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牙釉质基因巢式PCR鉴定猪ICSI胚胎性别 被引量:4
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作者 孙俊丽 廖海洪 +3 位作者 张冰 孙如玉 卢克焕 卢晟盛 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2018年第10期2202-2207,共6页
【目的】建立可准确鉴定猪胚胎性别、可靠的巢式PCR反应体系及研究卵胞浆内单精子显微注射技术(Intracytoplasmic sperm injection,ICSI)对胚胎性别的影响。【方法】根据猪X染色体和Y染色体上牙釉质基因(Amelogenin gene,AMEL)第三内含... 【目的】建立可准确鉴定猪胚胎性别、可靠的巢式PCR反应体系及研究卵胞浆内单精子显微注射技术(Intracytoplasmic sperm injection,ICSI)对胚胎性别的影响。【方法】根据猪X染色体和Y染色体上牙釉质基因(Amelogenin gene,AMEL)第三内含子上9~10 bp的缺失设计了巢式PCR引物,并利用10个猪耳组织基因组DNA样品优化了PCR扩增条件,巢式PCR—荧光标记的半自动基因组扫描技术鉴定205个猪ICSI早期囊胚性别。【结果】特异性扩增了199个ICSI样品,6个ICSI胚胎扩增失败。经PCR产物片段扫描,只在178~179 bp处有峰的,判定为雌性胚胎,在169~171和178~179 bp 2处有峰则判定为雄性胚胎。共确定雄性胚胎71个,雌性胚胎128个,其中公母比例1∶1.8。【结论】基于牙釉质基因的巢式PCR方法可用于猪胚胎性别鉴定。性别比例偏离在一定程度上说明在ICSI囊胚中存在部分孤雌胚胎。 展开更多
关键词 牙釉质基因 猪ICSI胚胎 巢式PCR 性别鉴定
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牙釉质基因鉴定山羊性别的研究 被引量:2
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作者 唐纪伟 张志国 +2 位作者 高庆华 沈波 武延风 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2011年第4期162-165,共4页
根据牙釉质(amelogenin,AMEL)同源基因在山羊X、Y染色体上存在不同程度碱基缺失的特点,设计1对引物,对山羊血液基因组DNA混合样进行PCR扩增,将PCR产物纯化、克隆并测序;然后对46个山羊血液DNA样本(♀:22个,♂:24个)进行性别鉴定。结果显... 根据牙釉质(amelogenin,AMEL)同源基因在山羊X、Y染色体上存在不同程度碱基缺失的特点,设计1对引物,对山羊血液基因组DNA混合样进行PCR扩增,将PCR产物纯化、克隆并测序;然后对46个山羊血液DNA样本(♀:22个,♂:24个)进行性别鉴定。结果显示,雌性山羊样品经扩增只产生一条非特异性条带,雄性山羊样品产生一条非特异性条带和一条特异性条带;非特异性片段长度为349 bp,特异性片段为289 bp;46个山羊血液DNA样本鉴定结果与实际性别对比,雌性准确率为100%(22/22),雄性准确率为100%(24/24)。 展开更多
关键词 牙釉质基因 山羊 PCR 性别鉴定
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牙釉质基因鉴定麇鹿性别 被引量:2
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作者 武会娟 张林源 +3 位作者 王文 孟浩 李凯 高庆华 《野生动物》 2012年第4期177-179,195,共4页
性别鉴定是调查野生种群雌雄性比的重要方法,对野生动物种群管理具有重要意义。而牙釉质(AMEL)基因在性染色体上具有较高的保守性,在鉴定动物性别方面得到了应用,本次试验采用北京麋鹿生态实验中心的15头糜鹿组织样本,其中11个来自雄性... 性别鉴定是调查野生种群雌雄性比的重要方法,对野生动物种群管理具有重要意义。而牙釉质(AMEL)基因在性染色体上具有较高的保守性,在鉴定动物性别方面得到了应用,本次试验采用北京麋鹿生态实验中心的15头糜鹿组织样本,其中11个来自雄性麇鹿鹿茸,4个来自雌性糜鹿静脉血液。对所取样本分别进行基因组DNA提取、AMEL基因片段PCR扩增、纯化、测序。得到了AMEL基因鉴定和实际雌雄性别个数差异不显著(P>0.05)。结果表明:雌性麋鹿产生1条322 bpX带和1条N带,雄性麋鹿则产生322 bpX带和277 bpY带以及1条N带,雄鹿(10/10)和雌鹿(4/4)性别鉴定结果分别都与实际性别符合,所以,使用鹿茸角和血液样本进行AMEL.基因扩增电泳分析可以对糜鹿性别鉴定。 展开更多
关键词 麋鹿 性别鉴定 牙釉质基因 PCR
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牙釉质基因巢式扩增鉴定牛早期胚胎性别的研究 被引量:2
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作者 马梦婷 高庆华 +2 位作者 王姗姗 陈晓利 郑永富 《中国草食动物科学》 CAS 2016年第3期31-33,共3页
根据牙釉质基因在牛X染色体和Y染色体上存在的差异设计巢式引物,对牛静脉血基因组DNA样本以及10枚牛早期胚胎DNA样本进行巢式扩增和电泳分析,以鉴定性别。结果表明:利用此方法能够对牛10 pg量血液基因组DNA进行扩增鉴定性别,雌性产生1... 根据牙釉质基因在牛X染色体和Y染色体上存在的差异设计巢式引物,对牛静脉血基因组DNA样本以及10枚牛早期胚胎DNA样本进行巢式扩增和电泳分析,以鉴定性别。结果表明:利用此方法能够对牛10 pg量血液基因组DNA进行扩增鉴定性别,雌性产生1条片段长度为311 bp的源于X染色体的条带,雄性产生1条源于X染色体的条带(311 bp)和1条片段长度为251 bp的源于Y染色体的条带,对10枚胚胎进行鉴定,6枚为雄性,4枚为雌性。说明牙釉质基因巢式PCR扩增鉴定牛早期胚胎性别方法可靠,准确性和敏感性较高。 展开更多
关键词 牙釉质基因 胚胎 性别鉴定 巢式PCR
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单细胞双重巢式PCR扩增X、Y染色体STS、AMEL同源序列行性连锁遗传病诊断 被引量:1
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作者 郑圣霞 刘雨生 +6 位作者 陈大蔚 童先宏 吴丽敏 何国平 杨琼 许波 史庆华 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期244-247,共4页
目的在单细胞水平建立一种简便、快速、高准确性的胎儿性连锁遗传疾病诊断方法,为无创性产前诊断性连锁遗传病和植入前遗传学诊断提供一定的理论与方法学依据。方法提取男女单个淋巴细胞各150例,共300个细胞。随机分成3组,每组男女... 目的在单细胞水平建立一种简便、快速、高准确性的胎儿性连锁遗传疾病诊断方法,为无创性产前诊断性连锁遗传病和植入前遗传学诊断提供一定的理论与方法学依据。方法提取男女单个淋巴细胞各150例,共300个细胞。随机分成3组,每组男女细胞各50个,双重巢式PCR技术在单细胞水平同时扩增X-类固醇硫酸脂酶基因(steroid sulfatase gene,STS)/Y-假基因和牙釉质基因(amelogenin gene,AMEL),对照组用单重巢式PCR技术在单细胞水平分别扩增两基因,比较单、双重巢式PCR技术在单细胞水平的扩增率及性别诊断正确率。结果单重巢式PCR扩增男性细胞STS和AMEL的扩增率和性别诊断正确率分别是84%、76%和84%、84%;而双重巢式PCR技术同时扩增上述基因的扩增率和性别诊断正确率分别为98%、96%。后者与前两者相比扩增率和性别诊断正确率均明显提高,差异均有统计学意义(P〈0.05,P〈0.01)。结论在单细胞水平性连锁遗传疾病诊断中,双重巢式PCR技术较单重巢式PCR技术具有较高的扩增率及正确率,并有助于发现等位基因脱扣。该法在无创性单基因伴性遗传病的产前诊断和植入前遗传学诊断中具有较高的实际应用价值。 展开更多
关键词 单细胞 双重巢式PCR X-类固醇硫酸脂酶基因/Y-假基因 牙釉质基因 产前诊断
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应用牙釉质基因鉴定绒山羊早期胚胎的性别 被引量:1
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作者 王惠娥 张志国 +2 位作者 高庆华 唐纪伟 沈波 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期17-21,共5页
采用酚-氯仿法和煮沸法从南疆绒山羊血液和早期胚胎中提取基因组DNA,分别以雄羊和雌羊的血液基因组DNA和早期胚胎基因组DNA(约20~30胚胎细胞)为模板,以AMEL引物进行PCR扩增和电泳分析.结果表明:绒山羊5ng量和10pg量血液基因组DNA经扩... 采用酚-氯仿法和煮沸法从南疆绒山羊血液和早期胚胎中提取基因组DNA,分别以雄羊和雌羊的血液基因组DNA和早期胚胎基因组DNA(约20~30胚胎细胞)为模板,以AMEL引物进行PCR扩增和电泳分析.结果表明:绒山羊5ng量和10pg量血液基因组DNA经扩增后雌性只得到1条非特异性带,雄性得到1条非特异性带和1条特异性带;超微量血液基因组DNA样本(10pg)经巢式扩增和电泳分析能够鉴定绒山羊性别;32枚绒山羊胚胎鉴定结果,雄雌性别比17/15;移植胚胎产羔雄雌比15/14.采用牙釉质基因(AMEL),经巢式扩增和电泳分析能够鉴定绒山羊性别,并对胚胎无损伤;南疆绒山羊早期胚胎性别鉴定结果与胚胎移植后产羔性别结果对比,雌雄性别比率差异不显著(P>0.05). 展开更多
关键词 南疆绒山羊 胚胎性别鉴定 牙釉质基因 巢式PCR
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牙釉质基因Y片段缺失亲子鉴定1例
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作者 任苹 林琳 吴淑珍 《中国医药科学》 2021年第24期237-240,共4页
目的通过对亲权关系中牙釉质基因Y片段缺失的案例进行报道,分析其对亲子鉴定中结果的影响及解决方法。方法采用聚苯乙烯二乙烯基苯树脂(chelex)法提取被鉴定人样本的DNA,使用AGCU EX22与AGCU Database Y24人类荧光标记STR复合扩增检测... 目的通过对亲权关系中牙釉质基因Y片段缺失的案例进行报道,分析其对亲子鉴定中结果的影响及解决方法。方法采用聚苯乙烯二乙烯基苯树脂(chelex)法提取被鉴定人样本的DNA,使用AGCU EX22与AGCU Database Y24人类荧光标记STR复合扩增检测试剂进行复合PCR扩增,使用ABI-3500遗传分析仪电泳检测,使用GeneMapper®ID-X 1.5软件分析结果。结果结果显示子的牙釉质基因扩增Y片段缺失,仅检测到Amel-X,系染色体片段Amel-Y缺失所致,本次检测的所有STR基因座均进行多次检验,并排除污染的可能性。结论在亲子鉴定中如遇到Amel-Y缺失时,应综合分析检验结果,并增加试剂盒检验,避免结果中对被鉴定人性别的误判,本案例报道为亲子鉴定领域中Amel-Y缺失的案件,提供了一定的参考思路及解决方法。 展开更多
关键词 法医物证学 亲子鉴定 Y染色体基因缺失 牙釉质基因
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蓝狐牙釉质基因克隆及性别鉴定的应用
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作者 朱柯郦 于新生 +2 位作者 姜恩泽 刘珈羽 白秀娟 《经济动物学报》 CAS 2019年第1期9-12,共4页
牙釉质(Amelogenin,AMEL)基因在哺乳动物X、Y染色体上存在不同程度碱基缺失,已在动物性别鉴定方面得到一定程度的应用。本试验对蓝狐牙釉质基因片段进行克隆、纯化和测序,并通过测得序列设计1对引物,对50个蓝狐DNA样本(其中25个来自雄... 牙釉质(Amelogenin,AMEL)基因在哺乳动物X、Y染色体上存在不同程度碱基缺失,已在动物性别鉴定方面得到一定程度的应用。本试验对蓝狐牙釉质基因片段进行克隆、纯化和测序,并通过测得序列设计1对引物,对50个蓝狐DNA样本(其中25个来自雄性蓝狐精液,25个来自雌性蓝狐静脉血液)进行PCR扩增和电泳分析,鉴定蓝狐性别。结果显示,雌性蓝狐产生1条X带,雄性蓝狐产生1条X带和1条Y带,50个蓝狐DNA样本鉴定结果符合实际性别。判断所设计牙釉质基因引物可以用于蓝狐性别鉴定。 展开更多
关键词 蓝狐 牙釉质基因 性别鉴定 PCR
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基于牙釉质基因巢式PCR性别鉴定超微量DNA检测方法的建立 被引量:1
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作者 唐纪伟 高庆华 《塔里木大学学报》 2011年第2期24-27,共4页
实验根据山羊牙釉质(AMEL)基因序列设计巢式引物,用紫外分光仪检测基因组DNA的浓度,梯度稀释(10-2μg/μL、10-3μg/μL,10-4μg/μL,10-5μg/μL),巢式PCR扩增后琼脂糖凝胶电泳检测。结果表明,利用巢式PCR方法对10 pg量基因组DNA(约3... 实验根据山羊牙釉质(AMEL)基因序列设计巢式引物,用紫外分光仪检测基因组DNA的浓度,梯度稀释(10-2μg/μL、10-3μg/μL,10-4μg/μL,10-5μg/μL),巢式PCR扩增后琼脂糖凝胶电泳检测。结果表明,利用巢式PCR方法对10 pg量基因组DNA(约3个细胞)进行扩增,得到明显目的条带。巢式PCR扩增AMEL基因鉴定性别的方法具有较高的准确性和敏感性,超微量DNA检测方法对胚胎移植前性别鉴定及提高切割胚胎移植的成活率方面具有重要的意义。 展开更多
关键词 巢式PCR 超微量DNA 牙釉质基因1
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疑似父子Y染色体Yp11.2区域大片段共同缺失1例
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作者 郝伟琪 郑洁莹 +2 位作者 蔡金洪 雷雨田 黄健 《中国法医学杂志》 CSCD 2024年第4期409-411,共3页
牙釉质蛋白基因(Amelogenin)检测是目前国内外最常用的性别鉴定方法,其检测方法简便、灵敏、快捷,在法医物证学实践中具有较高的应用价值,许多商品化试剂盒包含了Amelogenin基因^([1])。该基因座中Amelogenin-X比Amelogenin-Y小6bp,正... 牙釉质蛋白基因(Amelogenin)检测是目前国内外最常用的性别鉴定方法,其检测方法简便、灵敏、快捷,在法医物证学实践中具有较高的应用价值,许多商品化试剂盒包含了Amelogenin基因^([1])。该基因座中Amelogenin-X比Amelogenin-Y小6bp,正常男性会在该基因座出现Amelogenin-X和Amelogenin-Y两个峰^([2]),如果只有Amelogenin-X一个峰经常会被判定为女性,可能是因为Amelogenin基因的变异或片段缺失而造成性别的误判。 展开更多
关键词 法医物证学 牙釉质蛋白基因 Y-STR Y染色体片段缺失
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三例AMELY基因发生改变的急性白血病临床与实验室分析 被引量:2
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作者 王志林 李桑 +1 位作者 曹祥山 顾伟英 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期460-461,共2页
目的了解白血病患者Y染色体上牙釉质蛋白基因(amelogenin Ygene,AMELY)改变情况。方法应用AmpFISTR Identifiler^TM荧光标记复合扩增系统检测115例男性白血病患者的短串联重复序列(short tandem repeat,STR)和牙釉质蛋白(ameloge... 目的了解白血病患者Y染色体上牙釉质蛋白基因(amelogenin Ygene,AMELY)改变情况。方法应用AmpFISTR Identifiler^TM荧光标记复合扩增系统检测115例男性白血病患者的短串联重复序列(short tandem repeat,STR)和牙釉质蛋白(amelogenin,AMEL)基因,判断患者AMELY缺失情况;对AMELY缺失的患者检测其口腔上皮细胞的STR及Amelogenin基因,同时应用荧光原位杂交技术检测AMELY缺失患者骨髓白血病细胞中的Y染色体,确认AMELY缺失是否由Y染色体丢失引起。结果2例初诊急性白血病患者AMELY发生了改变,1例慢性髓细胞白血病患者急变时AMELY发生了改变。结论AMELY改变可能与白血病发生、发展有关。 展开更多
关键词 白血病 Y染色体 牙釉质蛋白基因
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Y染色体Amelogenin基因缺失分析研究
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作者 孙丽娟 叶峻杰 +3 位作者 杜应雄 赵洁 张云 陈婷婷 《中国优生与遗传杂志》 2022年第1期68-70,共3页
目的分析云南省男性群体Y染色体Amelogenin基因缺失情况。方法采集6000名云南省无关男性个体血样,使用PowerPlex21、STRtyper-21G和PowerPlex Y23试剂盒进行STR复合扩增,GeneMapper ID-X 1.5软件分析基因分型数据。结果统计分析发现,云... 目的分析云南省男性群体Y染色体Amelogenin基因缺失情况。方法采集6000名云南省无关男性个体血样,使用PowerPlex21、STRtyper-21G和PowerPlex Y23试剂盒进行STR复合扩增,GeneMapper ID-X 1.5软件分析基因分型数据。结果统计分析发现,云南男性AMELY缺失频率约为0.033%。进一步探究缺失原因,AMELY缺失还伴随其他Y-STR基因座缺失,缺失导致的扩增失败是由于Yp11.2上连锁片段缺失。结论AMELY基因缺失具有一定的发生频率,将干扰性别鉴定,在检验时需要对缺失情况进行分析探究。 展开更多
关键词 法医遗传学 Y染色体 牙釉质蛋白基因 Y-STR
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孕妇外周血血浆胎源性牙釉质蛋白基因和DYS19位点检测
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作者 李瓅 陈辉 +1 位作者 郑红 王雅莉 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2009年第6期1212-1214,共3页
目的:检测孕妇外周血血浆胎源性牙釉质蛋白(Amelogenin)基因和DYS19位点,探讨其对男性胎儿性别诊断的可能性与准确性,为伴性遗传病的产前诊断提供参考。方法:采集22例正常孕妇外周血2mL,以1例未婚无妊娠史女性为阴性对照、1例正常男性... 目的:检测孕妇外周血血浆胎源性牙釉质蛋白(Amelogenin)基因和DYS19位点,探讨其对男性胎儿性别诊断的可能性与准确性,为伴性遗传病的产前诊断提供参考。方法:采集22例正常孕妇外周血2mL,以1例未婚无妊娠史女性为阴性对照、1例正常男性为阳性对照。提取血浆DNA作为PCR模板,以巢式PCR技术分别扩增Amelogenin基因和DYS19位点,并将实验结果与娩出后的新生儿实际性别比较。结果:孕妇外周血血浆中Amelo-genin基因检测与娩出后新生儿实际性别符合率为95.5%,DYS19位点检测符合率90.9%,2指标检测结果与胎儿实际性别符合率较高(kappa=0.909,P=0.088;kappa=0.820,P=0.120)。Amelogenin基因与DYS19位点检测的一致率为95.2%。结论:Amelogenin基因和DYS19位点预测胎儿性别符合率无差异。联合检测Amelogenin基因和DYS19位点,可以提高诊断结果的可信度。 展开更多
关键词 非创伤性产前诊断 血浆DNA 牙釉质蛋白基因 DYS19
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焦磷酸测序分析短片段牙釉质蛋白基因进行性别鉴定
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作者 冯婷 李淑瑾 +4 位作者 丛斌 娄春光 付丽红 张晓静 马春玲 《中国法医学杂志》 CSCD 2012年第3期177-180,共4页
目的采用焦磷酸测序技术分析短片段牙釉质蛋白基因进行性别鉴定并用于骨骼及腐败生物检材的检测。方法应用blast软件,确定牙釉质蛋白基因(Amel)上1段含有3个SNP位点及1个插入/缺失(indel)位点的序列作为待测靶序列,设计引物,扩增该段序... 目的采用焦磷酸测序技术分析短片段牙釉质蛋白基因进行性别鉴定并用于骨骼及腐败生物检材的检测。方法应用blast软件,确定牙釉质蛋白基因(Amel)上1段含有3个SNP位点及1个插入/缺失(indel)位点的序列作为待测靶序列,设计引物,扩增该段序列,应用焦磷酸测序技术分析扩增序列,进行性别鉴定。对方法进行准确性、灵敏度、种属特异性的测试,并用于对骨骼和高度降解DNA的检测。结果 PCR产物分别为44bp(Amel X)和45bp(Amel Y),女性测序结果为:G/G,T/T,…/…,C/C,男性测序结果为:G/T,T/A,…/C,C/A,分型图谱清晰。应用本文方法检测100份已知性别的DNA样本,结果均正确无误,方法最低DNA模板量为0.5ng,具有较好的人类种属特异性。用于高度降解DNA分析,较IdentifilerTM试剂盒具有更高的成功率且骨骼样本也得到清晰的分型结果。结论本文采用焦磷酸测序技术分析Amel的方法在法医学性别鉴定中有较好的应用价值。 展开更多
关键词 法医物证学 性别鉴定 焦磷酸测序技术 牙釉质蛋白基因 降解检材
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19例Amelogenin-Y等位基因的缺失分析 被引量:1
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作者 周安 《中国法医学杂志》 CSCD 2024年第2期232-235,240,共5页
目的探讨19例Amelogenin-Y等位基因缺失情况,为今后日常工作实践提供基础数据。方法本实验室选取在2017年~2019年的无关联的男性人员样本检验,使用PowerPlex 21、华夏白金、Geno-ID Y41、YfilerTM Platinum等试剂盒进行常染色体和Y染色... 目的探讨19例Amelogenin-Y等位基因缺失情况,为今后日常工作实践提供基础数据。方法本实验室选取在2017年~2019年的无关联的男性人员样本检验,使用PowerPlex 21、华夏白金、Geno-ID Y41、YfilerTM Platinum等试剂盒进行常染色体和Y染色体分型检测。结果发现有19例人员样本出现Amelogenin-Y等位基因和10个Y-STR基因座存在缺失情况,其在染色体上的位置在4.4~8.82 Mb之间,紧密相连于Y染色体短臂的Yp11.2区域。结论当Amelogenin-Y等位基因缺失出现时,需要对缺失情况进行充分的甄别,可能是染色体等位基因区域大范围的连锁片段缺失所致,在日常法医DNA检验工作过程中要引起足够的重视。 展开更多
关键词 法医物证学 人类牙釉质蛋白基因Amelogenin 等位基因缺失Y-STR
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Amelogenin基因遗传变异及其法医学应用研究进展 被引量:4
16
作者 王克杰 郭利伟 黄艳梅 《中国法医学杂志》 CSCD 2020年第4期422-425,421,共5页
人类牙釉质蛋白基因(Amelogenin, AMEL)为X、Y染色体同源基因,分别称为AMEL-X和AMEL-Y。根据二者在扩增序列大小的不同可以确定性别,在法医学实践和临床医学等应用中具有重要意义。但是,AMEL基因在不同个体和人群中的遗传变异而导致性... 人类牙釉质蛋白基因(Amelogenin, AMEL)为X、Y染色体同源基因,分别称为AMEL-X和AMEL-Y。根据二者在扩增序列大小的不同可以确定性别,在法医学实践和临床医学等应用中具有重要意义。但是,AMEL基因在不同个体和人群中的遗传变异而导致性别决定并不是100%准确;通常由于特异性产物扩增异常,有可能导致性别错判。本文重点从AMEL基因的遗传变异、分型技术、以及引起性别误判的应对策略方面进行综述。 展开更多
关键词 人类牙釉质蛋白基因 性别鉴定 遗传变异 法医学
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牙釉质蛋白基因Y缺失1例 被引量:3
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作者 梁燕 梁鳅双 +3 位作者 翚芸 黄晓华 龙文明 陈家礼 《刑事技术》 2014年第3期56-57,共2页
笔者在工作中发现1例身份为男性但STR检测分型的Amelogenin基因座上仅检测到X特异谱带.
关键词 法医物证 STR 牙釉质蛋白基因Y
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