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硫酸软骨素裂解酶ABC产生菌的筛选及发酵工艺研究 被引量：5
1
作者 陶科 王忠彦 +4 位作者 国锦琳 胡承 邓林 刘世贵 代其林 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期138-141,共4页
从成都井研生猪屠宰厂等地采集的样品中平板分离粗筛到 4 8株硫酸软骨素裂解酶 ABC产生菌 ,进一步复筛出一株高产、稳定的硫酸软骨素裂解酶 ABC产生菌株 GT38,初步鉴定为彭氏变形菌 (P.pen-neri)。通过单因素实验和正交分析研究了摇瓶... 从成都井研生猪屠宰厂等地采集的样品中平板分离粗筛到 4 8株硫酸软骨素裂解酶 ABC产生菌 ,进一步复筛出一株高产、稳定的硫酸软骨素裂解酶 ABC产生菌株 GT38,初步鉴定为彭氏变形菌 (P.pen-neri)。通过单因素实验和正交分析研究了摇瓶最适产酶条件和 2 L 实验室小罐发酵工艺 ,该菌的最适发酵工艺为培养基大豆蛋白胨 2 .5 % ,蔗糖 1.5 % ,Na Cl0 .4 % ,硅油 0 .0 5 % ,p H7.5 ,接种量 5 % ,通气量 1∶ 1～1∶ 1.2 (v/ v) ,搅拌转速为 6 0 0 r/ min,30℃发酵 10 h,酶活力单位高达 32 2 U/ L。 展开更多
关键词 硫酸软骨素裂解酶abc 彭氏变形菌 筛选 产酶条件 发酵罐
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硫酸软骨素裂解酶ABC产生菌的筛选及酶学性质的初步研究 被引量：3
2
作者 陶科 王忠彦 +4 位作者 胡承 田宇 国锦琳 邓林 刘世贵 《四川大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期1168-1171,共4页
从成都市井研县生猪屠宰厂等地采集的样品中筛选出一株高产、稳定的硫酸软骨素裂解酶ABC产生菌株GT38,初步鉴定为彭氏变形杆菌(P.penneri).其酶活力单位高达112U/L.酶学性质经初步研究表明:该酶的最适反应pH值为7.0,最适反应温度为30℃,... 从成都市井研县生猪屠宰厂等地采集的样品中筛选出一株高产、稳定的硫酸软骨素裂解酶ABC产生菌株GT38,初步鉴定为彭氏变形杆菌(P.penneri).其酶活力单位高达112U/L.酶学性质经初步研究表明:该酶的最适反应pH值为7.0,最适反应温度为30℃,在pH值6～8之间较稳定,温度在30℃～45℃较稳定,金属离子对酶活力影响不大. 展开更多
关键词 硫酸软骨素裂解酶abc 彭氏变形杆菌 筛选 酶学性质
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硫酸软骨素裂解酶ABCⅡ的高效融合表达及其酶学性质研究
3
作者 李晔 周朝 袁其朋 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2023年第5期88-97,共10页
目的:本研究旨在实现硫酸软骨素裂解酶ABCⅡ(chondroitinase ABCⅡ,ChSase ABCⅡ)的高效可溶性表达并研究其酶学性质,为ChSase ABCⅡ在药品和保健食品生产中的应用奠定基础。方法:在优化ChSase ABCⅡ基因原始序列的基础上,构建重组质粒p... 目的:本研究旨在实现硫酸软骨素裂解酶ABCⅡ(chondroitinase ABCⅡ,ChSase ABCⅡ)的高效可溶性表达并研究其酶学性质,为ChSase ABCⅡ在药品和保健食品生产中的应用奠定基础。方法:在优化ChSase ABCⅡ基因原始序列的基础上,构建重组质粒pET-28a-His-ChSase ABCⅡ并优化其表达条件;利用亲和层析得到带有多聚组氨酸标签(polyhistidine-tag,His-tag)的ChSase ABCⅡ融合蛋白后,研究了His-ChSase ABCⅡ的部分酶学性质。结果:构建的His-ChSase ABCⅡ融合蛋白表达系统能在大肠杆菌中实现可溶性表达;在表达宿主为E.coli BL21(DE3)和诱导剂(异丙基-β-D-硫代半乳糖苷)浓度为125μmol/L的优化条件下,发酵液酶活力可达到7206.83±184.27 IU/L;纯化后的His-ChSase ABCⅡ酶比活力为22.02±0.39 IU/mg蛋白,最适pH和温度分别为7.5和40℃,其在30~40℃条件下较为稳定,且半衰期在2 h以上。His-ChSase ABCⅡ能特异性有效分解硫酸软骨素,其K_(m)值为10.4±0.8μmol/L,Kcat值为9.4±0.2 s^(-1)。结论:本论文通过基因优化和融合表达等策略实现了His-ChSase ABCⅡ的高效表达和纯化。此外,His-ChSase ABCⅡ的酶学性质可基本满足其在医药和营养产品工业生产中的应用需求。 展开更多
关键词 硫酸软骨素裂解酶abcⅡ 低分子量硫酸软骨素(LMWCSs) 酶学性质 融合表达 多聚组氨酸标签
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