磷脂酰乙醇胺结合蛋白的基础和临床研究 被引量：8

1

作者 李芳芳 宋士军 张若楠 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期214-218,共5页

磷脂酰乙醇胺结合蛋白(phosphatidylethanolamine-binding protein,PEBP)是一类高度保守的多功能蛋白质,广泛存在于不同物种中。在同一物种的多种组织和不同类型细胞中均有表达。PEBP在多条信号转导通路中具有重要的调控作用。PEBP通过... 磷脂酰乙醇胺结合蛋白(phosphatidylethanolamine-binding protein,PEBP)是一类高度保守的多功能蛋白质,广泛存在于不同物种中。在同一物种的多种组织和不同类型细胞中均有表达。PEBP在多条信号转导通路中具有重要的调控作用。PEBP通过与Raf-1相互作用抑制MAPK信号通路的活性,因此也被称为Raf-1激酶抑制蛋白(RKIP);同时,PEBP还参与了PKC、G蛋白偶联受体和NF-κB信号通路的调控。在临床医学研究中发现,PEBP作为海马胆碱神经刺激肽(HCNP)的前体蛋白在阿尔采末病(AD)的形成过程中发挥重要作用。由于PEBP可以抑制肿瘤转移和促进肿瘤细胞凋亡,因此也被认为是一种肿瘤转移的抑制基因。新近研究表明,PEBP参与细胞周期的纺锤体检查点的调控,PEBP的缺失可导致染色体异常。在直肠结肠癌,PEBP基因启动子区的高甲基化可导致其不表达,这可能是癌症转移的分子基础。 展开更多

关键词 磷脂酰乙醇胺结合蛋白 信号转导 阿尔采末病 肿瘤转移抑制基因

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雪莲PBP基因表达载体的构建 被引量：7

2

作者 李萍 艾秀莲 +1 位作者 王志方 王博 《生物技术》 CAS CSCD 2006年第2期11-13,共3页

目的:利用新疆雪莲特殊功能基因磷脂酰乙醇胺结合蛋白基因(XLPBP)与基础质粒构建植物表达载体pXLPBP,为介导该基因在植物中表达,以期提高植物抗寒力的转基因研究打下基础。方法:利用设计好的两端加有EcoRⅠ酶切位点的引物,对XLPBP全长... 目的:利用新疆雪莲特殊功能基因磷脂酰乙醇胺结合蛋白基因(XLPBP)与基础质粒构建植物表达载体pXLPBP,为介导该基因在植物中表达,以期提高植物抗寒力的转基因研究打下基础。方法:利用设计好的两端加有EcoRⅠ酶切位点的引物,对XLPBP全长基因片段进行PCR扩增,获得700bp左右大小的片段,将其纯化回收并与同样经过EcoRⅠ酶切的质粒pCAMBIA3301连接;然后采用冻融法和电击法,将含XLPBP基因的载体pCAMBIA3301转入根癌农杆菌中。结果:通过一系列分子克隆方法获得含雪莲XLPBP基因的植物表达载体,并经PCR实验证实。结论:利用以自身携带的非编码区为调控序列的XLPBP全长基因和双向表达载体pCAMBIA3301为基础构建植物表达载体,可望提高外源基因表达量。 展开更多

关键词 雪莲 磷脂酰乙醇胺结合蛋白 根癌农杆菌

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亚洲棉和雷蒙德氏棉PEBP家族基因的鉴定及该家族基因在陆地棉组织中表达分析 被引量：6

3

作者 李超 张彦楠 +1 位作者 刘焕龙 黄先忠 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期394-404,共11页

磷脂酰乙醇胺结合蛋白(phosphatidyl ethanolamine-binding proteins,PEBP)基因家族广泛存在于真核生物中,在被子植物中主要起着促进或抑制开花和控制株型的作用。利用亚洲棉(Gossypium arboreum,A2)和雷蒙德氏棉(Gossypium raimondii,... 磷脂酰乙醇胺结合蛋白(phosphatidyl ethanolamine-binding proteins,PEBP)基因家族广泛存在于真核生物中,在被子植物中主要起着促进或抑制开花和控制株型的作用。利用亚洲棉(Gossypium arboreum,A2)和雷蒙德氏棉(Gossypium raimondii,D5)的基因组数据库,分别搜索到8个棉花PEBP同源基因,都包含4个外显子和3个内含子,编码的蛋白都存在PEBP家族的保守基序和关键氨基酸位点,表明二倍体棉花中至少存在8个PEBP家族基因。进化分析表明,8个PEBP基因分属于3个亚家族,含FLOWERING LOCUS T(FT)-like亚家族1个、TERMINAL FLOWER 1(TFL1)-like亚家族5个(包括3个TFL1和2个BFT)、MOTHER OF FT AND TFL1(MFT)-like亚家族2个。实时荧光定量PCR分析陆地棉(Gossypium hirsutum)8个PEBP基因在根、茎、叶、幼苗顶端分生组织、花、胚珠和25 d的纤维组织中的表达,表明FT1在叶片中表达量最高,其次在纤维、胚珠和花中;MFT1在各组织中均表达,但在纤维中表达量最高,其次是花和叶片中,而MFT2以在叶片中表达为主;TFL1a、TFL1b和TFL1c均在根中表达量最高,但TFL1c在叶片、花和胚珠中也有相对较高的表达;BFT1和BFT2在叶片中表达量最高,但除幼苗顶端分生组织外,BFT1在其他各组织中的表达明显高于BFT2。这些结果表明,PEBP家族基因在棉花的生长发育中可能具有不同的功能。 展开更多

关键词 磷脂酰乙醇胺结合蛋白 亚洲棉 雷蒙德氏棉 成花素 基因表达

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PEBP在切割穹窿海马伞大鼠海马中的表达变化 被引量：5

4

作者 李浩明 张蕾 +3 位作者 金国华 秦建兵 朱蕙霞 田关玲 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期619-624,共6页

切割大鼠右侧穹窿海马伞,应用Western blot、免疫组化技术,观察切割后海马中磷脂酰乙醇胺结合蛋白(phosphatidyle-thanolamine binding protein,PEBP)的表达的时空变化。Western blot结果显示:PEBP在切割后3 d表达开始上升,7 d达最高水... 切割大鼠右侧穹窿海马伞,应用Western blot、免疫组化技术,观察切割后海马中磷脂酰乙醇胺结合蛋白(phosphatidyle-thanolamine binding protein,PEBP)的表达的时空变化。Western blot结果显示:PEBP在切割后3 d表达开始上升,7 d达最高水平,随后缓慢下降,28 d时降至正常。免疫组化结果显示:术后各时间点切割侧海马CA1～CA3区的锥体细胞层和齿状回颗粒层的PEBP阳性细胞数与正常侧相比无显著性差异(P>0.05),但切割侧PEBP阳性细胞染色加深,7 d时最为明显,两侧比较灰度值有显著性差异(P<0.01)。切割侧齿状回门区和颗粒下层中可见较多深染的PEBP阳性细胞,其细胞数和灰度值与正常侧相比均有显著性差异(P<0.05)。结合本课题组以往的工作,本结果提示切割穹窿海马伞后PEBP的高表达可能与海马神经再生有关。 展开更多

关键词 磷脂酰乙醇胺结合蛋白 切割穹窿海马伞 海马 大鼠

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吗啡诱导的大鼠条件性位置偏爱模型中关键脑区PEBP及ERK活性的变化 被引量：4

5

作者 边佳明 吴宁 李锦 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期542-546,共5页

目的研究大鼠阿片精神依赖状态下,相关脑区磷脂酰乙醇胺结合蛋白(PEBP)及ERK活性的变化。方法建立条件性位置偏爱(CPP)模型模拟吗啡精神依赖的不同阶段,观察依赖相关重要脑区在大鼠CPP形成、熄灭及重建时PEBP表达和ERK活性的变化。结果... 目的研究大鼠阿片精神依赖状态下,相关脑区磷脂酰乙醇胺结合蛋白(PEBP)及ERK活性的变化。方法建立条件性位置偏爱(CPP)模型模拟吗啡精神依赖的不同阶段,观察依赖相关重要脑区在大鼠CPP形成、熄灭及重建时PEBP表达和ERK活性的变化。结果海马、前额叶皮层、纹状体、伏隔核等4个脑区,CPP各阶段均未见PEBP表达水平有明显变化;但在CPP形成时,前额叶皮层的ERK活性明显升高,而CPP重建后,海马的ERK活性明显降低。结论吗啡成瘾不同阶段,药效-环境关联性记忆的形成和唤起涉及不同神经通路,ERK活性在其中十分关键,但PEBP可能并未参与ERK活性调节。 展开更多

关键词 磷脂酰乙醇胺结合蛋白 ERK 吗啡 成瘾 条件性位置偏爱 阿片依赖

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大鼠附睾管腔液M_r22000蛋白的鉴定研究 被引量：2

6

作者 齐晓伟 常勇杰 于和鸣 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期20-25,共6页

目的:鉴定大鼠附睾管腔液中可能参与精子成熟/精子表面修饰的附睾特异蛋白。方法:通过SDS-PAGE或双向(2D)电泳比较正常大鼠附睾头段和尾段以及实验性精索静脉曲张(ELV)大鼠附睾尾段管腔液中差异蛋白成分。选择主要差异斑点进行质谱分析... 目的:鉴定大鼠附睾管腔液中可能参与精子成熟/精子表面修饰的附睾特异蛋白。方法:通过SDS-PAGE或双向(2D)电泳比较正常大鼠附睾头段和尾段以及实验性精索静脉曲张(ELV)大鼠附睾尾段管腔液中差异蛋白成分。选择主要差异斑点进行质谱分析,并采用免疫印迹对目标蛋白作进一步鉴定确认。结果:发现多个蛋白成分明显增高。对其中之一的相对分子质量(Mr)22000蛋白集中研究。经质谱分析及免疫印迹确认Mr22000蛋白为磷脂酰乙醇胺结合蛋白(PBP)。结论:附睾管腔液中的PBP存在多种分子形式包括糖基化修饰。ELV导致大鼠附睾尾管腔液中PBP升高。因此,该分子与精子表面修饰的关系仍需进一步研究。 展开更多

关键词 附睾蛋白 实验性精索静脉曲张 双向电泳 磷脂酰乙醇胺结合蛋白 大鼠

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棉铃虫磷脂酰乙醇胺结合蛋白的克隆及表达分析 被引量：3

7

作者 赵洁 任苏伟 +3 位作者 刘宁 艾新宇 马纪 刘小宁 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第8期1493-1503,共11页

【目的】克隆获得棉铃虫(Helicoverpa armigera)磷脂酰乙醇胺结合蛋白(phosphatidylethanolamine binding protein,PEBP)的c DNA序列,分析Ha PEBP在棉铃虫体内的表达规律,检测2-十三烷酮处理条件下棉铃虫体内Ha PEBP的变化情况,为进一... 【目的】克隆获得棉铃虫(Helicoverpa armigera)磷脂酰乙醇胺结合蛋白(phosphatidylethanolamine binding protein,PEBP)的c DNA序列,分析Ha PEBP在棉铃虫体内的表达规律,检测2-十三烷酮处理条件下棉铃虫体内Ha PEBP的变化情况,为进一步明确棉铃虫PEBP的功能和选择该基因作为调控棉铃虫种群数量的分子靶标提供依据。【方法】利用RACE技术从棉铃虫6龄幼虫的中肠组织中扩增得到Ha PEBP的c DNA序列,并对其氨基酸序列和蛋白结构进行分析。将Ha PEBP的ORF序列连接至p ET32a载体并转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导后检测目的蛋白的表达形式,并通过镍柱的亲和层析纯化融合蛋白。最后通过实时荧光定量PCR检测棉铃虫幼虫不同时期和6龄幼虫不同组织中Ha PEBP的表达规律,以及2-十三烷酮处理棉铃虫6龄幼虫后中肠内Ha PEBP的变化规律。【结果】获得的Ha PEBP c DNA序列长760 bp,其中ORF为588 bp,编码195个氨基酸,蛋白质分子量和等电点分别为21.76 k D和5.93。氨基酸序列分析表明Ha PEBP无信号肽、跨膜结构域和二硫键,是一个由4个α螺旋和9个β折叠片组成的胞质单体蛋白。将BL21(DE3)-p ET32a-Ha PEBP重组菌用1 mmol·L-1的IPTG在37℃条件下诱导4 h,约40 k D的融合蛋白His-Ha PEBP能以可溶的形式存在于重组菌中。按照同样的方法诱导1 L的重组菌,将超声处理后的上清液与Ni-NTA柱结合,进行咪唑缓冲液梯度洗涤,200 mmol·L-1的咪唑洗涤两次后得到约40 k D的单一蛋白,与融合蛋白的大小一致。将此流出液超滤浓缩,获得183.3 ng·μL-1的融合蛋白,能被抗His-Tag的单克隆抗体识别发生免疫反应。Ha PEBP在棉铃虫幼虫的1—6龄期和预蛹期均表达,且6龄幼虫的表达量最高。该基因在6龄幼虫的脂肪体、中肠、头部和体壁中也均有表达,且脂肪体内的表达量最高。不同浓度的2-十三烷酮处理后,棉铃虫6龄幼虫中肠内Ha PEBP的表达量均有所降低;低 展开更多

关键词 棉铃虫 磷脂酰乙醇胺结合蛋白 原核表达 时空表达 2-十三烷酮

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磷脂酰乙醇胺结合蛋白的研究进展 被引量：2

8

作者 魏秋华 吴宁 李锦 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期1121-1124,共4页

磷脂酰乙醇胺结合蛋白是一类结构高度保守、生物功能多样的碱性胞质蛋白,可与膜磷脂、阿片、核苷酸等多种物质结合。该家族蛋白可作为信号转导过程中的调节器以及海马胆碱能神经刺激肽(HCNP)前体蛋白,在神经元保护、生物膜的构建与重塑... 磷脂酰乙醇胺结合蛋白是一类结构高度保守、生物功能多样的碱性胞质蛋白,可与膜磷脂、阿片、核苷酸等多种物质结合。该家族蛋白可作为信号转导过程中的调节器以及海马胆碱能神经刺激肽(HCNP)前体蛋白,在神经元保护、生物膜的构建与重塑、阿尔采末症、糖尿病肾病、癌症等生理、病理过程中发挥重要作用。 展开更多

关键词 磷脂酰乙醇胺结合蛋白 结构 生理功能 病理作用

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RKIP基因与卵巢上皮性癌转移的关系 被引量：2

9

作者 王越 杨洁 +3 位作者 高燕 赵秀兰 李宏钊 姚智 《中华妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期522-528,共7页

目的探讨一种新的转移抑制基因——RKIP基因与卵巢癌转移的关系。方法应用免疫组化、RT-PCR及蛋白印迹法对卵巢肿瘤的组织标本（卵巢癌组织22份，卵巢交界性肿瘤组织8份，卵巢良性肿瘤组织10份）及卵巢癌细胞系小RKIP基因的表达情况进... 目的探讨一种新的转移抑制基因——RKIP基因与卵巢癌转移的关系。方法应用免疫组化、RT-PCR及蛋白印迹法对卵巢肿瘤的组织标本（卵巢癌组织22份，卵巢交界性肿瘤组织8份，卵巢良性肿瘤组织10份）及卵巢癌细胞系小RKIP基因的表达情况进行检测。将含正义和反义RKIPcDNA的表达载体导入卵巢癌细胞系SKOV3，蛋白印迹法检测转染前后细胞中丝裂原激活的蛋白激酶／细胞外信号调节激酶的激酶（MEK）、细胞外信号调节激酶（ERK）活性的变化。应用四甲基偶氮唑蓝法、双层软琼脂集落形成实验、体外黏附实验、体外侵袭实验、流式细胞仪等观察RKIP基因对卵巢癌细胞生物学行为的影响。结果（1）22份卵巢癌组织中RKIP的表达以阴性（6份，27％）、弱阳性（9份，41％）为主，而10份卵巢良性肿瘤和8份交界性肿瘤组织以强阳性（分别为4份、2份）、阳性（分别为4份、5份）为主。（2）RKIP基因转染后，含正义cDNA的ssRKIP细胞的磷酸化MEK和磷酸化ERK蛋白表达水平下调，ssRKIP#1和ssRKIP#4细胞磷酸化MEK蛋白的相对表达含量分别为0．35和0．34，两者磷酸化ERK蛋白的相对表达含量分别为0．48和0．46。（3）ssRKIP细胞的增殖能力明显低于未转染细胞（P〈0．01）。（4）锚定非依赖性生长能力：ssRKIP#1、ssRKIP#4细胞的集落形成数（83．7±5．7、106．0±9．2）较其对照空载体pcDNA3．1（＋）转染细胞（158．3±14．6）明显减少，分别比较，差异均有统计学意义（P〈0．01）。（5）体外黏附能力：ssRKIP#1、ssRKIP#4细胞的黏附率[分别为（68．3±0．8）％、（64．1±0．9）％]明显低于未转染细胞[（100．0±1．1）％]，分别比较，差异均有统计学意义（P〈0．01）。（6）体外侵袭能力：ssRKIP#1、ssRK]P#4细胞的穿膜细胞数[分别为（24±5）、（25±4）个]明屁低于未转染细胞[（68±5）个]，分别比 展开更多

关键词 卵巢肿瘤 肿瘤转移 细胞系 肿瘤 磷脂酰乙醇胺结合蛋白

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磷脂酰乙醇胺结合蛋白的信号调节机制及其生物学功能研究进展 被引量：1

10

作者 边佳明 吴宁 李锦 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期237-243,共7页

磷脂酰乙醇胺结合蛋白(phosphatidylethanolamine-binding protein,PEBP)是一个结构上高度保守的胞浆可溶性蛋白。近年的研究显示,在细胞信号转导中,PEBP具有多种生物学功能,包括调节ERK通路、NF-κB通路、G蛋白偶联受体通路等多种重要... 磷脂酰乙醇胺结合蛋白(phosphatidylethanolamine-binding protein,PEBP)是一个结构上高度保守的胞浆可溶性蛋白。近年的研究显示,在细胞信号转导中,PEBP具有多种生物学功能,包括调节ERK通路、NF-κB通路、G蛋白偶联受体通路等多种重要的信号转导。此外,PEBP在肿瘤领域的临床研究价值也得到了越来越多的支持和认可,其表达水平和多种肿瘤的转移相关。作为一个多功能的信号调节分子,PEBP正在成为多个领域的研究热点。本文就近年来有关PEBP信号调节机制和生物学功能的研究进展做一回顾。 展开更多

关键词 磷脂酰乙醇胺结合蛋白 RAF激酶抑制蛋白 ERK NF-ΚB 海马

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小麦CEN/TFL1-like cDNA克隆及其编码序列分析

11

作者 齐亚飞 瞿小青 +2 位作者 闫晓华 张美祥 范三红 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期892-897,共6页

以水稻、金鱼草、拟南芥CEN/TFL1蛋白质序列为参考,以小麦中CEN/TFL1基因同源EST片段为依据设计特异引物,利用RT-PCR从普通小麦‘中国春’幼穗总RNA中扩增出549 bp的特异片段。测序结果表明,该片段包含了完整的ORF,编码产物为典型的CEN/... 以水稻、金鱼草、拟南芥CEN/TFL1蛋白质序列为参考,以小麦中CEN/TFL1基因同源EST片段为依据设计特异引物,利用RT-PCR从普通小麦‘中国春’幼穗总RNA中扩增出549 bp的特异片段。测序结果表明,该片段包含了完整的ORF,编码产物为典型的CEN/TFL1-like蛋白家族成员。序列比对表明,该基因编码产物与黑麦草LpTFL1、水稻FDR2和FDR1以及玉米ZmTFL1亲缘关系最近,分别具有96.5%、96.0%、93.6%和95.4%的相似性;与哺乳动物Rattus norveqicus磷脂酰乙醇胺结合蛋白(PEBP)具有38.9%相似性。空间结构预测表明,该蛋白具有PEBP家族成员的典型三维结构。 展开更多

关键词 小麦 RT-PCR CEN/TFL1 磷脂酰乙醇胺结合蛋白 表达序列标签

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实时聚合酶链反应检测切割穹窿海马伞大鼠海马内磷脂酰乙醇胺结合蛋白mRNA的表达变化 被引量：1

12

作者 秦建兵 张蕾 +3 位作者 李浩明 朱蕙霞 田美玲 金国华 《苏州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2009年第5期867-870,共4页

目的探讨切割穹窿海马伞大鼠海马与正常海马内磷脂酰乙醇胺结合蛋白(PEBP)mRNA的表达差异。方法42只SD大鼠随机分成正常对照组和切割穹隆海马伞后1、3、7、14、21及28d组,每组6只。提取各组大鼠的海马组织总RNA,应用实时PCR技术观察切... 目的探讨切割穹窿海马伞大鼠海马与正常海马内磷脂酰乙醇胺结合蛋白(PEBP)mRNA的表达差异。方法42只SD大鼠随机分成正常对照组和切割穹隆海马伞后1、3、7、14、21及28d组,每组6只。提取各组大鼠的海马组织总RNA,应用实时PCR技术观察切割穹窿海马伞后海马中PEBPmRNA的表达变化。结果PEBPmRNA在切割后3d表达开始上升,7d达最高水平,随后缓慢下降,21d时降至正常。结论切割穹窿海马伞后海马中PEBP的高表达可能与诱导神经干细胞向胆碱能神经元分化的海马神经再生有关。 展开更多

关键词 磷脂酰乙醇胺结合蛋白 切割穹隆海马伞 海马 实时聚合酶链反应 大鼠

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雪莲类PEBP基因在大肠杆菌中的表达及鉴定 被引量：1

13

作者 王志方 张学军 +2 位作者 王博 周小云 艾秀莲 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期1649-1652,共4页

本实验旨在构建雪莲类PEBP基因原核表达载体,在大肠杆菌中表达并纯化类PEBP基因所编码的蛋白,为进一步研究奠定基础。将雪莲类PEBP基因开放阅读框序列克隆到原核表达载体pET30(+)上,转化感受态表达菌株BL21(DE3),低浓度IPTG低温诱导融... 本实验旨在构建雪莲类PEBP基因原核表达载体,在大肠杆菌中表达并纯化类PEBP基因所编码的蛋白,为进一步研究奠定基础。将雪莲类PEBP基因开放阅读框序列克隆到原核表达载体pET30(+)上,转化感受态表达菌株BL21(DE3),低浓度IPTG低温诱导融合蛋白的表达,纯化产物,Western blotting鉴定目的蛋白。IPTG低温诱导PEBP,经SDS-PAGE分析,其相对分子量约为28kD,与预期相符,表达量约占菌体蛋白的26.8%,并且通过亲和层析纯化了重组融合蛋白,Western blotting鉴定为阳性。成功构建了原核表达载体pET-PEBP,获得了高效表达产物,并为进一步研究雪莲类PEBP基因的抗冻功能打下基础。 展开更多

关键词 磷脂酰乙醇胺结合蛋白 原核表达 低温诱导 雪莲

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雪莲PEBP基因原核表达载体的构建及表达 被引量：1

14

作者 张学军 艾秀莲 +2 位作者 吕秀娟 罗明 王博 《新疆农业科学》 CAS CSCD 2007年第3期329-332,共4页

根据雪莲PEBP基因序列设计特异性引物,利用实验室构建的Teasy-PEBP质粒为模板,扩增PEBP基因,与表达载体pET-30a(+)连接转化BL21(DE3),PCR和酶切鉴定筛选阳性克隆,测序分析。经IPTG诱导后SDS-PAGE检测,结果表明:PEBP得到大量表达,表达量... 根据雪莲PEBP基因序列设计特异性引物,利用实验室构建的Teasy-PEBP质粒为模板,扩增PEBP基因,与表达载体pET-30a(+)连接转化BL21(DE3),PCR和酶切鉴定筛选阳性克隆,测序分析。经IPTG诱导后SDS-PAGE检测,结果表明:PEBP得到大量表达,表达量占菌体总蛋白的26.8%,融合蛋白的相对分子量大约是28KD,与理论值相符,为进一步研究该蛋白的理化性质奠定了基础。 展开更多

关键词 磷脂酰乙醇胺结合蛋白 原核表达 低温诱导 雪莲

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Raf激酶抑制蛋白在食管鳞状细胞癌中的研究进展

15

作者 牛中喜 苏立伟 陈龙奇 《武警医学》 CAS 2016年第4期411-415,共5页

Raf激酶抑制蛋白（Raf kinase inhibitory protein,RKIP）是磷脂酰乙醇胺结合蛋白（phosphatidylethanolamine-binding protein,PEBP）的家族成员之一,具有膜的生物合成、精子形成、神经发育等功能,并能抑制促丝裂原活化蛋白激酶（mitog... Raf激酶抑制蛋白（Raf kinase inhibitory protein,RKIP）是磷脂酰乙醇胺结合蛋白（phosphatidylethanolamine-binding protein,PEBP）的家族成员之一,具有膜的生物合成、精子形成、神经发育等功能,并能抑制促丝裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase, 展开更多

关键词 RAF激酶抑制蛋白 磷脂酰乙醇胺结合蛋白 食管鳞状细胞癌

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抗磷脂酰乙醇胺结合蛋白反义核酸的设计与筛选

16

作者 魏秋华 吴宁 +1 位作者 苏瑞斌 李锦 《军事医学科学院院刊》 CSCD 北大核心 2008年第5期406-409,共4页

目的:设计与筛选能有效下调磷脂酰乙醇胺结合蛋白(phosphatidylethanolamine binding protein,PEBP)表达量的反义寡核苷酸(antisense oligodeoxynuclecotide,ASODN)。方法:应用Sfold、Mfold、RNAstructure等软件设计针对PEBP编码序列(C... 目的:设计与筛选能有效下调磷脂酰乙醇胺结合蛋白(phosphatidylethanolamine binding protein,PEBP)表达量的反义寡核苷酸(antisense oligodeoxynuclecotide,ASODN)。方法:应用Sfold、Mfold、RNAstructure等软件设计针对PEBP编码序列(CDS)的ASODN,并进行结构与能级评价;以PC12细胞为实验对象,应用RT-PCR和Western印迹方法筛选可有效下调PEBP基因与蛋白表达量的ASODN。结果与结论:实验结果表明,使用200 nmol/L ASODN转染PC12细胞24 h可有效下调PEBP基因和蛋白表达;ASODN对PEBP蛋白表达量的下调作用可持续至48 h,蛋白表达可下调至细胞对照组的38.3%。 展开更多

关键词 磷脂酰乙醇胺结合蛋白 反义寡核苷 PC12细胞

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海马放射状胶质细胞体外诱导激活后的PEBP mRNA表达变化

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作者 秦建兵 李浩明 +3 位作者 赵荷艳 朱蕙霞 田美玲 金国华 《交通医学》 2009年第5期453-455,458,共4页

目的:探讨切割穹窿海马伞侧海马提取液对海马放射状胶质细胞中磷脂酰乙醇胺结合蛋白(PEBP)mRNA表达的影响。方法:将培养的海马胶质细胞接种于培养板中,分成诱导组和对照组,诱导组中加入含5%切割穹窿海马伞侧海马提取液的DMEM/F12培养液... 目的:探讨切割穹窿海马伞侧海马提取液对海马放射状胶质细胞中磷脂酰乙醇胺结合蛋白(PEBP)mRNA表达的影响。方法:将培养的海马胶质细胞接种于培养板中,分成诱导组和对照组,诱导组中加入含5%切割穹窿海马伞侧海马提取液的DMEM/F12培养液,对照组加入单纯的细胞培养液。培养7d后,提取总RNA,然后逆转录合成cDNA,用real-timePCR观察诱导组及切割组中PEBPmRNA的表达情况。结果:PEBPmRNA在放射状胶质细胞中能够表达,诱导组的表达比对照组明显增加(P<0.05)。结论:表达增加的PEBPmRNA可能与切割侧海马提取液"激活"的放射状胶质细胞向胆碱能神经元分化有关。 展开更多

关键词 磷脂酰乙醇胺结合蛋白 放射状胶质细胞 切割穹窿海马伞 荧光实时定量聚合酶链反应 大鼠

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海马放射状胶质细胞体外诱导激活后PEBP蛋白的表达变化

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作者 秦建兵 李浩明 +5 位作者 金国华 赵荷艳 杨伟伟 田美玲 朱蕙霞 邹琳清 《南通大学学报（医学版）》 2010年第6期420-422,F0002,共4页

目的:探讨切割穹窿海马伞的侧海马提取液对放射状胶质细胞中磷脂酰乙醇胺结合蛋白(PEBP)表达的影响。方法:将培养的海马放射状胶质细胞接种于培养板中,分成对照组和诱导组,对照组中加入含5%正常海马提取液的DMEM/F12细胞培养液,诱导组... 目的:探讨切割穹窿海马伞的侧海马提取液对放射状胶质细胞中磷脂酰乙醇胺结合蛋白(PEBP)表达的影响。方法:将培养的海马放射状胶质细胞接种于培养板中,分成对照组和诱导组,对照组中加入含5%正常海马提取液的DMEM/F12细胞培养液,诱导组中加入含5%切割穹窿海马伞侧海马提取液的DMEM/F12培养液。培养7 d后,通过免疫荧光标记法观察PEBP在放射状胶质细胞中的表达,并提取总蛋白,采用Western blot的方法观察对照组及诱导组中PEBP蛋白的表达变化。结果:PEBP蛋白在放射状胶质细胞中能够表达,诱导组的表达比对照组明显增加(P<0.05)。结论:PEBP的表达增加可能与切割侧海马提取液"激活"的放射状胶质细胞向神经元分化有关。 展开更多

关键词 磷脂酰乙醇胺结合蛋白 放射状胶质细胞 切割穹窿海马伞 免疫印迹 免疫荧光

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雪莲类PEBP基因在毕赤酵母中的表达及鉴定

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作者 张学军 王志方 +1 位作者 周小云 艾秀莲 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期154-157,共4页

为了构建雪莲类PEBP基因真核表达载体,在毕赤酵母中表达并鉴定。将雪莲类PEBP基因开放阅读框序列克隆到真核表达载体pPIC9k上,转化到毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115细胞内,利用筛选到的Muts(methanol utilization slow)重组酵母株进行... 为了构建雪莲类PEBP基因真核表达载体,在毕赤酵母中表达并鉴定。将雪莲类PEBP基因开放阅读框序列克隆到真核表达载体pPIC9k上,转化到毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115细胞内,利用筛选到的Muts(methanol utilization slow)重组酵母株进行表达,经SDS-PAGE分析,表达产物置于低温条件下进行抗冻试验。结果在培养基上清液中含有一明显的特异性蛋白条带,大小为20 kD,与预期相符,上清液抗冻检测表明PEBP具有一定的抗冻性,表明该基因在毕赤酵母GS115中得到了表达。该研究成功构建了真核表达载体pPIC9k-PEBP,获得了表达产物,并为进一步研究雪莲类PEBP基因的抗冻功能打下基础。 展开更多

关键词 磷脂酰乙醇胺结合蛋白 真核表达 低温诱导 雪莲

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磷脂酰乙醇胺结合蛋白过表达CHO细胞的建立及对细胞周期的影响

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作者 边佳明 吴宁 李锦 《临床和实验医学杂志》 2013年第9期648-650,653,共4页

目的建立过表达磷脂酰乙醇胺结合蛋白(PEBP)的CHO细胞,并研究PEBP过表达对CHO细胞周期的影响。方法将PEBP克隆于潮霉素B抗性的表达质粒,转染CHO细胞,潮霉素B压力下筛选细胞单克隆,流式细胞法检测细胞周期。结果建立了与内源性表达量相当... 目的建立过表达磷脂酰乙醇胺结合蛋白(PEBP)的CHO细胞,并研究PEBP过表达对CHO细胞周期的影响。方法将PEBP克隆于潮霉素B抗性的表达质粒,转染CHO细胞,潮霉素B压力下筛选细胞单克隆,流式细胞法检测细胞周期。结果建立了与内源性表达量相当的,可稳定过表达外源性PEBP的CHO细胞,与对照细胞克隆比较,过表达PEBP的CHO细胞周期无显著变化。结论 PEBP过表达没有导致CHO细胞周期的改变。 展开更多

关键词 磷脂酰乙醇胺结合蛋白 过表达 CHO细胞 细胞周期

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