cPKCγ参与低氧预适应对小鼠脑缺血皮质内CRMP2水解和磷酸化的调节 被引量：2

1

作者 刘燕燕 杨璇 +3 位作者 韩松 苏吉儿 罗宏 李俊发 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2012年第1期25-30,共6页

目的探讨经典型蛋白激酶Cγ(cPKCγ)在低氧预适应(HPC)调节小鼠脑缺血皮质内脑衰反应蛋白-2(CRMP2)水解和磷酸化中作用。方法利用雄性BALB/c小鼠(18～22 g)HPC和大脑中动脉阻塞(MCAO)模型,借助蛋白印迹、免疫共沉淀和免疫组化等生物化... 目的探讨经典型蛋白激酶Cγ(cPKCγ)在低氧预适应(HPC)调节小鼠脑缺血皮质内脑衰反应蛋白-2(CRMP2)水解和磷酸化中作用。方法利用雄性BALB/c小鼠(18～22 g)HPC和大脑中动脉阻塞(MCAO)模型,借助蛋白印迹、免疫共沉淀和免疫组化等生物化学技术,观察cPKCγ激活对小鼠缺血脑皮质内CRMP2蛋白水解程度(BDP)和磷酸化水平(p-CRMP2)、cPKCγ-CRMP2相互作用和皮质缺血半影区内p-CRMP2阳性细胞数的影响。结果 HPC显著提高缺血脑皮质半影区内p-CRMP2水平,降低BDP产物形成(P<0.05),而侧脑室注射cPKCγ抑制剂Go6983(6nmol/L)可明显解除HPC对半影区内CRMP2蛋白水解和磷酸化的调节作用(P<0.05);免疫共沉淀结果提示,cPKCγ激活程度参与HPC对缺血脑皮质半影区内cPKCγ-CRMP2相互作用的调节;同时,cPKCγ激活与HPC提高脑缺血半影区内p-CRMP2阳性细胞数有关(P<0.05)。结论 cPKCγ参与HPC对小鼠缺血脑皮质内CRMP2水解与磷酸化的调节。 展开更多

关键词 缺血/低氧预适应 大脑中动脉阻塞 经典型蛋白激酶C 脑衰反应蛋白-2

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栀子苷对抑郁模型大鼠前额叶脑衰反应蛋白2表达的影响及其潜在分子机制 被引量：5

2

作者 陈光辉 陈强 +1 位作者 张玲莉 周本宏 《中国药师》 CAS 2021年第10期1794-1799,共6页

目的:观察慢性温和应激(CMS)抑郁模型大鼠前额叶哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、S6K和脑衰反应蛋白2(CRMP2)的表达变化,并探讨栀子苷抗抑郁作用的机制。方法:40只雄性Wistar大鼠随机平均分为4组:正常对照组、模型组、氟西汀组(阳性对照,... 目的:观察慢性温和应激(CMS)抑郁模型大鼠前额叶哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、S6K和脑衰反应蛋白2(CRMP2)的表达变化,并探讨栀子苷抗抑郁作用的机制。方法:40只雄性Wistar大鼠随机平均分为4组:正常对照组、模型组、氟西汀组(阳性对照,5 mg·kg^(-1)·d^(-1))和栀子苷组(50 mg·kg^(-1)·d^(-1))。正常对照组予以常规饲养,其余各组建立大鼠CMS抑郁症模型。造模28 d后,氟西汀组和栀子苷组灌胃给与相应药物,正常对照组和模型组给与等量生理盐水,1次/d,持续14 d,给药期间各组大鼠均继续给予CMS。给药结束后进行糖水偏好实验、旷场实验和强迫游泳实验行为学检测;分别采用RT-qPCR和Western blot检测前额叶m-TOR、S6K、CRMP2 mRNA和蛋白表达。结果:模型组大鼠表现出明显的抑郁样行为,前额叶m-TOR、S6K和CRMP2表达显著降低,与正常对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01);经药物治疗后,CMS大鼠的抑郁样行为明显减少,前额叶m-TOR、S6K和CRMP2表达抑制被显著逆转(P<0.05或P<0.01)。结论:前额叶m-TOR/S6K/CRMP2信号抑制介导CMS大鼠抑郁样行为的发生,栀子苷可以缓解CMS大鼠抑郁样行为,同时逆转CMS所致的前额叶m-TOR、S6K和CRMP2的低表达。 展开更多

关键词 栀子苷 抑郁症 前额叶 脑衰反应蛋白2 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白

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脑衰反应调节蛋白-2(CRMP-2)促进海马神经元轴突生长 被引量：4

3

作者 郑红云 李艳 童永清 《卒中与神经疾病》 2011年第3期145-147,150,共4页

目的研究脑衰反应调节蛋白2（collapsin response mediator protein,CRMP-2）对原代海马神经元轴突生长的影响,探讨CRMP-2在神经元轴突生成中的作用。方法每次原代取孕18d SD大鼠1只,每只孕鼠含胎鼠约12~15只。显微镜下分离12~15只胎鼠... 目的研究脑衰反应调节蛋白2（collapsin response mediator protein,CRMP-2）对原代海马神经元轴突生长的影响,探讨CRMP-2在神经元轴突生成中的作用。方法每次原代取孕18d SD大鼠1只,每只孕鼠含胎鼠约12~15只。显微镜下分离12~15只胎鼠双侧海马组织,消化法培养原代海马神经元。原代海马神经元培养采用核电转实验转染绿色荧光蛋白（enhanced green fluorescence protein,EGFP）和野生型CRMP-2（wild type（wt）CRMP2）和突变型T514D-CRMP2（突变体,模拟失活型CRMP-2）。培养72h固定做免疫荧光双标,分别绿色荧光蛋白（EGFP）和轴突标志物Tau-1,采用激光共聚焦显微镜和普通光学显微镜观察海马神经元形态变化。结果转染EGFP载体的对照组神经元正常发育,培养至72h,神经元轴突特异性表达标志物蛋白Tau-1;过表达了wtCRMP-2的神经元除了生成一条长的特异性表达Tau-1的轴突,另外一条突起也发育成了特异性表达Tau-1的轴突;而过表达了失活型CRMP-2的神经元发育与正常组相比无差异。结论野生型CRMP-2可明显促进轴突生长,而转染模拟磷酸化CRMP-2的突变体T514D-CRMP2则没有显示任何的促进作用。 展开更多

关键词 脑衰反应调节蛋白2 海马神经元 原代培养 轴突 神经元极性

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CRMP2磷酸化参与阿尔茨海默病的机制研究进展

4

作者 梁璇 慕静然 +2 位作者 骆延 徐陶 曾俊伟 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2024年第10期1467-1472,共6页

阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)是一种常见神经系统退行性疾病。脑衰反应调节蛋白2(collapsin response mediator protein2,CRMP2)在AD病变进展中发挥作用,CRMP2高磷酸化导致神经元轴突末端微管稳定性下降,神经元轴浆运输异... 阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)是一种常见神经系统退行性疾病。脑衰反应调节蛋白2(collapsin response mediator protein2,CRMP2)在AD病变进展中发挥作用,CRMP2高磷酸化导致神经元轴突末端微管稳定性下降,神经元轴浆运输异常,从而导致神经元线粒体动力学异常,抑制溶酶体自噬能力,导致NMDA受体过度激活。CRMP2磷酸化为AD药物研发提供了思路。本文就有关CRMP2参与AD病变的相关分子机制的研究进展进行综述,以期为靶向药物的研发提供参考资料。 展开更多

关键词 脑衰反应调节蛋白2 阿尔茨海默病 微管 线粒体

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氯化锂对异氟醚诱导的发育期幼鼠海马毒性的影响 被引量：3

5

作者 苗利萍 李珏 +2 位作者 刘雅芳 刘延辉 李玉娟 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第22期1923-1928,共6页

目的探讨氯化锂对异氟醚诱导的发育期幼鼠海马神经细胞凋亡的影响以及糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)/脑衰反应调节蛋白-2(CRMP2)通路的作用。方法 60只出生后7 d的SD大鼠,随机分为空气对照组(Air+NS),氯化锂对照组(Air+LiCl),异氟醚组(Is... 目的探讨氯化锂对异氟醚诱导的发育期幼鼠海马神经细胞凋亡的影响以及糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)/脑衰反应调节蛋白-2(CRMP2)通路的作用。方法 60只出生后7 d的SD大鼠,随机分为空气对照组(Air+NS),氯化锂对照组(Air+LiCl),异氟醚组(Iso+NS)及异氟醚复合不同剂量氯化锂组(Iso+LiCl2,Iso+LiCl4,Iso+LiCl8)。前2组吸入空气6 h,后4组吸入体积分数为0.75%异氟醚6 h。吸入异氟醚前30 min,Air+NS组和Iso+NS组经侧脑室注射5μL生理盐水(NS),Iso+LiCl2组、Iso+LiCl4组、Iso+LiCl8组以及Air+LiCl组分别经侧脑室注射浓度为20、40、80、80 mmol·L^(-1)氯化锂溶液5μL。麻醉结束后即刻蛋白印迹法检测海马激活型caspase-3,磷酸化GSK-3β(p-GSK-3β),GSK-3β,磷酸化CRMP2(p-CRMP2)和CRMP2蛋白表达变化(n=5)。麻醉结束后2 h,TUNEL检测海马CA1区神经细胞凋亡(n=5)。结果 80 mmol·L^(-1)Li Cl可明显减少异氟醚诱导的海马激活型caspase-3蛋白表达(P<0.01)以及TUNEL阳性细胞数目增加(P<0.01)。与Air+NS组比较,Iso+NS组p-GSK-3β表达减少,p-CRMP2表达增加,有统计学意义;与Iso+NS组比较,Iso+LiCl8组p-GSK-3β表达增加了41.03%(P<0.05),p-CRMP2表达减少了23.64%(P<0.05)。结论氯化锂预处理能通过减少海马细胞凋亡来减轻异氟醚对发育期幼鼠的神经毒性作用,抑制GSK-3β/CRMP2通路的激活可能是保护作用的机制之一。 展开更多

关键词 异氟醚 氯化锂 凋亡 糖原合成酶激酶-3Β 脑衰反应调节蛋白-2

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海马AKT/GSK3β/CRMP2信号通路改变对大鼠抑郁样行为及微管蛋白的影响 被引量：3

6

作者 魏艳艳 陈景旭 +4 位作者 肖玲 吴作天 何静 张楠 王高华 《中华行为医学与脑科学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第8期713-718,共6页

目的研究磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol 3 kinase,PI3K)抑制剂LY294002对AKT/GSK3β/CRMP2信号通路的影响,及通路改变对大鼠抑郁样行为及微管蛋白的影响。方法16只成年雄性SD大鼠采用盲法随机分为LY294002组及溶剂DMSO组,每组8... 目的研究磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol 3 kinase,PI3K)抑制剂LY294002对AKT/GSK3β/CRMP2信号通路的影响,及通路改变对大鼠抑郁样行为及微管蛋白的影响。方法16只成年雄性SD大鼠采用盲法随机分为LY294002组及溶剂DMSO组,每组8只。麻醉后进行海马CA1区脑立体置管,置管1周后给予LY294002或DMSO脑立体注射,并进行抑郁样行为检测。采用RT-qPCR技术检测海马AKT、GSK3β、CRMP2、tubulin的mRNA表达水平,采用Western blot检测海马AKT、p-AKT、GSK3β、p-GSK3β、CRMP2、p-CRMP2以及微管动态性相关蛋白Acet-tubulin、Tyr-tubulin表达水平。比较两组大鼠抑郁样行为表现及分子表达差异。结果旷场实验显示,LY294002组大鼠的中心移动距离较DMSO组显著下降[(3.64±2.17)cm;(31.51±12.68)cm;t=2.69,P=0.03];LY294002组中心区持续时间较DMSO组亦显著下降[(0.73±0.46)s;(4.85±2.10)s;t=2.33,P=0.04]。强迫游泳测试结果显示LY294002组大鼠的不动时间有升高的趋势,但差异无统计学意义。糖水偏好实验显示两组大鼠糖水消耗量差异无统计学意义(P>0.05)。RT-qPCR结果显示,LY294002组大鼠海马组织CRMP2 mRNA表达水平显著下降(P<0.05)。Western blot结果显示,与DSMO组比较,LY294002组大鼠海马组织p-AKT及p-GSK3β表达水平下降(P<0.05);CRMP2表达水平降低,p-CRMP2表达水平显著升高,同时,Tyr-tubulin表达水平下降,Acet-tubulin表达水平显著升高,两组均差异有统计学意义(均P<0.05)。结论LY294002通过影响AKT/GSK3β/CRMP2信号通路,导致微管动态性损害,并使大鼠出现抑郁样行为。 展开更多

关键词 PI3K抑制剂 脑衰反应调节蛋白2 信号通路 微管蛋白 抑郁

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中枢神经系统脑衰反应调节蛋白2的研究进展 被引量：3

7

作者 邢进 孙兆良 冯东福 《中华神经外科疾病研究杂志》 CAS 2016年第6期564-566,共3页

脑衰反应调节蛋白2（collapsin response mediator protein2，CRMP2）又称二氢嘧啶酶相关蛋白2，属于CRMPs蛋白家族的5种亚型之一。在生理情况下CRMP2可作用于细胞骨架成分（如微管、微丝等），通过对生长锥的生长、塌陷等行为的调节参... 脑衰反应调节蛋白2（collapsin response mediator protein2，CRMP2）又称二氢嘧啶酶相关蛋白2，属于CRMPs蛋白家族的5种亚型之一。在生理情况下CRMP2可作用于细胞骨架成分（如微管、微丝等），通过对生长锥的生长、塌陷等行为的调节参与神经元的生长发育过程。 展开更多

关键词 脑衰反应调节蛋白2 神经元轴突 中枢神经系统疾病

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美满霉素对阿尔茨海默病大鼠前额叶皮层CRMP-2和Caspase-3表达的影响 被引量：3

8

作者 孙缦利 邓海峰 +2 位作者 马玲 王兴红 常全忠 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2018年第17期4236-4239,共4页

目的探讨美满霉素对阿尔茨海默病(AD)大鼠学习记忆能力及前额叶皮层脑衰反应调节蛋白(CRMP)-2和半胱天冬酶(Caspase)-3表达的影响及其对AD大鼠脑保护作用的机制。方法侧脑室注射Aβ25～35建立AD大鼠模型。48只健康雄性SD大鼠随机分成对... 目的探讨美满霉素对阿尔茨海默病(AD)大鼠学习记忆能力及前额叶皮层脑衰反应调节蛋白(CRMP)-2和半胱天冬酶(Caspase)-3表达的影响及其对AD大鼠脑保护作用的机制。方法侧脑室注射Aβ25～35建立AD大鼠模型。48只健康雄性SD大鼠随机分成对照组、模型组和美满霉素(50 mg/kg)组,每组16只。Morris水迷宫实验检测学习记忆能力的变化,免疫组织化学方法检测前额叶皮层CRMP-2和Caspase-3的表达情况,Western印迹检测前额叶皮层CRMP-2和磷酸化(p)-CRMP-2的表达情况。结果 Morris水迷宫实验结果显示,美满霉素干预后,AD大鼠学习记忆能力明显改善;免疫组织化学法和Western印迹检测结果显示,与对照组比较,模型组前额叶皮层p-CRMP-2和Caspase-3表达明显升高,CRMP-2表达明显降低(P<0.01),与模型组比较,美满霉素组前额叶皮层p-CRMP-2和Caspase-3表达明显降低,CRMP-2表达明显升高(P<0.01)。结论美满霉素可能通过下调pCRMP-2和Caspase-3的表达、增加CRMP-2表达,抑制AD大鼠神经细胞凋亡,从而改善AD大鼠学习记忆能力。 展开更多

关键词 美满霉素 阿尔茨海默病 细胞凋亡 脑衰反应调节蛋白2

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视神经损伤后脑衰反应调节蛋白-2表达及其磷酸化修饰的变化及意义 被引量：2

9

作者 陈小璠 袁容娣 +1 位作者 叶剑 陈春林 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期874-877,共4页

背景 脑衰反应调节蛋白-2（CRMP-2）具有促进中枢神经轴突生长的作用,但中枢神经损伤后在细胞周期素依赖蛋白激酶5（CDK5）诱导下CRMP-2会发生过度磷酸化修饰,从而导致生长锥塌陷,阻碍神经系统的修复.视神经作为一种特殊的中枢神经组织... 背景 脑衰反应调节蛋白-2（CRMP-2）具有促进中枢神经轴突生长的作用,但中枢神经损伤后在细胞周期素依赖蛋白激酶5（CDK5）诱导下CRMP-2会发生过度磷酸化修饰,从而导致生长锥塌陷,阻碍神经系统的修复.视神经作为一种特殊的中枢神经组织,其损伤后是否发生CRMP-2表达的变化和磷酸化修饰鲜见研究报道. 目的 探讨视神经钳夹伤小鼠模型视神经组织中CRMP-2表达及其磷酸化修饰水平的动态变化及意义.方法 选取8～9周龄健康BALB/c小鼠48只,雌雄不限.采用随机数字表法将小鼠随机分为假手术组和损伤后3、7、14 d组,每组12只.各损伤组小鼠右眼术中暴露视神经,用小号动脉夹于球后2 mm处夹持视神经10s,假手术组小鼠手术操作同各损伤组,但不钳夹视神经.分别于术后3、7、14 d获取小鼠视神经组织,采用实时荧光定量PCR法检测各组小鼠视神经组织中CRMP-2 mRNA的相对表达量;采用Western blot法检测各组小鼠视神经组织中CRMP-2蛋白、磷酸化CRMP-2（p-CRMP-2）及CDK5的表达变化,检测结果进行组间比较.结果 假手术组及损伤后3、7、14d组小鼠视神经组织中CRMP-2 mRNA及蛋白相对表达量的总体比较差异均无统计学意义（CRMP-2 mRNA：F=2.971,P=0.097;CRMP4蛋白：F=1.202,P=0.370）.假手术组及损伤后3、7、14 d组小鼠视神经组织中p-CRMP-2蛋白的相对表达量分别为0.001±0.000、0.064±0.003、0.136±0.005和0.346±0.012,CDK5蛋白的相对表达量分别为0.440±0.009、0.723±0.011、0.874±0.015和0.952±0.019,总体比较差异均有统计学意义（p-CRMP-2：F=445.600,P＜0.001;CDK5：F=186.600,P＜0.001）,其中损伤后3、7、14 d组小鼠视神经组织中p-CRMP-2和CDK5蛋白的相对表达量均明显高于假手术组,差异均有统计学意义（均P＜0.01）.结论 小鼠视神经钳夹伤后视神经组织中CRMP-2的表达无明显变化,但视神经组织中CDK5和p-CRMP-2蛋白表达均明显上调,且随着� 展开更多

关键词 脑衰反应调节蛋白-2 细胞周期素依赖蛋白激酶5 中枢神经系统 视神经损伤 生长锥 蛋白质磷酸化 BALB/c小鼠

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ccd3-1改善大鼠神经病理性疼痛的作用研究 被引量：1

10

作者 刘霞 鲁懿 +3 位作者 冉冬芝 涂钰均 王琼 杨俊卿 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期256-260,共5页

目的 观察ccd3-1对保留性坐骨神经损伤(SNI)模型所致大鼠神经病理性疼痛的效应,并初步探讨其作用机制。方法 将SD雄性大鼠随机分为假手术组、模型组和低、中、高剂量实验组,每组11只。分离大鼠坐骨神经分支,结扎并剪断腓总神经和胫神经... 目的 观察ccd3-1对保留性坐骨神经损伤(SNI)模型所致大鼠神经病理性疼痛的效应,并初步探讨其作用机制。方法 将SD雄性大鼠随机分为假手术组、模型组和低、中、高剂量实验组,每组11只。分离大鼠坐骨神经分支,结扎并剪断腓总神经和胫神经建立SNI模型。SNI术后第7天,低、中、高剂量实验组分别鞘内给予0.1,0.3和0.9μg·kg^(-1)ccd3-1;假手术组和模型组均给予等量溶剂。用机械刺激法检测各组大鼠机械痛阈值的变化,用蛋白质印迹法检测大鼠背根神经节(DRG)细胞周期素蛋白依赖性激酶5(Cdk5)、脑衰反应调节蛋白2(CRMP2)、p-CRMP2(ser522)、N型电压门控钙离子通道(CaV2.2)总蛋白及膜蛋白的表达水平,用酶联免疫吸附法检测Cdk5激酶活性、降钙素基因相关肽(CGRP)、白细胞介素6(IL-6)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量变化。结果 中剂量实验组、模型组和假手术组给药后2 h的机械痛阈值分别为(9.43±1.33),(2.30±0.84)和(11.37±1.75)g;Cdk5激酶活性表达分别为(217.20±37.29),(317.90±41.77)和(194.90±35.46)mU·g^(-1);p-CRMP2/CRMP2蛋白相对表达水平分别为1.03±0.18,1.82±0.34和1.07±0.12;膜/总CaV2.2蛋白水平分别为0.92±0.16,1.75±0.43和0.94±0.43;IL-6含量分别为(1 040.00±130.70),(1 388.00±116.70)和(960.9±82.06)pg·g^(-1);TNF-α含量分别为(1 812.00±292.40),(2 400.00±209.40)和(1 710.00±82.48)pg·g^(-1);CGRP含量分别为(244.80±35.70),(338.30±33.11)和(241.90±26.38)pg·g^(-1)。模型组的上述指标与假手术组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05);中剂量实验组的上述指标与模型组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 ccd3-1对SNI模型所致的大鼠神经病理性疼痛具有明显的改善效应,其机制可能与抑制Cdk5活性,下调CRMP2磷酸化,进而降低CaV2.2膜转运有关。 展开更多

关键词 ccd3-1 神经病理性疼痛 细胞周期素蛋白依赖性激酶5 脑衰反应调节蛋白2 N型电压门控钙离子通道

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脑衰反应调节蛋白2的生理作用及其与阿尔茨海默病的关系 被引量：2

11

作者 代丽丽 刘华月 +1 位作者 霍秀娥 朱淑敏 《山东医药》 CAS 2014年第1期96-98,共3页

阿尔茨海默病（AD）的主要病理特征包括大脑中淀粉样斑块（淀粉样前体蛋白的β样剪切）和神经纤维缠结（tau蛋白的高度磷酸化）.近年来,为了深入探讨AD患者记忆和认知缺陷的发病机理,许多研究者试图寻找与AD病理发展相关的早期分子机制... 阿尔茨海默病（AD）的主要病理特征包括大脑中淀粉样斑块（淀粉样前体蛋白的β样剪切）和神经纤维缠结（tau蛋白的高度磷酸化）.近年来,为了深入探讨AD患者记忆和认知缺陷的发病机理,许多研究者试图寻找与AD病理发展相关的早期分子机制.研究发现,脑衰反应调节蛋白（CRMP）是一种广泛表达于成人和婴幼儿大脑中的蛋白,而且伴随着AD的病理发展,CRMP2出现了明显的异常磷酸化.现就CRMP2的生理作用与AD的关系综述如下. 展开更多

关键词 阿尔茨海默病 脑衰反应调节蛋白2 酪氨酸蛋白激酶

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麦芽酚铝通过GSK-3β调控CRMP2致小鼠海马神经元突起损伤的作用研究 被引量：2

12

作者 张慧芳 韩颖超 +2 位作者 蔡小亚 向长鑫 牛侨 《环境与职业医学》 CAS CSCD 北大核心 2021年第11期1207-1213,共7页

[背景]铝可对神经突触结构和功能造成不可逆的损伤,其机制可能与糖原合成酶-3β(GSK-3β)/脑衰反应调节蛋白2(CRMP2)调控的神经元突起损伤有关。[目的]探讨麦芽酚铝[Al(mal)_(3)]对小鼠海马原代神经元突起的影响,揭示GSK-3β-CRMP2在其... [背景]铝可对神经突触结构和功能造成不可逆的损伤,其机制可能与糖原合成酶-3β(GSK-3β)/脑衰反应调节蛋白2(CRMP2)调控的神经元突起损伤有关。[目的]探讨麦芽酚铝[Al(mal)_(3)]对小鼠海马原代神经元突起的影响,揭示GSK-3β-CRMP2在其中的作用。[方法]取出生24 h以内的新生ICR小鼠海马提取神经元进行原代培养。细胞培养至第5天,应用激光共聚焦检测神经元纯度。细胞培养至第7天,加入慢病毒载体介导的mNeonGreen基因对神经元进行转染。细胞培养第10天,选择生长状态良好带有mNeonGreen荧光的神经元进行Al(mal)_(3)染毒,实验分组为空白对照组、麦芽酚组(120μmol·L^(−1))以及10、20、40μmol·L^(−1)Al组。后续实验选择20μmol·L^(−1) Al建立神经元突起损伤模型并进行干预,实验分组为空白对照组、二甲基亚砜(DMSO)组、Al组(20μmol·L^(−1))、SB组(GSK-3β抑制剂,1μmol·L^(−1))、SB(1μmol·L^(−1))+Al(20μmol·L^(−1))􀀁组。采用CCK-8法检测神经元细胞活力。在Al(mal)_(3)或SB处理海马原代神经元0、48 h􀀁时,用高内涵成像分析仪对小鼠海马原代神经元突起数及长度进行扫描和分析。采用蛋白印迹法检测小鼠海马原代神经元GSK-3β、CRMP2蛋白表达及磷酸化水平。[结果]免疫荧光结果显示原代神经元纯度大于90%。经Al(mal)_(3)染毒48 h后,与空白对照组相比,10、20和40μmol·L–1Al组细胞存活率下降(P<0.05),而麦芽酚组细胞存活率无变化。经SB处理48h后,DMSO组、SB组细胞存活率与空白对照组之间的差异无统计学意义;SB+Al联合处理组神经元的细胞存活率高于Al组(P<0.05)。空白对照组神经元平均突起数量、平均突起长度的48h/0h值分别是90.13%±11.70%、113.24%±8.34%。Al组神经元平均突起数量、神经元平均突起长度的48h/0h值分别是56.47%±16.36%、62.06%±6.75%,均低于空白组(P<0.05)。SB组神经元平均突起数量的48 h/0 h值(99.0 展开更多

关键词 铝 神经元 突起 糖原合成酶-3β 脑衰反应调节蛋白2

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臂丛神经损伤后脊髓神经元脑衰反应调节蛋白2表达上调以加快轴突生长 被引量：2

13

作者 高山 肖鹏 +1 位作者 陈文恒 蔡猛 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期2298-2301,共4页

目的观察臂丛神经损伤后大鼠脊髓中脑衰反应调节蛋白2(CRMP2)的表达及其作用。方法构建臂丛撕脱伤大鼠模型,收集损伤后1、3、7、10d大鼠脊髓标本,使用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)及Westernblot方法检测CRMP2的表达变化及磷酸... 目的观察臂丛神经损伤后大鼠脊髓中脑衰反应调节蛋白2(CRMP2)的表达及其作用。方法构建臂丛撕脱伤大鼠模型,收集损伤后1、3、7、10d大鼠脊髓标本,使用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)及Westernblot方法检测CRMP2的表达变化及磷酸化水平。使用免疫荧光法检测CRMP2在脊髓中的空间表达。在体外培养的神经元中观察调控CRMP2表达对神经元突起生长的影响。结果在臂丛撕脱伤后第1、3、7、10天,RT-qPCR及Westernblot法检测均显示脊髓中CRMP2表达明显增加。Westernblot法检测显示术后第3、7天实验组磷酸化CRMP2的表达量为0.154±0.113、0.124±0.200,Sham组磷酸化CRMP2表达量为0.342±0.200、0.434±0.165。实验组较Sham组磷酸化水平明显降低。CRMP2表达于脊髓神经元中,在小胶质细胞及星型胶质细胞中未观察到其表达。在体外培养的神经元中调控CRMP2表达,测得神经元的轴突长度及突起数目在上调组为7.066±1.762、24.500±8.816,下调组为1.044±0.556、8.000±3.295。上调组较下调组明显增加。结论臂丛神经损伤后,脊髓神经元CRMP2表达增加能够加快神经轴突生长,对神经功能恢复有利。 展开更多

关键词 臂丛神经损伤 脑衰反应调节蛋白2 脊髓神经元 大鼠

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大鼠背根神经节中的Nogo-A蛋白促进微管聚合和炎症热痛觉敏化的发生 被引量：2

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作者 胡启国 刘怀存 +2 位作者 陈玲 赵妍 王君 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期549-553,共5页

目的探讨背根神经节(DRG)神经元中的Nogo-A在炎症性热痛觉敏化过程中对微管的调控作用及其下游分子通路。方法对野生型大鼠(n=12)和Nogo-A敲除大鼠(n=14)足底注射完全弗式佐剂(CFA)制造炎症痛大鼠模型,取两组大鼠DRG组织,采用Western bl... 目的探讨背根神经节(DRG)神经元中的Nogo-A在炎症性热痛觉敏化过程中对微管的调控作用及其下游分子通路。方法对野生型大鼠(n=12)和Nogo-A敲除大鼠(n=14)足底注射完全弗式佐剂(CFA)制造炎症痛大鼠模型,取两组大鼠DRG组织,采用Western blotting、免疫荧光染色等方法,研究DRG中Nogo-A在炎症热痛觉敏化过程中对于微管的调节作用。结果 Nogo-A基因敲除具有缓解CFA诱导的炎症性热痛觉敏化作用,Nogo-A基因敲除大鼠DRG中的微管聚合减少,微管上游信号分子磷酸化脑衰反应调节蛋白2(p-CRMP2)表达增加。结论 Nogo-A通过增强CRMP2促进微管聚合,促进了炎症热痛觉敏化的发生。 展开更多

关键词 NOGO-A 微管 脑衰反应调节蛋白2 背根神经节 炎症痛 免疫印迹法 大鼠

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脑衰反应调节蛋白-2在细胞迁移和非神经系统相关疾病中的研究 被引量：1

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作者 范莉 陈淑琴 《新医学》 2015年第3期140-143,共4页

脑衰反应调节蛋白-2(CRMP-2)是一种多功能调节蛋白,它不仅在哺乳类动物的神经系统内高度表达,而且在T细胞、肿瘤细胞和正常上皮细胞等非神经系统的细胞和组织中存在表达。在神经系统中,CRMP-2在促进神经轴突生长、维持神经细胞极性、神... 脑衰反应调节蛋白-2(CRMP-2)是一种多功能调节蛋白,它不仅在哺乳类动物的神经系统内高度表达,而且在T细胞、肿瘤细胞和正常上皮细胞等非神经系统的细胞和组织中存在表达。在神经系统中,CRMP-2在促进神经轴突生长、维持神经细胞极性、神经元迁移等方面均起着重要作用。在非神经系统中,CRMP-2正向调节T细胞骨架重组和细胞迁移,负向调节肿瘤细胞的迁移水平,并以磷酸化形式参与肿瘤细胞增殖,被认为可能成为某些恶性肿瘤的生物标志物和治疗靶点。 展开更多

关键词 脑衰反应调节蛋白-2 轴突生长 细胞迁移 肿瘤 子宫内膜异位症

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上调脑内脑衰反应调节蛋白2的表达促进了脑缺血再灌注大鼠神经再生 被引量：1

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作者 幸享凤 王恬竹 +2 位作者 王玉 张融融 秦新月 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第17期1910-1917,共8页

目的 探讨脑衰反应调节蛋白2（collapsin response mediator protein 2,CRMP2）对大鼠脑缺血再灌注损伤后神经元丢失及神经再生的影响及其可能的机制。方法 将60只成年雄性SD大鼠分成4组：假手术组（sham）、脑缺血/再灌注组（MCAO）、... 目的 探讨脑衰反应调节蛋白2（collapsin response mediator protein 2,CRMP2）对大鼠脑缺血再灌注损伤后神经元丢失及神经再生的影响及其可能的机制。方法 将60只成年雄性SD大鼠分成4组：假手术组（sham）、脑缺血/再灌注组（MCAO）、脑缺血＋质粒对照组（MCAO＋GFP）、脑缺血＋CRMP2真核表达质粒组（MCAO＋CRMP2）。将质粒注射入各组大鼠脑内,1 d后建立大鼠大脑中动脉缺血（middle cerebral artery occlusion,MCAO）/再灌注模型,术后5~7 d腹腔注射5-乙炔基-2＇脱氧尿嘧啶核苷（5-ethinyl deoxidization uracil nucleoside-2＇,Edu）,免疫荧光检测各组大鼠MAP2、GFAP、Edu标记细胞的阳性率及Nestin/Edu双标记阳性细胞的表达;采用Western blot检测CRMP2、脑源性神经营养因子（brain derived neurotrophic factor,BDNF）及N-甲基-D-天冬氨酸受体2B（N-methyl-D-aspartate receptor2B,NMDAR2B）的表达;免疫组化检测CRMP2的表达及其神经功能评分。结果 与sham组相比,脑缺血再灌损伤使MAP2表达降低（P〈0.05）,GFAP表达增高（P〈0.05）,同时促进了Edu标记阳性细胞[（62.00±7.65）、（62.60±7.06）]及Nestin/Edu标记阳性细胞[（31.60±5.50）、（31.60±5.40）]的表达（P〈0.05）。而CRMP2真核质粒干预之后降低了GFAP的表达（P〈0.05）,且升高了MAP2的表达（P〈0.05）,还进一步促进了Edu标记阳性细胞（100.20±11.52）及Nestin/Edu标记阳性细胞（57.20±4.80）的表达（P〈0.05）。与sham组相比,MCAO及MCAO＋GFP组BDNF及NMDAR2B的表达明显升高（P〈0.05）;经CRMP2真核质粒干预后,BDNF表达进一步增高（P〈0.05）,NMDAR2B的表达被部分削弱（P〈0.05）。CRMP2真核质粒干预后神经功能评分较MCAO及MCAO＋GFP组明显改善（P〈0.05）。结论 CRMP2减少了大鼠脑缺血再灌注损伤后神经元的丢失;促进了大鼠脑缺血再灌注损伤后内源性神经干细胞的增殖,而其对BDNF及NMDAR2B的调节可能是其作用机� 展开更多

关键词 脑衰反应调节蛋白2 脑缺血再灌注 神经再生 BDNF NMDAR2B

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母婴分离应激对幼年大鼠脑衰反应调节蛋白2及微管动态性影响 被引量：1

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作者 魏艳艳 陈景旭 +4 位作者 吴作天 肖玲 何静 张楠 王高华 《中国神经精神疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第7期400-404,共5页

目的探讨不同程度母婴分离(maternal separation,MS)应激对幼年雄性大鼠海马脑衰反应调节蛋白2(collapsin response mediator protein 2,CRMP2)及微管动态性的影响。方法36只新生雄性大鼠随机分为3组,母婴分离360 min组(MS360组)、母婴... 目的探讨不同程度母婴分离(maternal separation,MS)应激对幼年雄性大鼠海马脑衰反应调节蛋白2(collapsin response mediator protein 2,CRMP2)及微管动态性的影响。方法36只新生雄性大鼠随机分为3组,母婴分离360 min组(MS360组)、母婴分离15 min组(MS15组)及对照组(NC组)。出生后第4~10天进行1周的母婴分离,每天分离360 min或15 min,NC组正常饲养。采用q-RT-PCR技术检测海马CRMP2、actin、tubulin的mRNA表达水平,采用Western-Blot技术检测海马CRMP2、P-CRMP2、actin、tubulin及动态微管标志物Tyr-tubulin、稳定微管标志物Acet-tubulin表达水平。结果3组海马P-CRMP2、Acet-tubulin、Tyr-tubulin表达水平差异有统计学意义(P<0.05),MS360组与MS15组及NC组大鼠相比,P-CRMP2、Acet-tubulin表达水平升高(P<0.05),Tyr-tubulin表达水平下降(P<0.05),MS15组与NC组无统计学差异(P>0.05)。3组CRMP2、actin、tubulin的mRNA和蛋白表达水平无统计学差异(P>0.05)。结论长时间母婴分离应激可升高CRMP2的磷酸化水平,降低海马微管动态性,使神经可塑性受损,而短期母婴分离未对海马微管动态性产生不利影响。 展开更多

关键词 母婴分离 脑衰反应调节蛋白2 微管动态性 神经可塑性

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脑衰反应调节蛋白2在单眼形觉剥夺性弱视大鼠视皮层的表达 被引量：1

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作者 王智 袁学双 +2 位作者 费志刚 肖启国 夏世刚 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期88-92,共5页

目的研究脑衰反应调节蛋白2(CRMP-2)在单眼形觉剥夺性弱视大鼠视皮层的表达。方法出生后14d的SD健康大鼠64只,采用随机数字表法分为单眼形觉剥夺性弱视组和正常对照组。单眼形觉剥夺性弱视组于出生后14d行右眼睑缘缝合术,单眼形觉剥夺... 目的研究脑衰反应调节蛋白2(CRMP-2)在单眼形觉剥夺性弱视大鼠视皮层的表达。方法出生后14d的SD健康大鼠64只,采用随机数字表法分为单眼形觉剥夺性弱视组和正常对照组。单眼形觉剥夺性弱视组于出生后14d行右眼睑缘缝合术,单眼形觉剥夺性弱视组和正常对照组分别于出生后14、21、45和120d各取8只大鼠进行观察。在出生后21d(单眼剥夺7d)对大鼠行闪光视觉诱发电位(F-VEP)检测,记录P1波的潜伏期和波幅值。利用免疫组织化学检测法观察2个组大鼠视皮层中CRMP-2免疫阳性神经元的表达变化,通过图像分析系统测定平均吸光度(A)值。结果F-VEP检查结果显示,与正常对照组相比,形觉剥夺性弱视组P1波潜伏期延长,波幅降低,差异均有统计学意义(t=16.760,P=0.000;t=-22.919,P=0.000)。免疫组织化学检测显示,单眼形觉剥夺性弱视组和正常对照组大鼠出生后不同时间点视皮层中CRMP-2的表达量比较,差异均有统计学意义(F分组=8.855,P=0.010;F时间=63.091,P=0.000),其中出生后21、45和120d单眼形觉剥夺性弱视组CRMP-2的表达量较正常对照组明显降低,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论CRMP-2可能参与单眼形觉剥夺性弱视的发生和发展过程,但其具体作用机制还有待进一步研究。 展开更多

关键词 脑衰反应调节蛋白2 形觉剥夺性弱视 大鼠 视皮层

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CRMP2衍生的TAT-CBD3多肽对阿尔茨海默病神经元的保护作用 被引量：1

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作者 姚远 任晶红 +1 位作者 刘环宇 纪影实 《中国实验诊断学》 2021年第10期1518-1522,共5页

目的探索CRMP2衍生的TAT-CBD3多肽对AD大鼠神经元的保护作用及其机制。方法雄性Wistar大鼠随机分为假手术组(Sham)、模型组(Model)、TAT-CBD3高剂量组(10mg/kg)以及TAT-CBD3低剂量组(3mg/kg)。制备大鼠阿尔茨海默病模型,模型成功后,尾... 目的探索CRMP2衍生的TAT-CBD3多肽对AD大鼠神经元的保护作用及其机制。方法雄性Wistar大鼠随机分为假手术组(Sham)、模型组(Model)、TAT-CBD3高剂量组(10mg/kg)以及TAT-CBD3低剂量组(3mg/kg)。制备大鼠阿尔茨海默病模型,模型成功后,尾静脉注射给药,连续给药15天,假手术组及模型组给予相同体积的生理盐水。末次给药后,Morris水迷宫进行大鼠行为学检测,HE染色检测大鼠海马CA1区神经元损伤,Western blot法检测相关蛋白表达,免疫共沉淀法检测蛋白相互作用。结果TAT-CBD3多肽能够明显改善大鼠学习和记忆能力,减轻海马CA1区神经元损伤,降低pCRMP2、NMDAR2B蛋白表达,抑制pCRMP2与NMDAR2B之间相互作用(P<0.01,P<0.05)。结论CRMP2衍生的TAT-CBD3多肽能够改善阿尔茨海默病症状,减轻神经元损伤,其机制可能与抑制pCRMP2、NMDAR2B蛋白表达,干扰两者相互作用有关。 展开更多

关键词 阿尔茨海默病 脑衰反应调节蛋白2 N-甲基-D-天冬氨酸受体 TAT-CBD3多肽

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脑衰反应调节蛋白2的表达与颞叶癫痫关系的研究

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作者 张文霞 余洋 +1 位作者 林卫红 孟红梅 《癫痫杂志》 2017年第2期137-140,共4页

颞叶癫痫(Temporal lobe epilepsy,TLE)是最常见的癫痫类型,大部分为药物难治性癫痫,最主要的病理特征是海马苔藓纤维出芽和突触重塑,是目前研究的热点。国内外许多学者运用比较蛋白质组学技术,通过比较TLE患者或动物模型组与对照组的... 颞叶癫痫(Temporal lobe epilepsy,TLE)是最常见的癫痫类型,大部分为药物难治性癫痫,最主要的病理特征是海马苔藓纤维出芽和突触重塑,是目前研究的热点。国内外许多学者运用比较蛋白质组学技术,通过比较TLE患者或动物模型组与对照组的差异蛋白质,发现脑衰反应调节蛋白2(CRMP-2)的表达下调最显著,表明CRMP-2与TLE密切相关。CRMP-2属于细胞质磷蛋白,高表达于中枢神经系统,尤其是神经元和少突胶质细胞。通过对CRMP-2表达信号通路作用机制的相关性研究,CRMP-2在经典通路中通过影响神经元微管的合成从而调节轴突和树突的生长,推测CRMP-2在TLE海马神经元损伤的作用是通过PTEK/P13K/Akt/GSK-3β/CRMP-2信号通路进行的,可揭示TLE的发病机制及为进一步的临床治疗提供新的作用靶点。 展开更多

关键词 脑衰反应调节蛋白-2 颞叶癫痫 神经元微管 轴突 树突

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