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血链菌死菌在生物膜再形成中的作用观察 被引量:10
1
作者 马瑞 朱敏 刘正 《上海口腔医学》 CAS CSCD 2002年第1期37-39,共3页
目的 探讨血链菌死菌在生物膜更新形成中的作用。方法 利用激光共聚焦扫描显微镜和死菌 /活菌荧光染色技术相结合 ,对人工口腔内覆盖死菌 (实验组 )和未覆盖死菌 (对照组 )盖玻片表面血链菌生物膜的形成进行动态观察。结果 血链菌生... 目的 探讨血链菌死菌在生物膜更新形成中的作用。方法 利用激光共聚焦扫描显微镜和死菌 /活菌荧光染色技术相结合 ,对人工口腔内覆盖死菌 (实验组 )和未覆盖死菌 (对照组 )盖玻片表面血链菌生物膜的形成进行动态观察。结果 血链菌生物膜形成 3 0min时 ,实验组生物膜厚度和对照组相比 ,无显著性差异 ;但其细菌密度明显大于对照组 (P <0 .0 5 ) ,至 60min ,12 0min ,2 4 0min时 ,实验组生物膜厚度和对照组相比 ,有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ,但其细菌密度几乎一致。结论 在生物膜的形成初期 ,死菌具有一定的促进作用。 展开更多
关键词 生物膜 斑控制剂 口腔病理学
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益生菌活菌与死菌的保健作用研究进展 被引量:6
2
作者 魏华 刘春梅 +1 位作者 程波财 徐峰 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第11期618-623,共6页
酸奶和发酵制品均强调活菌的重要性。然而,并非活菌产品才具有保健效果。就乳糖酶缺乏症、过敏性鼻炎、急性胃肠炎患者而言,活菌和死菌具有相似的临床治疗效果。在刺激免疫系统、抗肿瘤、治疗阴道炎等方面,活菌的生理功能强于死菌,而在... 酸奶和发酵制品均强调活菌的重要性。然而,并非活菌产品才具有保健效果。就乳糖酶缺乏症、过敏性鼻炎、急性胃肠炎患者而言,活菌和死菌具有相似的临床治疗效果。在刺激免疫系统、抗肿瘤、治疗阴道炎等方面,活菌的生理功能强于死菌,而在清除黄曲霉毒素方面,死菌则强于活菌。目前益生菌功能研究多限于活菌,且在某些活菌和死菌功能研究中存在争议,提示将来的研究应对两者进行科学的对照实验。 展开更多
关键词 益生 保健作用
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血链菌生物膜形成中死菌/活菌的粘附观察研究 被引量:6
3
作者 马瑞 朱敏 刘正 《现代口腔医学杂志》 CAS CSCD 2002年第1期1-3,共3页
目的 观察血链菌生物膜形成初期的死菌、活菌粘附情况 ,并对其粘附能力进行比较。方法 血链菌混悬于人工唾液 ,其中活菌百分比为 70 %,在模仿体内环境的人工口腔内 ,血链菌悬液以 0 .8ml/min均速滴至唾液覆盖的玻片以形成生物膜 ,应... 目的 观察血链菌生物膜形成初期的死菌、活菌粘附情况 ,并对其粘附能力进行比较。方法 血链菌混悬于人工唾液 ,其中活菌百分比为 70 %,在模仿体内环境的人工口腔内 ,血链菌悬液以 0 .8ml/min均速滴至唾液覆盖的玻片以形成生物膜 ,应用荧光染色技术观察血链菌生物膜形成中死 /活细菌的初期粘附 ,计算活菌百分比 ;并通过疏水实验、红细胞凝集实验对死 /活菌的粘附特性进行比较。结果 血链菌生物膜形成的 30min ,6 0min ,12 0min ,2 40min ,其中活菌百分比分别为 30 %,5 0 %,6 0 %,70 %;在同一时间血链菌悬液的活菌百分比几乎是恒定的 ,两者相比 :在 30min ,6 0min具有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ;在 12 0min ,2 40min无显著性差异 (P>0 .0 5 )。疏水实验、红细胞凝集实验中 ,死菌的疏水性能、红血球凝集能力均强于活菌。结论 血链菌生物膜形成的初期 ,死菌可能比活菌更易粘附于固体表面。 展开更多
关键词 生物膜 疏水性 红血球凝集
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叠氮溴化丙锭结合qPCR检测与区分活菌和死菌的研究进展 被引量:4
4
作者 陶怡君(综述) 谌志筠(审校) 何秋水(审校) 《微生物学免疫学进展》 CAS 2020年第6期63-68,共6页
活菌的检测是病原菌检验的关键,目前快速、灵敏、特异和准确的检测方法,如定量聚合酶链反应(quantitative PCR,qPCR)是微生物检测领域关注的焦点之一。其中,基于核酸结合染料如以叠氮溴化丙锭(propidium monoazide,PMA)预处理的定量聚... 活菌的检测是病原菌检验的关键,目前快速、灵敏、特异和准确的检测方法,如定量聚合酶链反应(quantitative PCR,qPCR)是微生物检测领域关注的焦点之一。其中,基于核酸结合染料如以叠氮溴化丙锭(propidium monoazide,PMA)预处理的定量聚合酶链反应(PMA-qPCR)已广泛应用于多种病原菌活菌的检测,但仍然存在一定的局限性。现就PMA-qPCR检测与区分活菌(living bacteria)和死菌(dead bacteria)的研究进展作一综述。 展开更多
关键词 叠氮溴化丙锭 定量聚合酶链反应 检测 区分
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PMA-qPCR快速检测结核活菌方法的建立 被引量:4
5
作者 温书香 王慧勤 +7 位作者 曹旭东 赵新霞 李亚 张亚丽 陈鹏博 纪太旺 陈创夫 袁莉 《石河子大学学报(自然科学版)》 CAS 2014年第2期143-147,共5页
为建立快速鉴别诊断结核活/死菌的方法,本研究应用PMA染料与实时定量PCR技术结合(PMA-qPCR),以结核标准株16 sRNA基因为靶基因,PMA对样品基因组提取物进行处理,PMA能够与死细胞DNA分子共价交联并抑制DNA分子扩增。结果显示:PMA浓度在3μ... 为建立快速鉴别诊断结核活/死菌的方法,本研究应用PMA染料与实时定量PCR技术结合(PMA-qPCR),以结核标准株16 sRNA基因为靶基因,PMA对样品基因组提取物进行处理,PMA能够与死细胞DNA分子共价交联并抑制DNA分子扩增。结果显示:PMA浓度在3μg/mL,曝光时间大于15 min时,PMA既不影响活菌的的扩增,又能有效抑制死菌的扩增;当PMA浓度大于20μg/mL时,PMA影响活菌DNA的扩增;PMA-qPCR技术能够定量不同比例的结核活/死菌悬液中的活菌。结论:PMA-qPCR技术能够快速准确检测出结核杆菌中的活细胞。 展开更多
关键词 叠氮溴化丙锭(PMA) PMA-qPCR技术
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白木耳“杨梅霜病”和“死菌”原因探讨 被引量:1
6
作者 林成辉 唐乐尘 《中国食用菌》 2000年第2期23-24,共2页
关键词 白木耳 杨梅霜病 症状 病因 防治
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副溶血弧菌EMA-PCR检测技术的建立 被引量:21
7
作者 伦镜盛 夏常艳 +3 位作者 罗鹏 梁嘉明 黄通旺 胡忠 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期952-956,共5页
PCR技术被广泛应用于副溶血弧菌的检测中,但传统的PCR技术无法区分样品中的死细菌与活细菌,往往使检测结果出现较高的假阳性。因此,将叠氮溴乙锭(Ethidium monoazide bro-mide,EMA)与PCR技术结合,建立一种快速、准确的副溶血弧菌检测方... PCR技术被广泛应用于副溶血弧菌的检测中,但传统的PCR技术无法区分样品中的死细菌与活细菌,往往使检测结果出现较高的假阳性。因此,将叠氮溴乙锭(Ethidium monoazide bro-mide,EMA)与PCR技术结合,建立一种快速、准确的副溶血弧菌检测方法。以dnaJ基因为检测副溶血弧菌的靶基因,分别用副溶血弧菌的纯培养细胞及其基因组DNA作模板进行PCR检测,灵敏度分别为2.5×104 CFU/mL和6×102 fg/μL。在检测样品前处理过程中加入EMA,当EMA的浓度小于5 mg/L时,EMA对活菌靶基因的扩增没有明显的抑制;而终浓度为2 mg/L的EMA,能有效抑制1×108 CFU/mL副溶血弧菌死菌的扩增。活菌和死菌混合体系的PCR结果表明,EMA-PCR能有效降低副溶血弧菌检测过程中的假阳性。 展开更多
关键词 副溶血弧 EMA-PCR 与活
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微生态制剂的分类及临床应用新进展 被引量:9
8
作者 牟方宏 胡伏莲 《临床药物治疗杂志》 2004年第5期34-39,共6页
微生态学是近年来发展的一门新兴生命科学.在人的胃肠道栖息着大约1014个,约400多种,占粪便湿重的20%~40%,可分为3大类:①厌氧菌,也称为共生菌或益生菌,占总数的99%以上,以双歧杆菌及类杆菌为代表,这些细菌对宿主有益无害,有保持宿主... 微生态学是近年来发展的一门新兴生命科学.在人的胃肠道栖息着大约1014个,约400多种,占粪便湿重的20%~40%,可分为3大类:①厌氧菌,也称为共生菌或益生菌,占总数的99%以上,以双歧杆菌及类杆菌为代表,这些细菌对宿主有益无害,有保持宿主健康的作用. 展开更多
关键词 微生态制剂 分类 临床应用 制剂 制剂 酪酸制剂
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微生态制剂临床应用概况 被引量:8
9
作者 钱康年 《中国医师杂志》 CAS 2002年第2期122-125,共4页
关键词 微生态学 微生态制剂 药理作用 微生物 制剂 制剂
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EMA/PMA-qPCR技术检测活肠炎沙门氏菌方法的对比研究 被引量:7
10
作者 庞贝妮 顾文佳 +3 位作者 徐琼 冯琦 曲勤凤 段文锋 《食品科技》 CAS 北大核心 2014年第6期298-302,共5页
将DNA染料EMA(Edthidium Monoazide Bromide叠氮溴化乙啶)和PMA(Propidium Monoazide Bromide叠氮溴化丙啶)与实时荧光定量PCR技术相结合,通过对曝光时间、染料浓度进行优化,验证EMA/PMA-qPCR技术对于肠炎沙门氏菌活/死菌鉴别方法的可行... 将DNA染料EMA(Edthidium Monoazide Bromide叠氮溴化乙啶)和PMA(Propidium Monoazide Bromide叠氮溴化丙啶)与实时荧光定量PCR技术相结合,通过对曝光时间、染料浓度进行优化,验证EMA/PMA-qPCR技术对于肠炎沙门氏菌活/死菌鉴别方法的可行性;对比2种试剂的作用效果,确定最为适宜的预处理方式。结果表明,使用浓度为10μg/mL的EMA,曝光时间为15 min,可以完全抑制浓度为5×107 cfu/mL的热致死肠炎沙门氏菌的DNA扩增。对于相同浓度的菌悬液,PMA则无法保证与热致死菌DNA分子的有效交联,对于死菌扩增的抑制效果不理想。降低菌液浓度为5×106 cfu/mL,提高PMA的浓度对于活菌的DNA模板有损耗,对热致死菌的抑制效果无改善。EMA-qPCR方法能克服普通PCR无法区别活死菌的缺点,更适宜作为沙门氏菌检测的一种初筛方式。 展开更多
关键词 核酸染料 qPCR 肠炎沙门氏 区分活
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活/死菌检测方法的研究进展 被引量:6
11
作者 陈盟 祁建城 +2 位作者 杜耀华 程智 李抄 《军事医学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第9期715-720,共6页
细菌活性检测在细菌生物学研究、消毒灭菌评价、卫生安全监测、食品卫生控制等领域具有重要意义。实际研究中多表现为活/死菌区分检测,检测方法通常基于细菌的可培养性、可转录性、代谢活性以及细胞膜完整性这4个细菌活性评价标准。该... 细菌活性检测在细菌生物学研究、消毒灭菌评价、卫生安全监测、食品卫生控制等领域具有重要意义。实际研究中多表现为活/死菌区分检测,检测方法通常基于细菌的可培养性、可转录性、代谢活性以及细胞膜完整性这4个细菌活性评价标准。该文综述了目前常见的活/死菌检测方法的原理、特点及应用实例,并对比了各种方法的优缺点。 展开更多
关键词 存活率 活/ 计数 检测方法
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EMA与PCR结合检测沙门氏菌方法的研究 被引量:6
12
作者 赵瑜 李金磊 +2 位作者 董鹏 狄元冉 高延玲 《畜牧与饲料科学》 2013年第11期113-116,共4页
为了建立一种快速区分样品中沙门氏菌的死细菌与活细菌的检测方法,将叠氮溴化乙锭(EMA)与PCR技术相结合,以沙门氏菌的invA为靶基因,以沙门氏菌的纯培养细胞做模板进行扩增,并进行灵敏度、特异性、曝光时间及EMA浓度试验。结果显示,灵敏... 为了建立一种快速区分样品中沙门氏菌的死细菌与活细菌的检测方法,将叠氮溴化乙锭(EMA)与PCR技术相结合,以沙门氏菌的invA为靶基因,以沙门氏菌的纯培养细胞做模板进行扩增,并进行灵敏度、特异性、曝光时间及EMA浓度试验。结果显示,灵敏度为14 CFU/mL,最佳曝光时间为2 min,当EMA的浓度小于18μg/mL时,EMA对活菌靶基因的扩增没有明显的抑制,而终浓度为1μg/mL的EMA,能有效抑制1×108CFU/mL沙门氏菌死菌的扩增。EMA-PCR能有效降低沙门氏菌检测过程中的假阳性。 展开更多
关键词 沙门氏 EMA—PCR 检测 与活
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柑橘溃疡病菌EMA-PCR快速活体检测技术的建立 被引量:5
13
作者 熊书 王中康 +1 位作者 卢小林 殷幼平 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期78-84,共7页
传统PCR方法不能诊断柑橘溃疡病菌(Xanthomonas citri subsp.citri Gabriel)的死活状态,往往导致假阳性检测结果。本研究将特异性核酸染料叠氮溴化乙锭(ethidium monoazide bromide,EMA)与PCR技术结合,旨在建立柑橘溃疡病活菌的快速检... 传统PCR方法不能诊断柑橘溃疡病菌(Xanthomonas citri subsp.citri Gabriel)的死活状态,往往导致假阳性检测结果。本研究将特异性核酸染料叠氮溴化乙锭(ethidium monoazide bromide,EMA)与PCR技术结合,旨在建立柑橘溃疡病活菌的快速检测技术。根据柑橘溃疡病菌独有的保守蛋白基因设计特异性引物扩增出278bp的靶带,PCR反应的检测下限为25个细胞/25μL或2.75pg/25μL。EMA-PCR结果表明:当卤钨灯曝光时间1min,EMA终浓度为1.0mg/L时,能有效抑制1.0×108 cfu/mL死菌的扩增;当EMA的浓度小于30mg/L时,EMA对上述相同浓度活菌靶基因的扩增没有明显的抑制。EMA-PCR对死活混合菌的扩增表明,活菌数在6.875×101~6.875×105 cfu/PCR范围时,荧光强度与混合体系中活菌的对数值有线性关系。基于以上建立的EMA-PCR活体检测技术,对疑似带病柑橘材料进行检测,结果发现能降低柑橘溃疡病菌检测过程中的假阳性,有望为柑橘溃疡病的检疫检验提供更科学的技术手段。 展开更多
关键词 柑橘溃疡病 EMA-PCR 与活 检疫
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血链菌生物膜中死菌/活菌的空间分布 被引量:3
14
作者 马瑞 朱敏 +2 位作者 刘正 马健 于毅 《上海第二医科大学学报》 CSCD 北大核心 2005年第8期826-828,共3页
目的研究血链菌生物膜形成中死菌/活菌的空间分布。方法在模拟人口腔环境的简易人工口腔模型内,形成血链菌生物膜,应用激光共聚焦扫描显微镜和死菌/活菌荧光染色方法,对血链菌生物膜形成中死菌/活菌的空间分布进行观察。结果生物膜底部... 目的研究血链菌生物膜形成中死菌/活菌的空间分布。方法在模拟人口腔环境的简易人工口腔模型内,形成血链菌生物膜,应用激光共聚焦扫描显微镜和死菌/活菌荧光染色方法,对血链菌生物膜形成中死菌/活菌的空间分布进行观察。结果生物膜底部的活菌百分比为20%;随着生物膜厚度的增加,活菌百分比达到70%,其间存在许多黑色气泡样的间隙;随后活菌百分比逐渐减少,至生物膜顶部时几乎全部为死菌。结论生物膜的底部和顶部主要由死细菌组成,而中间层主要是由围绕在黑色气泡样孔和通道周围的活细菌组成。 展开更多
关键词 生物膜 人工口腔 /活 激光共聚焦扫描显微镜
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黑曲霉死菌与活性炭对直接耐晒翠蓝FBL的吸附性能 被引量:4
15
作者 孟雪娇 熊小京 +2 位作者 黄艺海 卢昌义 郑天凌 《环境工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期1317-1320,共4页
采用批式实验,系统考察了黑曲霉死菌和活性炭的粉剂投加量,染料初始浓度,pH和反应时间对酞菁染料FBL脱色效果的影响;并采用扫描电镜图像,分析吸附剂的结构变化。结果表明,对于FBL染料的吸附处理,黑曲霉死菌粉剂与活性炭粉剂适宜的吸附... 采用批式实验,系统考察了黑曲霉死菌和活性炭的粉剂投加量,染料初始浓度,pH和反应时间对酞菁染料FBL脱色效果的影响;并采用扫描电镜图像,分析吸附剂的结构变化。结果表明,对于FBL染料的吸附处理,黑曲霉死菌粉剂与活性炭粉剂适宜的吸附条件为:酸性至弱碱性pH下,投加量为8 g/L;黑曲霉死菌粉剂比活性炭粉剂的吸附速度快、脱色性能高、抗染料浓度负荷冲击能力强。扫描电镜图像分析显示,黑曲霉死菌粉剂所具有的多层纤维结构为吸附染料分子提供较大的比表面。 展开更多
关键词 黑曲霉 活性炭粉 酞菁染料 吸附性能
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Br.ovis死菌佐剂苗的制备及保护力试验 被引量:2
16
作者 刘志文 高如常 +9 位作者 张萍 程凤清 张银国 赵兴旺 刘增桐 沈兆银 缪礼维 张高轩 朱鹤赐 王学智 《地方病通报》 1992年第2期35-39,共5页
本文报告了用新疆0.19Br.ovis株制备的死菌佐剂苗,并对其免疫学改造进行了检查。用30只中国美利奴8月龄公羔,分两个不同剂量免疫组和对照组,每组10只,第一组皮下注射1000亿菌,第二组皮下注射4000亿菌。85天时分别加强免疫,用原制剂1000... 本文报告了用新疆0.19Br.ovis株制备的死菌佐剂苗,并对其免疫学改造进行了检查。用30只中国美利奴8月龄公羔,分两个不同剂量免疫组和对照组,每组10只,第一组皮下注射1000亿菌,第二组皮下注射4000亿菌。85天时分别加强免疫,用原制剂1000亿菌/ml皮下注射。第三组不免疫,以资对照。 各组于325天时分别进行结膜+包皮30亿菌和睾丸内接种15亿菌63/290Br.ovis直接注射攻毒。在攻毒后75天参试羊全部屠杀并剖检,同时采血样进行GDT、SAT、CFT试验和细菌培养及病理学检查。试验结果表明,用新疆019Br.ovis制备的死菌佐剂苗免疫绵羊,保护力达75%。此苗安全有效,使用方便,可用于Br.ovis病的防治。 展开更多
关键词 佐剂苗 保护力 布鲁氏 制备
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草分枝杆菌死菌制剂治疗肺结核216例效果观察 被引量:2
17
作者 袁瑛 张玉明 +1 位作者 顾红艳 刘明福 《南通医学院学报》 2004年第4期454-455,共2页
目的 :探讨草分枝杆菌死菌制剂 (乌体林斯 )对肺结核的治疗效果。方法 :在正规抗结核治疗下 ,观察组加用乌体林斯免疫治疗。结果 :初治治疗组在治疗 2个月时痰菌阴转 84例 (97.7% ) ,治疗 6个月时病灶明显吸收 79例 (91.9% ) ,空洞闭合... 目的 :探讨草分枝杆菌死菌制剂 (乌体林斯 )对肺结核的治疗效果。方法 :在正规抗结核治疗下 ,观察组加用乌体林斯免疫治疗。结果 :初治治疗组在治疗 2个月时痰菌阴转 84例 (97.7% ) ,治疗 6个月时病灶明显吸收 79例 (91.9% ) ,空洞闭合 43例(93 .5 % ) ,明显优于初治对照组 ,两者差异有显著性 ;耐多药肺结核治疗组在治疗 6个月、9个月时痰菌阴转分别为 18例 (81.8% ) ,19例 (86.4% ) ,病灶明显吸收 17例 (77.3 % ) ,空洞闭合 14例 (73 .7% ) ,与对照组比较差异有显著性。结论 :乌体林斯免疫治疗肺结核 ,安全、有效 。 展开更多
关键词 肺结核 草分枝杆制剂 免疫治疗
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微生态制剂评价
18
作者 朱丽琼 陈孝治 《中华临床医药杂志(北京)》 CAS 2002年第17期84-86,共3页
关键词 制剂 制剂 微生态制剂
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一种双通道荧光扫描同步探测系统的设计 被引量:1
19
作者 陈盟 祁建城 +3 位作者 李玲君 杜耀华 程智 李抄 《医疗卫生装备》 CAS 2020年第7期41-46,68,共7页
目的:设计一种双通道荧光扫描同步探测系统,以实现对活/死菌的快速检测。方法:基于双色荧光染色技术,针对检测对象的荧光特性设计双光源同步激发的荧光探测系统;采用空间错位的共焦设计方法,解决双光源同步激发探测中互相干扰的问题;通... 目的:设计一种双通道荧光扫描同步探测系统,以实现对活/死菌的快速检测。方法:基于双色荧光染色技术,针对检测对象的荧光特性设计双光源同步激发的荧光探测系统;采用空间错位的共焦设计方法,解决双光源同步激发探测中互相干扰的问题;通过MATLAB编程编写阈值分割结合边缘检测的目标提取算法实现对细菌荧光信号的准确提取与计数。采用荧光探测性能测试、荧光显微镜对照试验和活/死菌混合样本扫描检测对系统的性能进行验证。结果:该系统能实现红绿荧光信号的同步扫描探测;与荧光显微镜检测获得的图像特征完全匹配,且扫描检测视野远大于荧光显微镜检测视野;测得的活/死菌比例值与已知样本的活菌含量的相关程度高(R2=0.9708)。结论:该系统可快速完成对活/死菌的准确识别和定量分析,在微生物活性检测和定量分析领域具有广阔的应用前景。 展开更多
关键词 活/区分检测 荧光染色技术 荧光探测 检测
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Br.ovis死菌佐剂苗的免疫效应研究
20
作者 刘志文 陈风清 +1 位作者 张银国 赵兴旺 《地方病通报》 1995年第4期17-19,共3页
本文报告了自制的Br.ovis死菌佐剂苗和Rev─1活菌苗在免疫羊只后引起良好的细胞免疫反应。两个试验血的特异性淋巴母细胞转化试验结果未见显著性差异,细胞游走抑制试验结果差异较大。在体液免疫检查中看到两组分别引出对免... 本文报告了自制的Br.ovis死菌佐剂苗和Rev─1活菌苗在免疫羊只后引起良好的细胞免疫反应。两个试验血的特异性淋巴母细胞转化试验结果未见显著性差异,细胞游走抑制试验结果差异较大。在体液免疫检查中看到两组分别引出对免疫抗原优势的抗体成分,其抗体滴度的升高和酯酶染色的阳性结果相平行。Br.ovis死菌佐剂苗组吞噬活的Br.ovis和死的Br.ovis的指数不一样,约有10的差别,这种差异在Rev─1活菌苗免疫组则看不出来,而且凋理吞噬指数和抗体的增长水平无同步关系。 展开更多
关键词 Br.ovis 佐剂苗 细胞免疫反应 布鲁氏
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