结肠癌细胞内吞活动中癌基因产物cortactin的作用 被引量：2

1

作者 钱飞 毛勤生 朱建伟 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期175-179,共5页

目的探讨癌基因EMS1表达产物皮层蛋白(cortactin)与结肠癌细胞内吞运动的关系。方法采用共聚焦显微镜检测人结肠癌细胞株HT29细胞内cortactin与内吞过程功能蛋白Rab5及Rab11的分布情况,以及cortactin和组成性内吞标记转铁蛋白(Tfn)的关... 目的探讨癌基因EMS1表达产物皮层蛋白(cortactin)与结肠癌细胞内吞运动的关系。方法采用共聚焦显微镜检测人结肠癌细胞株HT29细胞内cortactin与内吞过程功能蛋白Rab5及Rab11的分布情况,以及cortactin和组成性内吞标记转铁蛋白(Tfn)的关系。采用病毒转染的方法,将外源性全长cortactin及其突变体转入结肠癌细胞内,观察过表达皮层蛋白及其变异体对细胞内吞活动的影响。进一步采用Western blot和免疫荧光分析方法检测cortactin磷酸化与Tfn内吞在时间和剂量上的关系。结果cortactin与Rab5/11及Tfn在HT29细胞内共定位。当HT29细胞过表达皮层蛋白氨基端或羧基端缺失的突变体时,细胞的内吞活动受到削弱,而表达全长皮层蛋白或载体的对照组未受明显影响。同时发现cortactin的磷酸化与Tfn内吞呈时间和剂量依赖关系。结论cortactin在结肠癌细胞HT29的内吞活动中发挥作用,其功能的发挥可能依赖其氨基端和羧基端结构区域。在内吞过程中,皮层蛋白发生磷酸化。 展开更多

关键词 结肠癌 皮层蛋白 细胞内吞

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水痘带状疱疹病毒皮层蛋白功能的研究进展 被引量：2

2

作者 王玮 程通 +1 位作者 朱桦 夏宁邵 《中国科学：生命科学》 CSCD 北大核心 2015年第7期623-634,共12页

水痘带状疱疹病毒(VZV)初次感染可引发水痘并可长期潜伏在宿主神经节内,一旦再激活即可引起带状疱疹.VZV病毒具有疱疹病毒典型结构,从内向外依次是DNA核心、衣壳、皮层和囊膜.VZV皮层是核衣壳与囊膜之间一层无固定形状的蛋白层.VZV皮层... 水痘带状疱疹病毒(VZV)初次感染可引发水痘并可长期潜伏在宿主神经节内,一旦再激活即可引起带状疱疹.VZV病毒具有疱疹病毒典型结构,从内向外依次是DNA核心、衣壳、皮层和囊膜.VZV皮层是核衣壳与囊膜之间一层无固定形状的蛋白层.VZV皮层由多种蛋白组成,但种类和功能仍未全部确定.本文综述了目前已发现的VZV皮层蛋白在病毒感染过程中发挥的多种作用,讨论了VZV皮层蛋白相关的蛋白-蛋白相互作用及其对病毒在SCID-hu人鼠嵌合感染模型中组织趋向性的影响,这将有助于更好地理解VZV皮层蛋白是如何帮助病毒DNA复制、逃避宿主免疫反应和致病. 展开更多

关键词 水痘带状疱疹病毒 VZV 皮层蛋白

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皮层蛋白氨基端同源性多肽分子对大肠癌细胞迁移、内吞能力及侵袭性的抑制 被引量：2

3

作者 朱建伟 陆毅祥 +2 位作者 黄宝玉 赵任 秦婧 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2009年第32期3302-3306,共5页

目的:研究针对CTTN编码蛋白Cortactin功能的多肽分子对大肠癌细胞运动性的抑制作用.方法:设计和制备与Cortactin蛋白氨基端同源性的多肽分子,用荧光物Cy5标记并导入到大肠癌细胞HCT-8中.采用细胞划痕法检测癌细胞的迁移、Capture-ELISA... 目的:研究针对CTTN编码蛋白Cortactin功能的多肽分子对大肠癌细胞运动性的抑制作用.方法:设计和制备与Cortactin蛋白氨基端同源性的多肽分子,用荧光物Cy5标记并导入到大肠癌细胞HCT-8中.采用细胞划痕法检测癌细胞的迁移、Capture-ELISA法检测癌细胞内吞作用,并采用Boyden培养小室检测癌细胞的侵袭性的改变.结果:成功制备和纯化35kDa多肽分子A,并以Cy5标记,有效导入到大肠癌细胞中.与对照组比较,导入多肽的大肠癌细胞迁移能力下降,填充划痕的癌细胞数量减少;以癌细胞摄取转铁蛋白数量反映的内吞作用同时下降,摄取值多肽导入组为0.3,对照组为1.2,两组比较有统计学差异(P<0.05);Trans well侵袭实验结果表明,导入多肽的癌细胞迁移数目为56±1.3个,对照为148±2.5个,侵袭能力明显下降(P<0.05).结论:Cortactin氨基端同源性多肽可能对抑制大肠癌的侵袭转移具有潜在应用价值. 展开更多

关键词 大肠癌 皮层蛋白 多肽

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皮层蛋白受磷酸化调控机制的荧光共振能量转移分析 被引量：1

4

作者 朱建伟 陆毅祥 +3 位作者 马利林 黄宝玉 刘培根 詹熙 《细胞生物学杂志》 CSCD 2009年第5期689-693,共5页

皮层蛋白(cortactin)是一种癌基因蛋白,是酪氨酸磷酸化激酶Src的作用底物,到目前为止,皮层蛋白受磷酸化调控的机制还不清楚。本研究用荧光共振能量转移(FRET)分析皮层蛋白受磷酸化调控后的蛋白质结构变化,推测皮层蛋白受磷酸化调控的可... 皮层蛋白(cortactin)是一种癌基因蛋白,是酪氨酸磷酸化激酶Src的作用底物,到目前为止,皮层蛋白受磷酸化调控的机制还不清楚。本研究用荧光共振能量转移(FRET)分析皮层蛋白受磷酸化调控后的蛋白质结构变化,推测皮层蛋白受磷酸化调控的可能机制。采用蓝绿色荧光蛋白(CFP)和黄色荧光蛋白(YFP)作为配对,设计和构建基于皮层蛋白羧基端SH3功能的蛋白质传感器,转染NIH/3T3细胞,将细胞以过钒酸盐(PV)和PP2处理,人为诱导或抑制细胞蛋白磷酸化,比较皮层蛋白的磷酸化和非磷酸化状态FRET的不同;进一步观察皮层蛋白磷酸化位点突变后FRET的变化,以此判断皮层蛋白的磷酸化作用后结构的变化。所设计的生物传感器供体和受体工作良好。FRET分析显示,在PP2处理后,FRET能量变化明显较对照组增高,但用PV处理后,FRET下降。皮层蛋白的磷酸化位点突变后,产生的FRET明显较野生型皮层蛋白产生的FRET为弱。因此推测,皮层蛋白在磷酸化后其分子结构处于"展开"状态,并可能以此增强和其他细胞蛋白的相互作用。 展开更多

关键词 皮层蛋白 磷酸化 蛋白质结构

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癌基因CTTN表达Cortactin蛋白及其变异体磷酸化状态下与细胞蛋白Dynamin相互作用分析 被引量：1

5

作者 朱建伟 马利林 +1 位作者 黄宝玉 刘培根 《交通医学》 2010年第3期223-225,229,共4页

目的:探讨Cortactin的氨基端序列在磷酸化介导的蛋白相互作用中的功能。方法:设计表达标签为GST的氨基端缺失的Cortactin突变体,纯化突变体蛋白,以及全长Cortactin蛋白,同时纯化His标签的细胞发动蛋白Dynamin,采用Src磷酸化Cortactin蛋... 目的:探讨Cortactin的氨基端序列在磷酸化介导的蛋白相互作用中的功能。方法:设计表达标签为GST的氨基端缺失的Cortactin突变体,纯化突变体蛋白,以及全长Cortactin蛋白,同时纯化His标签的细胞发动蛋白Dynamin,采用Src磷酸化Cortactin蛋白,并采用pull-down分析观察与Dynamin的相互作用。结果:成功表达和纯化Cortactin的1-80氨基酸(CortΔ80)缺失、1-349缺失的Cortactin突变体(CortΔ349),以及全长Cortactin(Cort WT)和Dynamin。Pull-down分析结果表明:与磷酸化的野生型Cortactin蛋白比较,氨基端缺失的Cortactin蛋白在磷酸化后与Dynamin的结合作用减弱。结论:实验提示Cortactin分子的氨基端是Arp2/3与actin结合的重要结构域其参与肌动蛋白聚合的过程,对于磷酸化信号的正常传导是不可或缺的部分。 展开更多

关键词 癌基因CTTN 皮层蛋白 发动蛋白 磷酸化 结构域

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Abelson相关基因和皮层蛋白在大肠癌中的表达及其临床意义 被引量：1

6

作者 许波涛 毛勤生 +2 位作者 朱建伟 袁岱岳 黄华 《中华临床医师杂志（电子版）》 CAS 2011年第1期79-82,共4页

目的探讨Abelson相关基因(Arg)和皮层蛋白(Cortactin)在人大肠癌组织中的表达及其意义。方法通过免疫组织化学染色法检测80例大肠腺癌组织、30例大肠腺瘤组织及30例癌旁结肠组织中Arg和Cortactin的表达及其相互关系。结果 Arg和Cortacti... 目的探讨Abelson相关基因(Arg)和皮层蛋白(Cortactin)在人大肠癌组织中的表达及其意义。方法通过免疫组织化学染色法检测80例大肠腺癌组织、30例大肠腺瘤组织及30例癌旁结肠组织中Arg和Cortactin的表达及其相互关系。结果 Arg和Cortactin阳性表达在大肠腺癌组织中为70%和67.5%,均显著性高于癌旁结肠组织(0和0)和大肠腺瘤组织(0和0)。Arg和Cortactin表达与肿瘤分化程度和Dukes分期均显著相关(P<0.05);Arg和Cortactin高表达生存期低(P<0.05),与患者年龄、性别无关(P>0.05);Arg和Cortactin在大癌组织中表达有相关性(P<0.01)。结论 Arg和Cortactin可能参与了肿瘤生长和发展的共同通道,在大肠癌的发生、发展和转移过程中起着重要作用。 展开更多

关键词 结直肠肿瘤 基因 abl 皮层蛋白

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EHV-1皮层蛋白VP22生物信息学分析及亚细胞定位研究

7

作者 王世民 王浩 +2 位作者 阿依古丽·艾麦尔尼亚孜 郝翠兰 姚刚 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2018年第21期32-36,258,259,共7页

为了研究马疱疹病毒（EHV-1）皮层蛋白VP22的生物学功能,试验通过克隆测序获得VP22基因并构建系统进化树,采用生物信息学软件分析其生物学特征,并将其编码基因的PCR扩增产物亚克隆至p DsRed2-N1真核表达载体,构建重组质粒pDsRed-VP22,研... 为了研究马疱疹病毒（EHV-1）皮层蛋白VP22的生物学功能,试验通过克隆测序获得VP22基因并构建系统进化树,采用生物信息学软件分析其生物学特征,并将其编码基因的PCR扩增产物亚克隆至p DsRed2-N1真核表达载体,构建重组质粒pDsRed-VP22,研究VP22在BHK-21细胞中定位。结果表明：EHV-1新疆本地株的VP22由304个氨基酸组成,其序列与欧洲分离株Ab4的同源性为100%,与其他分离株的同源性为97%-99%; VP22是一种无信号肽、跨膜区及核定位信号（NLS）的磷酸化蛋白质,具有1个核输出信号（NES）序列及14个蛋白结合位点; VP22的二级结构主要由α-螺旋及β-折叠构成,三级结构及表面电荷分布情况显示该蛋白质正反两面的电荷分布差异较大;生物学功能预测显示EHV-1 VPP22是一种多功能蛋白质;此外,试验成功构建出重组质粒p DsRed-VP22,并证实EHV-1 VP22定位于BHK-21细胞的内质网-高尔基体（ER-Golgi）膜系附近。 展开更多

关键词 马疱疹病毒 皮层蛋白 二级囊膜 亚细胞定位 系统发育树 分子模拟

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参与病毒裂解性复制周期的人巨细胞病毒皮层蛋白

8

作者 张文昌(综述) 甘霖(审校) +1 位作者 陈敬贤(审校) 王明丽(审校) 《国际生物制品学杂志》 CAS 2014年第1期19-23,共5页

人巨细胞病毒（human cytomegalovirus,HCMV）是疱疹病毒科β亚科的成员,具有典型的疱疹病毒结构和基因表达模式.在核衣壳与包膜之间的皮层区域含有多种蛋白以及病毒或细胞的RNA,这些蛋白统称为皮层蛋白.皮层蛋白不仅占病毒颗粒蛋白的... 人巨细胞病毒（human cytomegalovirus,HCMV）是疱疹病毒科β亚科的成员,具有典型的疱疹病毒结构和基因表达模式.在核衣壳与包膜之间的皮层区域含有多种蛋白以及病毒或细胞的RNA,这些蛋白统称为皮层蛋白.皮层蛋白不仅占病毒颗粒蛋白的大部分,而且功能多样.此文就HCMV皮层蛋白在病毒入胞、基因表达、免疫逃避、组装和释放几个重要阶段中的功能做一综述. 展开更多

关键词 巨细胞病毒 皮层蛋白 基因表达 免疫逃逸

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细胞外信号调节激酶系统(ERKs)在正常发育和单眼剥夺大鼠视皮层蛋白表达的研究 被引量：7

9

作者 谢剑萍 印湖莲 张振平 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期8-12,W003-W004,共7页

为了研究正常发育和单眼视觉剥夺大鼠视皮层 ERK1/ ERK2基因蛋白质表达的变化 ,本研究建立了 SD大鼠单眼视觉剥夺模型 ,以多克隆抗 ERK1/ ERK2抗体和单克隆抗双磷酸化 ERK抗体检测出生后第 1、14、2 1、2 8、45 d和成年 (90 d)正常发育... 为了研究正常发育和单眼视觉剥夺大鼠视皮层 ERK1/ ERK2基因蛋白质表达的变化 ,本研究建立了 SD大鼠单眼视觉剥夺模型 ,以多克隆抗 ERK1/ ERK2抗体和单克隆抗双磷酸化 ERK抗体检测出生后第 1、14、2 1、2 8、45 d和成年 (90 d)正常发育和单眼视觉剥夺 (14～ 45 d)视皮层 ERK1/ ERK2蛋白表达和活性改变。结果表明 ,出生后大鼠视皮层 ERK1/ ERK2蛋白表达逐渐增加 ,至 45 d达到高峰 ,此后下降至成年达稳定水平。磷酸化 ERK蛋白表达仅见于成年大鼠视皮层。单眼视觉剥夺导致ERK1/ ERK2蛋白表达减少。提示 ERK的蛋白表达依赖于正常的视觉输入信号的刺激 ,异常的视觉经验造成表达的明显下调 ,阻断正常的发育进程。说明 ERK1和 展开更多

关键词 细胞外信号调节激酶系统 正常发育 大鼠 视皮层蛋白 表达 ERK1/ERK2 单眼剥夺 免疫组织化学

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人DNAJB6蛋白与人巨细胞病毒皮层蛋白pUL23相互作用的鉴定 被引量：6

10

作者 姚伙旺 李实骞 +6 位作者 胡嘉淼 陈业志 邹奕 张欣 李月琴 周天鸿 李弘剑 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第12期1143-1148,共6页

pUL23是人巨细胞病毒(HCMV)UL23基因编码的皮层蛋白.HCMV皮层蛋白与病毒颗粒的形成、病毒转移、免疫调控等病毒生活过程相关.利用GAL4酵母双杂交系统筛选人胚肾cDNA文库,获得与人巨细胞病毒皮层蛋白pUL23相互作用的宿主蛋白分子DNAJB6[D... pUL23是人巨细胞病毒(HCMV)UL23基因编码的皮层蛋白.HCMV皮层蛋白与病毒颗粒的形成、病毒转移、免疫调控等病毒生活过程相关.利用GAL4酵母双杂交系统筛选人胚肾cDNA文库,获得与人巨细胞病毒皮层蛋白pUL23相互作用的宿主蛋白分子DNAJB6[DnaJ(Hsp40)homolog,subfamily B,member 6].回复酵母双杂交、体外GST-Pull down和免疫共沉淀试验再次确认两者之间的相互作用.该结果为进一步研究pUL23蛋白在HCMV生活周期中的作用机制提供依据. 展开更多

关键词 皮层蛋白pUL23 人巨细胞病毒 酵母双杂交 蛋白质相互作用 DNAJB6

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人巨细胞病毒皮层蛋白pUL23与宿主蛋白IGFBP4相互作用的鉴定 被引量：2

11

作者 肖小平 周天鸿 +6 位作者 宫君原 杨丹丽 员月明 李月琴 邹奕 张欣 李弘剑 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期2378-2382,共5页

目的:利用蛋白质相互作用的技术筛选与pUL23相互作用宿主蛋白,为研究pUL23蛋白对人巨细胞病毒繁殖的影响提供线索。方法:通过酵母双杂交系统从人胚肾cDNA文库筛选与pUL23相互作用的宿主蛋白;通过GST-pu ll-down技术研究二者体外物理性... 目的:利用蛋白质相互作用的技术筛选与pUL23相互作用宿主蛋白,为研究pUL23蛋白对人巨细胞病毒繁殖的影响提供线索。方法:通过酵母双杂交系统从人胚肾cDNA文库筛选与pUL23相互作用的宿主蛋白;通过GST-pu ll-down技术研究二者体外物理性相互作用;免疫共沉淀技术进一步研究二者在胞内相互作用。结果:Pu ll-down技术、免疫共沉淀技术确定了宿主蛋白IGFBP4与pUL23具有相互作用。结论:上述结果为研究pUL23蛋白调节病毒自身繁殖功能提供重要依据。 展开更多

关键词 pUL23 人巨细胞病毒 皮层蛋白质 胰岛素样生长因子结合蛋白质4

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皮层蛋白介导斑马鱼(Danio rerio)原肠化细胞运动

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作者 喻丹 张培军 Zhan Xi 《中国科学（C辑）》 CSCD 北大核心 2005年第5期433-438,共6页

在胚胎发育过程中,细胞运动对指导原肠期胚胎细胞的时空定位并决定其发育命运具有核心作用,然而活体状态下原肠化过程中细胞运动的调控机制目前并不清楚.微丝结合蛋白皮层蛋白(cortactin)是微丝核化过程的重要调控分子,它通过激活微丝... 在胚胎发育过程中,细胞运动对指导原肠期胚胎细胞的时空定位并决定其发育命运具有核心作用,然而活体状态下原肠化过程中细胞运动的调控机制目前并不清楚.微丝结合蛋白皮层蛋白(cortactin)是微丝核化过程的重要调控分子,它通过激活微丝相关蛋白2/3复合物(Arp2/3complex)促进微丝在细胞前导缘区域迅速组装,从而直接作用于细胞运动.为阐明斑马鱼(Daniorerio)原肠化细胞运动的分子调控机制,本研究首先检测了皮层蛋白在斑马鱼胚胎发育过程的表达水平.Westernblotting分析证明皮层蛋白在斑马鱼原肠期胚胎中大量表达;整装胚胎抗体染色结果表明在斑马鱼原肠化过程中,皮层蛋白主要分布于胚胎背侧胚盾区域的细胞中,在发生活跃运动的上皮层细胞和下皮层细胞中含量较高;在亚细胞水平,皮层蛋白和Arp2/3复合物共同定位于运动的皮层区域,并在细胞连接处也有大量分布.此外,研究还发现皮层蛋白在发育中的中枢神经系统中表达量较高.本研究结果首次表明皮层蛋白和Arp2/3复合物介导的微丝聚合参予了斑马鱼原肠化细胞运动,并在中枢神经系统发育中扮演重要角色. 展开更多

关键词 皮层蛋白(cortactin) 微丝相关蛋白2/3复合物(Arp2/3 complex) 斑马鱼(Danio rerio) 细胞运动 形态发生 原肠化 神经化 皮层细胞

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艾瑞昔布抑制肺腺癌A549细胞裸鼠移植瘤侵袭和转移及其机制 被引量：9

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作者 王玲婵 崔立静 +3 位作者 王东昌 赵云霞 赵志芳 陈刚 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期1-6,共6页

背景与目的:环氧化酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)与肺癌血管生成、淋巴转移相关,COX-2抑制剂能够抑制肺癌侵袭和转移。该研究探讨COX-2抑制剂艾瑞昔布能否抑制肺腺癌A549细胞裸鼠移植瘤侵袭和转移及其机制,以及与洛铂联合应用的疗效。方... 背景与目的:环氧化酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)与肺癌血管生成、淋巴转移相关,COX-2抑制剂能够抑制肺癌侵袭和转移。该研究探讨COX-2抑制剂艾瑞昔布能否抑制肺腺癌A549细胞裸鼠移植瘤侵袭和转移及其机制,以及与洛铂联合应用的疗效。方法:将肺腺癌A549细胞接种于30只BALB/c雄性裸鼠右侧腋部皮下,建立移植瘤模型。将造模成功裸鼠(n=29)随机分为4组:对照组(n=7)、艾瑞昔布组(n=8)、洛铂组(n=7)和艾瑞昔布联合洛铂组(n=7)。对照组灌胃等量灭菌蒸馏水及尾静脉注射等量0.9%Na Cl溶液,治疗组分别给予灌胃艾瑞昔布片每日40 mg/kg及尾静脉注射洛铂每周7.5 mg/kg相应处理。每日观察裸鼠饮食、活动等一般情况。给药6周后处死裸鼠,剥取移植瘤组织。应用免疫组织化学法和real-time PCR分别检测各组肿瘤PTEN、cortactin蛋白及相应m RNA表达水平。采用单因素方差分析及非参数检验进行统计学分析。结果:最后1周发现所有裸鼠饮食、活动较之前减少,逐渐消瘦,洛铂组及联合组变化较明显。与对照组相比,艾瑞昔布组及联合组PTEN蛋白及其m RNA表达明显升高,差异有统计学意义(P均<0.001);与对照组相比,艾瑞昔布组及联合组cortactin蛋白及其m RNA表达明显降低,差异有统计学意义(P均<0.001)。PTEN与cortactin蛋白、PTEN m RNA与cortactin m RNA均呈显著负相关(r=-0.660、-0.983,P均<0.001)。结论:艾瑞昔布能够抑制非小细胞肺癌侵袭和转移,其作用机制可能与上调PTEN蛋白及下调cortactin蛋白表达有关。艾瑞昔布对洛铂化疗可能具有增敏作用。 展开更多

关键词 非小细胞肺癌 侵袭转移 艾瑞昔布 PTEN 皮层肌动蛋白

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电针足三里穴对肠易激综合征大鼠平滑肌收缩功能及皮层肌动蛋白表达的影响 被引量：8

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作者 李佳 薛艳 +2 位作者 杨大业 王华 徐派的 《广州中医药大学学报》 CAS 2018年第2期272-276,共5页

【目的】探讨电针足三里穴对肠易激综合征(IBS)大鼠平滑肌收缩功能及皮层肌动蛋白(cortactin)的影响。【方法】将80只3月龄SPF级雌性SD大鼠随机分为正常组、模型组、穴位组、非穴位组4组,每组20只。采用高乳糖饲料喂养与束缚应激相结合... 【目的】探讨电针足三里穴对肠易激综合征(IBS)大鼠平滑肌收缩功能及皮层肌动蛋白(cortactin)的影响。【方法】将80只3月龄SPF级雌性SD大鼠随机分为正常组、模型组、穴位组、非穴位组4组,每组20只。采用高乳糖饲料喂养与束缚应激相结合的方法制备腹泻型IBS(IBS-D)大鼠模型。穴位组电针大鼠足三里穴,非穴位组选取大鼠足三里穴外侧5 mm区域的非穴位区作为针刺点。治疗结束后,测定各组大鼠全胃肠活性炭排出时间,观察大鼠近端结肠平滑肌肌条收缩水平,采用蛋白免疫印迹(Western blot)法检测近端结肠组织蛋白cortactin表达水平以及G/F-actin比值。【结果】与正常组比较,模型组大鼠全胃肠活性炭排出时间缩短(P<0.05),结肠平滑肌肌条收缩基础张力、近端结肠组织蛋白cortactin表达水平及G/F-actin比值均升高(P<0.05);电针足三里穴治疗后,与模型组与非穴位组比较,穴位组大鼠全胃肠活性炭排出时间延长(P<0.05),肠平滑肌肌条收缩基础张力、近端结肠组织蛋白cortactin表达水平以及G/F-actin比值降低(P<0.05)。【结论】针刺足三里穴可以有效改善IBS大鼠胃肠功能,并对结肠平滑肌收缩有较好的调节作用。 展开更多

关键词 电针 肠易激综合征 足三里 皮层肌动蛋白 疾病模型 动物 大鼠

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ABL2基因表达沉默对胶质瘤细胞迁移和侵袭的影响 被引量：6

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作者 陈磊 朱蒙 +9 位作者 于圣平 张辰 赵鹏飞 周华 海龙 刘波 李帅 周星辰 林雨 杨学军 《中华神经医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期221-226,共6页

目的 研究非受体酪氨酸激酶ABL2基因表达沉默对胶质瘤细胞迁移和侵袭能力的影响及机制. 方法 免疫组化染色检测正常脑组织和经病理证实的胶质母细胞瘤组织标本（分别来自天津医科大学总医院神经外科自2012年9月至2014年8月期间的癫痫、... 目的 研究非受体酪氨酸激酶ABL2基因表达沉默对胶质瘤细胞迁移和侵袭能力的影响及机制. 方法 免疫组化染色检测正常脑组织和经病理证实的胶质母细胞瘤组织标本（分别来自天津医科大学总医院神经外科自2012年9月至2014年8月期间的癫痫、胶质瘤手术患者）中ABL2的表达.将携带ABL2抑制物核苷酸序列（shRNA-ABL2）、阴性对照核苷酸序列（shRNA-NC）的重组慢病毒转染体外培养的SNB19胶质瘤细胞,分别作为shRNA-ABL2组、shRNA-NC组,同时设不做任何处理的空白对照组,转染后48 h实时荧光定量PCR检测3组细胞ABL2 mRNA的表达;Western blotting检测3组细胞ABL2、皮层肌动蛋白、Y-421位点酪氨酸磷酸化的皮层肌动蛋白（pY-421 cortactin）的表达;划痕实验和Transwell实验评价各组细胞的迁移和侵袭能力;免疫荧光染色检测ABL2、皮层肌动蛋白在SNB19细胞中的定位情况. 结果 免疫组化染色显示ABL2在正常脑组织中表达较低,在胶质母细胞瘤中表达则较高.与shRNA-NC组、空白对照组比较,转染后shRNA-ABL2组细胞ABL2 mRNA和蛋白、pY421 cortactin蛋白的表达降低,差异均有统计学意义（P＜0.05）;划痕实验显示shRNA-ABL2组细胞迁移数（72.33 ±7.64）少于shRNA-NC组、空白对照组（187.67±5.03、190.33±7.23）,Transwell实验显示shRNA-ABL2组穿膜细胞数低于shRNA-NC组、空白对照组,差异均有统计学意义（P＜0.05）.免疫荧光染色结果显示ABL2与皮层肌动蛋白在细胞前端伪足处共定位. 结论 ABL2在胶质母细胞瘤组织中表达较正常脑组织高.沉默ABL2表达可能通过调节pY-421 cortactin的水平来抑制胶质瘤细胞的迁移和侵袭. 展开更多

关键词 神经胶质瘤 ABL2 皮层肌动蛋白 迁移侵袭

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黄芪—莪术—重楼配伍对结肠癌原位移植瘤模型裸鼠肿瘤及癌旁组织中侵袭性伪足相关蛋白表达的影响 被引量：6

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作者 关汉卿 刘甜甜 +1 位作者 梁研 唐德才 《中医杂志》 CSCD 北大核心 2021年第16期1427-1433,共7页

目的探讨黄芪-莪术-重楼配伍抗结肠癌转移的可能作用机制。方法38只裸鼠采用随机数字表法分为空白组8只及模型组、5-氟尿嘧啶(5-Fu)组和黄芪-莪术-重楼组各10只。除空白组外,其余各组裸鼠采用人结肠癌HCT116细胞原位移植法构建结肠癌原... 目的探讨黄芪-莪术-重楼配伍抗结肠癌转移的可能作用机制。方法38只裸鼠采用随机数字表法分为空白组8只及模型组、5-氟尿嘧啶(5-Fu)组和黄芪-莪术-重楼组各10只。除空白组外,其余各组裸鼠采用人结肠癌HCT116细胞原位移植法构建结肠癌原位移植瘤模型。造模24h后,5-Fu组给予注射用5-Fu 25mg/(kg·d)腹腔注射,隔日1次;黄芪-莪术-重楼组给予5.85g/(kg·d)黄芪-莪术-重楼药液灌胃,每日1次;空白组、模型组分别以10ml/(kg·d)生理盐水灌胃,每日1次。连续给药21天后计算瘤重及抑瘤率;检测各组裸鼠肿瘤及癌旁组织中酪氨酸激酶底物5(Tks5)、皮层肌动蛋白(Cortactin)、磷酸化皮层肌动蛋白(p-Cortactin)、细胞分裂周期蛋白(Cdc42)、衔接蛋白1(Nck1)、丝状肌动蛋白(F-actin)及膜型基质金属蛋白酶1(MT1-MMP)蛋白表达。结果5-Fu组、黄芪-莪术-重楼组的抑瘤率分别为58.32%、45.77%。与模型组比较,黄芪-莪术-重楼组、5-Fu组平均瘤重均降低(P<0.01);5-Fu组与黄芪-莪术-重楼组平均瘤重比较差异无统计学意义(P>0.05)。与空白组比较,模型组、黄芪-莪术-重楼组及5-Fu组肿瘤组织及癌旁组织中侵袭性伪足前体核心蛋白Tks5、p-Cortactin,侵袭性伪足成熟相关蛋白Cdc42、Nck1、F-actin、MT1-MMP蛋白表达均升高(P<0.05或P<0.01)。与模型组比较,黄芪-莪术-重楼组及5-Fu组肿瘤组织及癌旁组织中侵袭性伪足前体核心蛋白Tks5、p-Cortactin,侵袭性伪足成熟相关蛋白Cdc42、Nck1、F-actin、MT1-MMP蛋白表达均降低(P<0.01)。结论黄芪-莪术-重楼配伍可通过抑制肿瘤侵袭性伪足的形成及成熟,从而抑制结肠癌的生长与转移。 展开更多

关键词 结肠癌 黄芪 莪术 重楼 肿瘤转移 侵袭性伪足 酪氨酸激酶底物5 皮层肌动蛋白

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纤毛虫皮层细胞骨架的研究进展 被引量：1

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作者 李雪玲 杨玉慧 庞延斌 《淄博学院学报（自然科学与工程版）》 2001年第4期87-91,共5页

纤毛虫皮层的研究对探讨细胞的发育、分化、结构模式及其遗传控制有着极其重大的生物学意义 .纤毛虫细胞皮层中含有非常丰富的细胞骨架成分 ,它们在结构上表现出来的特殊性有利于更深入地探索皮层分化和皮层模式的控制机理 .本文综述了... 纤毛虫皮层的研究对探讨细胞的发育、分化、结构模式及其遗传控制有着极其重大的生物学意义 .纤毛虫细胞皮层中含有非常丰富的细胞骨架成分 ,它们在结构上表现出来的特殊性有利于更深入地探索皮层分化和皮层模式的控制机理 .本文综述了有关纤毛虫皮层细胞骨架的结构和形态发生方面的研究及皮层细胞骨架蛋白质构成的生化和分子生物学研究进展 . 展开更多

关键词 纤毛虫 皮层模式 皮层细胞骨架蛋白 皮层分化 骨架结构 骨架形态 原生动物

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敲低皮层肌动蛋白的表达下降胶质瘤细胞迁移和侵袭能力 被引量：5

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作者 王垒垒 赵恺 +9 位作者 朱蒙 任炳成 刘志峰 于圣平 赵鹏飞 周华 张辰 陈磊 明浩朗 杨学军 《中华神经医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期325-329,共5页

目的探讨运用特异性干扰RNA抑制皮层肌动蛋白表达后对人胶质瘤细胞迁移、侵袭能力的影响。方法免疫组化染色检测天津医科大学总医院神经外科癫痫及胶质瘤手术治疗患者的正常脑组织及胶质母细胞瘤标本中皮层肌动蛋白的表达：体外常规培... 目的探讨运用特异性干扰RNA抑制皮层肌动蛋白表达后对人胶质瘤细胞迁移、侵袭能力的影响。方法免疫组化染色检测天津医科大学总医院神经外科癫痫及胶质瘤手术治疗患者的正常脑组织及胶质母细胞瘤标本中皮层肌动蛋白的表达：体外常规培养人恶性胶质瘤细胞系U251并分为RNA干扰组、阴性对照组、空白对照组，分别转染干扰RNA序列、阴性对照序列及等量Lipofetmiane2000。48h后Westernblotting、免疫荧光染色检测3组细胞皮层肌动蛋白的表达：细胞划痕实验和Transwell细胞侵袭实验评价细胞迁移、侵袭能力的高低。结果免疫组化染色检测显示皮层肌动蛋白在正常脑组织呈弱阳性表达。在胶质母细胞瘤为强阳性表达：Westernblotting检测显示RNA干扰组细胞皮层肌动蛋白表达低于空白对照组与阴性对照组，差异有统计学意义（P〈0.05）；免疫荧光染色显示皮层肌动蛋白表达于细胞质特别是与细胞伪足密切相关的细胞膜周围。划痕实验结果显示RNA干扰组、空白对照组、阴性对照组迁移细胞数分别为18．17±4．07、94．00±4．33、92．67±5．24；Transwell细胞侵袭实验显示侵袭细胞数分别为31．25±2．98、125．00±4．57、127．00±3．56；与空白对照组与阴性对照组比较，RNA干扰组迁移、侵袭细胞数均减少，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论皮层肌动蛋白在胶质母细胞瘤组织中的表达高于正常脑组织。敲低U251细胞皮层肌动蛋白的表达后细胞的迁移、侵袭能力下降，提示皮层肌动蛋白可作为脑胶质瘤治疗的一个靶点。 展开更多

关键词 神经胶质瘤 皮层肌动蛋白 RNA干扰 迁移侵袭

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食管鳞癌组织中血管内皮生长因子C、皮层肌动蛋白的表达及其临床意义 被引量：5

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作者 张九娜 李校天 +6 位作者 瞿峰 魏红 翟山 翟建文 郭永泽 路新卿 王飞 《中国综合临床》 2016年第4期319-324,共6页

目的探讨血管内皮生长因子C（VEGF-C）、皮层肌动蛋白（CTTN）在食管鳞癌组织中的表达及D2-40标记的食管鳞癌淋巴管浸润（LVI）与临床病理特征和预后的关系。方法采用免疫组织化学法检测216例食管鳞癌和癌旁正常食管黏膜组织中VEGF-C和C... 目的探讨血管内皮生长因子C（VEGF-C）、皮层肌动蛋白（CTTN）在食管鳞癌组织中的表达及D2-40标记的食管鳞癌淋巴管浸润（LVI）与临床病理特征和预后的关系。方法采用免疫组织化学法检测216例食管鳞癌和癌旁正常食管黏膜组织中VEGF-C和CTTN蛋白表达及LVI的情况，分析其与食管鳞癌临床病理特征之间的关系，随访观察患者总生存期。结果VEGF-C、CTYN在食管鳞癌和癌旁正常食管黏膜组织中的阳性表达率比较差异均有统计学意义[43．1％与10．6％，63．9％与25．5％，χ2值分别为28．874、32．259，P均〈0．0001]；216例食管鳞癌患者淋巴管浸润率为63．9％。食管鳞癌组织中VEGF-C、CTTN的表达与浸润深度（pT）（χ2值分别为10．759、13．958）、TNM分期（χ2值分别为11．476、16．299）、淋巴结转移（pN）（χ2值分别为15．473、23．728）和LVI（χ2值分别为16．370、23．594）相关，差异均有统计学意义（P均〈0．001）。Logistic单因素和多因素回归分析均显示VEGF-C、CTTN、LVI和TNM分期是预测淋巴结转移的独立影响因素（P值分别为0．001、0．006、0．004、0．003）；而在单因素分析中浸润深度是影响淋巴结转移的独立因素（P=0．042），但多因素分析中浸润深度不能成为预测淋巴结转移的独立危险因素。Kaplan-Meier生存分析显示VEGF-C（-）组的中位生存时间51．0个月，高于VEGF-C（＋）组的中位生存时间28．0个月；CqTN（-）组的中位生存时间54．0个月，显著高于CTTN（＋）组的中位生存时间26．0个月；VEGF-C和CTTN的Logrank值分别为11．810、18．100，差异均有统计学意义（P均〈0．001）。同时Kaplan-Meier生存分析显示LVI（＋）组中位生存时间26．0个月明显低于LVI（-）组的中位生存时间54．0个月，差异有统计学意义（P〈0．000）。Cox多因素分析示浸润深度pT、TNM分期、LVI、VEGF-C、CTTN为影响食� 展开更多

关键词 食管鳞癌 血管内皮生长因子C 皮层肌动蛋白 淋巴管浸润 淋巴结转移

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皮层肌动蛋白表达水平与NSCLC患者MVD及术后预后的关系 被引量：1

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作者 孙勇攀 龙谦 +1 位作者 鲁战胜 周小江 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2023年第20期4915-4918,共4页

目的探讨皮层肌动蛋白(cortactin)表达水平与非小细胞肺癌(NSCLC)患者肿瘤微血管密度(MVD)及术后预后的关系。方法选取行手术治疗的140例NSCLC患者,于术中获取癌组织及癌旁正常组织,采用免疫组化法检测cortactin表达情况,用CD34标记微... 目的探讨皮层肌动蛋白(cortactin)表达水平与非小细胞肺癌(NSCLC)患者肿瘤微血管密度(MVD)及术后预后的关系。方法选取行手术治疗的140例NSCLC患者,于术中获取癌组织及癌旁正常组织,采用免疫组化法检测cortactin表达情况,用CD34标记微血管计算MVD。比较癌组织及癌旁正常组织中表达水平,癌组织cortactin水平与MVD的相关性采用Pearson相关性分析,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析cortactin对预后的预测效能。分析cortactin表达与临床病理特征的关系,采用COX比例风险模型分析NSCLC术后预后的影响因素。结果癌组织cortactin表达量(1.09±0.27)明显高于癌旁组织(0.65±0.12;P<0.05)。癌组织中MVD计数为(38.09±7.27)个,Pearson相关性分析显示MVD与cortactin呈正相关(r=0.594,P<0.05)。随访3年,140例NSCLC患者中死亡58例(41.43%),存活82例(58.57%)。单因素、多因素Logistic回归分析显示,临床分级、淋巴结转移、MVD、cortactin均是影响患者预后的独立危险因素(P<0.05)。cortactin表达阳性组存活36例(54.55%),死亡30例(45.45%),阴性组中位生存时间[(30.56±2.68)个月]明显高于阳性组[(27.15±2.30)个月;χ^(2)=4.235,P=0.022]。ROC曲线分析显示,cortactin截断值为1.15时,诊断曲线下面积为0.844(95%CI:0.796~0.902),灵敏度为77.59%,特异度为86.59%。结论NSCLC癌组织中cortactin高表达,且与MVD存在正相关性,是影响NSCLC患者术后预后的危险因素,对于预后具有良好的预测效能。 展开更多

关键词 皮层肌动蛋白 非小细胞肺癌 微血管密度 预测效能

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