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超氧化物歧化酶的某些性质及胰酶酶解的研究 被引量：3
1
作者 刘利东 邹国林 朱汝璠 《武汉大学学报（自然科学版）》 CSCD 1991年第1期93-98,共6页
按本室制备方法,从1000ml 鸡红细胞中得30mg 纯超氧化物歧化酶(Cu·Zn-SOD),比活力为16600u/mg,经检测所得酶是均一的。用 DNS 法测得该酶 N-末端氨基酸为丙氨酸。在紫外和可见光区的特征吸收峰分别在260nm 和680nm,用 Sephadex G-... 按本室制备方法,从1000ml 鸡红细胞中得30mg 纯超氧化物歧化酶(Cu·Zn-SOD),比活力为16600u/mg,经检测所得酶是均一的。用 DNS 法测得该酶 N-末端氨基酸为丙氨酸。在紫外和可见光区的特征吸收峰分别在260nm 和680nm,用 Sephadex G-100凝胶过滤法测得分子量为33800道尔顿,经 SDS—PAGE 测得其亚基分子量为16500道尔顿,由大约154个氨基酸残基组成,不含色氨酸。此外,对猪血 Cu·Zn-SOD 进行了胰酶酶解,得具 Cu·Zn-SOD 活性分子片段。 展开更多
关键词 SOD 性质 胰酶酶解 鸡 红细胞
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重组人促红细胞生成素的HPLC与UPLC肽图谱分析
2
作者 王敏力 杨鹏云 沈琦 《中国预防医学杂志》 CAS 2008年第5期360-365,共6页
目的分析rHuEPO供试品及其对照品经胰酶酶解后分别在HPLC与UPLC上的肽图谱表现。方法rHuEPO供试品及对照品经透析、冻干、重新溶解和胰酶酶切后,以三氟醋酸/水,三氟醋酸/乙腈/水作为流动相梯度洗脱,分别以HPLC及UPLC连接反相色谱柱分析... 目的分析rHuEPO供试品及其对照品经胰酶酶解后分别在HPLC与UPLC上的肽图谱表现。方法rHuEPO供试品及对照品经透析、冻干、重新溶解和胰酶酶切后,以三氟醋酸/水,三氟醋酸/乙腈/水作为流动相梯度洗脱,分别以HPLC及UPLC连接反相色谱柱分析酶切后的肽段。结果rHuEPO供试品及其对照品经胰酶酶切后的肽段在HPLC上肽图谱表现一致,在UPLC上肽图谱也完全一致。UPLC分析rHuEPO肽图需要的进样量更少,且较传统HPLC的分析时间大为缩短,同时不损失分离度及灵敏度。结论UPLC与HPLC均能验证rHuEPO供试品及对照品肽图的一致性,相比于HPLC、UPLC分析肽图谱更方便快捷,更节省样品,更适合分析rHuEPO肽图。 展开更多
关键词 重组人促红细胞生成素 胰酶酶解 肽图谱 高效液相色谱 超高效液相色谱
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土鳖虫胰酶酶解物抗凝活性部位分离纯化及组成分析 被引量：9
3
作者 曹艳玲 李文兰 +5 位作者 伍水龙 李濯冰 于季萍 赵韶华 王玉蓉 张玉杰 《中国实验方剂学杂志》 CAS 北大核心 2013年第3期52-55,共4页
目的:采用溶剂萃取和凝胶柱色谱法对土鳖虫胰酶酶解物进行分离纯化,初步确定其抗凝活性部位及化学成分组成。方法:应用胰酶酶解法制备土鳖虫胰酶酶解物,以APTT(活化部分凝血酶时间)为指标,采用溶剂萃取法,获得抗凝活性部位IV,经凝胶柱... 目的:采用溶剂萃取和凝胶柱色谱法对土鳖虫胰酶酶解物进行分离纯化,初步确定其抗凝活性部位及化学成分组成。方法:应用胰酶酶解法制备土鳖虫胰酶酶解物,以APTT(活化部分凝血酶时间)为指标,采用溶剂萃取法,获得抗凝活性部位IV,经凝胶柱色谱法对其进行分离纯化获得胰酶酶解纯化物;采用考马斯亮蓝法对纯化物进行定量分析,通过MALDI-TOF-MS检测分离部分的分子量分布范围。结果:土鳖虫胰酶酶解物部位IV有较强的抗凝活性,其抗凝活性强度与酶解物质量浓度相关;部位IV经Sephadex G-25纯化后,通过考马斯亮蓝法测得其蛋白质量分数5.5%;进一步经Sephadex G-10脱盐的纯化物,采用MALDI-TOF-MS检测,确定为相对分子质量在850～910 Da的3组多肽混合物。结论:采用凝胶柱色谱法分离纯化土鳖虫胰酶酶解物是可行的,抗凝活性组分是<1 000 Da的小分子肽类。 展开更多
关键词 土鳖虫 胰酶酶解物 抗凝活性 凝胶柱色谱 MALDI-TOF-MS 小分子肽 分离纯化
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蝇蛆组织匀浆液及其酶解物中抑菌组分的研究 被引量：3
4
作者 吴杰 邹思湘 +1 位作者 陈伟华 张源淑 《江苏农业科学》 CSCD 北大核心 2007年第4期153-155,共3页
以人工培养的新鲜蝇蛆为原料,采用磷酸盐缓冲液匀浆,经胰蛋白酶酶解、Sephadex G-15层析分离,筛选到了一组具有抑菌活性的肽类物质。试验结果显示,蝇蛆组织匀浆液对大肠杆菌和沙门氏菌的增殖有显著的抑制作用,对金黄色葡萄球菌的增殖有... 以人工培养的新鲜蝇蛆为原料,采用磷酸盐缓冲液匀浆,经胰蛋白酶酶解、Sephadex G-15层析分离,筛选到了一组具有抑菌活性的肽类物质。试验结果显示,蝇蛆组织匀浆液对大肠杆菌和沙门氏菌的增殖有显著的抑制作用,对金黄色葡萄球菌的增殖有显著的促进作用,但加热灭活后其抑菌生物活性丧失;匀浆液经胰酶消化后对上述3种细菌增殖的影响没有变化,煮沸灭活后其生物活性也未见显著变化,表现出较高的热稳定性;胰酶消化产物经Sephadex G-15层析柱分离后得到一种组分保持了对沙门氏菌、大肠杆菌增殖的抑制作用和对金黄色葡萄球菌增殖的促进作用。表明蝇蛆组织中存在着有抑菌活性的肽类物质,具有潜在的开发利用价值。 展开更多
关键词 蝇蛆 组织匀浆液 胰酶酶解液 抑菌
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