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冠状动脉药物洗脱支架的优劣比较:仍然没有最后确认胜者
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作者 陈纪言 《循证医学》 CSCD 2006年第6期321-322,共2页
关键词 药物洗支架 西罗莫司洗支架 紫杉醇洗 支架 冠心病
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腹腔镜联合胆道镜胆管可控式自脱支架治疗胆总管结石合并胆管炎的临床观察 被引量:16
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作者 王海龙 索灵宇 +5 位作者 韩唯杰 张冬胜 马永强 李小龙 王秋红 赵之明 《腹腔镜外科杂志》 2020年第5期374-378,共5页
目的:比较双镜(腹腔镜+胆道镜)联合胆总管探查取石胆管可控式自脱支架置入一期缝合与T管引流治疗胆总管结石合并胆管炎的临床疗效;探讨其可行性与安全性。方法:回顾分析2015年2月至2018年8月因胆囊结石、胆总管结石合并胆管炎行双镜联... 目的:比较双镜(腹腔镜+胆道镜)联合胆总管探查取石胆管可控式自脱支架置入一期缝合与T管引流治疗胆总管结石合并胆管炎的临床疗效;探讨其可行性与安全性。方法:回顾分析2015年2月至2018年8月因胆囊结石、胆总管结石合并胆管炎行双镜联合胆囊切除、胆总管探查取石术的84例患者的临床资料,按术中胆总管引流方式分为可控式自脱支架置入胆管内引流一期缝合组(观察组,n=54)与T管引流组(对照组,n=30),比较两组手术时间、术中出血量、术后肛门排气时间、术后腹腔引流管留置时间、胆漏发生率、住院时间、降钙素原、C反应蛋白、总胆红素、谷丙转氨酶;记录支架管脱落时间与T管拔除时间。结果:84例患者均顺利完成手术;观察组与对照组手术时间[(117.9±45.2)min vs.(138.4±52.7)min]、住院时间[(8.1±2.2)d vs.(10.6±3.1)d]、术后腹腔引流管留置时间[(6.6±1.4)d vs.(8.6±2.6)d]差异有统计学意义(P<0.05)。对照组2例因取石困难术后8周经T管窦道再次取石成功,两组均无术后出血。可控式自脱落支架排出时间为2~6周,拔除T管时间8周。随访12个月,两组均无残余结石、胆管狭窄及支架管残留。结论:腹腔镜联合胆道镜胆总管探查取石胆管可控式自脱支架置入一期缝合术可作为治疗胆总管结石合并胆管炎的常规术式,效果确切,可达到胆道引流的目的,而且避免了留置T管带来的治疗周期长及患者生活不便、水电解质失衡等问题,具有手术创伤小、安全、治疗周期短、操作简便等优势,值得临床推广应用。 展开更多
关键词 胆总管结石 胆管炎 腹腔镜检查 胆道镜检查 可控式自支架
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双镜联合胆总管探查取石胆管可控式自脱支架置入一期缝合与T管引流治疗胆总管结石合并胆管炎疗效分析 被引量:3
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作者 孙勇 赵爱祥 《系统医学》 2021年第23期113-116,共4页
目的探讨在胆总管结石并发胆管炎患者治疗中,分别以双镜联合胆总管探查取石胆管可控式自脱支架置入一期缝合与T管引流治疗的价值。方法选取2017年1月—2020年12月于该院就医的胆总管结石并发胆管炎患者78例,以术中引流方式分组,常规组(n... 目的探讨在胆总管结石并发胆管炎患者治疗中,分别以双镜联合胆总管探查取石胆管可控式自脱支架置入一期缝合与T管引流治疗的价值。方法选取2017年1月—2020年12月于该院就医的胆总管结石并发胆管炎患者78例,以术中引流方式分组,常规组(n=39)以T管引流,观察组(n=39)以可控式自脱支架置入胆管内引流一期缝合,统计两组手术指标、术后并发症发生率与疾病复发率。结果观察组手术时间(117.4±45.2)min、腹腔引流管拔除时间(6.7±1.2)d、住院时间(8.2±1.9)d,均低于常规组,差异有统计学意义(t=2.033、4.362、4.045,P<0.05);观察组术中出血量(15.0±4.6)mL、肛门排气时间(23.2±7.5)h,略优于常规组,但差异无统计学意义(t=1.025、1.725,P>0.05)。观察组术后并发症总发生率2.56%低于常规组20.51%,差异有统计学意义(χ^(2)=4.522,P<0.05)。观察组结石和胆管炎复发率为2.56%低于常规组的7.69%,但差异无统计学意义(χ^(2)=0.264,P>0.05)。结论通过以双镜联合胆总管探查取石胆管可控式自脱支架置入一期缝合治疗,可有效缩短患者住院时间,促进其尽快恢复的同时,还能降低患者术后并发症发生风险,且复发率较低,适宜深入研究与推广。 展开更多
关键词 胆总管结石 胆管炎 双镜 可控式自支架 T管引流
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腹腔镜联合胆道镜胆总管探查可控式自脱支架置入一期缝合术治疗胆囊结石合并胆总管结石的效果 被引量:2
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作者 高刚峰 《临床医学研究与实践》 2021年第24期79-81,共3页
目的探讨腹腔镜联合胆道镜胆总管探查可控式自脱支架置入一期缝合术治疗胆囊结石合并胆总管结石的效果。方法将2018年4月至2020年4月收治的86例胆囊结石合并胆总管结石患者根据抽签法分为对照组与观察组,各43例。对照组采用腹腔镜联合... 目的探讨腹腔镜联合胆道镜胆总管探查可控式自脱支架置入一期缝合术治疗胆囊结石合并胆总管结石的效果。方法将2018年4月至2020年4月收治的86例胆囊结石合并胆总管结石患者根据抽签法分为对照组与观察组,各43例。对照组采用腹腔镜联合胆道镜胆总管探查T管引流术治疗,观察组采用腹腔镜联合胆道镜胆总管探查可控式自脱支架置入一期缝合术治疗。比较两组的临床效果。结果术后1 d,两组的血清NE、Cor及ACTH水平均升高,但观察组低于对照组(P<0.05)。观察组的手术时间、引流管留置时间及住院时间均短于对照组(P<0.05)。术后3 d,两组的CRP、TNF-α及PCT水平均升高,但观察组低于对照组(P<0.05)。结论腹腔镜联合胆道镜胆总管探查可控式自脱支架置入一期缝合术治疗胆囊结石合并胆总管结石的效果显著,有助于降低患者创伤应激反应,更利于术后恢复,并能控制炎性反应。 展开更多
关键词 腹腔镜 胆道镜 可控式自支架置入 胆总管探查一期缝合 胆囊结石 胆总管结石
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异种(猪)脱细胞真皮与自体表皮复合移植研究 被引量:110
5
作者 冯祥生 潘银根 +2 位作者 谭家驹 阮树斌 杜永军 《中华整形外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第1期40-42,共3页
目的 为深度烧伤、瘢痕切除控制瘢痕增生与组织凹陷等寻求良好、廉价的覆盖与充填材料。方法 健康的白色小猪 ,活杀后剥其皮肤 ,用固定剂对异种 (猪 )皮肤细胞外基质固定交联 ,盐水法去除表皮 ,保留基底膜 ,用酶化学剂去除异种 (猪 )... 目的 为深度烧伤、瘢痕切除控制瘢痕增生与组织凹陷等寻求良好、廉价的覆盖与充填材料。方法 健康的白色小猪 ,活杀后剥其皮肤 ,用固定剂对异种 (猪 )皮肤细胞外基质固定交联 ,盐水法去除表皮 ,保留基底膜 ,用酶化学剂去除异种 (猪 )皮肤细胞 ,使其失去抗原性 ,保留完整的基底膜和细胞外基质的形态 ,制成网状异种 (猪 )脱细胞真皮支架。结果 对 2 3例病人进行异种(猪 )脱细胞真皮支架移植 7d左右 ,再植自体刃厚大张皮的二步法复合移植 ,成活率 ( 87 0±2 5 4 ) % ,采用一步法即异种皮脱细胞真皮支架 +自体刃厚皮同时复合移植 ,成活率 ( 60 0± 3 4 ) %。复合移植成活后的创面愈合平坦 ,颜色淡红或近似正常皮肤 ,表面光滑 ,外观平整 ,触软 ,皮肤可捏起。因病例情况不同可见无瘢痕增生或轻度瘢痕增生。结论 异种 (猪 )脱细胞真皮支架 +自体刃厚皮复合移植是覆盖深度烧伤创面、瘢痕切除创面 ,以及组织凹陷充填的廉价的较理想材料。 展开更多
关键词 烧伤 复合移植 细胞真皮支架
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人脐动脉脱细胞支架的制备及其生物相容性 被引量:15
6
作者 吴春根 方宁涛 潘銮凤 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2007年第26期5082-5085,共4页
目的:制备脱细胞人脐动脉支架并检测其与内皮细胞的相容性。方法:实验于2005-11/2006-12在复旦大学上海医学院分子生物学实验室完成。实验材料:健康新生儿的新鲜脐带(产妇知情同意并自愿捐献)。实验方法:①脱细胞脐动脉支架的制备:分离... 目的:制备脱细胞人脐动脉支架并检测其与内皮细胞的相容性。方法:实验于2005-11/2006-12在复旦大学上海医学院分子生物学实验室完成。实验材料:健康新生儿的新鲜脐带(产妇知情同意并自愿捐献)。实验方法:①脱细胞脐动脉支架的制备:分离脐动脉放于离心管中,先用低渗后用等渗的十二烷基硫酸钠处理,再用核酸酶消化。脱细胞脐动脉支架作苏木精-伊红染色、Movat五色法染色及透射电镜观察。②支架与内皮细胞共培养:将脱细胞脐动脉支架切成小块,移入24孔培养板中。实验组每孔接种1.5mL的脐静脉内皮细胞悬液,对照组未种细胞,只加1.5mL的培养液,1周后进行扫描电镜观察。实验评估:①脱细胞脐动脉支架的形态。②血管内皮细胞在脱细胞脐动脉支架上黏附生长情况。结果:①脱细胞脐动脉支架的形态:光镜下对照组样品中观察到深蓝色的细胞核,实验组细胞结构被完全破坏,核破碎后被彻底清除,未见核碎片,血管壁纤维组织染成红色,呈整齐排列,组织结构未见明显的疏松;Movat五色法染色显示,脱细胞血管无红色的细胞质和黑色的细胞核,只见呈现整齐排列的波浪状黑色的弹性纤维,其间散布着蓝色的糖蛋白和网状纤维;透射电镜下观察到交错排列的胶原纤维和弹性纤维,有少量碎片存在,未见细胞样结构。②血管内皮细胞在脱细胞脐动脉支架上黏附生长情况:脐静脉内皮细胞种植于脱细胞脐动脉支架后,扫描电镜观察到可黏附生长并形成完整内膜层。结论:用十二烷基硫酸钠和核酸酶联合消化人脐动脉能够制备良好的脱细胞血管支架,并且对内皮细胞有良好的组织相容性。 展开更多
关键词 血管组织工程 细胞血管支架 十二烷基硫酸钠 人血管内皮细胞
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肝衰竭修复替代治疗的现状与发展对策 被引量:12
7
作者 郭伟 卢姗 +1 位作者 范红 李君 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2020年第20期3248-3255,共8页
背景:为解决肝移植的临床应用受供肝来源短缺限制的问题,世界各国科学家正在积极探索,相继研究发展了人工肝、组织工程肝脏、异种器官移植等技术手段以期解决缓解器官短缺的问题,从而对肝衰竭起到一个修复或替代的治疗作用。目的:阐述... 背景:为解决肝移植的临床应用受供肝来源短缺限制的问题,世界各国科学家正在积极探索,相继研究发展了人工肝、组织工程肝脏、异种器官移植等技术手段以期解决缓解器官短缺的问题,从而对肝衰竭起到一个修复或替代的治疗作用。目的:阐述肝衰竭修复替代治疗的发展历程、研究现状和未来预期。方法:检索web of science、万方数据库2000至2019年发表的文献,检索关键词为“artificial liver,liver tissue engineering,hepatic failure,肝衰竭,肝移植”。结果与结论:针对肝衰竭等晚期肝脏疾病,主要有原位肝移植、细胞移植、人工肝系统和组织工程肝脏等修复替代治疗手段。国内目前已有多家医院和机构自主研发了人工肝装置,尽管生物型人工肝和混合型人工肝在肝衰竭治疗上展现出很好的发展前景,但大多仍处于动物实验阶段,未来应加大生物反应器的研发力度,增强支架内的细胞活率。利用生物材料和种子细胞构建的组织工程肝脏可以在一定程度上模拟肝脏的合成、解毒、代谢和分泌等生理性功能,可经体内移植治疗终末期肝病,是组织功能领域的研究热点,而解决生物支架体内移植的凝血问题、促进支架的血管化形成是该领域的需要努力的方向。异种移植是解决人类器官供体严重短缺的最佳途径,但该技术距离临床应用依然还有很长的路要走。 展开更多
关键词 组织工程 肝移植 组织工程肝脏 人工肝 肝衰竭 细胞支架 3D打印 血管化
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组织工程血管脱细胞支架主要组织相容性复合体Ⅰ抗原性的免疫组化观察 被引量:6
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作者 刘太华 张炎 +3 位作者 姜宗来 李玉泉 刘波 张秀花 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期72-74,F004,共4页
目的 :探讨组织工程血管全生物支架的免疫原性的检测方法。 方法 :取猪颈总动脉 ,剥离外膜 ,剪成 2 cm长的血管段 ,随机分为 3组 :对照组、脱细胞组和脱细胞加碱处理组 ,每组 5段。以免疫组化方法检测血管脱细胞处理前后主要组织相容性... 目的 :探讨组织工程血管全生物支架的免疫原性的检测方法。 方法 :取猪颈总动脉 ,剥离外膜 ,剪成 2 cm长的血管段 ,随机分为 3组 :对照组、脱细胞组和脱细胞加碱处理组 ,每组 5段。以免疫组化方法检测血管脱细胞处理前后主要组织相容性复合体 (MHC )的变化情况 ,并将检测结果作图像分析。 结果 :对照组血管壁 MHC 高表达 ,脱细胞处理后 MHC 明显减少。图像分析得出阳性颗粒面积与视场面积比 :对照组为 (2 4 .0 9± 6 .0 9) % ,脱细胞组为 (6 .71± 2 .1 8) % ,脱细胞加碱处理组为 (1 .6 2± 0 .76 ) % ,组间比较差别均有显著意义 (P<0 .0 1 )。 结论 :MHC 展开更多
关键词 组织工程 血管细胞支架 免疫组织化学 免疫原性 主要组织相容性复合体I 免疫排斥反应
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严重复合组织缺损皮瓣修复术后应用自体脂肪干细胞构建组织工程骨重建骨支架 被引量:9
9
作者 郭恩琪 谢庆平 +1 位作者 朱孜冠 索岩 《中华显微外科杂志》 CSCD 北大核心 2017年第3期213-217,共5页
目的探讨严重复合组织缺损皮瓣修复术后采用自体脂肪干细胞(ADSCs)复合脱钙骨支架构建组织工程骨重建骨支架的临床疗效。方法2013年4月至2015年6月.共收治创伤性骨皮肤复合组织缺损的患者9例,男7例,女2例,年龄20~58岁,平均43岁... 目的探讨严重复合组织缺损皮瓣修复术后采用自体脂肪干细胞(ADSCs)复合脱钙骨支架构建组织工程骨重建骨支架的临床疗效。方法2013年4月至2015年6月.共收治创伤性骨皮肤复合组织缺损的患者9例,男7例,女2例,年龄20~58岁,平均43岁。一期选择腹壁下动脉穿支(DIEP)皮瓣修复创面皮肤及软组织缺损。同时采用皮瓣修薄时切除的多余脂肪组织,经体外培养获取ADSC。并诱导向成骨细胞转化,然后复合同种异体脱钙骨支架构建组织工程骨。二期将制备完成的组织工程骨回植体内重建骨支架.并同时行皮瓣修薄整形术。术后进行随访。结果术后9例随访12~36个月.平均18个月。截至末次随访.5例胫骨中下段骨缺损者新骨生长明显.均已达到临床愈合标准.可完全负重行走。1例肱骨中段骨缺损患者新生正常骨组织长人.骨干横截面的2/3以上已恢复连续性。1例肱骨和1例桡骨骨缺损者已达骨性愈合。1例颅骨缺损患者CT显示有大量新骨生长。结论应用自体ADSC。构建组织工程骨联合穿支皮瓣为治疗复合组织缺损中合并骨骼大块缺如的患者开辟了一条新的途径.具有取材便利、不产生新的供区损伤、疗效可靠和操作安全等诸多优点。 展开更多
关键词 脂肪干细胞 钙骨支架 组织工程骨 复合缺损 穿支皮瓣
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小鼠骨髓基质干细胞与人耳脱细胞软骨复合培养的研究 被引量:7
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作者 杨宏梅 柏树令 +1 位作者 王志军 高景恒 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 2004年第3期214-216,共3页
目的 探讨以小鼠骨髓基质干细胞 (MSCs)作为组织工程软骨的种子细胞 ,在人耳脱细胞软骨支架上生长的可行性。 方法 将人耳软骨经脱细胞处理 ,得到脱细胞软骨支架。抽取鼠的骨髓 ,经离心得到单个核细胞 ,进行体外分离培养得到 MSCs。... 目的 探讨以小鼠骨髓基质干细胞 (MSCs)作为组织工程软骨的种子细胞 ,在人耳脱细胞软骨支架上生长的可行性。 方法 将人耳软骨经脱细胞处理 ,得到脱细胞软骨支架。抽取鼠的骨髓 ,经离心得到单个核细胞 ,进行体外分离培养得到 MSCs。将鼠的第 2代 MSCs种植于脱细胞软骨支架上 ,体外立体培养 10天 ,在光镜及电镜下观察细胞生长及胶原纤维排列情况。 结果 MSCs在人耳脱细胞软骨支架上能立体培养成活 ,细胞分布不均 ,靠近培养液的一面细胞分布较多 ,其中大部分细胞进入已脱细胞的软骨陷窝内 ,每个陷窝内的细胞数为 1~ 2个。 结论 以鼠 MSCs为种子细胞 ,可在人耳脱细胞软骨支架上良好生长 ,构建组织工程软骨。 展开更多
关键词 小鼠 骨髓基质干细胞 人耳细胞软骨 复合培养 细胞软骨支架
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TritonX-100法制备牛颈静脉脱细胞血管支架 被引量:6
11
作者 陆军 张镜方 +1 位作者 陈欣欣 黄薇 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期347-350,F0003,共5页
【目的】研究经TritonX-100脱细胞处理的牛颈静脉的组织结构和生物力学特性以及作为组织工程血管支架的可能性。【方法】获取10条新鲜带瓣牛颈静脉,随机分为两组,新鲜对照组(n=5)和脱细胞实验组(n=5),脱细胞组血管使用2.5mL/LTritonX-10... 【目的】研究经TritonX-100脱细胞处理的牛颈静脉的组织结构和生物力学特性以及作为组织工程血管支架的可能性。【方法】获取10条新鲜带瓣牛颈静脉,随机分为两组,新鲜对照组(n=5)和脱细胞实验组(n=5),脱细胞组血管使用2.5mL/LTritonX-100等进行脱细胞处理48h,病理切片染色和扫描电镜观察血管壁和瓣膜自身细胞的脱除情况和细胞外基质变化情况;生物力学性能检测血管组织强度变化;体外人内皮种子细胞种植以了解脱细胞支架的生物相容性。【结果】脱细胞处理后,管壁和瓣膜的自身细胞完全脱除而弹力纤维和胶原纤维无明显改变;与新鲜牛颈静脉相比,脱细胞血管的拉伸强度[(16.5±2.61)MPavs(15.5±3.1)MPa;P>0.05]和最大持线力[(7.9±0.9)Nvs(7.0±1.1)N;P>0.05]无明显改变,在100mmHg液压下脱细胞血管无异常扩张;内皮种子细胞在脱细胞血管支架上生长黏附良好。【结论】TritonX-100法对新鲜牛颈静脉进行脱细胞处理效果良好,脱细胞牛颈静脉可作为细胞种植的血管支架使用。 展开更多
关键词 牛颈静脉 细胞支架 组织工程 细胞种植
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大鼠脱细胞肝支架的制备研究
12
作者 陈宁 郭安然 +5 位作者 刘安娜 张玲 王彩 邢君 郑敏 李玲 《湖北科技学院学报(医学版)》 2024年第4期313-318,共6页
目的 本研究旨在探索优化脱细胞肝支架的简易脱细胞方案,可为脱细胞肝的下一步应用研究提供良好的生物材料。方法 依次采用0.9%氯化钠注射液500mL冲洗1h、0.5%乙二醇双(2-氨基乙基醚)四乙酸1500mL冲洗3h和1%十二烷基硫酸钠溶液3000mL冲... 目的 本研究旨在探索优化脱细胞肝支架的简易脱细胞方案,可为脱细胞肝的下一步应用研究提供良好的生物材料。方法 依次采用0.9%氯化钠注射液500mL冲洗1h、0.5%乙二醇双(2-氨基乙基醚)四乙酸1500mL冲洗3h和1%十二烷基硫酸钠溶液3000mL冲洗大鼠肝脏6h,速度均为120滴/min,用来制备脱细胞肝支架。通过HE染色、扫描电镜和免疫荧光染色、DNA含量检测、X线下显影测试和流动性测试等方式检测脱细胞肝的结构完整性和主要成分。结果 经过10h的灌流,肝脏中的血管清晰可见,HE染色中显示脱细胞肝去除了细胞核,免疫组织化学染色见胶原蛋白I、纤连蛋白和层粘连蛋白表达,扫描电镜显示支架呈疏松多孔的结构,DNA含量显示<50ng/mg,X线测试表明对注射进入的显影剂有良好的显影效果,流动性测试表明脱细胞肝保留了较为完整和通畅的血管系统。结论 本研究所采用的脱细胞方法成功制备了脱细胞肝脏模型,达到了较为理想的脱细胞效果。 展开更多
关键词 细胞肝 肝组织工程 细胞支架 肝脏
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不同方法制备大鼠肝脏脱细胞支架及其免疫原性研究 被引量:7
13
作者 姜楠 季茹 +5 位作者 王建锋 韩炜 李伟民 曹阳 王德盛 窦科峰 《现代生物医学进展》 CAS 2013年第5期844-849,共6页
目的:肝脏脱细胞支架(decellularized liver bioscaffold,DLB)在组织工程研究中具有良好前景,但对DLB的免疫原性尚未见探讨。本研究利用不同方案制备大鼠DLB,检测支架成分和体内重塑反应,为制备出低免疫原性的DLB提供改进依据。方法:选... 目的:肝脏脱细胞支架(decellularized liver bioscaffold,DLB)在组织工程研究中具有良好前景,但对DLB的免疫原性尚未见探讨。本研究利用不同方案制备大鼠DLB,检测支架成分和体内重塑反应,为制备出低免疫原性的DLB提供改进依据。方法:选取文献报道的三种方案(分别以SDS,Triton X-100和NP-40为主要洗脱成分),制备F344大鼠DLB,进行HE和Masson染色,检测DLB中DNA、氨基葡聚糖(GAG)以及羟脯氨酸(HYP)含量;再将DLB埋植于C57BL/6小鼠的背部皮下,于术后第3、7和14天取出后进行形态学观察和组织学评分。结果:三种方案均成功制备出符合脱细胞标准的大鼠DLB;形态学结果提示Triton X-100和NP-40方案较SDS方案能更好地保护肝脏超微结构;成分检测结果发现NP-40方案去除DNA的能力显著强于SDS和Triton X-100方案(P<0.05),而对GAG含量的洗脱作用最弱(P<0.05);异种体内埋置实验提示NP-40方案制备的DLB引起的免疫反应强度明显弱于SDS和Triton X-100方案,体内重塑结局评分显著高于SDS和Triton X-100方案。结论:与SDS和Triton X-100方案相比,NP-40方案能更有效地去除肝脏DNA,较好地保留GAG,诱导移植受体对DLB的良性重塑反应,为进一步的体内研究提供更优化的支架。 展开更多
关键词 细胞肝支架 肝组织工程 细胞外基质 免疫原性
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人甲床来源的脱细胞支架搭载骨髓间充质干细胞向指甲干细胞分化的研究
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作者 薛鑫鑫 刘士波 +3 位作者 刘飞 姜洪涛 王培 李小东 《临床和实验医学杂志》 2024年第6期604-607,共4页
目的探究人甲床来源的脱细胞支架搭载骨髓间充质干细胞向指甲干细胞分化的作用。方法收集2022年至2023年在承德医学院附属医院手足外科进行截指术的15例患者的临床废弃甲床组织,制备成脱细胞甲床支架,使用试剂盒检测参照组(未脱细胞组)... 目的探究人甲床来源的脱细胞支架搭载骨髓间充质干细胞向指甲干细胞分化的作用。方法收集2022年至2023年在承德医学院附属医院手足外科进行截指术的15例患者的临床废弃甲床组织,制备成脱细胞甲床支架,使用试剂盒检测参照组(未脱细胞组)与脱细胞组(脱细胞甲床支架组)中总胶原蛋白含量、残留DNA含量;将脱细胞甲床支架与人骨髓间充质干细胞(hMSCs)进行共培养14 d。比较对照组(hMSCs组)与共培养组(脱细胞甲床支架+hMSCs组)体外细胞分化能力及指甲干细胞标志物[角蛋白15,角蛋白17,G蛋白偶联受体6(Lgr6)以及β-联蛋白(β-catenin)蛋白]含量。结果脱细胞组总胶原蛋白含量为(189.62±45.45)μg/mg,低于参照组[(196.02±41.93)μg/mg],但两组相比差异无统计学意义(P>0.05);脱细胞组中DNA含量为(0.41±0.15)μg/mg,明显低于参照组[(0.87±0.13)μg/mg],差异有统计学意义(P<0.05)。培养14 d后,共培养组吸光度值为1.09±0.07,对照组吸光度值为1.10±0.5,两组相比差异无统计学意义(P>0.05)。培养14 d后,共培养组角蛋白15、角蛋白17、Lgr6、β-catenin含量分别为(39.56±5.09)、(45.83±4.01)、(5.74±0.99)、(146.79±5.34)pg/mL,均明显高于对照组[(12.10±4.28)、(10.47±3.19)、(0.93±0.67)、(67.28±7.41)pg/mL],差异均有统计学意义(P<0.05)。结论脱细胞甲床支架中的DNA有被清除、保留胶原蛋白,与hMSCs共培养后细胞增殖能力正常,且可诱导hMSCs向指甲干细胞分化,为临床上治疗甲床缺损提供新思路。 展开更多
关键词 角蛋白15 角蛋白17 人甲床 细胞支架 骨髓间充质干细胞 指甲干细胞
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构建兔软骨脱落细胞三维支架及与干细胞相容性评价的实验研究
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作者 徐菊菊 谢燕燕 +6 位作者 郭志义 马雨凯 王霖虹 杨美荣 邓昭玲 华宝来 闫振宇 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期1012-1022,共11页
目的制备不同浓度的兔软骨脱落细胞支架,并评估其理化性能和干细胞的相容性,为软骨修复提供实验依据。方法Percoll密度分离法培养骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs),并进行流式细胞学鉴定和成骨、成软骨分化... 目的制备不同浓度的兔软骨脱落细胞支架,并评估其理化性能和干细胞的相容性,为软骨修复提供实验依据。方法Percoll密度分离法培养骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs),并进行流式细胞学鉴定和成骨、成软骨分化能力检测。从兔膝、股关节中切取软骨片,进行物理粉碎、反复冻融以及各种酶混合消化脱细胞。为比较并观察不同浓度脱细胞支架的理化性能差异,设计3组支架,浓度分别为100%(A组)、50%(B组)、30%(C组),每组3只。将第3代PKH26示踪的BMSCs接种于最适浓度支架上培养1周,观察细胞生长情况。结果流式技术检测BMSCs表面抗原,CD44、CD90呈阳性表达,CD45阴性表达;成骨诱导茜素红染色可见红色钙结节;软骨诱导阿利新蓝染色见软骨结节呈蓝色;3组支架经苏木素-伊红(HE)、甲苯胺蓝染色后未观察到明显细胞形态。样本脱细胞后的DNA浓度与未脱支架的指标均值差异具有显著性(P<0.05)。糖胺聚糖含量较正常值稍偏低。3组支架两两比较孔径、吸水膨胀率、孔隙率、支架断裂强度、杨氏模量差异具有显著性(P<0.05);干细胞与支架共培养后细胞附着良好。结论Percoll密度分离法可获取高纯度的兔BMSCs;应用混合脱细胞方法脱细胞较彻底。B组支架可作为构建组织工程软骨修复的最适方案。体外培养的BMSCs在B组支架生长良好。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 组织工程 软骨细胞支架 共培养
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肝素化脱细胞血管支架的制备及血液相容性评价
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作者 李霞飞 赵苓苓 +5 位作者 梁峰 张雪薇 张锦锦 林飞 杨托 赵亮 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2024年第17期2631-2636,共6页
背景:脱细胞血管支架能模仿天然血管的微观结构与功能,但在制备过程中出现部分细胞外基质丢失,导致其血液相容性受到影响,因此有必要对脱细胞血管支架进行修饰以提升其血液相容性。目的:评价经Triton-x100/肝素钠处理制备的脱细胞血管... 背景:脱细胞血管支架能模仿天然血管的微观结构与功能,但在制备过程中出现部分细胞外基质丢失,导致其血液相容性受到影响,因此有必要对脱细胞血管支架进行修饰以提升其血液相容性。目的:评价经Triton-x100/肝素钠处理制备的脱细胞血管支架的血液相容性。方法:从SD大鼠中取腹主动脉,随机分为对照组与实验组,对照组采用Triton-x100进行脱细胞处理48 h,实验组采用Triton-x100进行脱细胞处理48 h后进行肝素钠修饰处理。检测两组脱细胞血管支架的形貌、亲水性能,通过复钙化凝血时间实验、血小板黏附实验、动态凝血时间实验、溶血实验及补体激活实验评估两组脱细胞血管支架的血液相容性。结果与结论:①扫描电镜显示两组血管支架表面相对完整,脱细胞处理后血管支架表面出现大量纤维丝,表面微观结构发生了较明显改变;两组血管支架的水接触角均小于天然血管(P<0.0001),两组血管支架的水接触角比较差异无显著性意义(P>0.05)。②实验组血管支架的复钙化凝血时间长于对照组(P<0.05),血管支架膜上黏附的血小板数量少于对照组(P<0.0001),凝血指数大于对照组(P<0.01),补体水平低于对照组(P<0.001);两组血管支架的溶血率均低于国家标准5%。③结果表明,经Triton-x100/肝素钠处理的血管支架具有优良的血液相容性。 展开更多
关键词 细胞血管支架 肝素化 血液相容性 心血管疾病 组织工程
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脱细胞支架复合犬骨髓源内皮祖细胞构建组织工程血管 被引量:5
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作者 冉峰 刘长建 +4 位作者 周敏 卫志庆 乔威 刘昭 乔彤 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2008年第32期6225-6229,共5页
背景:目前临床使用的小口径(<6cm)人工血管因生物相容性差、远期通畅率低,效果并不理想。目的:将犬骨髓源内皮祖细胞与脱细胞血管支架动态复合培养,尝试构建一种全新的组织工程血管代用品。设计、时间及地点:随机对照实验,细胞学、... 背景:目前临床使用的小口径(<6cm)人工血管因生物相容性差、远期通畅率低,效果并不理想。目的:将犬骨髓源内皮祖细胞与脱细胞血管支架动态复合培养,尝试构建一种全新的组织工程血管代用品。设计、时间及地点:随机对照实验,细胞学、组织病理学体外观察,于2005-12/2007-12在南京大学医学院附属鼓楼医院实验室完成。材料:通过去污剂-酶消化法制备犬颈动脉脱细胞支架;采用密度梯度离心法和内皮系条件培养法,分离扩增犬骨髓源内皮祖细胞,将扩增后的内皮祖细胞种植于脱细胞支架并置于生物反应器中动态构建组织工程血管。方法:20只犬均暴露两侧颈总动脉及一侧股动脉,每只犬在3段血管随机移植组织工程血管、脱细胞血管支架及自体静脉,分别为组织工程血管组、脱细胞血管支架组及自体静脉组,每组的移植血管数量均为20例。主要观察指标:对培养的内皮祖细胞进行免疫组化鉴定;血管移植术后6个月行数字减影血管造影、病理切片、扫描电镜等观察移植效果。结果:犬骨髓单个核细胞在体外培养10d后形成"铺路石样"细胞,免疫组化结果符合内皮祖细胞表型特征;将内皮祖细胞与脱细胞支架置于生物反应器培养10d后,种子细胞在血管腔内黏附生长;犬动脉移植术6个月后,组织工程血管及自体静脉通畅率分别为85%,90%,均优于脱细胞支架移植组25%。结论:犬骨髓源内皮祖细胞复合脱细胞血管支架,可获得一种具有良好生物相容性和通畅率的生物人工血管。 展开更多
关键词 内皮祖细胞 细胞支架 组织工程血管 生物材料
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泪道重建手术中修复材料的应用及研究进展 被引量:5
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作者 尹玥 肖彩雯 范先群 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2015年第7期689-691,696,共4页
对于各种病因导致的严重泪道结构损伤或缺失,选择最佳的治疗方案是临床难题之一。当泪道系统难以再通或者无法修复时,可选择泪道旁路手术,以期建立一条新的通道。目前临床上重建泪道系统的材料,大多选用人工泪管或自体组织移植,两者各... 对于各种病因导致的严重泪道结构损伤或缺失,选择最佳的治疗方案是临床难题之一。当泪道系统难以再通或者无法修复时,可选择泪道旁路手术,以期建立一条新的通道。目前临床上重建泪道系统的材料,大多选用人工泪管或自体组织移植,两者各有利弊。近年来,随着分子生物学和组织工程技术的发展,一些新型材料不断被发明,并被应用于临床,为泪道阻塞性疾病的治疗带来了新材料和新思路。 展开更多
关键词 泪道重建手术 泪道义管 自体组织移植 细胞组织支架 POSS—PCU
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脱细胞羊膜支架复合Scleraxis慢病毒转染的人羊膜间充质干细胞促进兔腱-骨愈合 被引量:4
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作者 张骏 杨继滨 +5 位作者 金瑛 邹刚 汤井沣 葛振 杨启帆 刘毅 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2020年第13期2061-2067,共7页
背景:脱细胞羊膜支架是一种天然支架,具有良好的生物相容性,已经广泛应用于组织工程的相关领域。Scleraxis能够促进人羊膜间充质干细胞向人韧带细胞分化,进而促进腱-骨愈合。目的:探讨脱细胞羊膜支架复合Scleraxis慢病毒转染的人羊膜间... 背景:脱细胞羊膜支架是一种天然支架,具有良好的生物相容性,已经广泛应用于组织工程的相关领域。Scleraxis能够促进人羊膜间充质干细胞向人韧带细胞分化,进而促进腱-骨愈合。目的:探讨脱细胞羊膜支架复合Scleraxis慢病毒转染的人羊膜间充质干细胞能否促进兔腱-骨愈合。方法:①体外分离培养人羊膜间充质干细胞,经过传代培养后观察细胞的形态;②体外构建Scleraxis慢病毒然后以最适感染复数转染第3代人羊膜间充质干细胞,q-PCR检测其转染效率;③用酶消化法制备脱细胞羊膜支架,然后体外将转染Scleraxis慢病毒的人羊膜间充质干细胞接种到脱细胞羊膜支架上面,鬼笔环肽染色观察细胞在支架上的生长情况;④将脱细胞羊膜支架复合转染Scleraxis慢病毒的人羊膜间充质干细胞包裹新西兰大白兔跟腱,然后移植到骨隧道内,观察其对腱-骨愈合的影响。结果与结论:①第3代人羊膜间充质干细胞呈贴壁生长,细胞生长状态良好;②Scleraxis慢病毒转染后96 h表达稳定的绿色荧光,Slclerxis的m RNA表达水平明显提高,说明转染成功;③脱细胞羊膜支架的上皮细胞基本消失,证明脱细胞比较彻底,同时其基底层完整保留,细胞外基质成分仍然存在;④通过鬼笔环肽染色发现细胞在脱细胞羊膜支架上生长良好,增殖未受到影响;⑤体内实验结果提示:人脱细胞羊膜支架复合Scleraxis慢病毒转染的人羊膜间充质干细胞具有促进腱-骨愈合的作用。 展开更多
关键词 羊膜间充质干细胞 细胞羊膜 细胞羊膜支架 腱-骨愈合 SCLERAXIS 组织工程
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改良萃取法制备脱细胞神经支架的去髓鞘效果评价 被引量:4
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作者 侯博 李文胜 +6 位作者 秦峰 王辉 何海勇 龚谨 叶卓鹏 张保豫 郭英 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期322-325,共4页
【目的】评价改良化学方法制备脱细胞神经支架的去髓鞘与脱细胞效果。【方法】12只成年SD大鼠(230~280g),取双侧坐骨神经,随机分为3组,每组8例,分别采用不同的处理方法。正常对照组:不作任何处理;Hudson组:采用Triton X-200、磺基三甲... 【目的】评价改良化学方法制备脱细胞神经支架的去髓鞘与脱细胞效果。【方法】12只成年SD大鼠(230~280g),取双侧坐骨神经,随机分为3组,每组8例,分别采用不同的处理方法。正常对照组:不作任何处理;Hudson组:采用Triton X-200、磺基三甲铵乙内酯-10(SB-10)、磺基三甲铵乙内酯-16(SB-16)处理;改良组:采用Triton X-200、SB-10、SB-16联合脱氧胆酸钠(SDC)及过氧乙酸(PAA)处理。处理后行HE染色、甲苯胺蓝染色及透射电镜检查,观察脱细胞、去髓鞘程度及基底膜保存情况。【结果】形态学检查显示,与对照组相比,Hudson组中的细胞核结构完全消失,甲苯胺蓝染色为散在同心圆状的髓鞘结构,透射电镜下显示髓鞘板层成分保留,但有崩解断裂,轴突依然存在;改良组细胞核完全去除,与Hudson组不同的是,甲苯胺蓝染色显示为不规则多孔状结构,髓鞘成分消失,透射电镜下显示髓鞘及轴突成分彻底去除,基底膜管壁结构清晰并完整保留。【结论】改良萃取法制备脱细胞神经支架能够有效地去除细胞和髓鞘成分,同时基底膜管结构保留完整。 展开更多
关键词 萃取法 神经 细胞支架 髓鞘 基底膜管
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