HPV16E7抗原的HLA-A2限制性细胞毒性T淋巴细胞表位的筛选与鉴定 被引量：6

1

作者 徐云升 郝飞 +3 位作者 宋志强 钟白玉 郝进 叶庆佾 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期283-284,共2页

目的筛选和鉴定人工合成的人乳头瘤病毒16型E7抗原人白细胞抗原A2分子限制性细胞毒性T细胞预测表位。方法对预测的E7抗原人白细胞抗原A2分子限制性细胞毒性T细胞(CTL)表位运用标准Fmoc方案进行合成与纯化,采用标准51Cr释放试验检测特异... 目的筛选和鉴定人工合成的人乳头瘤病毒16型E7抗原人白细胞抗原A2分子限制性细胞毒性T细胞预测表位。方法对预测的E7抗原人白细胞抗原A2分子限制性细胞毒性T细胞(CTL)表位运用标准Fmoc方案进行合成与纯化,采用标准51Cr释放试验检测特异性CTL诱导活性。结果筛选并鉴定出E711-19(YMLDLQPET)和E749-57(RAHYNIVTF)2条人乳头瘤病毒16型E7抗原人白细胞抗原A2分子限制性CTL表位。结论E711-19(YMLDLQPET)和E749-57(RAHYNIVTF)抗原性较强,有可能作为HPV感染治疗用肽疫苗的候选表位。 展开更多

关键词 HPV16 E7抗原 HLA-A2 限制性细胞毒性 T淋巴细胞表位 筛选 鉴定 检测 人乳头瘤病毒16型

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基于免疫信息学方法设计针对猪急性腹泻综合征冠状病毒S、M及E蛋白的多表位疫苗 被引量：6

2

作者 李世念 刘婉宁 +1 位作者 陈亚萍 王金涛 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2022年第3期1057-1066,共10页

【目的】设计针对猪急性腹泻综合征冠状病毒(Swine acute diarrhea syndrome coronavirus,SADS-CoV)S、M及E蛋白的多表位疫苗。【方法】本研究选用IEDB预测SADS-CoV S、M及E蛋白T淋巴细胞主要组织相容性复合体Ⅰ(MHCⅠ)类分子结合表位;... 【目的】设计针对猪急性腹泻综合征冠状病毒(Swine acute diarrhea syndrome coronavirus,SADS-CoV)S、M及E蛋白的多表位疫苗。【方法】本研究选用IEDB预测SADS-CoV S、M及E蛋白T淋巴细胞主要组织相容性复合体Ⅰ(MHCⅠ)类分子结合表位;用NetMHCIIpan 4.0 Serve预测T淋巴细胞MHCⅡ类分子结合表位;用Immunomedicine Group、IEDB预测B淋巴细胞表位。将各个服务器预测结果筛选出重叠表位区域作为优势表位,运用IEDB、AllerTOP v 2.0 Servers筛选出高保守性、非致敏性的优势表位区域,通过柔性linker串联成多表位疫苗。对构建的多表位疫苗进行抗原性、理化性质、N-糖基化位点、二级结构和三级结构预测。使用分子对接评估多表位疫苗与免疫受体的结合能力,最后进行基因克隆。【结果】经筛选后的高保守性、非致敏性优势表位构建的多表位疫苗相对分子质量为35.30 ku,为稳定亲水蛋白,具有良好的抗原性,存在1个N-糖基化位点,在二级结构中α-螺旋、β-折叠、无规则卷曲和β-转角分别占22.11%、20.35%、50.88%和6.67%。三级结构Ramachandran作图显示优势区域中含有残基数占到90.00%,进行细化后优势区域的残基数增加到91.92%,三级结构突出表位作图也证明多表位疫苗具有良好的免疫原性,分子对接表明多表位疫苗与TLR3具有高亲和力。经密码子优化、反向翻译和基因克隆确保设计的多表位疫苗在大肠杆菌K12表达系统中高效、稳定的表达。【结论】构建的多表位疫苗抗原可有效表达并可能诱导强烈的T细胞和B细胞免疫应答。本研究为SADS-CoV多表位疫苗的设计提供了一种新的方法,为SADS-CoV多表位疫苗的研发提供了理论依据及数据支持。 展开更多

关键词 猪急性腹泻综合征冠状病毒(SADS-CoV) 结构蛋白 免疫信息学方法 T淋巴细胞表位 B淋巴细胞表

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十肽表位HPV-16E7_(11-20)氨基酸置换修饰的研究 被引量：6

3

作者 欧荣英 徐云升 +3 位作者 林治华 郝飞 倪兵 吴玉章 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第11期990-993,共4页

目的采用氨基酸置换对人乳头状瘤病毒16型E7抗原的人白细胞抗原A2分子限制性细胞毒性T细胞表位HPV-16E7_(11-20)进行修饰和鉴定。方法运用量化模体方案对置换后的多肽与人白细胞抗原A2分子的结合系数进行比较,以分子模拟方法确定合成序... 目的采用氨基酸置换对人乳头状瘤病毒16型E7抗原的人白细胞抗原A2分子限制性细胞毒性T细胞表位HPV-16E7_(11-20)进行修饰和鉴定。方法运用量化模体方案对置换后的多肽与人白细胞抗原A2分子的结合系数进行比较,以分子模拟方法确定合成序列,采用标准Fmoc方案进行合成与纯化多肽以及标准^(51)Cr释放试验检测特异性细胞毒性T细胞诱导活性。结果修饰多肽符合人白细胞抗原A2分子限制性细胞毒性T细胞的表位要求,十肽YLLDLQPEVT具有特异性细胞毒性T细胞诱导活性。结论修饰表位YLLDLQPEVT具有更好的结合力和较强的抗原性,可以代替原有序列E7_(11-20)(YMLDLQPETT)作为人乳头状瘤病毒感染治疗性肽疫苗分子设计的新表位。 展开更多

关键词 人乳头状瘤病毒 E7抗原 T淋巴细胞表位 分子修饰

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猪水泡病病毒结构蛋白基因的克隆及其蛋白二级结构和淋巴细胞表位的预测 被引量：1

4

作者 郑海学 刘湘涛 +4 位作者 尚佑军 刘光清 白兴文 罗静初 谢庆阁 《中国兽医科技》 CSCD 北大核心 2005年第11期843-850,共8页

以免疫信息学和反向疫苗学为理论根据,利用RT-PCR法获得了猪水泡病病毒(SVDV)HK/70株的基因组序列并测序,应用生物信息学相关软件和方法,对SVDV结构蛋白的二级结构的不同方面及其抗原特异性淋巴细胞表位进行了预测,综合评价了SVDV结构... 以免疫信息学和反向疫苗学为理论根据,利用RT-PCR法获得了猪水泡病病毒(SVDV)HK/70株的基因组序列并测序,应用生物信息学相关软件和方法,对SVDV结构蛋白的二级结构的不同方面及其抗原特异性淋巴细胞表位进行了预测,综合评价了SVDV结构蛋白的抗原特异性细胞表位,并计算出一些潜在的抗原位点。结果表明,VP1蛋白含有的细胞优势抗原表位最多,但其他结构蛋白也含有抗原特异性淋巴细胞表位,有的甚至有可能成为优势抗原表位或对优势抗原表位有协同作用。 展开更多

关键词 猪水泡病病毒 结构蛋白 淋巴细胞表位 二级结构 反向遗传学 反向疫苗学

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实验性肺炎球菌荚膜多糖-辅助性T淋巴细胞表位结合疫苗的研制

5

作者 林云（摘） 王建华 单璞（校） 《国外医学（预防．诊断．治疗用生物制品分册）》 2005年第5期228-229,共2页

为了讨论小分子合成肽能否替代大分子细菌蛋白用于疫苗制备,美国Epimmune公司Alexander等将含13个氨基酸的全人白细胞抗原(HLA)-同向重复(DR)表位(PADRE)与肺炎球菌荚膜多糖(PS)结合制成糖结合疫苗(PADRE-PS),评估了PADRE作为糖结合疫... 为了讨论小分子合成肽能否替代大分子细菌蛋白用于疫苗制备,美国Epimmune公司Alexander等将含13个氨基酸的全人白细胞抗原(HLA)-同向重复(DR)表位(PADRE)与肺炎球菌荚膜多糖(PS)结合制成糖结合疫苗(PADRE-PS),评估了PADRE作为糖结合疫苗蛋白载体的可能性. 展开更多

关键词 肺炎球菌荚膜多糖 T淋巴细胞表位 糖结合疫苗 Epimmune公司 实验性 ALEXANDER 研制 人白细胞抗原 疫苗制备

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人类白细胞抗原限制性乙型肝炎病毒特异性细胞毒性T淋巴细胞表位研究进展 被引量：10

6

作者 于乐成 侯金林 《中华肝脏病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第10期797-800,共4页

不同个体在乙型肝炎病毒(HBV)感染后的免疫学和临床转归不同,这与宿主的人类白细胞抗原(human leukocyte antigens,HLA)等免疫遗传学背景和HBV自身特性均相关.HLA-Ⅰ类基因的型别和HBV抗原的序列特点,共同决定某一宿主的抗原呈递细胞(an... 不同个体在乙型肝炎病毒(HBV)感染后的免疫学和临床转归不同,这与宿主的人类白细胞抗原(human leukocyte antigens,HLA)等免疫遗传学背景和HBV自身特性均相关.HLA-Ⅰ类基因的型别和HBV抗原的序列特点,共同决定某一宿主的抗原呈递细胞(antigen-presenting cell,APC)能够引起何种HLA-Ⅰ限制性HBV特异性细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocytes,CTL)应答,后者是决定宿主能否有效清除肝细胞内HBV的关键因素[1].CTL表位是诱导特异性CTL克隆性增殖、分化和发挥效应的最重要的激发因素,近年来倍受重视[2].本文阐述了HBV CTL表位研究的意义、当前研究所取得的主要成绩和不足,并对表位鉴定方法的进展进行了简评. 展开更多

关键词 HLA抗原 肝炎病毒 乙型 T淋巴细胞 细胞 毒性 表位 乙型肝炎病毒(HBV) 人类白细胞抗原 细胞毒性T淋巴细胞表位 病毒特异性

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肿瘤抗原MAGE-A3新的HLA-A2限制性CTL表位的发现与鉴定 被引量：7

7

作者 贾正才 吴玉章 +4 位作者 万瑛 周伟 王祥智 邹丽云 唐艳 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期26-29,共4页

目的:鉴定肿瘤抗原MAGE－A3新的HLA-A2限制性CTL表位。方法:采用CTL表位预测的基序法与二级锚点相结合预测 MAGE-A3的 HLA-A2限制性CTL表位;用计算机分子模拟进行表位的初步筛选;以标准51Cr释放试验检测特异性CTLs诱导活性。结果:在所... 目的:鉴定肿瘤抗原MAGE－A3新的HLA-A2限制性CTL表位。方法:采用CTL表位预测的基序法与二级锚点相结合预测 MAGE-A3的 HLA-A2限制性CTL表位;用计算机分子模拟进行表位的初步筛选;以标准51Cr释放试验检测特异性CTLs诱导活性。结果:在所筛选的4个候选CTL表位中,MAGE-A3201-209可在体外有效诱导特异性CTLs的产生,杀伤靶细胞。结论:MAGE-A3201-209为肿瘤抗原MAGE-A3的新的HLA-A2限制性CTL表位。为基于MAGE-A3的肿瘤治疗性多肽疫苗的设计、研究奠定了基础。 展开更多

关键词 肿瘤抗原 MAGE-A3 黑色素瘤 细胞毒性T淋巴细胞表位 鉴定

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蓝舌病病毒VP7蛋白的B细胞表位预测 被引量：6

8

作者 杜杰 尹惠琼 +3 位作者 杨姝 马玉媛 韦平 章金刚 《中国动物传染病学报》 CAS 2013年第1期29-36,共8页

根据前期试验中测得的蓝舌病病毒VP7蛋白的基因序列和推导的氨基酸序列，利用DNAStar软件和Biosun软件进行生物信息学预测，以单参数（亲水性、可及性、柔韧性、抗原性）预测为基础，结合二级结构预测来综合分析蓝舌病病毒VP7蛋白的B细... 根据前期试验中测得的蓝舌病病毒VP7蛋白的基因序列和推导的氨基酸序列，利用DNAStar软件和Biosun软件进行生物信息学预测，以单参数（亲水性、可及性、柔韧性、抗原性）预测为基础，结合二级结构预测来综合分析蓝舌病病毒VP7蛋白的B细胞表位。比较两种软件的预测结果发现，在蓝舌病病毒VP7蛋白的381个氨基酸序列中，第81～85、198～202、235～239、253～257区域有较好的亲水性、表面可及性和较高的抗原指数，并且在二级结构上含有易形成抗原袁位的转角和无规则卷曲，最有可能为蓝舌病病毒VP7蛋白的B细胞线性优势表位。上述预测和判定结果表明，在蓝舌病病毒VP7蛋白序列中存在优势B细胞线型表位，为进一步合成多肽并分析已获得的VP7蛋白单抗的结合表位奠定了基础。 展开更多

关键词 蓝舌病毒VP7蛋白 B淋巴细胞表位 二级结构 预测

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人乳头瘤病毒16E7限制性细胞毒性T淋巴细胞表位的穿膜肽疫苗设计及体外免疫学研究 被引量：6

9

作者 尹锐 郝飞 +1 位作者 郝进 杨希川 《临床皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第12期807-809,共3页

目的:利用穿膜肽人免疫缺陷病毒(HIV)-Tat49-57的穿膜能力,设计穿膜肽人乳头瘤病毒(HPV)16E7限制性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)表位(第49～57位氨基酸)的融合肽疫苗,并在体外研究其诱导特异性CTL的应答能力。方法:应用多肽固相合成技术,分... 目的:利用穿膜肽人免疫缺陷病毒(HIV)-Tat49-57的穿膜能力,设计穿膜肽人乳头瘤病毒(HPV)16E7限制性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)表位(第49～57位氨基酸)的融合肽疫苗,并在体外研究其诱导特异性CTL的应答能力。方法:应用多肽固相合成技术,分别合成含HIVTat49-57和人类白细胞抗原(HLA)-A2.1限制性CTL优势表位HPV16E749-57的18肽,和该CTL表位的9肽,并用一无关肽作对照,在体外用乳酸脱氢酶(LDH)细胞毒性试验分别检测了上述18肽和9肽在HLA-A2阳性健康者外周血单个核细胞(PBMC)中诱导的表位E749-57的特异性CTL活性。结果:经质谱分析,上述多肽成功合成,纯度均在95%以上。与9肽相比,18肽能在体外诱导出明显增强的特异性CTL活性(P<0.05)。结论:在HPV16E7HLA-A2.1限制性CTL表位(49～57)的N-末端加上HIV-Tat49-57序列,不会影响表位的提呈效率,而且在体外能有效激发针对E749-57特异性的CTL应答,为新型抗肿瘤及细胞内感染的多肽疫苗设计提供了新思路。 展开更多

关键词 穿膜肽 人免疫缺陷病毒-Tat49-57 细胞毒性T淋巴细胞表位 人乳头瘤病毒16 肽疫苗

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外源辅助T淋巴细胞表位影响HBVS基因DNA免疫的体液免疫应答 被引量：3

10

作者 彭晓谋 谢冬英 +3 位作者 顾琳 黄仰甦 高志良 姚集鲁 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期232-236,共5页

目的　探讨外源辅助T淋巴细胞 (HTL)表位对HBVS基因体液免疫应答的影响。方法选用 2种通用HTL表位 ,破伤风类毒素的氨基酸残基 (aa) 830 843片段 (TTE)和人工HTL表位(PADRE) ,以及 3种特异性HTL表位 ,结核杆菌热休克蛋白 6 5的aa1 2 0... 目的　探讨外源辅助T淋巴细胞 (HTL)表位对HBVS基因体液免疫应答的影响。方法选用 2种通用HTL表位 ,破伤风类毒素的氨基酸残基 (aa) 830 843片段 (TTE)和人工HTL表位(PADRE) ,以及 3种特异性HTL表位 ,结核杆菌热休克蛋白 6 5的aa1 2 0片段 (TBE)、风疹蛋白E2 4的aa5 4 6 5片段 (ME)和沙眼衣原体热休克蛋白 6 0的aa35 48片段 (CE) ,以单个表位或复合表位形式插入HBVS基因的翻译起始密码下游而构建成真核表达载体。 10 0 μg重组载体DNA免疫BALB/c小鼠 ,3周加强 1次 ,共 3次 ,第三次加强接种后 1月取血采用Abbott试剂盒检测抗 HBs。结果　HBVS基因真核表达载体pHB和 6种外源HTL表位HBVS基因真核表达载体pHB TBE、pHB PADRE、pHB TTE、pHB MTE2、pHB MTE3和pHB MTE5构建成功 ,DNA免疫的抗 HBs水平 (IU/L)分别为 10± 5 ,5± 5 ,49±7,2 9± 6 ,16± 8,2 3± 7和 2 8± 8。单个表位中 ,TTE和PADRE具有良好的免疫促进作用 ,而TBE无促进作用。复合表位均有不同程度的免疫增强作用。结论　部分外源HTL表位对HBVS基因的体液免疫应答有促进作用 ,复合表位中的单个表位间的促进作用无协同或迭加效果。表位PADRE可能用于新型高效乙肝疫苗的研制 。 展开更多

关键词 外源辅助T淋巴细胞表位 HBV S基因 DNA免疫 体液免疫应答 乙肝疫苗

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抗人Toll样受体4合成肽单克隆抗体的制备与鉴定 被引量：2

11

作者 杨清武 朱佩芳 +2 位作者 王正国 吕凤林 蒋建新 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期11-12,共2页

在对Toll样受体 4(TLR4)B细胞优势表位预测的基础上 ,合成该B细胞表位多肽 ,并以此为抗原免疫BABL/C小鼠 ,经鼠 鼠杂交 ,ELISA筛选 ,有限稀释克隆化 ,得到一株分泌抗TLR4合成肽的杂交瘤细胞株B4,腹水效价为 1∶10 0 0 0 0。其免疫球蛋白... 在对Toll样受体 4(TLR4)B细胞优势表位预测的基础上 ,合成该B细胞表位多肽 ,并以此为抗原免疫BABL/C小鼠 ,经鼠 鼠杂交 ,ELISA筛选 ,有限稀释克隆化 ,得到一株分泌抗TLR4合成肽的杂交瘤细胞株B4,腹水效价为 1∶10 0 0 0 0。其免疫球蛋白为IgG2 ,k型。ELISA鉴定表明该抗体能识别TLR4+ 性细胞 ,Westernblot分析显示在分子量约 90kD处呈现单一免疫色带。 展开更多

关键词 TOLL样受体4 B淋巴细胞表位 单克隆抗体

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肿瘤抗原MAGE-12新的HLA-A2限制性细胞毒性T细胞表位的预测 被引量：3

12

作者 张秀敏 隋延仿 +2 位作者 罗二平 黄亚渝 曲萍 《现代肿瘤医学》 CAS 2005年第2期149-151,共3页

目的　预测黑色素瘤抗原MAGE-12的HLA-A2限制性CTL表位。方法　采用SYFPEITHI超基序远程预测系统与量化基序多项式法、延展基序联合应用,筛选MAGE-12抗原HLA-A0201限制性CTL表位。结果　共预测出5个MAGE-12抗原HLA-A2限制性CTL表位。结... 目的　预测黑色素瘤抗原MAGE-12的HLA-A2限制性CTL表位。方法　采用SYFPEITHI超基序远程预测系统与量化基序多项式法、延展基序联合应用,筛选MAGE-12抗原HLA-A0201限制性CTL表位。结果　共预测出5个MAGE-12抗原HLA-A2限制性CTL表位。结论　超基序法与量化基序,延展基序联合应用可以提高预测效率,为实验方法探索MAGE-12的表位提供有用线索。 展开更多

关键词 肿瘤抗原 MAGE-12 细胞毒性T淋巴细胞表位 预测

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人乳头瘤病毒16型E6和E7细胞毒性T淋巴细胞表位的预测与筛选

13

作者 崔湘杰 苏羽豪 +3 位作者 朱兰芳 史磊 史荔 陶玉芬 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 北大核心 2024年第19期1163-1169,共7页

目的以人乳头瘤病毒16型(HPV16)E6和E7癌蛋白为靶抗原,通过生物信息学方法及小鼠体内实验,筛选出能被人与鼠主要组织相容性复合体(MHC)共呈递的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)优势表位。方法在美国国家生物技术信息中心(NCBI)网站上获取HPV16 E... 目的以人乳头瘤病毒16型(HPV16)E6和E7癌蛋白为靶抗原,通过生物信息学方法及小鼠体内实验,筛选出能被人与鼠主要组织相容性复合体(MHC)共呈递的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)优势表位。方法在美国国家生物技术信息中心(NCBI)网站上获取HPV16 E6和E7的参考蛋白序列,通过免疫表位数据库(IEDB)网站中的MHC-Ⅰ加工和MHC-Ⅰ结合方法,预测出人类白细胞抗原(HLA)-A*02:01、HLA-A*11:01、HLA-A*24:02限制性和C57BL/6小鼠H-2b限制性的CTL表位,根据评分筛选出两者共同呈递的CTL表位。同时,构建表达HPV16 E6和E7的DNA疫苗(pVAX1-E6E7Com),免疫小鼠后分离脾淋巴细胞,以预测得到的CTL表位作为抗原,与小鼠脾淋巴细胞共培养40 h后,通过酶联免疫斑点法来评估各CTL表位诱导的特异性T细胞免疫应答的能力。所有实验数据均通过单因素方差分析和Dunnett t检验进行组间比较。结果预测筛选获得10条人鼠共呈递的抗原肽。酶联免疫斑点法检测结果表明,实验组的每种表位均能诱导小鼠淋巴细胞产生特异性免疫应答,与阳性参考肽(E7-^(49)RAHYNIVTF^(57))相比,实验组中每种表位差异均无统计学意义(均P>0.05),其中E6-^(38)VYCKQQLL^(45)(175.60±52.88)、E6-^(49)VYDFAFRDL^(57)(202.20±108.50)、E6-^(86)YCYSLYGTTL^(95)(157.00±44.46)和E7-^(77)RTLEDLLMGTL^(87)(162.20±49.35)激发的特异性斑点数比阳性参考肽E7-^(49)RAHYNIVTF^(57)(156.20±97.40)的斑点数量多。结论通过这种生物信息学方法预测和筛选得到的10个CTL表位均具有一定的免疫原性,可作为HPV16型治疗性疫苗的优势候选表位。 展开更多

关键词 人乳头瘤病毒16型 E6 E7 细胞毒性T淋巴细胞表位

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KDEL修饰的HSV-2CD8^+T细胞表位促进CTL效应的研究 被引量：2

14

作者 罗萍 毛旭虎 赵莉莉 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 2005年第4期252-255,共4页

目的:研究赖氨酸天冬氨酸谷氨酸亮氨酸(Lys-Asp-GluLeu,KDEL)修饰的2型单纯疱疹病毒(herpessimplexvirustype2,HSV2)CD8+T细胞表位促进细胞毒T淋巴细胞(cytotoxicityTlymphocyte,CTL)效应。方法:将雄性C57BL/6小鼠随机分为5组,每组5只,... 目的:研究赖氨酸天冬氨酸谷氨酸亮氨酸(Lys-Asp-GluLeu,KDEL)修饰的2型单纯疱疹病毒(herpessimplexvirustype2,HSV2)CD8+T细胞表位促进细胞毒T淋巴细胞(cytotoxicityTlymphocyte,CTL)效应。方法:将雄性C57BL/6小鼠随机分为5组,每组5只,用各抗原肽免疫C57BL/6小鼠,采用3HTdR掺入法检测淋巴细胞增殖反应、标准4h51Cr释放试验检测CD8+T细胞特异性CTL效应,观察HSV2CD8+T细胞表位(SSIEFARL,S1)、KDEL修饰的HSV-2CD8+T细胞表位(SSIEFARL-KDEL,S1-KDEL)、4拷贝串联的CTL表位[(SSIEFARL)4,S4]及KDEL修饰的串联CTL表位[(SSIEFARL)4KDEL,S4-KDEL]的特异性细胞免疫应答。结果:3HTdR掺入试验中,S4组和S4KDEL组cpm值显著高于对照组和S1组、S1KDEL组(P<0.05);S4KDEL组的cpm值显著高于S4组(P<0.05);S1组和S1KDEL组与对照组比较,差异无显著性(P>0.05);S1组与S1KDEL组比较,cmp值亦无显著性差异(P>0.05)。以S1致敏的EL4细胞为靶细胞的杀伤实验中,S4和S4KDEL组诱导的CTL活性明显高于对照组、S1组及S1KDEL组(P<0.05);S4KDEL组诱导的CTL活性明显高于S4组(P<0.05),S1组和S1KDEL组与对照组比较,差异无显著性(P>0.05);S1组与S1KDEL组比较,差异亦无显著性(P>0.05);以EL4细胞为靶细胞的实验中,实验组的杀伤率均在10%以下,与对照组? 展开更多

关键词 2型单纯疱疹病毒 细胞毒T淋巴细胞表位 赖氨酸-天冬氨酸-谷氨酸-亮氨酸基序 细胞毒T淋巴细胞效应

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四川呼吸道合胞病毒F蛋白基因序列和抗原表位变异分析 被引量：2

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作者 张梦妍 廖虹瑜 +3 位作者 范雪佳 鲁蕾 裴晓方 许欣 《四川大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期175-178,共4页

目的分析呼吸道合胞病毒(RSV)四川分离株F蛋白基因序列,探讨F蛋白基因和抗原表位变异情况。方法 RT-PCR方法扩增F蛋白近全长序列并测序,分析核苷酸和氨基酸变异位点,比较不同亚型和基因型间中和表位、细胞毒性T淋巴细胞(CTL)表位基因组... 目的分析呼吸道合胞病毒(RSV)四川分离株F蛋白基因序列,探讨F蛋白基因和抗原表位变异情况。方法 RT-PCR方法扩增F蛋白近全长序列并测序,分析核苷酸和氨基酸变异位点,比较不同亚型和基因型间中和表位、细胞毒性T淋巴细胞(CTL)表位基因组成。结果 10株RSV F蛋白的核苷酸和氨基酸P-distance分别为0.102±0.005和0.058±0.006,中和表位47F和L4在亚型间高度保守,而RS-348和7C2在亚型内保守,CTL表位HLA B*57、HLA A*01和HLA Cw*12也是亚型内高度保守,亚型间存在个别氨基酸变异。结论 RSV四川分离株F蛋白基因保守度较高,抗原表位在亚型内保守,已在A亚型上识别的CTL表位可能在B亚型内不能识别。 展开更多

关键词 呼吸道合胞病毒 F蛋白 细胞毒性T淋巴细胞表位 中和表位

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肿瘤相关蛋白EIF4G1亚型的B细胞表位预测 被引量：1

16

作者 曹廷虎 常文军 +2 位作者 胡锦新 朱军 曹广文 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期822-825,共4页

目的预测肿瘤相关蛋白EIF4G1亚型的B细胞表位。方法下载EIF4G1蛋白各种亚型的氨基酸序列,以单参数(亲水性、可及性、柔韧性、抗原性)预测为基础,结合ABCpred和二级结构预测筛选等方法综合筛选EIF4G1蛋白质亚型特异性的B细胞表位。结果... 目的预测肿瘤相关蛋白EIF4G1亚型的B细胞表位。方法下载EIF4G1蛋白各种亚型的氨基酸序列,以单参数(亲水性、可及性、柔韧性、抗原性)预测为基础,结合ABCpred和二级结构预测筛选等方法综合筛选EIF4G1蛋白质亚型特异性的B细胞表位。结果目前已知EIF4G1蛋白的亚型有5种,亚型间的氨基酸变化局限在一个由300个氨基酸形成的序列区域,亚型特异性的B细胞表位可能位于该区域的14～19、21～27、52～61、106～112、113～139、183～189、201～216和217～224位氨基酸残基区域内或附近。结论 EIF4G1蛋白质亚型间存在特异性B细胞表位,这些表位对应用合成肽抗原检测蛋白质亚型和进行肿瘤患者的早期诊断具有重要指导意义。 展开更多

关键词 真核细胞起始因子4G 蛋白质亚型 B淋巴细胞表位 肿瘤

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肿瘤-睾丸抗原SPANX-C基因mRNA在肝细胞癌中的表达及HLA-A2限制性CTL表位的预测 被引量：1

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作者 赵力 牟东成 +1 位作者 彭吉润 冷希圣 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2010年第17期1810-1814,共5页

目的:检测肿瘤-睾丸抗原SPANX-C基因在肝细胞癌(HCC)中的表达,预测SPANX-C/HLA-A2限制性CTL表位.为HCC的免疫治疗寻找新的靶位.方法:用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法对HCC患者癌组织、相应癌旁组织和对照组织(肝硬化和正常肝组织)中的... 目的:检测肿瘤-睾丸抗原SPANX-C基因在肝细胞癌(HCC)中的表达,预测SPANX-C/HLA-A2限制性CTL表位.为HCC的免疫治疗寻找新的靶位.方法:用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法对HCC患者癌组织、相应癌旁组织和对照组织(肝硬化和正常肝组织)中的SPANX-C基因mRNA进行检测,随机选取RT-PCR阳性扩增产物进行序列测定;用超基序法和量化基序法联合预测SPANX-C/HLA-A2限制性CTL表位.结果:在所检测的115例HCC组织中有70例(60.9%)表达SPANX-C基因mRNA,癌旁组织和20例对照肝组织均不表达.SPANX-C基因的表达与肿瘤分期、肿瘤分化程度、血清甲胎蛋白(AFP)水平等临床指标无相关性(P>0.05).用基序预测法筛选出5个HLA-A2限制性CTL表位(9肽),其中SPANX-C51-59(LVVRYRRNV)与HLA-A2分子具有较高结合力.结论:SPANX-C基因mRNA在HCC组织中呈高频率特异性表达,并存在HLA-A2限制性CTL表位,有望用于HCC的免疫治疗. 展开更多

关键词 肿瘤-睾丸抗原 SPANX-C 肝细胞癌 细胞毒T淋巴细胞表位 逆转录聚合酶链反应

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LRRC15来源HLA-A2.1限制性CTL表位肽鉴定及其抗乳腺癌效应评价 被引量：1

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作者 汤海潮 刘雯思 于兆进 《国际免疫学杂志》 CAS 2022年第5期441-448,共8页

目的鉴定富含亮氨酸重复蛋白15(leucine-rich repeat-containing protein-15,LRRC15)来源的优势细胞毒性T淋巴细胞(cytosolic T lymphocyte,CTL)表位肽,并验证其诱导CTL特异性抗乳腺癌免疫效应。方法收集中国医科大学附属第一医院乳腺... 目的鉴定富含亮氨酸重复蛋白15(leucine-rich repeat-containing protein-15,LRRC15)来源的优势细胞毒性T淋巴细胞(cytosolic T lymphocyte,CTL)表位肽,并验证其诱导CTL特异性抗乳腺癌免疫效应。方法收集中国医科大学附属第一医院乳腺癌外科自2010年1月至2010年7月经手术病理证实的乳腺癌组织及正常组织各30例。利用癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库和免疫组化方法评估LRRC15在乳腺癌中表达情况。利用免疫表位数据库(Immune Epitope Database and Analysis Resource,IEDB)联合SYFPEITHI数据库预测LRRC15蛋白序列中HLA-A2.1限定性CTL表位肽。利用分子对接软件MOE、T2亲和力实验和荧光共聚焦技术确认候选CTL表位肽与HLA-A2.1分子亲和性。利用酶联免疫斑点实验(enzyme-linked immunospot assay,ELISPOT)以及流式细胞术检测CTL表位肽免疫活性。利用钙黄素和Dil标记乳腺癌细胞评价CTL表位肽诱导的杀伤效应。建立乳腺癌移植瘤模型进行免疫回输,在体内评估CTL表位肽诱导的抗肿瘤效应。结果相比于正常组织,LRRC15 mRNA在乳腺癌组织中表达水平明显增高,组间差异有统计学意义[(4.00±1.57)比(1.31±0.72),Z=14.85,P<0.05];LRRC15 mRNA表达与CD8+T细胞浸润呈显著正相关性(r=0.20,P<0.001)。LRRC15蛋白在乳腺癌组织中呈现高表达,可作为乳腺癌潜在靶点。在筛选得到的3条候选CTL表位肽中,L2与HLA-A2.1分子具有最高亲和力(FI=2.490)。与阴性肽组相比,L2能够明显提升CD8+T细胞亚群比例(27.70%比45.50%),L2负载的树突状细胞(dendritic cells,DCs)能够明显提升CD8+T细胞分泌干扰素(interferon,IFN)-γ的水平(50.20%比74.90%)。在最高效靶比时,L2诱导的效应细胞对乳腺癌细胞系MDA-MB-231的杀伤效应明显高于阴性肽对照组,组间差异有统计学意义[(19.30±2.20)%比(8.60±1.40)%,t=1.45,P<0.05],但对乳腺上皮细胞MCF-10A无杀伤效应(P>0.05)。L2负载DCs诱导的CTL细胞对2例乳腺癌� 展开更多

关键词 乳腺癌 毒性T淋巴细胞表位肽 富含亮氨酸重复蛋白15 肿瘤免疫治疗

原文传递

用辅助性T细胞表位增强猪带绦虫DNA疫苗的免疫保护反应 被引量：1

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作者 刁振宇 邓小昭 +6 位作者 周宗安 陶开华 王元伦 刘玉 顾志香 吴琳 高键 《药物生物技术》 CAS CSCD 2004年第4期225-228,共4页

在猪绦虫融合抗原 pCC2 7(本室从六钩蚴cDNA表达文库筛选的 3个保护性抗原经拼接所得 )基因片段 5′末端引入 1个通用型辅助性T淋巴细胞表位、2个谷胱甘肽还原酶的辅助性T淋巴细胞表位 (TGG) ,构建成DNA疫苗。通过肌肉注射途径将这种DN... 在猪绦虫融合抗原 pCC2 7(本室从六钩蚴cDNA表达文库筛选的 3个保护性抗原经拼接所得 )基因片段 5′末端引入 1个通用型辅助性T淋巴细胞表位、2个谷胱甘肽还原酶的辅助性T淋巴细胞表位 (TGG) ,构建成DNA疫苗。通过肌肉注射途径将这种DNA疫苗免疫小鼠和仔猪。动物试验结果表明 ,TGG表位可提高小鼠血清 pCC2 7抗体IgG、IgG1、IgG2a的水平 ,且长时间保持较高应答水平。用该疫苗免疫仔猪获得了 89%的保护率。 展开更多

关键词 猪带绦虫 DNA疫苗 辅助性T淋巴细胞表位 谷胱甘肽还原酶

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利用重叠PCR实现乙肝表面抗原CTL表位的替换

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作者 王文敬 黎诚耀 李明松 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期589-591,共3页

目的以磷酸酰肌醇蛋白聚糖-3蛋白(glypican-3,GPC3)的CTL表位EYILSLEEL替换HBsAg中内源性CTL表位LLD,构建用于预防和治疗乙肝的DNA疫苗。方法以重组表面抗原基因pcHBsAg质粒为模板,应用重叠延伸PCR扩增出含EYILSLEEL表位的HBsAg基因HBsA... 目的以磷酸酰肌醇蛋白聚糖-3蛋白(glypican-3,GPC3)的CTL表位EYILSLEEL替换HBsAg中内源性CTL表位LLD,构建用于预防和治疗乙肝的DNA疫苗。方法以重组表面抗原基因pcHBsAg质粒为模板,应用重叠延伸PCR扩增出含EYILSLEEL表位的HBsAg基因HBsAg/GPC3,将其插入pBSSK+载体中,构建出pBSSK/GPC3载体。利用DNA重组技术将其定向插入真核表达载体pcDNA3.1+中,将真核表达载体经PCR、酶切和测序鉴定,构建表达CTL表位EYILSLEEL的DNA疫苗。结果酶切和测序的结果显示序列无错配,获得了完整表达EYILSLEEL表位的真核质粒pcDNA3-HBsAg/GPC3。结论成功将EYILSLEEL表位替换HBsAg的内源性CTL表位,构建了pcDNA3-HBsAg/GPC3真核表达质粒。 展开更多

关键词 表位替换 磷酸酰肌醇蛋白聚糖-3蛋白 细胞毒T淋巴细胞表位 重叠延伸PCR

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