Pin1介导血管内皮细胞氧化应激反应参与重症中暑急性肺损伤的机制研究

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作者 李莉 李琴 +4 位作者 邹志敏 钟赫伦 张堃 苏磊 古正涛 《中华急诊医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第9期1079-1087,共9页

目的观察热打击后小鼠肺微血管内皮细胞(pulmonary microvascular endothelial cells,PMVECs)和肺组织中肽基-脯氨酰顺/反异构酶1(Pin1)通过调控氧化应激和凋亡形成,参与重症中暑急性肺损伤(acute lung injury,ALI)形成的分子机制。方... 目的观察热打击后小鼠肺微血管内皮细胞(pulmonary microvascular endothelial cells,PMVECs)和肺组织中肽基-脯氨酰顺/反异构酶1(Pin1)通过调控氧化应激和凋亡形成,参与重症中暑急性肺损伤(acute lung injury,ALI)形成的分子机制。方法体外实验,建立PMVECs热打击模型,对照组将PMVECs置于标准37℃、5%CO2细胞培养箱,热打击组将细胞置于43℃细胞培养箱中进行热打击2 h,热打击后继续在细胞培养箱进行复温(1、3、6、12 h),并使用Pin1抑制剂Juglone(1µmol/L)预处理细胞1 h。体内实验,通过热打击构建重症中暑小鼠模型,热打击组动物置于仿真气候舱内,舱内温度(35.5±0.5)℃,湿度(60±5)%,肛温表监测小鼠直肠温度,小鼠体温达到42℃即停止热打击,热打击后1、3、6以及12 h处死动物,对照组小鼠始终置于室温(25±0.5)℃下,并使用Pin1抑制剂Juglone(1 mg/kg)于热打击前连续3 d腹腔注射对小鼠进行预处理。Western blot观察Pin1、cleaved caspase-9和cleaved caspase-3的表达情况;DHE染色,荧光显微镜下观察细胞中O_(2)^(-)˙水平;ELISA检测肺组织中丙二醛(malondialdehyde,MDA)和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)水平;HE染色检测各组小鼠的病理改变情况;免疫组化染色检测各组小鼠肺组织中Pin1表达情况;TUNEL染色检测各组小鼠肺组织凋亡情况。结果热打击后复温1 h即可诱导PMVECs和肺组织中Pin1的表达,并呈现复温时间依赖性增加(F=771.6,P<0.05;F=1035,P<0.05);热打击后复温3 h开始PMVECs和肺组织中cleaved caspase-9的表达,并呈现复温时间依赖性增加(F=729.8,P<0.05;F=1773,P<0.05);PMVECs和肺组织中cleaved caspase-3在热打击后复温3 h开始表达,随着复温时间的延长其表达不断增多,趋势与cleaved caspase-9一致(F=1084,P<0.05;F=1252,P<0.05);同时,热打击后导致PMVECs中O_(2)^(-)˙释放。热打击后小鼠肺组织中氧化-抗氧化系统失衡,表现为热打击后小鼠肺组织中MDA的持续释放 展开更多

关键词 肽基-脯氨酰顺/反异构酶1 重症中暑 热打击 急性肺损伤 氧化应激

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类风湿关节炎患者外周血肽基脯氨酰顺反异构酶1与辅助性T细胞17/调节性T细胞分析及维甲酸对其的影响 被引量：7

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作者 乔丽娟 高惠英 +5 位作者 张婷婷 尚莉丽 谢戬芳 温鸿雁 罗静 李小峰 《中华风湿病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期373-377,共5页

目的探索RA患者外周血肽基脯氨酰顺反异构酶1(Pin1)活性的表达和辅助性T细胞(Th)17/调节性T细胞的数值及相关性,并分析全反式维甲酸(ATRA)对其的作用和影响。方法①对比RA患者治疗前后及健康对照组3组间Pin1表达、及Th17、调节性T细胞... 目的探索RA患者外周血肽基脯氨酰顺反异构酶1(Pin1)活性的表达和辅助性T细胞(Th)17/调节性T细胞的数值及相关性,并分析全反式维甲酸(ATRA)对其的作用和影响。方法①对比RA患者治疗前后及健康对照组3组间Pin1表达、及Th17、调节性T细胞绝对计数的差异,采用Kruskal-Wallis秩和检验进行分析;②分析RA初治组患者Pin1表达与其一般资料、活动性指标(如ESR、CRP及DAS28评分),以及Th17、调节性T细胞及部分细胞因子的相关性,采用皮尔逊、Spearman相关检验;③分析RA患者加用小剂量全反式维甲酸(10 mg,每周2次)与羟氯喹等传统免疫抑制剂分别治疗3个月后的外周血Pin1表达及Th17/调节性T细胞的差异,2组间对比采用Mann-Whitney U检验,以P<0.05表示差异具有统计学意义。结果①RA初治组的外周血Pin1活性[13.62(9.16,19.42)]高于健康对照组[8.97(7.62,11.45)](Z=42.82,P<0.05),且Th17[18.28(12.76,24.08)]高于健康对照组[6.04(4.96,7.73),Z=48.83,P<0.05],而调节性T细胞[11.06(5.31,21.87)]低于健康对照组[40.41(24.33,48.52),Z=42.21,P<0.05];②RA初治组外周血Pin1活性与CRP、受累关节的个数、DAS28评分、IL-6及TNF-α呈正相关且差异具有统计学意义(r=0.396,P<0.05;r=0.683,P<0.05;r=0.466,P<0.05;r=0.315,P<0.05;r=0.416,P<0.05),而与调节性T细胞值呈负相关(r=-0.502,P<0.05);③与RA初治组比较,RA用药组Pin1活性[6.94(5.96,8.77)]和Th17[7.38(3.85,11.21)]均有所下降,而调节性T细胞[40.41(17.77,33.47),Z=42.82,P<0.05]较前上升;④与传统药物组相比,维甲酸组的调节性T细胞[28.9(21.73,37.36)]较高,差异具有统计学意义(Z=-2.683,P<0.05),Pin1活性[6.23(5.58,8.75)]有明显下降趋势,但差异无统计学意义(Z=-1.622,P=0.104)。结论RA患者外周血Pin1过表达,Th17增高而调节性T细胞降低,加用ATRA联合其他传统药物治疗可以降低Pin1活性,促进调节性T细胞生长,在一定程度上能更有效改善RA患者疾病活动。 展开更多

关键词 关节炎 类风湿 辅助性T细胞17/调节性T细胞 肽基脯氨酰顺反异构酶1 全反式维甲酸

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乳腺浸润性导管癌组织中肽基脯氨酰顺反异构酶1和细胞周期蛋白D1的表达及临床意义 被引量：4

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作者 吴晓明 韩华 吴煌福 《新乡医学院学报》 CAS 2018年第12期1118-1121,共4页

目的探讨肽基脯氨酰顺反异构酶1(Pin1)和细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)在乳腺浸润性导管癌组织中的表达,分析Pin1和Cyclin D1表达与乳腺癌临床特征的相关性。方法选取2013年1月至2015年1月海南医学院第二附属医院保存的80例乳腺浸润性导管... 目的探讨肽基脯氨酰顺反异构酶1(Pin1)和细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)在乳腺浸润性导管癌组织中的表达,分析Pin1和Cyclin D1表达与乳腺癌临床特征的相关性。方法选取2013年1月至2015年1月海南医学院第二附属医院保存的80例乳腺浸润性导管癌组织和40例癌旁正常乳腺组织标本,采用免疫组织化学法检测乳腺浸润性导管癌组织和正常乳腺组织中Pin1和Cyclin D1的表达,并分析Pin1和Cyclin D1表达与乳腺浸润性导管癌病理分级、TNM分期及淋巴结转移的相关性。结果乳腺浸润性导管癌组织中Pin1和Cyclin D1阳性表达率分别为56. 3%(45/80)、45. 0%(36/80),正常乳腺组织中Pin1和Cyclin D1阳性表达率分别为12. 5%(5/40)、20. 0%(8/40);乳腺浸润性导管癌组织中Pin1和Cyclin D1阳性表达率显著高于正常乳腺组织(χ~2=21. 001、7. 170,P <0. 05)。Pin1表达与乳腺浸润性导管癌病理学分级及淋巴结转移有关(χ~2=10. 381、4. 085,P <0. 05),与TNM分期无关(χ~2=2. 544,P> 0. 05)。Cyclin D1表达与乳腺浸润性导管癌病理学分级有关(χ~2=7. 024,P <0. 05),与TNM分期及淋巴结转移无关(χ~2=3. 236、0. 191,P> 0. 05)。乳腺浸润性导管癌组织中Pin1与Cyclin D1表达呈正相关(χ~2=4. 363,P <0. 05)。结论 Pin1和Cyclin D1在乳腺浸润性导管癌组织中表达上调,其可能与乳腺浸润性导管癌的发生、发展有关。 展开更多

关键词 乳腺浸润性导管癌 肽基脯氨酰顺反异构酶1 细胞周期蛋白D1

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寻常型银屑病患者血清肽基脯氨酰顺反异构酶1摄食抑制因子1、血管生成素2的变化及临床意义 被引量：4

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作者 吴佳理 金花 +2 位作者 涂云华 张力丹 韦蓉 《现代生物医学进展》 CAS 2022年第9期1775-1778,1723,共5页

目的:观察寻常型银屑病患者血清肽基脯氨酰顺反异构酶1(Pin1)、摄食抑制因子1(nesfatin-1)、血管生成素2(ANGPT2)水平的变化,并探讨分析其临床意义。方法:选择我院2019年5月~2021年5月收治的寻常型银屑病患者98例,分别比较不同疾病严重... 目的:观察寻常型银屑病患者血清肽基脯氨酰顺反异构酶1(Pin1)、摄食抑制因子1(nesfatin-1)、血管生成素2(ANGPT2)水平的变化,并探讨分析其临床意义。方法:选择我院2019年5月~2021年5月收治的寻常型银屑病患者98例,分别比较不同疾病严重程度和不同疾病分期患者的血清Pin1、nesfatin-1、ANGPT2水平,采用Pearson检验分析血清Pin1、nesfatin-1、ANGPT2水平与皮损面积及严重程度指数(PASI)评分的相关性,采用光疗仪对患者进行治疗,比较治疗前后血清Pin1、nesfatin-1、ANGPT2水平变化。结果:重度组和中度组患者的Pin1、ANGPT2水平均高于轻度组,且重度组高于中度组(P<0.05);重度组和中度组患者的nesfatin-1水平均低于轻度组,且重度组低于中度组(P<0.05)。进行期组患者的Pin1、ANGPT2水平高于静止期组和退行期组患者,而nesfatin-1水平低于静止期组与退行期组患者(P<0.05);静止期组与退行期组之间上述各指标比较差异无统计学意义(P>0.05)。Pearson相关性分析结果显示,寻常型银屑病患者的血清Pin1、ANGPT2水平与PASI评分呈正相关,而nesfatin-1水平与PASI评分呈负相关(P<0.05)。治疗后,寻常型银屑病患者的血清Pin1、ANGPT2水平明显降低,nesfatin-1水平则明显升高(P<0.05)。结论:寻常型银屑病患者的病情越重,血清Pin1、ANGPT2水平越高,而nesfatin-1水平越低,且三者对患者疗效有一定评估价值。 展开更多

关键词 寻常型银屑病 肽基脯氨酰顺反异构酶1 摄食抑制因子1 血管生成素2 相关性

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根治术后胃癌组织中肽基脯氨酰顺反异构酶1及细胞周期素E的表达及意义 被引量：2

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作者 王兵 《中国基层医药》 CAS 2013年第10期1466-1468,共3页

目的 探讨根治术后胃癌组织中肽基脯氨酰顺反异构酶1（PIN1）及细胞周期素E（Cyclin E）的表达及意义。方法 选择46例接受胃癌根治术的患者作为研究对象,取其肿瘤组织作为胃癌组,癌旁正常组织作为对照组,采用免疫组织化学法观察组织中P... 目的 探讨根治术后胃癌组织中肽基脯氨酰顺反异构酶1（PIN1）及细胞周期素E（Cyclin E）的表达及意义。方法 选择46例接受胃癌根治术的患者作为研究对象,取其肿瘤组织作为胃癌组,癌旁正常组织作为对照组,采用免疫组织化学法观察组织中PIN1以及Cyclin E的表达情况,并分析其与肿瘤浸润深度、分化程度、淋巴及远处转移等病理参数的关系并对患者进行为期5年的随访调查。结果 胃癌组织中PIN1（3 949.66±157.40）及Cyclin E（5 443.07±240.15）表达显著高正常组织［（247.67±75.63）、（354.92±93.88）］（均P＜0.05）,其中PIN1与胃癌分化程度、淋巴及远处转移有关;Cyclin E则与胃癌浸润深度及分化程度有关;PIN1及Cyclin E表达同时升高的患者5年生存率仅为50.0%,显著低于两者表达单独升高或不升高者。结论 胃癌根治术后胃癌组织中PIN1及Cyclin E表达水平升高,可较好反映病理参数及预后。 展开更多

关键词 胃肿瘤 肽基脯氨酰顺反异构酶1 细胞周期素E 预后 免疫组织化学

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肽基脯氨酰顺反异构酶1对喉癌细胞系Hep-2细胞生物学行为的影响 被引量：2

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作者 王辉 李章富 +2 位作者 温行 刘剑利 李福才 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第8期681-689,共9页

目的探讨肽基脯氨酰顺反异构酶1(Pin1)对喉癌细胞系Hep-2细胞中心体扩增以及生物学行为的影响。方法培养人喉癌细胞系Hep-2细胞,构建、转染Pin1 siRNA并分组。Pin1过表达分为转染pcDNA3.1组(NC组)、转染pcDNA3.1-Pin1组(Pin1组)、转染pc... 目的探讨肽基脯氨酰顺反异构酶1(Pin1)对喉癌细胞系Hep-2细胞中心体扩增以及生物学行为的影响。方法培养人喉癌细胞系Hep-2细胞,构建、转染Pin1 siRNA并分组。Pin1过表达分为转染pcDNA3.1组(NC组)、转染pcDNA3.1-Pin1组(Pin1组)、转染pcDNA3.1-Pin1后加核转录因子(NF-κB/p65)抑制剂(BAY11-7082)组(Pin1+7082组)。Pin1干扰分为转染阴性对照组(NC组)、转染siRNA组(Si-Pin1组)、转染siRNA后加NF-κB/p65激活剂(IL-1β)组(Si-Pin1+IL-1β组)。Western blotting检测Pin1、CDK2及NF-κB/p65蛋白表达,实时PCR检测Pin1及CDK2基因表达,免疫荧光实验检测细胞中心体扩增及NF-κB/p65核转位,流式细胞仪检测Hep-2细胞周期、凋亡、克隆形成,CCK-8实验检测Hep-2细胞增殖能力,Transwell及划痕实验检测Hep-2细胞的迁移能力。结果Pin1过表达促进中心体复制异常、克隆形成、细胞迁移、细胞周期G1/S转化,NF-κB/p65核转位以及CDK2的表达;NF-κB/p65抑制剂能够减弱这些效应。下调Pin1表达能够抑制中心体异常复制、克隆形成、细胞迁移、细胞周期G1/S的转化,NF-κB/p65入核以及CDK2的表达;NF-κB/p65激活剂能够逆转这些作用。结论Pin1可能经NF-κB通路上调CDK2的表达来影响Hep-2细胞的生物学行为。 展开更多

关键词 肽基脯氨酰顺反异构酶1 喉癌细胞系 生物学行为

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肽基脯氨酰顺反异构酶1和细胞周期蛋白D1在食管鳞状细胞癌中的表达 被引量：1

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作者 陈志军 卢建国 +1 位作者 姚文健 王忠民 《新乡医学院学报》 CAS 2012年第7期505-507,共3页

目的研究肽基脯氨酰顺反异构酶1(Pin1)和细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)在食管鳞状细胞癌中的表达及意义。方法通过免疫组织化学SP法检测37例食管鳞状细胞癌标本癌组织及癌旁组织中Pin1与Cyclin D1蛋白的表达,分析各临床病理参数对食管鳞状... 目的研究肽基脯氨酰顺反异构酶1(Pin1)和细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)在食管鳞状细胞癌中的表达及意义。方法通过免疫组织化学SP法检测37例食管鳞状细胞癌标本癌组织及癌旁组织中Pin1与Cyclin D1蛋白的表达,分析各临床病理参数对食管鳞状细胞癌组织中Pin1及Cyclin D1表达的影响。结果 Pin1在癌旁正常组织中不表达或呈微弱的核表达,在癌组织中呈阳性表达;Cyclin D1在癌旁正常组织中不表达,在癌细胞的细胞质或细胞核内呈阳性或强阳性表达。有淋巴结转移者Pin1表达较未转移者高,差异有统计学意义(P<0.05),分化程度、年龄、性别及TNM分期等临床病理参数对Pin1的表达无影响(P>0.05)。分化程度高者Cyclin D1表达较低,分化程度低者Cyclin D1表达较高,差异有统计学意义(P<0.05),年龄、性别及肿瘤分期等临床病理参数对Cyclin D1的表达无明显影响(P>0.05)。结论 Pin1和Cyclin D1在食管鳞状细胞癌中的表达明显增高,二者相互作用调节细胞周期,促进食管鳞状细胞癌的发生。 展开更多

关键词 肽基脯氨酰顺反异构酶1 细胞周期蛋白D1 食管鳞状细胞癌 免疫组织化学

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肽基脯氨酰顺反异构酶1在肝癌中的研究进展

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作者 莫柱宁(综述) 黄莉(审校) 《中国临床新医学》 2023年第10期1100-1103,共4页

肽基脯氨酰顺反异构酶1(PIN1)在肝癌中异常表达,作为肿瘤催化分子在肝癌的增殖、侵袭、凋亡和血管生成等过程中发挥着重要作用。该文从PIN1的分子结构与功能、PIN1在肝癌中的表达及其在肝癌发生、发展中的作用等几方面进行综述。

关键词 肽基脯氨酰顺反异构酶1 肝癌 进展

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系统性红斑狼疮患者外周血肽基脯氨酰顺反异构酶1与白细胞介素-17的分析及其临床意义

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作者 吴爱瑜 马小美 +3 位作者 张子渺 田畔 赖勤 余莲 《风湿病与关节炎》 2023年第12期24-27,35,共5页

目的:探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血肽基脯氨酰顺反异构酶1(Pin1)活性的表达与细胞因子白细胞介素-17(IL-17)水平相关性及其临床意义。方法:选取98例SLE患者,其中42例为SLE初治患者,另选43例健康体检者为健康对照组。采用酶联免疫... 目的:探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血肽基脯氨酰顺反异构酶1(Pin1)活性的表达与细胞因子白细胞介素-17(IL-17)水平相关性及其临床意义。方法:选取98例SLE患者,其中42例为SLE初治患者,另选43例健康体检者为健康对照组。采用酶联免疫吸附试验检测所有研究对象入组时及98例SLE患者治疗后3个月血清中Pin1、IL-17水平,分析98例SLE患者血清Pin1水平变化及与细胞因子IL-17、SLE疾病活动指数(SLEDAI)评分、实验室指标的相关性,分析42例SLE患者初治时、治疗后3个月时其水平变化及意义。结果:①SLE稳定组外周血的Pin1表达水平明显高于健康对照组(H=28.913,P<0.05),SLE活动组外周血的Pin1表达水平明显高于SLE稳定组(H=31.738,P<0.05)。②SLE患者Pin1与IL-17、SLEDAI评分呈正相关(r=0.640,P<0.05;r=0.461,P<0.05),与抗ds-DNA抗体、C反应蛋白、红细胞沉降率无明显相关性。③SLE初治组外周血的Pin1表达水平明显高于健康对照组(H=55.568,P<0.05),SLE初治组治疗后3个月的Pin1表达水平较治疗前下降(H=28.136,P<0.05)。④血清Pin1水平在有肾脏损害的SLE患者表达增高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:SLE患者外周血Pin1过表达,IL-17增高且与其呈正相关,经过治疗能显著降低Pin1活性,降低IL-17细胞因子水平,抑制Pin1蛋白表达,可能会延缓SLE的进展,Pin1抑制剂可能成为SLE治疗的新靶点之一。 展开更多

关键词 系统性红斑狼疮 肽基脯氨酰顺反异构酶1 白细胞介素-17 酶联免疫吸附测定

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PIN1蛋白在胃癌组织中表达及其临床意义 被引量：1

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作者 张雅琴 白光辉 郭云娣 《江苏医药》 CAS 2015年第18期2128-2130,共3页

目的探讨肽基脯氨酰顺反异构酶1(PIN1)蛋白在胃癌组织中的表达及其临床意义。方法应用MaxEnvision免疫组化法检测213例胃癌组织及40例正常胃黏膜组织中PIN1蛋白表达,分析其与临床病理参数及患者术后生存率的关系。结果胃癌组织中PIN1蛋... 目的探讨肽基脯氨酰顺反异构酶1(PIN1)蛋白在胃癌组织中的表达及其临床意义。方法应用MaxEnvision免疫组化法检测213例胃癌组织及40例正常胃黏膜组织中PIN1蛋白表达,分析其与临床病理参数及患者术后生存率的关系。结果胃癌组织中PIN1蛋白阳性表达率高于正常胃黏膜组织(34.3%vs.17.5%)(P<0.05)。有淋巴结转移者(97例)的胃癌组织PIN1蛋白阳性表达率低于无淋巴结转移者(116例)(26.80%vs.40.52%)(P<0.05),PIN1蛋白阳性表达患者(73例)5年生存率低于阴性表达患者(140例)(17.8%vs.45.0%)(P<0.05)。结论胃癌组织PIN1蛋白表达可作为筛选高危淋巴结转移患者和预测胃癌预后的有用指标。 展开更多

关键词 胃癌 肽基脯氨酰顺反异构酶1

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Pin1蛋白与上皮间质转化相关蛋白在宫颈鳞癌中的表达及意义 被引量：5

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作者 焦娟 徐丽秀 +3 位作者 肖金宝 郭春凤 马俊旗 阿仙姑.哈斯木 《新疆医科大学学报》 CAS 2017年第10期1333-1337,共5页

目的探讨肽基脯氨酰顺反异构酶1(Pin1)蛋白在宫颈鳞癌(CSCC)组织中的表达及与上皮间质转化相关蛋白E-钙粘素(E-cadherin)、N-钙粘素(N-cadherin)、β-连接蛋白(β-catenin)和波形蛋白(Vimentin)表达关系及意义。方法采用免疫组织化学SP... 目的探讨肽基脯氨酰顺反异构酶1(Pin1)蛋白在宫颈鳞癌(CSCC)组织中的表达及与上皮间质转化相关蛋白E-钙粘素(E-cadherin)、N-钙粘素(N-cadherin)、β-连接蛋白(β-catenin)和波形蛋白(Vimentin)表达关系及意义。方法采用免疫组织化学SP法检测89例宫颈鳞癌组织及相应癌旁组织中Pin1、E-cadherin、Ncadherin、β-catenin和Vimentin蛋白表达。结果宫颈鳞癌组织中Pin1蛋白的阳性表达率(73.0%)明显高于正常宫颈组织(27.0%),且随着宫颈病变的进展,Pin1的表达逐渐增加,尤其在低分化鳞癌及伴有淋巴结转移的宫颈鳞癌中Pin1上调更加明显,差异有统计学意义(P<0.05);β-catenin、E-cadherin、N-cadherin和Vimentin蛋白在宫颈鳞癌中阳性表达率分别为37.1%、20.2%、66.3%和75.3%,随着宫颈病变的进展,上皮表面标志物E-cadherin和β-catenin表达明显下调(P<0.05),而间质细胞表型N-cadherin和Vimentin蛋白表达明显上调(P<0.05)。在宫颈鳞癌中Pin1与E-cadherin和β-catenin蛋白的表达呈负相关(r=-0.450,P<0.001;r=-0.367,P=0.003),而与N-cadherin和Vimentin蛋白的表达呈正相关(r=0.491,P=0.001;r=0.299,P=0.017)。结论宫颈鳞癌组织中Pin1蛋白表达上调可能是影响肿瘤细胞上皮间质转化相关蛋白E-cadherin、N-cadherin、β-catenin和Vimentin在细胞表达的重要原因之一,其可能反映宫颈鳞癌的发病机制。 展开更多

关键词 宫颈鳞癌 肽基脯氨酰顺反异构酶1(Pin1) 上皮间质转化

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慢病毒介导的shRNA对A549细胞Pin1表达的干扰作用 被引量：3

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作者 赵帅 董文斌 +5 位作者 张婵 李清平 康兰 雷小平 郭琳 翟雪松 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期245-249,共5页

目的构建Pin shRNA慢病毒载体,建立稳定抑制肽基脯氨酰顺反异构酶1(Pin1)表达的A549细胞系。方法根据查阅文献获得Pin1shRNA干扰靶点序列并插入pLenR-GPH载体,构建pLenR-GPH-Pin1shRNA慢病毒载体,随后转入人胚肾HEK293T细胞中,收集其上... 目的构建Pin shRNA慢病毒载体,建立稳定抑制肽基脯氨酰顺反异构酶1(Pin1)表达的A549细胞系。方法根据查阅文献获得Pin1shRNA干扰靶点序列并插入pLenR-GPH载体,构建pLenR-GPH-Pin1shRNA慢病毒载体,随后转入人胚肾HEK293T细胞中,收集其上清进行病毒滴度测定,再行慢病毒的包装,将获得的慢病毒毒液感染A549细胞。通过实时定量PCR(qRT-PCR)及Western blot法检测Pin1在不同组的表达抑制情况。结果经限制性内切酶鉴定及测序分析,成功构建了pLenR-GPH-Pin1shRNA慢病毒载体质粒,包装并得到高滴度的病毒颗粒。通过qRT-PCR和Western blot法检测显示,与对照组相比,pLenR-GPH-Pin1shRNA慢病毒载体感染的A549细胞中Pin1的表达在mRNA和蛋白水平均有所下降。结论慢病毒介导的shRNA能够有效下调A549细胞中Pin 1的表达。 展开更多

关键词 肽基脯氨酰顺反异构酶1(Pin1) 慢病毒载体 A549细胞 基因表达

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宫颈癌细胞株和宫颈上皮组织中Pin1和Cyclin D1的表达及临床意义 被引量：19

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作者 李红雨 徐茜 +5 位作者 朱涛 周金华 邓东锐 王世宣 卢运萍 马丁 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2006年第3期367-372,共6页

背景与目的:肽基脯氨酰顺反异构酶Pin1在人类多种肿瘤中过表达,Pin1过表达可增强CyclinD1表达,在肿瘤发生发展中起重要作用。本研究拟探讨宫颈癌细胞株及宫颈上皮组织中Pin1、CyclinD1的表达及其临床意义。方法:应用RT-PCR、Westernblo... 背景与目的:肽基脯氨酰顺反异构酶Pin1在人类多种肿瘤中过表达,Pin1过表达可增强CyclinD1表达,在肿瘤发生发展中起重要作用。本研究拟探讨宫颈癌细胞株及宫颈上皮组织中Pin1、CyclinD1的表达及其临床意义。方法:应用RT-PCR、Westernblot法检测HeLa、SiHa、C33a、Caski细胞中Pin1和CyclinD1基因蛋白表达,免疫组化法检测10例正常宫颈、21例宫颈上皮内瘤样病变、57例浸润癌组织中Pin1和CyclinD1的表达状况,评价其临床意义。结果:HeLa、SiHa、C33a、Caski细胞存在不同程度Pin1mRNA及蛋白过表达(P<0.05)。正常宫颈、宫颈上皮内瘤样病变、浸润癌组织中Pin1蛋白表达逐渐增强,分别为0%、47.62%、64.91%(P<0.05)。Pin1蛋白过表达与宫颈癌临床分期、病理分级、淋巴结转移无关(P>0.05);但宫颈腺癌组织中Pin1表达明显高于鳞癌(P<0.05)。Pin1过表达与CyclinD1表达呈显著正相关(P<0.05)。结论:Pin1在宫颈癌细胞株及宫颈癌组织中存在mRNA及蛋白水平上的过表达,Pin1过表达与CyclinD1表达密切相关,Pin1和CyclinD1异常表达可能参与宫颈癌的发生发展。 展开更多

关键词 肽基脯氨酰顺反异构酶Pin1 宫颈肿瘤 宫颈癌细胞株 宫颈上皮组织 CYCLIN D1 免疫组织化学

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Pin1在宫颈癌中过表达及其与Ki67关系的研究 被引量：7

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作者 李红雨 石小燕 +4 位作者 徐茜 邓东锐 王世宣 卢运萍 马丁 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期181-185,共5页

目的:探讨宫颈癌中肽基脯氨酰顺反异构酶Pin1表达、与Ki67的相关性及其临床意义。方法:应用RT-PCR和免疫组化技术检测宫颈癌组织中Pin1mRNA和蛋白表达水平及其与Ki67蛋白表达的相关性。结果:1)宫颈癌组织中Pin1mRNA表达明显高于正常宫... 目的:探讨宫颈癌中肽基脯氨酰顺反异构酶Pin1表达、与Ki67的相关性及其临床意义。方法:应用RT-PCR和免疫组化技术检测宫颈癌组织中Pin1mRNA和蛋白表达水平及其与Ki67蛋白表达的相关性。结果:1)宫颈癌组织中Pin1mRNA表达明显高于正常宫颈组织(P<0.05);2)从正常宫颈到CIN再到浸润癌Pin1蛋白表达逐渐增强(P<0.05);3)Pin1蛋白过表达与临床分期、病理分级、淋巴结转移无明显相关(P>0.05);但宫颈腺癌Pin1表达明显高于宫颈鳞癌(P<0.05);4)Pin1过表达与Ki67表达呈显著正相关(P<0.05)。结论:1)Pin1过表达与宫颈癌细胞增殖有关,参与宫颈癌发生发展;2)Pin1过表达可作为宫颈癌诊断的辅助指标。 展开更多

关键词 肽基脯氨酰顺反异构酶Pin1 子宫颈癌 KI67

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沉默Pin1基因对子宫颈癌SiHa细胞生物学性能的影响 被引量：1

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作者 肖金宝 赵骏达 +1 位作者 马俊旗 阿仙姑.哈斯木 《新疆医科大学学报》 CAS 2017年第6期783-786,共4页

目的探讨肽基脯氨酰同分异构酶(peptidyl-prolylcis/trans isomerase,Pin1)基因对子宫颈癌SiHa细胞生物学性能的影响。方法实验设立4组:空白对照组(正常培养的SiHa细胞)、阴性对照组(SiHa细胞转染随机序列)和Pin1siRNA1组、Pin1siRNA2组... 目的探讨肽基脯氨酰同分异构酶(peptidyl-prolylcis/trans isomerase,Pin1)基因对子宫颈癌SiHa细胞生物学性能的影响。方法实验设立4组:空白对照组(正常培养的SiHa细胞)、阴性对照组(SiHa细胞转染随机序列)和Pin1siRNA1组、Pin1siRNA2组(转染siRNA序列1、2),采用基因RNA干扰技术下调子宫颈癌SiHa细胞中Pin1的表达;qRT-PCR和Western blot法检测Pin1 mRNA和Pin1蛋白水平的变化。Transwell小室体外实验检测Pin1基因对SiHa细胞侵袭、迁移能力的影响;应用流式细胞术分析其对SiHa细胞周期及凋亡的影响。结果 SiHa细胞转染基因Pin1siRNA干扰SiHa细胞后Pin1mRNA和Pin1蛋白表达水平明显降低;Transwell小室体外实验表明,Pin1siRNA1、Pin1siRNA2组蛋白表达下调后细胞侵袭、迁移能力降低;流式细胞术结果提示,与空白对照组、阴性对照组相比,Pin1基因被干扰后细胞阻滞在G0/G期,细胞凋亡率明显增高(P<0.05)。结论降低Pin1表达能明显抑制宫颈癌细胞的侵袭、迁移能力。Pin1参与了SiHa细胞的凋亡过程,并且随Pin1表达量的高低来调控肿瘤细胞的周期和凋亡程度。 展开更多

关键词 肽基脯氨酰同分异构酶(Pin1) SIHA细胞 宫颈癌 侵袭 转移

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Pin1基因真核表达载体的构建及在宫颈癌HeLa细胞中的表达

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作者 李红雨 朱涛 +6 位作者 周金华 徐茜 胡春霞 邓东锐 王世宣 卢运萍 马丁 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期633-636,共4页

目的构建一种含人肽基脯氨酰顺反异构酶Pin1的质粒,以绿色荧光蛋白作为报告基因,观察其在宫颈癌HeLa细胞中的表达。方法从人宫颈癌HeLa细胞中,以RT-PCR方法扩增出人Pin1基因全长cDNA序列(CDS),插入增强绿色荧光蛋白表达质粒pEGFP-C1,脂... 目的构建一种含人肽基脯氨酰顺反异构酶Pin1的质粒,以绿色荧光蛋白作为报告基因,观察其在宫颈癌HeLa细胞中的表达。方法从人宫颈癌HeLa细胞中,以RT-PCR方法扩增出人Pin1基因全长cDNA序列(CDS),插入增强绿色荧光蛋白表达质粒pEGFP-C1,脂质体法转染HeLa细胞,荧光显微镜下观测绿色荧光蛋白的表达,免疫印迹法检测GFP-Pin1蛋白的表达。结果RT-PCR扩增出人Pin1基因;构建pEGFP-C1-Pin1重组质粒,体外成功转染入宫颈癌HeLa细胞,在荧光显微镜下可见强绿色荧光蛋白的表达,免疫印迹法证实存在GFP-Pin1蛋白高表达;经G418筛选获得单细胞克隆。结论重组质粒pEGFP-Pin1体外转染HeLa细胞后,目的基因能够在细胞内有效表达,检测方法简便可靠,为利用转染该目的基因的细胞进行下一步研究提供了实验基础。 展开更多

关键词 肽基脯氨酰顺反异构酶Pin1 质粒构建 基因转染

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肽基脯氨酰顺反异构酶Pin1与心血管疾病的研究进展

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作者 林丽明 吴莹 +1 位作者 吴梅芳 林金秀 《中华心血管病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期1104-1106,共3页

Pinl是肽基脯氨酰顺反异构酶（peptidyl．prolylcis．transisomerase，PPlase）微小菌素蛋白家族成员之一，由哈佛大学医学院的卢坤平教授于1996年首次发现并命名，是目前发现的人体内唯一能够识别磷酸化的丝氨酸／苏氨酸．脯氨酸（pSer... Pinl是肽基脯氨酰顺反异构酶（peptidyl．prolylcis．transisomerase，PPlase）微小菌素蛋白家族成员之一，由哈佛大学医学院的卢坤平教授于1996年首次发现并命名，是目前发现的人体内唯一能够识别磷酸化的丝氨酸／苏氨酸．脯氨酸（pSer／Thr-Pro）基序的顺反异构酶。Pinl蛋白编码基因定位于19p13，由163个氨基酸组成，相对分子质量为18000，含WW和PPlase两个结构域，WW结构域特异结合底物蛋白的pSer／Thr-Pro基序，PPIase结构域催化其肽键发生顺反异构，从而改变靶蛋白的构象，调节靶蛋白的活性、稳定性、磷酸化水平、亚细胞定位及与其他蛋白质之间的相互作用，参与调控细胞周期、基因转录和信号转导等生命活动过程。 展开更多

关键词 肽基脯氨酰顺反异构酶Pin1 心血管疾病 哈佛大学医学院 磷酸化水平 蛋白编码 相对分子质量 PPlase PPIASE

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