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猪瘟兔化弱毒疫苗——半个世纪的回顾 被引量:83
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作者 仇华吉 童光志 沈荣显 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期1675-1685,共11页
猪瘟是一种严重危害养猪业的毁灭性传染病。20世纪50年代中国首创了举世闻名的猪瘟兔化弱毒疫苗(即C株),随后创制了不同的疫苗制造工艺,如细胞培养苗、乳兔组织苗和牛体反应组织苗等。C株是一株非常安全的弱毒疫苗,对各种年龄和品种的... 猪瘟是一种严重危害养猪业的毁灭性传染病。20世纪50年代中国首创了举世闻名的猪瘟兔化弱毒疫苗(即C株),随后创制了不同的疫苗制造工艺,如细胞培养苗、乳兔组织苗和牛体反应组织苗等。C株是一株非常安全的弱毒疫苗,对各种年龄和品种的猪都没有副作用,并且有良好的免疫效力,它能同时诱导体液免疫和细胞免疫应答,对不同基因型的猪瘟病毒株均能提供有效的免疫保护。免疫母猪通过母乳可对仔猪提供被动免疫保护,但过高水平的母源抗体会影响仔猪对C株疫苗的主动免疫应答。目前已经完成了包括C株及其亲本株在内的几十株猪瘟病毒的全基因组序列测定和注释,建立了猪瘟病毒的反向遗传操作系统,初步解析了猪瘟病毒主要基因的结构与功能,并构建了不同的反向遗传操作标记疫苗,赋予了C株疫苗新的生命和内涵。C株疫苗可以用于猪瘟的控制和根除,借助于C株疫苗密集接种和综合控制措施,有关国家有效地控制了猪瘟,甚至消灭了猪瘟。尽管如此,要在全球范围内根除猪瘟,今后依然有漫长的路要走,这可能有赖于对C株进行进一步改造和利用。 展开更多
关键词 猪瘟 猪瘟病毒 猪瘟兔化弱毒疫苗 20世纪50年代 综合控制措施 细胞免疫应答 被动免疫保护 反向遗传操作 回顾 免疫效力
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猪瘟病毒E2基因真核表达质粒的构建及基因疫苗的研究 被引量:50
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作者 余兴龙 涂长春 +5 位作者 李红卫 陈创夫 李作生 马正海 孙明 殷震 《中国病毒学》 CSCD 2000年第3期264-271,共8页
构建了猪瘟病毒 (classicalswinefevervirus,CSFV)主要保护性抗原E2基因 4种不同的真核表达质粒。小鼠免疫试验表明 ,E2基因上不同的功能区对基因疫苗的免疫应答有很大影响 ,有信号肽序列的E2基因可诱导产生特异性免疫反应 ,且无跨膜区... 构建了猪瘟病毒 (classicalswinefevervirus,CSFV)主要保护性抗原E2基因 4种不同的真核表达质粒。小鼠免疫试验表明 ,E2基因上不同的功能区对基因疫苗的免疫应答有很大影响 ,有信号肽序列的E2基因可诱导产生特异性免疫反应 ,且无跨膜区序列的E2基因所诱导的免疫应答反应比有跨膜区序列的强 ,而无信号肽序列的E2基因则不能诱导产生CSFV特异性的免疫反应。攻毒保护试验表明 ,免疫家兔最少可抵抗 10个最小感染剂量 (MID)的猪瘟兔化弱毒苗 (Hogcholeralap inizedvirus,HCLV)的攻击 ;免疫猪可抵抗致死剂量的CSFV石门株强毒的攻击。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 E2基因 真核表达质粒 基因疫苗
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以重组mE2蛋白为抗原建立检测猪瘟病毒抗体间接ELISA方法的研究 被引量:45
3
作者 余兴龙 涂长春 +5 位作者 李作生 马正海 李红卫 吴健敏 吕宗吉 殷震 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 1999年第3期220-222,共3页
以在E.coli高效表达的猪瘟病毒E2基因主要抗原编码区(mE2)为抗原,以辣根过氧化物酶(HRP)标记的兔抗猪IgG为二抗,建立了检测猪瘟病毒抗体的间接ELISA方法。经检测筛选出最佳反应条件为:12μg/孔纯化... 以在E.coli高效表达的猪瘟病毒E2基因主要抗原编码区(mE2)为抗原,以辣根过氧化物酶(HRP)标记的兔抗猪IgG为二抗,建立了检测猪瘟病毒抗体的间接ELISA方法。经检测筛选出最佳反应条件为:12μg/孔纯化的E.coli表达的mE2重组蛋白包被酶标板,用10%的兔血清或马血清进行封闭,以正常E.coli裂解上清液稀释待检血清。试验表明应用重组mE2蛋白作为诊断HCV抗原具有特异性高、抗原易纯化和成本低等特点。 展开更多
关键词 mE2重组蛋白 猪瘟病毒 抗体 间接ELISA
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猪瘟病毒及其猪瘟疫苗研究进展 被引量:40
4
作者 韩雪清 刘湘涛 赵启祖 《动物医学进展》 CSCD 2000年第2期1-7,共7页
猪瘟 ( HC)是猪的一种高度传染性疾病。它遍布于世界各国 ,对经济造成巨大的损失。中国猪瘟兔化弱毒疫苗在防治猪瘟中曾起到决定性作用 ,但近几年来出现免疫效果不理想 ,应用组织培养弱毒苗也发生免疫失败 ,究其原因比较多 .本文结合多... 猪瘟 ( HC)是猪的一种高度传染性疾病。它遍布于世界各国 ,对经济造成巨大的损失。中国猪瘟兔化弱毒疫苗在防治猪瘟中曾起到决定性作用 ,但近几年来出现免疫效果不理想 ,应用组织培养弱毒苗也发生免疫失败 ,究其原因比较多 .本文结合多年研究成果 ,对猪瘟病毒分子生物学特性和猪瘟疫苗研究进展进行了较为系统的综述 。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 猪瘟疫苗 分子生物学 研究进展
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猪瘟病毒遗传发生关系分析 被引量:41
5
作者 韩雪清 刘湘涛 +8 位作者 赵启祖 刘伯华 马军武 李明晖 鄂承钧 刘在新 李健强 李忠润 谢庆阁 《中国兽医科技》 CSCD 1999年第6期3-7,共5页
利用反转录(RT)及PCR扩增并测定了中国猪瘟兔化弱毒(C-株)兔组织毒、C-株细胞疫苗毒和近期(1997~1998年)甘肃省7个地区的10个流行野毒株的E2基因核酸序列。通过序列比较和系统发生关系分析发现:C-株兔... 利用反转录(RT)及PCR扩增并测定了中国猪瘟兔化弱毒(C-株)兔组织毒、C-株细胞疫苗毒和近期(1997~1998年)甘肃省7个地区的10个流行野毒株的E2基因核酸序列。通过序列比较和系统发生关系分析发现:C-株兔组织毒、C-株细胞毒和中国50~60年代流行的石门强毒株同属于组群1(Group1);近期猪瘟流行毒株同属于组群2(Group2)的两个不同的亚组群(Subgroup2.1和2.2),其流行毒株与疫苗毒株有较大的差异(E2全基因核苷酸序列同源性82.2%~84.3%),表明猪瘟流行毒株向远离疫苗毒株的方向演变。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 流行 遗传发生关系
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猪瘟病毒持续感染与猪瘟预防控制 被引量:49
6
作者 宁宜宝 王琴 赵耘 《中国兽药杂志》 2005年第5期31-35,共5页
研究证明,在自然条件下,猪瘟病毒持续感染通常是在免疫力较低的情况下,由于环境中的病毒反复感染产生的,由于感染猪还有一定的免疫力,病毒虽然可以在其体内局部存留,但还不足以引起猪发病。一般情况下,感染猪虽然持续带毒,但不表现临床... 研究证明,在自然条件下,猪瘟病毒持续感染通常是在免疫力较低的情况下,由于环境中的病毒反复感染产生的,由于感染猪还有一定的免疫力,病毒虽然可以在其体内局部存留,但还不足以引起猪发病。一般情况下,感染猪虽然持续带毒,但不表现临床症状,然而却可以不断向外排毒,再次感染其他猪,污染环境;带毒的种猪可以通过母猪的胎盘和公猪的精液传播给仔猪,造成仔猪的先天免疫耐受,导致疫苗免疫失败。实验还证明,即使在良好的免疫状况下,反复多次人工感染猪瘟强毒也可造成持续感染。由此可见,猪瘟病毒持续感染是一个复杂的问题。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 持续感染 免疫失败
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多重PCR检测猪瘟病毒、猪细小病毒、猪伪狂犬病病毒 被引量:43
7
作者 刘建柱 崔玉东 +3 位作者 李鹏 王志强 石星明 朴范泽 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期535-537,共3页
根据猪瘟病毒 ( CSFV)、猪细小病毒 ( PPV)和猪伪狂犬病病毒 ( PRV) 3种病原体的基因保守序列 ,分别设计了与CSFV的 E2基因、PPV的 VP2基因和 PRV的 g 基因序列互补的 3对引物。用这 3对引物对人为混合的样品中的PPV和 PRV的 DNA模板及 ... 根据猪瘟病毒 ( CSFV)、猪细小病毒 ( PPV)和猪伪狂犬病病毒 ( PRV) 3种病原体的基因保守序列 ,分别设计了与CSFV的 E2基因、PPV的 VP2基因和 PRV的 g 基因序列互补的 3对引物。用这 3对引物对人为混合的样品中的PPV和 PRV的 DNA模板及 CSFV反转录后的 c DNA模板进行多重 PCR扩增和多重 PCR反应条件的优化 ,结果同时得到 3条与试验设计相符的 2 88bp( CSFV)、5 75 bp( PPV)和 70 0 bp( PRV)特异性条带 ;敏感性检测结果表明 ,该多重 PCR可以检测到 14 .5 ng/ L 的 CSFV、2 7.1pg/ L 的 PPV、31.4 ng/ L 的 展开更多
关键词 猪瘟病毒 细小病毒 伪狂犬病病毒 检测 多重PCR 早期诊断
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猪瘟病毒流行病学、病原致病特性及猪瘟综合防制研究 被引量:42
8
作者 王琴 《中国农业科技导报》 CAS CSCD 2006年第5期13-18,共6页
猪瘟是由猪瘟病毒引起猪的高度致死性、接触性传染病,严重危害全球养猪业的重要传染病,也是我国计划要消灭的重大动物疫病之一。近年流行态势十分复杂,本文就CSF的流行情况、病原致病特征及综合防治技术研究等方面进行全面概述,并为猪... 猪瘟是由猪瘟病毒引起猪的高度致死性、接触性传染病,严重危害全球养猪业的重要传染病,也是我国计划要消灭的重大动物疫病之一。近年流行态势十分复杂,本文就CSF的流行情况、病原致病特征及综合防治技术研究等方面进行全面概述,并为猪瘟的防制提出具体实施方案。 展开更多
关键词 猪瘟 猪瘟病毒 流行情况 防制
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几种动物病毒的基因芯片检测技术 被引量:25
9
作者 杨素 花群义 +7 位作者 徐自忠 周晓黎 杨晶焰 董俊 杨云庆 贾建军 谭德勇 赖建华 《中国兽医科技》 CSCD 北大核心 2004年第3期35-39,共5页
分别用水疱性口炎病毒、蓝舌病病毒、口蹄疫病毒、猪瘟病毒、牛病毒性腹泻病毒、鹿流行性出血热病毒和赤羽病病毒各一段高度保守的基因片段构建质粒 ,在此基础上制备了芯片探针。提取样品中的核酸 ,经反转录和荧光标记后滴加到芯片上进... 分别用水疱性口炎病毒、蓝舌病病毒、口蹄疫病毒、猪瘟病毒、牛病毒性腹泻病毒、鹿流行性出血热病毒和赤羽病病毒各一段高度保守的基因片段构建质粒 ,在此基础上制备了芯片探针。提取样品中的核酸 ,经反转录和荧光标记后滴加到芯片上进行特异性杂交 ,对杂交结果扫描检测 ,可同时对上述 7种动物传染病进行快速、准确的诊断 ,此方法敏感性高 ,特异性强 ,适合于大批动物高通量检疫。 展开更多
关键词 动物病毒 基因芯片 检测技术 水疱性口炎病毒 蓝舌病病毒 口蹄疫病毒 猪瘟病毒 病毒性腹泻病毒
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鉴别牛病毒性腹泻病毒和猪瘟病毒的复合PCR方法及其应用 被引量:23
10
作者 周绪斌 王新平 +1 位作者 宣华 涂长春 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期557-560,共4页
以牛病毒性腹泻病毒 (BVDV)特异引物 P1/ P3扩增 BVDV标准毒株及以猪瘟病毒 (HCV)特异引物 P2 / P3扩增HCV阳性病料 ,分别扩增出 32 6 bp和 2 5 2 bp的特异片段 ;以 P1、P2、P3扩增 BVDV和 HCV人工混合感染样品 ,扩增出大小为 32 6 bp和... 以牛病毒性腹泻病毒 (BVDV)特异引物 P1/ P3扩增 BVDV标准毒株及以猪瘟病毒 (HCV)特异引物 P2 / P3扩增HCV阳性病料 ,分别扩增出 32 6 bp和 2 5 2 bp的特异片段 ;以 P1、P2、P3扩增 BVDV和 HCV人工混合感染样品 ,扩增出大小为 32 6 bp和 2 5 2 bp的 2条片段 ,建立了特异的一步检测 BVDV和 HCV的复合 PCR方法。以建立的复合 PCR方法检测 BVDV分离株 ,都扩增出 1条 32 6 bp的特异片段 ;从吉林等地送检的病料和猪瘟兔化弱毒疫苗中扩增出一2 5 2 bp的特异片段 ,从长岭地区的疑似猪瘟病猪的血清病料中 ,同时扩增出 32 6 bp和 2 5 2 bp的核酸片段 ,表明长岭某猪场流行的“猪瘟”为 BVDV和 HCV混合感染。本研究为进行 HCV和 BVDV的鉴别诊断与流行病学调查提供了有效的方法。 展开更多
关键词 鉴别 复合PCR方法 应用 病毒性腹泻病毒 猪瘟病毒
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我国部分地区猪瘟病毒流行株的基因差异 被引量:23
11
作者 吕宗吉 李红卫 +4 位作者 涂长春 余兴龙 吴健敏 李月红 殷震 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期313-316,共4页
采用 RT-PCR方法 ,从我国 1 0个省、市、自治区收集的 2 3个猪瘟病毒 ( CSFV)流行毒株中 ,扩增了CSFV E2基因中主要抗原位点编码区。对各扩增片段进行了序列测定 ,通过计算机分析构建了系统发生树 ,并确定了它们间的遗传相关性。结果表... 采用 RT-PCR方法 ,从我国 1 0个省、市、自治区收集的 2 3个猪瘟病毒 ( CSFV)流行毒株中 ,扩增了CSFV E2基因中主要抗原位点编码区。对各扩增片段进行了序列测定 ,通过计算机分析构建了系统发生树 ,并确定了它们间的遗传相关性。结果表明 ,2 3个流行毒株中的 1 8株属基因 群 ,占 78.2 6%;另外 5个流行株与传统石门强毒、兔化弱毒株属基因 群 ,占 2 1 .74 %。两群间测序区的核酸同源性只有 78.90 %。此外 ,根据序列差异程度 ,将基因 群流行株分为 3个亚群 ,各基因群 CSFV在地域分布上未发现有明显的特征性。本研究初步揭示了我国较大范围内流行的 CSFV毒株与传统的石门强毒和疫苗用兔化弱毒在抗原基因上存在较大的差异 。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 RT-PCR 基因差异 疫苗株 流行株
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猪瘟病毒保护性抗原E2蛋白单抗的制备及其抗原表位的初步分析 被引量:27
12
作者 马刚 李作生 +2 位作者 余兴龙 刘思国 涂长春 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期121-124,共4页
应用大肠杆菌表达的猪瘟病毒主要保护性 E2抗原决定簇蛋白和全长 E2基因构建的 DNA疫苗免疫 BAL B/c小鼠。取免疫小鼠脾细胞与 SP2 /0骨髓瘤细胞进行融合 ,经克隆和间接 EL ISA筛选 ,获得了 A11、B2、E3、H6、D5、D86株稳定分泌抗猪瘟病... 应用大肠杆菌表达的猪瘟病毒主要保护性 E2抗原决定簇蛋白和全长 E2基因构建的 DNA疫苗免疫 BAL B/c小鼠。取免疫小鼠脾细胞与 SP2 /0骨髓瘤细胞进行融合 ,经克隆和间接 EL ISA筛选 ,获得了 A11、B2、E3、H6、D5、D86株稳定分泌抗猪瘟病毒 E2蛋白单克隆抗体 (Mc Ab)的杂交瘤细胞株。它们的腹水效价在 1∶ 80 0~ 1∶ 2 10 0 0 0之间。抗体类型鉴定结果表明 ,A11、E3、H6、D5和 D8为 Ig M类型 ,B2为 Ig G类型。随后用蛋白 A凝胶层析法和 PEG沉淀法分别纯化了 Ig G和 Ig M单抗。对纯化单抗进行的抗原识别表位研究结果初步表明 ,6株单抗可能识别 3种不同的E2抗原表位。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 McAb 纯化 表位分析 保护性抗原E2 蛋白 单抗
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猪流感病毒与繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒、圆环病毒、伪狂犬病病毒、副猪嗜血杆菌混合感染的情况调查 被引量:29
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作者 覃绍敏 梁安莉 +5 位作者 王仰杰 向晖 黄红梅 陈凤莲 马玲 吴健敏 《中国畜牧兽医》 CAS 2008年第3期77-80,共4页
应用套式PCR方法对采自广西境内13个市122个不同规模猪场及农村散养户的126份病料,进行了SIV的检测,并对鉴定为SIV阳性的15份病料,再分别进行PRRSV、CSFV、PCV-2、PRV、HPS的检测,以调查广西猪群中SIV与PRRSV、CSFV、PCV-2、PRV、HPS混... 应用套式PCR方法对采自广西境内13个市122个不同规模猪场及农村散养户的126份病料,进行了SIV的检测,并对鉴定为SIV阳性的15份病料,再分别进行PRRSV、CSFV、PCV-2、PRV、HPS的检测,以调查广西猪群中SIV与PRRSV、CSFV、PCV-2、PRV、HPS混合感染的情况。结果发现:猪群中SIV感染率为11.9%(15/126),而在所检测的15份阳性病料中,SIV混合感染十分严重,感染率为73.3%(11/15)。混合感染病毒种类最多达四重感染(SIV+PRRSV+CSFV+PCV-2),占6.67%(1/15);三重感染(SIV+PRRSV+PCV-2、SIV+PRRSV+CSFV)占40%(6/15);二重感染(SIV+PRRSV,SIV+PCV-2)占26.6%(4/15)。调查结果表明广西发病猪群中SIV与PRRSV、CSFV、PCV-2混合感染普遍存在。 展开更多
关键词 流感病毒 繁殖与呼吸综合征病毒 猪瘟病毒 圆环病毒 伪狂犬病病毒 副猪嗜血杆菌 混合感染
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猪瘟病毒致病机制及防治的研究进展 被引量:18
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作者 王镇 丁明孝 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第5期449-454,共6页
猪瘟病毒(CSFV)属黄病毒科,瘟病毒属,感染猪可引起猪瘟,是一种危害严重的畜病毒。本文综述了近年来在CSFV与宿主细胞间关系及其致病机制方面的研究进展,并对防治猪瘟的各种方法,特别是几种疫苗的研制及特点进行了比较分... 猪瘟病毒(CSFV)属黄病毒科,瘟病毒属,感染猪可引起猪瘟,是一种危害严重的畜病毒。本文综述了近年来在CSFV与宿主细胞间关系及其致病机制方面的研究进展,并对防治猪瘟的各种方法,特别是几种疫苗的研制及特点进行了比较分析,为今后对猪瘟的控制工作提供参考。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 致病机制 疫苗 防治 传染病 病毒
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猪瘟病毒强弱毒株和野毒株E2全基因序列测定及比较分析 被引量:19
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作者 王琴 李博 +2 位作者 王在时 丘惠深 郎洪武 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期320-328,共9页
为了比较猪瘟病毒 (HCV)野毒株、疫苗株及标准株之间E2基因抗原区域的差异 ,采用RT PCR扩增了HCV石门株、兔化弱毒疫苗株、野毒 0 3及 0 7株的囊膜糖蛋白E2 (gp55)全基因的cDNA片段 ,分别克隆于pGEM T载体中并对其进行了核苷酸序列测定... 为了比较猪瘟病毒 (HCV)野毒株、疫苗株及标准株之间E2基因抗原区域的差异 ,采用RT PCR扩增了HCV石门株、兔化弱毒疫苗株、野毒 0 3及 0 7株的囊膜糖蛋白E2 (gp55)全基因的cDNA片段 ,分别克隆于pGEM T载体中并对其进行了核苷酸序列测定及氨基酸序列的推导 ,同时进行了同源性比较及E2结构与功能的分析。所测 4株HCVE2基因的长度均为1 2 73bp,所编码的氨基酸序列均包括部分信号肽序列和完整的跨膜区序列 ,共由 381个氨基酸组成 ;4个毒株E2蛋白N末端的 683位至 690位信号肽序列 (WLLLVTGA)和C末端 1 0 30~1 0 63位跨膜区均为保守序列 ,而且具疏水性 ;N末端抗原功能区中 ,4个E2蛋白与其它所比较序列在位于第 753位至 759位氨基酸处 ,均有一段保守序列RYLASLH ,无一氨基酸发生变异 ,为亲水性 ,在整个E2蛋白抗原谱中抗原性峰值为最高 ,推测对抗原性产生起重要作用 ;4个E2蛋白的氨基酸序列中均含有 1 5个半胱氨酸 (Cys)残基 ,其数量及位置与国外五株HCV(Brescia ,C ,Alfort.ALD和GPE)完全一致。表明该 4株HCVE2抗原具有相同的构型 ,尤其是N末端的 6个Cys残基对E2蛋白结构的正确折叠及特异抗原决定簇的形成至关重要。同时对主要抗原区域氨基酸位点变异进行分析 ,发现疫苗株与野毒株之间抗原决定簇未发生明显变? 展开更多
关键词 猪瘟病毒 E2基因 序列分析 强毒株 弱毒株 野毒株
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PMWS患病猪群中PCV2与CSFV、PPV、PRRSV混合感染的调查 被引量:26
16
作者 赵浩军 王先炜 +3 位作者 姜平 范伟兴 李晓成 黄保续 《畜牧与兽医》 北大核心 2007年第3期32-35,共4页
应用套式PCR方法对采自辽宁、河北、河南、湖北、湖南、山东、浙江、福建和广西9个省份的733份临床发病猪肺脏和淋巴结样品进行了PCV2的检测,然后对鉴定为PCV2阳性的283份病料再分别进行PRRSV、PPV和CSFV的检测,以确定猪群中PCV2与CSFV... 应用套式PCR方法对采自辽宁、河北、河南、湖北、湖南、山东、浙江、福建和广西9个省份的733份临床发病猪肺脏和淋巴结样品进行了PCV2的检测,然后对鉴定为PCV2阳性的283份病料再分别进行PRRSV、PPV和CSFV的检测,以确定猪群中PCV2与CSFV、PRRSV和PPV双重感染情况,结果表明:CSFV、PRRSV和PPV阳性样品分别为74份、94份和46份,阳性率分别为26.1%、33.2%和16.3%。表明这些地区发病猪群中PCV2与这三种病毒的双重感染普遍存在,其中以PCV2和PRRSV的双重感染较为突出;但在河北和湖北两省,则以PCV2与CSFV的双重感染为主。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型 猪瘟病毒 猪繁殖与呼吸综合征病毒 猪细小病毒 混合感染
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江苏省猪高热病病例主要继发感染病毒的多重PCR检测 被引量:24
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作者 叶俊平 盛瑜 +2 位作者 朱丽娜 高崧 刘秀梵 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第12期1029-1034,共6页
应用建立的2个多重PCR方法,对2005~2006年收集于江苏省的211份猪高热病疑似病料进行了检测。结果,PRRSV阳性率为51.2%,PCV2阳性率为44.1%,CSFV阳性率为10.4%,PPV阳性率为3.9%,PRV阳性率为2.4%。2005年病料中PCV2阳性率... 应用建立的2个多重PCR方法,对2005~2006年收集于江苏省的211份猪高热病疑似病料进行了检测。结果,PRRSV阳性率为51.2%,PCV2阳性率为44.1%,CSFV阳性率为10.4%,PPV阳性率为3.9%,PRV阳性率为2.4%。2005年病料中PCV2阳性率为21.2%,2006年为73.2%;2005年PRRSV阳性率为38.1%,2006年为67.7%。2006年猪高热病疫情比2005年严重,PCV2和PRRSV可能在其中发挥了协同致病作用。对10个PRRSV分离株ORF5基因和Nsp2基因进行的测序表明,2006年分离株Nsp2基因中有连续87个碱基的缺失。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 猪圆环病毒2型 猪细小病毒 猪瘟病毒 猪伪狂犬病病毒 猪高热病 多重PCR ORF5基因 NSP2基因
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PRRS-CSF-PCV2诊断DNA芯片构建研究 被引量:22
18
作者 肖驰 曹三杰 +3 位作者 文心田 张焕容 肖国生 黄小波 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第8期799-803,共5页
本研究旨在研制CSF-PRRS-PCV2诊断DNA芯片。根据各病毒序列选取靶标,制备相应探针,并构建DNA芯片。结果表明:该芯片能同时检测PRRS、CSF和PCV2感染,并能区分PRRSV欧洲型和美洲型毒株,芯片检测阳性判读标准为SNR≥1.5(信号总强度模式量化... 本研究旨在研制CSF-PRRS-PCV2诊断DNA芯片。根据各病毒序列选取靶标,制备相应探针,并构建DNA芯片。结果表明:该芯片能同时检测PRRS、CSF和PCV2感染,并能区分PRRSV欧洲型和美洲型毒株,芯片检测阳性判读标准为SNR≥1.5(信号总强度模式量化)或信号强度≥1 000(信号中位值模式量化)。该芯片具有特异性高、灵敏度高和可重复利用的优点。应用PRRS-CSF-PCV2诊断DNA芯片检测20份临床病料发现PRRSV、CSFV和PCV2单独感染分别为0、15%和5%,PRRSV与CSFV、PRRSV与PCV2、PRRSV、PCV2和CS-FV混合感染分别为15%、35%和15%。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 猪瘟病毒 猪圆环病毒2型 DNA芯片 诊断
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鉴别猪瘟强毒和弱毒的反转录-复合套式聚合酶链式反应(RT-nPCR)检测方法的建立 被引量:26
19
作者 李艳 仇华吉 +5 位作者 王秀荣 张守发 朱庆虎 李娜 李国新 童光志 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第9期1907-1914,共8页
【目的】建立一种能区分猪瘟病毒(classicalswinefever,CSFV)强毒和弱毒的反转录-复合套式聚合酶链式反应(RT-nPCR)检测方法。【方法】根据GenBank上登录的现有CSFV基因组全序列,选择高度保守区设计了一对CSFV通用引物,并在该对引物跨... 【目的】建立一种能区分猪瘟病毒(classicalswinefever,CSFV)强毒和弱毒的反转录-复合套式聚合酶链式反应(RT-nPCR)检测方法。【方法】根据GenBank上登录的现有CSFV基因组全序列,选择高度保守区设计了一对CSFV通用引物,并在该对引物跨越区域的内部设计了猪瘟兔化弱毒疫苗和强毒特异性引物,建立了一种能区分猪瘟强毒和弱毒的RT-nPCR鉴别诊断方法。【结果】应用该方法从猪瘟兔化弱毒疫苗和石门强毒株基因组中扩增出了大小分别为447和343bp的一条特异性片段,从两种病毒基因组混合物中扩增出了大小为447和343bp的两条特异性片段,但对牛病毒性腹泻病毒和其它常见猪源病毒细胞培养物以及正常细胞基因组进行检测时均为阴性。该方法可以检测出0.04pg的CSFVRNA。对从黑龙江省采集的15份疑似猪瘟病料进行了检测,结果表明,有14份类似猪瘟强毒,1份类似弱毒疫苗。限制性片段长度多态性和种系发生分析证实了RT-nPCR的检测结果。【结论】本研究建立的RT-nPCR可以有效区分猪瘟强毒和弱毒,减少了未感染的免疫猪被误杀的可能性。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 反转录-复合套式聚合酶链式反应 限制性片段长度多态性分析
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猪瘟免疫情况调查及防制对策 被引量:28
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作者 王克领 郎利敏 +2 位作者 熊华东 游一 张彬 《养猪》 2004年第6期31-32,共2页
关键词 猪瘟 猪瘟病毒 防制 饲养管理 免疫接种 合理用药 饲料
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