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提高小鼠原代肝星状细胞获得率及纯度的分离方法 被引量：1
1
作者 徐莹 张定棋 +5 位作者 慕永平 陈佳美 王清兰 平键 刘伟 刘平 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2018年第21期3376-3380,共5页
背景:由于小鼠肝脏小、血管较细,其原代肝星状细胞分离的难度相对较大,且得率有限,难以满足体外实验需求。目的:建立小鼠原代肝星状细胞高效稳定的分离方法,提高小鼠原代肝星状细胞的得率与纯度,为研究肝纤维化的机制奠定实验基础。方法... 背景:由于小鼠肝脏小、血管较细,其原代肝星状细胞分离的难度相对较大,且得率有限,难以满足体外实验需求。目的:建立小鼠原代肝星状细胞高效稳定的分离方法,提高小鼠原代肝星状细胞的得率与纯度,为研究肝纤维化的机制奠定实验基础。方法:取成年雄性C57BL/6小鼠,以无钙镁离子的前灌流液经门静脉充分灌注肝脏,再先后以1 g/L链霉蛋白酶和0.7 g/LⅣ型胶原酶灌注,使用Nycodenz进行梯度密度离心,获取中间层原代肝星状细胞,锥虫蓝染法观察肝星状细胞活力,流式细胞法检测细胞纯度,免疫荧光法检测Desmin表达,并于倒置显微镜下观察细胞培养3,5,7 d后的形态变化,PCR法检测培养3,5,7 d后α-平滑肌肌动蛋白及Ⅰ型胶原蛋白基因表达情况。结果与结论:(1)每只小鼠肝脏可获得肝星状细胞(5.5±0.4)×10~6个,锥虫蓝检测细胞活力均大于95%,流式细胞法检测细胞纯度为94%,免疫荧光检测细胞高表达Desmin;(2)随着体外培养时间的延长,可见原代肝星状细胞逐渐由圆形向星型发展;(3)随培养天数增长,α-平滑肌肌动蛋白及Ⅰ型胶原蛋白表达逐渐升高;(4)结果提示,实验成功建立了高效分离小鼠肝星状细胞的方法,可为获得高纯度、高细胞活力的小鼠原代肝星状细胞提供技术方案,也为肝纤维化的机制研究提供技术保障。 展开更多
关键词 肝星状细胞 细胞分离技术 原代细胞 细胞外基质 荧光鉴定 肝纤维化 细胞得率 国家自然科学基金 肝细胞 细胞分离 组织工程
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饲料酵母固体发酵的细胞得率与营养成分 被引量：1
2
作者 江永才 《上海饲料》 1997年第6期30-31,共2页
关键词 饲料酵母 固体发酵 细胞得率 营养成分
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免疫磁珠分选前列腺肿瘤细胞的方法优化 被引量：1
3
作者 陈伟 王国民 《泌尿外科杂志（电子版）》 2017年第2期5-7,4,共4页
目的优化免疫磁珠分选前列腺肿瘤细胞的方法,提高阳性细胞得率。方法对比静置孵育、连续旋转孵育磁珠对分选后细胞得率的影响,并比较分离柱的大小对细胞得率的影响。结果连续旋转法孵育磁珠后,分选细胞得率显著升高。分离柱大小与分选... 目的优化免疫磁珠分选前列腺肿瘤细胞的方法,提高阳性细胞得率。方法对比静置孵育、连续旋转孵育磁珠对分选后细胞得率的影响,并比较分离柱的大小对细胞得率的影响。结果连续旋转法孵育磁珠后,分选细胞得率显著升高。分离柱大小与分选后细胞得率无显著相关。结论免疫磁珠分选前列腺癌细胞的细胞得率与磁珠和细胞的孵育方式有关。 展开更多
关键词 前列腺肿瘤 免疫磁珠分选 孵育 细胞得率 分选柱
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不同取材部位的TIL得率及活力研究
4
作者 陆静 李彪如 +2 位作者 华祖德 朱佑明 童善庆 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1995年第3期182-184,共3页
为了获得更多、活力更强的ＴＩＬ细胞，本实验就实体瘤肝癌、肺癌及卵巢癌取材部位进行了分析，比较了取自肝癌、肺癌组织的浸润结节、交界组织、实质部位、中心及坏死区域的得率与活力，结果发现：坏死部位的细胞得率与活力最差，淋巴... 为了获得更多、活力更强的ＴＩＬ细胞，本实验就实体瘤肝癌、肺癌及卵巢癌取材部位进行了分析，比较了取自肝癌、肺癌组织的浸润结节、交界组织、实质部位、中心及坏死区域的得率与活力，结果发现：坏死部位的细胞得率与活力最差，淋巴细胞得率也最差，肝癌、肺癌组织分别为４．０５×１０￣４／ｇ、５．５×１０￣４／ｇ；中心部位较差，分别为３．６×１０￣５／ｇ、４．１９×１０￣５／ｇ；实质部位的细胞得率最高，淋巴细胞得率最多，肝癌、肺癌组织分别为１．５９８×１０￣６／ｇ，９．０５×１０￣５／ｇ；表面浸润结节及交界组织淋巴细胞得率及活力较好，在肺癌组织分别为７．８７×１０￣５／ｇ、７．０４×１０￣５／ｇ，在肝癌组织分别为８．４×１０￣／ｇ、１．２２９×１０￣／ｇ，故认为肝癌、肺癌组织以浸润结节、交界组织及实质部分较好。对于卵巢癌肿块，分析其浸润结节、实质部位及卵泡部位，其中表面浸润结节最后为７．２４７×１０￣５／ｇ，其次为实质部位为２．４９９×１０￣５／ｇ，而卵巢组织最差为２．０１７×１０￣５／ｇ，故认为卵巢肿瘤的取材以表面浸润结节为最好。 展开更多
关键词 肿瘤 淋巴细胞 细胞得率 细胞活力
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饲料酵母固体发酵的细胞得率与营养成分
5
作者 江永才 《中国饲料》 北大核心 1997年第21期31-32,共2页
在饲料酵母生产中,一般采用液体深层发酵和固体发酵这两种工艺。由于液体深层发酵设备投资较大,故大多数厂家采用固体发酵工艺进行饲料酵母生产。我所于1992年承担了万县市科委、计委下达的饲料酵母研究开发课题,于1996年通过了万县市... 在饲料酵母生产中,一般采用液体深层发酵和固体发酵这两种工艺。由于液体深层发酵设备投资较大,故大多数厂家采用固体发酵工艺进行饲料酵母生产。我所于1992年承担了万县市科委、计委下达的饲料酵母研究开发课题,于1996年通过了万县市科委组织有关单位和技术专家的验收和成果鉴定。 1 酵母菌的细胞数 酵母制品分活性干酵母和非活性干酵母。活性干酵母的主要产品有面包酵母、酿酒酵母等,其主要技术指标是发酵力; 展开更多
关键词 饲料酵母 固体发酵 细胞得率 营养成分
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大鼠骨髓间充质干细胞培养浓度的即时监测
6
作者 郑琛 孙海英 齐念民 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2012年第1期111-114,共4页
目的探讨大鼠骨髓间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)培养过程中即时监测细胞浓度的可行性。方法将6～8周龄的SD大鼠处死,分离MSCs,在24孔板上半连续灌注培养和自制的生物反应器上连续灌注培养,通过实时检测培养过程中的葡萄糖... 目的探讨大鼠骨髓间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)培养过程中即时监测细胞浓度的可行性。方法将6～8周龄的SD大鼠处死,分离MSCs,在24孔板上半连续灌注培养和自制的生物反应器上连续灌注培养,通过实时检测培养过程中的葡萄糖消耗率(Glucose consumption rate,GCR)、乳酸累积率(Lactic acid production rate,LPR)及相应的干细胞浓度,并计算葡萄糖的比细胞得率(qGlu)及乳酸累积比细胞得率(qLac),分析其稳定性及细胞浓度与GCR和LPR之间的关系。结果所分离培养的MSCs形态均一,轮廓鲜明,呈典型的短小梭形。在24孔板上半连续灌注培养的qGlu和qLac分别为1.84和1.74 mg/(106个.d);生物反应器连续灌注培养的qGlu和qLac分别为1.66和1.61 mg/(106个.d),二者比细胞得率均为恒值。结论 MSCs培养过程中,GCR、LPR与细胞浓度具有良好的线性关系,通过对葡萄糖浓度和乳酸浓度的测定,可以实时监测MSCs的浓度。 展开更多
关键词 间质干细胞 细胞浓度 葡萄糖消耗率 乳酸累积率 生物反应器 比细胞得率
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利用康宁CellBIND界面有效增加LNCaP细胞系的贴壁
7
作者 Ana Maria P. Pardo Todd Upton Debra S. Hoover 《细胞生物学杂志》 CSCD 2005年第4期477-477,共1页
一些特殊细胞系的培养非常困难,是因为在培养过程中细胞不能有效的贴附于传统组织培养处理表面。冻存细胞在恢复过程中,良好的起始贴壁能力是非常重要的。低贴壁能力不仅会使得细胞得率降低,还会造成实验时间的浪费。在这里我们介绍利... 一些特殊细胞系的培养非常困难,是因为在培养过程中细胞不能有效的贴附于传统组织培养处理表面。冻存细胞在恢复过程中,良好的起始贴壁能力是非常重要的。低贴壁能力不仅会使得细胞得率降低,还会造成实验时间的浪费。在这里我们介绍利用具有专利的康宁CellBIND表面有效增加LNCaP细胞系的复苏和得率。LNCaP细胞系是人前列腺癌细胞系,由于生长缓慢和低贴壁能力,培养十分困难。 展开更多
关键词 细胞系 贴壁 界面 细胞得率 组织培养 培养过程 恢复过程 实验时间 前列腺癌
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