3基因序列与GenBank上已发表的几种鼠的ZP3基因序列进行同源性比较,将有助于哺乳动物受精机理的阐明与免疫不育疫苗的设计,同时也有助于了解这些鼠在系统进化中的相对地位. 展开更多
关键词 草原 透明带3 ZP3基因 基因序列 同源性分析 精子 糖蛋白 受精机理
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草原兔尾鼠卵透明带3基因重组腺病毒载体的构建及表达 被引量:3
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作者 陈邦党 张富春 +2 位作者 孙美玉 李轶杰 马正海 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期707-710,共4页
目的:探索制备免疫不育疫苗的新途径,获得草原兔尾鼠卵透明带3(LZP3)重组腺病毒减毒活疫苗。方法:将LZP3基因亚克隆到穿梭质粒pShuttle-CMV上,采用细菌内同源重组"两步转化法"构建携带LZP3基因的重组腺病毒载体。获得的重组... 目的:探索制备免疫不育疫苗的新途径,获得草原兔尾鼠卵透明带3(LZP3)重组腺病毒减毒活疫苗。方法:将LZP3基因亚克隆到穿梭质粒pShuttle-CMV上,采用细菌内同源重组"两步转化法"构建携带LZP3基因的重组腺病毒载体。获得的重组腺病毒载体线性化后转染HEK293细胞,包装成病毒颗粒。PCR鉴定重组腺病毒,继而用鉴定正确的重组腺病毒感染HeLa细胞,并以RT-PCR、Western blot检测LZP3的转录和表达。结果:成功构建了携带LZP3基因的重组腺病毒pAd-LZP3载体,其转染293细胞后包装出重组病毒,PCR证实LZP3基因已整合至腺病毒基因组中,病毒的滴度可达1.2×1010pfu/L。RT-PCR和Western blot检测表明RAd-LZP3感染的HeLa细胞中LZP3基因能够有效转录和表达。结论:制备的RAd-LZP3可成功表达LZP3基因,为后续开展RAd-LZP3免疫动物的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 草原 卵透明带3 表达 重组腺病毒
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