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铝盐对大鼠脑突触小体摄取谷氨酸功能的影响 被引量:4
1
作者 张本忠 吴德生 《现代预防医学》 CAS 1999年第4期464-465,共2页
应用3 H—DL—谷氨酸为示踪剂进行突触小体谷氨酸摄取实验,通过体外、体内实验观察铝盐对大鼠脑突触小体谷氨酸摄取功能的影响。结果显示: 剂量为37.5~600.0μm ol/LAl3+ 在体外作用15 分钟, 能使大鼠脑组织海马区突触小体3H—DL—谷... 应用3 H—DL—谷氨酸为示踪剂进行突触小体谷氨酸摄取实验,通过体外、体内实验观察铝盐对大鼠脑突触小体谷氨酸摄取功能的影响。结果显示: 剂量为37.5~600.0μm ol/LAl3+ 在体外作用15 分钟, 能使大鼠脑组织海马区突触小体3H—DL—谷氨酸摄取抑制25.9~72.3% ;大脑皮层抑制11.0~63.4% ,且有一定的剂量-效应关系。动物以20.0、60.0m g/kg·d Al3+ 经饮水染毒50 天, 观察到高剂量时, 海马及大脑皮层谷氨酸摄取抑制了12.1% 、7.4% , 与对照比较无显著性差异 (P> 0.05)。表明体外铝对突触小体摄取灭活谷氨酸的功能有抑制作用, 展开更多
关键词 铝盐 突触小体 谷氨酸摄取 毒理
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钙离子与疼痛及炎症免疫的关系 被引量:4
2
作者 陈志武 马传庚 徐叔云 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 1989年第2期65-68,共4页
钙离子和cAMP/cGMP共同参与细胞内一些重要机能的调节,如在肌肉收缩过程中的兴奋—收缩偶联,跨膜信息的传递以及细胞运动、分泌、代谢和分化等基本过程中均起着偶联或第二信使的作用,因此钙离子(Ca^(2+))被公认为第二信使,其生物学意义... 钙离子和cAMP/cGMP共同参与细胞内一些重要机能的调节,如在肌肉收缩过程中的兴奋—收缩偶联,跨膜信息的传递以及细胞运动、分泌、代谢和分化等基本过程中均起着偶联或第二信使的作用,因此钙离子(Ca^(2+))被公认为第二信使,其生物学意义日益受到人们的重视。本文就Ca^(2+)与疼痛及炎症免疫的关系作一简单概述。Ca^(2+) 展开更多
关键词 吗啡受体 CA 疼痛 突触小体 钙离子 凝血因子Ⅳ 炎症免疫
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SNARE和synaptotagmin对学习记忆作用的研究进展 被引量:4
3
作者 李冬阳 董静 《解剖科学进展》 CAS 2010年第1期82-84,88,共4页
可溶性NSF附着蛋白受体(SNARE)复合物是神经元囊泡胞吐过程重要的一部分,一般认为它参与调节突触前膜融合过程。SNARE复合体核心蛋白主要有3个,突触小体相关蛋白(SNAP-25),syntaxin和囊泡相关蛋白(VAMP)。突触结合蛋白(synaptotagmin,s... 可溶性NSF附着蛋白受体(SNARE)复合物是神经元囊泡胞吐过程重要的一部分,一般认为它参与调节突触前膜融合过程。SNARE复合体核心蛋白主要有3个,突触小体相关蛋白(SNAP-25),syntaxin和囊泡相关蛋白(VAMP)。突触结合蛋白(synaptotagmin,syt)是一个钙感受器蛋白,通过和SNARE结合起到调控膜融合过程的作用。SNARE复合物中的syntaxin,SNAP-25以及syt基因的缺失可造成小鼠认知以及学习记忆损伤。本文主要综述两者在突触前膜的作用过程,并分析其对学习记忆的影响与其调节突触前膜融合过程密切相关,以期了解syntaxin,SNAP-25及syt影响学习记忆的分子机制。 展开更多
关键词 学习记忆损伤 记忆作用 SNARE复合物 附着蛋白受体 突触小体 突触结合蛋白 相关蛋白 膜融合
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对硫磷对大鼠脑突出小体钙稳态及cAMP的影响 被引量:3
4
作者 滕丽红 张铣 《卫生毒理学杂志》 CSCD 1991年第4期237-239,共3页
本研究观察了对硫磷在体外条件下对大鼠脑突触小体钙稳态及cAMP量的影响。结果表明,对硫磷在较低浓度下即可明显抑制突触小体静息状态下的钙摄取功能,并使突触小体膜脂流动性下降。在较高浓度下,可抑制Ca^(2+)-Mg^(2+)-ATPase活性,增加c... 本研究观察了对硫磷在体外条件下对大鼠脑突触小体钙稳态及cAMP量的影响。结果表明,对硫磷在较低浓度下即可明显抑制突触小体静息状态下的钙摄取功能,并使突触小体膜脂流动性下降。在较高浓度下,可抑制Ca^(2+)-Mg^(2+)-ATPase活性,增加cAMP含量。对硫磷的这些作用均存在剂量效应关系及时间效应关系,井与其抑制AchE活性的作用无关。 展开更多
关键词 1605 突触小体 环腺苷酸
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胆红素导致SD大鼠脑干神经元突触小体Ca^(2+)过载 被引量:2
5
作者 李丹萍 赖轲 +1 位作者 王际平 时海波 《上海交通大学学报(医学版)》 CSCD 北大核心 2017年第11期1458-1462,共5页
目的·探讨胆红素暴露对SD大鼠脑干神经元突触小体游离钙离子浓度([Ca^(2+)]i)的影响。方法·采用出生后7~14 d的SD大鼠40只,随机分成3组,分别为对照组、胆红素组(浓度分别为0.1、1、10μmol/L)以及胆红素+甘氨酸熊脱氧胆酸(GUD... 目的·探讨胆红素暴露对SD大鼠脑干神经元突触小体游离钙离子浓度([Ca^(2+)]i)的影响。方法·采用出生后7~14 d的SD大鼠40只,随机分成3组,分别为对照组、胆红素组(浓度分别为0.1、1、10μmol/L)以及胆红素+甘氨酸熊脱氧胆酸(GUDCA)干预组。用蔗糖密度梯度离心法提纯脑干神经元突触小体;采用光学显微镜及透射电子显微镜验证突触小体活性,以OG-BAPTA作为钙离子荧光探针,共聚焦激光扫描显微镜下观察不同条件下突触小体荧光强度的实时变化。结果·获得了具有活性的SD大鼠脑干神经元突触小体。在对照组中随着观察时间的推移,突触小体荧光强度缓慢升高;胆红素组表现更为强烈、与暴露时间及浓度相关的升高(主体内、主体间效应检验,P<0.05);单纯给予GUDCA并未改变实验体系中的荧光强度升高趋势(与对照组比较,P=0.656),但GUDCA干预降低了胆红素暴露所致荧光强度的升高程度,尤其是较高浓度(10μmol/L)胆红素,差异具有统计学意义(P=0.000)。结论·胆红素能使突触小体发生钙超载,并与暴露浓度、时间呈正相关;GUDCA对胆红素所致的突触小体钙超载具有抑制作用,可能通过该途径拮抗胆红素神经毒性。 展开更多
关键词 胆红素 突触小体 游离钙离子 甘氨酸熊脱氧胆酸 免疫荧光探针
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吗啡和血管紧张素Ⅱ对大鼠脑突触小体Ca^(2+)摄取的拮抗效应 被引量:2
6
作者 王晓民 王晓京 韩济生 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 1989年第2期179-183,共5页
行为实验已多次证明,脑室注射血管紧张素Ⅱ(AⅡ)可以对抗吗啡的镇痛作用,但机制不明。吗啡阻止神经末梢钙摄取被认为是其镇痛的机理之一,因此本工作研究了AⅡ和吗啡对大鼠脑突触小体^(45)Ca摄取的作用及相互关系。结果表明,吗啡(10^(-8)... 行为实验已多次证明,脑室注射血管紧张素Ⅱ(AⅡ)可以对抗吗啡的镇痛作用,但机制不明。吗啡阻止神经末梢钙摄取被认为是其镇痛的机理之一,因此本工作研究了AⅡ和吗啡对大鼠脑突触小体^(45)Ca摄取的作用及相互关系。结果表明,吗啡(10^(-8)—10^(-6)mol/L)对^(45)Ca摄取有明显的抑制作用,10^(-7)mol/L时抑制41%(P<0.001),该效应可被吗啡受体阻断剂纳洛酮(10^(-6)mol/L)完全翻转。与吗啡的作用相反,AⅡ(10^(-8)—110^(-6)mol/L)可促进突触小体对^(45)Ca的摄取,10^(-7)mol/L时增加75%(P<0.001),该效应可被AⅡ受体阻断剂Saralasin(10^(-6)mol/L)完全翻转。将不同剂量的AⅡ(10^(-8)—10^(-6)mol/L)和10^(-8)mol/L吗啡与突触小体共同孵育,则吗啡抑制^(45)Ca摄取的作用被完全翻转。以上结果表明,AⅡ促进脑突触小体Ca^(2+)摄取,对抗了吗啡抑制Ca^(2+)摄取的作用,可能是AⅡ抗吗啡镇痛的机制之一。 展开更多
关键词 吗啡 血管紧张素II 突触小体
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八肽胆囊收缩素对抗吗啡抑制大鼠脑突触小体钙摄取的作用 被引量:1
7
作者 王晓京 王晓民 韩济生 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1989年第4期241-246,共6页
用大鼠脑的膜制备观察吗啡和CCK-8对突触小体摄取^(45)Ca^(2+)的影响。吗啡(10 nmol/L~1μmo1/L)抑制突触小体对^(45)Ca的摄取,该作用能被1μmol/L纳洛酮完全阻断。CCK-8(10nmol/L~1μmol/L)本身能抑制突触小体^(45)Ca摄取,但它在10nm... 用大鼠脑的膜制备观察吗啡和CCK-8对突触小体摄取^(45)Ca^(2+)的影响。吗啡(10 nmol/L~1μmo1/L)抑制突触小体对^(45)Ca的摄取,该作用能被1μmol/L纳洛酮完全阻断。CCK-8(10nmol/L~1μmol/L)本身能抑制突触小体^(45)Ca摄取,但它在10nmol/L和100 nmol/L时能对抗吗啡对^(45)Ca摄取的抑制作用,浓度提高到1μmol则不能对抗吗啡的这一作用。CCK-8抑制突触小体摄取^(45)Ca,以及对抗吗啡的^(45)Ca摄取抑制的作用,皆能被CCK受体拮抗剂丙谷酰胺(2μmol/L)所阻断.捉示CCK-8是通过激动CCK受体而拮抗吗啡抑制^(45)Ca摄取的,CCK-8的这一拮抗作用可能是其抗阿片作用的机理之一. 展开更多
关键词 吗啡 CCK-8 钙摄取 突触小体
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寡聚化和磷酸化α-突触核蛋白在不同年龄段食蟹猴脑不同部位突触小体中的表达分布 被引量:1
8
作者 杨巍巍 李昕 +2 位作者 李旭冉 李旭颖 于顺 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2015年第5期671-674,共4页
目的研究寡聚化(oligomer-α-synuclein,oligo-α-Syn)和磷酸化α-突触核蛋白(phosphorylated-α-Synuclein,p-α-Syn)在不同年龄段食蟹猴脑不同部位突触小体中的表达差异。方法酶联免疫吸附实验(enzyme linked immunosorbent assay,ELI... 目的研究寡聚化(oligomer-α-synuclein,oligo-α-Syn)和磷酸化α-突触核蛋白(phosphorylated-α-Synuclein,p-α-Syn)在不同年龄段食蟹猴脑不同部位突触小体中的表达差异。方法酶联免疫吸附实验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测oligo-α-Syn与p-α-Syn在不同年龄段食蟹猴脑不同部位突触小体中的表达。结果在老年食蟹猴的前额叶、枕叶、颞叶、海马、纹状体和丘脑中,突触小体中寡聚化与磷酸化α-Syn表达较青年与中年猴显著增加,且差异有统计学意义(P<0.01)。结论食蟹猴颞叶、海马、纹状体和丘脑突触小体中α-Syn寡聚化与磷酸化表达呈增龄性增加。 展开更多
关键词 寡聚化α-突触核蛋白 磷酸化α-突触核蛋白 食蟹猴 突触小体
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细胞内钙调节与递质释放
9
作者 黄秀兰 《川北医学院学报》 CAS 1991年第4期68-71,共4页
在神经元活动过程中,包括递质释放过程,细胞内 Ca■起关键作用。递质释放增加,有赖于细胞外 Ca■内流,而细胞内外Ca■浓度之比为10<sup>-</sup>4,胞内 Ca■含量甚微,静息时为10<sup>-8</sup>~10<sup>-7&... 在神经元活动过程中,包括递质释放过程,细胞内 Ca■起关键作用。递质释放增加,有赖于细胞外 Ca■内流,而细胞内外Ca■浓度之比为10<sup>-</sup>4,胞内 Ca■含量甚微,静息时为10<sup>-8</sup>~10<sup>-7</sup>M。似乎有许多机制参与缓冲和调节细胞内游离 Ca■浓度并维持低Ca■水平,从而影响递质释放过程:Ca■与胞浆内蛋白结合,如钙调蛋白(Calmo-dulin,CaM);质膜 Na<sup>+</sup>—Ca■交换系统和 Ca■—Mg■—ATP 酶;线粒体 Ca■摄取与 Ca■释放;光滑内质网的 ATp 依赖性Ca■转运等等。本文主要从以下几个方面来讨论细胞内 Ca(?)调节与递质释放的关系。 展开更多
关键词 递质释放 细胞内钙 蛋白结合 线粒体膜 突触小体 交换系统 钙调蛋白 膜电位 内流 主动转运
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“通过神经系统的调节”难点突破
10
作者 谢衍书 《中学生物教学》 2015年第1X期58-58,共2页
如果在教学过程中教师无法引导学生对兴奋传递的正常与异常情况进行系统分析,学生就难以突破"通过神经系统调节"的难点,下面通过实例说明如何解决这一问题。1难点例解1.1抑制性递质作用于突触后膜使后膜表现抑制效应,后膜能... 如果在教学过程中教师无法引导学生对兴奋传递的正常与异常情况进行系统分析,学生就难以突破"通过神经系统调节"的难点,下面通过实例说明如何解决这一问题。1难点例解1.1抑制性递质作用于突触后膜使后膜表现抑制效应,后膜能否产生电位变化例1(2013年高考海南卷) 展开更多
关键词 突触后膜 抑制性递质 例解 抑制效应 膜电位 电位变化 突触小泡 受体结合 教学过程 突触小体
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造脑难题
11
作者 张鲲 《新知客》 2009年第6期88-91,共4页
从人工智能这个词还没诞生的时候,人们就尝试用电路模拟人脑。近60年过去了,对人脑的工作模式我们仍然知之甚少。所以,模拟人脑这事,前途是光明的,很光明,道路依旧是曲折的,很曲折。
关键词 明斯基 电路模拟 并行处理系统 外界信号 神经网络 神经科学家 智能体 斯坦福 突触小体 威斯康星大
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脊神经结扎诱导大鼠脊髓背角SFKs-Y416p和GluN2B表达增加
12
作者 解新 蔡捷 +2 位作者 万有 崔彦军 邢国刚 《中国疼痛医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期616-619,共4页
目的:研究脊神经结扎(SNL)后大鼠脊髓背角SFKs-Y416p和GluN2B的表达变化,并探讨二者在维持神经病理性疼痛中的作用。方法:按照双盲随机的原则,将20只雄性SD大鼠随机分为Naive组(n=4),SNL手术组(n=8)和假手术组(n=8),进行Western blottin... 目的:研究脊神经结扎(SNL)后大鼠脊髓背角SFKs-Y416p和GluN2B的表达变化,并探讨二者在维持神经病理性疼痛中的作用。方法:按照双盲随机的原则,将20只雄性SD大鼠随机分为Naive组(n=4),SNL手术组(n=8)和假手术组(n=8),进行Western blotting实验,检测神经病理性疼痛大鼠脊髓背角突触部位SFKs-Y416p和GluN2B的表达变化。结果:1 Western blotting定量分析显示,脊神经结扎能显著上调SFKs-Y416p。SNL后第7 d,脊髓背角突触部位的SFKs-Y416p由手术前的(0.89±0.07)上调到(1.27±0.08)(P<0.01);然而在假手术组大鼠,背角突触部位的SFKs-Y416p则没有明显的变化。2 SNL后第7 d,脊髓背角突触部位的GluN2B由术前的(0.73±0.05)上调到(1.45±0.12)(P<0.01);然而在假手术组大鼠,背角突触部位的GluN2B则没有明显变化。结论:脊神经结扎可以上调脊髓背角突触部位SFKs-Y416p和GluN2B的蛋白表达,且SFKs-Y416p和GluN2B升高的时间点在神经病理性疼痛的第7天,所以,SFKs-Y416p/GluN2B信号通路可能参与维持外周神经损伤所引起的神经病理性疼痛的中枢机制。 展开更多
关键词 SFKs-Y416p GluN2B 脊髓背角 神经病理性疼痛 突触小体 脊神经结扎 大鼠
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小鼠不同频率轻型TBI后脑组织tau蛋白的毒性差异研究
13
作者 程兴滕 尹亚东 +1 位作者 张赛 孙中磊 《遵义医科大学学报》 2021年第2期159-164,共6页
目的探索不同频率轻型颅脑创伤(Traumatic brain injury,TBI)后脑组织tau蛋白的不同及其毒性的差异。方法小鼠TBI模型制备成功后取脑组织,通过快速蛋白液相色谱(FPLC)法分析并通过免疫沉淀提取可溶性tau低聚物,采用Western blot法分析ta... 目的探索不同频率轻型颅脑创伤(Traumatic brain injury,TBI)后脑组织tau蛋白的不同及其毒性的差异。方法小鼠TBI模型制备成功后取脑组织,通过快速蛋白液相色谱(FPLC)法分析并通过免疫沉淀提取可溶性tau低聚物,采用Western blot法分析tau低聚物的结构特点,MTT和乳酸脱氢酶法测定tau低聚物的毒性,最后分离提取突触小体检测tau低聚物对突触小体的影响。结果Western blot抗(tau-5、T22、TOMA1)检测结果RB-3周组均与sham组有明显差异(P<0.05);FPLC色谱图分析表明SB-24 h、SB-3周、sham组与RB-3周组tau低聚物峰值存在差异;tau低聚物与SH-SY5Y、原代神经元共培养结果RB-3周和4R-Tau组的细胞毒性增强,细胞生存率的下降(P<0.05),而T22抗体预孵育SH-SY5Y可以显著逆转RB-3周组细胞生存率下降(P<0.05);与未处理组相比突触提取物突触前标记物(Synaptophysin)水平在RB-3周和4R-Tau组降低,突触后标记物(PSD95)水平在TBI各组均降低,突触树突标记物(Drebrin)水平仅在RB-3周组降低(P<0.05),而与sham相比,仅RB-3周组可引起PSD95和Drebrin水平降低(P<0.05)。结论本研究证明,不同频率轻型TBI诱导的tau低聚物不同,表现出不同的形态特性和毒性。 展开更多
关键词 颅脑损伤 TAU 毒性 突触小体
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惊厥大鼠不同脑区突触体内单胺类递质水平的动态变化及意义
14
作者 吴浪龙 李祖荣 《南昌大学学报(医学版)》 CAS 2010年第5期13-15,共3页
目的探讨单胺类递质与惊厥的关系。方法选用Wistar大鼠32只,采用腹腔注射硫代氨基脲制作惊厥模型。取大脑皮层、海马、纹状体三个脑区,制备出突触小体。用荧光分光光度计测定五羟色胺(5-HT)、多巴胺(DA)、去甲肾上腺素(NA)三种单胺类递... 目的探讨单胺类递质与惊厥的关系。方法选用Wistar大鼠32只,采用腹腔注射硫代氨基脲制作惊厥模型。取大脑皮层、海马、纹状体三个脑区,制备出突触小体。用荧光分光光度计测定五羟色胺(5-HT)、多巴胺(DA)、去甲肾上腺素(NA)三种单胺类递质的含量。结果 5-HT含量在惊厥发作组中,大脑皮层和海马区显著下降(P<0.01),而纹状体仅致死组有明显降低(P<0.01);DA含量在惊厥组中仅纹状体有显著下降(P<0.01);而大脑皮层和海马区无明显变化(P>0.05);NA含量在惊厥组中,仅海马区有明显下降(P<0.01);而大脑皮层则随惊厥初发、再发和致死组反见升高;在纹状体,致死组有明显下降(P<0.05)。结论惊厥的发生、发展与特定脑区突触体内特定的单胺类递质含量有关,并非所有脑区突触体内出现普遍性单胺类递质的下降;不同部位的神经递质与惊厥的敏感性和发作严重程度有关。 展开更多
关键词 惊厥 大脑皮质 海马 纹状体 单胺类神经递质 突触小体 动物 实验 大鼠
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从溶酶体发现到自噬基因揭秘
15
作者 訾玉玲 《教学考试》 2017年第24期50-52,共3页
2016年10月3日,日本东京工业大学的科学家大隅良典被授予诺贝尔生理学或医学奖。在对酵母细胞的研究中大隅良典不仅看到了正在运行的自噬行为,还找出了导致无法运行自噬过程的突变细胞,并基于他发现的参与调控细胞自噬过程的多个关键基... 2016年10月3日,日本东京工业大学的科学家大隅良典被授予诺贝尔生理学或医学奖。在对酵母细胞的研究中大隅良典不仅看到了正在运行的自噬行为,还找出了导致无法运行自噬过程的突变细胞,并基于他发现的参与调控细胞自噬过程的多个关键基因阐明了细胞自噬过程的分子机制。关于细胞自噬机制的研究已经进行了50年,大隅良典在20世纪90年代完成的开拓性研究使人们广泛意识到该过程在生理学和医学中的重要性。 展开更多
关键词 细胞自噬 自噬体 细胞凋亡 生物膜系统 自噬基因 高中教材 突触小体 细胞质 复合物 诺贝尔奖 人教版 细胞溶胶 神经元
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稳态磁场对小鼠脑突触个体膜的影响 被引量:5
16
作者 江长层 王振刚 +2 位作者 丁红卫 沈子威 丁晓岚 《北京医科大学学报》 CSCD 1994年第2期142-143,共2页
从离休小鼠脑突触小体膜试验和动物实验两方面,初步探讨了稳态磁场对BALB/C小鼠脑突触小体膜的影响。离休脑突触小体膜试验结果表明,0.380T以下稳态磁场对膜蛋白ATPase活性、园二色性和膜脂热致相变行为没有明显影... 从离休小鼠脑突触小体膜试验和动物实验两方面,初步探讨了稳态磁场对BALB/C小鼠脑突触小体膜的影响。离休脑突触小体膜试验结果表明,0.380T以下稳态磁场对膜蛋白ATPase活性、园二色性和膜脂热致相变行为没有明显影响。而阳性对照组ATPase活性下降,园二色谱形状明显改变,膜蛋白α-螺旋量显著降低。动物实验也未发现1.4T以下稳态磁场对小鼠脑突触小体膜膜蛋白ATPase活性和园二色性具有明显影响。但观察到1.4T以下稳态磁场组小鼠脑突触小体膜膜脂热致相变行为有改变。 展开更多
关键词 稳态磁场 突触小体
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突触小体相关蛋白-25在神经退行性疾病中的研究进展
17
作者 许靖 张晓军 陈加俊 《中华神经医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期284-290,共7页
突触功能障碍是神经退行性疾病中神经退行性变的重要病理机制之一,检测突触蛋白生物标志物在判定疾病进展及监测疾病修饰药物的临床疗效中具有重要价值。突触小体相关蛋白-25是突触前质膜蛋白,能准确反映神经退行性疾病中发生的突触损伤... 突触功能障碍是神经退行性疾病中神经退行性变的重要病理机制之一,检测突触蛋白生物标志物在判定疾病进展及监测疾病修饰药物的临床疗效中具有重要价值。突触小体相关蛋白-25是突触前质膜蛋白,能准确反映神经退行性疾病中发生的突触损伤,是目前十分有前景的评估突触功能的生物标志物。本文现围绕突触小体相关蛋白-25的基本特征、功能及其在阿尔茨海默病、帕金森病、路易体相关痴呆等神经退行性疾病中的研究进展进行综述,以期为在临床前阶段早期识别高危患者的病理改变、监测患者病情进展以及开发新的治疗靶点提供参考依据。 展开更多
关键词 突触小体相关蛋白-25 阿尔茨海默病 帕金森病 路易体相关痴呆
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不同类型细胞对A型肉毒毒素效价检测的可行性分析
18
作者 杨克娜 李小娟 +3 位作者 张华捷 马霄 朱衍志 杨英超 《微生物学免疫学进展》 CAS 2024年第2期28-34,共7页
目的 分析4种连续细胞和1种人神经元细胞对A型肉毒毒素(botulinum neurotoxin type A,BoNT/A)效价检测的适用性,为高敏感性BoNT/A细胞检测方法的建立提供依据。方法 采用实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(quantitative reverse transcr... 目的 分析4种连续细胞和1种人神经元细胞对A型肉毒毒素(botulinum neurotoxin type A,BoNT/A)效价检测的适用性,为高敏感性BoNT/A细胞检测方法的建立提供依据。方法 采用实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(quantitative reverse transcriptase chain reaction, qRT-PCR)对4种连续细胞中BoNTs毒性相关蛋白受体和N-乙基马来酰亚胺敏感因子附着蛋白受体(soluble N-ethylmaleimide-sensitive factor attachment protein receptor, SNARE)进行定量检测,并用Western blot评估4种连续细胞和1种人神经元细胞对BoNT/A的敏感性。结果 qRT-PCR结果显示,4种连续细胞中除突触囊泡蛋白2B(synaptic vesicle protein 2B,SV2B)不表达或表达量较低外,其他BoNTs相关蛋白受体和SNARE蛋白均有较高的表达。Western blot结果显示,4种连续细胞对BoNT/A的敏感性依次为人神经母细胞瘤细胞(SK-N-SH)、大鼠嗜铬细胞瘤细胞(PC12)、人神经母细胞瘤细胞(SH-5Y5Y)、人神经母细胞瘤细胞[BE(2)-M17]。在SK-N-SH中,孵育0.1 mg/mL的三唾液神经节苷脂GT1b(Trisialoganglioside GT1b, GT1b),5 000 U/mL BoNT/A可切割45%突触小体相关蛋白25(synaptosome-associated protein of 25 000,SNAP25)。Western blot检测发现,1种人神经元细胞对BoNT/A较敏感,在约100 U/mL时达到50%的SNAP25裂解。结论 人神经元细胞敏感性优于其他4种连续细胞,在建立BoNT/A细胞学检测方法中具有一定的潜力。 展开更多
关键词 肉毒毒素 连续细胞 人神经元细胞 突触小体相关蛋白25
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A型肉毒毒素内肽酶免疫检测方法的建立 被引量:5
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作者 安佳佳 付楚溪 +2 位作者 汪建华 熊向华 张惟材 《军事医学》 CAS 北大核心 2019年第9期659-663,共5页
目的建立一种A型肉毒毒素内肽酶生物活性定量检测方法。方法首先构建参考底物蛋白SNAP251-197质粒并表达纯化,合成检测目标8肽序列且于兔体内制备并纯化其抗体;96孔板包被底物蛋白,利用ELISA方法建立A型肉毒毒素生物活性定量检测体系,... 目的建立一种A型肉毒毒素内肽酶生物活性定量检测方法。方法首先构建参考底物蛋白SNAP251-197质粒并表达纯化,合成检测目标8肽序列且于兔体内制备并纯化其抗体;96孔板包被底物蛋白,利用ELISA方法建立A型肉毒毒素生物活性定量检测体系,并对检测方法的检测限、重复性及精密度等因素进行评价。结果成功表达纯化了SNAP251-197底物蛋白,制备并纯化了8肽兔多抗,建立了BoNT/A ELISA检测体系。结论成功建立了一种简便、灵敏、快速、稳定、可靠的A型肉毒毒素内肽酶生物活性定量检测方法。 展开更多
关键词 突触小体相关蛋白25 肉毒杆菌毒素类 A型 内肽酶类 酶联免疫吸附测定 免疫检测方法
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强啡肽A和CCK-8对大鼠脊髓突触小体摄取^(45)Ca的影响 被引量:3
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作者 王晓京 王峻峰 韩济生 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 1990年第3期226-232,共7页
为了探讨血管紧张素Ⅱ(AⅡ)和八肽胆囊收缩素(CCK-8)这两种肽的抗阿片作用机理,本实验中观察了三种阿片类物质(吗啡、强啡肽和 DPDPE)和两种抗阿片物质(AⅡ和 CCK-8)对大鼠脊髓突触小体摄取^(45) Ca 的影响。结果表明:(1)在脊髓腹柱突... 为了探讨血管紧张素Ⅱ(AⅡ)和八肽胆囊收缩素(CCK-8)这两种肽的抗阿片作用机理,本实验中观察了三种阿片类物质(吗啡、强啡肽和 DPDPE)和两种抗阿片物质(AⅡ和 CCK-8)对大鼠脊髓突触小体摄取^(45) Ca 的影响。结果表明:(1)在脊髓腹柱突触小体上,10nmol/L—1μmol/L 的吗啡、强啡肽 A(Dyn A)和 DPDPE 对^(45)Ca 摄取均有较弱的抑制作用;(2)CCK-8在浓度高达lμmol/L 时对^(45)Ca 摄取有较弱的抑制作用;(3)AⅡ在浓度高达lμmol/L时也不影响腹柱突触小体摄取^(45)Ca;(4)在背柱的突触小体制备中,上述阿片物质中 Dyn A 对^(45)Ca 摄取有较强的抑制作用,并被 k 受体阻断剂 nor-BNI 所阻断。10和100nmol/L 的 CCK-8能翻转lμmol/L Dyn A 对^(45)Ca 摄取的抑制作用;(5)A Ⅱ不能翻转Dyn A 的抑制作用。以上结果提示,CCK-8阻断 Dyn A 抑制脊髓背柱突触小体摄取 Ca^(2+)的作用可能是其行为学中抗阿片作用的机理之一。AⅡ对脊髓 Ca^(2+)摄取和 Dyn A 抑制脊髓 Ca^(2+)摄取的作用皆无影响,与行为学中观察到的 AⅡ在脊髓内不能对抗阿片镇痛的现象一致,进一步说明 CCK-8和AⅡ拮抗阿片类物质对神经末梢 Ca^(2+)摄取的影响可能是其抗阿片作用的重要机理之一。 展开更多
关键词 脊髓突触小体 钙45 摄取 强啡肽A CCK-8
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