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人乳头瘤病毒特异性T细胞系细胞冻存后细胞的存活率及功能 被引量:1
1
作者 王雪莲 葛安兴 腾秀志 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2014年第4期33-36,共4页
研究人乳头瘤病毒特异性 T 细胞系细胞冻存后细胞的存活率及功能。应用包含10%二甲基亚砜、90%小牛血清的冻存液冻存6个 T 细胞系(5个 CD4 T 细胞系,1个 CD8 T 细胞系)细胞,液氮中冻存32~54个月后复苏,台盼蓝染色法检测复苏后 T ... 研究人乳头瘤病毒特异性 T 细胞系细胞冻存后细胞的存活率及功能。应用包含10%二甲基亚砜、90%小牛血清的冻存液冻存6个 T 细胞系(5个 CD4 T 细胞系,1个 CD8 T 细胞系)细胞,液氮中冻存32~54个月后复苏,台盼蓝染色法检测复苏后 T 细胞系细胞的存活率,用酶联免疫斑点法(enzyme-linked immunospot assay,ELISPOT)检测复苏后 T 细胞系细胞的功能。结果显示,6个 T 细胞系细胞液氮冻存解冻后细胞的存活率为24.7%~93.5%,过夜培养后细胞的存活率为2.5%~72.2%。CD8 T 细胞系细胞的存活率高于 CD4 T细胞系细胞。6个复苏后的 T 细胞系细胞在 PHA 诱导后均能分泌 IFN-γ。人乳头瘤病毒特异性 T 细胞系细胞冻存复苏后能够保持较好的存活率和功能。 展开更多
关键词 细胞冻存 人乳头瘤病毒 T 细胞系细胞
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黄芩苷-小檗碱复合物及纳米晶在Caco-2细胞单层模型的吸收特性研究 被引量:1
2
作者 王继林 冯晓姣 +3 位作者 党文利 李紫微 刘志东 皮佳鑫 《天津中医药大学学报》 CAS 2023年第1期87-94,共8页
[目的]研究黄芩苷(BA)-小檗碱(BBR)复合物及纳米晶的吸收特性,探讨纳米晶技术对BA-BBR复合物吸收特性的改善。[方法]利用Cell Counting Kit-8(CCK-8)法筛选BA-BBR复合物及纳米晶对人结肠腺癌细胞系(Caco-2)细胞的给药浓度,构建Caco-2细... [目的]研究黄芩苷(BA)-小檗碱(BBR)复合物及纳米晶的吸收特性,探讨纳米晶技术对BA-BBR复合物吸收特性的改善。[方法]利用Cell Counting Kit-8(CCK-8)法筛选BA-BBR复合物及纳米晶对人结肠腺癌细胞系(Caco-2)细胞的给药浓度,构建Caco-2细胞单层模型探究BA-BBR复合物及纳米晶的跨膜转运方式,并且加入P-糖蛋白(P-gp)抑制剂维拉帕米研究对其累积转运量和表观渗透系数(Papp)的影响。[结果]复合物组中BA和BBR的Papp值均低于物理混合物组;与复合物组相比,纳米晶组中BA和BBR的累积转运量和Papp值均提高,Papp值为复合物组的1.3倍和2.3倍。加入维拉帕米后,复合物组BA和BBR的Papp值分别提高1.5倍和2.0倍,而纳米晶组Papp值无明显提高。[结论]BA-BBR复合物不同于物理混合物,具有低渗透性,同时易受到P-gp外排影响。纳米晶技术可以显著改善BA-BBR复合物的渗透性,并且减弱外排作用对其的影响。 展开更多
关键词 黄芩苷 小檗碱 人结肠腺癌细胞系细胞单层模型 累积转运量 表观渗透
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miR-125a-5p通过黏着斑通路对铝染毒GC2-spd细胞凋亡的影响
3
作者 黄艳新 陈文成 +3 位作者 彭慧鑫 韦光吉 庞艳芳 元辉雄 《右江医学》 2023年第5期397-402,共6页
目的 探讨miR-125a-5p在铝染毒小鼠精母细胞系(GC2-spd)模型中对黏着斑信号通路及GC2-spd细胞凋亡的影响。方法 建立铝染毒GC2-spd细胞模型,分为对照组(CG),铝染毒组(ALG),铝染毒组+miR-125a-5p inhibitor阴性对照组(ALG+inhibitor NC)... 目的 探讨miR-125a-5p在铝染毒小鼠精母细胞系(GC2-spd)模型中对黏着斑信号通路及GC2-spd细胞凋亡的影响。方法 建立铝染毒GC2-spd细胞模型,分为对照组(CG),铝染毒组(ALG),铝染毒组+miR-125a-5p inhibitor阴性对照组(ALG+inhibitor NC)及铝染毒组+miR-125a-5p inhibitor组(ALG+inhibitor);利用RT-qPCR检测ALG与CG细胞中miR-125a-5p的表达情况;利用Western blot检测CG组、ALG组、ALG+inhibitor NC组及ALG+inhibitor组Itga7、Pak4、Akt1、Bax及Caspase-9的表达情况;利用CCK8实验及流式细胞术实验检测各组GC2-spd细胞的活性和凋亡率。结果 RT-qPCR结果显示,与对照组比较,ALG组细胞中miR-125a-5p的表达显著升高;Western blot结果显示,抑制miR-125a-5p的表达后,可显著升高铝染毒GC2-spd细胞中Itga7、Pak4和Akt1的表达,降低Bax及Caspase-9的表达;CCK8和流式细胞术实验结果显示,抑制miR-125a-5p的表达后,可显著提高GC2-spd细胞的活性,降低细胞的凋亡率。结论 miR-125a-5p inhibitor可通过提高Itga7、Pak4和Akt1的表达,促进黏着斑信号通路激活,抑制细胞凋亡,提高细胞的活性,从而抑制铝染毒GC2-spd细胞的凋亡作用。 展开更多
关键词 miR-125a-5p 黏着斑通路 铝染毒 小鼠精母细胞系细胞
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菩人丹对高糖诱导的INS-1细胞凋亡、BAD和FOXO1蛋白表达的影响 被引量:4
4
作者 杜子亮 鲁碧楠 +3 位作者 陈书 白永飞 德力格玛 庞宗然 《中国实验方剂学杂志》 CAS 北大核心 2013年第22期173-177,共5页
目的:观察菩人丹(Puren Dan,PRD)对高糖诱导的INS-1细胞凋亡、Bal-xl/Bcl-2相关死亡促进因子(BAD)和叉头框转录因子O亚族1(FOXO1)蛋白表达的影响,探讨PRD恢复INS-1细胞分泌功能的相关分子机制。方法:采用血清药理学方法制备菩人丹含药血... 目的:观察菩人丹(Puren Dan,PRD)对高糖诱导的INS-1细胞凋亡、Bal-xl/Bcl-2相关死亡促进因子(BAD)和叉头框转录因子O亚族1(FOXO1)蛋白表达的影响,探讨PRD恢复INS-1细胞分泌功能的相关分子机制。方法:采用血清药理学方法制备菩人丹含药血清,建立高浓度葡萄糖(33.3 mmol·L-1)诱导INS-1细胞损伤模型,以菩人丹药物血清干预24 h;实验分为5组,即正常对照组(control组)、高糖模型组(HG组)、菩人丹药物血清高剂量组(H-PRD组)、菩人丹药物血清低剂量组(L-PRD组)和二甲双胍药物血清对照组(MF组);采用CCK8试剂盒检测细胞活力,流式Annexin V-FITC/PI双染法考察细胞凋亡水平,Western blotting assay检测BAD和FOXO1蛋白表达水平及其磷酸化水平。结果:与正常组比较高糖能够显著降低INS-1细胞活力、诱导细胞凋亡、降低INS-1细胞BAD,FOXO1丝氨酸磷酸化水平;与模型组比较菩人丹含药血清(终体积分数10%)则能抑制INS-1细胞凋亡,增加细胞活力,下调FOXO1表达,促进BAD和FOXO1丝氨酸磷酸化。结论:菩人丹药物血清能够减少高糖诱导的INS-1细胞凋亡,这种作用与上调BAD和FOXO1蛋白丝氨酸磷酸化水平直接相关。 展开更多
关键词 菩人丹 高糖 大鼠胰岛素瘤细胞系细胞 凋亡 Bal-xl Bcl-2相关死亡促进因子 叉头框转录因子O亚族1
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真核细胞翻译延伸因子2参与神经生长因子诱导的大鼠嗜铬细胞瘤细胞的分化 被引量:2
5
作者 李荣双 范淑玲 李立平 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第23期6720-6721,共2页
目的研究神经生长因子(NGF)诱导大鼠嗜铬细胞瘤细胞系PC12细胞分化途径中,细胞突触生长的起始和延伸步骤中的关键蛋白质,寻找其中可能的药物靶点。方法 50 ng/ml NGF诱导PC12细胞6 h和12 h,显微镜下观察PC12细胞的形态变化;应用二维凝... 目的研究神经生长因子(NGF)诱导大鼠嗜铬细胞瘤细胞系PC12细胞分化途径中,细胞突触生长的起始和延伸步骤中的关键蛋白质,寻找其中可能的药物靶点。方法 50 ng/ml NGF诱导PC12细胞6 h和12 h,显微镜下观察PC12细胞的形态变化;应用二维凝胶电泳、De Cyder软件分析及基质辅助激光解析/电离-飞行时间质谱,研究其差异蛋白质组学变化。结果 NGF作用于PC12细胞6 h后,细胞出现神经突起;12 h,神经突起进一步生长,蛋白质分析提示真核细胞翻译延伸因子(e EF)2含量减少,α微管蛋白和β肌动蛋白表达增加。结论 NGF诱导PC12细胞发生神经突触生长,e EF-2的减少与细胞骨架蛋白增加与细胞的形态学变化一致,提示突触生长过程中,e EF-2可能起到关键性作用。 展开更多
关键词 大鼠嗜铬细胞细胞系细胞 神经生长因子 神经分化
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禽白血病病毒衣壳蛋白p15基因慢病毒表达载体的构建及其在鸡肝癌细胞系中的表达 被引量:2
6
作者 沈逵 何倩 +1 位作者 秦爱建 钱琨 《畜牧与兽医》 北大核心 2021年第4期89-94,共6页
构建禽白血病病毒(ALV)衣壳蛋白p15基因慢病毒表达载体,并检测其在鸡肝癌细胞系(LMH)中的表达情况,以探讨p15基因对病毒复制、免疫信号通路的影响。以真核表达质粒pCAGGS-p15为模板扩增p15全长基因,经双酶切后克隆到慢病毒载体plvx-IRES... 构建禽白血病病毒(ALV)衣壳蛋白p15基因慢病毒表达载体,并检测其在鸡肝癌细胞系(LMH)中的表达情况,以探讨p15基因对病毒复制、免疫信号通路的影响。以真核表达质粒pCAGGS-p15为模板扩增p15全长基因,经双酶切后克隆到慢病毒载体plvx-IRES-ZsGreen1上,构建成plvx-p15-Flag慢病毒表达质粒,将该质粒与辅助质粒共转染293T细胞产生慢病毒,将细胞上清中的病毒感染LMH细胞,检测p15蛋白表达情况。慢病毒载体在293T细胞上包装完成后,病毒滴度为2.25×10^(5) TU/mL。慢病毒感染LMH细胞,基因和蛋白水平检测结果表明,p15蛋白表达良好。表达ALV p15基因的慢病毒包装成功,并且能够感染鸡源LMH细胞。该载体的构建为进一步研究p15蛋白的生物学功能提供工具。 展开更多
关键词 P15蛋白 慢病毒载体构建 鸡肝癌细胞系细胞 鉴定
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神经肽Y对小鼠成骨细胞系细胞成骨分化的影响及其与Wnt通路相关机制的初步研究 被引量:1
7
作者 张弛 梁笃 +5 位作者 许子宜 吴建群 刘松 王簕 王钊 胡汉生 《中华创伤骨科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期617-623,共7页
目的探讨神经肽Y(NPY)对小鼠成骨细胞系细胞(MC3T3.E1细胞)成骨分化的生物学效应,并从Wnt信号通路角度探讨其可能的机制。方法体外培养MC3T3.E1细胞,将不同浓度的NPY(10^-4 mol/L、10^-10mol/L、10^-12mol/L)作用于细胞,... 目的探讨神经肽Y(NPY)对小鼠成骨细胞系细胞(MC3T3.E1细胞)成骨分化的生物学效应,并从Wnt信号通路角度探讨其可能的机制。方法体外培养MC3T3.E1细胞,将不同浓度的NPY(10^-4 mol/L、10^-10mol/L、10^-12mol/L)作用于细胞,在培养的不同时期(1、3、5、7、9d)使用噻唑蓝法检测细胞增殖情况。成骨诱导条件下将不同浓度的NPY作用于MC3T3.E1细胞,在传代培养的不同时期(4、7、14d)采用免疫细胞化学、Westernblot对MC3T3.T1细胞诱导进行鉴定并确定促成骨效应最适的浓度;成骨诱导4d时将最适浓度NPY、NPY加经典wnt通路抑制因子(DKK1)、NPY加Y1受体拮抗剂分别作用于细胞,采用Westernblot法检测经典Wnt通路相关蛋白(β-cmenin和p-GSK-3β)的表达,免疫荧光检测各组β-catenin蛋白核内转移的情况。结果与对照组相比,不同浓度的NPY在7、9d时均显著促进MC3T3-E1细胞增殖。成骨诱导条件下,NPY(10^-8mol/L)和NPY(10^-10mol/L)浓度组、NPY(10^-10mol/L)和NPY(10^-12mol/L)浓度组分别在4d、14d时显著促进碱性磷酸酶(ALP)蛋白表达。NPY促成骨效应的最适浓度为10^-10mol/L。在成骨诱导4d时,使用DKKl或Yl受体拮抗剂可以显著抑制NPY(10^-10tool/L)组对ALP蛋白表达的促进作用,虽然β-cmenin和p-GSK-3β蛋白表达未受影响,但是NPY可明显激活β-cmenin的核内转移。结论NPY促进MC3T3-E1细胞成骨分化过程中ALP的蛋白表达,该效应可能是通过经典wnt信号通路介导。 展开更多
关键词 神经肽Y 小鼠 细胞增殖 细胞分化 成骨细胞系细胞
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人体内皮细胞系细胞株ECV304细胞低氧模型的制备 被引量:1
8
作者 苗兰英 林大勇 +5 位作者 白剑 杨葳 张伯阳 王良君 杨菁 刘书林 《解剖科学进展》 CAS 2011年第2期151-153,共3页
目的研究人体内皮细胞系细胞株(ECV304)细胞低氧模型的建立条件及其形态学特点。方法培养ECV304细胞,将培养箱内通入5%CO2-95%N2混合气体(氧分压为18.3mmHg)并培养ECV304细胞12h、24h,使用MTT法、酸脱氢酶试剂盒(LDH)活力测定及细胞骨... 目的研究人体内皮细胞系细胞株(ECV304)细胞低氧模型的建立条件及其形态学特点。方法培养ECV304细胞,将培养箱内通入5%CO2-95%N2混合气体(氧分压为18.3mmHg)并培养ECV304细胞12h、24h,使用MTT法、酸脱氢酶试剂盒(LDH)活力测定及细胞骨架染色对低氧细胞模型鉴定。结果与正常对照组相比,在低氧条件下12h,ECV304细胞存活率降低,LDH释放增加,但细胞骨架保持完整;在低氧条件下24h,ECV304细胞存活率进一步降低,LDH释放增加更明显,细胞骨架破碎。结论在低氧(氧分压为18.3mmHg)24h条件下,可以建立ECV304细胞低氧模型,同时可以观察到形态学改变。 展开更多
关键词 人体内皮细胞系细胞 低氧 细胞骨架
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奇正消痛贴膏治疗急性软组织损伤实验研究及其机制探讨 被引量:26
9
作者 李敏 何朝勇 +2 位作者 陈丽华 马捷 李卫东 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期1241-1243,共3页
目的:探讨奇正消痛贴对实验性动物急性软组织损伤的治疗作用及可能机制。方法:制备了大鼠软组织损伤模型,分组给药,动态测定大鼠损伤症侯指数并测定血浆白细胞介素-1β(IL-1β)水平的变化;以活化的巨噬细胞系(THP-1)细胞为观察模型,以... 目的:探讨奇正消痛贴对实验性动物急性软组织损伤的治疗作用及可能机制。方法:制备了大鼠软组织损伤模型,分组给药,动态测定大鼠损伤症侯指数并测定血浆白细胞介素-1β(IL-1β)水平的变化;以活化的巨噬细胞系(THP-1)细胞为观察模型,以消痛贴提取物作用,检测提取物对THP-1细胞中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-1βmRNA表达的影响。结果:奇正消痛贴对急性软组织损伤动物模型有良好的恢复作用,给药组损伤症侯指数优于模型组,奇正消痛贴低、高剂量给药组使模型大鼠升高的血浆IL-1β水平降低,第5d分别降低了43.5%和31.4%,第7d降低了50.8%和26.7%,与模型组相比差异均有显著性;奇正消痛贴提取物使THP-1中经LPS诱导的过高的IL-1β和TNF-αmRNA表达水平下降。结论:提示奇正消痛贴具有改善急性软组织损伤症侯作用,该作用可能与其降低炎症介质IL-1β和TNF-α释放及mRNA表达有关。 展开更多
关键词 奇正消痛贴 软组织损伤 细胞系巨噬细胞 细胞介素-1Β 肿瘤坏死因子-Α
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40种香豆素类化合物对人表皮癌细胞系A432细胞株和人乳腺癌细胞系BCAP细胞株增殖抑制活性的筛选 被引量:23
10
作者 杨秀伟 徐波 +3 位作者 冉福香 王瑞卿 吴俊 崔景荣 《中国现代中药》 CAS 2006年第12期9-10,18,共3页
目的从中药中筛选有抗肿瘤活性的化合物、类药或先导化合物。方法应用人表皮癌细胞系A432细胞株和人乳腺癌细胞系BCAP细胞株筛选40种香豆素类化合物对其增殖的抑制活性。结果花椒毒素、前胡素、虎耳草素、牛防风素和甘草香豆素对人表皮... 目的从中药中筛选有抗肿瘤活性的化合物、类药或先导化合物。方法应用人表皮癌细胞系A432细胞株和人乳腺癌细胞系BCAP细胞株筛选40种香豆素类化合物对其增殖的抑制活性。结果花椒毒素、前胡素、虎耳草素、牛防风素和甘草香豆素对人表皮癌细胞系A432细胞株增殖具有弱的抑制作用,且呈浓度-效应关系;其IC50值分别为8.40×10-4、5.00×10-5、7.30×10-5、1.00×10-5、5.00×10-5mol.L-1。蛇床素、欧前胡素、香柑内酯、羌活烯醇、紫苜蓿酚和考迈斯托醇对人乳腺癌细胞系BCAP细胞株增殖具有弱的抑制作用,且呈浓度-效应关系;其IC50值分别为6.70×10-5、2.11×10-4、2.77×10-5、6.62×10-5、4.16×10-5、2.26×10-4mol.L-1。结论某些香豆素类化合物具有潜在的抗肿瘤活性,可能发展成为类药或先导化合物。 展开更多
关键词 中药 香豆素类 人表皮癌细胞系A432细胞 人乳腺癌细胞系BCAP细胞
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人参总皂甙诱导淋巴细胞表达GM-CSF的实验研究 被引量:17
11
作者 陈笛 王莎莉 +2 位作者 王亚平 王璐 姜蓉 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期411-414,共4页
目的 研究人参总皂甙 (TSPG)对人淋巴细胞表达GM CSF的影响 ,及其与人粒细胞 巨噬细胞系血细胞发生调控的关系。方法 采用造血祖细胞、胸腺细胞和脾细胞体外培养、造血生长因子生物学活性检测、免疫细胞化学和核酸分子原位杂交等技... 目的 研究人参总皂甙 (TSPG)对人淋巴细胞表达GM CSF的影响 ,及其与人粒细胞 巨噬细胞系血细胞发生调控的关系。方法 采用造血祖细胞、胸腺细胞和脾细胞体外培养、造血生长因子生物学活性检测、免疫细胞化学和核酸分子原位杂交等技术。结果 TSPG能显著刺激粒细胞 巨噬细胞系造血祖细胞 (CFU GM)增殖 ;经TSPG诱导制备的胸腺细胞和脾细胞条件培养液富含GM CSF样活性 ;TSPG能显著促进胸腺细胞和脾细胞的GM CSF蛋白和mRNA表达。结论 TSPG可能通过直接和 或间接途径促进淋巴细胞合成和分泌GM CSF ,进而促进CFU 展开更多
关键词 人参总皂甙 淋巴细胞 GM-CSF 实验 细胞-巨噬细胞集落刺激因子 细胞-巨噬细胞系造血祖细胞
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人树突状细胞与肝癌细胞系HLE融合细胞的构建 被引量:14
12
作者 关心 彭吉润 冷希圣 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期465-467,共3页
目的构建人源树突状细胞(DC)与肝癌细胞系HLE的融合细胞。方法含15%FCS的RPMI1640培养HLE细胞,用GMCSF和IL4培养成人外周血单核细胞7d,并用TNFα和PGE2促成熟2d后获得成熟DC;用荧光染料PKH67GL(绿色荧光)和PKH26GL(红色荧光)分别标记DC... 目的构建人源树突状细胞(DC)与肝癌细胞系HLE的融合细胞。方法含15%FCS的RPMI1640培养HLE细胞,用GMCSF和IL4培养成人外周血单核细胞7d,并用TNFα和PGE2促成熟2d后获得成熟DC;用荧光染料PKH67GL(绿色荧光)和PKH26GL(红色荧光)分别标记DC和HLE细胞,以50%聚乙二醇和10%二甲基亚砜为融合剂,构建可供流式细胞仪快速筛选的融合细胞。结果成功构建具有红、绿双色荧光的人源DC与HLE的融合细胞,融合率为16.8%。结论利用PKH67GL和PKH26GL为标记,可获得便于快速识别和筛选的DC与肝癌细胞的融合细胞,为使用融合DC疫苗治疗肝癌奠定了基础。 展开更多
关键词 人树突状细胞 肝癌细胞系HLE细胞 融合细胞 HLE细胞 肝癌细胞系 人外周血单核细胞 荧光染料 快速筛选 TNF-α 二甲基亚砜
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PBX1基因对系统性红斑狼疮易感基因IFI16表达的影响 被引量:5
13
作者 徐宗怡 黄新芳 +5 位作者 唐元家 倪旭鸣 黄秀琴 钱其军 吴慧 沈南 《现代免疫学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期306-309,共4页
探讨PBX1基因转染人单核细胞系THP1后,对IFI16基因表达的影响。以携带人PBX1基因表达序列的复制缺陷型5型腺病毒载体(pDC315-PBX1-EGFP)转染THP1细胞后,采用实时定量PCR(RT-PCR)和Western blot技术分别在mRNA水平和蛋白水平检测PBX1和IF... 探讨PBX1基因转染人单核细胞系THP1后,对IFI16基因表达的影响。以携带人PBX1基因表达序列的复制缺陷型5型腺病毒载体(pDC315-PBX1-EGFP)转染THP1细胞后,采用实时定量PCR(RT-PCR)和Western blot技术分别在mRNA水平和蛋白水平检测PBX1和IFI16表达的变化。结果,pDC315-PBX1-EGFP转染THP1细胞后,PBX1基因的表达水平都增高,同时发现IFI16基因的表达水平降低。PBX1作为一种转录因子,能调节干扰素诱导蛋白IFI16的表达。 展开更多
关键词 PBX1基因 IFI16基因 人单核细胞系THP1细胞 表达
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SOX7靶向ERK1/2/PD-L1通路抑制结直肠癌血管生成
14
作者 武雪亮 王立坤 +3 位作者 马洪庆 路永刚 李少东 惠志龙 《解剖学研究》 CAS 2024年第3期208-215,共8页
目的探讨性别决定区Y框蛋白7(SOX7)对结直肠癌血管生成的影响及潜在作用机制。方法应用免疫荧光检测结直肠癌患者组织样本中SOX7表达水平,之后通过裸鼠、转染SOX7 mimic的人结直肠癌细胞系SW480细胞和人脐静脉内皮细胞(HUVEC)共培养进... 目的探讨性别决定区Y框蛋白7(SOX7)对结直肠癌血管生成的影响及潜在作用机制。方法应用免疫荧光检测结直肠癌患者组织样本中SOX7表达水平,之后通过裸鼠、转染SOX7 mimic的人结直肠癌细胞系SW480细胞和人脐静脉内皮细胞(HUVEC)共培养进一步研究。用Western-blot验证SOX7与ERK1/2/PD-L1对结直肠癌细胞的相关蛋白表达的影响。用CCK8检测SOX7与ERK1/2/PD-L1对HUVEC增殖的影响。通过体外内皮细胞成管实验测定SOX7与ERK1/2/PD-L1对肿瘤血管生成的影响。结果SOX7在人结直肠癌组织中表达被抑制(P<0.01),同时SOX7的过表达抑制了小鼠体内肿瘤生长(P<0.01)。SW480细胞中SOX7的过表达抑制了ERK1/2、c-Jun的表达,并在ERK1/2的激动剂Senkyunolide I的作用下上调了SW480细胞的ERK1/2、c-Jun蛋白表达(P<0.01),逆转了SOX7对SW480细胞中ERK1/2、c-Jun蛋白表达的影响(P<0.01)。HUVEC中SOX7抑制了PD-L1、V-EGFR2、p-PI3K、HIF-1α的蛋白表达,Senkyunolide I上调了HUVEC的PD-L1、V-EGFR2、p-PI3K、HIF-1α的蛋白表达,并逆转了SOX7对HUVEC中上述相关蛋白表达的影响(P<0.01)。PD-1/PD-L1 Inhibitor 3抑制了PD-L1、V-EGFR2、p-PI3K、HIF-1α的蛋白表达,SOX7过表达在PD-1/PD-L1 Inhibitor 3的影响下并没有表现出抑制作用。CCK8实验结果显示SOX7过表达显著抑制了HUVEC的增殖能力,Senkyunolide I作用下的两组HUVEC增殖能力较SOX7 NC组与SOX7 mimic组明显上升,PD-1/PD-L1 Inhibitor 3作用下的两组HUVEC增殖能力较SOX7 NC组与SOX7 mimic组明显下降,以上均有明显统计学差异(P<0.01)。成管实验结果显示SOX7过表达抑制了HUVEC的血管生成,Senkyunolide I强烈加速了血管生成,而PD-1/PD-L1 Inhibitor 3血管生成则被显著抑制,以上均有明显统计学差异(P<0.01)。结论SOX7通过ERK1/2/PD-L1通路抑制结直肠肿瘤的增殖和血管生成,SOX7可能是晚期CRC患者临床治疗中潜在的抗血管生成靶点。 展开更多
关键词 结直肠癌 性别决定区Y框蛋白7(SOX7) 细胞外调节蛋白激酶(ERK1/2) 细胞程序性死亡-配体1(PD-L1) 增殖 血管生成 人结直肠癌细胞系SW480细胞
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桔梗总皂苷对人肺腺癌细胞系A549移植裸鼠瘤生长和STAT2的影响 被引量:5
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作者 易亚乔 葛金文 +5 位作者 伍参荣 喻嵘 田雪飞 陈懿 邓玺玮 彭国璇 《湖南中医药大学学报》 CAS 2014年第3期7-11,共5页
目的探讨桔梗总皂苷体内抑制人肺腺癌细胞系A549裸鼠移植瘤生长及其对肿瘤细胞信号传导与转录激活因子2(signal transducer and activatorot transcription2,STAT2)的影响。方法将荷人A549移植瘤BALB/c裸小鼠随机分为模型组、环磷酰胺... 目的探讨桔梗总皂苷体内抑制人肺腺癌细胞系A549裸鼠移植瘤生长及其对肿瘤细胞信号传导与转录激活因子2(signal transducer and activatorot transcription2,STAT2)的影响。方法将荷人A549移植瘤BALB/c裸小鼠随机分为模型组、环磷酰胺组、桔梗总皂苷组1(5 mg/kg·d)、桔梗总皂苷组2(10 mg/kg·d)、桔梗总皂苷组3(20 mg/kg·d)、桔梗总皂苷组4(25 mg/kg·d),分别治疗观察30 d,测量瘤体积与质量,并用HE染色观察各组移植瘤组织的病理形态结构,用免疫组化法检测瘤体细胞STAT2蛋白的表达。结果模型组与桔梗总皂苷各组对人肺癌细胞系A549移植瘤抑制作用比较,差异均有统计学意义(P<0.05);桔梗总皂苷对移植瘤体积与抑瘤率均显示出较好作用,桔梗总皂苷组4移植瘤的体积明显小于模型组、桔梗总皂苷其它各组,差异均有统计学意义(P<0.05);桔梗总皂苷各组移植瘤体积大于环磷酰胺组,差异有统计学意义(P<0.05);桔梗总皂苷各组STAT2表达由强到弱随浓度的增加而减弱,成剂量依赖关系,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论桔梗总皂苷对A549肺移植瘤组织生长有较好抑制作用,可能通过下调移植瘤组织STAT2蛋白表达来抑制瘤组织的生长。 展开更多
关键词 桔梗总皂苷 人肺腺癌细胞系A549细胞 移植瘤 细胞信号传导及转录激活因子2 裸鼠
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OSAS模式IH对肺癌细胞系YAP以及P-YAP表达的影响 被引量:2
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作者 薛震 李莲 +3 位作者 任方元 姜芳馨 陈宝元 曹洁 《天津医药》 CAS 2016年第12期1414-1417,共4页
目的探讨阻塞性睡眠呼吸暂停综合征(OSAS)模式间歇低氧(IH)对肺癌细胞系A549细胞YES相关蛋白(YAP)及磷酸化YAP(P-YAP)表达的影响。方法 IH分别处理A549细胞1 h、3 h、6 h(IH1组、IH3组、IH6组),IH频率为:5%O2300 s,21%O2300 s,并设置常... 目的探讨阻塞性睡眠呼吸暂停综合征(OSAS)模式间歇低氧(IH)对肺癌细胞系A549细胞YES相关蛋白(YAP)及磷酸化YAP(P-YAP)表达的影响。方法 IH分别处理A549细胞1 h、3 h、6 h(IH1组、IH3组、IH6组),IH频率为:5%O2300 s,21%O2300 s,并设置常氧对照组(N组)。q RT-PCR检测YAP m RNA表达;Western blot检测YAP及P-YAP蛋白表达。结果 IH1组(2.50±0.18)、IH3组(4.07±0.25)、IH6组(9.18±0.58)YAP m RNA的相对表达量显著高于N组(1.00±0.01),差异有统计学意义(均P<0.05),IH1组、IH3组、IH6组YAP蛋白的表达量较N组上调,并随暴露时间增加而上调;IH1组、IH3组、IH6组P-YAP蛋白的表达量较N组下调,并随暴露时间增加而下调。结论 YAP信号通路可能在OSAS模式IH促进肿瘤发生发展的过程中起重要的调控作用。 展开更多
关键词 睡眠呼吸暂停 阻塞性 细胞低氧 肺癌细胞系A549细胞 YES相关蛋白 磷酸化YAP 实时荧光定量聚合酶链式反应 蛋白质免疫印迹法
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脐血清对小鼠骨髓成纤维系祖细胞产率影响 被引量:2
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作者 黄东生 唐锁勤 +1 位作者 谭汉君 陈家佩 《实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期357-358,共2页
目的 观察脐血清对小鼠骨髓成纤维系祖细胞 (CFU F)产率影响。方法 采用体外长期液体培养(LTC)法观察CFU F产率 ,噻唑蓝 (MTT)比色法观察基质上清液造血活性。结果  1.脐血清可促进CFU F增殖与分化 ,加脐血清组CUU F产率为 (36 .0 0&... 目的 观察脐血清对小鼠骨髓成纤维系祖细胞 (CFU F)产率影响。方法 采用体外长期液体培养(LTC)法观察CFU F产率 ,噻唑蓝 (MTT)比色法观察基质上清液造血活性。结果  1.脐血清可促进CFU F增殖与分化 ,加脐血清组CUU F产率为 (36 .0 0± 2 6 .6 9)集落 /1× 10 6细胞 ,显著高于成人血清组 [(7.0 0± 4 .2 4 )集落 /1× 10 6细胞 ]和对照组 (马血清 ) [(8.6 7± 2 .31)集落 /1× 10 6]细胞 (P均 <0 .0 5 ) ;2 .脐血清诱导小鼠基质细胞产生集落刺激活性 (CSA)能力低于成人血清 ,培养 3周后上清液造血活性A值分别为 0 .2 2 2± 0 .0 13和 0 .30 7± 0 .0 89,对照组 (马血清 )为 0 .2 86± 0 .0 4 9,脐血清与成人血清相比差异有显著性 (P <0 .0 5 )。结论 脐血清中可能存在一些有利于小鼠CFU F增殖与分化的因素 ,而诱导基质细胞产生CSA能力低可能与脐血清白细胞介素 (IL 1) 展开更多
关键词 脐血清 成纤维细胞系细胞 集落刺激活性
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阵发性睡眠性血红蛋白尿症病人骨髓粒-巨噬细胞系祖细胞的特点
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作者 高清平 李秀珍 +3 位作者 梅广义 陈济民 夏虹 王巧玲 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 1996年第1期108-109,共2页
阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)是后天的细胞膜缺陷性疾病。这种缺陷累及红细胞、粒细胞和血小板,还累及骨髓造血祖细胞。本实验采用造血祖细胞体外培养技术研究PNH病人骨髓粒-巨噬细胞系祖细胞(CFU—GM)的增殖能力;骨髓细胞经新鲜酸化A... 阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)是后天的细胞膜缺陷性疾病。这种缺陷累及红细胞、粒细胞和血小板,还累及骨髓造血祖细胞。本实验采用造血祖细胞体外培养技术研究PNH病人骨髓粒-巨噬细胞系祖细胞(CFU—GM)的增殖能力;骨髓细胞经新鲜酸化AB型血清处理后培养的CFU—GM的增殖能力;以及CFU—GM对粒-巨噬细胞系集落刺激因子(GM—CSF)的反应能力。 展开更多
关键词 阵发性睡眠性血红蛋白尿症 粒-巨噬细胞系细胞 粒-巨噬细胞系集落刺激因子
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他莫昔芬诱导K562细胞凋亡的实验研究 被引量:1
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作者 韩丽英 陈枫 张玉高 《白血病.淋巴瘤》 CAS 2006年第1期13-15,共3页
目的观察他莫昔芬对体外培养的人白血病细胞系K562细胞增生抑制及诱导凋亡作用。方法在体外设定的浓度梯度和作用时间下用他莫昔芬处理K562细胞,采用锥虫蓝拒染法计数活细胞数,并计算细胞生长率,Wright-Giemsa染色光镜观察细胞形态、琼... 目的观察他莫昔芬对体外培养的人白血病细胞系K562细胞增生抑制及诱导凋亡作用。方法在体外设定的浓度梯度和作用时间下用他莫昔芬处理K562细胞,采用锥虫蓝拒染法计数活细胞数,并计算细胞生长率,Wright-Giemsa染色光镜观察细胞形态、琼脂糖凝胶电泳测定DNA梯带(DNA,ladder)、流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡率。结果他莫昔芬能够抑制K562细胞增生;1 ̄5μmol/L他莫昔芬可诱导K562细胞凋亡。结论他莫昔芬可抑制K562细胞生长,诱导其凋亡。 展开更多
关键词 他莫昔芬 人白血病细胞系K562细胞 细胞凋亡
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绒毛膜癌细胞的融合与侵袭和转移能力变化关系的研究 被引量:1
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作者 安瑞芳 张勇华 +1 位作者 林耀华 薛艳 《实用妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期114-117,共4页
目的:观察人绒毛膜癌(绒癌)细胞系中BeWo细胞株在福斯考林(forskolin)诱导融合前后细胞中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及上皮钙黏蛋白(E-cad)的表达变化,以探讨绒癌细胞融合与其浸润和转移能力变化的关系。方法:用BeWo细胞株进行培养传代,以... 目的:观察人绒毛膜癌(绒癌)细胞系中BeWo细胞株在福斯考林(forskolin)诱导融合前后细胞中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及上皮钙黏蛋白(E-cad)的表达变化,以探讨绒癌细胞融合与其浸润和转移能力变化的关系。方法:用BeWo细胞株进行培养传代,以100mmol/L浓度的forskolin作用于BeWo细胞,用逆转录聚合酶链(RT-PCR)方法检测细胞中人类内源性逆转录病毒基因编码的膜糖蛋白(Syncytin mRNA)表达量的变化;免疫印迹技术(Western blot)方法检测细胞中表达MMP-2及E-cad蛋白表达量的变化。结果:以BeWo细胞作为靶细胞,根据RT-PCR和Western blot方法中条带的形状和亮暗程度可知Syncytin基因和E-cad及MMP-2蛋白的表达呈时间依赖性,随着forskolin作用时间的增加,Syncytin基因及E-cad蛋白的表达逐渐增加,而MMP-2蛋白表达量逐渐减少,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:Syncytin高表达与融合后绒癌细胞的浸润转移能力的改变可能有一定关系,Syncytin的检测有望成为滋养细胞肿瘤患者判定预后的有价值的指标,并为滋养细胞肿瘤的治疗开辟了新的思路。 展开更多
关键词 人绒癌细胞系BeWo细胞 融合 人类内源性逆转录病毒基因编码的膜糖蛋白 基质金属蛋白酶 上皮钙黏蛋白
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