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瑞香狼毒水提取物对肺腺癌细胞株耐药及凋亡的影响 被引量：9
1
作者 李鸿君 邢立强 +1 位作者 李旺 赵建清 《河北医药》 CAS 2013年第6期823-825,共3页
目的探讨瑞香狼毒水提取物对肺腺癌细胞株A549和耐药细胞株A549/DDP细胞凋亡率及耐药基因表达的影响。方法用不同浓度的瑞香狼毒水提取物、顺铂分别及联合处理人肺腺癌细胞株A549和A549/DDP,用MTT法检测肺癌细胞凋亡率、实时荧光定量PC... 目的探讨瑞香狼毒水提取物对肺腺癌细胞株A549和耐药细胞株A549/DDP细胞凋亡率及耐药基因表达的影响。方法用不同浓度的瑞香狼毒水提取物、顺铂分别及联合处理人肺腺癌细胞株A549和A549/DDP,用MTT法检测肺癌细胞凋亡率、实时荧光定量PCR检测多药耐药(multidrug resistance protein1,MRP1)基因mRNA水平以及用Westernblot检测多药耐药蛋白1(multidrug resistance protein1,MRP1)的表达水平。结果不同浓度瑞香狼毒水提取物作用相同时间或相同浓度作用不同时间对A549和A549/DDP的细胞抑制率差异有统计学意义(P<0.05);瑞香狼毒处理前后A549/DDP细胞株与A549细胞株相比,对顺铂的敏感性差异有统计学意义(P<0.05);同时两细胞株与瑞香狼毒和顺铂联合孵育后MRP1mRNA水平及MRP1蛋白表达水平差异有统计学意义(P<0.05)。结论瑞香狼毒水提取物有明显抗肿瘤作用,能增强肺癌耐药细胞株对DDP的敏感性,对肺癌耐药具有一定的逆转作用。 展开更多
关键词 肺腺癌A549 耐药株A549 DDP 瑞香狼毒 基因蛋白表达
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补中益气汤对A549/DDP肺腺癌耐药动物模型中凋亡相关信号分子caspase-9的影响 被引量：7
2
作者 井欢 于丹 +1 位作者 唐莹 刘春英 《解剖科学进展》 CAS 2014年第2期134-136,141,共4页
目的研究补中益气汤对肺腺癌荷瘤BALB/c小鼠实体瘤中凋亡相关信号分子Caspase-9表达的影响,探讨其对肺腺癌可能的作用机制。方法体外培养肺腺癌A549/DDP细胞,接种健康BALB/c小鼠,荷瘤成功后予补中益气汤治疗,实验分为:荷瘤对照组,补中... 目的研究补中益气汤对肺腺癌荷瘤BALB/c小鼠实体瘤中凋亡相关信号分子Caspase-9表达的影响,探讨其对肺腺癌可能的作用机制。方法体外培养肺腺癌A549/DDP细胞,接种健康BALB/c小鼠,荷瘤成功后予补中益气汤治疗,实验分为:荷瘤对照组,补中益气汤低剂量组及补中益气汤高剂量组。观察转移病灶情况,利用RT-PCR检测Caspase-9 mRNA的表达,免疫组化法检测Caspase-9蛋白表达。结果同荷瘤对照组相比,高、低剂量的补中益气汤均可上调凋亡相关信号分子Caspase-9 mRNA和蛋白的表达水平,并且补中益气汤高剂量组效果优于低剂量组。结论补中益气汤对肺腺癌的抑制作用可能与Caspase-9表达上调相关。 展开更多
关键词 补中益气汤 CASPASE-9 肺腺癌A549 DDP BALB C小鼠
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瑞香狼毒根部提取物对人肺腺癌A549细胞增殖及凋亡作用的影响
3
作者 卢年华 赵慧巧 +4 位作者 靳国印 张海霞 李永民 刘阳 王雨清 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期382-385,共4页
目的:探讨瑞香狼毒根部提取物(SCE)对人肺腺癌A549细胞作用和潜在机制。方法:细胞划痕和MTT用以评价和筛选SCE对A549细胞抑制的最佳浓度;激光共聚焦和荧光显微镜分别观察不同浓度SCE作用于A549后线粒体膜电位和染色质变化;Western blot... 目的:探讨瑞香狼毒根部提取物(SCE)对人肺腺癌A549细胞作用和潜在机制。方法:细胞划痕和MTT用以评价和筛选SCE对A549细胞抑制的最佳浓度;激光共聚焦和荧光显微镜分别观察不同浓度SCE作用于A549后线粒体膜电位和染色质变化;Western blot检测p53、MDM2蛋白表达。结果:SCE药物组A549细胞较空白对照组在24、48 h迁移率均显著降低(P<0.01);在1~20μg/mL范围内,随着药物浓度的增加,A549细胞抑制率增强;与空白对照组比较,SCE低、中、高剂量组绿色荧光细胞占比逐渐增加;随着SCE浓度升高,A549细胞荧光增强至白色,染色质凋亡呈碎块状;与空白对照组比较,SCE低、中、高浓度组p53蛋白表达显著上升(P<0.05);与空白对照组和SCE低浓度组比较,SCE中、高浓度组MDM2蛋白表达显著下降(P<0.01)。结论:SCE能够显著抑制肺腺癌A549细胞增殖,其作用机制可能与作用于线粒体膜电位和p53/MDM2负反馈通路有关。 展开更多
关键词 瑞香狼毒 西瑞香素 瑞香狼毒根部提取物 肺腺癌A549 细胞凋亡 p53-MDM2通路
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平盖灵芝提取物对肺腺癌A549细胞增殖抑制作用研究 被引量：2
4
作者 崔伟亮 李慧芬 田景振 《食品与药品》 CAS 2013年第4期253-255,共3页
目的探讨平盖灵芝不同极性部位提取物对肺腺癌A549细胞增殖的抑制作用。方法采用噻唑蓝(MTT)法测定。结果平盖灵芝氯仿部位提取物高剂量组(100μg/mL)对肺腺癌A549细胞的增殖抑制率为30.43%,与空白组比较差异有统计学意义(P<0.01)。... 目的探讨平盖灵芝不同极性部位提取物对肺腺癌A549细胞增殖的抑制作用。方法采用噻唑蓝(MTT)法测定。结果平盖灵芝氯仿部位提取物高剂量组(100μg/mL)对肺腺癌A549细胞的增殖抑制率为30.43%,与空白组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论平盖灵芝氯仿部位提取物对肺腺癌A549细胞增殖有一定抑制作用,其有效成分及作用机制有待进一步研究。 展开更多
关键词 平盖灵芝 提取物 肺腺癌A549 细胞
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人野生型survivin-1基因重组载体的构建及其在A549中的表达 被引量：2
5
作者 刘彦兵 李简 刘桐林 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期683-685,共3页
目的克隆细胞凋亡抑制蛋白Survivin异构体之一Survivin-1(SVV-1)基因的编码序列,构建含SVV-1基因的真核细胞表达载体并在肺腺癌细胞系A549中高表达,为进一步研究该基因在肺腺癌发病中的作用奠定基础。方法根据已发表的SVV-1基因的核苷... 目的克隆细胞凋亡抑制蛋白Survivin异构体之一Survivin-1(SVV-1)基因的编码序列,构建含SVV-1基因的真核细胞表达载体并在肺腺癌细胞系A549中高表达,为进一步研究该基因在肺腺癌发病中的作用奠定基础。方法根据已发表的SVV-1基因的核苷酸序列自行设计一对分别含有BamHⅠ和Xho l双酶切位点的survivin-1基因上下游引物,以A549细胞系抽提的RNA为模板进行逆转录聚合酶链反应(RT-PCR),扩增产物用Bam HI和XhoI双酶酶切后定向克隆到真核细胞表达载体pcDNA3.0中,用限制性内切酶酶切重组质粒pcDNA30-SVV-1和DNA序列测定进行鉴定。用脂质体法将pcDNA3。0-SVV-1导入肺腺癌细胞系A549中,嘌呤霉素选择培养,经免疫组化法和western blot鉴定其表达。结果RT-PCR扩增出长448bp的特异性片段,经克隆至pcDNA3.0后酶切鉴定证实,并测序表明序列与Gen-Bank报道完全一致。pcDNA3.0-SVV-1在A549细胞中有稳定表达。结论成功克隆了SVV-1的编码序列,构建了其真核细胞表达载体pcDNA3.0-SVV-1,有助于对SVV-1基因在腺癌发生中的致瘤机制做进一步研究。 展开更多
关键词 Survivin-1基因 基因克隆 真核表达载体 肺腺癌A549
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二母颗粒含药血清对肺腺癌A549及肝癌SMMC-7721细胞株凋亡的影响 被引量：2
6
作者 代勇 徐世军 +2 位作者 刘蓉 熊敏 苟玲 《中药药理与临床》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期5-8,共4页
目的:观察二母颗粒含药血清对肺腺癌A549及肝癌SMMC-7721细胞株增殖和凋亡的影响。方法:采用形态学及MTT法观察二母颗粒组(10g/kg)5%、10%、20%含药血清对A549及SMMC-7721细胞株增殖的抑制作用;通过流式细胞法观察药物对细胞凋亡的影响... 目的:观察二母颗粒含药血清对肺腺癌A549及肝癌SMMC-7721细胞株增殖和凋亡的影响。方法:采用形态学及MTT法观察二母颗粒组(10g/kg)5%、10%、20%含药血清对A549及SMMC-7721细胞株增殖的抑制作用;通过流式细胞法观察药物对细胞凋亡的影响。结果:形态学观察表明二母颗粒含药血清使A549及SMMC-7721细胞株发生形态改变;MTT结果显示二母颗粒含药血清对A549及SMMC-7721细胞株增殖有抑制作用,且随含药血清浓度的增高以及作用时间的延长,抑制作用亦有所加强。其中20%含药血清作用于A549及SMMC-7721细胞株48h,10%含药血清作用于A549 48h,其OD值与对照组比较均有统计学差异;流式细胞技术检测结果表明20%含药血清作用于A549细胞株24h及48h,10%含药血清作用于A549 48h,与同时间段阴性对照组比较凋亡率明显升高;20%、10%含药血清作用于SMMC-7721细胞株24h及48h,对肿瘤细胞的凋亡率也有明显升高的作用。结论:二母颗粒含药血清对A549及SMMC-7721细胞株的增殖有抑制作用,其作用机制与其诱导细胞凋亡有密切的关系。 展开更多
关键词 二母颗粒 肺腺癌A549 肝癌SMMC-7721 凋亡
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IFN、IL—6联合丝裂霉素抑制肺腺癌A549细胞系生长的研究
7
作者 姜正华 俞婉珍 《临床肺科杂志》 1999年第2期109-111,共3页
肺癌是呼吸系统恶性肿瘤之一,近年来其发病率、死亡率急剧上升。干扰素(IFN)及白介素6(IL—6)是细胞因子网络中的重要组成部分,具有广泛的生物活性,在体内外都具有较强的抗肿瘤作用。丝裂霉素C(MMC)是临床上常用的抗肿瘤药物,能抑制肿... 肺癌是呼吸系统恶性肿瘤之一,近年来其发病率、死亡率急剧上升。干扰素(IFN)及白介素6(IL—6)是细胞因子网络中的重要组成部分,具有广泛的生物活性,在体内外都具有较强的抗肿瘤作用。丝裂霉素C(MMC)是临床上常用的抗肿瘤药物,能抑制肿瘤细胞DNA的复制而发挥其抗肿瘤作用。 展开更多
关键词 肺腺癌A549 A549细胞 细胞系生长 细胞因子网络 丝裂霉素C 抗肿瘤作用 抑制率 IL—6 IL一6 抑制肿瘤细胞DNA的合成
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S型与R型人参皂苷Rh_2对人肺腺癌A549细胞增殖和凋亡的影响 被引量：34
8
作者 张春晶 于海涛 侯金才 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期1670-1674,共5页
目的:探讨人参皂苷Rh2(S型与R型)对人肺腺癌A549细胞增殖和凋亡的影响,以阐述人参活性成分抗肿瘤活性的构效关系及可能机制。方法:采用MTT实验测定细胞增殖;碘化丙啶(PI)单染流式细胞仪分析细胞周期中各时期的细胞百分数,观察人参皂苷Rh... 目的:探讨人参皂苷Rh2(S型与R型)对人肺腺癌A549细胞增殖和凋亡的影响,以阐述人参活性成分抗肿瘤活性的构效关系及可能机制。方法:采用MTT实验测定细胞增殖;碘化丙啶(PI)单染流式细胞仪分析细胞周期中各时期的细胞百分数,观察人参皂苷Rh2对人肺腺癌A549细胞增殖周期的影响。AnnexinⅤ-PI双染流式细胞术检测细胞凋亡,采用免疫荧光实验对作为细胞凋亡标志的Caspase-3活性进行测定。结果:人参皂苷Rh2对人肺腺癌A549细胞毒活性明显存在构效关系,其中25 mg.L-1的20(R)-人参皂苷Rh2和20(S)-人参皂苷Rh2作用48 h对肿瘤细胞株A549的增殖抑制率分别为28.5%,33.6%,IC50值分别为33.4,28.5 mg.L-1。20 mg·L-1的20(S)-人参皂苷Rh2作用A549细胞24 h后G0/G1期细胞比例显著高于对照组(P<0.01),S期细胞比例显著低于对照组(P<0.01),G2/M期细胞比例与对照组比较无显著性差异,说明20(S)-人参皂苷Rh2能阻滞细胞周期于G1期。30 mg.L-1的S型和R型人参皂苷Rh2作用A549细胞24 h后,无论是早期还是晚期凋亡率均明显高于正常组细胞(P<0.05),并且20(S)-人参皂苷Rh2组早期凋亡率明显高于20(R)-人参皂苷Rh2组,表现出明显的构效效应(P<0.05)。20(R)-人参皂苷Rh2和20(S)-人参皂苷Rh2作用6 h的A549细胞中标记Caspase-3活性的荧光亮度明显增强,说明Caspase-3的激活参与了人参皂苷Rh2诱导的A549细胞凋亡。结论:S型和R型人参皂苷Rh2均可剂量依赖性地抑制A549细胞增殖,并且20(S)-人参皂苷Rh2的抗肿瘤活性明显强于20(R)-人参皂苷Rh2,阻滞细胞周期于G1期,具有构效效应;S型和R型人参皂苷Rh2均具有促进A549细胞凋亡作用,并且20(S)-人参皂苷Rh2组早期凋亡率明显高于20(R)-人参皂苷Rh2组,具有构效效应。 展开更多
关键词 人参皂苷RH2 人肺腺癌A549细胞 细胞周期 凋亡
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苦参碱诱导肺腺癌A549细胞凋亡及对人端粒酶逆转录酶表达的影响 被引量：23
9
作者 钟梁 刘北忠 +3 位作者 郝坡 刘畅 王东生 王春光 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期1507-1510,共4页
目的观察苦参碱诱导肺腺癌A549细胞凋亡及对人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因表达的影响。方法以终质量浓度为0.1、0.2、0.4、0.6 mg/mL的苦参碱作用肺腺癌A549细胞48 h后,通过台盼蓝拒染法计数细胞的生长抑制率;以终质量浓度为0.2 mg/mL的... 目的观察苦参碱诱导肺腺癌A549细胞凋亡及对人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因表达的影响。方法以终质量浓度为0.1、0.2、0.4、0.6 mg/mL的苦参碱作用肺腺癌A549细胞48 h后,通过台盼蓝拒染法计数细胞的生长抑制率;以终质量浓度为0.2 mg/mL的苦参碱作用A549细胞48、72、96 h后,经透射电镜和DNA Ladder实验了解到细胞凋亡的发生,PCR-TRAP法检测端粒酶活性,实时RT-PCR检测hTERT的mRNA表达水平。结果各种质量浓度的苦参碱作用A549细胞48 h后,均显著抑制细胞的增殖且呈浓度依赖性;0.2 mg/mL的苦参碱作用A549细胞不同时间后,经透射电镜形态学检测和DNA Ladder实验,均显示A549细胞发生了凋亡改变;0.2 mg/mL的苦参碱作用A549细胞48 h后,端粒酶活性明显受抑,hTERT mRNA表达显著降低。结论苦参碱能抑制肺腺癌A549细胞的生长并诱导其凋亡,其机制可能与下调hTERT基因表达,抑制端粒酶活性,破坏端粒稳定性有关。 展开更多
关键词 苦参碱 肺腺癌A549细胞 细胞凋亡 人端粒酶逆转录酶(hTERT)
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纳米氧化锌对人肺腺癌细胞A549的毒性 被引量：23
10
作者 王琳 王莉娟 +1 位作者 张芳 丁文军 《中国科学院研究生院学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期83-90,共8页
探讨纳米氧化锌(ZnO)对体外培养的人肺腺癌细胞A549的生物学效应.使用原子力显微镜(AFM)、透射电镜(TEM)和X射线衍射仪(XRD)研究纳米ZnO颗粒物的理化性质.然后,使用0mmol/L、0.1mmol/L、0.5mmol/L、1mmol/L、5mmol/L、10mmol/L的纳米Zn... 探讨纳米氧化锌(ZnO)对体外培养的人肺腺癌细胞A549的生物学效应.使用原子力显微镜(AFM)、透射电镜(TEM)和X射线衍射仪(XRD)研究纳米ZnO颗粒物的理化性质.然后,使用0mmol/L、0.1mmol/L、0.5mmol/L、1mmol/L、5mmol/L、10mmol/L的纳米ZnO处理体外培养的人肺腺癌A549细胞,MTT法测定细胞生长活性.并且测定1mmol/L纳米ZnO染毒24h后细胞培养液上清中,乳酸脱氢酶(LDH)和胞内的超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)的活性,以及丙二醛(MDA)的含量.使用透射电镜和流式细胞仪检测细胞凋亡的情况.荧光染色检测细胞产生活性氧(ROS)的生成.实验所用的ZnO纳米颗粒为长75nm、直径20nm的针状纤锌矿晶体.细胞实验结果表明,纳米ZnO颗粒对A549细胞的生长活性具有明显的抑制作用,存在剂量-效应关系.培养液上清中LDH活性显著升高(P<0.05),胞内CAT活性显著下降、MDA含量显著升高(P<0.01),但SOD活性下降不明显.荧光染色检测发现染毒后A549细胞出现细胞凋亡,而且细胞内ROS的生成与纳米ZnO存在剂量-效应关系.结论是纳米氧化锌诱导人肺腺癌A549细胞产生活性氧,引发细胞凋亡,并产生细胞毒性. 展开更多
关键词 纳米氧化锌 人肺腺癌A549细胞 细胞毒性
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人参皂甙Rg3对肺腺癌A549细胞株信号传导相关基因表达的影响 被引量：16
11
作者 陈明伟 杨岚 +3 位作者 倪磊 郭炫 田荣哲 王小琴 《中华结核和呼吸杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期37-40,共4页
目的　探讨人参皂甙Rg3[2 0 (R) Rg3]对人肺腺癌A5 4 9细胞株的信号传导相关基因差异表达的影响。方法　A5 4 9细胞株分 2组进行培养 ,实验组培养液中含有 10 -6mol/L的2 0 (R) Rg3,对照组不加药物 ,干预培养 72h后用BiostarH 4 0s型... 目的　探讨人参皂甙Rg3[2 0 (R) Rg3]对人肺腺癌A5 4 9细胞株的信号传导相关基因差异表达的影响。方法　A5 4 9细胞株分 2组进行培养 ,实验组培养液中含有 10 -6mol/L的2 0 (R) Rg3,对照组不加药物 ,干预培养 72h后用BiostarH 4 0s型基因芯片测定其基因差异表达。结果　共检测到有效基因点数量 3490个 ,2 0 (R) Rg3干预后有 2 4个基因发生差异表达 ,其中 2个细胞信号和传递蛋白基因以及 2个细胞骨架和运动基因上调 ,原癌基因和抑癌基因下调的有 3个 ,蛋白翻译合成的基因 2个下调、1个上调 ,DNA合成修复重组和代谢相关基因 1个、免疫相关基因 1个下调 ,代谢基因 1个上调 ,其他功能基因也受到一定影响。结论　 2 0 (R) Rg3可显著影响人肺腺癌A5 4 9细胞株信号传导等相关基因的差异表达。 展开更多
关键词 人参皂甙RG3 信号传导 肺腺癌A549细胞 相关基因表达 上调 人肺腺癌 差异表达 结论 培养 点数
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白花蛇舌草乙醇提取物对肺腺癌A549/DDP细胞的耐药逆转及其机制 被引量：20
12
作者 高宝安 陈世雄 +2 位作者 邓红艳 杨俊 黄骥 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期2714-2715,共2页
目的探讨白花蛇舌草乙醇提取物在体外对肺腺癌A549/DDP细胞株的耐药逆转作用及对多药耐药相关蛋白(MRP)表达的影响。方法MTT法测定白花蛇舌草乙醇提取物对A549/DDP细胞耐药的逆转作用;半定量RT-PCR和Western Blot分别检测肿瘤细胞MRP m... 目的探讨白花蛇舌草乙醇提取物在体外对肺腺癌A549/DDP细胞株的耐药逆转作用及对多药耐药相关蛋白(MRP)表达的影响。方法MTT法测定白花蛇舌草乙醇提取物对A549/DDP细胞耐药的逆转作用;半定量RT-PCR和Western Blot分别检测肿瘤细胞MRP mRNA和蛋白的表达。结果白花蛇舌草乙醇提取物使A549/DDP细胞对DDP的耐药倍数由10.294下降至5.586;并显著降低A549/DDP MRP mRNA和蛋白的表达。结论白花蛇舌草乙醇提取物可以部分逆转肺腺癌A549/DDP细胞对DDP的耐药;其逆转作用可能通过降低细胞MRP的表达来实现。 展开更多
关键词 白花蛇舌草乙醇提取物 人肺腺癌A549/DDP细胞 多药耐药相关蛋白
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肺岩宁方对A549裸鼠移植瘤VEGF与HIF-1α表达的影响 被引量：15
13
作者 张铭 董昀 +1 位作者 徐振晔 白冰 《上海中医药杂志》 北大核心 2008年第5期83-85,共3页
目的观察肺岩宁方对A549裸鼠移植瘤的抑制作用及对VEGF、HIF-1α表达的影响。方法将A549荷瘤鼠随机分为4组:模型组、化疗组、肺岩宁方组和综合治疗组,化疗组和综合治疗组DDP0.1mg腹腔注射3d,肺岩宁方组和综合治疗组中药灌胃21d。观察抑... 目的观察肺岩宁方对A549裸鼠移植瘤的抑制作用及对VEGF、HIF-1α表达的影响。方法将A549荷瘤鼠随机分为4组:模型组、化疗组、肺岩宁方组和综合治疗组,化疗组和综合治疗组DDP0.1mg腹腔注射3d,肺岩宁方组和综合治疗组中药灌胃21d。观察抑瘤率,RT-PCR和免疫组化法检测移植瘤VEGF和HIF-1α表达。结果肺岩宁方组抑瘤率为34.17%,低于模型组(P<0.05);RT-PCR结果显示,综合治疗组、肺岩宁方组和化疗组的VEGF mRNA的表达明显低于模型组(P<0.05,P<0.01);综合治疗组HIF-1α mRNA的表达水平低于模型组(P<0.05),其余各组无显著差异。VEGF、HIF-1α光密度指数化疗组、肺岩宁方组和综合治疗组均明显低于模型组(P<0.01)。结论益气养精法为主的肺岩宁方有一定的抑制肺癌生长的作用,且与顺铂有协同作用,肺岩宁方可能通过对HIF-1α的抑制,达到对VEGF的表达调控,从而抑制血管生成,控制肿瘤生长。 展开更多
关键词 益气养精 肺岩宁方 人肺腺癌A549 血管内皮细胞生长因子 缺氧诱导因子1Α
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全蝎粉酶解工艺最佳用酶的初步筛选 被引量：19
14
作者 焦方文 王集会 +3 位作者 邹龑 张盼盼 刘玉红 王俊香 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期2407-2408,共2页
目的从四种蛋白酶中选出酶解全蝎粉的最佳用酶,来制备抗肿瘤多肽。方法以蛋白质的水解度、对肺腺癌细胞A549细胞的抑制率为指标,同时以全蝎粉水提物作为对照组,评价胃蛋白酶、胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、弹性蛋白酶对全蝎粉的水解效果。... 目的从四种蛋白酶中选出酶解全蝎粉的最佳用酶,来制备抗肿瘤多肽。方法以蛋白质的水解度、对肺腺癌细胞A549细胞的抑制率为指标,同时以全蝎粉水提物作为对照组,评价胃蛋白酶、胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、弹性蛋白酶对全蝎粉的水解效果。结果胃蛋白酶对全蝎粉的水解度为8.47%,且不同的药物浓度对肺腺癌A549细胞的抑制率比对照组低,其IC50为14.7427 mg/ml;胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、弹性蛋白酶的水解度分别为25.12%、12.37%、11.13%,不同的药物浓度对肺腺癌A549细胞的抑制率比对照组高,其IC50分别为0.6878 mg/ml、0.7073 mg/ml、0.8306 mg/ml;对照组的IC50为5.9386 mg/ml。结论全蝎粉酶解工艺的最佳用酶是胰蛋白酶,其次是胰凝乳蛋白酶和弹性蛋白酶,而胃蛋白酶可以去除。 展开更多
关键词 蛋白酶 全蝎粉 水解度 肺腺癌A549细胞株 半数抑制率
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益气除痰方对肺癌系列基质金属蛋白酶表达的影响 被引量：18
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作者 王淑美 林丽珠 +2 位作者 熊绍权 周京旭 孙玲玲 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期135-138,共4页
目的研究益气除痰方对人肺腺癌A549细胞及LEWIS肺癌小鼠肿瘤组织基质金属蛋白酶MMP1、MMP2、MMP9、MMP14等促肿瘤转移因子表达的影响。方法 :培养A549细胞,20%益气除痰方含药血清干预,划痕实验分析细胞侵袭、转移能力的改变,RT-PCR检测... 目的研究益气除痰方对人肺腺癌A549细胞及LEWIS肺癌小鼠肿瘤组织基质金属蛋白酶MMP1、MMP2、MMP9、MMP14等促肿瘤转移因子表达的影响。方法 :培养A549细胞,20%益气除痰方含药血清干预,划痕实验分析细胞侵袭、转移能力的改变,RT-PCR检测其对A549肺癌细胞MMP1、MMP2、MMP9、MMP14 mRNA基因表达的影响。建立C57BL/6J小鼠Lewis肺癌模型,治疗组每日予益气除痰方3.0 g.kg-1处理,灌胃21 d后,处死,检测肿瘤体积、重量、肺转移灶,并用免疫组化法比较各组肿瘤组织MMP2、MMP14的表达。结果 :20%益气除痰方含药血清可抑制A549细胞的侵袭和转移能力,并能降低MMP2、MMP14转录水平基因的表达,与空白组比较差异有统计学意义(P<0.01),MMP1、MMP9 mRNA的表达差异无统计学意义(P>0.05);益气除痰方3.0 g.kg-1组LEWIS肺癌小鼠肿瘤体积、重量、肺转移灶数明显降低,肿瘤组织MMP2、MMP14的表达降低,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论 :益气除痰方能抑制肺腺癌A549细胞的侵袭和转移,降低MMP2、MMP14 mRNA转录水平的表达;能抑制LEWIS肺癌小鼠肿瘤肺转移,降低其肿瘤组织MMP2、MMP14的表达,抗转移可能是益气除痰方治疗肺癌的作用机制之一。 展开更多
关键词 益气除痰方 LEWIS肺癌 人肺腺癌A549 MMP2 MMP14
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黄芩苷和木犀草苷在体外对流感病毒H1N1感染A549细胞中NF-κB信号通路的调控作用 被引量：18
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作者 刘晓婷 顾立刚 +4 位作者 邓东沅 于卓男 王玥琦 吴珺 邱泽计 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期1937-1941,共5页
目的:探讨流感病毒H1N1体外感染诱导细胞NF-κB信号通路相关因子表达及黄芩苷和木犀草素-7-O-葡萄糖苷的调控作用。方法:正常生长细胞接种100TCID50的病毒液;吸附2h后分别加入黄芩苷(3.96、0.99mg/L)、木犀草苷(25.0、12.5mg/L),并以奥... 目的:探讨流感病毒H1N1体外感染诱导细胞NF-κB信号通路相关因子表达及黄芩苷和木犀草素-7-O-葡萄糖苷的调控作用。方法:正常生长细胞接种100TCID50的病毒液;吸附2h后分别加入黄芩苷(3.96、0.99mg/L)、木犀草苷(25.0、12.5mg/L),并以奥司他韦(0.75mg/L)做阳性对照。采用基因芯片技术分析各组细胞差异表达炎性因子。以RT-PCR和Western blot法检测细胞NF-κB信号通路相关因子m RNA和蛋白的表达变化。结果:与正常细胞对照组比较,H1N1感染组差异表达基因IRAK1、RIPK1、TAB2、NFKB、IL1B、IL8、TNFA和COX-2明显上调;与H1N1感染组比较,奥司他韦对照组基因NFKB、IL1B和TNFA明显下调,NFKBIA明显上调;黄芩苷高、低剂量组基因IRAK1、RIPK1、TAB2、NFKB、IL1B、IL8和TNFA明显下调,NFKBIA和TNFAIP3上调;木犀草苷高、低剂量组对差异表达基因RIPK1、IRAK1、TAB2、NFKB、IL1B、TNFA和COX-2明显下调,对NFKBIA上调作用。结论:流感病毒感染后活化NF-κB信号通路,引起炎性因子过度表达;黄芩苷和木犀草苷可以对活化通路的正负反馈进行调节,减轻病毒对宿主细胞的炎性损伤作用,发挥抗病毒作用。 展开更多
关键词 黄芩苷 木犀草素-7-O-葡萄糖苷 流感病毒H1N1 人肺腺癌A549细胞 NF-ΚB信号通路 基因芯片
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正交实验法优化发酵蜈蚣粉中总黄酮提取工艺 被引量：17
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作者 王彦多 刘春雨 +3 位作者 吕世洁 王颖 王立娜 王集会 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期183-186,192,共5页
目的:采用正交实验法优化发酵蜈蚣粉总黄酮回流提取工艺。方法:在对发酵蜈蚣粉中总黄酮提取条件进行单因素实验的基础上,以提取温度(A)、料液比(B)和提取时间(C)为自变量,发酵蜈蚣粉总黄酮得率为因变量,利用正交实验法探究最佳提取工艺... 目的:采用正交实验法优化发酵蜈蚣粉总黄酮回流提取工艺。方法:在对发酵蜈蚣粉中总黄酮提取条件进行单因素实验的基础上,以提取温度(A)、料液比(B)和提取时间(C)为自变量,发酵蜈蚣粉总黄酮得率为因变量,利用正交实验法探究最佳提取工艺条件。同时采用MTT体外抗肿瘤实验方法,研究发酵蜈蚣粉提取物对肺腺癌A549细胞的抑制作用。结果:影响发酵蜈蚣粉总黄酮得率提取因素的大小次序为:料液比>提取温度>提取时间,在此次实验中,发酵蜈蚣粉最佳提取工艺为:提取温度80℃,料液比1∶40(g∶m L),提取时间2.5 h,在此条件下发酵蜈蚣粉中总黄酮得率为1.970%;提取获得的不同浓度的发酵蜈蚣醇提液对肺腺癌A549细胞的抑制率均大于顺铂,具有较优良的抗肿瘤活性。 展开更多
关键词 发酵蜈蚣粉 正交实验 回流提取 总黄酮 MTT法 肺腺癌A549细胞株
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β-榄香烯乳联合照射对DNA-PKcs基因表达及凋亡的影响 被引量：15
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作者 张卓 邹丽娟 田莹莹 《实用癌症杂志》 2009年第6期555-559,共5页
目的探讨β-榄香烯乳影响肺腺癌A549细胞凋亡及DNA-PKcs基因表达的放射增敏机制。方法实验分为对照组、单纯照射组(4Gy照射)、单纯药物组(10μg/ml、20μg/mlβ-榄香烯乳)、药物+照射组(10μg/ml、20μg/mlβ-榄香烯乳+4Gy照射)。采用... 目的探讨β-榄香烯乳影响肺腺癌A549细胞凋亡及DNA-PKcs基因表达的放射增敏机制。方法实验分为对照组、单纯照射组(4Gy照射)、单纯药物组(10μg/ml、20μg/mlβ-榄香烯乳)、药物+照射组(10μg/ml、20μg/mlβ-榄香烯乳+4Gy照射)。采用四氮唑蓝比色分析法(MTT法)检测β-榄香烯乳对肺腺癌A549细胞的半数抑制浓度(IC50);克隆形成实验计算细胞存活率;采用流式细胞仪检测细胞周期与凋亡率;逆转录实时荧光定量PCR技术(RT-PCR)检测细胞DNA-PKcs基因mRNA表达量。结果MTT法测得β-榄香烯乳对A549细胞的IC50值为120μg/ml;克隆形成实验证明β-榄香烯乳对A549细胞有放射增敏作用;药物+照射组细胞G2/M期比率及凋亡率明显高于单纯照射组及单纯用药组(P<0.05);药物+照射组DNA-PKcs基因mRNA表达量与单纯照射及单纯用药组相比明显下降(P<0.05)。结论β-榄香烯乳可通过促进A549细胞凋亡及抑制DNA-PKcs基因mRNA表达实现对A549细胞放射增敏作用。 展开更多
关键词 β-榄香烯乳 肺腺癌A549细胞 DNA—PKcs 凋亡 放射增敏
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正交实验法优选发酵蜈蚣粉中水溶性总蛋白提取工艺及其抗肿瘤效果 被引量：15
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作者 史磊 刘春雨 +3 位作者 张盼盼 王彦多 王颖 王集会 《山东中医杂志》 2017年第8期710-713,共4页
目的:优选中药发酵蜈蚣粉中水溶性总蛋白的最佳提取工艺。方法:在对中药发酵蜈蚣粉中总蛋白提取条件进行单因素考察的基础上,采用L_9(3~4)正交实验设计法,以发酵蜈蚣粉水溶性总蛋白含量为指标,考察提取时间、pH值、料液比三个因素对提... 目的:优选中药发酵蜈蚣粉中水溶性总蛋白的最佳提取工艺。方法:在对中药发酵蜈蚣粉中总蛋白提取条件进行单因素考察的基础上,采用L_9(3~4)正交实验设计法,以发酵蜈蚣粉水溶性总蛋白含量为指标,考察提取时间、pH值、料液比三个因素对提取物中的水溶性总蛋白含量的影响,优选出最佳提取工艺。结果:中药发酵蜈蚣粉水溶性总蛋白的最佳提取工艺为:向发酵蜈蚣粉中加入20倍量的pH值为9的蒸馏水超声提取150 min。在最佳工艺下提取发酵蜈蚣粉中总蛋白对乳腺癌MCF-7细胞具有很好的抑制效果。结论:实验中优选的发酵蜈蚣粉中总蛋白提取工艺简便、可行,能准确反映总蛋白含量和一定的抗肿瘤效果。 展开更多
关键词 发酵蜈蚣粉 总蛋白 MTT法 乳腺癌MCF-7细胞株 肺腺癌A549细胞株 细胞抑制率
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牡蛎低分子活性肽BPO-L对人肺腺癌A549细胞周期和相关癌基因、抑癌基因表达的调控作用 被引量：13
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作者 李祺福 黄大川 +2 位作者 石松林 梁盈 李筱泉 《厦门大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期104-110,共7页
采用酸抽提、凝胶柱层析等方法,从僧帽牡蛎体内分离提取到牡蛎低分子活性多肽组分BPO-L,以HMBA处理组为平行对照,流式细胞仪检测细胞周期变化及以免疫细胞化学方法检测相关癌基因、抑癌基因表达变化.研究BPO-L对人肺腺癌A549细胞分化的... 采用酸抽提、凝胶柱层析等方法,从僧帽牡蛎体内分离提取到牡蛎低分子活性多肽组分BPO-L,以HMBA处理组为平行对照,流式细胞仪检测细胞周期变化及以免疫细胞化学方法检测相关癌基因、抑癌基因表达变化.研究BPO-L对人肺腺癌A549细胞分化的生物学效应,探索其对肺癌细胞的作用机理.实验结果显示,BPO-L能有效抑制A549细胞增殖活动,促使细胞阻滞于G0/G1期.在此过程中,A549细胞c-myc,MTp53等癌基因蛋白表达减弱,p21WAF1/CIP1和Rb等抑癌基因蛋白表达活性的增强.本研究证实BPO-L对肺癌细胞具有显著的诱导分化作用.其诱导癌细胞分化机理与其调节和干预c-myc、MTp53等癌基因与p21WAF1/CIP1和Rb等抑癌基因的表达有关. 展开更多
关键词 人肺腺癌A549细胞 牡蛎低分子活性肽 细胞周期 癌基因与抑癌基因 诱导分化
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