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噬菌体展示筛选人源细胞黏附分子L1结构域抗体及其体外实验研究
1
作者 赵炜疆 潘洪超 +2 位作者 李桂林 董丽萍 唐丹阳 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期91-96,共6页
目的使用噬菌体展示技术筛选人源细胞黏附分子L1结构域抗体并体外观察其对神经来源细胞信号通路及细胞聚集的影响。方法以L1纤黏连蛋白FN2-3区肽段为抗原,利用噬菌体抗体库(DAb library)筛选并纯化相应人源结构域抗体,并通过酶联免疫吸... 目的使用噬菌体展示技术筛选人源细胞黏附分子L1结构域抗体并体外观察其对神经来源细胞信号通路及细胞聚集的影响。方法以L1纤黏连蛋白FN2-3区肽段为抗原,利用噬菌体抗体库(DAb library)筛选并纯化相应人源结构域抗体,并通过酶联免疫吸附法(ELISA)及免疫荧光观察抗体与抗原结合特性。给予神经来源SK-N-SH细胞抗体,使用蛋白质印迹(Western blot)观察24 h时其对L1下游信号通路Erk及Akt1激活的影响。使用结晶紫进行细胞染色观察抗体对细胞聚集的影响。结果成功筛选出与L1FN2-3区肽段结合的结构域抗体H2-1,与SK-N-SH细胞内源性L1结合良好。与溶剂对照组相比,该抗体可有效促进SK-NSH细胞中L1下游信号分子Erk1/2及Akt1磷酸化激活(分别为P<0.01和P<0.05),并可促进神经突生长及神经细胞聚集。结论 L1激动型结构域抗体可激活L1相关信号分子,促进神经突生长等作用,具有进一步实验治疗脊髓损伤等神经系统创伤性疾病的研究价值。 展开更多
关键词 噬菌体展示 结构域抗体 细胞黏附分子L1 神经损伤 SK-N-SH细胞系 信号通路
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抗A型肉毒毒素人源三结构域抗体的重组设计与表达 被引量：1
2
作者 王慧 荫俊 +2 位作者 史晶 孟露露 李佩真 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期223-225,共3页
以获得的抗A型肉毒毒素人源单链抗体ScFvB17为模板 ,PCR扩增抗体ScFv基因的重链可变区 (VH)和轻链可变区 (Vκ) ,以重链恒定区 1(CH1) 5′端 12个氨基酸的序列作为连接肽 ,构建成三结构域抗体分子 :VH_连接肽_Vκ(VH Vκ)。重组VH Vκ... 以获得的抗A型肉毒毒素人源单链抗体ScFvB17为模板 ,PCR扩增抗体ScFv基因的重链可变区 (VH)和轻链可变区 (Vκ) ,以重链恒定区 1(CH1) 5′端 12个氨基酸的序列作为连接肽 ,构建成三结构域抗体分子 :VH_连接肽_Vκ(VH Vκ)。重组VH Vκ抗体分子在大肠杆菌中得到高效表达 ,其表达量占菌体总蛋白质的 34%以上。表达的蛋白质在菌内形成包含体 ,采用镍柱金属鏊合层析法对该包含体进行纯化 ,得到了纯度高达 95 %的VH Vκ。ELISA等实验结果显示 ,重组设计并制备的三结构域抗体蛋白VH Vκ不但可以特异识别毒素抗原 ,具有与原母本单链抗体ScFv相同的抗原特异性 ,而且具有了更高的相对亲和力和稳定性。 展开更多
关键词 A型肉毒毒素 三结构域抗体 表达 中和活性
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非传统抗磷脂抗体在产科抗磷脂综合征诊断中的价值 被引量：16
3
作者 刘畅 刘湘源 《中国计划生育和妇产科》 2017年第11期14-18,23,共6页
明确诊断的产科抗磷脂综合征(obstetric antiphospholipid antibody syndrome,OAPS)患者及抗磷脂抗体(antiphospholopid antibodies,a PLs)相关复发性流产(recurrent spontaneous abortion,RSA)患者中传统的抗β2糖蛋白Ⅰ抗体(anti-β2 ... 明确诊断的产科抗磷脂综合征(obstetric antiphospholipid antibody syndrome,OAPS)患者及抗磷脂抗体(antiphospholopid antibodies,a PLs)相关复发性流产(recurrent spontaneous abortion,RSA)患者中传统的抗β2糖蛋白Ⅰ抗体(anti-β2 glycoprotein,aβ2GPⅠ)、抗心磷脂抗体(anticardiolipin,a CL)和狼疮抗凝物(lupus anticoagulant,LA)抗体阳性率及滴度均较低,三大常规a PLs均阴性的符合抗磷脂综合征(antiphospholipid antibody syndrome,APS)临床诊断标准的患者,按APS治疗后的妊娠结局多得到明显改善,而这部分患者中有68%可以检测到至少一种的"非传统"抗磷脂抗体,包括抗磷脂酰乙醇胺抗体(antiphosphatidylethanolamine antibodies,a PE)、抗凝血酶原抗体(antiprothrombin,a PT)、抗磷脂酰丝氨酸依赖的抗凝血酶原抗体(antiphosphatidylserine/prothrombin,a PS/PT)、抗膜联蛋白抗体、抗β2GPⅠ结构域1抗体、Ig A型抗体谱等,而这些抗体与产科并发症有着显著的相关性,是提高OAPS诊断率的明日之星。 展开更多
关键词 产科抗磷脂综合征 抗磷脂酰乙醇胺抗体 抗磷脂酰丝氨酸依赖的抗凝血酶原抗体 抗膜联蛋白抗体 抗β2GPⅠ结构域1抗体 IgA亚型抗磷脂抗体
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抗磷脂综合征实验室检查项目的结果解读 被引量：12
4
作者 郭晗 乔蕊 《临床检验杂志》 CAS 2019年第9期652-656,共5页
抗磷脂抗体(狼疮抗凝物、抗心磷脂抗体和抗β2糖蛋白Ⅰ抗体)是诊断抗磷脂综合征的重要组成部分,但并非每个试验的阳性结果都具有相同的诊断价值,因此正确理解抗磷脂抗体试验阳性的本质内涵,对于APS的诊断、危险分层,进而指导个体化治疗... 抗磷脂抗体(狼疮抗凝物、抗心磷脂抗体和抗β2糖蛋白Ⅰ抗体)是诊断抗磷脂综合征的重要组成部分,但并非每个试验的阳性结果都具有相同的诊断价值,因此正确理解抗磷脂抗体试验阳性的本质内涵,对于APS的诊断、危险分层,进而指导个体化治疗具有重要意义。 展开更多
关键词 抗磷脂综合征 抗磷脂抗体 狼疮抗凝物 抗心磷脂抗体 抗β2糖蛋白Ⅰ抗体 抗β2糖蛋白Ⅰ结构域Ⅰ抗体
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湖州市德清县成年人群SARS-CoV-2灭活疫苗全程接种免疫效果的血清学评价 被引量：1
5
作者 毛传武 陈颖峰 +4 位作者 张莉 解玉阳 董晓莲 蒋露芳 姜庆五 《上海预防医学》 CAS 2022年第11期1118-1122,共5页
【目的】了解≥18岁成年人群在新型冠状病毒(SARS⁃CoV⁃2)灭活疫苗全程免疫后血清特异性抗体水平,并分析其影响因素。【方法】以浙江省湖州市德清县已完成2剂次SARS⁃CoV⁃2灭活疫苗全程接种的18岁及以上居民为研究对象,收集性别、年龄、... 【目的】了解≥18岁成年人群在新型冠状病毒(SARS⁃CoV⁃2)灭活疫苗全程免疫后血清特异性抗体水平,并分析其影响因素。【方法】以浙江省湖州市德清县已完成2剂次SARS⁃CoV⁃2灭活疫苗全程接种的18岁及以上居民为研究对象,收集性别、年龄、接种疫苗种类以及2剂次接种时间等信息,采集研究对象血清样本,采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)定量检测SARS⁃CoV⁃2受体结合结构域(RBD)特异性抗体水平,并分析其影响因素。【结果】接种了SARS⁃CoV⁃2灭活疫苗加强针人群的IgG抗体水平中位数高于完成2剂次全程接种人群,也高于只接种1剂次疫苗人群(P<0.05)。男性IgG抗体水平中位数为9.73(4.01~23.70)RU‧mL^(−1),低于女性[17.76(7.07~49.23)RU‧mL^(−1)](P<0.05)。国药集团北京生物制品研究所疫苗接种人群IgG抗体水平中位数为6.53(0.97~13.69)RU‧mL^(−1),低于北京科兴中维生物技术有限公司疫苗接种人群[17.29(8.54~43.73)RU‧mL^(−1)](P<0.05),也低于2种疫苗序贯接种人群[12.00(5.45~40.06)RU‧mL^(−1)](P<0.05)。距离第2剂次接种的间隔时间>6个月人群的IgG抗体水平中位数为9.73(3.83~23.63)RU‧mL^(−1),低于接种3~6个月人群[14.66(6.36~35.98)RU‧mL^(−1)](P<0.05)。影响因素分析显示,女性比男性疫苗接种效果好(χ^(2)=16.464,P<0.05);18~45岁年龄组人群疫苗接种效果更好(χ^(2)=7.158,P<0.05);接种北京科兴中维生物技术有限公司疫苗的人群效果更好(χ^(2)=49.637,P<0.05);距离第2剂次接种时间间隔>6个月的人群,疫苗接种效果下降(χ^(2)=8.447,P<0.05)。【结论】性别、年龄、疫苗种类一定程度上会影响免疫接种的效果,18岁及以上成年人群全程接种SARS⁃CoV⁃2灭活疫苗后呈现较好的免疫原性,但在接种6个月以后会出现疫苗接种效果显著下降,应及时接种加强针,以保持体内特异性抗体水平。 展开更多
关键词 新型冠状病毒灭活疫苗 新型冠状病毒受体结合结构域IgG抗体 免疫效果 血清学评价
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