泛素样蛋白质2在结直肠癌中的表达及其对癌细胞增殖作用

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作者 孙光源 王晓元 +4 位作者 任艳丽 尹洁 胡智洁 武雪亮 薛军 《安徽医药》 CAS 2024年第9期1810-1813,共4页

目的探讨泛素样蛋白质2(UBQLN2)在结直肠癌中的表达及其对结直肠癌细胞增殖的影响。方法选取2020年1月至2021年1月河北北方学院附属第一医院治疗的90例病人为研究对象,根据术中手术获取组织情况,分为正常组、癌旁组和肿瘤组。免疫组织... 目的探讨泛素样蛋白质2(UBQLN2)在结直肠癌中的表达及其对结直肠癌细胞增殖的影响。方法选取2020年1月至2021年1月河北北方学院附属第一医院治疗的90例病人为研究对象,根据术中手术获取组织情况,分为正常组、癌旁组和肿瘤组。免疫组织化学法和免疫荧光评估UBQLN2在肿瘤组织、远端组织和正常组织中表达;分析UBQLN2与病人临床病理特征以及预后的相关性;蛋白质印迹法和实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测UBQLN2在结直肠癌细胞系HT29、SW620、SW480、LOVO、HCT116以及人正常肠上皮细胞HIEC细胞中的表达;分别过表达和干扰UBQLN2在结肠癌细胞中的表达,随后CCK-8检测干扰前后细胞增殖能力变化。结果UBQLN2在结直肠癌癌旁组织中阳性面积(32.57±12.44)%显著高于肿瘤组织(12.68±9.79)%;UBQLN2 mRNA表达在转移阴性病人肿瘤组织中0.98±0.15显著高于转移阳性病人肿瘤组织0.33±0.08;UBQLN2的表达与结直肠癌病人预后呈正相关;UBQLN2在人正常肠上皮细胞中表达显著高于结直肠癌细胞,且在HCT116中表达最低;HCT116过表达UBQLN2培养36 h后,与pcDNA3.1-NC组细胞增殖能力0.78±0.23比较,pcDNA3.1-UBQLN-2组细胞0.52±0.18增殖能力显著降低;SW480细胞敲减UBQLN2培养36 h后,与si-NC细胞0.65±0.37增殖能力比较,si-UBQLN-2组细胞0.89±0.36增殖能力显著增加。结论UBQLN2在结直肠癌肿瘤组织和细胞中明显低表达并与转移呈负相关,UBQLN2可抑制结直肠癌增殖并与病人预后呈正相关。 展开更多

关键词 泛素类 结直肠癌 细胞增殖 生存期 预后

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SCF泛素化途径对c-Myc蛋白降解的调节作用 被引量：2

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作者 安静 周平坤 《军事医学科学院院刊》 CSCD 北大核心 2005年第5期464-467,共4页

泛素-蛋白酶体途径(ub iqu itin-proteasom e pathway,UPP)是细胞内降解蛋白质的重要途径,与细胞多种生理功能调节密切相关。本文主要论述了SCF(Skp-cu llin-F-box prote in)泛素化途径及对原癌基因c-myc产物的降解调控作用。

关键词 泛素类 泛素-蛋白酶体途径 原癌基因蛋白质类c-Myc 蛋白降解 SCF

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尿泛素-核糖体融合蛋白52和尿维生素D结合蛋白在糖尿病肾病患者的表达及意义 被引量：3

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作者 王江丽 刘茂东 +2 位作者 迟雁青 张益民 李英 《临床荟萃》 CAS 2019年第6期541-544,共4页

目的通过检测尿泛素-核糖体融合蛋白52(UbA52)和尿维生素D结合蛋白(VDBP)含量探讨其在糖尿病肾病(DN)诊断中的价值。方法糖尿病肾病患者46例(糖尿病肾病组)、2型糖尿病患者38例(糖尿病组),以及同期在我院体检的健康者40例作为健康对照... 目的通过检测尿泛素-核糖体融合蛋白52(UbA52)和尿维生素D结合蛋白(VDBP)含量探讨其在糖尿病肾病(DN)诊断中的价值。方法糖尿病肾病患者46例(糖尿病肾病组)、2型糖尿病患者38例(糖尿病组),以及同期在我院体检的健康者40例作为健康对照组。采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测尿UbA52、尿VDBP,比较尿UbA52、尿VDBP、24小时尿蛋白定量、尿白蛋白与尿肌酐的比值(ACR)、尿UbA52联合尿VDBP对糖尿病肾病诊断的特异性和敏感性。结果3组尿UbA52、尿VDBP差异有统计学意义(P<0.05),其中DN组尿UbA52、尿VDBP明显高于糖尿病组和健康对照组,糖尿病组与健康对照组差异无统计学意义(P>0.05)。尿UbA52、尿VDBP、24小时尿蛋白定量、ACR、尿UbA52联合尿VDBP诊断DN的ROC曲线下面积分别为0.729、0.776、0.629、0.657、0.779。结论检测尿UbA52、尿VDBP水平对于评估糖尿病肾病病情有一定参考价值,联合检测尿UbA52与尿VDBP对于糖尿病肾病的诊断有重要的临床意义。 展开更多

关键词 糖尿病肾病 泛素类 维生素D结合蛋白 诊断

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分枝杆菌中原核类泛素蛋白化靶蛋白的功能分析 被引量：3

4

作者 薛玉 刘毅 +2 位作者 张旭霞 张俊杰 李传友 《中国防痨杂志》 CAS 2014年第6期509-513,共5页

分枝杆菌中存在一种类似真核生物泛素的小分子蛋白,称为原核类泛素蛋白（prokaryotic ubiquitinlike protein,Pup）,蛋白被Pup共价标记后,或被蛋白酶体降解或参与修饰后的调节作用,可影响细菌活动的各个环节.结核分枝杆菌中目前发现可被... 分枝杆菌中存在一种类似真核生物泛素的小分子蛋白,称为原核类泛素蛋白（prokaryotic ubiquitinlike protein,Pup）,蛋白被Pup共价标记后,或被蛋白酶体降解或参与修饰后的调节作用,可影响细菌活动的各个环节.结核分枝杆菌中目前发现可被Pup标记的共有58种蛋白;耻垢分枝杆菌被标记了41种蛋白,其中38种都可以在结核分枝杆菌中找到同源蛋白.这些标记后的靶蛋白涉及了至少6种机制和功能,包括分枝杆菌的毒力、信号通路、脂类的合成、细胞壁和（或）膜的合成、中间代谢,等等.其中大部分蛋白被标记后经由蛋白酶体降解,也有被Pup标记的蛋白参与信号传导和调控作用;通过对这些靶蛋白的比较分析,能够对结核分枝杆菌的耐药和致病机制提供进一步的解释,同时这些Pup标记的蛋白也可以作为潜在的药物靶点,对其的分析研究可为结核病的治疗和控制提供理论基础. 展开更多

关键词 分枝杆菌属 泛素类 蛋白酶体内肽酶复合物

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泛素特异性肽酶22在胃癌中的表达及其临床意义 被引量：2

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作者 邓美洲 陶凯雄 +1 位作者 王国斌 刘兴华 《腹部外科》 2011年第5期302-303,共2页

目的探讨泛素特异性肽酶22（USP22）在胃癌组织中的表达及意义。方法采用免疫组织化学SABC法检测100例胃癌、46例癌旁正常组织中USP22的表达情况。结果USP22在胃癌组织中阳性率为80．0％，明显高于正常组织（P〈0．05）。胃癌病理分期... 目的探讨泛素特异性肽酶22（USP22）在胃癌组织中的表达及意义。方法采用免疫组织化学SABC法检测100例胃癌、46例癌旁正常组织中USP22的表达情况。结果USP22在胃癌组织中阳性率为80．0％，明显高于正常组织（P〈0．05）。胃癌病理分期越高，USP22蛋白阳性表达率越高（P〈0．05）。胃癌分化程度越低，USP22蛋白阳性表达率越高（P〈0．05）。结论USP22是胃癌潜在的分子标记物。 展开更多

关键词 胃肿瘤 泛素类 肽水解酶类 免疫组织化学

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Ufd1基因沉默逆转SW1116/HCPT细胞株对羟基喜树碱耐药的研究 被引量：2

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作者 陈翔 聂芳 +4 位作者 冉志华 童锦禄 朱明明 徐锡涛 萧树东 《胃肠病学》 2011年第10期580-584,共5页

背景:泛素融合降解1样蛋白(Ufd1)在蛋白质逆向转运中发挥一定作用。前期研究发现羟基喜树碱(HCPT)耐药人结肠癌细胞株SW1116/HCPT Ufd1表达增高。目的:探讨Ufd1基因沉默在逆转SW1 116/HCPT细胞株对HCPT耐药性中的作用。方法:干扰组SW111... 背景:泛素融合降解1样蛋白(Ufd1)在蛋白质逆向转运中发挥一定作用。前期研究发现羟基喜树碱(HCPT)耐药人结肠癌细胞株SW1116/HCPT Ufd1表达增高。目的:探讨Ufd1基因沉默在逆转SW1 116/HCPT细胞株对HCPT耐药性中的作用。方法:干扰组SW1116/HCPT细胞转染Ufd1特异性siRNA以沉默Ufd1基因,对照组转染非特异性siRNA。体外药物敏感性试验检测细胞对HCPT的敏感性,流式细胞术检测细胞周期,比色法测定caspase-3活性,蛋白质印迹法检测p-JNK、p53表达情况和细胞内泛素化蛋白贮留情况。结果:干扰组SW1116/HCPT细胞对HCPT的敏感性显著高于对照组(P<0.05)。经HCPT作用,干扰组和对照组细胞均出现S期阻滞、caspase-3活性增高和p-JNK、p53、泛素表达增加,干扰组更为明显。结论:以RNA干扰技术沉默Ufd1基因可逆转SW1116/HCPT细胞株对HCPT的耐药性,推测该作用可能与活化JNK信号通路、上调p53表达以及致细胞内泛素化蛋白贮留而破坏细胞内蛋白代谢的协调性有关。 展开更多

关键词 结直肠肿瘤 羟基喜树碱 多药耐药相关蛋白质类 泛素类 基因 Ufd1 RNA干扰

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亚低温对脑缺血大鼠海马神经元中类泛素蛋白表达的调控 被引量：2

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作者 刘洪良 王彤宇 +5 位作者 刘振林 陈镭 杨巍 盛华新 姜忠敏 刘晓智 《中华神经外科杂志》 CSCD 北大核心 2015年第3期294-298,共5页

目的 研究亚低温对大鼠海马神经元中类泛素蛋白（SUMO）表达的调控作用,探索亚低温对脑缺血后神经元的保护机制.方法 原代培养孕龄18 dSD大鼠的海马神经元,培养后12 d,分为对照组、氧糖剥夺（OGD）组、OGD＋亚低温组.37℃或亚低温（33... 目的 研究亚低温对大鼠海马神经元中类泛素蛋白（SUMO）表达的调控作用,探索亚低温对脑缺血后神经元的保护机制.方法 原代培养孕龄18 dSD大鼠的海马神经元,培养后12 d,分为对照组、氧糖剥夺（OGD）组、OGD＋亚低温组.37℃或亚低温（33℃）条件下培养OGD神经元24h.采用Western blot法检测SUMO-1和SUMO-2/3的表达水平,ELISA法检测乳酸脱氢酶（LDH）含量,原位凋亡法检测凋亡细胞数量.取SD大鼠36只,按完全随机化原则分为假手术组、大脑中动脉阻塞（MCAO）组及MCAO＋亚低温组,每组12只.线栓法建立MCAO模型,比较3组模型制作后第1、7、14及21天的神经功能缺损评分;免疫荧光法检测海马区神经元中SUMO-1和SUMO-2/3的表达定位.结果 （1）对照组、OGD组及OGD＋亚低温组的LDH分别为（9.85±2.47） pg/L、（586.29±51.56） μg/L、（317.54 ±42.33） pg/L,细胞凋亡率为（0.27±0.05）％、（29.25 ±6.07）％、（17.44±4.59）％,P值均＜ 0.01.3组间游离及共轭SUMO-1蛋白表达水平差异均无统计学意义;与OGD组比较,OGD＋亚低温组游离SUMO-2/3的表达水平降低（P＜0.05）,共轭SUMO-2/3表达水平升高（P＜0.01）,且均高于对照组（P＜0.01）.（2）第7、14天MCAO＋亚低温组神经功能缺损评分均低于MCAO组（P＜0.05）,至第21天两组差异无统计学意义.MCAO组脑梗死面积为（34.51±7.44） mm2,MCAO＋亚低温组为（23.67-±5.49） mm2 （P ＜0.05）;假手术组、MCAO组及MCAO＋亚低温组SUMO-1的表达相近;与假手术组比较,MCAO组细胞核的SUMO-2/3表达明显增高,MCAO＋亚低温组增高趋势更明显.结论 大鼠亚低温神经保护机制可能与提高脑缺血后SUMO-2/3与靶蛋白的结合能力有关. 展开更多

关键词 脑缺血 低温 人工 泛素类 海马 神经元 大鼠

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FAT10双甘酸突变体对宫颈癌细胞增殖和凋亡的影响 被引量：2

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作者 李翠 刘亚伟 +3 位作者 肖霄 刘爱华 罗海华 姜勇 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期931-935,共5页

目的探讨FAT10的碳末端双甘酸缺失突变体对宫颈癌He La细胞增殖和凋亡的影响。方法收集宫颈原位癌组织标本和正常宫颈组织标本各5例,Western blotting法检测组织中FAT10蛋白的表达。采用定点突变技术构建pc DNA3.0-flag-FAT10?GG质粒,... 目的探讨FAT10的碳末端双甘酸缺失突变体对宫颈癌He La细胞增殖和凋亡的影响。方法收集宫颈原位癌组织标本和正常宫颈组织标本各5例,Western blotting法检测组织中FAT10蛋白的表达。采用定点突变技术构建pc DNA3.0-flag-FAT10?GG质粒,分别将野生型FAT10、FAT10?GG及空载体(阴性对照)瞬时转染至He La细胞中,以野生型Hela细胞作为空白对照组,采用Western blotting法检测转染效率,CCK-8法检测细胞增殖情况。转染24h后,各组细胞经顺铂诱导凋亡,采用流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果 FAT10蛋白在宫颈癌组织中的表达明显高于正常组织。过表达野生型FAT10对宫颈癌细胞的增殖有明显促进作用,但FAT10发生双甘酸突变之后,该作用受到明显抑制。流式细胞仪检测结果显示:与空白对照组(22.7%±4.2%)和阴性对照组(24.1%±3.8%)相比,过表达野生型FAT10组的细胞凋亡率(10.9%±2.0%)明显降低(P<0.05),而FAT10?GG组的细胞凋亡率(25.7%±5.1%)无明显变化(P>0.05)。结论FAT10可通过其碳末端双甘酸结构促进肿瘤细胞增殖,减少凋亡,从而促进肿瘤的发生发展。 展开更多

关键词 宫颈肿瘤 泛素类 细胞增殖 细胞凋亡

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泛素蛋白-D在术后化疗的Ⅱ期结肠癌患者中的表达及临床意义 被引量：1

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作者 赵森林 唐华美 +5 位作者 崔菲菲 陈健 陆惠军 薛英明 彭志海 严东旺 《中华普通外科杂志》 CSCD 北大核心 2014年第5期358-361,共4页

目的探讨人泛素蛋白-D（UbiquitinD，UBD）在接受术后以5-氟尿嘧啶为基础的辅助化疗的Ⅱ期结肠癌患者中的表达及其临床意义。方法随机选取106例接受术后以5-氟尿嘧啶为基础的辅助化疗的Ⅱ期结肠癌患者，根据有无复发分为：复发组（35例... 目的探讨人泛素蛋白-D（UbiquitinD，UBD）在接受术后以5-氟尿嘧啶为基础的辅助化疗的Ⅱ期结肠癌患者中的表达及其临床意义。方法随机选取106例接受术后以5-氟尿嘧啶为基础的辅助化疗的Ⅱ期结肠癌患者，根据有无复发分为：复发组（35例）和未复发组（71例）。从两组患者中分别随机选取20例Ⅱ期结肠癌肿瘤组织和配对的正常组织，采用实时定量聚合酶链反应（real—timePCR）检测UBD基因的mRNA表达量，用免疫组织化学方法检测UBD基因在化疗后35例复发和71例未复发患者癌组织及相应正常组织中蛋白表达量。用χ2检验比较计数资料之间差异，通过COX比例风险模型评估风险。结果复发组和未复发组肿瘤组织中UBDmRNA的平均表达量分别是7．64及2．87（χ2=10．7，P〈0．01）。免疫组织化学结果显示UBD在复发和未复发患者肿瘤组织中阳性表达率分别为86％（30／35）及59％（42／71）（χ2=7．59，P〈0．01）。UBD阳性者化疗后5年无瘤生存率（P〈0．05）和总体生存率（P〈0．05）均显著降低。结论UBD基因表达是影响Ⅱ期结肠癌患者化疗后无瘤生存率和总体生存率的独立预后因素。 展开更多

关键词 泛素类 结肠肿瘤 抗肿瘤 联合化疗方案

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Oct4通过类泛素修饰途径维持胶质瘤干细胞增殖潜能 被引量：1

10

作者 张泰 蔡英 +2 位作者 王金环 闫华 亢建民 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 2016年第3期309-311,共3页

目的研究类泛素蛋白(SUMO)与肿瘤干细胞"干性"诱导基因Oct4共同维持胶质瘤干细胞于持续增殖状态的分子机制。方法采用极低密度细胞接种法培养C6胶质瘤肿瘤干细胞克隆球,血清还原+免疫荧光方法验证肿瘤干细胞分化能力。实验设... 目的研究类泛素蛋白(SUMO)与肿瘤干细胞"干性"诱导基因Oct4共同维持胶质瘤干细胞于持续增殖状态的分子机制。方法采用极低密度细胞接种法培养C6胶质瘤肿瘤干细胞克隆球,血清还原+免疫荧光方法验证肿瘤干细胞分化能力。实验设对照组、无义组和SUMO1组。持续测量克隆球直径,免疫荧光方法检测Ki67、CD133、巢蛋白和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达情况,Western blot法检测Oct4和SUMO1的表达水平。结果肿瘤细胞克隆球被血清诱导分化后高表达胶质细胞标记蛋白GFAP。与对照组和无义组比较,SUMO1组细胞克隆球直径增长速度、Ki67、CD133、巢蛋白阳性率明显降低(P<0.05),GFAP阳性率明显升高[(57.35±7.87)%vs(1.09±0.27)%,(0.87±0.21)%,P<0.05],SUMO1组游离及共价结合状态的SUMO1及Oct4明显降低(P<0.05)。结论 Oct4通过与SUMO1共价结合共同维持胶质瘤干细胞持续增殖潜能。 展开更多

关键词 肿瘤干细胞 神经胶质瘤 泛素类 细胞增殖 细胞分化

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去泛素化酶在皮肤病的研究进展

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作者 和义敏 冯爱平 陈善娟 《国际皮肤性病学杂志》 2013年第6期380-383,共4页

去泛素化酶家族种类繁多，分布于人体多种器官及组织，是泛素-蛋白酶体途径的重要组成部分，精细调控真核细胞生物细胞内蛋白的降解。A20、CYLD、泛素特异性加工酶7等去泛素化酶通过与外异蛋白受体、Fas相关的死亡区蛋白、B细胞淋巴因... 去泛素化酶家族种类繁多，分布于人体多种器官及组织，是泛素-蛋白酶体途径的重要组成部分，精细调控真核细胞生物细胞内蛋白的降解。A20、CYLD、泛素特异性加工酶7等去泛素化酶通过与外异蛋白受体、Fas相关的死亡区蛋白、B细胞淋巴因子-3、核因子-KB抑制蛋白激酶等因子相互作用，可参与银屑病、皮肤基底细胞癌、皮肤鳞状细胞癌、皮肤附属器肿瘤、Kaposi肉瘤以及恶性黑素瘤等皮肤疾病的发生发展。探讨去泛素化酶作用机制，有助于为炎症及肿瘤性皮肤病提供新的治疗靶点。 展开更多

关键词 皮肤疾病 泛素类 去泛素化酶

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类泛素分子FAT10上调核因子Kappa B表达与糖尿病肾病关系的研究进展

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作者 袁琴 王冠 《国际泌尿系统杂志》 2014年第3期427-430,共4页

糖尿病肾病（diabetic nephropathy,DN）是糖尿病主要的微血管并发症,也是糖尿病主要死亡原因之一.核因子Kappa B（NF-κB）是一种广泛存在于真核细胞内的转录因子,可通过调节转化生长因子β1（TGF-β1）表达、促进细胞凋亡等途径在进展... 糖尿病肾病（diabetic nephropathy,DN）是糖尿病主要的微血管并发症,也是糖尿病主要死亡原因之一.核因子Kappa B（NF-κB）是一种广泛存在于真核细胞内的转录因子,可通过调节转化生长因子β1（TGF-β1）表达、促进细胞凋亡等途径在进展期DN病程中占据重要地位.人类白细胞抗原F介导转录因子10（human leukocyte antigen F-associated transcript 10,FAT 10）是类泛素分子家族（ULMs）成员,具有与底物蛋白共价结合,并介导底物蛋白快速而不可逆地被蛋白酶体靶向降解的特性.研究表明,FAT10在受细胞因子等刺激后,可促进NF-κB通路抑制蛋白IκB-α迅速降解,上调NF-κB表达,而后者可以进一步促进DN发展.本文将就FAT10、NF-κB及DN三者之间关系的研究进展作一综述. 展开更多

关键词 糖尿病肾病 泛素类 NF-ΚB

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过表达parkin基因对蛋白酶体抑制剂致SH—SY5Y细胞损伤的影响

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作者 周海燕 杨卉 +2 位作者 范国华 王刚 陈生弟 《中华老年医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期56-59,共4页

目的 探讨过表达parkin基因能否抵抗蛋白酶体抑制剂lactacystin对SH—SY5Y细胞的特异性损伤。方法 不同浓度的lactacystin（1、5、10、15、20μmol／L）分别作用于人多巴胺能SH—SY5Y细胞和人胶质瘤U251细胞24h，用二甲基噻唑二苯基四... 目的 探讨过表达parkin基因能否抵抗蛋白酶体抑制剂lactacystin对SH—SY5Y细胞的特异性损伤。方法 不同浓度的lactacystin（1、5、10、15、20μmol／L）分别作用于人多巴胺能SH—SY5Y细胞和人胶质瘤U251细胞24h，用二甲基噻唑二苯基四唑溴盐（MTT）法检测细胞活力。选取10μmol／L和20μmol／L lactacystin处理SH—SY5Y细胞，Western印迹法检测细胞内多泛素化蛋白的含量。瞬时转染parkin至SH-SY5Y细胞，并以MTT法检测10μmol／L和20μmol／L lactacystin作用下的细胞活力，Western印迹法检测细胞内多泛素化蛋白的含量，以及用免疫荧光法检测泛素阳性包涵体的形成。结果 lactacystin呈剂量依赖性地损伤多巴胺能SH—SY5Y细胞（细胞活力分别为104％、82％、72％、60％、50％），而对胶质瘤U251细胞则无毒性作用。parkin过表达不能缓解lactacystin的毒性作用，也没有增加细胞内多泛素化蛋白生成，但却促进泛素阳性包涵体的形成（增加5％）。结论 蛋白酶体功能障碍有可能在多巴胺能神经元的选择性死亡中起关键作用，而Parkin蛋白在路易小体的形成过程中可能起重要作用。 展开更多

关键词 蛋白酶体内肽酶复合物 泛素类 多巴胺 基因表达 细胞死亡

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亚低温对神经母细胞瘤细胞氧糖剥夺/复氧时小泛素类修饰蛋白特异性蛋白酶3表达的影响 被引量：1

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作者 孙贵亮 徐玉云 +2 位作者 王培 张高峰 王明山 《国际麻醉学与复苏杂志》 CAS 2021年第3期244-247,共4页

目的研究亚低温对小鼠神经母细胞瘤(mouse neuro-blastoma N2a,N2a)细胞氧糖剥夺/复氧(oxygen glucose deprivation/reoxygenation,OGD/R)损伤时小泛素类修饰蛋白特异性蛋白酶3(small ubiquitin-like modifier proteins specific protea... 目的研究亚低温对小鼠神经母细胞瘤(mouse neuro-blastoma N2a,N2a)细胞氧糖剥夺/复氧(oxygen glucose deprivation/reoxygenation,OGD/R)损伤时小泛素类修饰蛋白特异性蛋白酶3(small ubiquitin-like modifier proteins specific protease 3,SENP3)表达的影响。方法体外培养小鼠N2a细胞并予以OGD/R处理,建立模拟大脑缺血/再灌注的OGD/R模型以及亚低温模型;将N2a细胞按照随机数字表法分为3组(每组5孔):假手术组(S组)、OGD/R组和氧糖剥夺/复氧+亚低温组(OGD/R+HT组)。细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)法检测OGD/R后N2a细胞活性,乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)释放率检测OGD/R后N2a细胞毒性,Hoechst33258染色观察N2a细胞凋亡,实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,RT-qPCR)分析SENP3 mRNA的相对表达量,Western blot法测定SENP3的蛋白水平。结果与S组比较,OGD/R组和OGD/R+HT组细胞存活率下降、LDH释放率升高、凋亡细胞数量增多、SENP3 mRNA的相对表达量和蛋白水平升高(P<0.05);与ODG/R组比较,OGD/R+HT组细胞存活率升高、LDH释放率降低、凋亡细胞数量减少、SENP3 mRNA的相对表达量和蛋白水平降低(P<0.05)。结论亚低温减轻N2a细胞OGD/R损伤机制与抑制SENP3的表达有关。 展开更多

关键词 亚低温 小鼠神经母细胞瘤细胞 氧糖剥夺/复氧 小泛素类修饰蛋白特异性蛋白酶3

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MARCH1在多器官功能障碍综合征病程中对脾脏树突细胞MHC-Ⅱ类分子泛素化作用的研究 被引量：4

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作者 李菲 陆江阳 刘茜 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期455-458,共4页

目的观察多器官功能障碍综合征(MODS)小鼠脾脏树突细胞(DCs)中MARCH1和MHC-Ⅱ类分子的蛋白及mRNA表达情况,探讨MARCH1对MHC-Ⅱ类分子的泛素化调控作用。方法 110只C57BL/6小鼠随机分为1、3、5、7、10d组和正常对照组,前5个实验组小鼠采... 目的观察多器官功能障碍综合征(MODS)小鼠脾脏树突细胞(DCs)中MARCH1和MHC-Ⅱ类分子的蛋白及mRNA表达情况,探讨MARCH1对MHC-Ⅱ类分子的泛素化调控作用。方法 110只C57BL/6小鼠随机分为1、3、5、7、10d组和正常对照组,前5个实验组小鼠采用腹腔注射酵母多糖法复制MODS模型(每组20只),正常对照组(10只)不做特殊处理。使用磁珠和Mini MACS分选磁场分离出小鼠脾脏DCs,分别采用Western blotting和Real Time PCR检测脾脏DCs中MARCH1和MHC-Ⅱ类分子的蛋白及mRNA表达情况,并观察其变化规律与病程的关系。结果脾脏DCs中MHC-Ⅱ类分子蛋白的表达在MODS 1d时即明显升高并达到峰值(P<0.05),而后逐渐下降,至10d时达到最低(P<0.05)。MHC-Ⅱ类分子mRNA的表达在整个病程中无明显变化(P>0.05)。MARCH1蛋白表达在MODS 1d时即显著降低(P<0.05),后开始回升,至7d时达到较高水平,而在10d时又再次下降,但与正常对照组相比,均无统计学差异。MARCH1 mRNA表达的变化与蛋白表达变化规律一致。结论在MODS病程中,MHC-Ⅱ类分子和MARCH1蛋白表达变化的趋势相反,MARCH1可能通过泛素化MHC-Ⅱ类分子来调控其表达水平,进而调控DCs的成熟状态及启动免疫应答反应。 展开更多

关键词 多器官功能衰竭 树突细胞 泛素连接酶类 MHC-Ⅱ类分子

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