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产克拉维酸的棒状链霉菌突变株的选育 被引量:6
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作者 王艳萍 张永生 +1 位作者 张阳 左志晗 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期9-12,共4页
以棒状链霉菌(Streptomyces clavuligerus),B71为出发菌株,通过紫外线诱变育种,采用琼脂块法初筛和摇瓶发酵复筛,选育出2株甘油耐受性正向突变株S.clavuligerus B71—14和S.clavuligerus B71-49,在摇瓶条件下,其克拉维酸产量与出发菌株S... 以棒状链霉菌(Streptomyces clavuligerus),B71为出发菌株,通过紫外线诱变育种,采用琼脂块法初筛和摇瓶发酵复筛,选育出2株甘油耐受性正向突变株S.clavuligerus B71—14和S.clavuligerus B71-49,在摇瓶条件下,其克拉维酸产量与出发菌株S.davuligerus B71相比,分别提高了90.6%和88.8%,并具有良好的遗传稳定性。 展开更多
关键词 棒状霉菌 紫外诱变 耐甘油 克拉维酸
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棒状链霉菌甘油耐受量与克拉维酸合成的关系 被引量:9
2
作者 李丹丹 黄喜桂 +1 位作者 林文良 程元荣 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第1期14-15,共2页
在克拉维酸产生菌的菌种选育过程中,应用甘油耐受量作为选择压力能有效地除去低效价菌株,提高高产变株的检出率,较传统筛选法优越。试验表明,甘油耐受量高的菌株克拉维酸效价也高。在高甘油含量(11%)的甘油-精氨酸琼脂(AG... 在克拉维酸产生菌的菌种选育过程中,应用甘油耐受量作为选择压力能有效地除去低效价菌株,提高高产变株的检出率,较传统筛选法优越。试验表明,甘油耐受量高的菌株克拉维酸效价也高。在高甘油含量(11%)的甘油-精氨酸琼脂(AGS)平板挑取的菌株基本上无负变株,与对照菌株相比,有的菌侏效价提高20%~30%。耐甘油量低(6%)的变株,其效价比对照菌株降低了95%。 展开更多
关键词 棒状霉菌 克拉维酸 生物合成 甘油
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提高克拉维酸发酵产量的研究 被引量:7
3
作者 骆红英 《国外医药(抗生素分册)》 CAS 2004年第1期43-44,共2页
从三个方面着手研究提高克拉维酸 (CA)的发酵产量 :诱变选育CA高产菌株 ,生产培养基的选择以及pH控制。在CA分批发酵中采用pH变换策略 ,当CA产量达最大值时 ,将 pH7.0变化至 6.0 ,以减少分解 ,提高产量。与不控制pH时比较 ,CA产量可增加... 从三个方面着手研究提高克拉维酸 (CA)的发酵产量 :诱变选育CA高产菌株 ,生产培养基的选择以及pH控制。在CA分批发酵中采用pH变换策略 ,当CA产量达最大值时 ,将 pH7.0变化至 6.0 ,以减少分解 ,提高产量。与不控制pH时比较 ,CA产量可增加约 3 6%。 展开更多
关键词 克拉维酸 发酵产量 棒状霉菌 头孢菌素
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棒状链霉菌原生质体再生和克拉维酸产量变化的研究 被引量:3
4
作者 陈春福 柯永忠 +3 位作者 罗朗 朱薇玲 徐欣 毛振玛 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 1996年第2期94-96,共3页
在棒状链霉菌菌种选育过程中,采用原生质体形成与再生,结合物理和化学诱变处理,得到产克拉维酸稳定性好、产量高的菌株。试验结果表明,改进后的方法原生质体形成率达到10 ̄6/ml数量级。原生质体再生后的菌株,对物理及化学诱... 在棒状链霉菌菌种选育过程中,采用原生质体形成与再生,结合物理和化学诱变处理,得到产克拉维酸稳定性好、产量高的菌株。试验结果表明,改进后的方法原生质体形成率达到10 ̄6/ml数量级。原生质体再生后的菌株,对物理及化学诱变剂的敏感性增加,与再生前对照菌株相比,同剂量死亡率增加了1%~35%。对未经过原生质体形成与再生的菌株用EMS、UV、NTG诱变处理所得到的1713只斜面和经再生后的菌株用同样诱变剂处理所得到的1230只斜面进行发酵试验。经效价测定表明,产量突变株的频率分布向正向移动,正变菌株出现频率较未再生突变株高24.06%,且出现了1.46%较对照高一倍以上的在未再生诱变株中没有出现过的高产株,菌株稳定性提高,小菌落突变率由31%降低到8%,而抗生素产量提高到原来的326%,斜面的保藏时间明显延长,传代后F_3效价保持在90%以上。 展开更多
关键词 原生质体 再生 棒状霉菌 菌种选育 克拉维酸
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提高棒状链霉菌中克拉维酸产量的可能途径 被引量:5
5
作者 杨斌 操二虎 邓子新 《国外医药(抗生素分册)》 CAS 1998年第6期419-422,425,共5页
棒状链霉菌(Streptomyces clavuligerus)作为克拉维酸(clavulanic acid,CA)生产菌株在过去二十多年中,从生化代谢和与CA相关的S.clavuligerus的分子生物学研究方面均为我们提从了许多有益的信息,使人们能够应用经典和现代的遗传学方法... 棒状链霉菌(Streptomyces clavuligerus)作为克拉维酸(clavulanic acid,CA)生产菌株在过去二十多年中,从生化代谢和与CA相关的S.clavuligerus的分子生物学研究方面均为我们提从了许多有益的信息,使人们能够应用经典和现代的遗传学方法和手段,尤其是基因工程和代谢工程等技术来进行CA高产菌的探索和尝试. 展开更多
关键词 棒状霉菌 克拉维酸 产量
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克拉维酸产生菌的改良 被引量:5
6
作者 孟勇 王忠彦 官家发 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期614-617,共4页
以棒状链霉菌Streptomyces clavu ligerus CCRC11518(ATCC27064)为出发菌,采用经典物理和化学诱变剂处理的微生物诱变技术和现代理性化筛选方法,通过筛选抗终产物结构类似物舒巴坦钠突变株、底物甘油耐受型突变株、营养缺陷型突变株,最... 以棒状链霉菌Streptomyces clavu ligerus CCRC11518(ATCC27064)为出发菌,采用经典物理和化学诱变剂处理的微生物诱变技术和现代理性化筛选方法,通过筛选抗终产物结构类似物舒巴坦钠突变株、底物甘油耐受型突变株、营养缺陷型突变株,最后获得一株克拉维酸高产突变株III50,其克拉维酸摇瓶产量为834.8μg/mL,是出发菌株产量(282.4μg/mL)的2.96倍.该突变株在琼脂斜面培养基上连续转接传代8代,克拉维酸的产量保持稳定. 展开更多
关键词 克拉维酸 棒状霉菌 菌种改良 理性化筛选
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棒状链霉菌中lat基因的突变及其对克拉维酸产量的影响 被引量:3
7
作者 王艳萍 崔艳艳 +2 位作者 左志晗 郭金体 张阳 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期1-4,共4页
以棒状链霉菌Streptomyces clavuligerus NRRL3585的染色体为模板扩增得到1条1.77kb的lat基因片段,并将其用于构建重组质粒pKCLES。将pKCLES由E.coli ET12567接合转移至S.clavuligerus中。重组质粒pKCLES与S.clavuligerus染色体中野生型... 以棒状链霉菌Streptomyces clavuligerus NRRL3585的染色体为模板扩增得到1条1.77kb的lat基因片段,并将其用于构建重组质粒pKCLES。将pKCLES由E.coli ET12567接合转移至S.clavuligerus中。重组质粒pKCLES与S.clavuligerus染色体中野生型lat基因发生同源交换,从而获得了带有阿泊拉抗性的突变菌株。对S.clavuligerus NRRL3585以及lat突变菌株的基因组进行PCR验证,且测定了这2种菌株的产头酶素C的能力。结果均表明,突变菌株中的lat基因中插入了含有阿泊拉抗性的pKC1139片段而遭到了破坏。另外,以HPLC法测定了这2种菌株在不同培养时间(72h和96h)下的克拉维酸的产量,结果显示,lat突变菌株的克拉维酸产量最高能达到其原始菌株的2.3倍。 展开更多
关键词 棒状霉菌 克拉维酸 lat基因 基因突变
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棒状链霉菌中lat基因的置换与克拉维酸的选择性生产 被引量:3
8
作者 舒杨 何建勇 +2 位作者 田威 张怡轩 张寒丽 《沈阳药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期62-66,共5页
目的提高棒状链霉菌的克拉维酸生产能力 ,去除副产物头霉素C。方法将安普霉素抗性基因片段插入到 4 7kb的lat pcbAB基因片段中 ,采用接合转移方法对棒状链霉菌中头霉素C生物合成的关键基因lat基因进行了置换。结果与结论经PCR验证 ,染... 目的提高棒状链霉菌的克拉维酸生产能力 ,去除副产物头霉素C。方法将安普霉素抗性基因片段插入到 4 7kb的lat pcbAB基因片段中 ,采用接合转移方法对棒状链霉菌中头霉素C生物合成的关键基因lat基因进行了置换。结果与结论经PCR验证 ,染色体上正常的lat pcbAB基因被插入失活的基因所替代。对重组菌株的发酵产物进行HPLC检测 ,发现所有的重组菌株均不再合成头霉素C ,并且重组菌株C35 85 lat ::apr、C2 5 1 lat::apr和C16 6 lat::apr的克拉维酸产量较出发菌株分别提高了 2 6 7 6 8%、4 3 6 9%和 35 0 5 %。结果表明基因插入失活是去除多余组分 。 展开更多
关键词 棒状霉菌 基因置换 高效液相色谱法 克拉维酸 头霉素C
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增加ccaR基因剂量提高棒状链霉菌克拉维酸产量的研究 被引量:3
9
作者 白小佳 左志晗 王艳萍 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2008年第8期67-70,共4页
CcaR蛋白对棒状链霉菌(S.clavuligerus)中克拉维酸的合成具有正调控作用,由ccaR基因编码。PCR获得包含ccaR完整基因及其上下游一定区域的扩增产物,构建重组质粒pSET152-ccaR并转化大肠杆菌ET12567/pUZ8002后,通过属间接合转移至棒状链霉... CcaR蛋白对棒状链霉菌(S.clavuligerus)中克拉维酸的合成具有正调控作用,由ccaR基因编码。PCR获得包含ccaR完整基因及其上下游一定区域的扩增产物,构建重组质粒pSET152-ccaR并转化大肠杆菌ET12567/pUZ8002后,通过属间接合转移至棒状链霉菌B71-14中。pSET152含有attP位点,可以与链霉菌基因组中的attB位点特异性同源整合,将重组质粒pSET152-ccaR携带的ccaR插入到S.clavuligerusB71-14染色体中的attB位点,实现了在S.clavuligerusB71-14基因组中增加一个拷贝ccaR基因的目的,所得的突变株S.clavuligerusB71-14:ccaR产酸量可达821.92 mg/L,是出发菌株的1.54倍。 展开更多
关键词 棒状霉菌 克拉维酸 ccaR基因
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lat基因的失活在提高棒状链霉菌棒酸产量中的应用 被引量:2
10
作者 左志晗 张阳 +1 位作者 郭金体 王艳萍 《天津科技大学学报》 CAS 2007年第4期15-19,共5页
利用lat基因突变的重组质粒pKCLHS对紫外诱变的克拉维酸(Clavulanic acid)高产菌株Streptomyces clavuligerusB71-14的lat基因进行了插入失活,对获得的基因突变子进行了PCR验证、菌体生长测定、发酵特征测定,并对发酵液中的克拉维酸进... 利用lat基因突变的重组质粒pKCLHS对紫外诱变的克拉维酸(Clavulanic acid)高产菌株Streptomyces clavuligerusB71-14的lat基因进行了插入失活,对获得的基因突变子进行了PCR验证、菌体生长测定、发酵特征测定,并对发酵液中的克拉维酸进行了初步提取和含量测定.结果表明,突变菌株的lat基因中插入了含有阿泊拉抗性的基因片段,突变菌株的生长速度与原始菌株无明显变化l,at突变菌株的克拉维酸产量最高能达到其原始菌株的1.11~1.29倍,产头霉素C的能力显著降低. 展开更多
关键词 棒状霉菌 克拉维酸 lat基因 基因突变
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影响克拉维酸生物合成的氨基酸 被引量:2
11
作者 朱薇玲 《生物技术》 CAS CSCD 2002年第5期24-25,共2页
发酵液的氨基酸分析显示 ,谷氨酸、精氨酸、天门冬氨酸、丙氨酸易被棒状链霉菌利用 ,发酵培养基中添加上述氨基酸后 ,谷氨酸、精氨酸有利于克拉维酸的生物合成 ,适时添加谷氨酸、精氨酸可分别提高克拉维酸的产量约 2 5 %和 12 % ;而蛋... 发酵液的氨基酸分析显示 ,谷氨酸、精氨酸、天门冬氨酸、丙氨酸易被棒状链霉菌利用 ,发酵培养基中添加上述氨基酸后 ,谷氨酸、精氨酸有利于克拉维酸的生物合成 ,适时添加谷氨酸、精氨酸可分别提高克拉维酸的产量约 2 5 %和 12 % ;而蛋氨酸、半胱氨酸含S氨基酸对克拉维酸生物合成不利。不同来源的黄豆粉作发酵培养基氮源 ,因其组成中某些氨基酸含量的差异 ,可使克拉维酸的产量相差百分之十几。 展开更多
关键词 克拉维酸 生物合成 氨基酸 棒状霉菌 谷氨酸 精氨酸 黄豆粉
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克拉维酸产生菌的诱变育种 被引量:3
12
作者 孙荣勋 韩斌 +2 位作者 赵海 范成英 官家发 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期684-687,共4页
以克拉维酸产生菌棒状链霉菌Streptomyces clavuligerus CCRC11518 III50为出发菌株,比较各种物理和化学诱变剂处理对其克拉维酸生物合成的影响,确定亚硝基胍为棒状链霉菌诱变育种的诱变剂及其处理剂量为2mgmL-1、40min.经亚硝基胍处理4... 以克拉维酸产生菌棒状链霉菌Streptomyces clavuligerus CCRC11518 III50为出发菌株,比较各种物理和化学诱变剂处理对其克拉维酸生物合成的影响,确定亚硝基胍为棒状链霉菌诱变育种的诱变剂及其处理剂量为2mgmL-1、40min.经亚硝基胍处理40min(处理浓度为2mgmL-1)后,采用新颖理性化筛选方法,通过筛选自身代谢产物抗性突变株、克拉维酸抗性突变株和链霉素抗性突变株,最终得到一株克拉维酸高产菌VI118,其克拉维酸产量较出发菌株提高了67.9%.该高产突变株在琼脂斜面培养基上连续传接10代,克拉维酸产量保持稳定. 展开更多
关键词 棒状霉菌 克拉维酸 理性化筛选 菌种改良
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一种快速显色定量检测微生物样品中棒酸的方法 被引量:2
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作者 戴西达 向四海 +2 位作者 李佳 高强 杨克迁 《中国科学:生命科学》 CSCD 北大核心 2012年第3期246-251,共6页
为满足从棒状链霉菌突变库中筛选棒酸高产株的需求,基于显色法原理设计了一种快速检测棒酸含量的方法.该方法的反应机制是β-内酰胺酶水解其黄色底物头孢硝噻吩(λmax=390nm),从而生成红色产物(λmax=486nm).由于棒酸是β-内酰胺酶不可... 为满足从棒状链霉菌突变库中筛选棒酸高产株的需求,基于显色法原理设计了一种快速检测棒酸含量的方法.该方法的反应机制是β-内酰胺酶水解其黄色底物头孢硝噻吩(λmax=390nm),从而生成红色产物(λmax=486nm).由于棒酸是β-内酰胺酶不可逆抑制剂,在上述反应中棒酸含量的高低将影响底物和产物的量,因此可以通过测定底物和产物的比值(A390/A486)最终测定棒酸的含量.本实验证实,该方法对棒酸的灵敏度为50μg/L,最佳检测窗口为0.05~10mg/L,且该方法的检测结果与HPLC法相关性很好.通过筛选一个小规模棒状链霉菌突变株库,证实该显色法可以快速识别和评价棒酸高产突变株.因此该方法若用于工业实践中的大规模突变株筛选,将节省大量的时间与人力.另外,还利用该显色反应开发了平板检测法,直接根据颜色差异定性判断平板菌落棒酸产量高低.该显色法是一种快速、方便、可靠的棒酸产量检测方法,适用于高通量筛选棒酸高产株. 展开更多
关键词 棒酸 棒状霉菌 头孢硝噻吩 显色法 Β-内酰胺酶
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棒状链霉菌lat基因的中断对棒酸产量的影响 被引量:2
14
作者 王永华 荆琛峰 +2 位作者 陶美凤 杨博 徐安龙 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期500-503,共4页
从棒状链霉菌中克隆1.8kb的lat基因片段,构建了基因置换质粒pXAL1和pXAL2。运用接合转移方法把中断载体导入棒状链霉菌中进行lat的中断,得到1株接合转移子AmrThios,命名为XAL863。通过Southern杂交分析及赖氨酸转氨酶活性测定,证明此菌... 从棒状链霉菌中克隆1.8kb的lat基因片段,构建了基因置换质粒pXAL1和pXAL2。运用接合转移方法把中断载体导入棒状链霉菌中进行lat的中断,得到1株接合转移子AmrThios,命名为XAL863。通过Southern杂交分析及赖氨酸转氨酶活性测定,证明此菌株的lat基因被中断。通过发酵培养,HPLC方法检测棒酸含量,发现棒酸产量明显提高,约为原产量的1.8倍。 展开更多
关键词 棒状霉菌 棒酸 lat 基因中断
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棒状链霉菌控制抗生素合成的调节机制 被引量:2
15
作者 朱碧银 洪文荣 《国外医药(抗生素分册)》 CAS 2010年第6期271-277,共7页
棒状链霉菌产生大量天然产物,包括抗生素、抗肿瘤药物、β-内酰胺酶抑制剂或免疫调节活性物质等。经过对头霉素C、克拉维酸和其它带克拉维烷结构化合物生物合成的多年研究,发现在棒状链霉菌中,存在着网络调节机制,并通过途径专一性调节... 棒状链霉菌产生大量天然产物,包括抗生素、抗肿瘤药物、β-内酰胺酶抑制剂或免疫调节活性物质等。经过对头霉素C、克拉维酸和其它带克拉维烷结构化合物生物合成的多年研究,发现在棒状链霉菌中,存在着网络调节机制,并通过途径专一性调节器或者多效调节器,来控制不同化合物的合成。有迹象表明,在该链霉菌中,可能还存在着一种γ-丁内酯的信号系统。此外,棒状链霉菌还具有一种不同于以前报道的、存在于其它链霉菌中的严格应答机制。 展开更多
关键词 克拉维酸 头孢霉素C 调节 棒状霉菌 PPGPP 多效调节因子 Γ-丁内酯
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原生质体融合法提高棒状链霉菌的克拉维酸产量 被引量:1
16
作者 左志晗 张阳 王艳萍 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期53-56,60,共5页
采用原生质体融合技术,将克拉维酸生产菌——棒状链霉菌甘油耐受性突变株B71-14和舒巴坦钠耐受性突变株B71-50进行了原生质体融合。以2种抗性为选择标记,筛选融合子。从形态上与2亲本菌株不同的98株融合子中发现了1株融合子F-11,既有甘... 采用原生质体融合技术,将克拉维酸生产菌——棒状链霉菌甘油耐受性突变株B71-14和舒巴坦钠耐受性突变株B71-50进行了原生质体融合。以2种抗性为选择标记,筛选融合子。从形态上与2亲本菌株不同的98株融合子中发现了1株融合子F-11,既有甘油抗性又有舒巴坦钠的抗性,其克拉维酸产量为742.71 mg/L,是亲本菌株B71-14(538.20 mg/L)的1.38倍,是亲本菌株B71-50(479.91 mg/L)的1.55倍。 展开更多
关键词 棒状霉菌 原生质体融合 克拉维酸 甘油耐受性 舒巴坦钠耐受性
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转录组分析棒状链霉菌F613-1高产克拉维酸的分子基础 被引量:2
17
作者 覃荣活 付加芳 +2 位作者 宗工理 王志宇 曹广祥 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第9期235-243,共9页
旨在探究S.clavuligerus工业菌株高产克拉维酸(CA)的分子基础。采用转录组高通量测序,对比标准菌株和高产CA的工业菌株F613-1之间的基因转录水平差异,结合菌株表型差异进行综合分析。结果表型比较显示,F613-1在固体培养基中生长速度、... 旨在探究S.clavuligerus工业菌株高产克拉维酸(CA)的分子基础。采用转录组高通量测序,对比标准菌株和高产CA的工业菌株F613-1之间的基因转录水平差异,结合菌株表型差异进行综合分析。结果表型比较显示,F613-1在固体培养基中生长速度、气生菌丝形态、孢子形成等方面与标准菌株存在差异。液体摇瓶培养中,菌体生长速度无明显变化,但F613-1的糖消耗量显著降低,同时CA产量比ATCC27064提高约11.7倍。转录组分析显示,F613-1中CA基因簇及其途径特异性调控基因的表达量显著升高,其副产物全霉素基因簇的表达量显著下降;CA合成原料精氨酸和3-磷酸甘油醛代谢相关基因的转录水平发生显著变化,精氨酸合成代谢基因上调,而3-磷酸甘油醛分解代谢基因下调;ABC转运系统中80多个基因的转录水平也发生明显变化,其中42个显著上调,38个显著下调。工业生产菌株高产克拉维酸的主要原因是CA基因簇及其调控基因表达量的升高、相关副产物基因簇的沉默及CA合成原料精氨酸和3-磷酸甘油醛的积累。 展开更多
关键词 棒状霉菌 工业菌株 转录组 克拉维酸
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克拉维酸产生菌的优化培养 被引量:2
18
作者 朱薇玲 《生物技术》 CAS CSCD 2003年第1期27-28,共2页
为提高克拉维酸产量 ,通过摇瓶实验考查了多种氮、碳源及无机盐对克拉维酸产量的影响 ,并对产生菌的部分性能进行了考查。试验表明实验中所用棒状链霉菌 (Strepto mycesclavuligerus)合成克拉维酸的最佳氮、碳源及无机盐是黄豆粉、甘油... 为提高克拉维酸产量 ,通过摇瓶实验考查了多种氮、碳源及无机盐对克拉维酸产量的影响 ,并对产生菌的部分性能进行了考查。试验表明实验中所用棒状链霉菌 (Strepto mycesclavuligerus)合成克拉维酸的最佳氮、碳源及无机盐是黄豆粉、甘油、KH2 PO4、MgSO4,其最佳培养基配比 (%)分别为2 8、1 8、0 0 4、0 0 5。为保证克拉维酸高产、稳产 ,产生菌斜面冷藏时间不宜超过 1个月 ,斜面传代次数不宜超过 4代 ,沙土、2 0 %甘油溶液、冷冻干燥管均可用于产生菌的孢子保藏。 展开更多
关键词 优化培养 克拉维酸 棒状霉菌 摇瓶培养 培养基 传代
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Coordination of glycerol utilization and clavulanic acid biosynthesis to improve clavulanic acid production in Streptomyces clavuligerus 被引量:2
19
作者 GUO DeKun ZHAO YouBao YANG KeQian 《Science China(Life Sciences)》 SCIE CAS 2013年第7期591-600,共10页
The glycerol utilization (gyl) operon is involved in clavulanic acid (CA) production by Streptomyces clavuligerus, and possibly supplies the glyceraldehyde-3-phosphate (G3P) precursor for CA biosynthesis. The gyl oper... The glycerol utilization (gyl) operon is involved in clavulanic acid (CA) production by Streptomyces clavuligerus, and possibly supplies the glyceraldehyde-3-phosphate (G3P) precursor for CA biosynthesis. The gyl operon is regulated by GylR and is induced by glycerol. To enhance CA production in S. clavuligerus, an extra copy of ccaR expressed from Pgyl (the gyl promoter) was integrated into the chromosome of S. clavuligerus NRRL 3585. This construct coordinated the transcription of CA biosynthetic pathway genes with expression of the gyl operon. In the transformants carrying the Pgyl-controlled regulatory gene ccaR, CA production was enhanced 3.19-fold in glycerol-enriched batch cultures, relative to the control strain carrying an extra copy of ccaR controlled by its own promoter (PccaR). Consistent with enhanced CA production, the transcription levels of ccaR, ceas2 and claR were significantly up-regulated in the transformants containing Pgyl-controlled ccaR. 展开更多
关键词 clavulanic acid ccaR glycerol utilization Streptomyces clavuligerus
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PCR-Targeting体系构建棒状链霉菌基因突变株 被引量:1
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作者 左志晗 郑津辉 +1 位作者 赵海龙 李玉珊 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期12-16,共5页
棒状链霉菌(Streptomyces clavuligerus)可产生多种β-内酰胺类化合物,其中包括克拉维酸。利用聚合酶链式反应(PCR)-Targeting体系构建棒状链霉菌突变株是获得克拉维酸高产菌株的又一可行方法。采用该体系对棒状链霉菌的lat基因进行了敲... 棒状链霉菌(Streptomyces clavuligerus)可产生多种β-内酰胺类化合物,其中包括克拉维酸。利用聚合酶链式反应(PCR)-Targeting体系构建棒状链霉菌突变株是获得克拉维酸高产菌株的又一可行方法。采用该体系对棒状链霉菌的lat基因进行了敲除,获得了没有抗性标记的lat基因被敲除的突变株S.clavuligerus lat::scar,其克拉维酸产量是出发菌株的2.8倍。由于最终构建的突变株没有抗性标记,因此可以将该方法应用于突变棒状链霉菌的其他基因,实现用一种抗性标记突变同一菌株不同基因的目的,为链霉菌的基因突变提供了又一种有效的方法。 展开更多
关键词 棒状霉菌 PCR-寻靶 突变 克拉维酸
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