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低能N^+离子、紫外线和^(60)Coγ射线对绛红小单孢菌产庆大霉素的诱变效应初步研究 被引量:11
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作者 吴健 苏明杰 +9 位作者 戴桂馥 王卫东 张书 李宗伟 王雁萍 秦广雍 霍裕平 袁天阳 严欣 甘崇洁 《辐射研究与辐射工艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期120-124,共5页
研究了以庆大霉素生产菌绛红小单孢菌为供试菌株,比较了低能N+离子、紫外线和60Co γ 射线对绛红小单孢菌的剂量存活效应和诱变效果。结果发现,N+离子注入的存活曲线与紫外线、60Co γ 射线辐照不同,即紫外线,60Co γ 射线照射绛红小单... 研究了以庆大霉素生产菌绛红小单孢菌为供试菌株,比较了低能N+离子、紫外线和60Co γ 射线对绛红小单孢菌的剂量存活效应和诱变效果。结果发现,N+离子注入的存活曲线与紫外线、60Co γ 射线辐照不同,即紫外线,60Co γ 射线照射绛红小单孢菌的剂量存活曲线均是指数曲线,而N+离子注入呈复杂下降、上升、再下降的趋势,而且3种辐射在诱变效应上也有很大的差异。在相同死亡率条件下,紫外线诱变率低,但正变多于负变,而 γ 射线诱变率高,负变远远多于正变。适当剂量的N+离子注入表现出诱变率高、正变率高及正变幅度大的特点,效果更像紫外+LiCL的复合诱变。并确定了N+离子注入绛红小单孢菌的适宜诱变剂量是在存活率高峰处附近。 展开更多
关键词 庆大霉素 离子注入 ^60Coγ射线 紫外线 低能N^+离子 诱变效应 抗生素
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不同能量重离子对庆大霉素生产菌绛红小单孢菌诱变的研究 被引量:10
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作者 颉红梅 卫增泉 +4 位作者 李文建 杨伟成 王莉 冯杰天 田维金 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第6期462-463,共2页
采用重离子辐照技术,对庆大霉素产生菌绛红小单孢菌进行了诱变处理,本文报告诱变处理后筛选的部分结果。1材料和方法1.1菌种庆大霉素生产菌绛红小单孢菌,由兰州制药厂提供。生物检定菌为短小芽孢杆菌63202。1.2培养基斜... 采用重离子辐照技术,对庆大霉素产生菌绛红小单孢菌进行了诱变处理,本文报告诱变处理后筛选的部分结果。1材料和方法1.1菌种庆大霉素生产菌绛红小单孢菌,由兰州制药厂提供。生物检定菌为短小芽孢杆菌63202。1.2培养基斜面培养基:可溶性淀粉1%;CaCO... 展开更多
关键词 庆大霉素 重离子 诱变
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利用抗自身代谢物特性进行小诺霉素高产菌种选育 被引量:5
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作者 王锦 段学辉 +2 位作者 黎俊 肖海群 韩超美 《南昌大学学报(工科版)》 CAS 2006年第2期111-114,共4页
经过紫外诱变处理小诺霉素产生菌,利用菌株抗自身代谢物特征,在添加3 000 u.mL-1小诺霉素的分离培养基上选育获得小诺霉素生产突变株201-9#-76,其摇瓶发酵单位比出发菌株提高了34.39%,小诺霉素的组分比由出发菌株的C2b∶C1 a=5∶5提高到... 经过紫外诱变处理小诺霉素产生菌,利用菌株抗自身代谢物特征,在添加3 000 u.mL-1小诺霉素的分离培养基上选育获得小诺霉素生产突变株201-9#-76,其摇瓶发酵单位比出发菌株提高了34.39%,小诺霉素的组分比由出发菌株的C2b∶C1 a=5∶5提高到C2b∶C1 a=7∶3. 展开更多
关键词 诺霉素 抗自身代谢物
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N^+诱变绛红小单孢菌提高其庆大霉素生产能力及条件优化 被引量:1
4
作者 戴桂馥 吴健 +5 位作者 李宗伟 王雁萍 秦广雍 苏明杰 李萍 袁天阳 《郑州大学学报(理学版)》 CAS 1999年第2期67-71,共5页
庆大霉素产生菌绛红小单孢菌(MicromonosporapurpureaKR960796)(开封制药厂提供)经30keVN+注入诱变处理,筛选到B0020等四株高产菌株.它们的产量较出发菌株提高的幅度分别是B0020... 庆大霉素产生菌绛红小单孢菌(MicromonosporapurpureaKR960796)(开封制药厂提供)经30keVN+注入诱变处理,筛选到B0020等四株高产菌株.它们的产量较出发菌株提高的幅度分别是B002030.2%,B003022.1%,B001716.7%,B001315.1%.B0017通过条件优化,总产量提高46%.在对B0017进行发酵条件优化中确定了正效应因子为:料液浓度>pH>葡萄糖>青霉素;负效应因子为:118小时,酵母汁>CoCl2>NH+4;125小时,NH+4>酵母汁,CoCl2几乎无负效应.说明游离NH+4对产量有强烈的抑制作用. 展开更多
关键词 离子注入 庆大霉素 发酵条件
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庆大霉素高产菌株的抗性方法选育 被引量:2
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作者 吴健 张少平 +3 位作者 戴桂馥 李宗伟 袁天阳 段广才 《信阳师范学院学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2007年第2期191-194,共4页
以生产菌株绛红小单孢菌为出发株,应用N+离子注入及紫外线诱变技术,利用高浓度的庆大霉素梯度平板筛选,或配合含有高浓度庆大霉素的液体培养基的生态驯化,筛选到摇瓶效价分别比出发株提高75.2%和70.1%的N08和Wt63两个高产菌株,10 L发酵... 以生产菌株绛红小单孢菌为出发株,应用N+离子注入及紫外线诱变技术,利用高浓度的庆大霉素梯度平板筛选,或配合含有高浓度庆大霉素的液体培养基的生态驯化,筛选到摇瓶效价分别比出发株提高75.2%和70.1%的N08和Wt63两个高产菌株,10 L发酵罐发酵产量分别达2 118 u/mL和1 843 u/mL,C组分含量符合中国药典2000版的规定. 展开更多
关键词 庆大霉素 育种 诱变
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一株产庆大霉素B的绛红小单孢菌的分类鉴定 被引量:3
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作者 王飞 高辉 涂国全 《江西农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期806-811,834,共7页
通过对一株自行筛选的野生稀有放线菌菌株的分类地位进行了研究,鉴定其分类地位。采用常规方法进行分离培养,以形态学特征、培养特性、生理生化特征及分子生物学等方法对其进行分类鉴定。将所分离的菌株进行摇瓶发酵,将发酵液上清液采用... 通过对一株自行筛选的野生稀有放线菌菌株的分类地位进行了研究,鉴定其分类地位。采用常规方法进行分离培养,以形态学特征、培养特性、生理生化特征及分子生物学等方法对其进行分类鉴定。将所分离的菌株进行摇瓶发酵,将发酵液上清液采用HPLC进行组分检测。该菌株菌落微黄色或浅棕色;产红色色素,气生菌丝不发达,基内菌丝直径平均0.4~0.8μm,产单孢子,生理生化特征与绛红小单孢菌相似,16 S rDNA测定结果与Micromonsopora sp.(EU214948)序列同源性达97%,与M.purpurea(X92595)最为接近。其发酵产物中含有庆大霉素B、小诺霉素和庆大霉素。鉴定该菌株为产庆大霉素B的小单孢菌属绛红小单孢菌(Micromonos-pora purpurea)。 展开更多
关键词 放线 分类鉴定
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庆大霉素生物合成基因genD2的研究 被引量:2
7
作者 阙新桥 陈泽斌 洪文荣 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期237-241,共5页
以绛红小单孢菌G1008基因组为模板,PCR扩增genD2的上下游序列作为同源交换臂,在温敏型穿梭质粒pKC1139的基础上,构建同源重组质粒pDB303;通过接合转移,将质粒pDB303导入绛红小单孢菌G1008,经影印筛选得到一株genD2框内缺失的工程菌GD23... 以绛红小单孢菌G1008基因组为模板,PCR扩增genD2的上下游序列作为同源交换臂,在温敏型穿梭质粒pKC1139的基础上,构建同源重组质粒pDB303;通过接合转移,将质粒pDB303导入绛红小单孢菌G1008,经影印筛选得到一株genD2框内缺失的工程菌GD238。发酵并提取代谢产物,质谱分析表明,工程菌GD238只积累庆大霉素A2和A2e,证明genD2参与了庆大霉素加洛糖胺上C-3″位氨甲基化,可能是编码脱氢酶基因。 展开更多
关键词 庆大霉素A2 genD2基因 生物合成
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一株产G418单组分工程菌的构建 被引量:1
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作者 阙新桥 林艺辉 +2 位作者 胡育龙 肖剑萍 洪文荣 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期307-314,共8页
【目的】定向改造庆大霉素产生菌绛红小单孢菌G1008,获得产G418单组分工程菌。【方法】以温敏型穿梭质粒p KC1139为载体,构建敲除基因genQ*重组质粒p QB303,通过接合转移,导入绛红小单孢菌G1008中,影印筛选和PCR鉴定genQ*框内缺失突变菌... 【目的】定向改造庆大霉素产生菌绛红小单孢菌G1008,获得产G418单组分工程菌。【方法】以温敏型穿梭质粒p KC1139为载体,构建敲除基因genQ*重组质粒p QB303,通过接合转移,导入绛红小单孢菌G1008中,影印筛选和PCR鉴定genQ*框内缺失突变菌,利用TLC和MS分析其代谢产物组分。【结果】获得一株genQ*缺失工程菌Micromonospora purpurea GQ175,其代谢产物为G418单组分,生物效价达828 mg/L,与出发菌G1008的产抗能力相当。【结论】工程菌GQ175产G418单组分,具有很好的工业开发价值。同时,证明绛红小单孢菌G1008中,庆大霉素C-6′脱氢酶基因为genQ*,且无其他同功酶基因。 展开更多
关键词 G418 基因敲除 genQ+
原文传递
sisI替换genP在绛红小单孢菌G1008中的功能表达
9
作者 陈成立 林艺辉 +1 位作者 林共德 洪文荣 《延边大学学报(自然科学版)》 CAS 2016年第1期23-28,共6页
将依纽小单孢菌3′,4′-双脱羟基基因sisI组合到绛红小单孢菌G1008中,替代其中的同工异源酶基因genP,研究sisI基因异源表达的内在特征.以温敏型质粒pKC1139作为克隆载体,构建sisI替换genP的重组质粒pIP303,利用接合转移技术,将穿梭质粒... 将依纽小单孢菌3′,4′-双脱羟基基因sisI组合到绛红小单孢菌G1008中,替代其中的同工异源酶基因genP,研究sisI基因异源表达的内在特征.以温敏型质粒pKC1139作为克隆载体,构建sisI替换genP的重组质粒pIP303,利用接合转移技术,将穿梭质粒导入绛红小单孢菌G1008基因组,影印筛选并通过PCR(聚合酶链式反应)鉴定,获得一株基因重组工程菌GIP95.借助TLC(薄层色谱)、HPLC(高效液相色谱)和MS(质谱)检测代谢产物组分及结构变化,结果表明突变株GIP95的代谢流未被阻断,仍能够合成庆大霉素C族组分.由此得出结论,外源基因依纽小单孢菌3′,4′-双脱羟基基因sisI参与了庆大霉素生物合成中绛红糖胺3′,4′-双脱羟基这一关键步骤,在绛红小单孢菌G1008中实现异源表达. 展开更多
关键词 依纽 sisI genP 3′ 4′-双脱羟基基因
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绛红小单孢菌227所产红色素的理化性质研究
10
作者 王飞 况丹 吴湾 《江苏农业科学》 CSCD 北大核心 2009年第2期243-245,共3页
对一株绛红小单孢菌227菌株发酵液菌丝体中所提取的天然红色素理化性质进行了初步研究,结果表明:该色素在波长530 nm时有最大吸收峰,在酸性条件(pH<7)和高温条件(100℃,120 min)下稳定,在光照条件(>1d)和紫外线辐射条件(30 W紫外... 对一株绛红小单孢菌227菌株发酵液菌丝体中所提取的天然红色素理化性质进行了初步研究,结果表明:该色素在波长530 nm时有最大吸收峰,在酸性条件(pH<7)和高温条件(100℃,120 min)下稳定,在光照条件(>1d)和紫外线辐射条件(30 W紫外灯,5 min)下不稳定,在防腐剂(苯甲酸钠10 mg/ml)、还原剂(Na2SO30.2 mg/ml)条件下稳定,在氧化剂(H2O2)条件下不稳定,饱和蔗糖溶液和100 mg/ml NaCl溶液对该色素无显著影响。 展开更多
关键词 色素 理化性质
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一株主产庆大霉素C2a工程菌的构建
11
作者 林强 陈洲琴 +1 位作者 阙新桥 洪文荣 《宁夏大学学报(自然科学版)》 CAS 2016年第1期90-93,98,共5页
为更好生产单组分庆大霉素C2a,拟构建一株主产庆大霉素C2a的工程菌.通过序列比对分析,锁定genB2为构建该工程菌的关键基因.以绛红小单孢菌G1008基因组为模板,PCR扩增genB2的上下游序列为同源交换臂,构建同源重组质粒pZB303.通过接合转移... 为更好生产单组分庆大霉素C2a,拟构建一株主产庆大霉素C2a的工程菌.通过序列比对分析,锁定genB2为构建该工程菌的关键基因.以绛红小单孢菌G1008基因组为模板,PCR扩增genB2的上下游序列为同源交换臂,构建同源重组质粒pZB303.通过接合转移,将质粒pZB303导入绛红小单孢菌G1008,安普抗性及PCR扩增筛选得到一株genB2框内缺失工程菌GB102.发酵并提取代谢产物,再经TLC,HPLC,MS分析.结果表明,工程菌GB102主要积累庆大霉素C2a.有望用于生产单组分庆大霉素C2a. 展开更多
关键词 庆大霉素C2a genB2
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绛红小单孢菌突变株CH20190225-107的选育与鉴定
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作者 葛祥斌 徐鹏 +4 位作者 刘阳 孟晓妍 叶晖 杨春敬 董宏伟 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期35-39,共5页
目的高产庆大霉素产生菌的筛选。方法对出发菌株绛红小单孢菌GM20190109-15进行常温等离子体(ARTP)和氯化锂复合诱变处理。结果经高通量筛选,得到一株突变菌株CH20190225-107,经高效液相色谱检测,突变菌株的各组份出峰时间与对照一致,... 目的高产庆大霉素产生菌的筛选。方法对出发菌株绛红小单孢菌GM20190109-15进行常温等离子体(ARTP)和氯化锂复合诱变处理。结果经高通量筛选,得到一株突变菌株CH20190225-107,经高效液相色谱检测,突变菌株的各组份出峰时间与对照一致,其效价从1547 U/mL提高到2280 U/mL,摇瓶效价较出发菌株提高了47.4%,组分C1、C1a、C2a和C2的相对比例分别为29%、23%、25%和23%,且遗传性状稳定。结论使用ARTP和氯化锂复合诱变庆大霉素产生菌的,效果较好,提高了庆大霉素的产量和质量。 展开更多
关键词 庆大霉素 ARTP 氯化锂
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小单孢菌叠加诱变与发酵过程的研究
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作者 管玉霞 孙甲贤 +1 位作者 王静 郑遵纪 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期77-82,共6页
采用庆大霉素产生菌—绛红小单孢菌(M.purpurea)在培养36h时添加15μg/ml的青霉素,对培养至48h对数生长期的菌体进行紫外线照射+亚硝基胍复合处理,置培养箱中37℃培养5~8d待长出菌落后再用紫外线照射叠加处理,获得一高产菌株N-14。试... 采用庆大霉素产生菌—绛红小单孢菌(M.purpurea)在培养36h时添加15μg/ml的青霉素,对培养至48h对数生长期的菌体进行紫外线照射+亚硝基胍复合处理,置培养箱中37℃培养5~8d待长出菌落后再用紫外线照射叠加处理,获得一高产菌株N-14。试管发酵生测效价1913u/ml(对照625u/ml);摇瓶发酵培养120h达2178(u/ml),比对照(1243u/ml)提高75.2%;并进行了5L发酵罐发酵培养,发酵过程中测定了发酵液还原糖、总糖、氨基氮、pH、菌体浓度等代谢参数,探索了适合N-14的培养条件,连续5批次生测效价平均1967u/ml,较对照1171u/ml提高了68%,效果明显。 展开更多
关键词 叠加诱变 生测效价 代谢参数
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