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肽抗原ELISA检测系统性红斑狼疮患者抗核糖体蛋白P抗体的临床意义 被引量:8
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作者 叶萍 许桂芳 +3 位作者 陈晓翔 叶霜 陆瑜 陈顺乐 《中华风湿病学杂志》 CAS CSCD 2006年第2期73-76,共4页
目的研究抗核糖体P蛋白(Rib-P)肽抗原抗体对系统性红斑狼疮(SLE)的临床诊断意义。方法用来源于抗核糖体P蛋白的3段表位肽为抗原,用酶联免疫吸附试验(ELISA)法和免疫印迹法(IBT)检测100例SLE病人和100例对照血清中抗Rib-P抗体。其中以90... 目的研究抗核糖体P蛋白(Rib-P)肽抗原抗体对系统性红斑狼疮(SLE)的临床诊断意义。方法用来源于抗核糖体P蛋白的3段表位肽为抗原,用酶联免疫吸附试验(ELISA)法和免疫印迹法(IBT)检测100例SLE病人和100例对照血清中抗Rib-P抗体。其中以90例自身免疫病病人(45例类风湿关节炎、22例强直性脊柱炎、8例干燥综合征、6例多肌炎/皮肌炎和9例其他自身免疫病病人)为疾病对照组和10名健康人为正常对照组。结果以对照组的吸光度(x±3s)设定为阳性临界值,临界值为1.258,SLE病人的阳性率为14%,病人对照组为1%。两组之间差异有统计学意义(P<0.01)。ELISA法的特异性为99%,阳性预测值为93.3%,阴性预测值为53.5%。IBT的阳性率为16%,ELISA和IBT的检测的比较差异无统计学意义(!=0.922,P=0.000)。结论Rib-P抗原肽ELISA与传统的IBT方法相关性好,对SLE病人有高特异性,有较好的诊断价值,与年龄、面部红斑、关节炎、多浆膜炎、肾脏累积、血液累积和神经系统累及等临床症状,以及与抗核抗体(ANA)、抗Sm抗体、抗u1RNP抗体、抗SSA/SSB抗体、抗心磷指抗体(ACL)和病情活动度无关。 展开更多
关键词 核糖体蛋白质 红斑狼疮 系统性
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应关注系统性红斑狼疮脑组织损害的发病机制 被引量:6
2
作者 邓国民 《中国现代神经疾病杂志》 CAS 2014年第9期741-743,共3页
系统性红斑狼疮(SLE)是一种严重的慢性全身性自身免疫性疾病,以大量自身抗体产生和多脏器损害为主要临床特征。系统性红斑狼疮好发于青年女性,发病高峰年龄为15~40岁,男女发病比例约为1:9,其中儿童和老年患者男女发病比例约为1... 系统性红斑狼疮(SLE)是一种严重的慢性全身性自身免疫性疾病,以大量自身抗体产生和多脏器损害为主要临床特征。系统性红斑狼疮好发于青年女性,发病高峰年龄为15~40岁,男女发病比例约为1:9,其中儿童和老年患者男女发病比例约为1:2,最近的流行病学调查资料显示全球患病率为(20~50)/10万,我国患病率约为70/10万”。 展开更多
关键词 红斑狼疮 系统性 脑疾病 核糖体蛋白质 抗原 CD3 T淋巴细胞
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MAP30全长基因的克隆及在巴斯德毕赤酵母中的高效表达研究 被引量:6
3
作者 朱振洪 杨威威 +1 位作者 葛立军 万海同 《中国医药生物技术》 CSCD 2010年第2期110-116,共7页
目的研究毕赤酵母中高效表达全长MAP30蛋白及其生物活性。方法根据GeneBank公布的MAP30全序列设计特异性引物,以苦瓜基因组为模板,PCR扩增MAP30全长基因,将该基因插入pPIC9k载体中,经SacI酶切线性化后,电转化至GS115细胞,再通过G418筛选... 目的研究毕赤酵母中高效表达全长MAP30蛋白及其生物活性。方法根据GeneBank公布的MAP30全序列设计特异性引物,以苦瓜基因组为模板,PCR扩增MAP30全长基因,将该基因插入pPIC9k载体中,经SacI酶切线性化后,电转化至GS115细胞,再通过G418筛选,最终获得了高拷贝重组GS115菌株。重组菌株在甲醇诱导下,SDS-PAGE分析表达的特异性条带,运用Pharmacia VDS图像分析软件进行条带密度扫描,得到各条带的扫描曲线图,计算出同一泳道目的蛋白条带峰面积相对于整个曲线所占的百分比,即蛋白纯度,并根据蛋白纯度和上清蛋白总量(Lowry法)计算出发酵上清液中目标蛋白含量。纯化时首先用75%的饱和硫酸铵盐析,然后用Phenyl Sepharose6FF疏水层析,再用CM-sepharoseFF阳离子层析。采用MTT法检测MAP30蛋白对人胃癌细胞株SGC7901的抑制作用。为验证重组MAP30蛋白结构的正确性,采用EDMAN降解法分析N末端8个氨基酸。结果重组菌株在甲醇诱导下,SDS-PAGE分析可见相对分子质量32000的特异性条带,重组蛋白占上清液总蛋白的67%;发酵液经硫酸铵沉淀、疏水和阳离子交换层析后,目的蛋白总回收率为32.4%。MTT法检测结果表明,重组MAP30蛋白具有明显的抑制人胃癌细胞SGC7901的活性,IC50为30μg/ml。N端的8个氨基酸测序进一步证实与理论一致。结论重组MAP30蛋白在毕赤酵母中正确表达,表达产物具有抑制肿瘤细胞的活性。 展开更多
关键词 苦瓜 核糖体蛋白质 毕赤酵母 基因表达
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黄芪甲苷通过调控宿主核糖体翻译开关抑制HBV复制的机制 被引量:4
4
作者 常凯 王艳艳 +4 位作者 那琬琳 刘晨霞 叶雨笙 江忠勇 刘媛 《临床肝胆病杂志》 CAS 北大核心 2022年第7期1495-1502,共8页
目的分析黄芪甲苷抑制HBV复制的宿主调控机制。方法使用不同浓度的黄芪甲苷处理人正常肝细胞(L-02),根据黄芪甲苷浓度的不同,分为0、5、10和20μg/mL 4组。应用CCK-8检测细胞活性,流式细胞法检测细胞凋亡,化学发光和生化方法检测AFP、AL... 目的分析黄芪甲苷抑制HBV复制的宿主调控机制。方法使用不同浓度的黄芪甲苷处理人正常肝细胞(L-02),根据黄芪甲苷浓度的不同,分为0、5、10和20μg/mL 4组。应用CCK-8检测细胞活性,流式细胞法检测细胞凋亡,化学发光和生化方法检测AFP、ALT、AST和ALP外泌水平,评估黄芪甲苷对正常细胞的影响。用黄芪甲苷处理携带HBV的肝癌细胞Hep3B,应用qPCR方法检测HBV DNA、pgRNA、MTIF2、RPL10基因表达量,ELISA测法检测HBsAg和HBeAg,评估对HBV复制的影响。应用TCGA和GEO数据库结合R语言资料包对RPL10和MTIF2在临床样本中的预后影响进行分析验证。绘制Kaplan-Meier生存曲线,log-rank检验用于分析比较两组或多组之间的生存差异,进行了time ROC分析以比较RPL10和MTIF2基因的预测准确性和风险评分。计量资料多组间比较和同一组内不同时间段比较均采用单因素方差分析,进一步分析两两组间比较采用Bonferroni方法。结果20μg/mL组处理24 h和48 h相较未处理组细胞生长活性均显著提高(P值均<0.05),20μg/mL组处理72 h相较10μg/mL组生长活性提高(P<0.05),5μg/mL组处理72 h相较未处理组生长活性提高(P<0.05)。5、10和20μg/mL 3个处理组AFP水平均较未处理组显著增高(P值均<0.05),10和20μg/mL 2个处理组ALT水平分别均较未处理和5μg/mL 2组显著降低(P值均<0.05),20μg/mL组ALT水平较10μg/mL组显著降低(P<0.05)。5、10和20μg/mL 3个处理组AST水平较未处理组均显著增高(P值均<0.05)。5、10和20μg/mL 3个处理组HBV DNA、pgRNA、HBsAg、HBeAg、RPL10和MTIF2水平与未处理组比较差异均有统计学意义(P值均<0.05)。生物信息学分析结果显示,HBV感染的肝癌患者中RPL10和MTIF2基因较高水平表达的患者预后较差,而在无HBV感染的肝癌患者中不存在此现象。结论黄芪甲苷能够抑制翻译起始蛋白MTIF2和核糖体大亚基成分RPL10,通过调控宿主核糖体翻译开关降低HBV复制。 展开更多
关键词 黄芪甲苷 乙型肝炎病毒 核糖体蛋白质
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丝瓜籽核糖体失活蛋白luffin-a基因的克隆和表达 被引量:3
5
作者 徐小蓉 詹金彪 夏铮 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 2005年第3期207-211,216,共6页
 目的:从丝瓜籽中克隆HIV整合酶抑制剂luffin-a基因,并构建其表达载体。方法:根据报道的cDNA序列,用RT-PCR的方法从未成熟的丝瓜籽中克隆luffin-a基因,T-A克隆后鉴定核苷酸序列。构建表达载体pET-44a(+)-luffin-a,转化大肠杆菌BL21(DE...  目的:从丝瓜籽中克隆HIV整合酶抑制剂luffin-a基因,并构建其表达载体。方法:根据报道的cDNA序列,用RT-PCR的方法从未成熟的丝瓜籽中克隆luffin-a基因,T-A克隆后鉴定核苷酸序列。构建表达载体pET-44a(+)-luffin-a,转化大肠杆菌BL21(DE3),并经IPTG诱导表达。用透析法对包含体复性;SDS-PAGE鉴定luffin-a表达产物,用MTT法分析其生物学活性。结果:克隆的luffin-a基因与国外报道的核苷酸序列同源性为99.73%,其所编码的氨基酸序列完全一致。经SDS-PAGE分析:luffin-a主要存在于包含体中。MTT法测定:复性后蛋白具有与蓖麻毒素A链相似的细胞毒性。结论:本研究成功地构建了luffin-a的表达系统,所表达蛋白经复性后具有生物学活性。 展开更多
关键词 核糖体蛋白质 核糖体失活蛋白luffin 丝瓜/化学 克隆 分子 基因表达 细胞毒性 HIV整合酶 聚合酶链反应
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核糖体蛋白S24对人颈动脉粥样硬化的影响及机制
6
作者 李卓 陈百强 +2 位作者 孔祥一 秦臻 栗世方 《青岛大学学报(医学版)》 CAS 2023年第1期6-10,共5页
目的研究核糖体蛋白S24(RPS24)对人颈动脉斑块血管新生的作用以及对磷酸甘油酸激酶1(PGK1)的调控。方法采用免疫印迹(Western blot)方法检测人体颈动脉稳定斑块组织(稳定组)和易损斑块组织(易损组)中的RPS24和PGK1蛋白表达水平。体外培... 目的研究核糖体蛋白S24(RPS24)对人颈动脉斑块血管新生的作用以及对磷酸甘油酸激酶1(PGK1)的调控。方法采用免疫印迹(Western blot)方法检测人体颈动脉稳定斑块组织(稳定组)和易损斑块组织(易损组)中的RPS24和PGK1蛋白表达水平。体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC),将细胞分为对照组和RPS24小干扰RNA(siRNA)组(siRNA组),进行成小管实验,分别检测两组细胞形成小管的数量和总长度,采用Western blot法检测两组细胞培养上清液中RPS24和PGK1的蛋白表达量。结果易损组人颈动脉斑块组织中RPS24蛋白表达水平明显高于稳定组,而PGK1蛋白表达水平则明显低于稳定组,差异具有统计学意义(t=47.50、39.06,P<0.05)。siRNA组细胞形成小管的数量和总长度明显低于对照组(t=9.80、25.74,P<0.05)。siRNA组细胞培养上清液中RPS24蛋白表达量显著低于对照组,而PGK1蛋白表达量则显著高于对照组(t=36.15、28.18,P<0.05)。结论RPS24通过抑制PGK1的表达来促进颈动脉斑块的新血管生成,抑制RPS24的表达可能是治疗颈动脉易损斑块的新选择。 展开更多
关键词 核糖体蛋白质 斑块 动脉粥样硬化 新生血管化 病理性 磷酸甘油酸酯激酶
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RPS21在肝细胞癌中的表达及与免疫浸润和预后的关系研究
7
作者 王勇 黄铁模 于守君 《中华普外科手术学杂志(电子版)》 2023年第4期413-417,共5页
目的研究RPS21在肝细胞癌(HCC)中的表达及与免疫浸润和预后的关系。方法回顾性分析2018年8月至2022年12月108例HCC患者资料。通过免疫组织化学法(IHC)和逆转录定量聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测HCC组织及相应的癌旁正常组织(距癌组织边缘... 目的研究RPS21在肝细胞癌(HCC)中的表达及与免疫浸润和预后的关系。方法回顾性分析2018年8月至2022年12月108例HCC患者资料。通过免疫组织化学法(IHC)和逆转录定量聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测HCC组织及相应的癌旁正常组织(距癌组织边缘>5cm)中RPS21蛋白及mRNA的表达情况。数据应用SPSS20.0软件处理。采用χ^(2)检验或秩和检验分析RPS21与临床病理特征的关系,利用Kaplan-Meier生存曲线分析RPS21表达与预后的关系,采用Spearman秩相关分析RPS21与免疫浸润水平的相关性。P<0.05为差异有统计学意义。结果IHC及RT-qPCR结果显示,HCC组织中RPS21蛋白的阳性表达率显著高于癌旁正常组织(84.3%vs.27.8%,P<0.05),且与癌旁正常组织相比,RPS21mRNA在HCC组织中表达显著上调[(10.1±1.1)vs.(5.5±0.8),P<0.05)]。RPS21高表达与TMN分期及Edmondson分级显著相关(P<0.05)。Spearman秩相关分析显示,HCC中RPS21表达与CD4^(+)肿瘤浸润淋巴细胞(CD4^(+)TLs)、CD8^(+)肿瘤浸润淋巴细胞(CD8^(+)TILs)、Foxp3^(+)调节性T淋巴细胞(Foxp3^(+)Trges)、CD11c^(+)树突状细胞(CD11e^(+)DCs)及CD163^(+)肿瘤相关巨噬细胞(CD163^(+)TAMs)的浸润数目呈正相关(P<0.05)。中位随访时间33个月,通过Kaplan-Meier分析显示,RPS21高表达组的患者累积总生存率及累积无病生存率显著低于RPS21低表达组(65.4%vs.81.5%,61.7%vs.77.8%),差异均有统计学意义(P=0.041、0.044)。结论RPS21在HCC组织中呈高表达,且RPS21高表达与HCC的TMN分期、Edmond-son分级、免疫浸润及预后密切相关。RPS21可能参与了HCC的发生和发展,同时也可能参免疫调节。 展开更多
关键词 肝细胞 核糖体蛋白质 临临床病理参数 免疫浸润 预后
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日本血吸虫核糖体蛋白S4基因的克隆、表达、纯化及免疫诊断价值的初步研究 被引量:3
8
作者 高冬梅 汪世平 +2 位作者 余路新 何卓 陈秀春 《中华预防医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期500-504,共5页
目的 体外重组日本血吸虫核糖体蛋白S4(SjRPS4),并评价其在日本血吸虫病免疫诊断中的应用价值.方法 从日本血吸虫尾蚴cDNA文库获得了SjRPS4蛋白相关基因,将该段基因克隆入pQE30表达载体并转化到大肠杆菌M15中,异丙基-β-D-硫代半乳糖... 目的 体外重组日本血吸虫核糖体蛋白S4(SjRPS4),并评价其在日本血吸虫病免疫诊断中的应用价值.方法 从日本血吸虫尾蚴cDNA文库获得了SjRPS4蛋白相关基因,将该段基因克隆入pQE30表达载体并转化到大肠杆菌M15中,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导融合蛋白表达.融合蛋白经Ni2+-NTA树脂柱进行亲和层析纯化,并通过十二烷基磺酸钠一聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定蛋白反应,通过Western blot和ELISA对其免疫原性进行鉴定.结果 成功构建了pQE30/SjRPS4重组菌.重组菌诱导培养后,SDS-PAGE电泳分析可见在相对分子质量约30×103处有SjRPS4融合蛋白的表达,经纯化获得纯度达90%以上的表达蛋白.Western blot检测结果表明该重组蛋白能被日本血吸虫病患者血清识别.用ELISA法检测疑似血吸虫病患者血清,敏感性为90.91%(70/77),特异性为92.59%(25/27),SjRPS4重组表达蛋白阳性率为67.30%(70/104),与肺吸虫病患者血清无交叉反应.结论 成功克隆表达了SjRPS4蛋白,初步证实了SjRPS4在诊断血吸虫病中具有良好的应用价值. 展开更多
关键词 血吸虫 日本 重组蛋白质 核糖体蛋白质 免疫学试验
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苦瓜核糖体失活蛋白MAP30的原核表达和生物活性研究 被引量:3
9
作者 张黎黎 丁倩 詹金彪 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期264-271,共8页
目的:从苦瓜籽中克隆HIV-1整合酶抑制剂MAP30,构建其表达载体,并在大肠杆菌中进行表达,用于MAP30在细胞内的转运机理研究。方法:从成熟苦瓜种子中提取基因组DNA,通过PCR的方法扩增出MAP30基因的全长,并将其克隆进入原核表达载体pET-30a... 目的:从苦瓜籽中克隆HIV-1整合酶抑制剂MAP30,构建其表达载体,并在大肠杆菌中进行表达,用于MAP30在细胞内的转运机理研究。方法:从成熟苦瓜种子中提取基因组DNA,通过PCR的方法扩增出MAP30基因的全长,并将其克隆进入原核表达载体pET-30a,转化Eoli.BL21(DE3),IPTG诱导表达,Ni-NTA亲和纯化,梯度咪唑洗脱。MTT法分析生物学活性。结果:测序发现插入的MAP30基因序列正确,SDS-PAGE鉴定表达产物分子量正确,且MAP30主要以可溶形式表达。MTT法测定重组的MAP30具有生物学活性,且对肿瘤细胞的毒性远远大于对正常细胞的毒性。结论:本研究成功地构建了MAP30的表达系统,并实现了MAP30的可溶性表达,表达后的蛋白具有生物学活性,可用于抗体-毒素的肿瘤靶向药物的合成。 展开更多
关键词 MAP30 苦瓜 植物蛋白质 核糖体蛋白质 遗传学技术 重组 遗传
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核糖体失活蛋白LuffinP1的构建* 被引量:2
10
作者 王儒鹏 吴军 +4 位作者 袁军 解志杰 贺伟峰 易绍萱 张小容 《贵阳医学院学报》 CAS 2005年第2期103-107,共5页
目的: 构建免疫毒素LuffinP1的基因原核表达载体,获得免疫毒素LuffinP1,并对其进行鉴定及纯化。方法:设计寡聚核苷酸片段连接延长合成全长LuffinP1, PCR扩增后将其克隆入表达载体pET20b( +)中,经酶切及DNA序列测定鉴定正确,转化表达宿主... 目的: 构建免疫毒素LuffinP1的基因原核表达载体,获得免疫毒素LuffinP1,并对其进行鉴定及纯化。方法:设计寡聚核苷酸片段连接延长合成全长LuffinP1, PCR扩增后将其克隆入表达载体pET20b( +)中,经酶切及DNA序列测定鉴定正确,转化表达宿主菌Origami(DE3 )pLysS中,经IPTG诱导表达蛋白LuffinP1,Westernblot鉴定。结果:成功构建了免疫毒素表达载体pET20b( +) -LuffinP1,获得纯化的免疫毒素,并经Westernblot鉴定正确。结论:通过基因工程成功表达免疫毒素LuffinP1,简化了其制备过程,有利于对其进一步研究应用。 展开更多
关键词 免疫毒素 Luffin P1 WESTERN BLOT 核糖体蛋白质
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Diamond-Blackfan贫血患儿的临床分析 被引量:3
11
作者 刘天峰 万扬 +2 位作者 陈玉梅 阮敏 竺晓凡 《国际输血及血液学杂志》 CAS 2014年第5期406-411,共6页
目的 分析Diamond-Black fan贫血(DBA)患儿的临床特征、诊断方法及治疗方案.方法 选取2003年7月至2013年7月于中国医学科学院北京协和医学院血液病医院(血液学研究所)儿童血液病诊疗中心确诊为DBA的61例患儿作为研究对象.对DBA患儿... 目的 分析Diamond-Black fan贫血(DBA)患儿的临床特征、诊断方法及治疗方案.方法 选取2003年7月至2013年7月于中国医学科学院北京协和医学院血液病医院(血液学研究所)儿童血液病诊疗中心确诊为DBA的61例患儿作为研究对象.对DBA患儿的临床资料进行回顾性分析.本研究遵循的程序符合中国医学科学院北京协和医学院血液病医院(血液学研究所)人体试验委员会所制定的伦理学标准,得到该委员会批准,征得受试对象监护人的知情同意,并与之签署临床研究知情同意书.通过本院儿童血液病诊疗中心采集61例DBA患儿的血液标本;对其中26例患儿采用体外造血祖细胞集落形成细胞(CFC)实验检测其红系细胞集落形成单位(CFU-E),红系细胞爆式集落形成单位(BFU-E);对其中18例患儿进行9种核糖体蛋白基因全外显子捕获测序;并对BFU-E,CFU-E减低与无减低患儿糖皮质激素反应率的比较,及核糖体蛋白基因突变呈阳性与突变呈阴性患儿糖皮质激素反应率的比较进行统计学分析.结果 ①61例DBA患儿中位发病年龄为3个月(0~39个月),15例(24.5%)患儿伴有躯体畸形.②61例DBA患儿初诊时,中位血红蛋白(Hb)水平为49 g/L(15~80 g/L),中位红细胞计数为2.15&#215;1012/L [(1.15~4.30)x10^12/L],平均红细胞体积(MCV)中位值为87.3 fl(69.0~105.0 fl);其中,21例DBA患儿行红细胞生成素(EPO)水平检测,90.5%(19/21)患儿EPO水平升高;42例DBA患儿行骨髓形态学检查,中位红系细胞比例为2%(0~17.5%);26例患儿行体外造血祖细胞CFC实验,50.0%(13/26)患儿B-FUE与C-FUE减低,23.0%(6/26)患儿为正常,26.9%(7/26)患儿为增高.③18例DBA患儿行9种核糖体蛋白基因全外显子捕获测序,50.0%(9/18)患儿突变呈阳性,分别为RPS19基因突变为5例(27.8%),RPL11、RPL5、RPL35a及RPS7基因突变各为1例(5.6%).44.4� 展开更多
关键词 红系细胞 儿童 核糖体蛋白质
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人核糖体蛋白S15a在大肠癌组织中的表达及其意义 被引量:2
12
作者 孟存英 袁东红 +3 位作者 王映梅 王燕 张欣 刘杰 《中国医药生物技术》 CSCD 2007年第2期101-104,共4页
目的研究人核糖体蛋白S15a(RPS15a)在大肠癌组织中的表达情况及其与大肠癌发生发展的关系。方法大肠癌及癌旁正常组织取自82例术前未经放疗、化疗患者的手术切除标本。利用RPS15a多克隆抗体进行免疫组织化学SP染色,检测RPS15a在大肠癌... 目的研究人核糖体蛋白S15a(RPS15a)在大肠癌组织中的表达情况及其与大肠癌发生发展的关系。方法大肠癌及癌旁正常组织取自82例术前未经放疗、化疗患者的手术切除标本。利用RPS15a多克隆抗体进行免疫组织化学SP染色,检测RPS15a在大肠癌及正常组织中的表达。结果RPS15a阳性表达率在大肠癌组织中为72.0%(59/82),在癌旁正常组织中为40.2%(33/82),二者间差异有统计学意义(χ2=17.76,P<0.05);在浆膜浸润大肠癌组织中为80.8%(42/52),在无浆膜浸润大肠癌组织中为56.7%(17/30),二者间差异有统计学意义(χ2=5.47,P<0.05);在无淋巴结转移者为58.3%(21/36),在有淋巴结转移者为82.6%(38/46),二者间差异有统计学意义(χ2=5.89,P<0.05)。结论RPS15a在大肠癌组织中呈高表达状态,RPS15a基因可能在大肠癌的发生、发展中起重要作用。 展开更多
关键词 结直肠肿瘤 腺癌 核糖体蛋白质 免疫组织化学
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核糖体蛋白与肿瘤 被引量:3
13
作者 阮杏雅 杨明夏 《国际肿瘤学杂志》 CAS 2017年第8期587-589,共3页
核糖体由核糖体蛋白和核糖体RNA组成,是蛋白质生物合成的重要场所.核糖体蛋白参与蛋白质的翻译过程,核糖体蛋白和核糖体RNA的表达紊乱将激活核糖体蛋白的核糖体外功能,该功能在肿瘤的发生发展过程中发挥重要作用.核糖体蛋白有望作为生... 核糖体由核糖体蛋白和核糖体RNA组成,是蛋白质生物合成的重要场所.核糖体蛋白参与蛋白质的翻译过程,核糖体蛋白和核糖体RNA的表达紊乱将激活核糖体蛋白的核糖体外功能,该功能在肿瘤的发生发展过程中发挥重要作用.核糖体蛋白有望作为生物标志物或治疗靶点用于肿瘤的早期诊断和治疗中. 展开更多
关键词 肿瘤 核糖体蛋白质
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无瘢痕愈合中核糖体蛋白s29基因表达产物对皮肤成纤维细胞增生的作用 被引量:3
14
作者 唐胜建 王小柯 +3 位作者 陈建华 王雪耘 梁伟中 梁晓琴 《中国临床康复》 CSCD 2004年第23期4762-4764,共3页
目的探讨核糖体蛋白s29基因(RPs29gene)表达产物对皮肤成纤维细胞增生的作用。方法采用抑制性消减杂交(suppressionsubtractivehybridization,SSH)方法筛选并克隆鼠胚皮肤特异表达的RPs29基因cDNA片段。应用PCR技术扩增RPs29基因ORF全长... 目的探讨核糖体蛋白s29基因(RPs29gene)表达产物对皮肤成纤维细胞增生的作用。方法采用抑制性消减杂交(suppressionsubtractivehybridization,SSH)方法筛选并克隆鼠胚皮肤特异表达的RPs29基因cDNA片段。应用PCR技术扩增RPs29基因ORF全长,构建真核重组表达载体pcDNA3.1/RPs29,体外转染成鼠皮肤成纤维细胞,观察细胞形态结构改变,免疫组织化学方法、RT-PCR分析外源基因表达情况。结果RPs29基因在成纤维细胞中表达,细胞增生能力降低,凋亡加剧。结论核糖体蛋白s29基因表达产物能抑制成纤维细胞增生,促进细胞凋亡,为无瘢痕愈合的研究提供实验材料及实验依据。 展开更多
关键词 核糖体蛋白质 遗传载 转导 遗传 基因表达 成纤维细胞
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RPL5在儿童和成人甲状腺乳头状癌中的差异表达及其诊断价值 被引量:3
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作者 金雅琼 王生才 +10 位作者 邰隽 张杰 陈峰 石金 于永波 杨业然 任慧敏 耿迪 刘原虎 郭永丽 倪鑫 《中华耳鼻咽喉头颈外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期830-834,共5页
目的 研究核糖体蛋白L5(ribosomal protein L5,RPL5)在儿童和成人甲状腺乳头状癌中的差异表达及其诊断价值.方法 采用实时荧光定量PCR方法检测甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)癌组织和癌旁正常组织中RPL5表达情况... 目的 研究核糖体蛋白L5(ribosomal protein L5,RPL5)在儿童和成人甲状腺乳头状癌中的差异表达及其诊断价值.方法 采用实时荧光定量PCR方法检测甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)癌组织和癌旁正常组织中RPL5表达情况,包括癌组织样本22例和癌旁组织样本13例(儿童甲状腺乳头状癌样本10例,癌旁组织3例;成人甲状腺乳头状癌标本12例,癌旁组织10例).同时采用受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC)中两个重要指标:曲线下面积(area under the curve,AUC)和Youden指数(Youden′s index)对RPL5在甲状腺乳头状癌中的诊断价值进行评估.结果 与癌旁正常组织相比,PTC肿瘤组织中RPL5表达显著增高(P=0.001),同时成人PTC肿瘤组织中RPL5表达显著高于儿童PTC(P=0.044).RPL5诊断成人和儿童PTC的AUC=0.820(P=0.001),Youden指数=0.568;儿童PTC对应的AUC=0.721(P=0.069),Youden指数=0.414,而在成人分别为AUC=0.896(P=0.0005),Youden指数=0.709),明显高于儿童PTC.进一步分析发现,RPL5在成人PTC的AUC(0.896,Youden指数0.709)要好于目前临床常用指标CK19(AUC=0.857,Yoden指数0.774)、Galectin-3(AUC 0.868,Youden指数0.775)和甲状腺过氧化物酶(AUC 0.830,Youden指数0.698).结论 本研究阐明RPL5在PTC肿瘤中表达显著高于癌旁组织,并明确RPL5对PTC具诊断价值.此外,本研究还提示RPL5作为分子标志物在成人PTC中的诊断价值明显高于儿童PTC,有助于提高PTC临床诊断. 展开更多
关键词 核糖体蛋白质 甲状腺肿瘤 乳头状 诊断价值 受试者工作特征曲线
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核糖体蛋白质L21在小鼠下颌磨牙牙胚发育过程中的特异性原位表达 被引量:2
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作者 李俊宪 谢明 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2011年第8期729-732,共4页
目的研究核糖体蛋白质L21(RPL21)在小鼠下颌第一磨牙牙胚发育过程中的表达状态及其对牙胚发育的影响,推测RPL21在牙胚形态发生过程中可能具有的生物学作用。方法制备具有特异性的RPL21的杂交探针,并使用原位杂交的方法研究RPL21在发育... 目的研究核糖体蛋白质L21(RPL21)在小鼠下颌第一磨牙牙胚发育过程中的表达状态及其对牙胚发育的影响,推测RPL21在牙胚形态发生过程中可能具有的生物学作用。方法制备具有特异性的RPL21的杂交探针,并使用原位杂交的方法研究RPL21在发育中的牙胚及其它颌面部发育器官中的表达定位。结果 RPL21 mRNA的表达贯穿于牙胚发育的蕾状期、帽状期和钟状期阶段,同时在其它颌面部发育器官中也存在RPL21 mRNA的特异性表达。结论 RPL21可能会通过参与多种多肽的合成从而影响牙胚及其它颌面部器官的发育成形。 展开更多
关键词 核糖体蛋白质 牙胚/胚胎学 磨牙 原位杂交
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hnRNPK在慢性粒细胞白血病急变前后的表达及意义 被引量:1
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作者 朱红倩 刘晓力 +4 位作者 李荣 杜庆锋 张嵩 龚峻梅 欧阳昭 《山东医药》 CAS 北大核心 2007年第34期19-20,共2页
目的探讨不均一性核内核糖蛋白K(hnRNPK)与慢性粒细胞白血病(CML)进展的关系。方法用Western blot和RT-PCR方法检测CML患者慢性期和急变期骨髓细胞hnRNPK在蛋白和转录水平的表达。结果hnRNPK蛋白表达慢性期患者明显低于急变期,其mRNA水... 目的探讨不均一性核内核糖蛋白K(hnRNPK)与慢性粒细胞白血病(CML)进展的关系。方法用Western blot和RT-PCR方法检测CML患者慢性期和急变期骨髓细胞hnRNPK在蛋白和转录水平的表达。结果hnRNPK蛋白表达慢性期患者明显低于急变期,其mRNA水平在两时期无统计学差异。结论hnRNPK蛋白在CML骨髓细胞中表达,其蛋白表达量与CML病情进展有关。 展开更多
关键词 白血病 髓样 慢性 核糖体蛋白质 印迹法 蛋白质 逆转录聚合酶链反应
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RPL34基因敲低对人皮肤鳞状细胞癌SCL-1细胞的影响 被引量:1
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作者 张雪丽 郭燕 +5 位作者 苏敏静 刘玉 黄艳平 李欣 孙志强 韩建文 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期220-225,共6页
目的研究RPL34基因对皮肤鳞状细胞癌(鳞癌)细胞增殖、凋亡的影响。方法收集2016年1月至2017年1月内蒙古医科大学附属医院皮肤性病科14例皮肤鳞癌和16例正常皮肤组织石蜡标本,通过免疫组化分析组织中RPL34的表达。构建RPL34基因干扰慢病... 目的研究RPL34基因对皮肤鳞状细胞癌(鳞癌)细胞增殖、凋亡的影响。方法收集2016年1月至2017年1月内蒙古医科大学附属医院皮肤性病科14例皮肤鳞癌和16例正常皮肤组织石蜡标本,通过免疫组化分析组织中RPL34的表达。构建RPL34基因干扰慢病毒,感染皮肤鳞癌SCL-1细胞(shRNA组),通过RT-PCR与Western印迹验证目的基因敲减。感染后72 h,通过流式细胞仪检测敲低RPL34基因后SCL-1细胞周期及凋亡情况,MTT法检测细胞增殖活力。两组间比较采用t检验或秩和检验。结果免疫组化显示,皮肤鳞癌组织细胞质RPL34表达评分(2.143±1.956)高于正常对照组织(0.500±0.516,z=3.53,P< 0.05)。RT-PCR显示,shRNA组SCL-1细胞RPL34mRNA相对表达(0.149±0.016)低于对照组(1±0.018,t=36.95,P< 0.05);Western印迹显示,shRNA组SCL-1细胞RPL34蛋白相对水平明显低于对照组。shRNA组S期细胞比例高于对照组(t=13.76,P< 0.05),G1期细胞比例低于对照组(t=36.62,P< 0.05);shRNA组细胞凋亡率(9.42%±0.16%)高于对照组(4.58%±0.41%,t=19.02,P< 0.05)。MTT结果显示,继续培养120 h,shRNA组细胞活力(0.815±0.005)低于对照组(1.886±0.005,t=265.91,P< 0.05)。结论 RPL34基因在皮肤鳞癌组织中过表达,敲低RPL34基因可干扰SCL-1细胞周期,降低增殖活力,促进凋亡。 展开更多
关键词 鳞状细胞 核糖体蛋白质 RNA 小分子干扰 细胞周期 细胞凋亡 RPL34 SCL-1细胞
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牛带绦虫亚洲亚种核糖体蛋白L10a基因分析
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作者 申萍香 黄江 +2 位作者 周灵贵 廖兴江 郎书源 《贵阳医学院学报》 CAS 2007年第4期365-367,共3页
目的:分析和预测牛带绦虫亚洲亚种成虫核糖体蛋白LlOa基因及其编码蛋白的结构和功能。方法:构建牛带绦虫亚洲亚种成虫eDNA文库,进行EST测序,将EST序列与GenBank中登陆的序列进行同源性比对及基因完整性判断;应用NCBI上的BLAST对所... 目的:分析和预测牛带绦虫亚洲亚种成虫核糖体蛋白LlOa基因及其编码蛋白的结构和功能。方法:构建牛带绦虫亚洲亚种成虫eDNA文库,进行EST测序,将EST序列与GenBank中登陆的序列进行同源性比对及基因完整性判断;应用NCBI上的BLAST对所筛选基因的保守域进行搜索比对,利用PredictProtein分析、预测其功能域及二级结构。结果:BLASTX分析该基因为全长基因,全长698bp,编码区为24-681,编码218个氨基酸,无跨膜区,具有较稳定的理化性质。结论:从牛带绦虫亚洲亚种成虫cDNA文库中筛选出核糖体蛋白L10a基因。 展开更多
关键词 无钩绦虫牛肉绦虫 核糖体蛋白质 基因顺序
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RPL15在K562细胞向红系分化过程中的功能和机制研究
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作者 彭涛 周唯君 +5 位作者 周栋珍 李化 兰金芝 李丹 周艳华 舒莉萍 《天津医药》 CAS 北大核心 2021年第7期688-693,共6页
目的研究RPL15基因在K562细胞向红系诱导分化过程中的表达变化,并确定其对珠蛋白表达及红系分化的影响。方法用氯化血红素诱导K562细胞向红系分化,采用实时荧光定量PCR(q PCR)及Western blot法检测RPL15在K562红系分化过程中的表达情况... 目的研究RPL15基因在K562细胞向红系诱导分化过程中的表达变化,并确定其对珠蛋白表达及红系分化的影响。方法用氯化血红素诱导K562细胞向红系分化,采用实时荧光定量PCR(q PCR)及Western blot法检测RPL15在K562红系分化过程中的表达情况。利用RNA干扰(RNAi)技术抑制K562细胞中RPL15的表达,进而通过四甲基联苯胺染色、q PCR及流式细胞技术检测K562细胞中血红蛋白、红系分化相关基因以及CD235a和CD71表达的变化。结果在K562细胞向红系分化过程中,RPL15的m RNA及蛋白水平均呈先升高后下降趋势。与对照组相比,干扰RPL15表达后,向红系分化24、48和72 h的K562细胞血红蛋白染色阳性率均明显下降;向红系分化的K562细胞中α-、β-、ε-、γ-珠蛋白及红系分化相关基因GATA1和HSP70相对表达量均明显下调(均P<0.05);而抑癌基因P53的m RNA表达水平显著上调(P<0.01)。同时CD235a^(+)CD71^(+)K562细胞比例在RPL15干扰后显著降低(P<0.01)。结论抑制RPL15表达可抑制K562细胞向红系分化,提示RPL15正调控红系分化过程。同时P53相关通路、GATA1及HSP70可能参与了RPL15对红系分化的调控过程。 展开更多
关键词 K562细胞 核糖体蛋白质 GATA1转录因子 基因 p53 HSP70热休克蛋白质 RPL15基因 红系分化
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