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TGF-β1通过肾素(前体)受体和V-ATP酶诱导人腹膜间皮细胞转分化 被引量：1
1
作者 龙作鹏 程丽慧 +1 位作者 符微微 宋科秀 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2022年第1期166-169,共4页
目的观察转化生长因子(TGF)-β1对人腹膜间皮细胞(HPMCs)肾素(前体)受体(P)RR和V-ATP酶的mRNA和蛋白表达影响。方法取健康成年人大网膜进行原代培养。用5 ng/ml TGF-β1刺激第三代培养细胞,采用免疫组织化学染色、Western印迹、酶联免... 目的观察转化生长因子(TGF)-β1对人腹膜间皮细胞(HPMCs)肾素(前体)受体(P)RR和V-ATP酶的mRNA和蛋白表达影响。方法取健康成年人大网膜进行原代培养。用5 ng/ml TGF-β1刺激第三代培养细胞,采用免疫组织化学染色、Western印迹、酶联免疫吸附试验(ELISA)及RT-PCR等方法,分别观察肾素(前体)受体和V-ATP酶的mRNA和蛋白表达。结果(P)RR和V-ATPase mRNA表达水平随TGF-β1浓度增加和孵育时间的延长而上调,且均显著高于Con组(均P<0.05)。TGF-β1组(4.23±0.98)、TGF-β1+si-N组(3.42±1.05)、TGF-β1+si-(P)RR组(2.48±0.56)组V-ATPase mRNA水平均显著高于Con组(1.00±0.00,P<0.05),且TGF-β1+si-(P)RR组V-ATPase mRNA水平显著低于TGF-β1+si-N组(P<0.05)。结论TGF-β1在致腹膜纤维化过程中诱导了HPMCs内(P)RR和V-ATPase的转录与蛋白表达,(P)RR介导了TGF-β1引起的V-ATPase表达升高,调节(P)RR和V-ATPase产生可用作防治腹膜纤维化的新型治疗策略。 展开更多
关键词 肾素(前体)受体 转化生长因子-Β1 人腹膜间皮细胞 腹膜纤维化
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免疫细胞化学法检测肾素(前体)受体在人脐静脉内皮细胞中表达
2
作者 陈佳 宋玮 +5 位作者 张英 杜作义 米芋枚 任丽丽 姜一农 林玉壁 《心血管病防治知识（学术版）》 2013年第11期6-10,共5页
目的既往研究表明,(P)RR存在于肾系膜细胞、血管平滑肌细胞、心脏、大脑等细胞和器官中,具有升高血压,导致蛋白尿和肾小球硬化等作用。有关(P)RR在内皮细胞表达的报道仍然有限,本研究应用免疫细胞化学法探讨(P)RR在人脐静脉内皮细胞(hum... 目的既往研究表明,(P)RR存在于肾系膜细胞、血管平滑肌细胞、心脏、大脑等细胞和器官中,具有升高血压,导致蛋白尿和肾小球硬化等作用。有关(P)RR在内皮细胞表达的报道仍然有限,本研究应用免疫细胞化学法探讨(P)RR在人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)中表达。方法在无菌条件下,取健康产妇分娩后的新鲜婴儿脐带,获得内皮细胞,体外原代培养HUVECs,以免疫细胞化学法鉴定(P)RR在血管内皮细胞中的表达。结果实验获得生长状态良好的内皮细胞。倒置显微镜下可见内皮细胞呈多角形和单层铺路石样排列。经过Ⅷ因子免疫细胞化学染色,棕褐色物质核周围分布密集,细胞边缘颗粒相对较少Ⅷ因子相关抗原阳性,提示该细胞为HUVECs。未加(P)RR抗体的对照组,可见呈紫色的苏木素复染的细胞核,未见细胞膜及细胞浆,免疫细胞化学染色呈阴性。加入(P)RR抗体的(P)RR组,呈DAB染色阳性的棕褐色反应产物存在于细胞膜上和细胞浆中,提示免疫细胞化学(P)RR相关抗原阳性。结论HUVECs中存在(P)RR的表达,可能参与动脉粥样硬化的形成机制。 展开更多
关键词 人脐静脉内皮细胞 肾素(前体)受体 肾素-血管紧张素系统
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肾素(前体)受体miRNA干扰质粒的构建及鉴定
3
作者 张娜娜 李茂莲 +3 位作者 边云飞 高奋 杨慧宇 肖传实 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期413-417,422,共6页
目的设计及构建肾素(前体)受体微小干扰核糖核酸(miRNA)质粒,并鉴定出有效干扰质粒。方法设计及构建4对肾素(前体)受体的pcDNATM6.2-GW/EmGFPmiR miRNA及1对阴性对照miRNA干扰质粒,通过测序鉴定。将干扰质粒用LipofectamineTM 2000转染... 目的设计及构建肾素(前体)受体微小干扰核糖核酸(miRNA)质粒,并鉴定出有效干扰质粒。方法设计及构建4对肾素(前体)受体的pcDNATM6.2-GW/EmGFPmiR miRNA及1对阴性对照miRNA干扰质粒,通过测序鉴定。将干扰质粒用LipofectamineTM 2000转染大鼠血管平滑肌细胞,通过顺时转染获得细胞系,倒置荧光显微镜下观察绿色荧光及流式细胞术确定转染效率,Real-time PCR和Western blot检测4对干扰质粒、阴性对照质粒肾素(前体)受体的mRNA及蛋白表达水平。结果测序显示肾素(前体)受体干扰序列及读框完全正确,倒置荧光显微镜及流式细胞术结果显示干扰质粒瞬时转染的大鼠血管平滑肌细胞系的转染效率均在60%以上。Real-time PCR和Western blot结果显示X2-2-3、X2-3-3干扰质粒对肾素(前体)受体mRNA及蛋白有较好的抑制效果。结论成功构建了肾素(前体)受体干扰真核表达载体,筛选出有效干扰质粒,为进一步研究肾素(前体)受体在大鼠血管平滑肌细胞中的作用提供参考。 展开更多
关键词 肾素(前体)受体 微小干扰核糖核酸 血管平滑肌细胞
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肾素(前体)受体在高糖诱发的内皮细胞舒缩功能障碍中的作用及机制
4
作者 郭然 宋玮 +3 位作者 张英 刘莹 路岩 姜一农 《中国动脉硬化杂志》 CAS 北大核心 2015年第7期673-678,共6页
目的探讨高糖对内皮细胞舒缩功能障碍等损害过程中是否有肾素(前体)受体((P)RR)的过度激活,并探讨其机制。方法体外培养人脐静脉内皮细胞,分别以不同浓度的葡萄糖(15、30mmol/L)干预细胞24h、48h后收取细胞,用分子生物学方法测定(P)RR... 目的探讨高糖对内皮细胞舒缩功能障碍等损害过程中是否有肾素(前体)受体((P)RR)的过度激活,并探讨其机制。方法体外培养人脐静脉内皮细胞,分别以不同浓度的葡萄糖(15、30mmol/L)干预细胞24h、48h后收取细胞,用分子生物学方法测定(P)RR以及反映血管舒缩功能的生物标记物蛋白和mRNA的表达,以siRNA的方法抑制(P)RR的表达后,观察葡萄糖对内皮细胞上述作用的改变,进一步分析其机制。结果高糖显著上调内皮细胞(P)RR的蛋白和mRNA表达;同时上调内皮素1(ET-1)的表达,抑制一氧化氮(NO)的合成。(P)RR-siRNA虽能抑制高糖引起的ET-1mRNA表达增高,但不抑制其蛋白表达。(P)RR-siRNA显著抑制高糖引起的NO降低。高糖抑制内皮型一氧化氮合酶(eNOS)的表达,增加非对称性二甲基精氨酸(ADMA)的合成,(P)RRsiRNA能显著抑制高糖对eNOS和ADMA的影响。结论高糖能够激活内皮细胞(P)RR的表达;(P)RR可能通过ADMA/eNOS通路介导了高糖诱发的血管内皮舒缩功能障碍。 展开更多
关键词 肾素(前体)受体 高糖 内皮细胞 内皮型一氧化氮合酶 非对称性二甲基精氨酸
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肾素/肾素前体受体在高血压中的进展 被引量：3
5
作者 顾婕 姜一农 杨晓蕾 《心血管病学进展》 CAS 2018年第1期83-86,共4页
肾素/肾素前体受体是肾素-血管紧张素系统的重要成员之一,能够与肾素及肾素前体结合,增强血管紧张素转化酶的活性进而影响心血管系统,同时可以诱导非肾素-血管紧张素系统细胞内的信号转导,如丝裂原活化蛋白激酶通路、经典的Wnt通路等,... 肾素/肾素前体受体是肾素-血管紧张素系统的重要成员之一,能够与肾素及肾素前体结合,增强血管紧张素转化酶的活性进而影响心血管系统,同时可以诱导非肾素-血管紧张素系统细胞内的信号转导,如丝裂原活化蛋白激酶通路、经典的Wnt通路等,诱发动脉硬化、高血压等疾病。近年来,诸多研究表明肾素/肾素前体受体在成人和胚胎生长发育、心血管疾病及肾脏等疾病的发生中都具有重要的作用。现对肾素/肾素前体受体及其在心血管系统的作用进行综述。 展开更多
关键词 肾素/肾素前体受体 丝裂原活化蛋白激酶通路 V-ATP酶 高血压
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可溶性肾素前体受体在多系统疾病中的研究进展
6
作者 李孟野 姜一农 《中国全科医学》 CAS 北大核心 2024年第18期2295-2300,共6页
既往关于肾素-血管紧张素-醛固酮系统(RAAS)的研究以在心血管、肾脏等疾病中发挥重要作用的肾素、肾素前体、肾素前体受体(PRR)为主,其中PRR的生理功能已被广泛研究。可溶性肾素前体受体(sPRR)是通过蛋白酶切割PRR的细胞外成分产生,并... 既往关于肾素-血管紧张素-醛固酮系统(RAAS)的研究以在心血管、肾脏等疾病中发挥重要作用的肾素、肾素前体、肾素前体受体(PRR)为主,其中PRR的生理功能已被广泛研究。可溶性肾素前体受体(sPRR)是通过蛋白酶切割PRR的细胞外成分产生,并分泌到细胞外空间,因此sPRR水平的变化有可能反映组织RAAS的变化,然而临床对sPRR的相关研究有限。近年来越来越多的研究证据表明,sPRR在多种病理生理过程中具有重要的生物学功能,因此本文总结了sPRR在心血管疾病、肾脏疾病、呼吸系统疾病、内分泌和代谢性疾病、妊娠并发症、癌症等方面的最新研究进展,认为sPRR可能是多种疾病的新型生物标志物,并对代谢性疾病等具有潜在的治疗效果。 展开更多
关键词 肾病 肾素 肾素-血管紧张素系统 心血管疾病 可溶性肾素前体受体 多系统疾病 综述
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