基于计算机模拟探究鱼类烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶源活性肽抗运动疲劳的功效 被引量：1

1

作者 曾巧辉 林妙銮 +2 位作者 丁瑶 彭名军 王敬敬 《现代食品科技》 CAS 北大核心 2023年第9期205-214,共10页

为了研究鱼类烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶(Nicotinamide Adenine Dinucleotide Dehydrogenase,NADH Dehydrogenase)源活性肽抗运动疲劳的功效,该研究利用计算机模拟水解5种我国常见鱼类中的NADH Dehydrogenase蛋白亚基,将模拟水解得到... 为了研究鱼类烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶(Nicotinamide Adenine Dinucleotide Dehydrogenase,NADH Dehydrogenase)源活性肽抗运动疲劳的功效,该研究利用计算机模拟水解5种我国常见鱼类中的NADH Dehydrogenase蛋白亚基,将模拟水解得到的寡肽与乳酸脱氢酶(Lactate Dehydrogenase,LDH)、肌酸激酶(Creatine Kinase,CK)分别进行分子对接,确定与LDH和CK具有超高亲和力的寡肽(对接分数≤-160),并利用Pymol、Ligplot+软件分析寡肽与LDH和CK分子间相互作用机制。结果显示,5种鱼类的7种不同NADH Dehydrogenase蛋白亚基经计算机模拟水解和分子对接后共获得72个超高亲和力寡肽,其中,与LDH、CK均具有超高亲和力的寡肽共36种,对接分数最高且出现次数最多的寡肽是PTIW(-198.762、-204.400)。研究结果为提升鱼类蛋白质的高值化利用以及开发抗疲劳功能食品提供理论参考。 展开更多

关键词 烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶 乳酸脱氢酶 肌酸激酶 抗疲劳 鱼类 计算机模拟

下载PDF 职称材料

大鼠迷走神经损伤对中枢核团神经元的影响 被引量：1

2

作者 周海洋 常业恬 戴茹萍 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期1576-1579,共4页

目的观察大鼠外周迷走神经主干离断后对中枢迷走背核神经元的影响。方法应用尼氏染色和免疫组化检测成熟雄性SD大鼠迷走神经主干离断后中枢背核神经元形态和诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)及烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶(NADPH)表达的变化... 目的观察大鼠外周迷走神经主干离断后对中枢迷走背核神经元的影响。方法应用尼氏染色和免疫组化检测成熟雄性SD大鼠迷走神经主干离断后中枢背核神经元形态和诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)及烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶(NADPH)表达的变化。结果迷走神经离断后1d和5 d右侧背核神经元形态与对照组及同时间点左侧背核相比有明显改变,神经元细胞数量有明显减少;右侧迷走神经离断后5 d大鼠右侧背核区均可见大量iNOS染色阳性神经元;右侧迷走神经离断后5 d大鼠右侧背核区均可见较多NADPH染色阳性神经元。结论大鼠单侧迷走神经离断后可导致同侧迷走中枢背核发生逆行性改变。 展开更多

关键词 迷走神经背核 迷走神经离断术 诱导型一氧化氮合成酶 烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶

下载PDF 职称材料

NDUFS6蛋白生物信息学分析及过表达质粒的构建与鉴定

3

作者 张瑜 孙美琪 +4 位作者 徐方晶 王洁 方克宝 王一帆 何军 《宁夏医科大学学报》 2024年第4期353-359,共7页

目的 应用生物信息学方法分析线粒体呼吸链复合体Ⅰ结构亚基烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶(泛素)铁硫蛋白6(NDUFS6)的理化性质,构建pCV702-NDUFS6过表达质粒并进行鉴定,为进一步研究NDUFS6蛋白功能奠定基础。方法 利用Expasy、UniProtKB、... 目的 应用生物信息学方法分析线粒体呼吸链复合体Ⅰ结构亚基烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶(泛素)铁硫蛋白6(NDUFS6)的理化性质,构建pCV702-NDUFS6过表达质粒并进行鉴定,为进一步研究NDUFS6蛋白功能奠定基础。方法 利用Expasy、UniProtKB、NCBI、SOPMA等生物信息学工具分析NDUFS6蛋白的理化性质、二级结构等;根据NDUFS6 cDNA序列构建携带NDUFS6基因的过表达质粒pCV702-NDUFS6,转染大鼠心肌细胞H9C2,并设置阴性对照(NC)组和相应空载体CON520作为阳性对照(PC)组,经嘌呤霉素筛选后,采用RT-qPCR和Western blot检测NDUFS6 mRNA和蛋白表达水平。结果 NDUFS6蛋白由116个氨基酸组成,理论等电点pI为9.37。蛋白二级结构以无规则卷曲(占50%)为主。酶切鉴定和基因测序结果显示,pCV702-NDUFS6表达质粒构建成功。RT-qPCR和Western blot结果显示,相较于NC组和PC组,过表达组NDUFS6表达水平均上调(P均<0.05)。结论 成功构建了能在心肌细胞H9C2中有效过表达NDUFS6基因的过表达质粒。 展开更多

关键词 烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶(泛素)铁硫蛋白6 生物信息学分析 心肌细胞 质粒构建

下载PDF 职称材料

不同地域株东方次睾吸虫线粒体nad1基因序列分析及种系发育研究

4

作者 陈云虹 谢贤良 +4 位作者 李燕榕 陈宝建 林耀莹 余文武 余海峰 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CSCD 北大核心 2024年第5期668-671,共4页

为研究不同地区东方次睾吸虫线粒体烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶亚单位Ⅰ基因(nad1)的部分序列(pnad1)遗传差异及种系发育情况,取福建、江西麦穗鱼中分离出的东方次睾吸虫囊蚴分别感染鹌鹑30 d后,收集成虫,各取3条成虫分别抽提线粒体基因... 为研究不同地区东方次睾吸虫线粒体烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶亚单位Ⅰ基因(nad1)的部分序列(pnad1)遗传差异及种系发育情况,取福建、江西麦穗鱼中分离出的东方次睾吸虫囊蚴分别感染鹌鹑30 d后,收集成虫,各取3条成虫分别抽提线粒体基因组DNA,PCR扩增pnad1基因并测序。采用BioEdit软件将获得的序列与GenBank中来自黑龙江的东方次睾吸虫(GenBank:KY232061、KY232066、KY232071)和同属相关吸虫线粒体pnad1序列进行比对,分析其序列的种内差异和种间差异。采用MEGA 11.0软件计算不同地区序列遗传距离,用邻接法构建基于线粒体pnad1序列的后睾科吸虫系统进化树。结果显示,来自福建、江西的东方次睾吸虫样品均扩增出500 bp条带,测序结果为523 bp线粒体pnad1基因。序列比对分析结果显示,pnad1序列种内遗传变异率为0~0.8%,种间遗传变异率为12.6%~13.9%。系统进化树结果显示,来自福建、江西与黑龙江株东方次睾吸虫聚于同一分支上,再与胆囊次睾吸虫(GenBank:KT740986)和黄体次睾吸虫(GenBank:KT40991)聚为一个分支。提示线粒体pnad1序列种内相对保守,种间差异较大,可作为种间遗传变异研究的标记。 展开更多

关键词 东方次睾吸虫 线粒体DNA 线粒体烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶亚单位Ⅰ基因 序列分析 种系发育

原文传递

早产大鼠高氧肺损伤组织还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶的动态表达及其意义 被引量：3

5

作者 彭琼玲 常立文 +3 位作者 卢红艳 蔡成 姜娜 李文斌 《实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第14期1047-1049,共3页

目的探讨还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)脱氢酶亚单位1、2、5在早产大鼠高氧肺损伤组织中的动态表达及其意义。方法早产新生大鼠生后1d随机分为高氧和空气组,高氧组持续暴露于850mL/L氧气中,空气组置同一室内常压空气中。分别取二组... 目的探讨还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)脱氢酶亚单位1、2、5在早产大鼠高氧肺损伤组织中的动态表达及其意义。方法早产新生大鼠生后1d随机分为高氧和空气组,高氧组持续暴露于850mL/L氧气中,空气组置同一室内常压空气中。分别取二组大鼠高氧或空气暴露后1、4、7、10和14d肺组织标本,采用HE染色观察肺组织形态学改变,采用RT-PCR法在mRNA水平检测NADH脱氢酶亚单位1、2、5的表达。结果1.高氧暴露1、4d,早产大鼠肺组织形态较空气组无明显改变;高氧暴露7、10d,肺组织渐出现小血管充血扩张,肺泡腔内炎性细胞浸润,肺泡间隔增厚,肺泡数目减少、结构简单化和囊泡化等改变。2.空气组NADH脱氢酶亚单位1(ND1)和亚单位2(ND2)mRNA的表达随日龄增长渐降低,至7d时最低,随后其表达逐渐增高;空气组NADH脱氢酶亚单位5(ND5)mRNA的表达随日龄增长渐降低,至4d时最低,随后其表达逐渐增高。3.与同时间点空气组相比,高氧暴露后1、4和7dND1和ND5mRNA表达显著增强(Pa<0.05),随后其表达渐下降,10、14d时低于空气组,但二者相比差异无显著性意义(Pa>0.05);与同时间点空气组相比,高氧暴露后1、4d ND2 mRNA表达二组间差异无显著性意义(Pa>0.05),7d时较空气组极显著增强(P<0.01),10、14d时较空气组显著降低(Pa<0.05)。结论高氧可导致早产大鼠肺组织NADH脱氢酶表达改变,提示其可能参与高氧肺损伤的病理生理过程。 展开更多

关键词 还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶 大鼠 早产 高氧肺损伤 脱氧核糖核酸 线粒体

下载PDF 职称材料

湖南省不同种类蛇源裂头蚴线粒体pnad1基因序列多态性研究 被引量：3

6

作者 谭磊 王爱兵 +5 位作者 孔小鲜 梁轩 贺峻琳 李洁 胡丹 刘伟 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期448-452,共5页

目的对湖南省不同种类蛇源裂头呦进行形态学与分子生物学鉴定,并分析其线粒体烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶第1亚基基因部分序列(pnad1)多态性。方法对从湖南永州、郴州、岳阳等地区6种常见的野生蛇体内获得的11条裂头勉(来自大王蛇3条、... 目的对湖南省不同种类蛇源裂头呦进行形态学与分子生物学鉴定,并分析其线粒体烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶第1亚基基因部分序列(pnad1)多态性。方法对从湖南永州、郴州、岳阳等地区6种常见的野生蛇体内获得的11条裂头勉(来自大王蛇3条、乌梢蛇2条、眼镜蛇1条、灰鼠蛇2条、滑鼠蛇2条和银环蛇1条)进行形态学鉴定,PCR扩增其线粒体pnad1,并测序,分析其核苷酸序列种内差异,并与已报道的迭宫属绦虫和其他属绦虫的相应序列进行同源性比较;以土耳其斯坦东毕吸虫为外群,用软件MEGA7.0采用邻接法构建系统进化树。结果从不同蛇类分离的11条虫体经形态学鉴定为裂头蚴。PCR扩增出11条裂头蚴分离株的nad1序列,片段大小为648bp,种内遗传差异分别为0~1.4%。与GenBank中收录的欧猬迭宫绦虫分离株序列相似性为97.8%-99.3%,与其它绦虫的序列相似性均低于74.3%。系统进化树结果显示,本研究分离的不同蛇源裂头蚴分离株与已知欧猬迭宫绦虫聚为一支,与微小膜壳绦虫和阔节裂头绦虫亲缘关系较近,与其它绦虫分支相隔较远。结论湖南省不同蛇源裂头蚴分离株均为欧猬迭宫绦虫,但存在一定的遗传变异,且线粒体pnad1基因适合作为分子标记对蛇源裂头蚴进行遗传变异研究。 展开更多

关键词 蛇源裂头蚴 线粒体 线粒体烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶第1亚基基因部分序列基因 系统发育研究

原文传递

ADRP、NADH、HSP70在妊娠高血压疾病患者胎盘组织中的表达及意义 被引量：2

7

作者 李园春 刘耘 《中国计划生育学杂志》 2021年第4期775-779,共5页

目的:探讨脂肪分化相关蛋白(ADRP)、还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)脱氢酶、热休克蛋白70(HSP70)在妊娠高血压疾病患者胎盘组织中的表达及意义。方法:选取2019年2月—2020年2月本院收治的152例妊娠高血压疾病患者为妊娠高血压组,同... 目的:探讨脂肪分化相关蛋白(ADRP)、还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)脱氢酶、热休克蛋白70(HSP70)在妊娠高血压疾病患者胎盘组织中的表达及意义。方法:选取2019年2月—2020年2月本院收治的152例妊娠高血压疾病患者为妊娠高血压组,同期健康产妇110例为健康对照组。免疫组化、实时荧光定量PCR检测胎盘组织中ADRP、NADH、HSP70表达并分析与妊娠高血压疾病、临床特征、妊娠结局的关系及相关性。结果:妊娠高血压组胎盘组织中ADRP、NADH、HSP70 mRNA表达量高于健康对照组,且随着患者疾病加重表达量升高(P<0.05)。ADRP、NADH、HSP70表达与患者年龄、体质指数、孕产次无关(P>0.05),与患者子痫前期家族史、高血压家族史、尿蛋白水平有关(P<0.05)。妊娠高血压组中不良妊娠结局孕妇ADRP、NADH、HSP70 mRNA表达量高于妊娠结局良好孕妇(P<0.05)。ADRP、NADH、HSP70之间均呈正相关(P<0.05)。结论:ADRP、NADH、HSP70在妊娠高血压疾病患者胎盘组织中高表达,且与患者疾病严重程度、妊娠结局有关,临床可根据指标变化早期筛查并评估患者疾病变化预测妊娠结局。 展开更多

关键词 妊娠高血压疾病 胎盘组织 脂肪分化相关蛋白 还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶 热休克蛋白70 妊娠结局

下载PDF 职称材料

还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶染色法术中快速诊断婴幼儿先天性巨结肠的价值 被引量：2

8

作者 赵淑君 李鸿岩 阿米娜.哈山 《新乡医学院学报》 CAS 2018年第4期294-297,共4页

目的探讨还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶(NADPH-d)酶组织化学染色法在术中快速诊断婴幼儿先天性巨结肠的价值。方法选取2015年1月至2017年3月新疆乌鲁木齐儿童医院收治的37例先天性巨结肠患儿术中切除的肠管为观察标本,以同期因坏死... 目的探讨还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶(NADPH-d)酶组织化学染色法在术中快速诊断婴幼儿先天性巨结肠的价值。方法选取2015年1月至2017年3月新疆乌鲁木齐儿童医院收治的37例先天性巨结肠患儿术中切除的肠管为观察标本,以同期因坏死性小肠结肠炎行结肠造瘘术患儿的切除肠管标本作为实验对照,将先天性巨结肠患儿的肠管标本分为扩张段和痉挛段,进行常规冰冻连续切片,采用NADPH-d进行染色(NADPH-染色组),显微镜下观察神经丛及神经节细胞的染色情况,并与术中快速苏木精-伊红(HE)染色法(HE染色组)进行配对比较。结果 37例患儿中,NADPH-d染色诊断阳性36例(97.3%),阴性6例(2.7%);HE染色诊断阳性34例(91.9%),阴性3例(8.1%);2种染色方法均诊断阳性或阴性者分别为34例、1例,另2例NADPH-d染色诊断阳性者HE染色诊断为阴性;2种染色方法的诊断结果比较差异无统计学意义(χ~2=0.059,P>0.05)。NADPH-d染色组扩张段标本低倍镜下可见呈串珠状分布的神经丛样结构,高倍镜下可见细胞质着紫蓝色、细胞核空白无着色的细胞,HE复染显示串珠状分布的紫蓝色组织为肌间神经丛,黏膜下未见着紫蓝色的神经丛;高倍镜下可清楚分辨核大、深染、细胞质略呈蓝色的神经节细胞。NADPH-d染色组痉挛段标本镜下背景清晰,无任何着色,未见神经丛及神经节细胞。HE染色组扩张段标本肌间神经丛内隐约可见神经节细胞,痉挛段肌间及黏膜下可见分布杂乱的神经丛,其间无神经节细胞。结论 NADPH-d染色法诊断婴幼儿先天性巨结肠快速、精确、易操作,NADPH-d法与术中快速HE染色法联用能提高诊断效率,准确判断病变段肠管的切除范围。 展开更多

关键词 先天性巨结肠 快速病理诊断 婴幼儿 还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶染色 苏木精-伊红染色

下载PDF 职称材料

4种终末宿主土耳其斯坦东毕吸虫cox1和nad1基因的序列分析 被引量：2

9

作者 李利 邢继兰 +2 位作者 王春仁 翟延庆 何国声 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期303-307,共5页

收集黑龙江省大庆地区牛源、绵羊源、绒山羊源和山羊源土耳其斯坦东毕吸虫，以SDS-蛋白酶K法抽提其基因组DNA，用特异性引物通过PCR扩增土耳其斯坦东毕吸虫成虫细胞色素C氧化酶亚基1基因（coxl）和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶亚基1基因... 收集黑龙江省大庆地区牛源、绵羊源、绒山羊源和山羊源土耳其斯坦东毕吸虫，以SDS-蛋白酶K法抽提其基因组DNA，用特异性引物通过PCR扩增土耳其斯坦东毕吸虫成虫细胞色素C氧化酶亚基1基因（coxl）和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶亚基1基因（nad1）并进行测序，应用Chromas和DNAStar软件分析扩增产物的变异情况。结果表明，大庆地区4种终末宿主土耳其斯坦东毕吸虫cox1基因均为1125bp，nad1基因均为518bp；且其线粒体基因存在差异，coxl的同源性为99．0％～99．7％，nad1的同源性为98．3％～99．4％。 展开更多

关键词 土耳其斯坦东毕吸虫 细胞色素C氧化酶亚基1基因 烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶亚基1基因 序列分析

下载PDF 职称材料

具有还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶功能的家蚕l(3)neo18基因的克隆与表达特征

10

作者 王更先 鲁延军 +2 位作者 司马杨虎 张升祥 徐世清 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期58-65,共8页

果蝇l(3)neo18基因可以通过P转座子诱发致死突变,编码的蛋白质具有还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)脱氢酶(ND)的功能。利用生物信息学、cDNA末端快速扩增(RACE)和反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)等方法,克隆了家蚕l(3)neo18同源基因,分... 果蝇l(3)neo18基因可以通过P转座子诱发致死突变,编码的蛋白质具有还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)脱氢酶(ND)的功能。利用生物信息学、cDNA末端快速扩增(RACE)和反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)等方法,克隆了家蚕l(3)neo18同源基因,分析了基因结构与表达谱。Bm-l(3)neo18基因(EU826676)的cDNA全长为868 bp,由573 bp的完整开放读码框(ORF)序列、25 bp的5′端非翻译区序列(5′-UTR)和251 bp的3′端非编码区序列(3′-UTR)组成,编码蛋白质为190个氨基酸残基,分子质量22.7 kD,pI 9.60。Bm-l(3)neo18基因由3个外显子和2个内含子组成,定位于家蚕第3染色体,位于nscaf2930的1 203.8-1 205.6 knt。Bm-l(3)neo18蛋白质在1-185氨基酸残基位置为ND的SGDH亚基保守区,在61-83氨基酸残基位置具有一个保守的跨膜区域。采用Clustal W进行多序列比对发现,Bm-l(3)neo18与埃及伊蚊等昆虫ND具有50%以上的蛋白质同源性,ND的保守区域高度一致,NJ法分子进化分析也显示Bm-l(3)neo18与昆虫ND进化上同源。该基因除在家蚕卵期的表达量较低外,在幼虫、蛹和蛾期均有较高表达,且存在组织差异性。 展开更多

关键词 家蚕 l(3)neo18基因 还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶 基因表达

下载PDF 职称材料

德国牧羊犬复孔绦虫种类鉴定和遗传进化分析 被引量：1

11

作者 简永利 于三科 +5 位作者 宋军科 王会宝 高永安 王清艳 李培德 涂宜强 《动物医学进展》 北大核心 2022年第2期54-58,共5页

为了对采集自3只德国牧羊犬小肠内的复孔绦虫进行种类鉴定和遗传进化分析,通过形态学方法对分离到的虫体进行孔雀绿染色后显微镜观察,并进一步基于线粒体部分基因(p cox 1和p nad 1)进行PCR扩增和序列分析。显微镜观察结果表明,分离到... 为了对采集自3只德国牧羊犬小肠内的复孔绦虫进行种类鉴定和遗传进化分析,通过形态学方法对分离到的虫体进行孔雀绿染色后显微镜观察,并进一步基于线粒体部分基因(p cox 1和p nad 1)进行PCR扩增和序列分析。显微镜观察结果表明,分离到的虫体形态和内部结构符合犬复孔绦虫的特征。通过对扩增的靶基因序列及其遗传进化分析发现,3个虫体样本的p cox 1和p nad 1序列完全一致,构建系统发生树显示这些虫体均与Dipylidium caninum(AB732959)位于同一进化支。以上结果提示,分离到的绦虫种为犬复孔绦虫(D.caninum)。研究结果为宠物复孔绦虫病的诊断和防控奠定了基础。 展开更多

关键词 犬复孔绦虫 形态 细胞色素C氧化酶Ⅰ亚基 烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶Ⅰ亚基 序列分析

下载PDF 职称材料

福建省蛇源裂头蚴的分子鉴定及遗传分析 被引量：1

12

作者 宋肇程 陈育琪 +4 位作者 黄潇航 魏坤亚 张龙 殷光文 黄志坚 《动物医学进展》 北大核心 2021年第1期37-45,共9页

裂头蚴病是由于裂头蚴感染引起的一种人兽共患病,为了对福建省养殖蛇类的裂头蚴感染情况进行调查并鉴定虫种,对采自福建省三明市、漳州市和南平市等地蛇场的蛇类进行剖检,分离得到了裂头蚴,记录寄生部位和数量。提取裂头蚴虫体基因组,采... 裂头蚴病是由于裂头蚴感染引起的一种人兽共患病,为了对福建省养殖蛇类的裂头蚴感染情况进行调查并鉴定虫种,对采自福建省三明市、漳州市和南平市等地蛇场的蛇类进行剖检,分离得到了裂头蚴,记录寄生部位和数量。提取裂头蚴虫体基因组,采用PCR对虫体ITS、NAD4和COX3基因进行了扩增。同时,将扩增得到的目的基因连接到pEASY-Blunt Simple载体上,转化Trans I-T1感受态细胞,培养得到单菌落,对菌落进行扩增测序。将测序结果与NCBI公布的裂头蚴ITS、NAD4和COX3基因序列进行比对分析,测定突变率和位点,并且进行样本之间的同源性分析和测定遗传距离。结果发现,三明市、漳州市和南平市某蛇场裂头蚴的感染率分别为75%、20%和0。分离到的裂头蚴ITS基因序列长为1360 bp~1380 bp,与NCBI中Spirometra erinaceieuropaei(FJ886747.1)的ITS基因同源性为95.70%~98.68%,样本之间平均遗传距离为0.0016;分离到的裂头蚴NAD4基因序列长为356 bp~650 bp,与NCBI中Spirometra erinaceieuropaei(HM475076.1)的NAD4基因同源性为96.73%~100%,样本之间平均遗传距离为0.0041;分离到的裂头蚴COX3基因序列总长为379 bp~408 bp,与NCBI中Spirometra erinaceieuropaei(HM475033.1)的COX3基因同源性为98.94%~100%,样本之间平均遗传距离为0.0038。结果表明,此次分离得到的裂头蚴虫体的ITS基因、NAD4基因和COX3基因与欧猥迭宫绦虫裂头蚴同源性较近,证明此次分离的蛇源裂头蚴属于欧猥迭宫绦虫裂头蚴。同时,经过对各虫体间NAD4和COX3基因分析发现,不同地区的裂头蚴虫体在进化树上存在分支。 展开更多

关键词 蛇源裂头蚴 内部转录间隔区 烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶亚单位4 线粒体细胞色素C氧化酶第Ⅲ亚基

下载PDF 职称材料

高浓度氧对早产大鼠肺组织中还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶亚单位1表达的影响

13

作者 彭琼玲 常立文 +3 位作者 卢红艳 李文斌 蔡成 姜娜 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期232-235,共4页

目的探讨高浓度氧暴露对早产大鼠肺组织中还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶亚单位1(ND1)表达的影响。方法早产SD新生大鼠生后1 d随机分为高氧组和空气组,高氧组持续暴露于≥85%氧气中,空气组置于同一室内常压空气中。分别取两组大鼠高... 目的探讨高浓度氧暴露对早产大鼠肺组织中还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶亚单位1(ND1)表达的影响。方法早产SD新生大鼠生后1 d随机分为高氧组和空气组,高氧组持续暴露于≥85%氧气中,空气组置于同一室内常压空气中。分别取两组大鼠高氧或空气暴露后1、4、7、10和14 d肺组织标本,采用免疫组织化学和Western blot方法检测ND1蛋白的表达,半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测ND1 mRNA的表达。结果①高氧组和空气组各时间点均有ND1蛋白表达;与空气组相比,高氧组在1、4和7 d ND1蛋白表达增高,随后其表达下降。②与同时间点空气组相比,高氧暴露后1、4和7 d ND1 mRNA表达显著增高(P<0.05),其后ND1 mRNA表达逐渐下降,10 d和14d时低于空气组,但两者相比差异无显著性意义(P>0.05)。③ND1蛋白的表达变化趋势与ND1 mRNA的表达变化趋势一致。结论高氧导致早产大鼠肺组织ND1表达改变,提示ND1可能参与了高氧肺损伤的病理生理过程。 展开更多

关键词 高氧 早产 还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶亚单位1 肺损伤

下载PDF 职称材料

醌烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸脱氢酶1和血红素氧合酶1 mRNA及蛋白表达与燃煤型砷中毒肝损伤关系探讨 被引量：1

14

作者 王祺 张爱华 +1 位作者 姚茂琳 罗鹏 《中华地方病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期21-25,共5页

目的了解贵州省燃煤型砷中毒病区砷暴露者外周血中核因子E2相关因子2（Nff2）诱导的下游醌烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADH）脱氢酶1（NQ01）和血红素氧合酶1（HO-1）mRNA及蛋白表达情况，探讨其在燃煤型砷中毒肝损伤发生发展中的作用... 目的了解贵州省燃煤型砷中毒病区砷暴露者外周血中核因子E2相关因子2（Nff2）诱导的下游醌烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADH）脱氢酶1（NQ01）和血红素氧合酶1（HO-1）mRNA及蛋白表达情况，探讨其在燃煤型砷中毒肝损伤发生发展中的作用。方法以贵州省兴仁县燃煤型砷中毒病区交乐村和长庆村为调查点，在健康体检基础上选择161例砷暴露者为砷暴露组，按照《地方性砷中毒诊断标准》（WS／T211-2001）分为病区非病例组（21例）和病例组（140例）。病例组参照《职业性中毒性肝病诊断标准》（GBZ59-2010）进一步分为轻度肝病组（52例）、中重度肝病组（36例），其余病例为无明显肝病组（52例）；同时以相邻的非病区村45例居民作为对照组；采集研究对象外周血，实时荧光定量PCR检测NQ01和HO-1 mRNA相对表达量，酶联免疫吸附试验（ELISA）检测NQ01和HO-1蛋白表达水平。结果①NQO1和HO-1 mRNA表达结果：随砷暴露人群肝损伤程度的加重，外周血NQO1和HO-1 mRNA相对表达量逐渐升高（F=5．548、10．961，P均〈0．05）。其中，轻度肝病组NQO1 mRNA相对表达量（中位数，0．918）高于对照组（0．576，P〈0．05），中重度肝病组NQO1 mRNA相对表达量（1．243）高于对照组、病区非病例组（0．653）、无明显肝病组（0．636）、轻度肝病组（P均〈0．05）；病区非病例组、无明显肝病组、轻度肝病组及中重度肝病组HO-1 mRNA相对表达量（1．059、1．225、11553、1．604）均高于对照组（0．767，P均〈0．05）；轻度肝病组HO-1 mRNA相对表达量高于病区非病例组（P〈0．05）；中重度肝病组HO-1 mRNA相对表达量高于病区非病例组、无明显肝病组（P均〈0．05）。②NQO1和HO-1蛋白表达结果：随砷暴露人群肝损伤程度的加重，血清中NQO1和HO-1蛋白表达水平逐渐升高（F=19．685、17．725，P均〈0．05）。� 展开更多

关键词 砷中毒 煤 肝 醌烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸脱氢酶1 血红素氧合酶1 氧化损伤

原文传递

高浓度氧暴露对早产鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸表达的影响 被引量：1

15

作者 黄光焰 常立文 +4 位作者 汪鸿 蔡成 刘伟 李文斌 陈燕 《实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期516-518,共3页

目的探讨高浓度氧(高氧)暴露对早产鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(AECⅡ)还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)-脱氢酶亚基4(ND4)表达的影响。方法原代培养早产Sprague-Dawley(SD)大鼠AECⅡ,待其在含50mL/L二氧化碳(CO2)培养箱中生长至接近融合状态... 目的探讨高浓度氧(高氧)暴露对早产鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(AECⅡ)还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)-脱氢酶亚基4(ND4)表达的影响。方法原代培养早产Sprague-Dawley(SD)大鼠AECⅡ,待其在含50mL/L二氧化碳(CO2)培养箱中生长至接近融合状态时随机分为高氧组和空气组。高氧组持续暴露于常压高浓度氧中,氧体积分数>900mL/L,CO2体积分数为50mL/L;空气组仍置于含50mL/L CO2培养箱中。二组分别于高氧或空气暴露6、12、24h提取细胞RNA,采取半定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定ND4 mRNA的表达;采用免疫细胞化学染色法检测细胞爬片ND4蛋白的表达。结果与空气组比较,免疫细胞化学结果显示高氧暴露6、12h ND4的表达无显著性差异(Pa>0.05),高氧暴露24h ND4的表达显著减弱(P<0.05);RT-PCR检测显示高氧暴露6h ND4 mRNA表达无显著性差异(P>0.05),高氧暴露12、24h ND4 mRNA表达显著减弱(Pa<0.05)。结论高氧暴露下调早产SD大鼠AECⅡ ND4 mRNA和蛋白水平的表达,这种改变可能参与高氧肺损伤的发病过程。 展开更多

关键词 高氧症 鼠 早产 肺泡Ⅱ型上皮细胞 还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸-脱氢酶亚基4

下载PDF 职称材料