目的：克隆红花中查耳酮异构酶（Chalcone-flavonone isomerase,CHI）基因,进行生物信息学分析、开花1~7 d CHI表达量及羟基红花黄色素A（hydroxysafflor yellow A,HSYA）含量分析,为红花中CHI功能验证、黄酮类成分合成及调控机制研究...目的：克隆红花中查耳酮异构酶（Chalcone-flavonone isomerase,CHI）基因,进行生物信息学分析、开花1~7 d CHI表达量及羟基红花黄色素A（hydroxysafflor yellow A,HSYA）含量分析,为红花中CHI功能验证、黄酮类成分合成及调控机制研究提供基础。方法：克隆CHI序列,通过生物信息学预测CHI特性,使用Real-time PCR检测红花开花1~7 d CHI的相对表达量,HPLC检测HSYA动态累积的百分含量,并进行关联分析。结果：克隆获得红花CHI序列全长,检测得到红花开花1~7 d CHI的相对表达量及HSYA动态累积的百分含量。CHI表达量及HSYA动态累积百分含量呈现相似的变化趋势：均在1~4 d逐渐升高,在第4天达到最高峰,第5~7天急剧降低。结论：此研究可为红花中CHI功能验证、黄酮类成分合成及调控机制研究提供基础。展开更多
目的构建红花查耳酮异构酶(CHI)基因的植物表达载体并在拟南芥中进行超表达验证该基因的功能。方法将已经分离的红花CHI基因作为目的基因,在其两端引入Bam H I和Eco R I酶切位点,构建含有35S启动子的植物超表达载体p BASTA-CHI,通过Flor...目的构建红花查耳酮异构酶(CHI)基因的植物表达载体并在拟南芥中进行超表达验证该基因的功能。方法将已经分离的红花CHI基因作为目的基因,在其两端引入Bam H I和Eco R I酶切位点,构建含有35S启动子的植物超表达载体p BASTA-CHI,通过Flora-dip法将其转化到拟南芥中,并对转基因拟南芥T2代植株进行PCR和总黄酮量检测。结果转基因拟南芥T2代植株的PCR检测,红花CHI基因已经初步整合到拟南芥基因组中,黄酮量检测表明,转红花CHI基因的拟南芥比野生型拟南芥中的黄酮量有所提高,最高提高到2.3倍。结论成功构建了含有红花CHI基因的植物表达载体,并在拟南芥中进行超表达,获得了转基因拟南芥T2植株。展开更多
文摘目的：克隆红花中查耳酮异构酶（Chalcone-flavonone isomerase,CHI）基因,进行生物信息学分析、开花1~7 d CHI表达量及羟基红花黄色素A（hydroxysafflor yellow A,HSYA）含量分析,为红花中CHI功能验证、黄酮类成分合成及调控机制研究提供基础。方法：克隆CHI序列,通过生物信息学预测CHI特性,使用Real-time PCR检测红花开花1~7 d CHI的相对表达量,HPLC检测HSYA动态累积的百分含量,并进行关联分析。结果：克隆获得红花CHI序列全长,检测得到红花开花1~7 d CHI的相对表达量及HSYA动态累积的百分含量。CHI表达量及HSYA动态累积百分含量呈现相似的变化趋势：均在1~4 d逐渐升高,在第4天达到最高峰,第5~7天急剧降低。结论：此研究可为红花中CHI功能验证、黄酮类成分合成及调控机制研究提供基础。
文摘目的构建红花查耳酮异构酶(CHI)基因的植物表达载体并在拟南芥中进行超表达验证该基因的功能。方法将已经分离的红花CHI基因作为目的基因,在其两端引入Bam H I和Eco R I酶切位点,构建含有35S启动子的植物超表达载体p BASTA-CHI,通过Flora-dip法将其转化到拟南芥中,并对转基因拟南芥T2代植株进行PCR和总黄酮量检测。结果转基因拟南芥T2代植株的PCR检测,红花CHI基因已经初步整合到拟南芥基因组中,黄酮量检测表明,转红花CHI基因的拟南芥比野生型拟南芥中的黄酮量有所提高,最高提高到2.3倍。结论成功构建了含有红花CHI基因的植物表达载体,并在拟南芥中进行超表达,获得了转基因拟南芥T2植株。
